KR102306737B1 - 큰도꼬마리 어린순 추출물을 함유하는 항산화용 건강식품 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 큰도꼬마리(Xanthium canadense Mill.) 어린순의 추출물을 함유하는 항산화 또는 항노화용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 큰도꼬마리 어린순 추출물 또는 큰도꼬마리 어린순에 추가로 도꼬마리(Xanthium strumanium) 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매를 혼합한 추출물이 높은 폴리페놀 함량 및 DPPH(2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl) 자유라디칼 소거, 수퍼옥사이드(Superoxide) 라디칼 소거, 하이드록실(Hydroxyl) 라디칼 소거 및 제2철 감소(Ferric reducing/antioxidant power, FRAP)에서 높은 활성을 나타내므로 상기 추출물을 포함하는 조성물은 항산화 또는 항노화를 목적으로 하는 식품, 건강기능식품, 음료, 화장품 등으로 유용하게 사용될 수 있다.

Description

큰도꼬마리 어린순 추출물을 함유하는 항산화용 건강식품{Antioxidant food comprising extracts of fresh sprouts of Xanthium canadense Mill.}
본 발명은 항산화 또는 항노화용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 큰도꼬마리(Xanthium canadense Mill.) 어린순 추출물을 함유하는 항산화 또는 항노화용 조성물, 이를 함유하는 음료 및 식품에 관한 것이다.
공기 중에 일반적으로 존재하는 안정한 분자상태인 기저 삼중항산소가 체내 효소계, 환원대사, 화학약품, 공해물질, 광화학 반응과 같은 환경 및 생화학적 요인 등에 의하여 반응성이 매우 큰 자유라디칼(free radical)인 활성산소(active oxygen)로 전환되어 세포의 구성성분을 비가역적으로 파괴한다.
활성산소는 체내 방어기구인 수퍼옥사이드 디스뮤타제(superoxide dismutase, SOD), 카탈라아제(catalase), 퍼옥시다아제(peroxidase), 글루타치온(glutathione) 등의 항산화성 효소, 및 비타민 C(vitamin C, ascorbic acid), 비타민 E(tocopherol) 등의 항산화 물질의 작용에 의하여 최소화될 수 있다. 하지만, 과도한 활성산소에 노출되거나 생체 방어력에 이상이 생기게 될 경우 균형이 깨어져서 활성산소가 생체에 치명적인 산소 독성을 일으키게 된다.
체내 과도한 활성산소는 세포구성 성분들인 지질, 단백질, 당, DNA 등과 반응하여 파괴작용을 함으로써 노화는 물론 암을 비롯하여 뇌졸중, 파킨슨씨병 등의 뇌질환과 심장질환, 허혈, 동맥경화, 피부손상, 염증, 류마티스, 자가면역 질환 등의 각종 질병을 일으키는 원인이 되고 있다.
이와 같은 산화적 스트레스가 노화를 비롯하여 각종 질환을 일으키는 중요한 원인임이 밝혀지면서 생체 내 활성산소를 제거하는 항산화제를 개발하려는 연구가 활발히 진행되고 있다.
합성 항산화제로 널리 사용되고 있는 BHA(butylated hydroxy anisol)와 BHT(butylated hydroxy toluene)는 그 효과와 경제성 그리고 안전성 때문에 많이 사용해 왔지만 합성 첨가물의 일반적인 기피 현상뿐만 아니라 장기간 과량 복용 시 위장점막, 폐, 신장, 순환계 등에 심각한 독성작용을 일으키는 것으로 알려져 그 사용량이 법적으로 규제되어 있다.
또한, 인체에 무해하고 항산화력이 우수한 천연 항산화제 관한 연구가 오래전부터 진행되어 왔으나 토코페롤과 같은 천연 항산화제는 인체에 대하여 안전하기는 하나 단독으로는 산화 연쇄반응 저지 능력이 있고, 가격이 비싼 단점이 있다.
따라서 보다 안전하고 항산화 효능이 탁월하면서도 경제성이 있는 새로운 소재의 항산화제 개발이 절실히 요구되어 진다.
한편, 한국등록특허 제1,056,756호는 상엽, 석창포, 유백피, 창이자, 향부자, 천남성, 천마, 천문동, 천산화추 및 천화분 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 항산화, 미백 또는 보습용 화장료 조성물에 관한 것으로 도꼬마리(창이자)를 포함하는 생약제 추출물의 항산화 활성에 대해 개시하고 있다.
한국등록특허 제1,130,245호는 사향쥐로부터 얻은 사향추출물과 대황, 백지, 당귀, 천화분, 금은화, 자단향, 창이자, 의이인, 녹각, 녹차를 포함하는 노화 개선용 복합 한방조성물에 관한 것으로 사향 추출물과 도꼬마리(창이자)를 포함하는 생약추출물의 자유라디칼 소거 활성, NF-κB 억제효과, 보습 및 콜라겐섬유 생합성 효과에 대해 개시하고 있다.
한국등록특허 제1,315,265호는 발아서목태 추출물, 야국화 추출물 및 곡정초 추출물이 혼합되어 형성되는 혼합 한방 추출물; 및 우방자 추출물, 창이자 추출물, 지부자 추출물, 토사자 추출물, 행인 추출물, 남사등실 추출물 및 괴실 추출물이 혼합되어 형성되는 혼합열매/씨앗 추출물을 포함하여 이루어지는 피부노화개선용 조성물에 관한 것으로 도꼬마리(창이자) 추출물을 포함하는 항산화, 피부주름개선, 피부 미백 및 보습 등 피부 노화 개선 효과에 대해 개시하고 있다.
또한, 2013년 12월 출판된 한국 식품영양 학회지(제26권 제4호, pp.609-614)에는 도꼬마리(Xanthium strumanium)의 뿌리와 열매를 각각 메탄올로 추출하여 부위별 항산화 활성을 검증결과에 대해 개시하고 있다.
상설한 바와 같이 도꼬마리(Xanthium strumanium) 또는 이를 포함한 한방 추출물의 항산화 활성에 관해 개시한 선행문헌들은 존재하나 큰도꼬마리(Xanthium canadense Mill.)의 항산화 활성에 대해 구체적으로 알려진 바가 없으며 더욱이 이의 어린순의 항산화 효과는 알려져 있지 않다.
이에 본원 발명자들은 큰도꼬마리(Xanthium canadense Mill.) 어린순 추출물 또는 큰도꼬마리 어린순에 추가로 도꼬마리(Xanthium strumanium) 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매를 혼합한 추출물이 우수한 항산화 효과를 나타낸다는 점을 최초로 규명하였다. 따라서 상기 추출물은 천연물 유래로 안전하면서 용이한 열수 추출방법으로 뛰어난 항산화 활성 나타내어 높은 경제성을 갖는 항산화 조성물로 활용될 수 있는바, 본 발명을 완성하기에 이르렀다.
한국등록특허 제1,056,756호 한국등록특허 제1,130,245호 한국등록특허 제1,315,265호
이연리, 도꼬마리 부위별의 항산화 및 항암 활성, 한국식품영양학회지 제26권 제4호, 2013년 12월, pp.609-614.
본 발명의 목적은 큰도꼬마리(Xanthium canadense Mill.) 어린순 추출물 또는 큰도꼬마리 어린순에 추가로 도꼬마리(Xanthium strumanium) 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매를 혼합한 추출물을 함유하는 항산화 또는 항노화용 조성물, 이를 함유하는 음료 및 식품을 제공하기 위한 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 큰도꼬마리(Xanthium canadense Mill.) 어린순 추출물 또는 큰도꼬마리 어린순에 추가로 도꼬마리(Xanthium strumanium) 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매를 혼합한 추출물이 높은 폴리페놀 함량을 나타낼 뿐만 아니라 자유라디칼(free radical) 제거 및 제2철 감소(Ferric reducing/antioxidant power, FRAP) 활성 또한 높다는 것을 실험을 통해 확인함으로써, 상기 추출물을 함유하는 항산화 또는 항노화용 조성물, 이를 함유하는 음료 및 식품을 제공한다.
본 발명의 큰도꼬마리(Xanthium canadense Mill.) 어린순 추출물 또는 큰도꼬마리 어린순에 추가로 도꼬마리(Xanthium strumanium) 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매를 혼합한 추출물은 용이한 열수 추출방법을 이용해 추출된 것으로 폴리페놀 함량이 높고, DPPH(2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl) 자유라디칼 소거, 수퍼옥사이드(Superoxide) 라디칼 소거, 하이드록실(Hydroxyl) 라디칼 소거 및 제2철 감소(Ferric reducing/antioxidant power, FRAP)에서 높은 활성을 나타내므로 경제적으로 천연물 유래의 안전한 항산화 또는 항노화용 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 큰도꼬마리(Xanthium canadense Mill.) 어린순, 도꼬마리(Xanthium strumanium) 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매 혼합물 열수 추출물을 촬영한 사진이다.
도 2는 본 발명에 따른 큰도꼬마리 어린순 추출물의 제조방법을 나타낸 흐름도이다.
도 3은 본 발명에 따른 큰도꼬마리 어린순, 도꼬마리 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매 혼합물 추출물의 제조방법을 나타낸 흐름도이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 큰도꼬마리(Xanthium canadense Mill.) 어린순 추출물을 함유하는 항산화 또는 항노화용 건강식품을 제공한다.
상기 큰도꼬마리 추출물은 하기의 단계들을 포함하는 방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다:
1) 큰도꼬마리에 추출용매를 가하여 추출하는 단계;
2) 단계 1)의 추출물을 여과하는 단계;
3) 단계 2)의 여과물을 감압 농축하는 단계; 및
4) 단계 3)의 농축물을 건조하는 단계.
본 발명의 제조방법에 있어서, 단계 1)의 큰도꼬마리는 재배한 것 또는 시판되는 것을 제한 없이 사용할 수 있다.
본 발명의 제조방법에 있어서, 상기 단계 1)의 추출용매는 물, 알코올 또는 이의 혼합물을 사용하는 것이 바람직하고, 물을 이용하여 추출하는 것이 가장 바람직하다. 상기 알코올로는 C1 내지 C2의 저급 알코올 이용하는 것이 바람직하며, 저급 알코올로는 에탄올 또는 메탄올을 이용하는 것이 바람직하다. 추출방법으로는 진탕추출, Soxhelt 추출 또는 환류 추출을 이용하는 것이 바람직하나, 이에 한정하지 않는다. 상기 추출용매를 건조된 큰도꼬마리 분량의 1 내지 10배 첨가하여 추출하는 것이 바람직하며, 2 내지 3배 첨가하여 추출하는 것이 더욱 바람직하다. 추출 온도는 20℃ 내지 150℃인 것이 바람직하며, 100℃ 내지 125℃인 것이 가장 바람직하나, 이에 한정하지 않는다. 또한, 추출시간은 1 내지 48시간이 바람직하며, 2 내지 10시간이 더욱 바람직하고, 2 내지 5시간이 가장 바람직하나, 이에 한정하지 않는다. 아울러 추출 횟수는 1 내지 5회인 것이 바람직하며, 3 내지 4회 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하고, 3회인 것이 가장 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 조성물은 유해 활성산소(free radical) 제거 및 제2철염 감소(Ferric reducing/antioxidant power, FRAP) 중 적어도 하나 이상의 활성을 나타낼 수 있으며, 보다 구체적으로 유해 활성산소(free radical) 제거활성은 DPPH(2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl) 자유라디칼 소거, 수퍼옥사이드(Superoxide) 라디칼 소거, 또는 하이드록실(Hydroxyl) 라디칼 소거 활성일 수 있다.
상기 조성물은 도꼬마리(Xanthium strumanium) 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 1종 이상의 추출물을 추가로 함유할 수 있다.
상기 도꼬마리 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매가 추가로 큰도꼬마리 어린순에 혼합되는 경우 큰도꼬마리 어린순은 10 내지 30 중량부; 도꼬마리 열매는 5 내지 25 중량부; 산수유 열매는 10 내지 30 중량부; 계피껍질은 5 내지 25 중량부; 천궁뿌리는 5 내지 25 중량부; 율무 씨는 2 내지 22 중량부; 및 대추 열매는 1 내지 5 중량부로 혼합될 수 있다. 보다 구체적으로 큰도꼬마리 어린순은 15 내지 25 중량부; 도꼬마리 열매는 10 내지 20 중량부; 산수유 열매는 15 내지 25 중량부; 계피껍질은 10 내지 20 중량부; 천궁뿌리는 10 내지 20 중량부; 율무 씨는 8 내지 16 중량부; 및 대추 열매는 2 내지 4 중량부로 혼합될 수 있다.
상기 큰도꼬마리 어린순에 도꼬마리 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매를 혼합한 추출물을 함유하는 조성물은 유해 활성산소 제거 및 제2철염 감소 중 적어도 하나 이상의 활성을 나타내낼 수 있으며, 보다 구체적으로 유해 활성산소 제거활성은 DPPH 자유라디칼 소거, 수퍼옥사이드 라디칼 소거, 또는 하이드록실 라디칼 소거 활성일 수 있다.
본 발명의 구체적인 실시예에서, 본 발명자들은 큰도꼬마리 어린순 추출물 또는 큰도꼬마리 어린순에 추가로 도꼬마리 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매를 혼합한 추출물을 각각 제조한 후, 항산화 활성을 확인한 결과, 상기 추출물은 폴리페놀 함량이 높고, DPPH 자유라디칼 소거, 수퍼옥사이드 라디칼 소거, 하이드록실 라디칼 소거 및 제2철 감소에서 높은 활성을 나타냄을 확인하였다.
따라서, 본 발명의 큰도꼬마리 어린순 추출물, 또는 큰도꼬마리 어린순에 추가로 도꼬마리 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매를 혼합한 추출물을 포함하는 조성물은 천연물 유래의 안전한 항산화 또는 항노화용 조성물로 사용될 수 있음을 확인하였다.
본 발명에 따른 식품은 큰도꼬마리 어린순 추출물 또는 큰도꼬마리 어린순에 추가로 도꼬마리 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매를 혼합한 추출물을 포함하되 적절한 식품보조첨가제가 포함될 수 있다.
본 발명에서 용어 "식품보조첨가제란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 건강기능식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 상기 예들에 의해 본 발명의 식품보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.
상기 식품은 건강기능식품인 것이 바람직하고, 상기 건강기능식품이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 기능성이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 당업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조 시에는 당업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 본 발명의 건강기능식품은 항산화 또는 항노화 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취가 가능하다.
유효성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품의 제조 시에 본 발명에 따른 큰도꼬마리 어린순 추출물 또는 큰도꼬마리 어린순에 추가로 도꼬마리 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매를 혼합한 추출물은 원료 조성물 중 1 ~ 20 중량%, 바람직하게는 5 ~ 15 중량%의 양으로 첨가된다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
본 발명의 건강식품에는 통상의 식품과 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유될 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 수크로스와 같은 디사카라이드 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 g당 일반적으로 약 0.1 ~ 10 g, 바람직하게는 약 0.5 ~ 5 g 이다.
또한, 본 발명은 본 발명의 조성물을 포함하는 음료를 제공한다.
상기 음료는 큰도꼬마리 어린순 추출물 또는 큰도꼬마리 어린순에 추가로 도꼬마리 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매를 혼합한 추출물을 함유하는 것 외에 액체성분에는 특별한 제한점은 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예컨대, 포도당, 과당 등의 디사카라이드, 예컨대, 말토스, 슈크로스 등의 및 폴리사카라이드, 예컨대, 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 화합물(예컨대, 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(예컨대, 사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 음료 100 ml당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 보다 구체적으로는 약 5 내지 12 g이다.
또한, 본 발명은 큰도꼬마리 어린순 추출물을 함유하는 항산화 또는 항노화용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 조성물은 도꼬마리 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 1종 이상의 추출물을 추가로 함유할 수 있다.
상기 도꼬마리 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매가 추가로 큰도꼬마리 어린순에 혼합되는 경우 큰도꼬마리 어린순은 10 내지 30 중량부; 도꼬마리 열매는 5 내지 25 중량부; 산수유 열매는 10 내지 30 중량부; 계피껍질은 5 내지 25 중량부; 천궁뿌리는 5 내지 25 중량부; 율무 씨는 2 내지 22 중량부; 및 대추 열매는 1 내지 5 중량부로 혼합될 수 있다. 보다 구체적으로 큰도꼬마리 어린순은 15 내지 25 중량부; 도꼬마리 열매는 10 내지 20 중량부; 산수유 열매는 15 내지 25 중량부; 계피껍질은 10 내지 20 중량부; 천궁뿌리는 10 내지 20 중량부; 율무 씨는 8 내지 16 중량부; 및 대추 열매는 2 내지 4 중량부로 혼합될 수 있다.
상기 큰도꼬마리 어린순에 도꼬마리 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매를 혼합한 추출물을 함유하는 조성물은 유해 활성산소 제거 및 제2철염 감소 중 적어도 하나 이상의 활성을 나타내낼 수 있으며, 보다 구체적으로 유해 활성산소 제거활성은 DPPH 자유라디칼 소거, 수퍼옥사이드 라디칼 소거, 또는 하이드록실 라디칼 소거 활성일 수 있다.
본 발명의 구체적인 실시예에서, 본 발명자들은 큰도꼬마리 어린순 추출물, 또는 큰도꼬마리 어린순에 추가로 도꼬마리 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매를 혼합한 추출물을 각각 제조한 후, 항산화 활성을 확인한 결과, 상기 추출물은 폴리페놀 함량이 높고, DPPH 자유라디칼 소거, 수퍼옥사이드 라디칼 소거, 하이드록실 라디칼 소거 및 제2철 감소에서 높은 활성을 나타냄을 확인하였다.
따라서, 본 발명의 큰도꼬마리 어린순 추출물, 또는 큰도꼬마리 어린순에 추가로 도꼬마리 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매를 혼합한 추출물을 포함하는 조성물은 천연물 유래의 안전한 항산화 또는 항노화용 약학적 조성물로 사용될 수 있음을 확인하였다.
본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구 투여(예를 들어, 도포 또는 정맥 내, 피하, 복강 내 주사) 할 수 있으나 경구 투여가 바람직하다. 비경구 투여를 위한 제제로는 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 멸균된 수용액, 액제, 비수성용제, 현탁제, 에멀젼, 시럽, 좌제, 에어로졸 등의 외용제 및 멸균 주사제제의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 바람직하게는 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제의 피부 외용 약학적 조성물을 제조하여 사용할 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다. 국소 투여의 조성물은 임상적 처방에 따라 무수형 또는 수성형일 수 있다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다. 경구 투여를 위한 고형제제에는 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 연질캅셀제, 환 등이 포함된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 에어로졸 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
상기 조성물은 투여를 위해서 큰도꼬마리 어린순 추출물 또는 큰도꼬마리 어린순에 추가로 도꼬마리 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매를 혼합한 추출물 이외에 추가로 약제학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함하여 제조할 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 담체는 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형 등으로 제제화할 수 있다.
본 발명에 따른 약제학적으로 허용가능한 첨가제는 상기 조성물에 대해 0.1~90 중량부 포함되는 것이 바람직하다.
본 발명의 조성물의 바람직한 투여량은 체내에서 활성성분의 흡수도, 환자의 연령, 성별 및 비만의 정도에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나 바람직한 효과를 위해서, 경구 투여제의 경우 일반적으로 성인에게 1일에 체중 1㎏당 본 발명의 조성물을 1일 0.0001 내지 100 ㎎/㎏으로, 바람직하게는 0.001 내지 100 ㎎/㎏으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 조성물은 큰도꼬마리 어린순 추출물 또는 큰도꼬마리 어린순에 추가로 도꼬마리 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매를 혼합한 추출물에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.
아울러, 본 발명은
(a) 큰도꼬마리 어린순 중량의 2배 이상의 정제수를 가하여 혼합하는 단계; 및
(b) 상기 혼합용액을 90 내지 125℃에서 1시간 이상 열수 추출하는 단계를 포함하는, 항산화 또는 항노화용 조성물의 제조방법을 제공한다.
상기 (a) 단계에서 큰도꼬마리 어린순에 도꼬마리 열매, 산수유 열매, 계피껍질, 천궁 뿌리, 율무 씨, 및 대추 열매로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 1종 이상의 추출물을 추가로 함유할 수 있다. 상기 성분들을 추가로 포함하는 경우 큰도꼬마리 어린순은 10 내지 30 중량부; 도꼬마리 열매는 5 내지 25 중량부; 산수유 열매는 10 내지 30 중량부; 계피껍질은 5 내지 25 중량부; 천궁뿌리는 5 내지 25 중량부; 율무 씨는 2 내지 22 중량부; 및 대추 열매는 1 내지 5 중량부로 혼합될 수 있다. 보다 구체적으로 큰도꼬마리 어린순은 15 내지 25 중량부; 도꼬마리 열매는 10 내지 20 중량부; 산수유 열매는 15 내지 25 중량부; 계피껍질은 10 내지 20 중량부; 천궁뿌리는 10 내지 20 중량부; 율무 씨는 8 내지 16 중량부; 및 대추 열매는 2 내지 4 중량부로 혼합될 수 있다. 상기와 같은 혼합물을 추출하는 경우 단계 (a)에서 가해지는 정제수의 양은 혼합물 중량의 2배 이상일 수 있다.
이하, 하기 실시예, 실험예 및 제조예를 통하여 본 발명에 대하여 보다 상세히 설명하고자 한다. 다만, 이는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위한 것이지, 본 발명의 권리범위를 이로 한정하려는 의도는 아니다.
<실시예 1> 큰도꼬마리( Xanthium canadense Mill.) 어린순 추출물의 제조
큰도꼬마리 어린순 50 g에 증류수 500 mL을 첨가하고 95℃에서 5시간 동안 추출하였다. 감압여과 장치에서 뜨거운 상태로 여과한 후 고형분 함량이 1.1%가 될 때까지 농축하여, 큰도꼬마리 어린순 추출물을 제조하였다.
<실시예 2> 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물의 제조
큰도꼬마리 어린순 900 g(20 중량%); 도꼬마리(Xanthium strumanium) 열매 670 g(15 중량%), 산수유 열매 900 g(20 중량%), 계피껍질 670 g(15 중량%), 천궁뿌리 670 g(15 중량%), 율무씨 540 g(12 중량%), 및 대추 열매 130 g(3 중량%)과 정제수 60 L를 초고속 진공저온 추출기(COSMOS-660, Kyungseo machine, Incheon, Korea)에 넣고 103℃에서 5시간 추출하였다. 그리고 곧바로 스파우트 파우치 자동포장기(SPS-A430, Sungil system corp, Daegu, Korea) 기기를 사용하여 포장하였으며, 이를 하기 항산화 실험 시료로 사용하였다.
<실시예 3> 실험결과의 통계 처리
실험을 통해 얻어진 자료는 엑셀프로그램을 사용하여 결과를 평균표준편차로 나타내었다.
<실험예 1> 고형분 함량 측정
상기 <실시예 1> 및 <실시예 2>에서 제조한 추출물, 또는 혼합 추출물의 고형분 함량을 굴절당도계(GMK-703AC, Gi-won hightech. Co., Ltd. Seoul, Korea)를 사용하여 3회 반복 측정하였다.
그 결과, 하기 [표 1]에 나타낸 바와 같이, 큰도꼬마리 어린순 추출물, 및 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물의 고형분의 함량이 모두 1.10±0.01%임을 확인하였다(표 1).
시료 고형분(%)
본 발명의 큰도꼬마리 어린순 추출물 1.10±0.011)
본 발명의 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물 1.10±0.01
1) 값은 평균값±표준편차이다(실험 3회 반복).
<실험예 2> 총 폴리페놀 함량 측정
상기 <실시예 1> 및 <실시예 2>에서 제조한 추출물의 총 폴리페놀 화합물의 함량은 폴린-데니스(Folin-Denis) 법을 응용하여 측정하였다.
구체적으로, 상기 <실시예 1> 및 <실시예 2>에서 제조한 큰도꼬마리 어린순 추출물 및 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물 0.2 mL를 각각 시험관에 넣고 증류수 1.8 mL와 폴린 용액( Folin-ciocalteus phenol reagent)을 0.2 mL 첨가하여 혼합한 다음 실온에서 3분간 방치하였다. 그런 다음, 10% Na2CO3 포화용액 0.4 mL와 증류수 1.4 mL을 가하여 혼합하고 실온에서 1시간 반응시킨 후 상등액을 700 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준물질은 카페인산(caffeic acid)을 0~100 g/mL의 농도로 제조하여 시료와 동일한 방법으로 분석하였으며, 표준 검량곡선으로부터 추출물의 총 페놀 함량을 계산하였다.
그 결과, 하기 [표 2]에 나타낸 바와 같이, 큰도꼬마리 어린순 열수 추출물의 폴리페놀 함량은 20.15±4.51 mg%이고, 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물의 폴리페놀 함량은 33.90±3.19 mg% 임을 확인하였다(표 2).
시료 고형분(%)
본 발명의 큰도꼬마리 어린순 추출물 20.15±4.511)
본 발명의 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물 33.90±3.19
1) 값은 평균값±표준편차이다(실험 3회 반복).
<실험예 3> DPPH 자유라디칼 소거능 확인
DPPH(2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl) 자유라디칼 소거활성을 확인하기 위하여, 상기 <실시예 1> 및 <실시예 2>에서 제조한 큰도꼬마리 어린순 추출물, 및 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물 각각 0.4 mL에 1×10-4 M DPPH용액(메탄올) 5.6 mL를 첨가한 후, 10분간 방치한 다음 525 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 활성비교를 위한 양성대조군의 표준물질은 아스코르브산(ascorbic acid)을 사용하였으며, 시료 무 첨가군에 대한 첨가군의 흡광도 비로 DPPH 자유라디칼 소거능을 나타내었다.
그 결과, 하기 [표 3]에 나타낸 바와 같이, 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물은 DPPH 라디칼 소거능이 73.64±1.38%로 나타났으며, 이는 양성대조군인 아스코르브산의 75 μg/mL 농도에서 측정한 DPPH 라디칼 소거능(67.85±2.82%)보다 현저히 높게 나타냄을 확인하였다. 또한, 큰도꼬마리 어린순 추출물도 DPPH 라디칼 소거능이 42.71±2.24%로 유의적인 항산화 활성을 나타냄을 확인하였다(표 3).
DPPH 자유라디칼 소거능(%)
본 발명의 큰도꼬마리 어린순 추출물 42.71±2.241)
본 발명의 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물 73.64±1.38
아스코르브산
 25 μg/mL 50 μg/mL 75 μg/mL 100 μg/mL
23.74±1.24 47.71±0.34 67.85±2.82 93.87±0.41
1) 값은 평균값±표준편차이다(실험 3회 반복).
<실시예 4> 수퍼옥사이드(Superoxide) 라디칼 소거능
수퍼옥사이드(Superoxide) 라디칼 소거능을 확인하기 위해 상기 <실시예 1> 및 <실시예 2>에서 제조한 큰도꼬마리 어린순 추출물, 및 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물 각각 0.25 mL에 30 mM 트리스-염화수소 완충액(Tri-HCl buffer)(pH 8.0) 50 μL와 0.1 mM 페나진 메토설페이트(phenazine methosulfate, PMS) 100 μL, 0.5 mM 니코틴 아미드 아데닌 디뉴클레오티드(nicotinamide adenine dinucleotide, NADH) 200 μL, 0.5 mM 니트로테트라졸리움 블루 클로라이드(nitrotetrazolium blue chloride, NBT) 100 μL를 혼합하여 37℃에서 10분 동안 방치한 후 560 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 활성비교를 위한 양성대조군의 표준물질은 아스코르브산(ascorbic acid)을 사용하였으며, 시료 무 첨가군에 대한 첨가군의 흡광도 비로 수퍼옥사이드 라디칼 소거능을 나타내었다.
그 결과, 하기 [표 4]에서 나타낸 바와 같이, 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물의 수퍼옥사이드 라디칼 소거능은 56.61±1.85%로 나타났으며, 이는 양성대조군인 아스코르브산의 250 μg/mL 농도에서 측정한 수퍼옥사이드 라디칼 소거능(56.97±0.24%)과 유사한 활성을 나타냄을 확인하였다. 따라서, 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물은 현저한 수퍼옥사이드 라디칼 소거 활성을 나타냄을 확인하였다. 아울러, 큰도꼬마리 어린순 열수 추출물도 수퍼옥사이드 라디칼 소거능이 34.38±4.08%로 수퍼옥사이드 라디칼 소거활성을 나타낸다는 것을 확인하였다(표 4).
슈퍼옥사이드 라디칼 소거능(%)
본 발명의 큰도꼬마리 어린순 추출물 34.38±4.081)
본 발명의 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물 56.61±1.85
아스코르브산
 50 μg/mL 100 μg/mL 250 μg/mL 500 μg/mL
13.30±1.14 26.77±2.94 56.97±0.24 91.70±0.24
1) 값은 평균값±표준편차이다(실험 3회 반복).
<실시예 5> 하이드록실(Hydroxyl) 라디칼 소거능
하이드록실(Hydroxyl) 라디칼 소거능을 확인하기 위해 10 mM FeSO4·7H2O/EDTA 용액 0.2 mL, 10 mM 2-데옥시리보오스(2-deoxyribose) 0.2 mL, 시료 0.2 mL, 0.1 M 인산나트륨 완충액(sodium phosphate buffer)(pH 7.4) 1.2 mL 및 10 mM H2O2 0.2 mL를 차례로 가한 다음 38℃에서 1시간 반응시켰다. 그 후 10% TCA 용액 1 mL, 1% TBA 1 mL을 가하고 95℃ 수욕상에서 10분간 가열한 다음 급냉시킨 후 532 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 활성비교를 위한 양성대조군의 표준물질은 아스코르브산을 사용하였으며, 시료 무 첨가군에 대한 첨가군의 흡광도 비로 하이드록실 라디칼 소거능을 나타내었다.
그 결과, [표 5]에 나타낸 바와 같이, 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물은 하이드록실 라디칼 소거능이 33.46±4.22%로 나타났으며, 이는 양성대조군인 아스코르브산의 5 mg/mL 농도에서 측정한 하이드록실 라디칼 소거능(29.06±1.10%)보다 높게 나타남을 확인하였다. 따라서, 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물은 우수한 하이드록실 라디칼 소거능을 나타냄을 확인하였다. 또한, 큰도꼬마리 어린순 열수 추출물도 8.52±3.74%의 하이드록실 라디칼 소거능을 나타냄을 확인하였다(표 5).
하이드록실 라디칼 소거능(%)
본 발명의 큰도꼬마리 어린순 추출물 8.52±3.741)
본 발명의 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물 33.46±4.22
아스코르브산
 2 mg/mL 5 mg/mL 7.5 mg/mL 10 mg/mL
12.06±1.76 29.06±1.10 43.32±6.63 52.75±0.33
1) 값은 평균값±표준편차이다(실험 3회 반복).
<실험예 5> 제2철 감소(Ferric reducing/antioxidant power, FRAP) 활성(환원력)
제2철 감소 활성 측정을 위해 0.2 M 인산나트륨 완충액(sodium phosphate buffer)(pH 6.6) 및 1% 페리시안화칼륨(potassium ferricyanide)을 1 mL씩 차례로 가하여 섞은 후 50℃에서 20분간 반응시켰다. 그 후 10% TCA용액 1 mL를 가하여 2,000 rpm에서 15분간 원심분리하여 얻은 상층액 1 mL와 증류수 1 mL에 0.1% 염화제이철(FeCl3) 0.2 mL를 가하여 혼합한 후 700 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 활성비교를 위한 양성대조군의 표준물질은 아스코르브산을 사용하였으며, 환원력은 흡광도 값으로 나타내었다.
그 결과, [표 6]에 나타낸 바와 같이, 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물은 흡광도가 2.307±0.034로 나타났으며, 이는 양성대조군인 아스코르브산의 200 μg/mL 농도에서 측정한 흡광도(2.316±0.018%)보다 높게 나타남을 확인하였다. 따라서, 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물은 우수한 환원력을 나타냄을 확인하였다. 또한, 큰도꼬마리 어린순 열수 추출물도 1.324±0.027의 흡광도를 나타냄으로써, 환원력을 나타냄을 확인하였다(표 6).
환원력(Absorbance)
본 발명의 큰도꼬마리 어린순 추출물 1.324±0.0271)
본 발명의 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물 2.307±0.034
아스코르브산
 25 μg/mL 50 μg/mL 100 μg/mL 200 μg/mL
0.449±0.010 0.904±0.010 1.771±0.022 2.316±0.018
1) 값은 평균값±표준편차이다(실험 3회 반복).
<제조예 1> 밀가루 식품의 제조
본 발명의 큰도꼬마리 어린순 추출물 또는 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물 분말 1 내지 20.0 중량부를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조한다.
<제조예 2> 스프 및 육즙의 제조
본 발명의 큰도꼬마리 어린순 추출물 또는 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물 분말 1 내지 20.0 중량부를 스프 및 육즙에 첨가하여 건강 증진용 육가공 제품, 면류의 수프 및 육즙을 제조한다.
<제조예 3> 유제품의 제조
본 발명의 큰도꼬마리 어린순 추출물 또는 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물 분말 5 내지 10 중량부를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
<제조예 4> 건강기능 식품의 제조
본 발명의 큰도꼬마리 어린순 추출물 또는 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물 분말 20 ㎎, 비타민 혼합물 적량, 비타민 A 아세테이트 70 ㎍, 비타민 E 1.0 ㎎, 비타민 B1 0.13 ㎎, 비타민 B2 0.15 ㎎, 비타민 B6 0.5 ㎎, 비타민 B12 0.2 ㎍, 비타민 C 10 ㎎, 비오틴 10 ㎍, 니코틴산아미드 1.7 ㎎, 엽산 50 ㎍, 판토텐산 칼슘 0.5 ㎎, 무기질 혼합물 적량, 황산제 1철 1.75 ㎎, 산화아연 0.82 ㎎, 탄산마그네슘 25.3 ㎎, 제1인산칼륨 15 ㎎, 제2인산칼슘 55 ㎎, 구연산칼륨 90 ㎎, 탄산칼슘 100 ㎎, 염화마그네슘 24.8 ㎎을 혼합하여 통상의 건강식품 제조방법에 따라 제조한다.
<제조예 5> 건강 음료의 제조
본 발명의 큰도꼬마리 어린순 추출물 또는 큰도꼬마리 어린순 추출물을 포함하는 혼합 추출물 분말 20 ㎎, 구연산 1,000 ㎎, 올리고당 100 g, 매실농축액 2 g, 타우린 1 g, 정제수 적량을 혼합하여 통상의 건강 음료의 제조방법에 따라 제조한다.

Claims (5)

  1. 큰도꼬마리(Xanthium canadense Mill.) 어린순 추출물, 도꼬마리(Xanthium strumarium) 열매 추출물, 산수유 열매 추출물, 계피껍질 추출물, 천궁 뿌리 추출물, 율무씨 추출물 및 대추 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 건강식품으로서,
    상기 큰도꼬마리 어린순 추출물 15 내지 25 중량부; 도꼬마리 열매 추출물 10 내지 20 중량부; 산수유 열매 추출물 15 내지 25 중량부; 계피껍질 추출물 10 내지 20 중량부; 천궁뿌리 추출물 10 내지 20 중량부; 율무씨 추출물 8 내지 16 중량부; 및 대추 열매 추출물 2 내지 4 중량부로 혼합되는 것인 항산화용 건강식품.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 추출물은 열수 추출물인 것을 특징으로 하는 항산화용 건강식품.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 건강식품은 유해 활성산소(free radical) 제거 또는 제2철염 감소(Ferric reducing/antioxidant power, FRAP) 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 항산화용 건강식품.
  4. 삭제
  5. 삭제
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도꼬마리[胡?, 蒼耳] (고농서의 현대적 활용을 위한 온고이지신 제9권 구황ㆍ벽온ㆍ구활편 초본류2, 농촌진흥청, 547쪽 중 430-434쪽) (발행일: 2013년 06월, DB 공개일자: 2014년 12월 31일) 1부.*

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