KR102279336B1 - Cosmetic composition for comprising sweet potato extract - Google Patents

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Abstract

본 발명은 기본적으로 고구마 덩이뿌리 에탄올 추출물을 포함하며, 또한 고구마 덩이뿌리 에탄올 추출물에 대하여 상승효과를 일으키는 고구마 순 에탄올 추출물 및 순채 잎 에탄올 추출물을 더 포함하여 피부 보습, 피부 미백, 피부 탄력 유지 내지 향상, 피부 주름 방지에 매우 유효하여, 궁극적으로는 피부 항노화 효과에 유용하게 사용될 수 있는 화장품 조성물이다.The present invention basically contains a sweet potato tuber root ethanol extract, and further includes a sweet potato pure ethanol extract and a pure vegetable leaf ethanol extract, which have a synergistic effect on the sweet potato tuber root ethanol extract, to moisturize the skin, whiten the skin, maintain or improve skin elasticity , is a cosmetic composition that is very effective in preventing skin wrinkles, and ultimately can be usefully used for skin anti-aging effects.

Description

고구마 추출물을 활성 성분으로 포함하는 화장품 조성물{Cosmetic composition for comprising sweet potato extract}Cosmetic composition comprising sweet potato extract as an active ingredient

본 발명은 고구마 추출물을 활성 성분으로 포함하는 화장품 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 고구마 덩이뿌리 추출물에 대한 고구마 순 추출물의 상승효과를 통하여 함유 화장품 조성물의 효과를 현저하게 증가시킨 새로운 화장품 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition comprising a sweet potato extract as an active ingredient, and more particularly, to a new cosmetic composition in which the effect of the containing cosmetic composition is significantly increased through the synergistic effect of the pure sweet potato extract to the sweet potato tuber root extract. will be.

고구마는 쌍떡잎식물 통화식물목 메꽃과의 여러해살이풀로서 감서·단고구마라고도 한다. 한국 전역에서 널리 재배한다. 길이 약 3m이다. 줄기는 길게 땅바닥을 따라 벋으면서 뿌리를 내린다. 잎은 어긋나고 잎몸은 심장 모양으로 얕게 갈라지며 잎과 줄기를 자르면 즙이 나온다. 줄기 밑쪽의 잎자루 기부에서 뿌리를 내는데, 그 일부는 땅속에서 커져 덩이뿌리인 고구마가 된다. 모양은 양쪽이 뾰족한 원기둥꼴에서 공 모양까지 여러 가지이고 빛깔도 흰색·노란색·연한 붉은색·붉은색·연한 자주색으로 다양하다. Sweet potato is a dicotyledonous plant, a perennial herb of the Convolvulaceae family, and is also called Gamseo and Sweet potato. It is widely cultivated throughout Korea. It is about 3 m long. Stems extend along the ground for a long time and take root. The leaves are alternate phyllotaxis, the leaf body is shallowly split in the shape of a heart, and the juice is released when the leaves and stems are cut. It takes root at the base of the petiole at the bottom of the stem, and a part of it grows in the ground to become a tuber, a sweet potato. Its shape varies from cylindrical to spherical with pointed sides, and its color varies from white, yellow, light red, red, and light purple.

꽃은 7∼8월에 잎겨드랑이에서 나온 꽃자루에 연한 홍색의 나팔꽃 모양으로 몇 개씩 달린다. 꽃받침은 5개로 갈라진다. 화관은 깔때기 모양이고 수술 5개와 암술 1개가 있다. 열매는 공 모양 삭과로 2∼4개의 흑갈색 종자가 여문다.가을에 서리가 내리면 잎과 줄기는 시드는데, 이때 고구마를 캐어 보온저장하였다가 이듬해 봄 묘상(苗床)에 심으면 싹이 나온다. 싹을 잘라 밭에 심으면 뿌리를 내린다. 아열대·열대 지방에서는 1년 내내 시들지 않으므로 적당한 시기에 줄기를 잘라 번식한다. 재배할 때는 종자를 쓰지 않는다.The flowers are hung on the peduncle from the leaf axil in July-August in the shape of light red morning glory. The calyx is divided into 5 pieces. Corolla is funnel-shaped and has 5 stamens and 1 pistil. The fruit is a ball-shaped capsule, with 2 to 4 blackish brown seeds ripening. When frost falls in the fall, the leaves and stems wither. At this time, the sweet potatoes are digged and stored for thermal insulation, and then sprouted when planted in the seedling in the spring of the following year. If you cut a shoot and plant it in the field, it will take root. In the subtropics and tropics, it does not wither all year round, so cut the stems at an appropriate time to reproduce. Seeds are not used for cultivation.

고구마의 원산지는 멕시코에서 남아메리카 북부에 이르는 지역으로 추정되며 원종(原種)도 명백히 밝혀지지 않았다. 일반적으로 약 2000년 전부터 중·남아메리카에서 재배한 것으로 추측하고 있다. 신대륙을 발견한 당시에는 원주민들이 널리 재배하였는데, 크리스토퍼 콜럼버스에 의해서 에스파냐에 전해졌고 그 뒤 필리핀, 중국의 푸젠성[福建省]에 전해졌으며 차차 아시아 각국에 퍼졌다. 주로 아시아·아프리카에서 재배하며 서양에서는 생산량이 적다. 나라로는 중국·인도네시아·한국·브라질 등지에서 많이 재배하며, 전 세계적으로 많은 품종이 있다. 외관과 맛, 자라는 속도, 흰색·노란색·붉은색·자주색 등의 속 빛깔, 점도 등에 따라 품종이 다양하다. 공업용으로는 녹말 함량이 많고 수확량이 많은 것이 좋고, 사료용으로는 고구마와 덩굴을 모두 수확할 수 있는 것을 선정한다. 한국에서는 충승 100호·수원 147호·신미(新美)·황미(黃美) 등의 품종을 재배한다.The origin of the sweet potato is estimated to be from Mexico to northern South America, and the original species is not clearly identified. It is generally assumed that it was cultivated in Central and South America about 2000 years ago. At the time of the discovery of the new continent, it was widely cultivated by indigenous peoples, and it was brought to Spain by Christopher Columbus, then to the Philippines and Fujian Province of China, and then spread to other Asian countries. It is mainly cultivated in Asia and Africa, and production is low in the West. As a country, it is widely cultivated in China, Indonesia, Korea, and Brazil, and there are many varieties around the world. There are various varieties according to appearance and taste, growth rate, inner color such as white, yellow, red, purple, etc., viscosity, etc. For industrial use, it is good to have a high starch content and a high yield, and for feed, select one that can harvest both sweet potatoes and vines. In Korea, varieties such as Chungseung No. 100, Suwon No. 147, Shinmi, and Hwangmi are grown.

고구마 성분은 수분 69.39%, 당질 27.7%, 단백질 1.3% 등이며 주성분은 녹말이다. 제2차 세계대전 이전에는 대부분 식용으로 소비하였으나, 최근에는 식용이 40% 안팎에 그쳐 예전처럼 주식을 보조하는 식품이 아니라 주로 부식 또는 간식으로 이용한다. 공업용으로는 녹말용으로 30% 정도 사용하고 엿·포도당·과자류·식용가공품·의약품·화장품·에탄올·위스키·소주 등의 원료로 많이 쓴다. 돼지 등의 가축 사료용으로도 쓰며 잎과 줄기는 땅의 생산력을 유지하는 풋거름으로 사용한다.Sweet potato contains 69.39% water, 27.7% sugar, 1.3% protein, and the main component is starch. Before World War II, it was mostly consumed for food, but recently, it is only used as a side dish or snack, not as a food supplement as in the past, as only about 40% of the food is eaten. For industrial purposes, about 30% is used for starch, and it is widely used as a raw material for syrup, glucose, confectionery, edible processed products, pharmaceuticals, cosmetics, ethanol, whiskey, and soju. It is also used as feed for livestock such as pigs, and leaves and stems are used as green manure to maintain the productivity of the land.

이와 같은 고구마의 화장품 사용 예를 보면, 자색고구마 추출물을 함유한 아토피용 화장품에 관한 것으로, 보다 상세하게는 아토피원인균인 스테피로코쿠스 아우레우스에 트리클로산과 자색고구마를 함께 함유하여 상승효과를 나타내는 것으로 이것을 이용한 아토피용 화장품을 개시하고 있는 대한민국 특허 공개 공보 제10-2011-0131855호 및 은행잎 추출물, 명아주 추출물, 자색 고구마 추출물, 선학초 추출물, 카카오 추출물, 왕느릅나무껍질추출물, 발효홍삼 추출물을 일정 배합비로 혼합 조성한 피부 보호 및 미백 효과를 갖는 화장품 조성물을 개시하고 있는 대한민국 특허 제10-1931549호가 있다.Such a cosmetic use example of sweet potato relates to cosmetics for atopic dermatitis containing purple sweet potato extract, and more specifically, to Stephirococcus aureus, which is the causative agent of atopy, contains triclosan and purple sweet potato together to show a synergistic effect. Korean Patent Publication No. 10-2011-0131855, which discloses cosmetics for atopic dermatitis using this, and Ginkgo biloba extract, Mage extract, purple sweet potato extract, Seonhakcho extract, cacao extract, King elm bark extract, and fermented red ginseng extract in a certain mixing ratio. There is Korean Patent No. 10-1931549, which discloses a cosmetic composition having a skin protection and whitening effect in a mixed composition.

그러나 이들은 고구마 덩이뿌리 부분만을 화장품 원료로 사용하고 있으며, 그 사용 범위도 제한적인 한계가 있으며, 또한. 고구마 덩이뿌리 추출물의 효과를 증진시킬 수 있는 방안에 대해서는 어떠한 제안도 없는 상태이다. However, they only use the tuberous root part of the sweet potato as a cosmetic ingredient, and the scope of its use is also limited. There are no proposals on how to enhance the effectiveness of the tuber root extract of sweet potato.

1. 대한민국 특허 공개 공보 제10-2011-0131855호1. Korean Patent Publication No. 10-2011-0131855 2. 대한민국 특허 제10-1931549호2. Korean Patent No. 10-1931549

따라서 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 고구마 덩이뿌리 추출물의 효과 범위를 더욱 확대하고 또한 고구마 덩이뿌리에 상승효과를 낼 수 있는 다른 추출물, 예를 들어 고구마 순 추출물을 이용하여 고구마 추출물 함유 화장품 조성물의 효과를 현저하게 증가시킨 새로운 화장품 조성물을 제공하는 것이다. Therefore, the technical problem to be achieved by the present invention is to further expand the effective range of the sweet potato tuber root extract and also use other extracts that can have a synergistic effect on the sweet potato tuber root, for example, the effect of a sweet potato extract-containing cosmetic composition using a sweet potato net extract. It is to provide a new cosmetic composition that significantly increased.

상기 기술적 과제를 달성하기 위하여, 본 발명은 고구마의 덩이뿌리 분쇄물, 건조 고구마 순 분쇄물 및 건조 순채 잎을 각각 동일 중량 비율로 혼합한 후에 혼합물을 에탄올로 추출한 추출물을 가열하여 에탄올을 증발시킨 후 잔류물을 정제수에 용해시킨 다음에 1 × 107cell/ml 효모(이사켄키아 오리엔탈리스)를 상기 추출물 전체 100중량부에 대하여 1중량부로 접종한 후, 30℃에서 24시간 내지 96시간 발효시킨 후 여과한 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장품 조성물을 제공한다.In order to achieve the above technical object, the present invention is to heat the extract obtained by extracting the mixture with ethanol after mixing the tuber root of sweet potato, the dried sweet potato purely, and the dried pure green leaves in the same weight ratio, respectively, after evaporating the ethanol. After dissolving the residue in purified water, 1 × 10 7 cell/ml yeast (Isakenchia orientalis) was inoculated at 1 part by weight based on 100 parts by weight of the total extract, and then fermented at 30° C. for 24 to 96 hours. There is provided a cosmetic composition for skin whitening containing the filtered fermented product as an active ingredient.

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본 발명은 기본적으로 고구마 덩이뿌리 에탄올 추출물을 포함하며, 또한 고구마 덩이뿌리 에탄올 추출물에 대하여 상승효과를 일으키는 고구마 순 에탄올 추출물 및 순채 잎 에탄올 추출물을 더 포함하여 피부 보습, 피부 미백, 피부 탄력 유지 내지 향상, 피부 주름 방지에 매우 유효하여, 궁극적으로는 피부 항노화 효과에 유용하게 사용될 수 있는 화장품 조성물이다.The present invention basically contains a sweet potato tuber root ethanol extract, and further includes a sweet potato pure ethanol extract and a pure vegetable leaf ethanol extract, which have a synergistic effect on the sweet potato tuber root ethanol extract, to moisturize the skin, whiten the skin, maintain or improve skin elasticity , is a cosmetic composition that is very effective in preventing skin wrinkles, and ultimately can be usefully used for skin anti-aging effects.

이하에서는 본 발명을 실시하기 위한 구체적인 내용을 설명하기로 한다.Hereinafter, specific contents for carrying out the present invention will be described.

본 발명에 따른 화장품 조성물은 피부 보습, 피부 미백, 피부 탄력 유지 내지 향상, 피부 주름 방지 효과, 궁극적으로는 피부 항노화 효과를 발휘하는 것으로서 기본적으로 고구마 덩이뿌리 에탄올 추출물을 함유한다.The cosmetic composition according to the present invention basically contains an ethanol extract from a sweet potato tuber as it exhibits skin moisturizing, skin whitening, skin elasticity maintenance or improvement, skin wrinkle prevention effect, and ultimately skin anti-aging effect.

본 발명에서 사용되는 고구마는 그 품종에 특별한 제한이 없으며, 또한 에탄올을 이용한 추출법이 역시 본 발명이 속하는 기술 분야에 널리 알려진 것이라면 특별한 제한 없이 사용 가능하다.The sweet potato used in the present invention is not particularly limited in its variety, and the extraction method using ethanol is also widely known in the art to which the present invention pertains.

또한, 본 발명에서는 고구마 덩이뿌리 추출물의 효과를 상승시키기 위하여 고구마 순 에탄올 추출물 더 포함할 수 있으며, 고구마 순 역시 특정한 품종에 제한을 받지 않으며, 그 수확 시기 역시도 제한이 없다.In addition, in the present invention, a sweet potato net ethanol extract may be further included in order to increase the effect of the sweet potato tuber root extract, and the sweet potato sprouts are also not limited to a specific variety, and the harvest period is also not limited.

상술한 바와 같은 고구마 덩이뿌리 에탄올 추출물 및 고구마 순 에탄올 추출물은 각각 조성물 전체 중량에 대하여 0.001 내지 20중량% 포함하는 바람직하며, 그 미만인 경우는 효과를 발휘할 수 있으며, 초과하여 포함되는 경우에는 더 이상의 효과 상승이 없으며, 제형의 안정성에도 영향을 미칠 수 있어 바람직하지 않다.As described above, the sweet potato tuber root ethanol extract and sweet potato pure ethanol extract each preferably contain 0.001 to 20% by weight based on the total weight of the composition, and when it is less than that, an effect can be exhibited, and when it is contained in excess, the effect is further There is no increase, and it is undesirable because it may affect the stability of the formulation.

본 발명에 따른 조성물은 고구마 추출물의 효과를 더욱 상승시키기 위하여 순채 잎 에탄올 추출물 더 포함할 수 있으며, 바람직하게는 본 발명에 따른 조성물은 순채 에탄올 추출물을 조성물 전체 중량에 대하여 0.001 내지 20중량% 포함하는 것이다.The composition according to the present invention may further include an ethanol extract of pure vegetable leaves in order to further enhance the effect of the sweet potato extract, and preferably, the composition according to the present invention contains 0.001 to 20% by weight of the ethanol extract of pure vegetables based on the total weight of the composition. will be.

상시 순채는 쌍떡잎식물 미나리아재비목 수련과의 여러해살이 수초로서 그 학명은 Brasenia schreberi로서 연못에서 자라지만 옛날에는 잎과 싹을 먹기 위해 논에 재배하기도 하였으며, 뿌리줄기가 옆으로 벋으면서 길게 자라서 50∼100cm나 되고 잎이 수면에 뜬다. 잎은 어긋나고 타원형이며, 뒷면은 자줏빛이 돌고 중앙에 잎자루가 달린다. 잎이 자랄 때는 어린 줄기와 더불어 우무 같은 점질로 둘러싸인다. 꽃은 5∼8월에 피고 검은 홍자색으로 잎겨드랑이에서 자란 긴 꽃자루 끝에 위를 보고 1개씩 달리며 지름 약 2cm이다. 꽃받침조각과 꽃잎은 3개씩이다. 암술은 6∼18개이고 젖꼭지 모양 돌기가 있으며 수술은 많다. 수술은 암술을 감싸고 암술보다 길며 중앙의 암술머리는 밖으로 구부러져 있다. 수술이 시들고 나면 암술이 자라 머리에 끈적끈적한 점액질이 생긴다. Perennial herbs are perennial plants of the dicotyledonous plant, Buttercylaceae, and its scientific name is Brasenia. schreberi , which grows in ponds, but was also cultivated in paddy fields to eat leaves and shoots in the past. The leaves are alternate phyllotaxis and oval, the back side is purple, and the petiole hangs in the center. When the leaves grow, they are surrounded by agar-like mucus along with the young stems. Flowers bloom from May to August, are black, reddish purple, and hang one by one at the end of a long peduncle that grows from the leaf axil, and is about 2cm in diameter. There are three sepals and three petals each. There are 6-18 pistils, there are nipple-shaped projections, and there are many stamens. The stamen surrounds the pistil and is longer than the pistil, and the central pistil is curved outward. After the operation withers, the pistil grows and a sticky slime is formed on the head.

또한, 상기 고구마 덩이뿌리, 고구마 순, 순채 잎에 대한 에탄올 추출물은 효모를 접종하여 발효를 시킬 수 있는데, 이 경우 효모를 접종하기 전 먼저 에탄올 추출물의 에탄올을 기화시켜 에탄올 함량을 낮춘 농축액 또는 에탄올 추출물을 농축 및 건조시킨 후 물에 용해한 후 사용한다. 또한, 바람직하게는 잡균의 번식을 억제하기 위하여 에탄올 추출물을 80 ~ 105℃, 바람직하게는 90 ~ 100℃에서 0.5 ~ 24 시간, 바람직하게는 1 ~ 6시간 살균한 후 사용한다.In addition, the ethanol extract for the sweet potato tuber root, sweet potato sprout, and pure vegetable leaf can be fermented by inoculating yeast. After concentration and drying, it is used after dissolving in water. In addition, preferably, the ethanol extract is used after sterilization for 0.5 to 24 hours, preferably 1 to 6 hours at 80 ~ 105 ℃, preferably 90 ~ 100 ℃ in order to suppress the propagation of various bacteria.

본 발명에서 추출물의 발효를 위해 접종되는 균주는 효모, 바람직하게는 이사켄키아 오리엔탈리스(Issatchenkia orientalis) 효모이다. 효모의 접종량은 1 × 107cell/ml 효모액을 기준으로 고구마 덩이뿌리, 고구마 순, 순채 잎에 대한 에탄올 추출물 100중량부에 대하여 0.001 ~ 10중량부, 바람직하게는 0.01 ~ 5중량부, 더욱 바람직하게는 0.1 ~ 3중량부 사용한다.The strain to be inoculated for fermentation of the extract in the present invention is yeast, preferably Issatchenkia orientalis ) yeast. The inoculation amount of yeast is 0.001 to 10 parts by weight, preferably 0.01 to 5 parts by weight, based on 1 × 10 7 cell/ml yeast solution, based on 100 parts by weight of ethanol extract for sweet potato tubers, sweet potato shoots, and pure green leaves. Preferably 0.1 to 3 parts by weight is used.

상기 추출물에 효모를 접종한 후 25 ~ 40℃, 바람직하게는 30 ~ 35℃에서18 ~ 78시간, 바람직하게는 48 ~ 72시간 발효하는데, 이와 같은 발효는 부 보습, 피부 미백, 피부 탄력 유지 내지 향상, 피부 주름 방지 효과의 현저한 상승을 불러온다. After inoculating the yeast with the extract, it is fermented at 25 to 40 ℃, preferably 30 to 35 ℃ for 18 to 78 hours, preferably for 48 to 72 hours, such fermentation is sub-moisturizing, skin whitening, maintaining skin elasticity. improvement, brings a significant increase in skin anti-wrinkle effect.

상술한 바와 같은 본 발명에서의 화장품 조성물은 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 일 예로 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.As described above, the cosmetic composition in the present invention may include components commonly used in cosmetic compositions, for example, conventional adjuvants such as antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and fragrances, and carriers. include

이와 같은 화장품 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있다. 일 구체예로 고점도 유화제형, 저점도 유화제형 및 가용화 제형으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 제형일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 제조하고자 하는 제형에 따라 발명이 속하는 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 화장품 조성물 배합 성분을 포함할 수 있다. 일 예로 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 팩, 마사지크림 및 스프레이 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 선로션, 선크림, 메이크업 베이스, 비비크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징 워터, 팩, 스틱상 제품, 밤(Balm) 타입 제품, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다. Such a cosmetic composition may be prepared in any formulation conventionally prepared in the art. In one embodiment, it may be any one formulation selected from the group consisting of a high-viscosity emulsifier type, a low-viscosity emulsifier type and a solubilizing formulation, but is not limited thereto. According to the formulation to be manufactured, it may include a cosmetic composition formulation component commonly used in the technical field to which the invention pertains. For example, to be formulated as a solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing, oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation, pack, massage cream, and spray. However, the present invention is not limited thereto. More specifically, flexible lotion, nourishing lotion, nourishing cream, massage cream, essence, eye cream, sun lotion, sun cream, makeup base, BB cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, stick product, balm ( Balm) type product, spray or powder formulation.

제조하고자 하는 제형에 따라 추가로 수상성분, 유상성분, 계면활성제, 보습제, 저급알콜, 점증제, 킬레이트제, 방부제, 향료 등을 선택하여 배합 첨가할 수 있다.Depending on the formulation to be manufactured, an aqueous phase component, an oil phase component, a surfactant, a moisturizer, a lower alcohol, a thickener, a chelating agent, a preservative, a fragrance, etc. may be selected and added.

이하, 실시예 및 실험예를 통하여 본 발명을 상세하게 설명하기로 한다. 상술한 실시예의 기술에 의해 본 발명이 제한되는 것이 아님은 명백하다.Hereinafter, the present invention will be described in detail through Examples and Experimental Examples. It is clear that the present invention is not limited by the description of the above-described embodiments.

<실시예 1: 본 발명에 따른 조성물 제조><Example 1: Preparation of a composition according to the present invention>

태안에서 생산된 속 노란 고구마의 덩이뿌리를 분쇄한 다음 분쇄된 덩이뿌리 500g을 에탄올 1ℓ에 혼합하였다.After grinding the tuber roots of yellow sweet potato produced in Taean, 500 g of the crushed tuber roots were mixed with 1 liter of ethanol.

상기 혼합된 원료를 상온에서 7일 동안 침적 추출한 후, 250메쉬 및 0.5㎛ 여과지로 여과하여 액상 추출물을 수득하였다. 수득된 액상 추출물을 농축하여 본 발명에 따른 조성물을 제조하였다. The mixed raw materials were immersed and extracted for 7 days at room temperature, and then filtered with a 250 mesh and 0.5 μm filter paper to obtain a liquid extract. The obtained liquid extract was concentrated to prepare a composition according to the present invention.

<실시예 2: 본 발명에 따른 조성물 제조><Example 2: Preparation of a composition according to the present invention>

실시예 1과 동일하며 태안에서 생산된 속 노란 고구마의 순을 건조한 다음 이를 분쇄하여 그 분쇄물 500g 더 포함시켜 본 발명에 따른 조성물을 제조하였다.In the same manner as in Example 1, the seeds of yellow sweet potato produced in Taean were dried and then pulverized, and 500 g of the pulverized product was further included to prepare a composition according to the present invention.

<< 실시예Example 3: 본 발명에 따른 조성물 제조> 3: Preparation of the composition according to the present invention>

실시예 2와 동일하며 다만 분쇄한 건조 순채 잎 500g을 더 포함시켜 본 발명에 따른 조성물을 제조하였다.A composition according to the present invention was prepared in the same manner as in Example 2, except that 500 g of pulverized dried pure vegetable leaves were further included.

<< 실시예Example 4: 본 발명에 따른 조성물 제조> 4: Preparation of the composition according to the present invention>

실시예 3과 동일하며 다만 추출물을 가열하여 에탄올을 증발시킨 후 잔류물을 정제수에 용해시킨 다음에 1 × 107cell/ml 효모(이사켄키아 오리엔탈리스)를 추출물 전체 100중량부에 대하여 1중량부로 접종한 후, 30℃에서 24시간 내지 96시간 발효시킨 후 여과하여 본 발명에 따른 조성물을 제조하였다.Same as in Example 3, except that after evaporating the ethanol by heating the extract, the residue is dissolved in purified water, and then 1 × 10 7 cell/ml yeast (Isakenchia orientalis) is added to 100 parts by weight of the total extract by weight. After inoculation with the parent, the composition according to the present invention was prepared by fermenting at 30° C. for 24 to 96 hours and then filtering.

<< 비교예comparative example 1: 고구마 순 단독 에탄올 추출물의 제조> 1: Preparation of pure sweet potato pure ethanol extract>

실시예 1과 동일하나 고구마 순만을 사용하여 에탄올 추출한 것에 차이가 있다.It is the same as in Example 1, but there is a difference in ethanol extraction using only sweet potato shoots.

<< 비교예comparative example 2: 순채 단독 에탄올 추출물의 제조> 2: Preparation of pure vegetable alone ethanol extract>

실시예 1과 동일하나 순채만을 사용하여 에탄올 추출한 것에 차이가 있다.It is the same as in Example 1, but there is a difference in ethanol extraction using only pure vegetables.

<< 시험예test example 1: 피부 보습> 1: Moisturize the skin>

1. 세포 독성 실험1. Cytotoxicity experiments

세포독성 테스트는 Moseman의 방법(Moseman T J, Immuno Methods, 65, 55 (1983)) 및 Skaper 등의 방법(Skaper SD, et al, Cell Culture, 2, 17 (1990))을 이용한 MTT(3-4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide) 측정법을 이용하여 수행하였다.The cytotoxicity test was performed by Moseman's method (Moseman TJ, Immuno Methods, 65, 55 (1983)) and Skaper et al. (Skaper SD, et al, Cell Culture, 2, 17 (1990)) using MTT (3-4). ,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide) was measured.

인간의 각질형성세포 HaCaT는 한국세포주은행(Korean Cell Line Bank; Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였다. HaCaT는 10% (V/V) FBS, 페니실린 100U/mL 및 스트렙토마이신 100g/mL의 항생제를 포함하는 DMEM 배지를 사용하여 실험실에서 37℃, 5% CO2 공급조건을 갖춘 동물세포 배양기에서 배양하였다.Human keratinocytes HaCaT were purchased from the Korean Cell Line Bank (Seoul, Korea) and used. HaCaT was cultured in an animal cell incubator at 37°C and 5% CO2 supply condition in a laboratory using DMEM medium containing antibiotics of 10% (V/V) FBS, penicillin 100U/mL, and streptomycin 100g/mL.

실시예와 비교예 조성물을 DMSO에 용해시켜 100g/mL로 배양액에 첨가하고, 상기 배양액에서 세포를 24시간 동안 배양하였다. MTT 용액(5mg/mL)을 처리하여 4시간 더 배양시킨 다음, 생성된 청색 결정인 포르마잔의 양을 ELISA 판독기를 이용하여 595nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포에 대한 독성은 각각의 대조군의 평균 흡광도 값에 대한 백분율로 나타냈다.The compositions of Examples and Comparative Examples were dissolved in DMSO and added to the culture medium at 100 g/mL, and the cells were cultured in the culture medium for 24 hours. After treatment with MTT solution (5 mg/mL) and further incubated for 4 hours, the amount of the produced blue crystal formazan was measured for absorbance at 595 nm using an ELISA reader. Toxicity to cells was expressed as a percentage of the average absorbance value of each control group.

HaCaT 각질세포에서 세포독성을 조사하기 위하여 100 g/mL 농도로 처리하였을 때, 대조군인 DMSO만을 처리한 것과 비교하여 세포증식의 변화 정도를 계산하여 세포독성을 조사하였다. To investigate cytotoxicity in HaCaT keratinocytes, when treated at a concentration of 100 g/mL, cytotoxicity was investigated by calculating the degree of change in cell proliferation compared to that treated only with DMSO, a control.

모든 결과에서 세포 생존율이 95 ~ 98%의 결과를 보여 실시예 및 비교예 조성물 모두 세포 독성은 없는 것으로 판명되었다.In all the results, cell viability showed a result of 95 to 98%, and it was found that both the compositions of Examples and Comparative Examples had no cytotoxicity.

2. 인체 적용시 수분 2. Moisture when applied to the human body 보유능의possessive 평가 evaluation

실시예 및 비교예의 조성물에 대한 피부 보습 효과를 평가하기를 하기 위하여, 실시예와 비교예의 각 시험물질이 도포된 피부를 대상으로 하여 수분 보유능을 다음과 같이 측정하였다. 시험물질은 정제수에 15중량%로 녹인 것을 사용하였다.In order to evaluate the skin moisturizing effect of the compositions of Examples and Comparative Examples, the moisture retention ability was measured as follows for skin coated with each test substance of Examples and Comparative Examples. The test substance dissolved in purified water at 15% by weight was used.

수분 보유능의 측정은 실내온도 22℃ 및 상대습도 45%의 항온 항습실에서 20명의 피시험자 전박 안쪽에 일정량(0.1g/4㎠)을 도포하고, 도포 전, 도포 1시간 후 및 도포 2시간 후의 피부의 수분 함량을 측정하였다. 측정 기기는 피부의 수분 함량에 따른 피부의 전기 용량을 측정하여 보습력을 측정하는 수분 함량측정기(corneometer CM820, Courage + Khazaka, Cologne, 독일)를 사용하여 그 결과는 하기 표 1에 나타내었다.Moisture retention capacity was measured by applying a certain amount (0.1g/4cm2) to the inside of the forearms of 20 subjects in a constant temperature and humidity room with a room temperature of 22°C and a relative humidity of 45%, and the skin before, 1 hour after, and 2 hours after application. of the water content was measured. As the measuring device, a moisture content meter (corneometer CM820, Courage + Khazaka, Cologne, Germany) that measures the moisturizing power by measuring the electric capacity of the skin according to the moisture content of the skin was used, and the results are shown in Table 1 below.

전기전도도electrical conductivity 도포 전before application 도포 1시간 후1 hour after application 도포 2시간 후2 hours after application 실시예 1Example 1 5050 8383 7777 실시예 2Example 2 5050 8585 8080 실시예 3Example 3 5050 8888 8383 실시예 4Example 4 5050 9090 8585 비교예 1Comparative Example 1 5050 5656 5151 비교예 2Comparative Example 2 5050 5656 5151

상기 표 1로부터 본 발명에 따른 조성물이 비교예의 조성물에 비하여 현저하게 우수한 수분 보유능을 확인할 수 있었으며, 이는 매우 뛰어난 보습효과를 갖는 소재임을 입증한 것이다. 실시예 2 및 3에서 효과가 뛰어난 것은 고구마 순과 순채 잎 추출물에 대한 상승효과에 따른 것이며, 특히 실시예 4의 결과를 보면 발효에 의한 상승 효과를 확인할 수 있다. From Table 1, it was confirmed that the composition according to the present invention has significantly superior water retention ability compared to the composition of Comparative Example, which proves that it is a material having a very excellent moisturizing effect. The excellent effect in Examples 2 and 3 is due to the synergistic effect on the sweet potato sprouts and pure vegetable leaf extracts, and in particular, the synergistic effect by fermentation can be confirmed from the results of Example 4.

3. 아쿠아포린3. Aquaporin -3 및 -3 and 인볼루크린Involuclein 합성 촉진효과 실험 Synthesis accelerating effect experiment

피부세포의 장벽 및 보습기능에 중요한 역할을 하는 인볼루크린과 물 이동에 중요한 역할을 하는 아쿠아포린-3의 합성을 증가시키는 효과를 확인하기 위하여 다음과 같이 세포에 실시예 및 비교예 조성물을 을 각각 처리한 후 웨스턴 블럿팅(western blotting)을 통해 확인하였다.In order to confirm the effect of increasing the synthesis of involucrin, which plays an important role in the barrier and moisturizing functions of skin cells, and aquaporin-3, which plays an important role in water movement, the compositions of Examples and Comparative Examples were applied to the cells as follows. After each treatment, it was confirmed by western blotting.

먼저, 인간의 각질형성세포 HaCaT를 접종하여 24시간 후 실시예 및 비교예 조성물을 각각 첨가하여 DMEM 배지, 37℃, 5% CO2에서 배양하였다. 24시간 배양 후 세포를 회수한 후 파쇄하여 단백질만을 추출하여 -40℃에 보관하였다. 추출된 단백질은 BCA saasy를 통해 단백질을 정량하였다. 각각의 시료의 단백질량 30g으로 희석한 후 12% SDS-겔에서 전기영동한 후 PVDF membrane으로 옮겼다. 1차 항체(rabbit anti-aquaporins-3 antibody)와 반응시킨 후 남은 항체를 세척하여 제거하고 2차 항체(rabbit HRP-coupled anti-IgG antibody)와 반응시켰다. First, human keratinocytes were inoculated with HaCaT, and after 24 hours, the compositions of Examples and Comparative Examples were added, respectively, and cultured in DMEM medium, 37° C., 5% CO 2 . After culturing for 24 hours, the cells were recovered, disrupted, and only proteins were extracted and stored at -40°C. The extracted protein was quantified by BCA saasy. After dilution with 30 g of protein in each sample, electrophoresis on 12% SDS-gel was carried out, and the resultant was transferred to PVDF membrane. After reacting with the primary antibody (rabbit anti-aquaporins-3 antibody), the remaining antibody was washed and removed and reacted with the secondary antibody (rabbit HRP-coupled anti-IgG antibody).

남은 항체를 제거한 후 항체와 반응하여 발색 반응을 일으키는 시약(peroxidase substrate and chromogen solution)을 첨가하였다. 발색된 밴드는 이미지 분석(BioRad, Universal Hood , USA )을 통해 측정하고 수치화하여 그 결과를 하기 표 2과 표 3에 나타냈다.After removing the remaining antibody, a reagent (peroxidase substrate and chromogen solution) that reacts with the antibody to cause a color reaction was added. The colored band was measured and quantified through image analysis (BioRad, Universal Hood, USA), and the results are shown in Tables 2 and 3 below.

구분division 아쿠아포린-3의 발현량(%)Aquaporin-3 expression level (%) 대조군control 100100 실시예 1Example 1 148148 실시예 2Example 2 153153 실시예 3Example 3 157157 실시예 4Example 4 163163 비교예 1Comparative Example 1 105105 비교예 2Comparative Example 2 103103

상기 표 2에서 보는 바와 같이 비교예 1, 2는 대조군에 비해 거의 효과를 보이지 않았으며, 본 발명에 따른 실시예 1 내지 4는 50% 이상의 효과를 보였으며, 실시예 2 및 3에서 상승효과. 특히 실시예 4에서 현저한 상승효과를 확인할 수 있었다.As shown in Table 2, Comparative Examples 1 and 2 showed little effect compared to the control group, and Examples 1 to 4 according to the present invention showed an effect of 50% or more, and a synergistic effect in Examples 2 and 3. In particular, a remarkable synergistic effect was confirmed in Example 4.

구분division 인볼루크린의 발현량(%)Expression level of involucrin (%) 대조군control 100100 실시예 1Example 1 149149 실시예 2Example 2 153153 실시예 3Example 3 155155 실시예 4Example 4 164164 비교예 1Comparative Example 1 102102 비교예 2Comparative Example 2 101101

HaCaT 각질세포에 처리 했을 때 피부장벽기능과 보습에 중요한 역할을 하는 인볼루크린의 발현이 상기 표 2에서 보는 바와 같이 비교예 1, 2는 대조군에 비해 거의 효과를 보이지 않았으며, 본 발명에 따른 실시예 1 내지 4는 50% 이상의 효과를 보였으며, 실시예 2 및 3에서 상승효과. 특히 실시예 4에서 현저한 상승효과를 확인할 수 있었다. As shown in Table 2 above, Comparative Examples 1 and 2 showed little effect compared to the control group on the expression of involucrin, which plays an important role in skin barrier function and moisturizing, when treated with HaCaT keratinocytes. Examples 1 to 4 showed an effect of 50% or more, and a synergistic effect in Examples 2 and 3. In particular, a remarkable synergistic effect was confirmed in Example 4.

이상의 실험결과를 통하여 본 발명의 조성물은 피부 장벽 기능과 보습에 뛰어난 효과를 확인할 수 있었다.Through the above experimental results, the composition of the present invention was able to confirm the excellent effect on the skin barrier function and moisturizing.

<< 시험예test example 2: 피부 2: skin 미맥mimeek >>

1. 멜라닌 생성 저해 효과 확인1. Confirmation of melanin production inhibitory effect

실시예와 비교예의 조성물을 쥐의 멜라노마 세포(B-16 mouse melanoma cell)의 배양액에 첨가하여 세포 수준에서의 미백효과를 실험하였다. (Lotan R, Lotan D Cancer Res 40:3345-3350, 1980)The compositions of Examples and Comparative Examples were added to the culture medium of B-16 mouse melanoma cells to test the whitening effect at the cellular level. (Lotan R, Lotan D Cancer Res 40:3345-3350, 1980)

실험 전 쥐의 멜라노마 세포에 대하여 독성을 평가하여 독성이 없는 농도를 선정하여 미백평가를 수행하였다.Before the experiment, toxicity was evaluated for melanoma cells in mice, and a non-toxic concentration was selected for whitening evaluation.

최종농도는 100㎍/ml가 되도록 하여 실험하였으며, 대조군인 알부틴은 100㎍/ml가 되도록 배지에 첨가하여 각각 B-16멜라노마 세포에 처리하여 3일간 배양하였다.The final concentration was tested to be 100㎍/ml, and arbutin, a control, was added to the medium so that it became 100㎍/ml, treated with B-16 melanoma cells, respectively, and cultured for 3 days.

이후, 세포들을 트립신(trypsin) 처리하여 배양용기로부터 떼어내 원심분리 한 후 멜라닌을 추출하였다. 떼어낸 세포는 수산화 나트륨 용액(1N농도) 1ml를 가하여 10분간 끓여 멜라닌을 녹이고 분광 광도계를 이용하여, 400나노미터(nm)에서 흡광도를 측정하여 생성된 멜라닌의 양을 측정하였다.Thereafter, the cells were treated with trypsin, removed from the culture vessel, centrifuged, and then melanin was extracted. To the detached cells, 1 ml of sodium hydroxide solution (1N concentration) was added and boiled for 10 minutes to dissolve melanin. Using a spectrophotometer, absorbance was measured at 400 nanometers (nm) to measure the amount of melanin produced.

상기 멜라닌 양은 단위 세포수당(106cell)의 흡광도로 나타내는 방법으로 측정하였으며, 대조군에 대한 상대적인 멜라닌 생성량을 저해율(%)로 계산하고 결과를 표 4에 정리하였다. 또한, 실험은 3번 반복된 것이다.The amount of melanin was measured by a method indicated by the absorbance per unit cell number (10 6 cells), the relative melanin production to the control was calculated as the inhibition rate (%), and the results are summarized in Table 4. Also, the experiment was repeated 3 times.

시료sample 멜라닌생성량 melanin production 저해율(%)Inhibition rate (%) 음성 대조군negative control 0.065±0.0020.065±0.002 -- 양성대조군positive control 0.033±0.001 0.033±0.001 49%49% 실시예 1Example 1 0.015±0.0030.015±0.003 77%77% 실시예 2Example 2 0.012±0.0010.012±0.001 81%81% 실시예 3Example 3 0.010±0.0010.010±0.001 85%85% 실시예 4Example 4 0.007±0.0030.007±0.003 89%89% 비교예 1Comparative Example 1 0.059±0.0010.059±0.001 10%10% 비교예 2Comparative Example 2 0.059±0.0010.059±0.001 10%10%

표 4의 결과에서 볼 수 있듯이, 본 발명의 조성물은 기존에 알려진 미백 물질인 알부틴과 비교할 때 배양된 쥐의 멜라노마 세포에 대하여 월등히 우수한 멜라닌 생성 억제능이 있음을 알 수 있었으며, 비교예 1, 2에서는 음성 대조군에 비하여 10% 정도의 미비한 효과를 보여 본원 발명에 따른 조성물의 우수성이 현저하게 드러났으며, 고구마 덩이뿌리에 대한 고구마 순 추출물의 상승효과, 순채 추출물의 상승효과, 특히 발효에 의한 현저한 상승효과를 확인할 수 있었다.As can be seen from the results in Table 4, it was found that the composition of the present invention has a significantly superior melanogenesis inhibitory ability against cultured mice melanoma cells when compared with arbutin, a known whitening material, Comparative Examples 1 and 2 showed an insignificant effect of about 10% compared to the negative control, thereby remarkably revealing the superiority of the composition according to the present invention. effect could be confirmed.

<< 시험예test example 3: 피부 주름방지 및 탄력 유지> 3: Prevents skin wrinkles and maintains elasticity>

1. One. ElastaseElastase 저해율 측정 Inhibition rate measurement

엘라스틴(Elastin)을 분해하는 효소인 엘라스테이즈(Elastase)의 활성 저해 효과를 다음과 같이 확인하였다.The inhibitory effect of Elastase, an enzyme decomposing elastin, was confirmed as follows.

엘라스테이즈(Elastase)는 사람의 백혈구 세포로부터 유래한 엘라스테이즈를 사용하였고, 엘라스테이즈의 기질로 합성 기질인 MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-pNA를 사용하였다. 완충용액은 100mM의 Tris(pH 7.5) 용액을 사용하였다. 엘라스테이즈는 완충용액을 이용하여 최종적으로 0.2mU을 사용하였다. 또한, 엘라스테이즈의 합성 기질은 DMSO를 이용하여 100mM 용액을 만든 후 최종 농도가 05mM이 되도록 완충용액을 이용하여 희석하였다. Elastase used elastase derived from human leukocyte cells, and a synthetic substrate MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-pNA was used as a substrate for elastase. A buffer solution of 100 mM Tris (pH 7.5) was used. Elastase was finally used at 0.2 mU using a buffer solution. In addition, the synthetic substrate of elastase was diluted with a buffer solution so that a final concentration of 05 mM after making a 100 mM solution using DMSO.

이때, 양성 대조군은 엘라스테이즈 저해 물질로 알려진 퀘르세틴(Quercetin)을 100ppm 농도로 넣은 것으로 설정하였다. 실시예 및 비교예의 시료 역시 100ppm이 되도록 첨가하였다. 반응은 96-웰플레이트에서진행하였으며, 상온에서 20분간 반응시켰다. 분광 광도계를 이용하여 1분 간격으로 405nm에서 흡광도를 측정하여 시간 대비 흡광도의 기울기를 구하여 효소의 활성도로 정하였다. 엘라스테이즈 저해율은 다음과 같이 계산하여 그 결과를 표 5에 나타냈다.At this time, the positive control was set to put quercetin (Quercetin) known as an elastase inhibitor at a concentration of 100ppm. Samples of Examples and Comparative Examples were also added so as to be 100 ppm. The reaction was carried out in a 96-well plate, and the reaction was carried out at room temperature for 20 minutes. The absorbance was measured at 405 nm at 1-minute intervals using a spectrophotometer, and the slope of the absorbance versus time was determined to determine the activity of the enzyme. The elastase inhibition rate was calculated as follows and the results are shown in Table 5.

Figure 112019053459718-pat00001
Figure 112019053459718-pat00001

시료sample Elastase 저해율(%) Elastase inhibition rate (%) 양성대조군positive control 43.12%43.12% 실시예 1Example 1 77.29%77.29% 실시예 2Example 2 82.34%82.34% 실시예 3Example 3 85.21%85.21% 실시예 4Example 4 88.21%88.21% 비교예 1Comparative Example 1 42.18%42.18% 비교예 2Comparative Example 2 42.36%42.36%

표 5의 결과에서 볼 수 있듯이, 본 발명의 조성물은 매우 우수한 엘라스타아제 저해능이 있음을 알 수 있었으며, 비교예 1 및 2에서도 어느 정도의 효과를 보였으나 실시예 1 보다 더 미비하였으며, 이를 실시예 1에 포함시킨 실시예 2 및 3에서 우수성이 현저하게 나타났는데, 이는 고구마 덩이뿌리에 대한 고구마 순 추출물의 상승효과, 순채 추출물의 상승효과, 특히 발효에 의한 현저한 상승효과를 확인할 수 있었다.As can be seen from the results in Table 5, it was found that the composition of the present invention had a very good elastase inhibitory ability, and although it showed some effect in Comparative Examples 1 and 2, it was more insignificant than in Example 1, Examples 2 and 3 included in Example 1 showed remarkably superiority, which confirmed the synergistic effect of the pure sweet potato extract on the tuber root of the sweet potato, the synergistic effect of the pure vegetable extract, especially the remarkable synergistic effect by fermentation.

2. 2. CollagenaseCollagenase 저해율 측정 Inhibition rate measurement

콜라겐(Collagen)을 분해하는 효소인 콜라게나제의 활성 저해 효과를 다음과 같이 확인하였다.The inhibitory effect on the activity of collagenase, an enzyme that decomposes collagen, was confirmed as follows.

콜라게나제는 쥐의 이자에서 유래한 콜라게나제를 사용하였고, 콜라게나제의 기질로 합성 기질인 N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala을 사용하였다. 완충용액은 50mM Tricine, 10mM CaCl2·H2O, 400mM NaCl(pH7.5)이 녹아 있는 용액을 사용하였다. 합성 기질은 완충용액을 이용하여 10mM의 농도로 녹인 후 최종적으로 75μM이 되도록 희석하였다. 콜라게나제는 4도의 차가운 3차 증류수를 이용하여 1unit/ml 농도로 녹인 후 최종적으로 0.05unit/ml이 되도록 완충용액을 이용하여 희석하였다. Collagenase derived from mouse pancreas was used, and a synthetic substrate N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala was used as a substrate for collagenase. A buffer solution in which 50 mM Tricine, 10 mM CaCl 2 ·H 2 O, and 400 mM NaCl (pH7.5) were dissolved was used. The synthetic substrate was dissolved at a concentration of 10 mM using a buffer and finally diluted to 75 μM. Collagenase was dissolved in 4 degree cold tertiary distilled water to a concentration of 1 unit/ml and finally diluted with a buffer solution to 0.05 unit/ml.

실시예 및 비교예의 시료는 최종농도 100ppm에서 실험하였다. 이 때, 양성 대조군은 콜라게나제 저해 효과가 알려진 에피갈로카테킨 갈레이트(EGCG)를 최종농도 100ppm이 되도록 설정하였다. 반응은 96-웰플레이트에서 진행하였으며, 상온에서 10분간 반응시켰다. 분광 광도계를 이용하여 1분 간격으로 345 nm에서 흡광도를 측정하여 시간 대비 흡광도의 최대 기울기를 구하여 효소의 활성으로 정하였다. 콜라게나제 저해율은 다음과 같이 계산하여 그 결과를 표 6에 나타냈다.The samples of Examples and Comparative Examples were tested at a final concentration of 100 ppm. At this time, the positive control group was set to have a final concentration of 100 ppm of epigallocatechin gallate (EGCG), which is known to have a collagenase inhibitory effect. The reaction was carried out in a 96-well plate, and reacted at room temperature for 10 minutes. The absorbance was measured at 345 nm at intervals of 1 minute using a spectrophotometer, and the maximum slope of the absorbance versus time was obtained and determined as the activity of the enzyme. The collagenase inhibition rate was calculated as follows and the results are shown in Table 6.

Figure 112019053459718-pat00002
Figure 112019053459718-pat00002

시료sample Collagenase 저해율(%) Collagenase inhibition rate (%) 양성대조군positive control 42.12%42.12% 실시예 1Example 1 68.18%68.18% 실시예 2Example 2 71.25%71.25% 실시예 3Example 3 75.28%75.28% 실시예 4Example 4 80.12%80.12% 비교예 1Comparative Example 1 39.15%39.15% 비교예 2Comparative Example 2 39.18%39.18%

표 6의 결과에서 볼 수 있듯이, 본 발명의 조성물은 매우 우수한 콜라게나제 저해능이 있음을 알 수 있었으며, 비교예 1 및 2에서도 어느 정도의 효과를 보였으나 실시예 1 보다 더 미비하였으며, 이를 실시예 1에 포함시킨 실시예 2 및 3에서 우수성이 현저하게 나타났는데, 이는 고구마 덩이뿌리에 대한 고구마 순 추출물의 상승효과, 순채 추출물의 상승효과, 특히 발효에 의한 현저한 상승효과를 입증하는 것이다.As can be seen from the results in Table 6, it was found that the composition of the present invention had a very excellent collagenase inhibitory ability, and although it showed some effect in Comparative Examples 1 and 2, it was more insignificant than that of Example 1, Examples 2 and 3 included in Example 1 showed remarkable superiority, which demonstrates the synergistic effect of the pure sweet potato extract on the tuber root of the sweet potato, the synergistic effect of the pure vegetable extract, in particular, the remarkable synergistic effect by fermentation.

3. 세포증식 효과 측정3. Measurement of cell proliferation effect

피부세포 증식 활성화에 대하여 확인하기 위해, 사람의 섬유아세포를 사용하여 세포증식 활성능을 측정하였다. In order to confirm the activation of skin cell proliferation, cell proliferation activity was measured using human fibroblasts.

10㎍/㎖의 실시예 및 비교예의 조성물을 배양액에 첨가한 후, 사람의 섬유아세포를 배양하여 MTT 환원법을 수행하고, 포르마잔(formazan) 생성물을 이소프로필 에탄올로 추출하여, 570nm에서 흡광도를 측정함으로써 세포증식 활성능을 상대비교하였다. 이때, 음성대조군으로는 시료는 넣지 않은 배양액을 사용하였다. 측정한 결과를 하기 식을 이용하여 수치로 계산하여 그 결과는 하기 표 7에 나타냈다.After adding the compositions of Examples and Comparative Examples at 10 μg/ml to the culture medium, the MTT reduction method was performed by culturing human fibroblasts, and the formazan product was extracted with isopropyl ethanol, and absorbance was measured at 570 nm. By doing so, the cell proliferation activity was compared. At this time, as a negative control, a culture medium without the sample was used. The measured results were numerically calculated using the following formula, and the results are shown in Table 7 below.

세포증식능(%) = 각 시료군에서의 흡광도/대조군에서의 흡광도Cell proliferative capacity (%) = absorbance in each sample group / absorbance in control group

시료sample 세포증식활성능(%) Cell proliferative activity (%) 실시예 1Example 1 137.28%137.28% 실시예 2Example 2 139.18%139.18% 실시예 3 Example 3 142.28%142.28% 실시예 4Example 4 144.14%144.14% 비교예 1Comparative Example 1 112.15%112.15% 비교예 2Comparative Example 2 115.18%115.18%

표 7의 결과에서 볼 수 있듯이, 처리하지 않은 대조군의 세포증식 활성능(100%)에 비하여 본 발명의 조성물은 매우 우수한 세포증식 활성을 보였으며,비교예 1 및 2에서도 어느 정도의 효과를 보였으나 실시예 1 보다 더 미비하였으며, 이를 실시예 1에 포함시킨 실시예 2 및 3에서 우수성이 현저하게 나타났는데, 이는 고구마 덩이뿌리에 대한 고구마 순 추출물의 상승효과, 순채 추출물의 상승효과, 특히 발효에 의한 현저한 상승효과를 입증하는 것이다.As can be seen from the results of Table 7, the composition of the present invention showed a very excellent cell proliferation activity compared to the cell proliferation activity (100%) of the untreated control group, and also showed some effect in Comparative Examples 1 and 2. I was more insignificant than in Example 1, and the superiority was remarkably shown in Examples 2 and 3, which were included in Example 1, which was the synergistic effect of the sweet potato net extract on the tuber root of the sweet potato, the synergistic effect of the pure vegetable extract, especially the fermentation. This proves a significant synergistic effect by

이상에서 살펴 본 결과 본 발명에 따른 화장품 조성물은 피부 탄력 유지 및 향상 효과, 피부 주름 방지 효과가 뛰어나 궁극적으로 피부 노화를 방지할 수 있는 최상의 화장품 조성물임을 알 수 있었다. As a result of the above examination, it was found that the cosmetic composition according to the present invention is excellent in maintaining and improving skin elasticity and preventing skin wrinkles, and is ultimately the best cosmetic composition capable of preventing skin aging.

상술한 시험예를 종합하여 보면 본 발명에 따른 조성물은 피부 보습, 피부 미백, 피부 탄력 유지 내지 향상, 피부 주름 방지 효과, 궁극적으로는 피부 항노화 효과가 현저하게 우수한 장점을 보유하고 있다.In summary of the above-described test examples, the composition according to the present invention has remarkably excellent advantages in skin moisturizing, skin whitening, maintaining or improving skin elasticity, skin wrinkle prevention effect, and ultimately skin anti-aging effect.

Claims (4)

고구마의 덩이뿌리 분쇄물, 건조 고구마 순 분쇄물 및 건조 순채 잎을 각각 동일 중량 비율로 혼합한 후에 혼합물을 에탄올로 추출한 추출물을 가열하여 에탄올을 증발시킨 후 잔류물을 정제수에 용해시킨 다음에 1 × 107cell/ml 효모(이사켄키아 오리엔탈리스)를 상기 추출물 전체 100중량부에 대하여 1중량부로 접종한 후, 30℃에서 24시간 내지 96시간 발효시킨 후 여과한 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장품 조성물.



After mixing the pulverized tuber root of sweet potato, pulverized dry sweet potato, and dried leaf by weight in the same weight ratio, the mixture was extracted with ethanol by heating the extract to evaporate the ethanol, and then the residue was dissolved in purified water and then 1 × 10 7 cell/ml yeast (Isakenchia orientalis) was inoculated at 1 part by weight based on 100 parts by weight of the entire extract, and then fermented at 30° C. for 24 to 96 hours and then filtered fermented product containing as an active ingredient A cosmetic composition for skin whitening.



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