KR102264873B1 - 니파바이러스 g 당단백질에 특이적인 단클론 항체 및 이의 용도 - Google Patents
니파바이러스 g 당단백질에 특이적인 단클론 항체 및 이의 용도 Download PDFInfo
- Publication number
- KR102264873B1 KR102264873B1 KR1020200006675A KR20200006675A KR102264873B1 KR 102264873 B1 KR102264873 B1 KR 102264873B1 KR 1020200006675 A KR1020200006675 A KR 1020200006675A KR 20200006675 A KR20200006675 A KR 20200006675A KR 102264873 B1 KR102264873 B1 KR 102264873B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- seq
- antibody
- sequence
- glycoprotein
- nipavirus
- Prior art date
Links
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 title claims abstract description 68
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 title claims abstract description 68
- 241000526636 Nipah henipavirus Species 0.000 title claims abstract description 23
- 208000000464 Henipavirus Infections Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 206010064034 Nipah virus infection Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims abstract description 7
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 22
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 18
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims description 17
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 16
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 6
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 6
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 6
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 6
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 6
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 2
- 241000893570 Hendra henipavirus Species 0.000 abstract description 16
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 abstract description 12
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 abstract description 11
- 101710091045 Envelope protein Proteins 0.000 abstract 1
- 101710188315 Protein X Proteins 0.000 abstract 1
- 102100021696 Syncytin-1 Human genes 0.000 abstract 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 22
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 22
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 22
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 17
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 13
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 11
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 10
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 125000003412 L-alanyl group Chemical group [H]N([H])[C@@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 238000002869 basic local alignment search tool Methods 0.000 description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 5
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 4
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 4
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 4
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 4
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 4
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- 108010068327 4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase Proteins 0.000 description 3
- FRBAHXABMQXSJQ-FXQIFTODSA-N Arg-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FRBAHXABMQXSJQ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 3
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 3
- SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N Dodecane Natural products CCCCCCCCCCCC SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000000570 L-alpha-aspartyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[C@]([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 3
- JAWUQFCGNVEDRN-MEYUZBJRSA-N Thr-Tyr-Leu Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N)O JAWUQFCGNVEDRN-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 3
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- PBSQFBAJKPLRJY-BYULHYEWSA-N Asn-Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(=O)N)N PBSQFBAJKPLRJY-BYULHYEWSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- SXFPZRRVWSUYII-KBIXCLLPSA-N Gln-Ser-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N SXFPZRRVWSUYII-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 125000003440 L-leucyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 125000002842 L-seryl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])O[H] 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 2
- GILLQRYAWOMHED-DCAQKATOSA-N Lys-Val-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN GILLQRYAWOMHED-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 2
- LLGTYVHITPVGKR-RYUDHWBXSA-N Phe-Gln-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O LLGTYVHITPVGKR-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- 238000010240 RT-PCR analysis Methods 0.000 description 2
- ZUDXUJSYCCNZQJ-DCAQKATOSA-N Ser-His-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](CO)N ZUDXUJSYCCNZQJ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 239000011545 carbonate/bicarbonate buffer Substances 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000001378 electrochemiluminescence detection Methods 0.000 description 2
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003317 immunochromatography Methods 0.000 description 2
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 108010057952 lysyl-phenylalanyl-lysine Proteins 0.000 description 2
- 239000012913 medium supplement Substances 0.000 description 2
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 2
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- HUZGPXBILPMCHM-IHRRRGAJSA-N Asn-Arg-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O HUZGPXBILPMCHM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- DXVMJJNAOVECBA-WHFBIAKZSA-N Asn-Gly-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O DXVMJJNAOVECBA-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- PNHQRQTVBRDIEF-CIUDSAMLSA-N Asn-Leu-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N PNHQRQTVBRDIEF-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- JPPLRQVZMZFOSX-UWJYBYFXSA-N Asn-Tyr-Ala Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 JPPLRQVZMZFOSX-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- RTFXPCYMDYBZNQ-SRVKXCTJSA-N Asn-Tyr-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O RTFXPCYMDYBZNQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- DATSKXOXPUAOLK-KKUMJFAQSA-N Asn-Tyr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O DATSKXOXPUAOLK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- WBDWQKRLTVCDSY-WHFBIAKZSA-N Asp-Gly-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O WBDWQKRLTVCDSY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ITGFVUYOLWBPQW-KKHAAJSZSA-N Asp-Thr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ITGFVUYOLWBPQW-KKHAAJSZSA-N 0.000 description 1
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 1
- 101100315624 Caenorhabditis elegans tyr-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 241000288673 Chiroptera Species 0.000 description 1
- 108091062157 Cis-regulatory element Proteins 0.000 description 1
- IWVNIQXKTIQXCT-SRVKXCTJSA-N Cys-Tyr-Asn Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N)O IWVNIQXKTIQXCT-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 description 1
- 108091006027 G proteins Proteins 0.000 description 1
- 108091000058 GTP-Binding Proteins 0.000 description 1
- ILKYYKRAULNYMS-JYJNAYRXSA-N Gln-Lys-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O ILKYYKRAULNYMS-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- LHMWTCWZARHLPV-CIUDSAMLSA-N Gln-Met-Ser Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N LHMWTCWZARHLPV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- SBYVDRJAXWSXQL-AVGNSLFASA-N Glu-Asn-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O SBYVDRJAXWSXQL-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- XMPAXPSENRSOSV-RYUDHWBXSA-N Glu-Gly-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O XMPAXPSENRSOSV-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- ZHNHJYYFCGUZNQ-KBIXCLLPSA-N Glu-Ile-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O ZHNHJYYFCGUZNQ-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- MFNUFCFRAZPJFW-JYJNAYRXSA-N Glu-Lys-Phe Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MFNUFCFRAZPJFW-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- QSDKBRMVXSWAQE-BFHQHQDPSA-N Gly-Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CN QSDKBRMVXSWAQE-BFHQHQDPSA-N 0.000 description 1
- YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- NGBGZCUWFVVJKC-IRXDYDNUSA-N Gly-Tyr-Tyr Chemical compound C([C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 NGBGZCUWFVVJKC-IRXDYDNUSA-N 0.000 description 1
- 241000035314 Henipavirus Species 0.000 description 1
- 125000001176 L-lysyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(N([H])[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000769 L-threonyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])[C@](O[H])(C([H])([H])[H])[H] 0.000 description 1
- 125000003580 L-valyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])[H] 0.000 description 1
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 description 1
- QVFGXCVIXXBFHO-AVGNSLFASA-N Leu-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O QVFGXCVIXXBFHO-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- OYQUOLRTJHWVSQ-SRVKXCTJSA-N Leu-His-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O OYQUOLRTJHWVSQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- IOQWIOPSKJOEKI-SRVKXCTJSA-N Lys-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IOQWIOPSKJOEKI-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- PNDCUTDWYVKBHX-IHRRRGAJSA-N Met-Asp-Tyr Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PNDCUTDWYVKBHX-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- MNGBICITWAPGAS-BPUTZDHNSA-N Met-Ser-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O MNGBICITWAPGAS-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 1
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 1
- 244000004005 Nypa fruticans Species 0.000 description 1
- 235000005305 Nypa fruticans Nutrition 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241000711504 Paramyxoviridae Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- DXTOOBDIIAJZBJ-BQBZGAKWSA-N Pro-Gly-Ser Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DXTOOBDIIAJZBJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- RCYUBVHMVUHEBM-RCWTZXSCSA-N Pro-Pro-Thr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O RCYUBVHMVUHEBM-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- VBZXFFYOBDLLFE-HSHDSVGOSA-N Pro-Trp-Thr Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(O)=O)C(=O)[C@@H]1CCCN1 VBZXFFYOBDLLFE-HSHDSVGOSA-N 0.000 description 1
- QKWYXRPICJEQAJ-KJEVXHAQSA-N Pro-Tyr-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@@H]2CCCN2)O QKWYXRPICJEQAJ-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 1
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 1
- 241001112090 Pseudovirus Species 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N Ser-Gly-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- UGTZYIPOBYXWRW-SRVKXCTJSA-N Ser-Phe-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O UGTZYIPOBYXWRW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- VVKVHAOOUGNDPJ-SRVKXCTJSA-N Ser-Tyr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VVKVHAOOUGNDPJ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- OQSQCUWQOIHECT-YJRXYDGGSA-N Ser-Tyr-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O OQSQCUWQOIHECT-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 1
- 101150006914 TRP1 gene Proteins 0.000 description 1
- XHALUUQSNXSPLP-UFYCRDLUSA-N Tyr-Arg-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 XHALUUQSNXSPLP-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 1
- UABYBEBXFFNCIR-YDHLFZDLSA-N Tyr-Asp-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O UABYBEBXFFNCIR-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 1
- AZGZDDNKFFUDEH-QWRGUYRKSA-N Tyr-Gly-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 AZGZDDNKFFUDEH-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- QARCDOCCDOLJSF-HJPIBITLSA-N Tyr-Ile-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N QARCDOCCDOLJSF-HJPIBITLSA-N 0.000 description 1
- KHPLUFDSWGDRHD-SLFFLAALSA-N Tyr-Tyr-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)NC(=O)[C@H](CC3=CC=C(C=C3)O)N)C(=O)O KHPLUFDSWGDRHD-SLFFLAALSA-N 0.000 description 1
- 108010064997 VPY tripeptide Proteins 0.000 description 1
- OUUBKKIJQIAPRI-LAEOZQHASA-N Val-Gln-Asn Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O OUUBKKIJQIAPRI-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- HQYVQDRYODWONX-DCAQKATOSA-N Val-His-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N HQYVQDRYODWONX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- BZMIYHIJVVJPCK-QSFUFRPTSA-N Val-Ile-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N BZMIYHIJVVJPCK-QSFUFRPTSA-N 0.000 description 1
- MIAZWUMFUURQNP-YDHLFZDLSA-N Val-Tyr-Asn Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N MIAZWUMFUURQNP-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 1
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 108010077245 asparaginyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010068265 aspartyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000013602 bacteriophage vector Substances 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 1
- FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N dipeptide phenylalanyl-tyrosine Natural products C=1C=C(O)C=CC=1CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 238000007499 fusion processing Methods 0.000 description 1
- 230000005182 global health Effects 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 238000003125 immunofluorescent labeling Methods 0.000 description 1
- 238000002991 immunohistochemical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 108010060857 isoleucyl-valyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- 108010073472 leucyl-prolyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 238000003670 luciferase enzyme activity assay Methods 0.000 description 1
- 230000034217 membrane fusion Effects 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 229940093430 polyethylene glycol 1500 Drugs 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000003156 radioimmunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000010206 sensitivity analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 1
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 108010027345 wheylin-1 peptide Proteins 0.000 description 1
- 244000059546 zoonotic virus Species 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
- C07K16/1027—Paramyxoviridae, e.g. respiratory syncytial virus
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/005—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from viruses
- G01N2333/08—RNA viruses
- G01N2333/115—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
본 발명은 니파바이러스(Nipah virus)의 외피 단백질 중 하나인 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 및 이의 용도에 관한 것이다. 본 발명의 항체는 헨드라바이러스(Hendra virus)와의 교차 반응성이 없으며, 니파바이러스 G 당단백질에 대해 높은 중화능을 나타내므로, 니파바이러스 감염의 진단 및 치료에 효과적으로 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 니파바이러스(Nipah virus) G 당단백질에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 및 이의 용도에 관한 것이다. 본 발명의 항체는 헨드라바이러스(Hendra virus)와의 교차 반응성이 없으며, 니파바이러스 G 당단백질에 대해 높은 중화능을 나타내므로 니파바이러스 감염의 진단 및 치료에 효과적으로 사용될 수 있다.
니파바이러스(Nipah virus, NiV)는 인간을 포함하는 광범위한 척추 동물에서 급성 호흡기 질환과 치명적인 뇌염을 유발하는 바이러스로, 니파바이러스 감염은 1998년 말레이시아에서 처음 발견되었으며 이후 싱가포르, 방글라데시 및 인도를 포함한 여러 아시아 국가에서 발견되었다. 니파바이러스의 주요 운반체는 과일 박쥐로 여겨지며, 감염된 동물과의 직접적인 접촉은 인간의 질병을 유발한다. 최근에는 사람 간의 감염도 보고된 바 있다.
니파바이러스는 파라믹소바이러스(Paramyxoviridae)과의 헨니파바이러스(Henipavirus)속에 속하는 동물원성 바이러스로, 헨니파바이러스속에 속하는 다른 바이러스인 헨드라바이러스(Hendra virus, HeV)와 유사한 구조적 특징을 공유한다. 다른 파라믹소바이러스와는 달리, 니파바이러스 및 헨드라바이러스는 광범위한 숙주 친화성을 나타낸다. 또한 높은 병원성 및 사망률로 인해 세계 보건기구 (World Health Organization, WHO)에 의해 global health priority로 간주되며, 생물안전 4등급(Biosafety level-4) 시설에서 취급해야한다.
현재 니파바이러스 또는 헨드라바이러스에 대해 유효한 백신이나 치료제는 없으며, 이들의 진단은 바이러스성 RNA의 역전사 중합효소 연쇄반응 (reverse transcriptase polymerase chain reaction, RT-PCR) 및 감염된 조직의 면역조직화학 분석(immunohistochemical analysis)에 의존하고 있다. 따라서 보다 안전하고 간단한 진단 방법의 개발이 요구되며, 국내에는 아직 니파바이러스의 유입이 보고된 바 없으나, 고위험 병원균이기 때문에 유입에 대비한 혈청학적 진단법 개발 및 중화항체 개발이 필요하다.
헨드라바이러스 및 니파바이러스는 모두 숙주 세포와의 융합에 필수적인 바이러스 막에 고정된 G 및 F 당단백질을 발현한다. G 당단백질은 적혈구 응집 및 뉴라미니다제(neuraminidase) 활성을 지니지 않고, 부착 당단백질로서 분자의 아미노(N) 말단이 세포질을 향하고 카르복시(C) 말단이 세포 밖을 향하는 2형 막단백질이다. F 당단백질은 두개의 HR(heptad repeat) 부위 및 하나의 소수성 융합 펩타이드를 갖는 삼량체의 1형 막단백질이다. 헨드라바이러스 및 니파바이러스는 세포의 수용체에 결합한 후 G 당단백질 및 F 당단백질의 일체의 작용을 통해 pH-의존적 막 융합과정을 거쳐 세포를 감염시킨다.
니파바이러스 G 당단백질에 결합하는 단클론 중화항체는 알려져 있으나(특허문헌 1 및 2), 이들은 모두 헨드라바이러스 G 당단백질에 대한 교차 반응을 나타내므로 니파바이러스에 대한 정확한 진단이 불가능하다. 따라서, 헨드라바이러스와 교차 반응성을 나타내지 않으면서도 니파바이러스 G 당단백질에 특이적이고 높은 중화능을 갖는 단클론 항체의 개발이 요구된다.
본 발명은 니파바이러스 G 당단백질을 검출함으로써, 니파바이러스 감염에 대한 효과적인 혈청학적 진단법 및 항체 치료제를 개발하는 것을 목적으로 한다.
이를 위해 본 발명에서는 니파바이러스 G 당단백질에 특이적인 항체를 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기 과제를 해결하고자, 본 발명은 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 제공한다.
구체적으로, 본 발명의 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체는 하기 (1) 내지 (3)으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것일 수 있다.
(1) 서열번호 1의 염기 서열에 의해 암호화되는 아미노산 서열을 갖는 중쇄; 및 서열번호 2의 염기 서열에 의해 암호화되는 아미노산 서열을 갖는 경쇄를 포함하는, 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체.
(2) 서열번호 3의 염기 서열에 의해 암호화되는 아미노산 서열을 갖는 중쇄; 및 서열번호 4의 염기 서열에 의해 암호화되는 아미노산 서열을 갖는 경쇄를 포함하는, 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체.
(3) 서열번호 5의 염기 서열에 의해 암호화되는 아미노산 서열을 갖는 중쇄; 및 서열번호 6의 염기 서열에 의해 암호화되는 아미노산 서열을 갖는 경쇄를 포함하는, 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체.
다른 실시태양에서, 본 발명의 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체는 하기 (4) 내지 (6)으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것일 수 있다.
(4) 서열번호 7의 서열을 갖는 CDR1; 서열번호 8의 서열을 갖는 CDR2; 및 서열번호 9의 서열을 갖는 CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 10의 서열을 갖는 CDR1; 서열번호 11의 서열을 갖는 CDR2; 및 서열번호 12의 서열을 갖는 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체.
(5) 서열번호 13의 서열을 갖는 CDR1; 서열번호 14의 서열을 갖는 CDR2; 및 서열번호 15의 서열을 갖는 CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 16의 서열을 갖는 CDR1; 서열번호 17의 서열을 갖는 CDR2; 및 서열번호 18의 서열을 갖는 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체.
(6) 서열번호 19의 서열을 갖는 CDR1; 서열번호 20의 서열을 갖는 CDR2; 및 서열번호 21의 서열을 갖는 CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 22의 서열을 갖는 CDR1; 서열번호 23의 서열을 갖는 CDR2; 및 서열번호 24의 서열을 갖는 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는, 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체.
본 발명에서, 상기 항체는 단클론항체일 수 있다. 또한 상기 항체의 중쇄는 면역글로불린 G1일 수 있으며, 경쇄는 카파 타입일 수 있다.
다른 실시태양에서, 본 발명은 상기 항체를 암호화하는 핵산 및 이를 포함하는 발현 벡터를 제공한다.
또 다른 실시태양에서, 본 발명은 상기 항체를 생산하는 하이브리도마 세포주를 제공한다.
또 다른 실시태양에서, 본 발명은 상기 항체를 포함하는 니파바이러스 G 당단백질 검출용 키트를 제공한다. 바람직하게는 상기 검출용 키트는 니파바이러스 감염의 진단에 사용되는 것일 수 있다.
또 다른 실시태양에서, 본 발명은 상기 항체를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다. 바람직하게는 상기 약학적 조성물은 니파바이러스 감염의 치료에 사용되는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 신규한 항체는 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하여 니파바이러스를 효과적으로 검출할 수 있다.
본 발명의 항체는 니파바이러스 G 당단백질에 특이적 결합력을 보이며, 헨드라바이러스 G 당단백질과의 교차 반응성이 없어 니파바이러스를 정밀하게 검출할 수 있는 진단제로 활용할 수 있다.
또한 본 발명의 항체는 니파바이러스에 높은 중화능을 보여, 니파바이러스에 대한 항체 치료제로 활용될 수 있다.
도 1은 ELISA를 이용한 니파바이러스 G 단클론 항체의 항원 반응성 시험 결과이다.
도 2는 웨스턴 블랏(western blot)을 이용한 니파바이러스 G 단클론 항체의 항원 반응성 시험 결과이다.
도 3 및 4는 IgBlast를 사용하여 분석한 니파바이러스 G 단클론 항체의 CDR 서열을 나타낸 것이다.
도 5는 ELISA를 이용한 니파바이러스 G 단클론 항체의 민감도 측정 결과이다.
도 6 및 7은 니파바이러스 G 단클론 항체의 교차 반응성 평가 결과이다.
도 8은 니파바이러스 G 단클론 항체의 중화능 평가 결과이다.
도 2는 웨스턴 블랏(western blot)을 이용한 니파바이러스 G 단클론 항체의 항원 반응성 시험 결과이다.
도 3 및 4는 IgBlast를 사용하여 분석한 니파바이러스 G 단클론 항체의 CDR 서열을 나타낸 것이다.
도 5는 ELISA를 이용한 니파바이러스 G 단클론 항체의 민감도 측정 결과이다.
도 6 및 7은 니파바이러스 G 단클론 항체의 교차 반응성 평가 결과이다.
도 8은 니파바이러스 G 단클론 항체의 중화능 평가 결과이다.
이하, 첨부한 도면을 참조하여 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본원의 실시태양 및 실시예를 상세히 설명한다. 그러나 본원은 여러 가지 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시태양 및 실시예에 한정되지 않는다.
본원 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성 요소를 "포함" 한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성 요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
본 발명은 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 제공한다.
본 발명의 일 구체예로서, 상기 항체는 하기 표 1의 염기 서열에 의해 암호화되는 아미노산 서열로 이루어진 중쇄 및 경쇄를 포함하는 항체 1 내지 항체 3일 수 있다.
| 구분 | 중쇄 | 경쇄 |
| 항체 1 (1B2) |
서열번호 1 | 서열번호 2 |
| 항체 2 (3D7) |
서열번호 3 | 서열번호 4 |
| 항체 3 (7G9) |
서열번호 5 | 서열번호 6 |
또한 상기 항체는 하기 표 2의 아미노산 서열로 이루어지는 중쇄 CDR 및 경쇄 CDR을 포함하는 항체 1 내지 항체 3일 수 있다.
| 구분 | 중쇄 CDR | 경쇄 CDR | ||||
| CDR1 | CDR2 | CDR3 | CDR1 | CDR2 | CDR3 | |
| 항체 1 (1B2) |
서열번호 7 | 서열번호 8 | 서열번호 9 | 서열번호 10 | 서열번호 11 | 서열번호 12 |
| 항체 2 (3D7) |
서열번호 13 | 서열번호 14 | 서열번호 15 | 서열번호 16 | 서열번호 17 | 서열번호 18 |
| 항체 3 (7G9) |
서열번호 19 | 서열번호 20 | 서열번호 21 | 서열번호 22 | 서열번호 23 | 서열번호 24 |
본 발명에서 “항체(Antibody)”는 니파바이러스 G 당단백질과 같은 항원에 특이적으로 결합하고 인식하는 폴리펩티드를 의미한다.
본 발명에서 "항체"는 단클론항체, 다클론항체, 및 다중특이성 항체(예를 들어, 이중특이성 항체)를 모두 포함할 수 있다. 항체는 2개의 중쇄(heavy chain)와 2개의 경쇄(light chain)로 구성되며, 대상 항원의 종류에 따라 아미노산 서열이 달라지는 가변 영역(variable region)과 서열이 달라지지 않는 불변 영역(constant region)을 갖는다.
바람직하게는, 본 발명에서 상기 항체는 단클론항체일 수 있다. 가장 바람직하게는, 상기 항체는 본원에서 1B2, 3D7 또는 7G9로 지칭되는 단클론항체일 수 있다.
본원에서 사용된 용어 "단클론항체(monoclonal antibody)"는 상기 항체 분자가 단일 분자로 구성되도록 제조된 것을 의미한다. 단클론항체는 동일한 에피토프를 갖는 항원에 대해서만 반응하는 특이성을 가지며, 또한 특정 에피토프에 대해서만 친화성을 나타낸다.
본 발명의 단클론항체는 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 것일 수 있다.
발명의 일 실시태양에서, 상기 단클론항체는 하이브리도마 세포주에서 생산되는 것일 수 있다. 상기 하이브리도마 세포는 당업계에 공지된 방법을 사용하여 제조할 수 있다. 예를 들어, 상기 하이브리도마 세포는 항원 단백질을 동물에 면역시키고, 상기 피면역 동물로부터 유래된 항체 생산세포인 B 세포를 골수종세포와 융합시켜서 하이브리도마를 제조한 다음, 그 중에서 항원 단백질에 특이적으로 결합하는 단클론항체를 생산하는 하이브리도마를 선택하는 방법으로 제조할 수 있다. 상기 피면역 동물은 실시예에서 사용된 마우스뿐만 아니라 염소, 양, 모르모트, 래트 또는 토끼와 같은 동물을 사용할 수 있다.
이에 따라 본 발명은 상기 항체를 생산하는 하이브리도마 세포주를 제공한다.
항체는 2개의 전체 길이의 경쇄 및 2개의 전체 길이의 중쇄를 가지는 구조이며 각각의 경쇄는 중쇄와 다이설파이드 결합으로 연결되어 있다. 중쇄는 IgG, IgM, IgA, IgD, IgA의 타입을 가지고, 경쇄는 카파(κ) 및 람다(λ) 타입을 가진다.
본 발명의 상기 항체에서 중쇄는 IgG1이고, 경쇄는 카파 타입일 수 있다.
경쇄 및 중쇄의 가변 영역들은 "상보성 결정 부위(complementarity-determining region, CDR)"라고 하는 매우 가변적인 3개의 영역을 포함한다. CDR은 항원의 에피토프(epitope)에 결합하며, 각 체인의 CDR은 전형적으로 3개의 영역(CDR1, CDR2, 및 CDR3)을 갖는다. CDR은 각 항체에 있어 항원 특이성에서 매우 중요한 부위이며, 따라서 항체를 특정하는데 있어 가장 중요한 부분이다.
본원에서 사용된 용어 "특이적으로 결합한다" 또는 이와 같은 것은, 항체가 생리적 조건 하에서 비교적 안정한 항원과 복합체를 형성한다는 것을 의미한다. 특이적 결합은 적어도 약 1 x 10-6 M 이하의 평형 해리 상수 (예를 들어, 이보다 작은 KD는 보다 단단한 결합을 나타냄)로 특성화될 수 있다. 2 개의 분자가 특이적으로 결합하는지 여부를 결정하는 방법은 당업계에 잘 알려져 있으며, 예를 들어 평형 투석, 표면 플라스몬 공명 등을 포함한다.
본 발명의 상기 항체는 인간 항체, 인간화 항체, 또는 키메라 항체일 수 있다.
본원에서 사용된 용어 "인간 항체(human antibody)" 또는 "인간화 항체(humanized antibody)"는 인간 또는 인간 세포에 의해 생성된 항체, 또는 인간 항체 레퍼토리(repertoires) 또는 다른 인간 항체 코딩 서열을 이용하는 비인간 근원으로부터 유래된 항체의 아미노산 서열에 상응하는 아미노산 서열을 보유한다.
본원에서 사용된 용어 "키메라(chimeric) 항체"는 중쇄 및/또는 경쇄의 일부가 특정 근원(source) 또는 종(species)으로부터 유래되고, 중쇄 및/또는 경쇄의 나머지가 상이한 근원 또는 종에서 유래한 항체를 의미한다.
본 발명의 상기 항체는 니파바이러스 G 당단백질을 특이적으로 인식할 수 있는 범위 내에서 본 발명의 서열목록에 기재된 서열의 변이체를 포함할 수 있다. 예를 들면, 항체의 결합 친화도 및/또는 기타 생물학적 특성을 개선시키기 위하여 항체의 아미노산 서열에 변화를 줄 수 있다. 이러한 변형은, 예를 들어 항체의 아미노산 서열 잔기의 결실, 삽입 및/또는 치환을 포함한다.
이러한 아미노산 변이는 아미노산 곁사슬 치환체의 상대적 유사성, 예컨대, 소수성, 친수성, 전하, 크기 등에 기초하여 이루어진다. 아미노산 곁사슬 치환체의 크기, 모양 및 종류에 대한 분석에 의하여, 아르기닌, 라이신과 히스티딘은 모두 양전하를 띤 잔기이고; 알라닌, 글라이신과 세린은 유사한 크기를 가지며; 페닐알라닌, 트립토판과 타이로신은 유사한 모양을 갖는다는 것을 알 수 있다. 따라서, 이러한 고려 사항에 기초하여, 아르기닌, 라이신과 히스티딘; 알라닌, 글라이신과 세린; 그리고 페닐알라닌, 트립토판과 타이로신은 생물학적으로 기능 균등물이라 할 수 있다.
분자의 활성을 전체적으로 변경시키지 않는 단백질에서의 아미노산 교환은 당해 분야에 공지되어 있다(H.Neurath, R.L.Hill, The Proteins, Academic Press, New York, 1979). 가장 통상적으로 일어나는 교환은 아미노산 잔기 Ala/Ser, Val/Ile, Asp/Glu, Thr/Ser, Ala/Gly, Ala/Thr, Ser/Asn, Ala/Val, Ser/Gly, Thy/Phe, Ala/Pro, Lys/Arg, Asp/Asn, Leu/Ile, Leu/Val, Ala/Glu, Asp/Gly 간의 교환이다.
본 발명은 상기 항체를 암호화하는 핵산을 제공한다.
본 발명의 상기 항체를 암호화하는 본 발명의 핵산은 상기한 뉴클레오타이드 염기 서열에 대하여 실질적인 동일성을 나타내는 뉴클레오타이드 염기 서열도 포함하는 것으로 해석된다. 상기의 실질적인 동일성은, 상기한 본 발명의 염기 서열과 임의의 다른 서열을 최대한 대응되도록 얼라인하고, 당업계에서 통상적으로 이용되는 알고리즘을 이용하여 얼라인된 서열을 분석한 경우에, 최소 80%의 상동성, 보다 바람직하게는 최소 90%의 상동성, 가장 바람직하게는 최소 95%의 상동성을 나타내는 염기 서열을 의미한다. 서열비교를 위한 얼라인먼트 방법은 당업계에 공지되어 있다. 얼라인먼트에 대한 다양한 방법 및 알고리즘은 문헌 [Smith and Waterman, Adv. Appl.Math. 2:482(1981)]; [Needleman and Wunsch, J. Mol. Bio. 48:443(1970)]; [Pearson and Lipman, Methods inMol. Biol. 24: 307-31(1988)]; [Higgins and Sharp, Gene 73:237-44(1988)]; [Higgins and Sharp, CABIOS 5:151-3(1989)]; [Corpet et al., Nuc. Acids Res. 16:10881-90(1988)]; [Huang et al., Comp. Appl. BioSci. 8:155-65(1992)] 및 [Pearson et al., Meth. Mol. Biol. 24:307-31(1994)] 등에 개시되어 있다. NCBI Basic Local Alignment Search Tool(BLAST)(Altschul et al., J. Mol. Biol. 215:403-10(1990))은 NBCI(National Center for Biological Information) 등에서 접근 가능하며, 인터넷 상에서 blastp, blastn, blastx, tblastn 및 tblastx와 같은 서열 분석 프로그램과 연동되어 이용할 수 있다. BLAST는 ncbi 웹사이트의 BLAST 페이지를 통하여 접속 가능하다. 이 프로그램을 이용한 서열 상동성 비교 방법은 ncbi 웹사이트의 BLAST help 페이지에서 확인할 수 있다.
본 발명은 또한 상기 핵산을 포함하는 발현 벡터를 제공한다.
본 명세서에서 용어 "발현 벡터"는 숙주 세포에서 목적 유전자를 발현시키기 위하여, 발현시킬 뉴클레오타이드 염기 서열에 작동가능하게 연결된 발현 제어 서열을 포함하는 재조합 뉴클레오타이드를 포함하는 벡터를 지칭한다. 발현 벡터는 발현을 위한 충분한 시스 작용 인자(cis-acting element)를 포함하고, 발현을 위한 다른 요소는 숙주 세포 또는 시험관 내 발현 시스템에 의해 제공될 수 있다. 상기 발현 벡터는 재조합 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 플라스미드 벡터; 코즈미드 벡터; 그리고 박테리오파아지 벡터, 아데노바이러스 벡터, 렌티바이러스, 레트로 바이러스 벡터 및 아데노-연관 바이러스 벡터 같은 바이러스 벡터를 포함한다.
본원에서 사용된 용어 "클론(clone)”은 동일한 복제물을 의미하는 것으로, 동일한 세포집단 또는 특정 유전자 절편의 동일한 복제물을 뜻한다.
본 발명은 또한 상기 항체를 포함하는 니파바이러스 G 당단백질 검출용 키트를 제공한다.
본 발명의 니파바이러스 G 당단백질 검출용 키트에는 검사대상시료를 채취 또는 검출 시약을 적용하기 위한 도구, 항원-항체 결합을 확인하기 위한 시약 또는 장치 등 항체를 사용하여 생물학적 시료로부터 항원 단백질의 존재 유무를 확인하는 통상의 검출 또는 진단 키트에 포함될 수 있는 도구, 장치 또는 시약이 더 포함될 수 있다.
바람직하게는 상기 검출용 키트는 니파바이러스 감염의 진단에 사용되는 것일 수 있다. 이러한 면역분석은 종래에 개발된 다양한 면역분석(immunoassay) 또는 면역염색(immunostaining) 프로토콜에 따라 실시될 수 있다. 상기 면역분석 또는 면역염색 포맷은, 예를 들어, 방사능면역분석, 방사능면역침전, 면역침전, 효소결합면역측정법(ELISA), 유세포 분석(flow cytometry), 면역형광염색 면역친화성 정제, 면역 크로마토그래피(immunochromatography) 등을 포함할 수 있다.
상기 검사대상시료는 개체로부터 유래된 생물학적 물질일 수 있다. 상기 개체는 척추동물일 수 있다. 상기 척추동물은 포유동물, 바람직하게는 인간일 수 있다. 상기 시료는 개체로부터 채취되거나 분리된 것, 예를 들어, 혈액 또는 혈액 구성성분(blood constituent), 체액(bodily fluid), 타액, 가래, 또는 이들의 조합일 수 있다.
본 발명은 상기 항체를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다. 바람직하게는 상기 약학적 조성물은 니파바이러스 감염의 치료에 사용되는 것일 수 있다.
일 실시태양에서 상기 약학적 조성물에 약제학적으로 허용 가능한 통상의 첨가제, 예를 들어 부형제, 결합제, 붕해제, 활택제, 가용화제, 현탁화제, 보존제 또는 증량제 등이 더 포함될 수 있다.
일 실시태양에서 상기 약학적 조성물의 제형은 분말, 과립, 정제, 환제, 당의정제, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제, 슬러리제, 현탁액, 및 주사제로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
이하 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 하나, 하기의 실시예는 단지 설명의 목적을 위한 것이며 본원 발명의 범위를 한정하고자 하는 것은 아니다.
[실시예 1] 니파바이러스 G 당단백질에 대한 단클론 항체의 제작
다음과 같이 니파바이러스 G 당단백질에 대한 단클론 항체를 제작하였다. 마우스 면역 연구 및 모든 관련 실험 절차는 건국 대학교 (IACUC No. KU18053)의 Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC)의 승인을 받아 수행되었다.
5주령 암컷 BALB/c 마우스에 2주 간격으로 니파바이러스 G 당단백질을 복강 내 주사하여 면역화 시키고, 4일의 최종 부스팅 후에 마우스를 희생하여 비장을 적출하였다. 적출한 비장을 40 μm 세포 스트레이너(cell strainers) (BD, NJ, USA)를 이용하여 단일 세포로 단리하였다. 단리된 비장 세포 및 마우스 골수종 세포 SP2/0를 표준 프로토콜에 따라 1ml 폴리에틸렌 글리콜 1500 (Roche Applied Science, Penzberg, Germany)과 함께 1.5 : 1의 비율로 융합시켜 하이브리도마(hybridoma) 세포를 제작하였다. 1.03x108 개의 하이브리도마 세포를 flat-bottomed 96-well plate (SPL, 한국 포천시)에 시딩(seeding)하고 20 % FBS 및 1 % P/S를 함유하는 DMEM에서 성장시켰다. 1x HAT 배지 보충제 Hybri-Max (Sigma-Aldrich, MO, USA)가 보충된 성장 배양 배지에서 하이브리도마 세포의 스크리닝을 수행하였다. 세포 배양 상청액을 수거하여 니파바이러스 G 당단백질에 대한 반응성을 간접 효소-결합 면역 흡착 분석법(indirect ELISA)을 통해 분석하였다. 선택된 하이브리도마 세포는 한계희석법(limiting dilution Method)을 통해 단일 클론으로 단리하였고, 20 % FBS, 1 % P/S 및 1x HT 배지 보충제 Hybri-Max (Sigma-Aldrich, MO, USA)를 함유하는 DMEM에서 클론 확대(clonal expansion)를 수행하였다.
그 결과 6 종류의 하이브리도마 클론(1B2, 3D7, 4A6, 7G9, 9E3 및 10H9)이 생성되었으며, 이를 배양하여 단클론 항체 1B2, 3D7, 4A6, 7G9, 9E3 및 10H9를 획득하였다.
[실시예 2] 니파바이러스 G 당단백질에 대한 단클론 항체의 항원 반응성
효소-결합 면역 흡착 분석법(ELISA) 및 웨스턴 블랏(western blot) 분석법을 이용하여 실시예 1에 따라 제작한 단클론 항체 각각의 항원 반응성을 분석하였다.
ELISA를 이용한 항원 반응성 시험 및 항체 후보 선정
실시예 1에 따라 제작한 6종류의 하이브리도마 클론(1B2, 3D7, 4A6, 7G9, 9E3 및 10H9)의 니파바이러스 G 당단백질에 대한 항원 반응성을 ELISA를 이용하여 분석하였다.
니파바이러스 G 특이적 항체 반응의 검출을 위해, Nunc-immuno™ 96-well plate (Thermo Fisher Scientific, MA, USA)를 탄산염-중탄산염 완충액(Carbonate-Bicarbonate Buffer; Sigma- Aldrich, MO, USA)하에서 니파바이러스 G 당단백질 30 ng /well로 4 ℃에서 밤새 코팅하였다. 37 ℃에서 1시간 동안 2 % 소 혈청 알부민 (bovine serum albumin, BSA; MP Biomedicals, CA, USA)으로 blocking한 후, 플레이트(plate)를 150 μl PBS + 0.05 % Tween-20 (PBS-T)으로 3회 세척하였다. 실시예 1에 따라 제작한 각각의 하이브리도마 클론을 함유하는 세포 배양 상청액을 1X PBS에서 3배 단계 희석하고, 희석된 상청액 50 μl을 각 웰(well)에 첨가하였다. 실온에서 2시간 동안 보관한 후, 반응 혼합물을 50 μl horseradish peroxidase-conjugated (HRP) 염소 항-마우스 IgG (1 : 10,000; Abcam, Cambridge, UK)와 함께 37 ℃에서 1시간 동안 배양하였다. 세척 후, 50 μl의 TMB 퍼옥시다제 ELISA EIA 기질 (Thermo Fisher Scientific, MA, USA)을 각 웰에 첨가하고 플레이트를 2-3분 동안 포일(foil)로 덮었다. 1N H2SO4 (50 μl/well)로 켄칭(quench)하고, 마이크로플레이트 분광 광도계 (microplate spectrophotometer; BioTek Epoch, VT, USA)를 사용하여 450 nm에서 광학 밀도(optical density, OD)를 측정하였다.
그 결과, 도 1에 나타난 바와 같이 4개의 하이브리도마 클론 1B2, 3D7, 4A6 및 7G9은 니파바이러스 G 당단백질과 유의하게 반응하였으며, 2개의 클론 9E3 및 10H9은 세포 배양 배지와 동등한 기초 항원 반응성만을 나타내었다. 따라서 4개의 하이브리도마 클론 1B2, 3D7, 4A6 및 7G9을 단클론 항체 후보로 선택하였다.
웨스턴 블랏(western blot)을 이용한 항원 반응성 시험
선별된 단클론 항체들의 항원 반응성을 다음과 같이 웨스턴 블랏(western blot) 분석을 통해 확인하였다.
니파바이러스 G 당단백질 10 ng을 10 % sodium dodecyl sulfateepolyacrylamide (SDS) 겔(gel)의 각 웰(well)에 로딩하여 전기영동(sodium dodecyl sulfateepolyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)을 실시하고, 이를 blocking 용액 (5 % 탈지유)으로 처리된 니트로셀룰로스 막(nitrocellulose membrane)에 블로팅하였다. 여러 번 세척한 후에, 선별한 단클론 항체 클론(1B2, 3D7, 4A6 및 7G9)을 니트로셀룰로스 막과 반응시켰다. enhanced chemiluminescence system을 사용하여 HRP가 접합된 항-마우스 IgG를 통해 니파바이러스 G 당단백질을 검출하고, 추가로 X-선 필름에 노출시켰다.
도 2에 나타난 바와 같이 1B2 및 7G9 클론은 3D7 및 4A6 클론보다 더 강한 니파바이러스 G 당단백질과의 결합능을 나타냈다.
[실시예 3] 단클론 항체의 서열 및 isotype 분석
선별된 단클론 항체의 상보성 결정부위(complementary determining regions, CDR) 서열을 IgBlast (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/igblast/)를 사용하여 분석하였다.
단클론 항체 각각의 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열을 도 3 및 도 4에 나타내었다. 각 클론의 특이적 아미노산 서열은 사각형 테두리로 표시하였다. 3D7 클론과 4A6 클론은 중쇄 및 경쇄 모두에서 동일한 아미노산 서열을 나타내어, 이후 실험에서는 두 클론을 동일하다고 보고, 이를 3D7로 지칭하였다.
또한 rapid ELISA Mouse mAb Isotyping kit (Thermo Scientific, MA, USA)를 통해 각 단클론 항체의 isotype을 분석한 결과, 모든 단클론 항체의 isotype은 IgG1 kappa임이 확인되었다.
[실시예 4] ELISA를 이용한 단클론 항체의 민감도 분석
선별된 단클론 항체의 항원 결합 민감도를 ELISA를 이용하여 분석하였다.
96-well plate를 니파바이러스 G 당단백질로 코팅하고, 3배씩 단계 희석한 단클론 항체 클론(1B2, 3D7 및 7G9)과 함께 배양하였다. 그 후, HRP가 접합된 항 마우스 IgG와 반응시켜 개별 클론의 항원 반응성을 검사하였다. 정상 마우스 혈청을 음성 대조군으로 사용하였다.
도 5에 나타난 바와 같이 7G9, 3D7, 1B2 순으로 높은 민감도를 보였으며, 3개의 단클론 항체 모두의 항원 반응성은 희석 배수 증가에 따라 감소하였다. 정상 마우스 혈청은 항원 반응성을 나타내지 않았다.
[실시예 5] 니파바이러스 G 당단백질에 대한 단클론 항체의 교차 반응성 분석
선별된 단클론 항체의 다른 항원과의 교차 반응성 평가를 위해 다음과 같은 실험을 수행하였다.
ELISA를 이용한 항원 교차 반응 분석
실시예 2에 따라 결합능이 높고, 실시예 4에 따라 민감도가 가장 높게 나타난 7G9 단클론 항체의 교차 반응성을 ELISA를 이용하여 분석하였다.
Nunc-immuno™ 96-well plate (Thermo Fisher Scientific, MA, USA)를 탄산염-중탄산염 완충액(Carbonate-Bicarbonate Buffer; Sigma- Aldrich, MO, USA)하에서 니파바이러스 G 또는 헨드라바이러스 G 당단백질로 4 ℃에서 밤새 코팅하였다. 37 ℃에서 1시간 동안 2 % 소 혈청 알부민 (bovine serum albumin, BSA; MP Biomedicals, CA, USA)으로 blocking한 후, 플레이트(plate)를 150 μl PBS + 0.05 % Tween-20 (PBS-T)으로 3회 세척하였다. 실시예 1에 따라 제작한 단클론 항체 7G9을 1X PBS에서 3배 단계 희석하고, 희석된 상청액 50 μl을 각 웰(well)에 첨가하였다. 실온에서 2시간 동안 보관한 후, 반응 혼합물을 50 μl horseradish peroxidase-conjugated (HRP) 염소 항-마우스 IgG (1 : 10,000; Abcam, Cambridge, UK)와 함께 37 ℃에서 1시간 동안 배양하였다. 세척 후, 50 μl의 TMB 퍼옥시다제 ELISA EIA 기질 (Thermo Fisher Scientific, MA, USA)을 각 웰에 첨가하고 플레이트를 2-3분 동안 포일(foil)로 덮었다. 1N H2SO4 (50 μl/well)로 켄칭(quench)하고, 마이크로플레이트 분광 광도계 (microplate spectrophotometer; BioTek Epoch, VT, USA)를 사용하여 450 nm에서 광학 밀도(optical density, OD)를 측정하였다.
도 6에 나타난 바와 같이 단클론 항체 7G9은 헨드라바이러스 G 당단백질이 아닌 니파바이러스 G 당단백질과만 특이적으로 반응하였으며, 농도가 낮아질수록 결합능 또한 감소하였다. 이를 통해 단클론 항체 7G9는 헨드라바이러스에 대하여 교차 반응성이 없음을 확인하였다.
웨스턴 블랏을 이용한 항원 교차 반응 분석
니파바이러스 또는 헨드로바이러스의 G 또는 F 단백질을 10 % sodium dodecyl sulfateepolyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE)을 통해 분리하고, 이를 blocking 용액 (5 % 탈지유)으로 처리된 니트로셀룰로스 막에 블로팅하였다. 여러 번 세척한 후에, 단클론 항체 클론 (1B2, 3D7, 7G9)을 니트로셀룰로스 막과 반응시켰다. enhanced chemiluminescence system을 사용하여 HRP가 접합된 항-마우스 IgG를 통해 단백질을 검출하고, 추가로 X-ray 필름에 노출시켰다.
도 7에 나타난 바와 같이 모든 단클론 항체가 니파바이러스 G 당단백질 이외의 니파바이러스 F 단백질, 헨드라바이러스 G 당단백질 및 헨드라바이러스 F 단백질에 대하여 교차 반응을 나타내지 않았다.
이를 통해, 선별된 1B2, 3D7, 7G9 클론 모두가 니파바이러스 G 당단백질에 대해 특이적이며 교차 반응성이 없음을 확인하였다.
[실시예 6] 니파바이러스 G 당단백질에 대한 단클론 항체의 중화능 평가
단클론 항체 클론의 배양액(1B2, 3D7 및 7G9)을 1:10, 1:20 및 1:40으로 희석한 후, 이를 Luciferase를 발현할 수 있는 재조합 니파바이러스 슈도바이러스와 반응시켜 각 항체의 중화능을 평가하였다.
Luciferase assay를 통하여, 음성 대조군(정상 마우스 혈청)과 상대 비교하여 중화능(%)은 (음성대조군의 light unit-항체 처리한 군의 light unit) / 음성대조군의 Luciferase unit*100 으로 계산하였다.
그 결과, 도 8에 나타난 바와 같이 1B2, 3D7 및 7G9 모두 니파바이러스 G 당단백질에 대하여 농도의존적인 중화능을 나타냈으므로, 상기 항체들은 니파바이러스 감염의 치료에 효과적인 것을 알 수 있었다.
<110> Konkuk University Industrial Cooperation Corp
Korea Center for Disease Control and Prevention
<120> MONOCLONAL ANTIBODY SPECIFIC FOR NIPAH VIRUS G GLYCOPROTEINS AND
ITS USE
<130> KCD19P-0006-KR
<160> 24
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 327
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IgG1 of 1B2
<400> 1
gggggaggct tagtgaagcc tggagggtcc ctgaaactct cctgtgcagc ctctggattc 60
actttcagta attatgccat gtcttggttt cgccagtctc cagagaagag gctggagtgg 120
gtcgcagaaa ttagtagtgg tggtagttac acctactatc cagacactgt gacgggccga 180
ttcaccatct ccagagacaa tgccaagaac accctgtacc tggaaatgaa cagtctgagg 240
tctgaggaca cggccatgta ttactgtgca agggatgggg actggggcca agggactctg 300
gtcactgtct ctgcagccaa aacgaca 327
<210> 2
<211> 329
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> kappa of 1B2
<400> 2
cactctccct gcctgtcagt cttggagatc aagcctccat ctcttgcaga tctagtcaga 60
gcattgtata taataatgga aacacctatt tagaatggta cctgcagaaa ccaggccagt 120
ctccaaagct cctgatctac aaagtttcca accgattttc tggggtccca gacaggttca 180
gtggcagtgg atcagggaca gatttcacac tcaagatcag cagagtggag gctgaggatc 240
tgggagttta ttactgcttt caaggttcac atgttccgta cacgttcgga ggggggacca 300
agctggaaat aaaacgggct gatgctgca 329
<210> 3
<211> 342
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IgG1 of 3D7
<400> 3
ctggagctgt actggtaagg cctgggactt cagtgagggt gtcctgcaag gcttctggat 60
acgccttcac taattacttg atagagtggg taaaacagag gcctggacag ggccttgagt 120
ggattggagt gattaatcct ggaagtggtg gttctaacta caatgagaag ttcaaggaca 180
aggcaacact gactgcagac aaatcctcca gcactgccta catacacctc agcagcctga 240
catctgatga ctctgcggtc tatttctgtg caagagaggg ctactatgat gttatggact 300
actggggtca aggaacctca gtcaccgtct cctcagccaa aa 342
<210> 4
<211> 335
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> kappa of 3D7
<400> 4
agtctccact ctccctgcct gtcagtcttg gagatcaagc ctccatctct tgcagatcta 60
gtcagagcat tgtacatagt aatggaatca cctatttaga atggtacctg cagaaaccag 120
gccagtctcc aaagctcctg atctacaaag tttcctaccg attttctggg gtcccagaca 180
ggttcagtgg cagtggatca gggacagatt tcacactcaa gatcagcaga gtggaggctg 240
aggatctggg agtttattac tgctttcaag gttcacatgt tccgtggacg ttcggtggag 300
gcaccaagct ggaaatcaaa cgggctgatg ctgca 335
<210> 5
<211> 357
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IgG1 of 7G9
<400> 5
gggggtgtcg ttttggctga ggagaccgtg agagtggtgc cttggcccca atagtcaaag 60
gagctaccat agaagttctc tcttgtacaa taatagaccg cagagtcttc agatgtcagg 120
ctgttgaagt gtatgtaggc tgtgctggag gatgtgtcta cagtaaatgt ggccttgccc 180
ttgaacttct ggctgtaact agtagcacca ttgtaacaac taatatatcc aatccactca 240
aggctctttc catggctctg tttgacccag tgcatgtagt aaccaatgaa tgagtaacca 300
gaagccttgc aggatatctt cactgaagac ccagtcttca ctagctcagg tcctgac 357
<210> 6
<211> 324
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> kappa of 7G9
<400> 6
tgcagcatca gcccgtttga tttccagctt ggtgcctcca ccgaacgtcg gaggaagttc 60
tagattttga acacagtaat aaacacccac atcctcagcc tccactctgc tgattctcag 120
tgtgaaatca gttcctgacc cactgctact gaacctgtct gggactcctg aggcaaggtt 180
ggacatctga taaatcagga gctgaggaga ctggcctgtc ttctgcagat accaatacaa 240
ataagtgatg ccattactat gtaggagact cttactagac ctgcaggaga tggaagctga 300
tgttccaaga gtgactggat tgga 324
<210> 7
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDRH1 of 1B2
<400> 7
Asn Tyr Ala Met Ser Trp
1 5
<210> 8
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDRH2 of 1B2
<400> 8
Glu Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Val Thr
1 5 10 15
Gly
<210> 9
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDRH3 of 1B2
<400> 9
Asp Gly Asp
1
<210> 10
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDRL1 of 1B2
<400> 10
Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val Tyr Asn Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu
1 5 10 15
<210> 11
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDRL2 of 1B2
<400> 11
Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser
1 5
<210> 12
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDRL3 of 1B2
<400> 12
Phe Gln Gly Ser His Val Pro Tyr Thr
1 5
<210> 13
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDRH1 of 3D7
<400> 13
Asn Tyr Leu Ile Glu
1 5
<210> 14
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDRH2 of 3D7
<400> 14
Val Ile Asn Pro Gly Ser Gly Gly Ser Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys
1 5 10 15
Asp
<210> 15
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDRH3 of 3D7
<400> 15
Glu Gly Tyr Tyr Asp Val Met Asp Tyr
1 5
<210> 16
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDRL1 of 3D7
<400> 16
Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Gly Ile Thr Tyr Leu Glu
1 5 10 15
<210> 17
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDRL2 of 3D7
<400> 17
Lys Val Ser Tyr Arg Phe Ser
1 5
<210> 18
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDRL3 of 3D7
<400> 18
Phe Gln Gly Ser His Val Pro Trp Thr
1 5
<210> 19
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDRH1 of 7G9
<400> 19
Gly Tyr Tyr Met His
1 5
<210> 20
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDRH2 of 7G9
<400> 20
Tyr Ile Ser Cys Tyr Asn Gly Ala Thr Ser Tyr Ser Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 21
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDRH3 of 7G9
<400> 21
Glu Asn Phe Tyr Gly Ser Ser Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 22
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDRL1 of 7G9
<400> 22
Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr
1 5 10 15
<210> 23
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDRL2 of 7G9
<400> 23
Gln Met Ser Asn Leu Ala Ser
1 5
<210> 24
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDRL3 of 7G9
<400> 24
Val Gln Asn Leu Glu Leu Pro Pro Thr
1 5
Claims (16)
- 서열번호 1의 염기 서열에 의해 암호화되는 아미노산 서열을 갖는 중쇄; 및
서열번호 2의 염기 서열에 의해 암호화되는 아미노산 서열을 갖는 경쇄
를 포함하는, 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체.
- 서열번호 3의 염기 서열에 의해 암호화되는 아미노산 서열을 갖는 중쇄; 및
서열번호 4의 염기 서열에 의해 암호화되는 아미노산 서열을 갖는 경쇄
를 포함하는, 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체.
- 서열번호 5의 염기 서열에 의해 암호화되는 아미노산 서열을 갖는 중쇄; 및
서열번호 6의 염기 서열에 의해 암호화되는 아미노산 서열을 갖는 경쇄
를 포함하는, 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체.
- 서열번호 7의 서열을 갖는 CDR1; 서열번호 8의 서열을 갖는 CDR2; 및 서열번호 9의 서열을 갖는 CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
서열번호 10의 서열을 갖는 CDR1; 서열번호 11의 서열을 갖는 CDR2; 및 서열번호 12의 서열을 갖는 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
을 포함하는, 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체.
- 서열번호 13의 서열을 갖는 CDR1; 서열번호 14의 서열을 갖는 CDR2; 및 서열번호 15의 서열을 갖는 CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
서열번호 16의 서열을 갖는 CDR1; 서열번호 17의 서열을 갖는 CDR2; 및 서열번호 18의 서열을 갖는 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
을 포함하는, 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체.
- 서열번호 19의 서열을 갖는 CDR1; 서열번호 20의 서열을 갖는 CDR2; 및 서열번호 21의 서열을 갖는 CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
서열번호 22의 서열을 갖는 CDR1; 서열번호 23의 서열을 갖는 CDR2; 및 서열번호 24의 서열을 갖는 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
을 포함하는, 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체.
- 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 단클론항체인 것을 특징으로 하는, 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체.
- 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체의 중쇄는 면역글로불린 G1(IgG1)인 것을 특징으로 하는, 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체.
- 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체의 경쇄는 카파 타입인 것을 특징으로 하는, 니파바이러스 G 당단백질에 특이적으로 결합하는 항체.
- 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 항체를 암호화하는 핵산.
- 제10항의 핵산을 포함하는 발현 벡터.
- 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 항체를 생산하는 하이브리도마 세포주.
- 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 항체를 포함하는, 니파바이러스 G 당단백질 검출용 키트.
- 제13항에 있어서, 니파바이러스 감염 진단에 사용되는 것을 특징으로 하는, 니파바이러스 G 당단백질 검출용 키트.
- 삭제
- 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 항체를 포함하는, 니파바이러스 감염 치료용 약학적 조성물.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020200006675A KR102264873B1 (ko) | 2020-01-17 | 2020-01-17 | 니파바이러스 g 당단백질에 특이적인 단클론 항체 및 이의 용도 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020200006675A KR102264873B1 (ko) | 2020-01-17 | 2020-01-17 | 니파바이러스 g 당단백질에 특이적인 단클론 항체 및 이의 용도 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR102264873B1 true KR102264873B1 (ko) | 2021-06-14 |
Family
ID=76417302
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020200006675A KR102264873B1 (ko) | 2020-01-17 | 2020-01-17 | 니파바이러스 g 당단백질에 특이적인 단클론 항체 및 이의 용도 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR102264873B1 (ko) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2022270656A1 (ko) * | 2021-06-24 | 2022-12-29 | 진철 | 금 나노입자를 유효성분으로 포함하는 니파 바이러스의 예방 또는 치료용 조성물 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2336174A2 (en) | 2005-03-14 | 2011-06-22 | THE GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA as represented by the SECRETARY OF THE DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES | Human monoclonal antibodies against Hendra and Nipah viruses |
| US20160272697A2 (en) | 2011-04-28 | 2016-09-22 | The Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine, Inc. | Neutralizing Antibodies to Nipah and Hendra Virus |
| KR20160127736A (ko) * | 2014-01-24 | 2016-11-04 | 더 헨리 엠. 잭슨 파운데이션 포 더 어드벤스먼트 오브 밀리터리 메디신, 인코포레이티드 | 헨드라 및 니파 바이러스의 f 당단백질에 대한 항체 |
-
2020
- 2020-01-17 KR KR1020200006675A patent/KR102264873B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2336174A2 (en) | 2005-03-14 | 2011-06-22 | THE GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA as represented by the SECRETARY OF THE DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES | Human monoclonal antibodies against Hendra and Nipah viruses |
| US20160272697A2 (en) | 2011-04-28 | 2016-09-22 | The Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine, Inc. | Neutralizing Antibodies to Nipah and Hendra Virus |
| KR20160127736A (ko) * | 2014-01-24 | 2016-11-04 | 더 헨리 엠. 잭슨 파운데이션 포 더 어드벤스먼트 오브 밀리터리 메디신, 인코포레이티드 | 헨드라 및 니파 바이러스의 f 당단백질에 대한 항체 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| PLOS PATHOG,2013, VOL. 9(10): E1003684 * |
| PNAS, DECEMBER 10, 2019, VOL. 116, NO. 50, P. 25057-25067 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2022270656A1 (ko) * | 2021-06-24 | 2022-12-29 | 진철 | 금 나노입자를 유효성분으로 포함하는 니파 바이러스의 예방 또는 치료용 조성물 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106432484B (zh) | 人类免疫缺陷病毒中和抗体及其使用方法 | |
| JP6979875B2 (ja) | チクングニヤウイルスの抗体媒介性中和 | |
| US9902765B2 (en) | Antibodies against chikungunya virus and uses thereof | |
| CN113388030B (zh) | 单克隆抗体32c7及其制备方法和用途 | |
| EP4291226A1 (en) | Antibodies targeting the spike protein of coronaviruses | |
| WO2021211963A1 (en) | Anti-sars-cov-2 monoclonal antibodies | |
| JP2022516039A (ja) | 抗ｃｄ１９抗体のモノクローナル抗体及びその使用 | |
| CN113416245A (zh) | 一种可结合SARS-CoV-2病毒RBD蛋白的中和抗体及其应用 | |
| KR102264873B1 (ko) | 니파바이러스 g 당단백질에 특이적인 단클론 항체 및 이의 용도 | |
| AU2015239606C1 (en) | Antibodies against HPA-1a | |
| CN106866820A (zh) | 一种用于捕获肿瘤细胞的抗人角蛋白18的单克隆抗体及其应用 | |
| KR20220054080A (ko) | SARS-CoV-2 스파이크 단백질에 특이적으로 결합하는 항체 및 이의 용도 | |
| KR20070103548A (ko) | 사스 코로나바이러스 뉴클레오캡시드 단백질에 대한 단클론항체 및 이것의 용도 | |
| KR102078879B1 (ko) | 돼지파보바이러스에 특이적인 단일클론항체 및 이의 용도 | |
| KR20230039786A (ko) | 코로나바이러스 뉴클레오캡시드 단백질 c-말단 부위에 특이적인 항체 및 이의 용도 | |
| EP4238988A1 (en) | Antibodies against sars-cov-2 and uses thereof | |
| WO2022238481A1 (en) | Antibodies | |
| WO2021065846A1 (ja) | 抗ＨＩＶ－１ Ｖ３抗体１Ｃ１０（０．５γ）に結合する抗体及びその抗原結合断片並びにその応用 | |
| CN114040924A (zh) | 对lif具有特异性的结合分子及其用途 | |
| KR20070103547A (ko) | 사스 코로나바이러스 뉴클레오캡시드 단백질에 대한 단클론항체 및 이것의 용도 | |
| US20240182551A1 (en) | Cross-reactive monoclonal antibodies against coronaviruses | |
| WO2021107725A1 (ko) | Cobll1 단백질 특이 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 및 이의 용도 | |
| EP4385999A1 (en) | Antibodies | |
| EP4088782A1 (en) | Antibodies | |
| KR102051052B1 (ko) | 메르스 코로나바이러스 단백질에 특이적인 단클론 항체 및 그 용도 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant |