KR102233749B1 - 몰로키아 추출물을 포함하는 장내 염증 또는 장누수증후군 개선, 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

몰로키아 추출물을 포함하는 장내 염증 또는 장누수증후군 개선, 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 염증성 장질환 또는 장누수증후군 개선, 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 몰로키아 추출물을 유효성분으로 함유하는 염증성 장질환 또는 장누수증후군 개선, 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.

Description

몰로키아 추출물을 포함하는 장내 염증 또는 장누수증후군 개선, 예방 또는 치료용 조성물{Composition for improvementing, preventing or treating intestinal inflammation or leaky gut syndrome comprising fractions or extract of molokhia leave}
본 발명은 염증성 장질환 또는 장누수증후군 개선, 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 몰로키아 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 염증성 장질환 또는 장누수증후군 예방, 개선 또는 치료를 위한 기능성 식품 및 약제 등에 유용하게 이용될 수 있다.
인체의 장관은 음식물의 소화, 흡수, 배설이라는 기본적인 기능 이외에 장관 점막이 관내 미생물이나 이들의 부산물, 항원, 독소 등의 혈류로의 유입을 차단하는 방어벽으로서의 면역학적 기능을 수행하고 있다. 즉, 장점막은 외부 물질을 차단하는 장벽인 동시에 이들을 통과, 흡수시키는 이중적인 기능을 갖는다.
이러한 장관 기능에 문제가 생기면 그 자체로 인체의 영양공급에 문제가 생길뿐만 아니라, 반복되는 변비, 설사, 복통 등의 증상이 일상생활을 크게 방해하기 때문에 장 건강은 매우 중요하다.
염증성 장질환은 장에 만성적으로 염증이 생기는 병으로 발병원인과 완치방법은 아직까지 알려져 있지 않다. 일반적으로 크론병과 궤양성 대장염을 가르키는데, 크론병과 궤양성 대장염은 설사나 복통, 메스꺼움, 발열, 식욕부진, 체중 감소, 피로감 등의 증상을 보일 수 있다. 크론병은 주로 소장과 대장에서 많이 발생하지만, 궤양성 대장염은 대장에서만 발명한다. 이외에 우리나라에 비교적 흔한 장형 베체트병도 이에 속한다.
이러한 염증성 장질환을 치료하기 위하여 사용되는 약물로는 스테로이드성 면역억제제, 프로스타글란딘 (prostaglandins)의 생성을 차단하는 5-아미노살리실산 (5-aminosalicylic acid; 5-ASA) 계통 약물 (예, 설파살라진 등), 메살라진 등이 사용되고 있는데, 이들은 염증성 장질환의 치료효과가 미미할 뿐만 아니라 복부허실 (fullness), 두통, 발진, 간질환, 백혈구 감소증, 무과립구증, 남성 불임 등의 심각한 부작용을 유발하기 때문에, 상기 치료제의 사용이 제한되고 있다.
따라서, 부작용을 유발하지 않는 염증성 장질환 치료제를 개발할 수 있다면, 보다 안전하면서도 효과적으로 염증성 장질환 환자들을 치료할 수 있을 것으로 예상되고 있으나, 아직까지는 부작용이 없는 치료제가 개발되지 못하고 있는 실정이다
이러한 배경하에서, 본 발명자들은 부작용을 유발하지 않는 천연물로부터 유래된 염증성 장질환 치료제를 개발하기 위하여 예의 노력한 결과, 몰로키아 추출물을 포함하는 조성물이 염증성 장질환뿐만 아니라 장누수증후군의 치료에 효과가 있고, 장관 면역기능을 증진시킴을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
대한민국 등록특허공보 제10-1926263호
본 발명의 목적은 몰로키아 추출물을 유효성분으로 하는 염증성 장질환 또는 장누수증후군 개선 또는 예방용 식품 조성물을 제공하는데 있다.
본 발명의 다른 목적은 몰로키아 추출물을 유효성분으로 하는 염증성 장질환 또는 장누수증후군 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는데 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 몰로키아 추출물을 유효성분으로 하는 염증성 장질환 또는 장누수증후군 개선 또는 예방용 식품 조성물을 제공한다.
상기 몰로키아 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4개의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출된 것일 수 있다.
상기 조성물은 면역 활성을 증가시키고, 염증 반응을 억제하며, 염증 세포의 활성화를 감소시키는 것일 수 있다.
상기 조성물은 IgA 발현을 증진시키고, IL-6의 발현과 LTB4 발현을 억제 또는 감소시키는 것일 수 있다.
상기 염증성 장질환은 크론병, 궤양성 대장염, 장형 베체트병, 감염성 장염, 허혈성 장질환 및 방사선 장염으로 이루어진 군에서 선택되는 질환일 수 있다.
상기 장누수증후군은 고지방 식이에 의해 유도된 것일 수 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 몰로키아 추출물을 유효성분으로 하는 염증성 장질환 또는 장누수증후군 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 몰로키아 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4개의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출된 것일 수 있다.
상기 조성물은 면역 활성을 증가시키고, 염증 반응을 억제하며, 염증 세포의 활성화를 감소시키는 것일 수 있다.
상기 조성물은 IgA 발현을 증진시키고, IL-6의 발현과 LTB4 발현을 억제 또는 감소시키는 것일 수 있다.
상기 염증성 장질환은 크론병, 궤양성 대장염, 장형 베체트병, 감염성 장염, 허혈성 장질환 및 방사선 장염으로 이루어진 군에서 선택되는 질환일 수 있다.
상기 장누수증후군은 고지방 식이에 의해 유도된 것일 수 있다.
본 발명의 조성물은 몰로키아 추출물을 포함하는 것으로써, 염증을 억제하고 면역을 활성화시켜 염증성 장질환을 개선, 예방 또는 치료할 수 있다. 또한 본 발명의 조성물은 장내 투과성을 강화하여 장누수증후군을 개선, 예방 또는 치료하는 효과를 갖는다.
도 1은 몰로키아 각 부위별 추출물(실시예 1, 비교예 1, 2)를 각각 처리한 RAW 264.7 세포에서의 NO 농도를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 2는 정상 사료군(NC), 양성 대조군(GC), 제1실험군(WEML50) 및 제2실험군(WEML100)에 대한 혈청 내 IgA의 농도를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 3은 정상 사료군(NC), 고지방 식이군(HF), 양성 대조군(GC), 제1실험군(WEML50) 및 제2실험군(WEML100)에 대한 혈청 내 사이토카인 IL-6 발현양을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 4는 정상 사료군(NC), 고지방 식이군(HF), 양성 대조군(GC), 제1실험군(WEML50) 및 제2실험군(WEML100)에 대한 혈청 내 사이토카인 leukotriene B4(LTB4) 발현양을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 5는 정상 사료군(NC), 고지방 식이군(HFD), 양성 대조군(GC), 제1실험군(WEML50) 및 제2실험군(WEML100)에서의 FITC-dextran 검출농도를 시간에 따라 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 6은 도 5로부터 측정된 결과의 곡선아래 면적을 계산하여 그래프로 나타낸 것이다.
본 발명은 몰로키아 추출물을 유효성분으로 하는 염증성 장질환 또는 장누수증후군 개선, 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명 몰로키아 추출물을 유효성분으로 하는 염증성 장질환 또는 장누수증후군 개선, 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
몰로키아(Molokhia-Corchorus olitorius L.)는 피나무과의 1년초 녹황색 야채로서 각종 영양이 풍부하여 "왕의 채소"라고 일컬어질 정도로 중동과 아프리카지역에서 영양가가 높고 성인병 예방에 효과적인 채소로 인식되어 있다. 일본에서는 1980년대부터 몰로키아를 재배하기 시작하였고, 우리나라는 그 보다 후인 1995년경부터 일부 농가에서 소규모로 재배되고 있다. 몰로키아는 식이섬유, 비타민, 칼슘 등의 미네랄과 폴리페놀, 카로테노이드 등을 풍부하게 함유하고 있는 것으로 알려져 있다.
본 발명에서 '장누수 증후군' 또는 'leaky gut syndrome; LGS'이란, 장점막세포는 일정한 세포 사이의 간극을 유지하다가 소화 흡수 과정이 일어나는 동안 어떠한 자극이나 손상이 가해지면서 세포 사이의 틈으로 고분자 물질이 왕복할 수 있는 장점막 투과성이 증가되는 현상을 나타내는 것으로, 장벽의 기능을 제대로 하지 못하여 혈액 내 고분자 물질이 장관내 관강으로 누수되거나 관강 내의 고분자 물질이 직접 혈액으로 들어가는 현상(새는 장 상태; leaky gut)으로 인해 유발되는 증상을 총괄하여 의미한다. 상기 증상들은 노화, 알레르기, 다발성 외상, 류마티스 관절염, 염증성 대장질환, 만성피로 증후군, 과민성 증후군 등의 다양한 임상적 상태로 나타난다. 또한 장점막 투과성의 증가나 장점막의 손상으로 인해 병원체, 항원, 부패물질 등이 장점막 내로 유입되어 염증반응이 일어나고 내독소가 혈류로 유입되어 장내세균 전위(bacterial translocation), 장관내독소혈증(intestinal endotoxemia) 등을 야기하여 각종 염증반응 및 면역 반응이 나타나게 된다.
이러한, 장누수 증후군은, 특이한 증상 없이 다양하고 광범위하며 모호한 증상을 호소하게 된다. 구체적으로 여러 가지 질환에서 공통적으로 호소하는 증상을 갖고 있다는 점에서 특이점이 있다.
상기 장누수 증후군을 일으키는 정확한 원인이 밝혀진 바는 없으나 현재까지 진통제로 쓰이는 비스테로이드성항염증제재(non-steroidal antiin ammatory drugs, NSAID)를 오래 쓴 경우, 항생제와 스테로이드를 쓴 경우, 항암요법으로 항암 화학요법이나 방사선 치료를 받은 경우, 장관 정상세균총의 조성의 변화가 초래 되었을 때, 곰팡이의 장관 내 번식, 과량의 음식의 섭취, 부패한 음식의 섭취나 중금속이나 독성물질을 섭취 했을 때, 지나치게 자극적인 음식물의 섭취나 특정음식물에 과민반응이 있는 경우, 알코올의 과량복용, 다발성 외상, 급 ㅇ 만성 정신적 스트레스에 노출 되었을 때나 만성적인 장관의 세균, 기생충, 이스트 등의 감염 등을 들 수 있다.
구체적으로 상기 장누수 증후군 개선, 예방 또는 치료용 조성물은 상기 다양한 원인에 의해 장관의 투과성이 증가되는 것을, 개선, 예방, 완화, 억제 및 치료하는 효과를 갖는 조성물이라고도 할 수 있다. 이는 장 투과성이 증가되어 혈액 내 고분자 물질이 장관내 관강으로 누수되거나 관강 내의 고분자 물질이 지접 혈액으로 들어가, 다양한 질환이 유발되는 장누수 증후군을 개선, 예방, 치료하는 효과를 갖는다. 장누수 증후군 예방 또는 치료란 장정막 세포 간극이 느슨해져 고분자 물질이 왕복할 수 있는 장점막 투과성이 증가되는 현상을 억제하는 것을 의미할 수 있다.
상기 염증성 장질환은 크론병, 궤양성 대장염, 장형 베체트병, 감염성 장염, 허혈성 장질환 및 방사선 장염으로 이루어진 군에서 선택되는 질환일 수 있다.
본 발명의 실험결과에 의하면, 고지방 식이를 장기간 투여하였을 때, 사이토카인 IL-6와 같은 염증 인자가 증가되고, 염증 세포의 활성화가 증가하였음을 볼 수 있다. 이는 시간이 경과함에 따라 장내 염증을 유도하며, 곧 장염이 유도되게 된다.
이때, 몰로키아 추출물을 병용투여하면 면역 활성은 증가되고, 염증 반응을 억제되며, 염증 세포의 활성화를 감소시키는 것을 확인할 수 있다. 따라서 본 발명에 따른 몰로키아 추출물을 유효성분으로 하는 조성물은 염증성 장질환 개선, 예방 또는 치료 효과를 가짐을 알 수 있다.
상기 몰로키아 추출물은 보다 구체적으로 IgA 발현을 증진시키고, IL-6의 발현과 LTB4 발현을 억제 또는 감소시키는 것을 특징으로 한다.
본 발명에서 '추출물'은 추출 원재료에 추출 용매를 처리하여 얻은 조추출물뿐만 아니라 조추출물의 가공물도 포함한다. 예를 들어, 몰로키아 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.
또한 본 발명에서 '추출물'은 상기 조추출물을 추가적으로 분획(fractionation)한 분획물도 포함한다. 즉, 몰로키아 추출물은 추출 용매를 이용하여 얻은 것뿐만 아니라, 여기에 정제과정을 추가적으로 적용하여 얻은 것도 포함한다. 예를 들어, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 얻은 고분자 분획물, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 방법을 통해 정제할 수 있다.
상기 고분자 분획물은 바람직하게 몰로키아 추출물 또는 몰로키아 추출물을 추출 용매를 이용해 얻은 후, 분자량 10 kDa 이상의 고분자 물질만 분리해 놓은 분획물일 수 있다.
또한 본 발명에서 '몰로키아 추출물'은 상기 몰로키아 잎을 물, 탄소수 1 내지 4 개의 알코올 또는 이들의 혼합 용매에 의한 추출물로서, 추출방법은 특별히 한정할 필요가 없다. 바람직하게는 상기 몰로키아 추출물은 몰로키아 열수 추출물 또는 몰로키아 에탄올 수용액일 수 있으며, 예를 들어 몰로키아 주정 추출물일 수 있다. 가장 바람직하게는 몰로키아 열수 추출물일 수 있다.
또한, 상기 몰로키아 추출물은 상기 몰로키아 추출물을 가공하고, 이를 다시 물, 탄소수 1 내지 4 개의 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 1회 이상 반복 추출한 것일 수 있다.
상기 몰로키아는 몰로키아의 잎을 일정한 크기로 절단하여 그늘이나, 건조기를 사용하여 건조한 후, 파쇄시키거나 그대로 사용할 수 있다. 상기 건조 기간은 상기 몰로키아 내에 수분함량이 20% 미만인 것이라면 특별히 한정되지 않는다.
본 발명에서 '유효성분으로 하는' 또는 '유효성분으로 포함하는'이란 본 발명의 몰로키아 추출물의 염증성 장질환 또는 장누수 증후군을 개선, 예방 또는 치료하는 데 충분한 양을 포함하는 것을 의미한다. 상기 몰로키아 추출물은 천연물로서 과량 투여하여도 인체에 부작용이 없으므로 본 발명의 조성물 내에 포함되는 몰로키아 추출물의 양적 상한 및 하한은 당업자가 적절한 범위 내에서 선택하여 실시할 수 있다.
본 발명에서는, 상기 몰로키아 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물을 처리하였을 때, 상기 조성물이 고지방 식이를 장기간 투여하였을 때 IgA 발현을 증진시키고, IL-6의 발현과 LTB4 발현을 억제 또는 감소시켜, 염증성 장질환을 개선, 예방 또는 치료하는 효과가 있음을 확인하였고, 장투과성을 억제 및 감소시키는 효과가 있음을 확인하였다.
본 발명의 조성물은 식품 조성물로, 본 발명의 몰로키아 추출물을 유효성분으로 포함하는 각종 식품류 예를 들어, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 분말, 과립, 정제, 캡슐 등의 형태로 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 식품 조성물은 후술하는 하기 약학 조성물과 동일한 방식으로 제제화되어 기능성 식품으로 이용하거나, 각종 식품에 첨가할 수 있다. 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 음료류, 알코올 음료류, 과자류, 다이어트바, 유제품, 육류, 초코렛, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류, 비타민 복합제, 건강보조식품류 등이 있다.
본 발명의 식품 조성물은 유효성분으로서 몰로키아 추출물뿐만 아니라, 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함한다. 상술한 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 향미제로서 천연 향미제 [타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등]) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다. 예컨대, 본 발명의 식품 조성물이 드링크제와 음료류로 제조되는 경우에는 본 발명의 몰로키아 추출물 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 및 각종 식물 추출액 등을 추가로 포함시킬 수 있다.
본 발명은 상기 몰로키아 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 장질환 또는 장누수증후군 개선, 억제 또는 예방용 식품 조성물을 포함하는 건강기능식품을 제공한다. 건강기능식품이란, 몰로키아 추출물을 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품소재에 첨가하거나, 캡슐화, 분말화, 현탁액 등으로 제조한 식품으로, 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오는 것을 의미하나, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있다. 이와 같이 하여 얻어지는 본 발명의 건강기능식품은, 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 매우 유용하다. 이와 같은 건강기능식품에 있어서의 몰로키아 추출물의 첨가량은, 대상인 건강기능식품의 종류에 따라 달라 일률적으로 규정할 수 없지만, 식품 본래의 맛을 손상시키지 않는 범위에서 첨가하면 되며, 대상 식품에 대하여 통상 0.01 내지 50 중량%, 바람직하기로는 0.1 내지 20 중량%의 범위이다. 또한, 환제, 과립제, 정제 또는 캡슐제 형태의 건강기능식품의 경우에는 통상 0.1 내지 100 중량% 바람직하기로는 0.5 내지 80 중량%의 범위에서 첨가하면 된다. 한 구체예에서, 본 발명의 건강기능식품은 환제, 정제, 캡슐제 또는 음료의 형태일 수 있다.
또 다른 예에서 상기한 바와 같은 몰로키아 추출물을 유효성분으로 하는 염증성 장질환 또는 장누수증후군 예방 또는 치료용 약학 조성물로 이용될 수 있다. 유효성분인 몰로키아 추출물 외에 약제학적으로 적합하고 생리학적으로 허용되는 보조제를 사용하여 제조될 수 있으며, 상기 보조제로는 부형제, 붕해제, 감미제, 결합제, 피복제, 팽창제, 윤활제, 활택제 또는 향미제 등을 사용할 수 있다.
상기 약학 조성물은 투여를 위해서 상기 기재한 유효 성분 이외에 추가로 약제학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함하여 약학 조성물로 바람직하게 제제화할 수 있다.
상기 약학 조성물의 제제 형태는 과립제, 산제, 정제, 피복정, 캡슐제, 좌제, 액제, 시럽, 즙, 현탁제, 유제, 점적제 또는 주사 가능한 액제 등이 될 수 있다. 예를 들어, 정제 또는 캡슐제의 형태로의 제제화를 위해, 유효 성분은 에탄올, 글리세롤, 물 등과 같은 경구, 무독성의 약제학적으로 허용 가능한 불활성 담체와 결합될 수 있다. 또한, 원하거나 필요한 경우, 적합한 결합제, 윤활제, 붕해제 및 발색제 또한 혼합물로 포함될 수 있다. 적합한 결합제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 젤라틴, 글루코스 또는 베타-락토오스와 같은 천연 당, 옥수수 감미제, 아카시아, 트래커캔스 또는 소듐올레이트와 같은 천연 및 합성 검, 소듐 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 소듐 벤조에이트, 소듐 아세테이트, 소듐 클로라이드 등을 포함한다. 붕해제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 메틸 셀룰로스, 아가, 벤토니트, 잔탄 검 등을 포함한다.
액상 용액으로 제제화되는 조성물에 있어서 허용 가능한 약제학적 담체로는, 멸균 및 생체에 적합한 것으로서, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다.
더 나아가 해당분야의 적절한 방법으로 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있고, 비경구 투여인 경우에는 정맥내 주입, 피하 주입, 근육 주입, 복강 주입, 경피 투여 등으로 투여할 수 있으며, 바람직하게는 경구 투여이다.
본 발명의 약학 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하며, 보통으로 숙련된 의사는 소망하는 치료 또는 예방에 효과적인 투여량을 용이하게 결정 및 처방할 수 있다. 본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 약학 조성물의 1일 투여량은 0.001-10 g/㎏이다.
본 발명의 약학 조성물은 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.
또한, 본 발명은 포유동물에게 유효량의 몰로키아 추출물을 투여하는 것을 포함하는 염증성 장질환 또는 장누수증후군의 개선, 예방 또는 치료 방법을 제공한다.
여기에서 사용된 용어 "포유동물"은 치료, 관찰 또는 실험의 대상인 포유동물을 말하며, 바람직하게는 인간을 말한다.
여기에서 사용된 용어 "유효량"은 연구자, 수의사, 의사 또는 기타 임상의에 의해 생각되는 조직계, 동물 또는 인간에서 생물학적 또는 의학적 반응을 유도하는 유효 성분 또는 약학적 조성물의 양을 의미하는 것으로, 이는 해당 증상의 완화를 유도하는 양을 포함한다. 본 발명의 유효 성분에 대한 유효량 및 투여횟수는 원하는 효과에 따라 변화될 수 있다. 그러므로, 투여될 최적의 투여량은 당업자에 의해 쉽게 결정될 수 있으며, 염증성 장질환의 증상 정도, 장누수증후군에 대한 장투과성 정도, 조성물에 함유된 유효성분 및 다른 성분의 함량, 제형의 종류, 및 환자의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 비롯한 다양한 인자에 따라 조절될 수 있다. 본 발명의 예방, 치료 또는 개선 방법에 있어서, 성인의 경우, 몰로키아 추출물을 1일 1회 내지 수회 투여시, 0.001 g/㎏ 내지 10 g/㎏의 용량으로 투여하는 것이 바람직하다.
본 발명의 치료방법에서 몰로키아 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 경구, 직장, 정맥내, 동맥내, 복강내, 근육내, 흉골내, 경피, 국소, 안구내 또는 피내 경로를 통해 통상적인 방식으로 투여할 수 있고, 바람직하는 경구, 복강 내에 투여할 수 있다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시하나, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범주 및 기술사상 범위 내에서 다양한 변경 및 수정이 가능함은 당업자에게 있어서 명백한 것이며, 이러한 변형 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속하는 것도 당연한 것이다.
실시예 1. 몰로키아 열수 추출물
강원도 홍천에서 재배한 국내산 몰로키아 잎을 구매하여 사용하였다. 몰로키아를 50 ℃ 건조 오븐에서 24시간 건조한 다음 분쇄기로 1.0 ㎜ 이하가 되도록 분쇄하여 몰로키아 잎 분말을 준비하였다.
몰로키아 잎 분말 5 g에 20 배 부피에 해당하는 증류수를 가하고 80 ℃ 에서 3 시간 동안 환류 추출하여 열수 추출물을 수득하였다. 상기 열수 추출물을 여과한 후, 회전 진공 증발기(rotary vacuum evaporator)를 이용하여 감압농축하고, 72 시간 동안 동결건조하였다. 상기 방법으로 수득한 몰로키아 열수 추출물은 WEML(Water-soluble extract from molokhia leaves)로 기재하였다.
실시예 2. 몰로키아 고분자 분획물
강원도 홍천에서 재배한 국내산 몰로키아 잎을 구매하여 사용하였다. 몰로키아 잎을 50 ℃ 건조 오븐에서 24시간 건조한 다음 분쇄기로 1.0 ㎜ 이하가 되도록 분쇄하여 몰로키아 분말을 준비하였다.
몰로키아 분말 100 g에 20 배 부피에 해당하는 증류수를 가하고 80 ℃의 온도에서 3 시간 동안 환류 추출하여 열수 추출물을 수득하였다. 상기 열수 추출물을 여과한 다음, 회전 진공 증발기(rotary vacuum evaporator)를 이용하여 추출액의 1/10이 되도록 감압농축하고, 감압농축된 열수 추출물의 4배 부피(v/v)에 해당하는 80% 주정을 상기 열수 추출물에 가하여 24시간 침전시켰다. 이를 원심분리(6000 rpm, 635×g, 30분)하여 침전물을 얻었으며 여기에 소량의 증류수를 가하여 침전물을 재용해하고 투석막(MW cut off 12,000, Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO, USA)을 이용하여 2~3일간 투석을 행하여 저분자물질을 제거하였으며 72시간 동결건조하여, 몰로키아 고분자 분획물을 얻었다. 상기 방법으로 수득한 몰로키아 고분자 분획물은 HFML(High-molecular fraction from molokhia leaves)라고 명명하였다.
비교예 1. 몰로키아 혼합 추출물
몰로키아 잎 분말 대신에 몰로키아 잎, 줄기의 혼합분말(1:1 중량비)을 사용한 것을 제외하고 상기 실시예 1과 모두 동일하게 하여 몰로키아 혼합 추출물을 제조하였다.
비교예 2. 몰로키아 줄기 추출물
몰로키아 잎 분말 대신에 몰로키아 줄기 분말을 사용한 것을 제외하고 상기 실시예 1과 모두 동일하게 하여 몰로키아 줄기 추출물을 제조하였다.
비교예 3. 가르시니아 캄보지아 추출물
가르시니아 캄보지아 추출물은 인도 Unicon Natural Products PVT사로부터 구매하여 사용하였다. 이때, 상기 가르시니아 캄보지아 추출물은 HCA을 600 mg/g 이상으로 함유하는 것을 사용하였다.
<시험예>
시험예 1. 몰로키아 부위별 추출물의 염증 억제 효능
몰로키아 각 부위별 추출물(실시예 1, 비교예 1, 2)의 NO 생성 억제활성을 조사하기 위하여, RAW 264.7 세포(1 × 106/mL)를 DMEM에서 먼저 배양하고 LPS(1 ㎍/mL), 몰로키아 각 부위별 추출물 5 ㎍/ml 또는 10 ㎍/ml를 첨가하여 24시간 동안 자극하였다. NO의 농도는 Griess 시약(Sigma, USA)을 이용하여 제조자의 지시에 따라 세포 배양액 상층액 내의 아질산염 양을 측정함으로써 조사하였다. 배양된 RAW 264.7 세포는 150 μL의 세포 배양액 상층액과 150 μL Griess 시약을 혼합하여 1,000 × g로 10분간 원심분리하였고, 이어서 상온에서 10분간 배양하였다. 흡광도는 마이크로플레이트 리더를 이용하여 540 nm에서 측정하였으며, 아질산나트륨(sodium nitrite)을 통해 형성된 검량선(calibration curve)을 기준으로 하여 비교하였다. 이때 대조군은 PBS 완충액만을 처리한 세포이다.
도 1은 몰로키아 각 부위별 추출물(실시예 1, 비교예 1, 2)를 각각 처리한 RAW 264.7 세포에서의 NO 농도를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 1에 나타난 바와 같이, 몰로키아 부위별 추출물의 NO 생성 활성은 몰로키아 잎 추출물이 가장 높았다. 산화질소(nitric oxide, NO)는 인체 내의 혈압조절, 신경전달, 그리고 면역과정의 항상성유지에 매우 중요한 역할을 한다. 특히 NO는 미생물 감염을 막는 인체 방어기전에 필수적인 내인성물질로 알려져 있다(Bogdan, 2001). 따라서, LPS와 같은 염증매개 물질이 처리하였을 때, 몰로키아 부위 중에서 실시예 1의 몰로키아 열수 추출물이 대식세포에서 NO 생산을 가장 크게 증가시켰으므로, 면역활성 증진에 가장 효과적임을 알 수 있다.
시험예 2. 실시예 1의 몰로키아 열수 추출물과 실시예 2의 몰로키아 고분자 분획물의 수율, 당과 단백질 함량 분석
중성당 분석은 Albersheim 등의 방법을 일부 변형하여 가수분해 후 각 구성당을 알디톨 아세테이트(alditol acetate)와 aldonolactone로 유도체화 하여 GC(Gas Chromatography ACME-6100, Young-Lin Co. Ltd. Anyang, Korea)를 이용하여 분석하였다. 실시예 1 또는 실시예 2의 시료를 2 M TFA(trifluroacetic acid) 중에서 121℃, 1.5 hr 반응시켜 가수분해한 후, 1 ㎖의 1 M NH4OH (ammonia solution)에 용해하여 10 ㎎의 NaBH4로 4 hr 환원시켰다. Acetic acid를 적당량 가하여 잔존 NaBH4를 제거한 후, 메탄올을 가하며 반복 건조함으로써 과량으로 가해진 아세트산을 제거하여 알디톨(alditol)로 전환하였다. 상기 알디톨(alditol)에 1 ㎖의 아세트산 무수물(acetic anhydride)을 가하여 121℃에서 30 min 동안 반응시켜 알디톨 아세테이트(alditol acetate)로 전환시켰으며 이를 클로로포름/H2O 2상 용매계로 분리하여 추출하고, 추출물은 건조 후 소량의 아세톤에 용해하여 GC 분석용 시료로 사용하였다.
단백질 정량은 Bradford법에 따라 측정하였으며, BSA(Bovine Serum Albumin, sigma aldrich)를 표준품으로 사용하여 1 ㎎/㎖를 최고 농도로 하여 일정배수로 희석하였다. Bradford시약 980 ㎕에 표준품과 시료를 각각 20 ㎕를 가하여 반응시킨 후 microplate reader를 이용하여 595 nm에서 흡광도를 측정하였다. 단백질 정량은 BSA에 대한 양으로 환산하였다.
총당은 phenol-sulfuric acid법에 따라 측정하였으며, 시료용액 0.5 mL에 동량의 5 % phenol 용액을 첨가하여 교반한 후 진한 황산 (98%, v/v) 2.5 mL를 가하여 상온에서 20분간 반응시켜 microplate reader를 이용하여 470 nm에서 흡광도를 측정하였다. 총당의 정량은 glucose 표준품(sigma aldrich)을 사용하여 검량선을 작성하여 이에 대한 양으로 환산하였다.
총 폴리페놀 함량은 gallic acid(sigma aldrich)를 이용하여 Folin Denis법에 따라 분석하였다.
구성당의 경우, 시료의 당사슬을 단당으로 가수분해 한 후 HPAEC-PAD(high-performance anion-exchange chromatography-pulsed amperometric detector)를 사용하였으며, 데이터는 Chromelon 6.80 소프트웨어 (Dionex)를 이용하여 분석하였다. 표준용액으로 단당류(fucose, rhamnose, arabinose, galactose, glucose, xylose)를 사용하였다.
그 결과, 몰로키아 열수 추출물 및 몰로키아 고분자 분획물의 주요성분 함량 등의 이화확적 특성을 분석한 결과 하기 표 1과 같았다.
실시예 1로부터 제조된 몰로키아의 열수 추출물 및 실시예 2로부터 제조된 몰로키아 고분자 분획물에 대한 주요성분 함량 등 이화학적 특성을 분석하였고, 그 결과 하기 표 1과 같았다.
구분 실시예 1(WEML) 실시예 2(HEML)
Extraction yield (%) 29.98 1.90
Chemical composition (%)
Protein(단백질) 2.8 ± 0.1 3.2 ± 0.7
Neutral sugar(중성당) 67.6 ± 2.0 47.1 ± 1.3
Uronic acid(우론산) 18.8 ± 0.8 44.7 ± 1.3
KDO-liked material(KDO 유사물질) 0.5 ± 0.3 1.4 ± 1.0
polyphenol(폴리페놀) 12.2 ± 0.2 3.6 ± 0.8
Component sugar (PMP) (Mole %)
Rhamnose(람노오스) 10.1 ± 0.1 22.4 ± 0.5
Fucose(푸코오스) - 0.3 ± 0.1
Arabinose(아라비노오스) 4.0 ± 0.0 5.3 ± 0.0
Xylose(자일로스) 1.2 ± 0.1 1.2 ± 0.0
Mannose(만노오스) 2.2 ± 0.0 0.3 ± 0.0
Galactose(갈락토오스) 8.5 ± 0.0 11.5 ± 0.2
Glucose(글루코오스) 40.9 ± 0.2 2.1 ± 0.0
Glucuronic acid(글루쿠론산) 9.0 ± 0.1 20.1 ± 0.1
Galacturonic acid(갈락투론산) 10.9 ± 0.0 28.5 ± 0.7
* 상기 chemical component의 함량비(%)는 건조 샘플 내의 중량%를 나타낸 것이다.
표 1에 나타난 바와 같이, 실시예 1로부터 제조된 몰로키아 열수 추출물은 수율이 29.98%로 나타났으며, 단백질 함량은 2.8 중량%, 중성당 함량은 67.6 중량%인 것으로 확인되었다. 즉, 실시예 1의 몰로키아 열수 추출물의 대부분은 당이 차지하고 있는 것으로 분석되었다.
실시예 1로부터 제조된 몰로키아 열수 추출물의 구성당을 분석한 결과, 주요 구성당은 글루코오스(40.9%)였으며, 갈락투론산, 람노오스, 글루쿠론산 및 갈락토오스가 각각 10.9, 10.1, 9.0, 8.5 Mole %존재하는 것으로 확인되었다. 또한 아라비노오스, 만노오스, 자일로스는 각각 4.0, 2.2, 1.2 Mole %로 미량 존재하고 있었다.
몰로키아고분자 분획물의 추출수율은 1.9%이고 단백질 함량은 3.2%, 중성당 함량은 47.1%, 우론산이 44.7%로 우론산 함량이 높은 것으로 확인되었으며, 주요 구성당은 galacturonic acid, rhamnose, glucuronic acid가 각각 28.5, 22.4, 20.1%로 검출되었으며, galactose, arabinose, glucose, xylose, fucose, mannose가 각각 11.5, 5.3, 2.1, 1.2, 0.3, 0.3%로 검출되었다.
시험예 3. 실시예 1의 몰로키아 열수 추출물의 염증 관련 인자 분석
1) 실험동물
우선, 6주령의 수컷 C57BL/6J mouse 45 마리를 중앙실험동물을 통해 구입하였다. 상기 실험동물은 다음과 같이 다섯 그룹으로 분리하였다. 각 그룹당 9마리의 실험동물을 사용하였고, 8주간의 식이를 진행한 후 장관 면역 조절 효능을 평가하였다.
- 정상 사료군(NC): 정상 사료(AIN-93G)를 먹이고, vehicle만을 경구투여 한 실험군
- 고지방 식이군(HFD): 고지방(60% kcal fat) 사료를 먹이고, vehicle만을 경구투여 한 실험군
- 양성 대조군(GC): 고지방 사료를 먹이고, 가르시니아 캄보지아 추출물 50 ㎎/㎏을 경구투여 한 실험군
- 제1실험군(WEML50): 고지방 사료를 먹이고, 실시예 1로부터 제조된 몰로키아 열수 추출물 50 ㎎/㎏을 경구투여 한 실험군
- 제2실험군(WEML100): 고지방 사료를 먹이고, 실시예 1로부터 제조된 몰로키아 열수 추출물 100 ㎎/㎏을 경구투여 한 실험군으로 구성하였다.
이때, 상기 고지방 자료는 Lard를 첨가하여 열량을 60 cal%를 증가시킨 Modified AIN 76A purified rodent diet(60 cal% fat)를 사용하였다.
2) 분석
8주의 식이 기간이 끝나고, 분석하기 6시간 전부터 각 그룹의 실험동물을 절식시켰다. 다음, 실험동믈을 마취시키고 복부를 개복하였다. 멸균 주사기를 사용하여 하대정맥에서 채혈한 후, 헤파린으로 처리된 멸균튜브에 보관하였다. 수득한 혈액은 원심분리(12,000 ×g, 10분, 4℃)하여 상등액을 취해 분석에 사용하였다. 혈중 immunoglobulin A, IL-6, leukotriene B4 농도는 각각 Mouse IgA ELISA kit(Abcam, ab157717), Mouse IL-6 Quantikine ELISA kit(R&D systems, M6000B), LTB4 Parameter Assay Kit(R&D systems, KGE006B)를 이용하여 정량하였다.
3) 분석결과
실시예 1로부터 제조된 몰로키아 열수 추출물에 대한 장내 염증 관련 지표를 확인하였고, 그 결과를 도 1 내지 3에 나타내었다.
도 2는 정상 사료군(NC), 양성 대조군(GC), 제1실험군(WEML50) 및 제2실험군(WEML100)에 대한 혈청 내 IgA의 농도를 측정하여 나타낸 그래프이다. 도 2에 나타난 바와 같이, 정상 사료군(NC)에서는 혈중 IgA 농도가 16.25 ㎍/㎖이였으나, 양성 대조군(GC)에서는 26.17 ㎍/㎖로 장내 면역 활성이 증진된 것을 확인하였다. 실시예 1로부터 제조된 몰로키아 열수 추출물을 50 ㎎/㎏ 농도로 경구 투여한 제1실험군에서는 22.09 ㎍/㎖의 IgA가 확인되었다. 또한 실시예 1로부터 제조된 몰로키아 열수 추출물을 100 ㎎/㎏ 농도로 경구 투여한 제2실험군에서는 26.33 ㎍/㎖ IgA가 검출되었다.
종합하면, 실시예 1의 몰로키아 열수 추출물 역시 양성 대조군(GC)와 같이 장내 면역활성을 증진시키고 있음을 알 수 있다. 특히, 몰로키아 열수 추출물(실시예 1)의 투여 농도가 증가할수록 장내 면역활성 또한 증가하고 있음을 확인한 바, 본 발명에 따른 몰로키아 열수 추출물은 장내 면역활성을 증진시켜 염증을 감소시키는 효과가 있음을 알 수 있다.
도 3은 정상 사료군(NC), 고지방 식이군(HF), 양성 대조군(GC), 제1실험군(WEML50) 및 제2실험군(WEML100)에 대한 혈청 내 사이토카인 IL-6 발현양을 측정하여 나타낸 그래프이다.
IL-6은 염증성 장질환에서 증가한다고 알려진 대표적인 사이토카인이다. 본 발명에서는 8주간의 장기적인 고지방 식이를 통해 염증성 장질환을 유도하는 한편, 실시예 1의 몰로키아 열수 추출물을 혼합 투여하여 염증성 장질환의 예방 또는 치료 효과를 살펴보고자 하였다. 도 3에 나타난 바와 같이, 8주간의 고지방 식이를 통해 염증성 장질환이 유도된 고지방 식이군(HF)은 12.37 pg/㎖로 IL-6의 농도가 크게 증가하였음을 알 수 있다. 고지방 식이와 실시예 1의 몰로키아 열수 추출물을 다양한 농도로 병용 투여한 제1, 제2실험군의 경우, 각각 3.41 pg/㎖과 1.32 pg/㎖의 IL-6이 검출되었다. 이는 염증성 장질환에 치료효과가 있는 것으로 알려진 가르시니아 캄보지아 추출물을 병용 투여한 양성 대조군(GC)에서의 IL-6(2.89 pg/㎖) 농도와 정상 사료군(NC)(2.78 pg/㎖)보다도 낮은 수치이다. 즉, 실시예 1로부터 제조된 몰로키아 열수 추출물은 정상 사료군 또는 가르시니아 캄보지아 추출물보다 IL-6 생성을 현저히 억제시키는 것을 알 수 있다. 이를 통해 본 발명에 따른 몰로키아 열수 추출물은 장내 염증반응을 억제하여 염증성 장질환에 대한 개선, 예방 또는 치료효과를 가지고 있음을 알 수 있다. 가르시니아 캄보지아의 경우 섭취시 구강건조증, 현기증, 두통 또는 설사 등의 다양한 부작용을 동반하는 것으로 알려져 있지만, 본 발명에 따른 몰로키아 열수 추출물은 일상적으로 섭취가능한 식품으로써 알려진 부작용이 없을뿐만 아니라 세포 독성 실험에서도 전혀 독성이 검출되지 않은 안정한 물질이라는 점에서 큰 강점을 갖는다.
도 4는 정상 사료군(NC), 고지방 식이군(HF), 양성 대조군(GC), 제1실험군(WEML50) 및 제2실험군(WEML100)에 대한 혈청 내 사이토카인 leukotriene B4(LTB4) 발현양을 측정하여 나타낸 그래프이다.
leukotriene B4(LTB4)는 면역세포에서 염증반응을 유발하여 염증성 세포의 활성에 관여하는 것으로 알려져 있다. 따라서, 장기간의 고지방 식이로 염증성 장질환이 유도된 실험동물로부터 LTB4 농도를 측정하여 염증 정도를 분석하였다. 도 4에 나타난 바와 같이, 고지방 식이를 통해 염증성 장질환이 유도된 경우 1357 pg/㎖로, LTB4 농도가 정상 사료군(NC)에 비해 현저히 증가하였음을 알 수 있다. 이에 반해 가르시니아 캄보지아 추출물을 고지방 식이와 병행 투여한 양성 대조군(GC)에서는 LTB4 농도가 976 pg/㎖로 감소하였음을 확인하였다.
실시예 1로부터 제조된 몰로키아 열수 추출물을 고지방 식이와 병행 투여한 제1, 제2실험군 역시 LTB4 농도가 각각 1165 pg/㎖, 1025 pg/㎖으로 감소하였음을 확인하였다.
또한 본 발명에 따른 몰로키아 열수 추출물은 양성 대조군 및 정상 사료군과 유사한 정도의 LTB4 농도 감소를 나타내었으며, 이를 통해 가르시니아 캄보지아 추출물과 동등한 정도의 LTB4 생성 억제 효과를 갖고 있음을 알 수 있다.
비록 몰로키아 열수 추출물을 투여한 제1, 2실험군이 양성 대조군보다 LTB4 농도의 감소량이 적었으나, 가르시니아 캄보지아 추출물의 경우 각종 부작용이 야기될 수 있다는 문제점이 있는 반면, 본원발명의 몰로키아 열수 추출물은 매우 안정한 물질로, 세포 독성을 전혀 나타내지 않으면서도 현저한 염증억제 효과를 나타낸다는 점에서 현저히 우수한 효과를 가지고 있음을 알 수 있다.
본 발명에 따른 몰로키아 열수 추출물은 염증세포의 활성을 억제시켜 염증성 장질환 개선, 예방 또는 치료에 효과를 나타낼 수 있음을 확인하였다. 나아가 LTB4 생성에 대해서, 정상 사료군 수준으로 억제시키는 현저한 활성까지 얻기 위해서는 상기 몰로키아 열수 추출물이 100 ㎎/㎖ 농도로 투여되는 것이 바람직하다.
시험예 4. 몰로키아 열수 추출물의 장누수 증후군(leaky gut syndrome) 개선, 예방 또는 치료 효과
1) 실험동물
우선, 6주령의 수컷 C57BL/6J mouse 45 마리를 중앙실험동물을 통해 구입하였다. 상기 실험동물은 다음과 같이 다섯 그룹으로 분리하였다. 각 그룹당 9마리의 실험동물을 사용하였고, 8주간의 식이를 진행한 후 장누수 증후군에 대한 개선, 예방 및 치료 효능을 평가하였다.
- 정상 사료군(NC): 정상 사료(AIN-93G)를 먹이고, vehicle만을 경구투여 한 실험군
- 고지방 식이군(HFD): 고지방(60% kcal fat) 사료를 먹이고, vehicle만을 경구투여 한 실험군
- 양성 대조군(GC): 고지방 사료를 먹이고, 가르시니아 캄보지아 추출물 50 ㎎/㎏을 경구투여 한 실험군
- 제1실험군(WEML50): 고지방 사료를 먹이고, 실시예 1로부터 제조된 몰로키아 열수 추출물 50 ㎎/㎏을 경구투여 한 실험군
- 제2실험군(WEML100): 고지방 사료를 먹이고, 실시예 1로부터 제조된 몰로키아 열수 추출물 100 ㎎/㎏을 경구투여 한 실험군으로 구성하였다.
2) 분석
8주의 식이 기간이 끝나고, 분석하기 6시간 전부터 각 그룹의 실험동물을 절식시켰다. 각 실험동물들로부터 장 투과성을 확인하기 위해 멸균생리식염수에 녹인 FITC-dextran 400 mg/kg body weight을 경구투여한 후 0, 2, 4시간 뒤에 미정맥 채혈을 진행하였다. 얻어진 100 μL의 혈액을 원심분리(12,000 ×g, 10 min, 4 ℃)하여 상등액을 취하였고 이를 microplate reader기를 이용하여 여기파장(excitation wavelength)은 485 nm, 방출파장(emission wavelength)은 535 nm로 설정하여 흡광도를 측정하였다. 이는 FITC-dextran의 표준 곡선을 이용하여 농도를 산출하였고, 시간대 별 FITC-dextran 농도를 곡선아래면적(AUC, area under the curve)로 나타내었다.
3) 분석결과
도 5는 정상 사료군(NC), 고지방 식이군(HFD), 양성 대조군(GC), 제1실험군(WEML50) 및 제2실험군(WEML100)에서의 FITC-dextran 검출농도를 시간에 따라 측정하여 나타낸 그래프이다. 도 6은 도 5로부터 측정된 결과의 곡선아래 면적을 계산하여 그래프로 나타낸 것이다.
도 5, 6에 나타난 바와 같이, 정상 사료군(NC)(normal control)을 100%로 하였을 때, 고지방 식이를 통해 장누수 증후군이 야기된 고지방 식이군(HFD)은 399.61%였고, 양성 대조군(GC)는 271.71%로 검출되었다. 즉 고지방 식이가 제공되었어도 가르시니아 캄보지아 추출물이 병용 투여되면 장 투과성이 억제됨을 알 수 있다.
그러나, 실시예 1로부터 제조된 몰로키아 열수 추출물이 병용 투여된 제1, 2실험군에서는 각각 280.18%, 206.06%로 측정된 바, 이는 정상 사료군과 상당히 유사한 수치까지 장투과성이 억제 및 감소됨을 알 수 있다. 특히 실시예 1로부터 제조된 몰로키아 열수 추추출물이 100 ㎎/㎏ 이상 투여된 것이 가장 효과가 우수함을 확인하였다.
제1, 제2실험군은 고지방 식이군(HFD)에 비해, 장투과성이 각각 2배 감소하였다. 따라서 본 발명에 따른 몰로키아 열수 추출물은 장누수 증후군에 대해 개선, 예방 또는 치료 효과가 있음을 알 수 있다.
하기에 본 발명의 분말을 함유하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
제제예 1. 산제의 제조
실시예 1에서 얻은 몰로키아 열수 추출물 또는 실시예 2에서 얻은 몰로키아 고분자 분획물 500 ㎎
유당 100 ㎎
탈크 10 ㎎
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
제제예 2. 정제의 제조
실시예 1에서 얻은 몰로키아 열수 추출물 또는 실시예 2에서 얻은 몰로키아 고분자 분획물 300 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
제제예 3. 캅셀제의 제조
실시예 1에서 얻은 몰로키아 열수 추출물 또는 실시예 2에서 얻은 몰로키아 고분자 분획물 200 ㎎
결정성 셀룰로오스 3 ㎎
락토오스 14.8 ㎎
마그네슘 스테아레이트 0.2 ㎎
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
제제예 4. 주사제의 제조
실시예 1에서 얻은 몰로키아 열수 추출물 또는 실시예 2에서 얻은 몰로키아 고분자 분획물 600 ㎎
만니톨 180 ㎎
주사용 멸균 증류수 2974 ㎎
Na2HPO4,12H2O 26 ㎎
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플 당 상기의 성분 함량으로 제조한다.
제제예 5. 액제의 제조
실시예 1에서 얻은 몰로키아 열수 추출물 또는 실시예 2에서 얻은 몰로키아고분자 분획물 4 g
이성화당 10 g
만니톨 5 g
정제수 적량
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100g으로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.
제제예 6. 과립제의 제조
실시예 1에서 얻은 몰로키아 열수 추출물 또는 실시예 2에서 얻은 몰로키아 고분자 분획물 1,000 ㎎
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 ㎎
비타민 B1 0.13 ㎎
비타민 B2 0.15 ㎎
비타민 B6 0.5 ㎎
비타민 B12 0.2 ㎍
비타민 C 10 ㎎
비오틴 10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 ㎎
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 ㎎
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75 ㎎
산화아연 0.82 ㎎
탄산마그네슘 25.3 ㎎
제1인산칼륨 15 ㎎
제2인산칼슘 55 ㎎
구연산칼륨 90 ㎎
탄산칼슘 100 ㎎
염화마그네슘 24.8 ㎎
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 과립제에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 과립제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강기능식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
제제예 7. 기능성 음료의 제조
실시예 1에서 얻은 몰로키아 열수 추출물 또는 실시예 2에서 얻은 몰로키아 고분자 분획물 1,000 ㎎
구연산 1,000 ㎎
올리고당 100 g
매실농축액 2 g
타우린 1 g
정제수를 가하여 전체 900 ㎖
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1 시간 동안 85 ℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 L 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 기능성 음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

Claims (12)

  1. 몰로키아 열수 추출물을 유효성분으로 하는 고지방 식이에 의한 장누수증후군 개선 또는 예방용 식품 조성물.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 고지방 식이에서 IgA 발현을 증진시키고, IL-6의 발현과 LTB4 발현을 억제 또는 감소시키는 것을 특징으로 하는 고지방 식이에 의한 장누수증후군 개선 또는 예방용 식품 조성물.
  5. 삭제
  6. 삭제
  7. 삭제
  8. 삭제
  9. 삭제
  10. 삭제
  11. 삭제
  12. 삭제
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