KR102209701B1

KR102209701B1 - 토파시티닙의 신규한 결정형 형태 및 이의 제조방법

Info

Publication number: KR102209701B1
Application number: KR1020200102920A
Authority: KR
Inventors: 안지훈
Original assignee: 유니셀랩 주식회사
Priority date: 2019-08-16
Filing date: 2020-08-17
Publication date: 2021-01-29

Abstract

본 발명자들은 현재 시판되고 있는 토파시티닙 시트르산염의 특수한 유연물질인 아민체, 다이하이드로체, 벤조일체 등이 발생하는 안정성을 극복하고, 제제의 용이성까지 개선한 토파시티닙 유리염기 신규 결정형으로서 류마티스 관절염, 건선성 관절염, 및 궤양성 대장염의 치료에 유용한 치료 또는 예방용 약제학적 조성물로 사용될 수 있다.

Description

토파시티닙의 신규한 결정형 형태 및 이의 제조방법 {A NOVEL CRYSTALLINE FORM OF TOFACITINIB, METHOD FOR PREPATING THEREOF}

본 발명은 현재 시판되고 있는 토파시티닙 시트르산염의 문제점인 수분 및 저장과정에서의 특수한 유연물질인 아민체, 다이하이드로체, 벤조일체 등이 발생하는 안정성을 극복하고, 제제의 용이성까지 개선한 토파시티닙 유리염기 신규 결정형 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

토파시티닙(Tofacitinib)은 국제공개공보 제2003/048162호 및 대한민국 등록특허공보 제10-0691590호에 기재되어 있는 {3-((3R,4R)-4-메틸-3-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판나이트릴} 모노 시트르산염의 염형태로서 하기 구조식(화학식 1)으로 표현된다.

[화학식 1]

토파시티닙은 효소 야누스(Janus) 키나아제 3와 같은 단백질 키나아제의 억제제로 유용하며, 류마티스 관절염 등의 특징인 염증성 사이토카인의 증가를 억제하는 활성을 나타낸다. 토파시티닙은 국제특허공개공보 제2001/042246호에 그에 대한 물질특허가 개시되어 있으며, 국제공개공보 제2003/048162호 및 대한민국 등록특허공보 제10-0691590호에 토파시티닙 시트르산염에 대해 구체적으로 개시되어 있는데, 이는 젤잔즈(Xeljanz)라는 상품명으로 시판되는 정제 제품의 주성분이다.

국제공개공보 제2012/135338호에서 무정형의 아세트산염, 국제공개공보 제2013/090490호에서 무정형의 타르타르산염, 무정형의 말레산염, 무정형의 옥살산염, 미국공개공보 제2015/225406호에는 염산염 및 브롬산염 등이 개시되어 있다.

또한 대한민국 특허공개공보 제10-2019-0090729호에는 토파시티닙 캠퍼술폰산염 일수화물이 개시되어 있으며, 대한민국 특허공개공보 제10-2018-0095198호에는 토파시티닙의 그 밖에 산부가염에 대해 개시되어 있다.

토파시티닙 산부가염들은 수분이 존재하는 보관 및 저장과정에서의 안정성을 저해시켜 인체에 치명적인 아민체, 다이하이드로체, 벤조이체 등을 생성시켜 토파시티닙을 약물로서 사용하는데 치명적인 문제점을 야기 시킨다(Der Pharma Chemica, 2014,6(2):11-19). 이를 개선하고자 하는 노력이 있었지만 충분하지 않은 결과를 보였다.

특히 토파시티닙 시트릭산의 다이하이드로체의 경우 이 다이하이드로체가 0.1% 이상 존재시 약물로서의 치명적인 독성을 나타내기에 이를 개선하기위한 노력이 시급한 실정이다.

그러므로 토파시티닙 유리염기 형태의 결정형으로서 개발하게 된다면, 유리염기 자체가 중성분자로서 수분과 친화적이지 않기 때문에 보관 및 저장 과정에서의 토파시티닙의 약물로서 치명적인 문제점을 야기시티는 특정 유연물질을 저해 할 수 있을 뿐만 아니라 토파시티닙의 최적의 안정성을 개선할 수 있을 것으로 야기 된다.

하지만 현재 보고된 토파시티닙의 염 또는 무정형과 같은 고체형태에서는 유리염기의 결정형으로서의 보고는 어디에도 존재하지 않는다.

따라서 본 발명자들은 토파시티닙의 보관 및 저장과정에서의 안정성을 개선하고자 신규한 결정성 고체로서 토파시티닙 유리염기를 확보하였다.

국제공개공보 제2003/048162호, 대한민국 등록특허공보 제10-0691590호, 국제공개공보 제2012/135338호, 국제공개공보 제2013/090490호, 미국공개공보 제2015/225406호, 대한민국 특허공개공보 제10-2019-0090729호 및 대한민국 특허공개공보 제10-2018-0095198호에서 토파시티닙의 다양한 산부가염 및 공동무정형을 개시하고 있지고, 용해도 및 안정성 평가는 존재하지만, 구체적이지 않으며, 제제과정에서 중요하게 고려되는 특성인 점착성, 흐름성, 정전기력에 대한 시험결과는 존재하지 않는다.

그러나 본 발명자들은 국제공개공보 제2003/048162호, 대한민국 등록특허공보 제10-0691590호에서 개시한 토파시티닙 시트르산염을 제조하여 분석한 결과 점착성이 강하고, 결정의 입도분포가 고르지 못하고, 타정 시 부착성이 문제가 있으며, 안정성과 흡습성이 떨어지는 문제점을 가지고 있었음을 확인했다.

따라서 본 발명자들은 열역학적으로 안정하고 흡습성이 낮아 상온에서의 보관이 용이하며, 나아가 점착성이 없고, 산부가염을 제조하지 않더라도 제형화에 유리한 신규 결정형 형태의 토파시티닙 유리염기를 개시하고자 한다.

국제공개공보 제2003/048162호 대한민국 등록특허공보 제10-0691590호 국제공개공보 제2012/135338호 국제공개공보 제2013/090490호 미국공개공보 제2015/225406호 대한민국 특허공개공보 제10-2019-0090729호 대한민국 특허공개공보 제10-2018-0095198호

본 발명자들은 현재 시판되고 있는 토파시티닙 시트르산염의 보관 및 저장과정에서의 안정성에 대한 문제점을 극복하고, 제형화에 용이한 성질인 우수한 점착성, 균일성을 가지며, 정전기력이 낮은 토파시티닙의 신규한 결정형 형태의 유리염기를 개발하였다.

본 발명의 일 구현예에 따르면 본 발명은 분말 X선 회절(PXRD)분석에서 6.369±0.2, 6.923± 0.2, 9.02± 0.2, 11.085± 0.2, 12.769± 0.2, 14.317± 0.2, 16.957± 0.2, 18.041± 0.2, 19.231± 0.2, 20.343± 0.2, 21.288± 0.2, 22.317± 0.2, 23.158± 0.2, 24.119± 0.2, 24.955± 0.2, 25.743± 0.2, 26.559± 0.2, 27.322± 0.2, 28.153±0.2, 28.836± 0.2, 29.572± 0.2, 31.028± 0.2, 32.35± 0.2, 32.999± 0.2, 33.677± 0.2, 34.316± 0.2에서 특징적인 피크를 갖는 분말 X선 회절 패턴을 갖는 것을 특징으로 하는 하기 화학식 2로 표기되는 토파시티닙 유리염기 신규 결정형을 제공한다. 본 발명은 필요에 따라 위 2θ회절각 중에서 상대적 피크 강도가 큰 것부터 순차적으로 5개에서 10개의 2θ회절각으로 본 발명을 특정할 수도 있다.

[화학식 2]

예컨대 본 발명에 따른 토파시티닙 유리염기 결정형의 일 구현예의 분말 X선 회절의 강도 및 피크 위치는 하기 [표 1]와 같을 수 있다.

(토파시티닙 유리염기 신규한 결정형의 PXRD의 강도 및 피크 위치)

또한 본 발명은 밀폐 팬을 사용한 온도시차주사 열량(DSC)분석에서 승온속도를 10℃/min으로 하였을 때, 탈수화개시온도 59.91℃± 3℃, 탈수화온도 109.18℃± 3℃, 흡열개시온도 159.72℃± 3℃ 및 흡열온도 168.82℃± 3℃, 흡열개시온도 170.23℃± 3℃, 흡열온도 178.32℃± 3℃에서 흡열피크를 보이는 토파시티닙 유리염기의 신규한 결정형을 제공한다.

또한 본 발명은 밀페 팬을 사용한 온도시차주사 열량(DSC)분석에서 승온속도를 1℃/min으로 하였을 때, 흡열개시온도 155.24℃± 3℃, 흡열온도 159.66℃± 3℃ 그리고 흡열온도 174.19℃± 3℃에서 흡열피크를 보이는 토파시티닙 유리염기의 신규한 결정형을 제공한다.

또한 본 발명은 열중량(TGA) 분석에서 100℃ 이전의 열중량 감소가 2.5%에서 3.5%를 나타내는 수분을 함유한 토파시티닙 유리염기 신규한 결정형을 제공한다.

또한 본 발명은 핵자기공명분광(NMR)에서 그 H-NMR 스펙트럼이 토파시티닙 유리염기를 나타내는 스펙트럼을 확인하였다.

본 발명자들은 종래의 토파시티닙 시트르산염의 문제점인 안정성을 극복할 수 있는 신규한 결정성 고체로서의 토파시티닙 유리염기를 얻고자 하였다.

본 발명자들은 종래의 토파시티닙 시트르산염이 갖는 단점을 극복하면서 순도가 우수하고, 물리화학적 성질 및 안정성이 우수한 토파시티닙의 신규한 결정성 유리염기를 얻고자 하였다.

그 결과, 본 발명자들은 상술한 장점을 갖는 토파시티닙 유리염기의 신규 결정형을 제조할수 있는 방법 및 조건들을 개발하였고, 이렇게 하여 제조된 토파시티닙 유리염기는 열역학적으로 안정하며, 그 자체로서 의약품의 주성분 또는 다른 염 원료를 제조 사용하기에 적합함을 규명하였다.

도 1에서 화학식 2로 표시되는 본 발명의 결정형 토파시티닙 유리염기는 토파시티닙 시트르산염과 상이한 X-선 회절 패턴을 나타낸다.

본 발명의 일구현예에 따르면, 본 발명의 결정형 토파시티닙 유리염기는 도 1에 표시된 X선 회절패턴을 갖는다.

본 발명의 일구현예에 따르면, 본 발명의 결정형 토파시티닙 유리염기는 도 2와 3의 온도시차주사(DSC)열량분석의 열량곡선의 특징을 갖는다.

본 발명의 일구현예에 따르면, 본 발명의 결정형 토파시티닙 유리염기는 도 4의 열중량분석(TGA)의 100℃ 이전의 수분에 의한 중량감소가 2.5%에서 3.5%로 나타나는 특징을 갖는다.

본 발명의 일구현예에 따르면, 본 발명의 결정형 토파시티닙 유리염기는 도 6의 핵자기공명(NMR) 분석의 H-NMR 스펙트럼을 갖는다.

본 발명은 현재 시판되고 있는 토파시티닙 시트르산염의 보관 및 저장과정에서의 문제점을 극복하고, 제형화에 용이한 성질인 우수한 점착성, 균일성을 가지며, 정전기력이 낮은 토파시티닙 유리염기의 신규한 결정형 형태로서 의약품 주성분으로 사용하기 적합하다.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 다음 단계를 포함하는 결정형 토파시티닙 유리염기의 제조방법을 제공한다:

(a) 토파시티닙 산부가염을 메틸렌클로라이드 용매에 용해하거나 현탁하고 탄산나트륨 또는 탄산수소나트륨 수용액을 가하여 pH를 조절한 후 유기층을 분리하는 단계;

(b) 상기 단계 (a)의 결과물에 흡습제로 황산마그네슘(MgSO₄) 또는 황산나트륨(Na₂SO₄)을 첨가하며 교반하는 단계;

(c) 상기 단계 (b)의 결과물을 여과한 후 감압 농축 및 건조하는 단계;

(d) 상기 단계 (c)의 결과물에 물, 아세톤, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 에틸아세테이트; 또는 아세톤 에틸아세테이트의 혼합용매(cosolvent)를 첨가하고, 격렬한 교반 및 선택적 시딩(seeding)을 통하여 결정형 토파시티닙 유리염기를 수득하는 단계.

단계(a) 토파시티닙 산부가염 처리

본 발명에서, 토파시티닙 산부가염을 메틸렌클로라이드 용매에 녹이거나 현탁하고 탄산나트륨 또는 탄산수소나트륨 수용액을 가하여 pH를 조절한 후 추출에 의해 유기층을 분리하여 얻는 단계를 포함한다.

한편 토파시티닙 산부가염에 가하는 탄산나트륨 또는 탄산수소나트륨 수용액 및 메틸렌클로라이드 용매의 처리는 그 순서에 구속되지 않는다.

본 발명에서 이용되는 토파시티닙 산부가염은 토파시티닙의 다양한 산부가염을 포함하며, 예를 들어 토파시티닙 시트르산염이 이용 가능하다.

탄산나트륨 또는 탄산수소나트륨 수용액의 처리에 의한 pH조절은 9-10의 조건을 만들어 주는 것을 의미한다.

단계 (b)-(c): 재결정화에 의한 결정형 토파시티닙 유리염기의 수득

단계 (b)에서 흡습제로 황산마그네슘 또는 황산나트륨을 첨가하며 교반하여, 수분을 제거하는 과정을 의미한다.

단계 (c)에서 결과물을 바람직하게는 5℃에서 여과하고, 50℃ 이하에서 감압 농축 및 건조를 하는 단계를 의미한다.

단계 (d): 재결정화에 의한 토파시티닙 유리염기의 신규 결정형 수득

상기 단계 (c)의 결과물 또는 상기 단계(a)의 출발물질에 물, 아세톤, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올 또는 에틸아세테이트 및 이들 중 두 가지 이상의 용매의 혼합용매(co-solvent)를 가하고 격렬한 교반 및 필요에 따라 선택적인 시딩(seeding)을 통해 결정성 토파시티닙 유리염기를 수득한다.

물, 아세톤, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올 에틸아세테이트 및 이들 중 두 가지 이상의 용매의 혼합 비율은 다양하게 제조할 수 있으며 용매의 사용양은, 구체적으로 토파시티닙 유리염기 1 g 에 대해서 10-50 ml이다.

결정화를 위해 토파시티입 유리염기와 용매를 격렬하게 교반하는 것이 유리하며, 교반 시간은 1-8 시간, 보다 구체적으로 1-4 시간이다.

교반시 본 발명에 따른 토파시티닙 결정성 유리염기를 선택적으로 시딩(seeding)하여 결정의 석출 시간을 앞당길 수 있다. 시딩은 필수적인 것은 아니지만 여러 시간 교반하여도 결정형 고체가 석출되지 않을 경우 효과적이다.

본 발명의 효과는 아래와 같다.

본 발명에 따른 토파시티닙 유리염기는 토파시티닙 시트르산염에 비하여 경시변화에 따른 유연물질의 발생을 극소화시킬 수 있어, 제품의 보관 과정에서 불순물 생성량을 낮추어 제제의 안정성을 높일 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 토파시티닙 유리염기는 제제의 용이성인 흐름도, 균일성이 뛰어나며, 정전기력이 없는 물리화학적으로 우수한 성질을 가지기 때문에 약학 조성물의 유용한 주성분으로 사용될 수 있다.

도 1은 본 발명의 실시예에 따라 제조된 토파시티닙 유리염기 신규 결정형의 분말 X-선 회절 패턴을 도시한 것이다.
도 2는 본 발명의 실시예에 따라 제조된 토파시티닙 유리염기 신규 결정형의 온도 시차주사 열량계(DSC) 승온속도 10℃/min에서 분석한 열량곡선을 도시한 것이다.
도 3은 본 발명의 실시예에 따라 제조된 토파시티닙 유리염기 신규 결정형의 온도 시차주사 열량계(DSC) 승온속도 1℃/min에서 분석한 열량곡선을 도시한 것이다.
도 4는 본 발명의 실시예에 따라 제조된 토파시티닙 유리염기 신규 결정형의 열중량(TGA) 결과를 도시한 것이다.
도 5는 본 발명의 실시예에 따라 제조된 토파시티닙 유리염기 신규 결정형의 TGA-DSC 분석 결과를 도시한 것이다.
도 6은 본 발명의 실시예에 따라 제조된 토파시티닙 유리염기의 수소핵자기공명분광 스펙트럼(H-NMR) 결과를 도시한 것이다.
도 7은 입도분석기(PSA)를 이용하여 본 발명의 실시예에 따라 제조된 토파시티닙 유리염기 신규 결정형과 토파시티닙 시트르산염의 입자도에 의한 입자의 균일성 및 분포도 비교 결과를 나타낸다.
도 8은 본 발명의 실시예에 따라 제조된 토파시티닙 유리염기 신규 결정형과 토파시티닙 시트르산염에 따른 입자의 형태를 비교하였다.
도 9은 본 발명의 실시예에 따라 제조된 토파시티닙 유리염기 신규 결정형과 토파시티닙 시트르산염의 분말사진을 비교하여 나타낸 것이다. 이는 실제 포장용기로 사용되는 PE bag에 담아 비교 하였으며, 토파시티닙 시트르산염은 정전기가 발생하여 소분에 어려움이 있고, 점착성이 있어 덩어리져 있는 반면, 본 발명에 따른 토파시티닙 유리염기 신규 결정형은 정전기도 없을 뿐만 아니라 흐름성이 좋은 균질한 상태를 확인할 수 있다.

이하 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.

[실시예 1] 토파시티닙 유리염기 신규 결정형 제조

상온에서 토파시티닙 시트르산염 5g을 메틸란클로라이드 100mL에 투입하여 용해하였다. 10% 탄산 나트륨 수용액을 투입하여 10분간 교반하면서, pH를 9-10 정도로 맞춘 후 유기층을 분리하였다. 황산마그네슘을 이용하여 유기층의 수분을 제거한 후 여과하고 45도에서 감압농축 하였다. 이후 물 100mL를 투입한 후 상온에서 2시간 교반한 후 여과하여 (물 20mL로 세척)토파시티닙 유리염기 신규 결정형 2.5g을 수득하였다.

[실시예 2] 토파시티닙 유리염기 신규 결정형 제조

상온에서 토파시티닙 시트르산염 5g을 메틸란클로라이드 100mL에 투입하여 용해하였다. 10% 탄산수소나트륨 수용액을 투입하여 10분간 교반하면서, pH를 9-10 정도로 맞춘 후 유기층을 분리하였다. 황산마그네슘을 이용하여 유기층의 수분을 제거한 후 여과하고 45도에서 감압농축 하였다. 이후 물 50mL를 투입한 후 상온에서 2시간 교반한 후 여과하여 (물 5mL로 세척)토파시티닙 유리염기 신규 결정형 2.3g을 수득하였다.

[실시예 3] 토파시티닙 유리염기 신규 결정형 제조

상온에서 토파시티닙 시트르산염 5g을 메틸렌클로라이드 100mL에 투입하여 용해하였다. 10% 탄산 나트륨 수용액을 투입하여 10분간 교반하면서, pH를 9-10 정도로 맞춘 후 유기층을 분리하였다. 황산마그네슘을 이용하여 유기층의 수분을 제거한 후 여과하고 45도에서 감압농축 하였다. 이후 아세톤 50mL를 투입한 후 상온에서 2시간 교반한 후 여과하여 (아세톤 5mL로 세척)토파시티닙 유리염기 신규 결정형 2.1g을 수득하였다.

[실시예 4] 토파시티닙 유리염기 신규 결정형 제조

상온에서 토파시티닙 시트르산염 5g을 메틸렌클로라이드 100mL에 투입하여 용해하였다. 10% 탄산 나트륨 수용액을 투입하여 10분간 교반하면서, pH를 9-10 정도로 맞춘 후 유기층을 분리하였다. 황산마그네슘을 이용하여 유기층의 수분을 제거한 후 여과하고 45도에서 감압농축 하였다. 이후 메탄올 50mL를 투입한 후 상온에서 2시간 교반한 후 여과하여 (메탄올 5mL로 세척)토파시티닙 유리염기 신규 결정형 2.5g을 수득하였다.

[실시예 5] 토파시티닙 유리염기 신규 결정형 제조

상온에서 토파시티닙 시트르산염 5g을 메틸렌클로라이드 100mL에 투입하여 용해하였다. 10% 탄산 나트륨 수용액을 투입하여 10분간 교반하면서, pH를 9-10 정도로 맞춘 후 유기층을 분리하였다. 황산마그네슘을 이용하여 유기층의 수분을 제거한 후 여과하고 45도에서 감압농축 하였다. 이후 에탄올 50mL를 투입한 후 상온에서 2시간 교반한 후 여과하여 (에탄올 5mL로 세척)토파시티닙 유리염기 신규 결정형 2.6g을 수득하였다.

[실시예 6] 토파시티닙 유리염기 신규 결정형 제조

상온에서 토파시티닙 시트르산염 5g을 메틸렌클로라이드 100mL에 투입하여 용해하였다. 10% 탄산 나트륨 수용액을 투입하여 10분간 교반하면서, pH를 9-10 정도로 맞춘 후 유기층을 분리하였다. 황산마그네슘을 이용하여 유기층의 수분을 제거한 후 여과하고 45도에서 감압농축 하였다. 이후 이소프로판올 50mL를 투입한 후 상온에서 2시간 교반한 후 여과하여 (이소프로판올 5mL로 세척)토파시티닙 유리염기 신규 결정형 2.5g을 수득하였다.

[실시예 7] 토파시티닙 유리염기 신규 결정형 제조

상온에서 토파시티닙 시트르산염 5g을 메틸렌클로라이드 100mL에 투입하여 용해하였다. 10% 탄산 나트륨 수용액을 투입하여 10분간 교반하면서, pH를 9-10 정도로 맞춘 후 유기층을 분리하였다. 황산마그네슘을 이용하여 유기층의 수분을 제거한 후 여과하고 45도에서 감압농축 하였다. 이후 에틸아세테이트 50mL를 투입한 후 상온에서 2시간 교반한 후 여과하여 (에틸아세테이트 5mL로 세척)토파시티닙 유리염기 신규 결정형 2.4g을 수득하였다.

[비교실시예 1] 대한민국 등록특허공보 10-0691590호에 따라 토파시티닙 시트르산염 제조

토파시티닙 유리염기 신규 결정형과 비교 평가하기 위해 대한민국 등록특허공보 10-0691590호에 기재된 실시예에 따라 제조하였다.

[실험예 1] 분말 X-선 회절 (PXRD)

PXRD 분석(도 1 참조)을 Cu Kα 방사선을 사용하여 (D8 Advance) X-선 분말 회절계 상에서 수행하였다. 기구에는 관 동력이 장치되어 있고, 전류량은 45 kV 및 40 mA 로 설정하였다. 발산 및 산란 슬릿은 1°로 설정하였고, 수광 슬릿은 0.2 mm 로 설정하였다. 5 에서 35° 2θ까지 3°/분 (0.4 초/0.02°간격) 의 θ-2θ 연속 스캔을 사용하였다.

[실험예 2] 열중량 분석 법(TGA)

TA사로부터 입수한 TGA Q50을 사용하여, 질소 정화 하에 30℃ 에서 400℃까지 10℃/min 스캔속도로, TGA 팬을 이용하여 측정(도 4 참조)을 수행하였다.

[실험예 3] 온도 시차주사 열량법(DSC)

TA사로부터 입수한 DSC Q20을 사용하여, 질소 정화 하에 20℃ 에서 300℃까지 10℃/min, 1℃/min 스캔속도로, 밀폐 팬에서 DSC 측정(도 2에서 도 3 참조)을 수행하였다.

[실험예 4] 토파시티닙 유리염기 신규 결정형의 용해도 평가

상기 실시예에서 제조한 토파시티닙 유리염기 신규 결정형의 수용해도 및 pH 6.8에서의 용해도를 측정하여 토파시티닙 시트르산염과 비교하기 위해 우선 토파시티닙 시트르산염 10㎍/ml에서 50㎍/ml 까지 농도를 설정하여 10배 희석 한 후 직선성을 나타내었다. 나타낸 직선성에서의 R²=0.993로 신뢰 할 수 있는 수치를 얻었다. 이 직선성을 이용하여 5ml의 water와 pH 6.8 수용액에 고체가 침전될 때까지 토파시티닙 시트르산염과 토파시티닙 유리염기 신규 결정형을 투입하였다. 그 후 1시간 교반 한 후 한시간 정치 하였다. 정치 된 용액의 상등액 1ml를 샘플링 한 후 메탄올을 이용하여 10배 희석 한 후 희석 된 용매를 HPLC로 분석한 후 토파시티닙 피크의 넓이를 이용하여 용해도를 측정하였다. HPLC 크로마토그램은 도 9에 나타내었다. 그 결과를 아래 [표 2]에 정리하였다.

	H₂O	pH6.8
시트르산염	0.294 mg/ml	0.291 mg/ml
유리염기 신규결정형	0.285 mg/ml	0.278 mg/ml

(토파시티닙 유리염기 신규 결정형 용해도)

상기 표 2 에서 보는 것과 같이 토파시티닙 유리염기 신규 결정형과 토파시티닙 시트르산염의 용해도는 동등한 결과를 나타내었다. 따라서 산부가염이 아닌 유리염기라도 산부가염과 동등한 용해도를 나타낼 수 있음이 확인되었다.

[실험예 5] 토파시티닙 유리염기 신규 결정형과 토파시티닙 시트르산염의 가속, 가혹안정성비교 평가

의약품의 안정성 시험이라 함은 의약품등의 저장방법 및 사용기간을 설정하기 위하여, 적절한 규격을 설정한 후 정해진 시험법에 근거하여 유의적인 변화를 판단하여 유효기간을 설정하게 되므로, 약물의 적정한 안정성 확보는 약물의 제품화에 있어 대단히 중요한 요소 중 하나이다.

따라서 본 발명의 토파시티닙 유리염기 신규 결정형의 제품화 가능성을 확인하기 위해 결정성 토파시티닙 시트르산염을 대조군으로 하여 ICH 가이드라인에 따라 가속 및 가혹 안정성을 실시하고 미국 약전(USP)에 기재되어 있는 액체크로마토그래피(HPLC) 분석법을 이용하여 분석한 후 그 결과를 표 3 내지 6 에 나타내었다.

	초기	3일	7일
유리염기 Total 순도	99.82%	99.81%	99.83%
아민체	검출안됨	검출안됨	검출안됨
다이하이드로체	검출안됨	검출안됨	검출안됨
벤조이체	검출안됨	검출안됨	검출안됨

{토파시티닙 유리염기 신규 결정형의 7일간 가속 안정성평가 결과 (40℃± 2℃, RH 75%)}

	초기	3일	7일
시트릭산 Total 순도	99.75%	99.68%	99.60%
아민체	0.05	0.08	0.08
다이하이드로체	0.08	0.12	0.15
벤조이체	검출안됨	검출안됨	검출안됨

{토파시티닙 시트릭산의 7일간 가속 안정성 평가 결과 (40℃± 2℃, RH 75%)}

이 결과를 보는 것과 같이 토파시티닙 시트릭산의 다이하이트로체가 0.1% 이상을 나타내는 것을 확인 할 수 있다. 그리고 본 발명의 토파시티닙 유리염기 신규결정형은 특정한 유연물질들의 생성이 되지 않는 것을 확인할 수 있다.

	초기	3일	7일
유리염기 Total 순도	99.82%	99.81%	99.82%
아민체	검출안됨	검출안됨	검출안됨
다이하이드로체	검출안됨	검출안됨	검출안됨
벤조이체	검출안됨	검출안됨	검출안됨

{토파시티닙 유리염기 신규 결정형의 7일간 가혹 안정성 평가 결과 (60℃± 2℃, RH 75%)}

	초기	3일	7일
시트릭산 Total 순도	99.75%	99.68%	99.45%
아민체	0.05	0.08	0.09
다이하이드로체	0.08	0.18	0.20
벤조이체	검출안됨	검출안됨	0.04

{토파시티닙 시트릭산의 7일간 가혹 안정성 평가 결과 (60℃± 2℃, RH 75%)}

이 결과를 보는 것과 같이 7일간의 가혹 안정성이지만 토파시티닙 시트릭산의 다이하이트로체가 0.2% 이상 나타나는 것으로 확인 되었다. 그리고 본 발명의 토파시티닙 유리염기 신규결정형은 특정한 유연물질들의 생성이 되지 않는 것이 확인 되었다. 이처럼 시트릭산과 같은 산부가염들은 저장 및 보관 안정성에서 약물로서의 치명적인 특정안 유연물질들로 인해 약물로서의 치명적인 독성을 야기시킬 수 있음을 시사할 수 있다.

따라서 본 발명의 토파시티닙 유리염기 신규 결정형은 이를 개선 할 수 있는 효과적인 원료의약물질로서의 가능성을 시사한다.

[실험예 6] 토파시티닙 유리염기 신규 결정형의 입자 흐름도, 균일성, 정전기력 비교 평가

고체 분말의 경우 타정시 부형제와의 혼합성, 입자의 흐름도, 입자의 균일성 등이 매우 중요하다. 일반적으로 입자크기분포도 상에서 입자분포가 대칭적이면서, 매우 균일한 형태가 타정이 용이하다고 알려져 있다. 본 발명의 토파시티닙 유리염기 신규 결정형과 토파시티닙 시트르산염의 입자분포도를 비교 분석하였다. 입자도는 일반적으로 고체분산법을 이용하여 마스터사이저 2000(mastersizer 2000) 장비를 이용하여 측정하였다. 상기 본 발명의 토파시티닙 유리염기와 토파시티닙 시트르산염의 입자도를 도 7에 각각 나타내었다.

도 7에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 토파시티닙 유리염기 신규 결정형의 경우 대칭적인 봉우리 형태의 일정한 분포를 보인 반면, 토파시티닙 시트르산염은 넓고 갈라진 다양한 봉우리를 같는 비대칭적인 입자분포도를 갖는다는 것이 확인 되었다.

또한 도 8에서 본 발명의 토파시티닙 유리염기 신규 결정형의 결정모양은 작은 입자 들이지면, 토파시티닙 시트르산염은 고르지 않고 서로 다르게 응집된 입자 형태를 나타낸다.

도 9에서는 각 고체들의 점착성을 확인 할 수 있다. 토파시티닙 시트르산염은 점성이 강하고, 정전기력에 의해 포장재(PE bag)에 달라붙어 있는 것을 확인 할 수 있지만, 본 발명의 토파시티닙 유리염기 신규 결정형은 정전기력이 없고 고른 입자 형태를 나타낸다는 것이 확인되었다.

결론적으로 본 발명의 토파시티닙 유리염기 신규 결정형은 토파시티닙 시트르산염보다 타정이 용이한 고체 형태로서 입자의 흐름도, 균일성, 정전기력이 매우 향상 되어 제제학적 타정에 매우 용이한 고체형태라는 것이 확인 되었다.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims

하기 화학식 2로 표시되는 토파시티닙 유리염기 결정형을 포함하는 류마티스 관절염, 건선성 관절염 및 궤양성 대장염으로 이루어진 군으로부터 선택된 질환의 치료 또는 예방용 약제학적 조성물로서, 약제학적 조성물이 경구투여용이며, 토파시티닙 유리염기 결정형이 분말 X선 회절(PXRD)분석에서 2θ회절각 6.369±0.2, 6.923±0.2, 9.02±0.2, 11.085±0.2, 12.769±0.2, 14.317±0.2, 16.957±0.2, 18.041±0.2, 19.231±0.2, 20.343±0.2, 21.288±0.2, 22.317±0.2, 23.158±0.2, 24.119±0.2, 24.955±0.2, 25.743±0.2, 26.559±0.2, 27.322±0.2, 28.153±0.2, 28.836±0.2, 29.572±0.2, 31.028±0.2, 32.35±0.2, 32.999±0.2, 33.677±0.2, 34.316±0.2에서 특징적인 피크를 갖는 분말 X선 회절 패턴을 갖는 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
[화학식 2]
삭제
제 1 항에 있어서, 상기 토파시티닙 유리염기 결정형이 도 1 에 표시된 분말 X선 회절패턴을 갖는 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
[도 1]
제 1 항에 있어서, 토파시티닙 유리염기 결정형이 온도시차주사 열량(DSC)분석에서 승온속도 10℃/min으로 하였을 때, 탈수화개시온도 59.91℃± 3℃, 탈수화온도 109.18℃± 3℃, 흡열개시온도 159.72℃± 3℃ 및 흡열온도 168.82℃± 3℃, 흡열개시온도 170.23℃± 3℃, 흡열온도 178.32℃± 3℃에서 흡열피크를 보이는 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제 1 항에 있어서, 토파시티닙 유리염기 결정형이 온도시차주사 열량(DSC)분석에서 승온온도 1℃/min으로 하였을 때, 흡열개시온도 155.24℃± 3℃, 흡열온도 159.66℃± 3℃ 그리고 흡열온도 174.19℃± 3℃에서 흡열피크를 보이는 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
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