KR102196276B1 - Probiotic composition comprising green tea fermented extract having antibacterial activity against acne-causing resident skin flora and antioxidant efficacy - Google Patents

Probiotic composition comprising green tea fermented extract having antibacterial activity against acne-causing resident skin flora and antioxidant efficacy Download PDF

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Abstract

The present invention relates to an antibacterial composition for acne-causing resident skin flora including a green tea fermented extract, and a probiotic composition with improved antioxidant efficacy. The composition is a material derived from natural products and is safe for the skin.

Description

여드름 유발 피부상재균에 대한 항균 활성 및 항산화 효능을 갖는 녹차 발효 추출물을 함유하는 프로바이오틱스 조성물{PROBIOTIC COMPOSITION COMPRISING GREEN TEA FERMENTED EXTRACT HAVING ANTIBACTERIAL ACTIVITY AGAINST ACNE-CAUSING RESIDENT SKIN FLORA AND ANTIOXIDANT EFFICACY}{PROBIOTIC COMPOSITION COMPRISING GREEN TEA FERMENTED EXTRACT HAVING ANTIBACTERIAL ACTIVITY AGAINST ACNE-CAUSING RESIDENT SKIN FLORA AND ANTIOXIDANT EFFICACY}

본 발명은 녹차 발효 추출물을 포함하는 여드름 유발 피부상재균에 대한 항균용 조성물 및 항산화 효능이 증진된 프로바이오틱스 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to an antibacterial composition for acne-causing dermatophytes and a probiotic composition with improved antioxidant efficacy, including a green tea fermented extract.

인간의 피부는 주위환경과 직접 접촉하는 기관으로서 각종 피부 질환에 관여하는 세균, 곰팡이 등의 감염이 쉽게 일어난다. 예컨대 피부에 화농을 일으키는 황색포도상구균인 스태필로코쿠스 아우레우스(Staphylococcus aureus)을 비롯하여 피Human skin is an organ that directly contacts the surrounding environment, and infections such as bacteria and fungi that are involved in various skin diseases easily occur. E.g., blood, including the Staphylococcus aureus in nasal pillow Stability kusu aureus (Staphylococcus aureus) causing maturation in skin

부 상재균인 스태필로코쿠스 에피더미디스(Staphlyococcus epidermidis), 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 등이 피부에 존재하며, 이러한 균들은 피부상에 분비된 피지나 땀을 분해시켜 냄새를 발생시키며, 이와 더불어 그 분해 산물들은 피부에 자극을 주고 염증을 발생시킨다. 특히 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)는 지방산 분해효소인 리파아제(lipase)를 이용하여 피지를 분해시켜서 유리 지방산을 생성시킨다. 이들 유리지방산은 피부에 자극을 줄 뿐만 아니라 여드름에서 볼 수 있는 붉은 발진인 구진, 농포, 결절 등의 염증성 병변을 유발시킨다. Staphlyococcus epidermidis , an injured germ, and Propionibacterium acnes , an acne germ, are present in the skin.These germs decompose sebum or sweat secreted on the skin. It produces odor, and along with its decomposition products, it irritates the skin and causes inflammation. In particular, Propionibacterium acnes uses a fatty acid degrading enzyme, lipase, to decompose sebum to produce free fatty acids. These free fatty acids not only irritate the skin, but also cause inflammatory lesions such as papules, pustules, and nodules, which are red rashes found in acne.

이러한 세균들에 대한 항균성 물질로서 트리클로카반(triclocarban), 트리클로산(triclosan) 등 항균성 화합물이 사용되어 왔으나 장기간 사용시 피부 작열감, 화끈거림, 피부 발적 등의 피부 부작용을 유발하는 것으로 알려져 있다.Antimicrobial compounds such as triclocarban and triclosan have been used as antimicrobial substances against these bacteria, but they are known to cause skin side effects such as skin burning, burning, and redness when used for a long time.

상기와 같이 종래의 항균용 합성 물질 및 이를 포함하는 화장료 조성물은 피부 자극이 발생될 우려가 있고, 피부 트러블이 발생할 수 있다는 점에서 새로운 조성의 항균 물질이 필요한 실정이다.As described above, the conventional antimicrobial synthetic material and cosmetic composition including the same may cause skin irritation, and skin troubles may occur. Accordingly, a new antimicrobial material is required.

한국등록특허 제 10-0883399 호Korean Patent Registration No. 10-0883399

본 발명의 목적은 녹차 발효 추출물을 포함하는 여드름 유발 피부상재균에 대한 항균용 조성물을 제공하고자 하는 것이다.It is an object of the present invention to provide a composition for antibacterial against acne-causing dermatophytes comprising a green tea fermented extract.

본 발명의 다른 목적은 상기 녹차 발효 추출물을 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물을 제공하고자 하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a cosmetic composition for improving acne comprising the green tea fermented extract.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 녹차 발효 추출물을 포함하는 항산화 효능이 증진된 프로바이오틱스 조성물을 제공하고자 하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a probiotic composition containing the green tea fermented extract with improved antioxidant efficacy.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 프로바이오틱스 조성물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하고자 하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a cosmetic composition comprising the probiotic composition.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 프로바이오틱스 조성물을 포함하는 식품 조성물을 제공하고자 하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a food composition comprising the probiotic composition.

상기와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명의 일 측면은 녹차 발효 추출물을 포함하는 여드름 유발 피부상재균에 대한 항균용 조성물에 관한 것이다.An aspect of the present invention for achieving the above object relates to a composition for antibacterial against acne-causing dermatophytes, including a green tea fermented extract.

본 발명에서, “녹차(Camellia Sinensis)”는 차나무과에 속하는 상록활엽관목으로, 이 잎을 건조한 차는 다방면에 활용되고 있다. 특히 항산화 작용, 항암작용, 심혈관계에 있어 혈중 지질 감소 작용, 혈액 순환 촉진 작용을 나타내는 것으로 알려져 있다. In the present invention, “green tea ( Camellia Sinensis )” is an evergreen broad-leaved shrub belonging to the tea tree family, and tea with dried leaves is used in many ways. In particular, it is known to exhibit antioxidant, anti-cancer, cardiovascular, blood lipid-reducing, and blood circulation-stimulating effects.

본 발명의 “추출물”은 녹차의 추출 처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액들의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다. The "extract" of the present invention refers to an extract obtained by extracting green tea, a dilution or concentrate of the extracts, a dried product obtained by drying the extract, a preparation or purified product of the extract, or a mixture thereof, the extract itself and the extract It includes extracts of all formulations that can be formed using.

상기 추출물은, 상기 녹차의 천연, 잡종 또는 변종 식물로부터 추출될 수 있고, 식물 조직 배양물로부터도 추출이 가능하다.The extract may be extracted from natural, hybrid or variant plants of the green tea, and may also be extracted from plant tissue culture.

상기 추출물을 추출하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2 종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다. The method of extracting the extract is not particularly limited, and may be extracted according to a method commonly used in the art. Non-limiting examples of the extraction method include a hot water extraction method, an ultrasonic extraction method, a filtration method, a reflux extraction method, and the like, which may be performed alone or in combination of two or more methods.

상기 녹차 추출물의 추출용매 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물, C1 내지 C4의 무수 또는 저급 알코올, 상기 물과 저급 알코올의 혼합 용매, 아세톤, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸아세테이트, 클로로포름으로 이루어진 군에서 선택되는 1 종 이상으로, 단독으로 2종 이상 혼합하여 사용할 수 있다.The type of the extraction solvent of the green tea extract is not particularly limited, and any solvent known in the art may be used. Non-limiting examples of the extraction solvent include water, C 1 to C 4 anhydrous or lower alcohol, a mixed solvent of water and lower alcohol, acetone, 1,3-butylene glycol, ethyl acetate, selected from the group consisting of chloroform It can be used alone or in combination of two or more.

본 발명에서 “발효”는 발효 균주 자신이 가지고 있는 효소를 이용해 유기물을 분해시키는 과정을 의미한다. 발효 균주를 통한 발효과정을 거친 원료는 발효 전보다 최소 2배에서 최대 수십배의 효과가 증대되는 것으로 알려져 있다. 특히 발효를 거친 대사물질은 피부에 좋은 각종 아미노산, 유기산, 항산화물질을 함유하여 피부대사를 촉진시켜 피부결을 매끄럽게 가꿔줄 수 있으며, 발효과정을 거치면서 입자가 작아지고 중금속 등의 독성이 분해되어 피부트러블이나 알레르기 부작용을 완화시켜줄 수 있다고 알려져 있다.In the present invention, "fermentation" refers to a process of decomposing organic matter using enzymes possessed by the fermentation strain itself. It is known that raw materials that have undergone a fermentation process through a fermentation strain have an effect of at least two to tens of times greater than before fermentation. In particular, metabolites that have undergone fermentation contain various amino acids, organic acids, and antioxidants that are good for the skin, and can promote skin metabolism to smooth the skin texture, and through the fermentation process, particles become smaller and toxicities such as heavy metals are decomposed. It is known that it can relieve skin problems or allergic side effects.

본 발명에서는 녹차 추출물을 발효시킬 경우, 여드름 유발 피부상재균에 대한 항균효과가 우수해짐을 확인하였다. 이에, 본 발명에서는 녹차 발효 추출물을 포함하는 항균용 조성물을 제공하고자 한다.In the present invention, when the green tea extract is fermented, it was confirmed that the antibacterial effect against acne-causing skin flora was excellent. Thus, in the present invention, to provide an antibacterial composition comprising a green tea fermented extract.

구체적으로, 상기 발효 추출물은 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus Plantarum) 균주를 접종하여 수득한 것일 수 있다. 보다 구체적으로 상기 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus Plantarum) 균주는 락토바실러스 플란타룸 AMI-1205 (Lactobacillus Plantarum AMI-1205) KCCM12713P일 수 있다.Specifically, the fermentation extract may be obtained by inoculating a Lactobacillus Plantarum strain. More specifically, the Lactobacillus Plantarum strain may be Lactobacillus Plantarum AMI-1205 ( Lactobacillus Plantarum AMI-1205) KCCM12713P.

본 발명에서 “락토바실러스 플란타룸 AMI-1205 (Lactobacillus Plantarum AMI-1205)”은 열무 김치에서 분리 및 동정된 락토바실러스 플란타룸의 신규한 유산균으로, 한국미생물보존센터에 2020년 5월 8일자로 기탁하였다(수탁번호 KCCM12713P).In the present invention, “ Lactobacillus Plantarum AMI-1205” is a novel lactic acid bacteria of Lactobacillus plantarum isolated and identified from Yulmu Kimchi, as of May 8, 2020 by the Korea Microbiology Conservation Center. It was deposited with (accession number KCCM12713P).

본 발명의 일 실시예에서 녹차를 건조시킨 후 분쇄하여 정제수와 혼합하고 120 내지 125℃ 온도 범위에서 가열 멸균하였다. 상기 멸균된 녹차에 락토바실러스 플란타룸 균주를 접종시킨 후 30~37℃ 온도 범위에서 3~10 일간 발효시킴으로써 녹차 발효 추출물을 수득하였다.In one embodiment of the present invention, green tea was dried, pulverized, mixed with purified water, and heat sterilized at a temperature of 120 to 125°C. The sterilized green tea was inoculated with a Lactobacillus plantarum strain and then fermented at a temperature range of 30 to 37° C. for 3 to 10 days to obtain a green tea fermented extract.

본 발명에서 “항균(antibiotic)”은 미생물의 성장 또는 생존율을 감소, 방지, 억제 또는 제거하는 것을 말하며, “항균용 조성물”은 세균과 같은 미생물의 생육을 저해하는 활성을 가진 조성물로서, 항미생물제를 총칭하는 의미인 항생제와 같은 의미일 수 있고, 항균 효과가 요구되는 다양한 모든 형태가 포함될 수 있으며, 예를 들어, 화장품, 식품 첨가제, 사료 첨가제, 의약품 또는 의약외품 등의 형태일 수 있다.In the present invention, "antibiotic" refers to reducing, preventing, inhibiting or removing the growth or survival rate of microorganisms, and "antibacterial composition" is a composition having an activity to inhibit the growth of microorganisms such as bacteria, and antimicrobial agents It may have the same meaning as antibiotics, which is a generic term, and may include all types of various forms that require antibacterial effect, and may be, for example, cosmetics, food additives, feed additives, pharmaceuticals, or quasi-drugs.

구체적으로, 상기 항균용 조성물은 프로피오니박테리움 아크네(Propionibacterium acnes)에 대한 항균 활성을 가지는 것일 수 있다.Specifically, the antimicrobial composition may be one having antibacterial activity against Propionibacterium acnes .

본 발명의 일 실시예에서는 락토바실러스 플란타룸 균을 이용하여 농도별 항균 활성을 확인한 결과, 여드름 유발 피부상재균에 대한 최소억제농도가 낮으며, 전반적으로 여드름 유발 피부상재균에 대한 성장 저해 활성 효과가 우수하게 나타남을 확인하였다(표 2 및 표 3).In one embodiment of the present invention, as a result of confirming the antimicrobial activity by concentration using Lactobacillus plantarum bacteria, the minimum inhibitory concentration against acne-causing skin flora is low, and overall growth inhibitory activity against acne-causing skin flora It was confirmed that the effect was excellent (Tables 2 and 3).

본 발명의 다른 일 측면은 상기 조성물을 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물에 관한 것일 수 있다.Another aspect of the present invention may relate to a cosmetic composition for improving acne comprising the composition.

본 발명에서 “여드름”은 심상성 좌창으로, 모공에서 피지의 생산이 증가되고 피부상피세포가 비정상적으로 각화되어 모공의 개구부를 막으며 이곳에 여드름 원인 세균이 증식하여 염증을 발생시킴으로써 유발되는 피부 질환 중 하나이다. 상기 “여드름 개선”이란 여드름 유발시킨 원인 세균의 생육을 저해 및 억제함으로써 모공의 폐쇄 및 피지의 과잉 분비를 억제하여 피부 상태를 개선시키는 것을 의미한다.In the present invention, “acne” refers to acne vulgaris, a skin disease caused by increased production of sebum in the pores and abnormal keratinization of skin epithelial cells to block the opening of the pores, where acne-causing bacteria proliferate and cause inflammation. Is one of them. The “acne improvement” refers to improving the skin condition by inhibiting and inhibiting the growth of bacteria that cause acne, thereby inhibiting pore closure and excessive secretion of sebum.

본 발명의 일 실시예에서는 락토바실러스 플란타룸으로 발효시킨 본 발명의 녹차 발효 추출물이 상기 여드름 유발 원인균 중 하나인 프로피오니박테리움 아크네(Propionibacterium acnes)에 대하여 항균 활성이 우수함을 확인하였다(표 2 및 표 3). 이를 통해, 여드름 개선용 화장료 조성물에 효과적으로 활용할 수 있음을 확인하였다.In one embodiment of the present invention, it was confirmed that the fermented green tea extract of the present invention fermented with Lactobacillus plantarum has excellent antibacterial activity against Propionibacterium acnes , one of the acne-causing bacteria (Table 2). And Table 3). Through this, it was confirmed that it can be effectively used in a cosmetic composition for improving acne.

본 발명의 또 다른 일 측면은 녹차 발효 추출물을 포함하는 항산화 효능이 증진된 프로바이오틱스 조성물에 관한 것이다.Another aspect of the present invention relates to a probiotic composition containing a green tea fermented extract with enhanced antioxidant efficacy.

본 발명에서, “항산화”란, 산화를 억제하는 작용을 의미하는 것으로, 인체는 산화촉진물질과 산화억제물질이 균형을 이루고 있으나, 여러 가지 요인들로 인하여 이러한 균형 상태를 잃고 산화를 촉진하는 방향으로 기울게 되면, 생체 내에 산화적 스트레스(oxidative stress)가 유발되어 세포손상 및 병리적 질환을 유발하게 된다. 이러한 산화적 스트레스의 직접적 원인이 되는 활성 산소종(reactive oxygen species, ROS)은 화학적으로 불안정하고 반응성이 높아 DNA, 단백질, 지질 및 탄수화물과 같은 여러 생체물질과 쉽게 반응할 수 있으며, 생체 내 고분자들을 공격하여 세포와 조직에 비가역적인 손상을 일으키거나 돌연변이, 세포독성 및 암 등을 초래하게 되고, 노화의 직접적인 원인이 되기도 한다. 이러한 활성 산소종을 제거하거나 감소시킴으로써 항산화 효과를 얻어 노화를 방지하고 건강을 유지할 수 있게 된다.In the present invention, “antioxidation” refers to an action of inhibiting oxidation, and in the human body, an oxidation promoting substance and an oxidation inhibitor are in balance, but due to various factors, the balance is lost and the direction of promoting oxidation When inclined toward, oxidative stress is induced in a living body, leading to cell damage and pathological diseases. Reactive oxygen species (ROS), which are the direct cause of oxidative stress, are chemically unstable and highly reactive, so they can easily react with various biomaterials such as DNA, proteins, lipids, and carbohydrates. Attacks cause irreversible damage to cells and tissues, or cause mutations, cytotoxicity and cancer, and are also a direct cause of aging. By removing or reducing these reactive oxygen species, antioxidant effects are obtained, preventing aging and maintaining health.

본 발명에서 “프로바이오틱스(probiotics)”란 건강에 유익한 효과를 내는 살아있는 미생물을 통칭하는 개념으로 유산균이라고도 불리운다. 일반적으로 건강에 도움을 주는 장 속 세균을 총칭하며, 최근에는 화장품 등의 미용 용도 또는 건강기능식품 용도로 다양하게 활용되고 있다.In the present invention, "probiotics" is a concept collectively referred to as living microorganisms that exert beneficial effects on health and are also called lactic acid bacteria. In general, it is a generic term for bacteria in the intestines that help health, and recently, it has been used in various ways for beauty purposes such as cosmetics or health functional foods.

구체적으로, 상기 발효 추출물은 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus Plantarum) 균주를 접종하여 수득한 것일 수 있으며, 보다 구체적으로, 상기 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus Plantarum) 균주는 락토바실러스 플란타룸 AMI-1205(Lactobacillus Plantarum AMI-1205) KCCM12713P인 것일 수 있다.Specifically, the fermentation extract may be obtained by inoculating a Lactobacillus Plantarum strain, and more specifically, the Lactobacillus Plantarum strain is Lactobacillus Plantarum AMI-1205 ( Lactobacillus Plantarum AMI-1205) It may be KCCM12713P.

본 발명의 일 실시예에서는 자유라디칼(free radical) 소거활성을 측정하여 항산화 효과를 확인하였으며, 특히 락토바실러스 플란타룸 균주를 이용하여 수득된 녹차 발효 추출물이 다른 균주로 발효시킨 녹차 발효 추출물에 비해 항산화 효과가 현저하게 증가함을 확인하였는 바(표 4 및 표 5), 상기 프로바이오틱스 조성물의 항균활성 증진 효과가 우수함을 확인하였다.In one embodiment of the present invention, the antioxidant effect was confirmed by measuring the free radical scavenging activity. In particular, the green tea fermented extract obtained using the Lactobacillus plantarum strain was compared to the green tea fermented extract fermented with other strains. It was confirmed that the antioxidant effect was significantly increased (Tables 4 and 5), and it was confirmed that the antibacterial activity enhancing effect of the probiotic composition is excellent.

본 발명의 또 다른 일 측면은 상기 프로바이오틱스 조성물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.Another aspect of the present invention relates to a cosmetic composition comprising the probiotic composition.

구체적으로 상기 화장료 조성물은 항산화용인 것일 수 있다.Specifically, the cosmetic composition may be for antioxidant.

상기 녹차 발효 추출물은 건조중량으로 화장료 조성물 총 중량에 대해 0.001중량% 내지 30.0 중량% 포함될 수 있다. 더욱 구체적으로는 0.01중량% 내지 20중량%로 포함될 수 있다. 상기 범위 내에서 우수한 여드름 개선 및 항산화 효과가 나타나는 이점이 있으며, 조성물의 제형이 안정화되는 이점이 있다.The green tea fermented extract may be included in a dry weight of 0.001% to 30.0% by weight based on the total weight of the cosmetic composition. More specifically, it may be included in 0.01% to 20% by weight. There is an advantage in that excellent acne improvement and antioxidant effects appear within the above range, and there is an advantage in that the formulation of the composition is stabilized.

본 발명의 화장료 조성물은 용액, 외용 연고, 크림, 폼, 영양 화장수, 유연 화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업 베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린 크림, 선 오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면 활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패취 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The cosmetic composition of the present invention is a solution, external ointment, cream, foam, nutrient lotion, flexible lotion, pack, softening water, emulsion, makeup base, essence, soap, liquid detergent, bathing agent, sunscreen cream, sun oil, suspension, emulsion It can be prepared in a formulation selected from the group consisting of liquid, paste, gel, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing, oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation, patch, and spray, but is limited thereto. no.

본 발명의 상기 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1 종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면 활성제, 보습제, 저급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The cosmetic composition of the present invention may additionally include one or more cosmetically acceptable carriers blended in general skin cosmetics, and as common ingredients, for example, oil, water, surfactants, moisturizers, lower alcohols, thickeners , A chelating agent, a colorant, a preservative, a fragrance, and the like may be appropriately blended, but are not limited thereto.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 화장료 조성물의 제형에 따라 다양하다.The cosmetically acceptable carrier included in the cosmetic composition of the present invention varies depending on the formulation of the cosmetic composition.

본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화 아연 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.When the formulation of the present invention is an ointment, paste, cream or gel, animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc, zinc oxide, etc. May be used, but is not limited thereto. These may be used alone or in combination of two or more.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 등이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로하드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate, polyamide powder, etc. may be used as a carrier component. In particular, in the case of a spray, additional chlorofluorohard It may include a propellant such as locarbon, propane/butane or dimethyl ether, but is not limited thereto. These may be used alone or in combination of two or more.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제 등이 이용될 수 있으며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일 등이 이용될 수 있고, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, a solubilizing agent or an emulsifying agent may be used as a carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, Propylene glycol, 1,3-butyl glycol oil, and the like may be used, and in particular, cottonseed oil, peanut oil, corn germ oil, olive oil, castor oil and sesame oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or fatty acid ester of sorbitan May be used, but is not limited thereto. These may be used alone or in combination of two or more.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타하이드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, as a carrier component, a liquid diluent such as water, ethanol or propylene glycol, an ethoxylated isostearyl alcohol, a suspending agent such as polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, micro Crystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar, or tracant may be used, but are not limited thereto. These may be used alone or in combination of two or more.

또한, 본 발명의 조성물은 피부에 직접 도포하거나 살포하는 등의 경피 투여 방법으로 사용될 수 있으며, 본 발명 조성물의 투여 경로는 목적조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다. In addition, the composition of the present invention may be used as a transdermal administration method such as direct application or spraying on the skin, and the administration route of the composition of the present invention may be administered through any general route as long as it can reach the target tissue.

본 발명의 조성물의 사용량은 연령, 병변의 정도 등의 개인 차이나 제형에 따라 적절하게 조절될 수 있으며, 1일 1회 내지 수회 적?韜?을 피부에 도포하여 1 주일 내지 수개월 사용될 수 있다.The amount of use of the composition of the present invention may be appropriately adjusted according to individual differences or formulations such as age and degree of lesions, and may be used from one week to several months by applying one or several times a day to the skin.

본 발명의 또 다른 일 측면은 상기 프로바이오틱스 조성물을 포함하는 식품 조성물에 관한 것이다.Another aspect of the present invention relates to a food composition comprising the probiotic composition.

상기 “프로바이오틱스”에 관한 설명은 전술한 바와 동일하다.The description of the “probiotics” is the same as described above.

구체적으로 상기 식품 조성물은 동물용인 것일 수 있으며, 더욱 구체적으로 반려동물용인 것일 수 있다.Specifically, the food composition may be for animals, and more specifically may be for companion animals.

본 발명에서 “반려동물(Companion animal)”은 강아지, 고양이, 햄스터, 토끼, 닭, 이구아나, 기니피그, 고슴도치, 저빌, 달팽이, 라쿤, 앵무새, 도마뱀, 열대어를 포함한 어류 등 인간과 더불어 살아가는 동물은 종류 불문하고 모두 포함한다. 상기 반려동물용 건강기능식품은 반려동물의 건강을 증진 및/또는 유지시키거나 신체 컨디션 유지를 위해 반려 동물이 섭취하는 식품을 모두 일컫는다.In the present invention, "Companion animal" refers to animals that live with humans, such as dogs, cats, hamsters, rabbits, chickens, iguanas, guinea pigs, hedgehogs, gerbils, snails, raccoons, parrots, lizards, and fish including tropical fish. Includes all regardless. The health functional food for companion animals refers to all foods consumed by companion animals to promote and/or maintain the health of companion animals or maintain physical condition.

본 발명의 녹차 발효 추출물을 첨가할 수 있는 식품은 육류, 빵, 소시지, 초콜릿류, 스넥류, 캔디류, 과자류, 라면, 피자, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 비타민 복합제, 건강기능성 보조식품 등이 있다. Foods to which the green tea ferment extract of the present invention can be added include meat, bread, sausage, chocolate, snacks, candy, confectionery, ramen, pizza, other noodles, gums, dairy products including ice cream, various soups, beverages, tea , Vitamin complexes, and health functional supplements.

본 발명의 일 실시예에서는 기존 동물 사료 제조과정 마지막 단계에 상기 녹차 발효 추출물을 분무하여 건조시킴으로써 항산화 및 프로바이오틱 활성이 우수한 사료를 제조하였다.In an embodiment of the present invention, a feed having excellent antioxidant and probiotic activity was prepared by spraying and drying the green tea fermented extract at the last step of the conventional animal feed manufacturing process.

상기 식품의 종류는 구체적으로 건강기능식품일 수 있다. 상기 건강기능 식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 증진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 점증제, pH 조절제, 안정화제, 보존제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 단독으로 또는 조합으로 사용될 수 있으며, 이러한 첨가제의 비율은 조성물 전체 중량당 0.001 내지 50 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.The type of food may specifically be a health functional food. The health functional foods include various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), synthetic flavors and flavoring agents such as natural flavors, colorants and enhancers (cheese, chocolate, etc.), pectic acid and its salts, organic acids, protective colloidal growth It may contain an agent, a pH adjuster, a stabilizer, a preservative, glycerin, alcohol, a carbonation agent used in carbonated beverages, and the like. These components may be used alone or in combination, and the proportion of these additives is generally selected from 0.001 to 50 parts by weight per total weight of the composition.

상기 건강기능식품은 식품의 생체 조절 기능을 강조한 식품으로 물리적, 생화학적, 생물공학적인 방법을 이용하여 특정 목적에 작용 및 발현하도록 부가가치를 부여한 식품이다. 이러한 건강기능 식품의 성분은 생체 방어와 신체 리듬의 조절, 질환의 방지 및 회복에 관계하는 신체 조절 기능을 생체에 대하여 충분히 발휘하도록 설계하여 가공하게 되며, 식품으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제, 감미료 또는 기능성 원료를 함유할 수 있다. The health functional food is a food that emphasizes the biological regulation function of food, and is a food that has added value to act and express it for a specific purpose by using physical, biochemical, and bioengineering methods. Ingredients of these health functional foods are designed and processed to fully exert the body's control functions related to body defense, regulation of body rhythm, prevention and recovery of diseases to the living body, and food additives, sweeteners, or functional foods acceptable as foods. It may contain raw materials.

상기 건강기능식품은 정제, 과립, 분말, 캅셀, 액상의 용액 및 환으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 제형일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. The health functional food may be any one formulation selected from the group consisting of tablets, granules, powders, capsules, liquid solutions, and pills, but is not limited thereto.

또한, 상기 식품의 종류는 식품 첨가제일 수 있으며, 상기 식품 첨가제는 식품의 제조, 가공, 또는 보존을 위해 식품에 첨가, 혼합, 침윤 기타의 방법에 의해 사용되는 물질을 의미한다. 상기 식품 첨가제는 천연물과 합성품이 있으며, 기능과 용도에 따라 분류할 수 있다. 현재 한국에 식품첨가물로 허가되어 있는 품목은 화학적 합성품 370여종, 천연첨가물 50여종이며, 주로 용도에 따라 보존료, 살균제, 산화방지제, 착색료, 발색제, 표백제, 조미료, 감미료, 착향료, 팽창제, 강화제, 개량제, 유화제, 증점제(호료) 및 안정제, 피막제, 껌 기초제, 소포제, 용제, 이형제, 방충제, 품질개량제와 기타 식품제조용 첨가제 등으로 분류되어 쓰이고 있다.In addition, the type of food may be a food additive, and the food additive refers to a substance used by a method such as adding, mixing, infiltrating or adding to food for manufacturing, processing, or preserving food. The food additives include natural products and synthetic products, and can be classified according to functions and uses. Currently, 370 kinds of chemical synthetic products and 50 kinds of natural additives are approved as food additives in Korea. Depending on the purpose, preservatives, fungicides, antioxidants, coloring agents, coloring agents, bleaching agents, seasonings, sweeteners, flavoring agents, expanding agents, strengthening agents, and improving agents , Emulsifiers, thickeners and stabilizers, coating agents, gum base agents, defoaming agents, solvents, releasing agents, insect repellents, quality improvers and other additives for food manufacturing.

상기 식품첨가제의 형태는 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 액상 형태를 포함할 수 있으며 구체적으로는 캡슐의 형태일 수 있으나, 상기 형태에 제한되는 것은 아니다.The form of the food additive may include a powder, granule, tablet, capsule or liquid form, and specifically may be a capsule form, but is not limited to the form.

본 발명의 녹차 발효 추출물을 식품용 조성물로 사용할 경우, 상기 녹차 발효 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용하고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 상기 녹차 발효 추출물의 혼합량은 그의 사용 목적(예방, 건강 또는 개선, 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 나아가, 항균 용도로서 각종 생활용품, 반려용품 등에 제한되지 않고 적용될 수 있다.When the green tea fermented extract of the present invention is used as a food composition, the green tea fermented extract may be added as it is or used with other foods or food ingredients, and may be appropriately used according to a conventional method. The mixing amount of the green tea fermented extract may be appropriately determined according to the purpose of use (prevention, health or improvement, therapeutic treatment). Furthermore, as an antibacterial use, it can be applied without limitation to various household products, companion products, and the like.

본 발명의 녹차 발효 추출물은 여드름 유발 피부상재균에 대한 항균 효능 및 항산화 효과가 우수하다.The green tea fermented extract of the present invention is excellent in antibacterial and antioxidant effects against acne-causing skin flora.

또한, 본 발명의 조성물은 천연물 유래의 물질로서 피부에 안전하여 여드름 개선 및/또는 항산화용도의 화장료 조성물로의 활용도가 높다.In addition, the composition of the present invention is a natural substance-derived material that is safe for the skin and has high utilization as a cosmetic composition for improving acne and/or for antioxidant purposes.

본 발명의 효과는 상기한 효과로 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 상세한 설명 또는 청구범위에 기재된 발명의 구성으로부터 추론 가능한 모든 효과를 포함하는 것으로 이해되어야한다.The effects of the present invention are not limited to the above effects, and should be understood to include all effects that can be deduced from the configuration of the invention described in the detailed description or claims of the present invention.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by examples. However, the following examples are only illustrative of the present invention, and the present invention is not limited by the following examples.

실시예 1-2. 녹차 발효 추출물의 제조Example 1-2. Preparation of green tea fermented extract

정제수로 세척하고 건조시킨 녹차 전초를 조분쇄하여 20 배의 추출용매(정제수)로 121℃ 15분간 고압 열수추출 하였다. 발효를 위한 종균은 멸균된 유산균 배양배지(Lactobacillus MRS Broth, 디프코, 미합중국)에서 배양된 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus Plantarum)을 사용하였으며, 배양이 완료된 후 균체만 회수하여 1x109 cfu/ml 농도로 녹차 추출물에 접종하였다. 이때, 발효 균주는 열무 김치에서 직접 분리한 락토바실러스 플란타룸 AMI-1205(Lactobacillus plantarum AMI-1205) KCCM12713P 및 한국 미생물 보존센터에서 분양받은 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus Plantarum) KCCM 11322을 이용하였다. 발효는 발효조를 이용하여 1~3일간, 25~35°C로 유지하며 진행하였다. 발효가 완료된 녹차 발효물은 원심분리하여 균체를 제거하고 0.2 ㎛ 여과지를 이용하여 최종 여과하였다. 추출 여과된 녹차 추출물은 동결건조하여 사용하였다. The green tea outpost washed with purified water and dried was coarsely pulverized and extracted with hot water at 121°C for 15 minutes with 20 times the extraction solvent (purified water). Inoculum for the fermentation was used for the Lactobacillus Planta room (Lactobacillus Plantarum) cultured in a sterilized lactic acid bacteria culture medium (Lactobacillus MRS Broth, deep nose, USA), to recover only the cells after the culture is completed, 1x10 9 cfu / ml concentration Was inoculated into green tea extract. At this time, the fermentation strain was Lactobacillus plantarum AMI-1205 ( Lactobacillus plantarum AMI-1205) KCCM12713P, which was directly isolated from Yulmu kimchi, and Lactobacillus Plantarum , which was sold in Korea Microbial Conservation Center. KCCM 11322 was used. Fermentation was carried out while maintaining at 25 to 35 °C for 1 to 3 days using a fermentation tank. The fermented green tea after the fermentation was completed was centrifuged to remove the cells, and finally filtered using 0.2 μm filter paper. The extracted filtered green tea extract was lyophilized and used.

비교예 1. 녹차 추출물 제조Comparative Example 1. Preparation of green tea extract

정제수로 세척하고 건조시킨 녹차 전초를 조분쇄하여 20 배의 추출용매(정제수)로 121℃ 15분간 고압 열수추출 하였다. 추출된 녹차 추출물을 원심분리하여 추출 상등액을 회수하고 추출물을 0.2 ㎛의 크기를 가진 필터로 여과하여 녹차 추출물을 제조하였다. 추출 여과된 녹차 추출물은 동결건조하여 사용하였다. The green tea outpost washed with purified water and dried was coarsely pulverized and extracted with hot water at 121°C for 15 minutes with 20 times the extraction solvent (purified water). The extracted green tea extract was centrifuged to recover the extraction supernatant, and the extract was filtered through a filter having a size of 0.2 µm to prepare a green tea extract. The extracted filtered green tea extract was lyophilized and used.

비교예 2-7. 녹차 발효 추출물 제조Comparative Example 2-7. Manufacture of fermented green tea extract

상기 실시예 1-2와 녹차 발효 추출물 제조 방법은 동일하며, 다만 발효 균주를 락토바실러스 플란타룸 대신 한국 미생물 보존센터에서 분양받은 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides), 락토바실러스 쿠르바투스(Lactobacillus curvatus), 류코노스톡 시트리움(Leuconostoc citreum)를 각각 사용하였다.The method for preparing the fermented green tea extract was the same as in Example 1-2, except that the fermented strain was purchased from the Korea Microbial Conservation Center instead of Lactobacillus plantarum, Leuconostoc mesenteroides , and Lactobacillus curbatus ( Lactobacillus curvatus ) and Leuconostoc citreum were used, respectively.

실시예 및 비교예는 하기 표 1에 나타내었다.Examples and comparative examples are shown in Table 1 below.

실시예Example 성분ingredient 균주Strain 실시예 1Example 1 녹차green tea Lactobacillus Plantarum AMI-1205 KCCM12713P Lactobacillus Plantarum AMI-1205 KCCM12713P 실시예 2Example 2 Lactobacillus plantarum KCCM 11322 Lactobacillus plantarum KCCM 11322 비교예 1Comparative Example 1 -- 비교예 2Comparative Example 2 Leuconosstoc citreum AMI-1227 Leuconosstoc citreum AMI-1227 비교예 3Comparative Example 3 Leuconostoc mesenteroides AMI-1228 Leuconostoc mesenteroides AMI-1228 비교예 4Comparative Example 4 Lactobacillus curvatus AMI-1214 Lactobacillus curvatus AMI-1214 비교예 5Comparative Example 5 Leuconostoc mesenteroides AMI-1208 Leuconostoc mesenteroides AMI-1208 비교예 6Comparative Example 6 Leuconostoc mesenteroides AMI-1209 Leuconostoc mesenteroides AMI-1209 비교예 7Comparative Example 7 Leuconostoc mesenteroides AMI-1224 Leuconostoc mesenteroides AMI-1224

실험예 1. 발효 균주에 대한 항균 효과 확인Experimental Example 1. Confirmation of antibacterial effect on fermentation strains

본 발명의 녹차 발효 추출물에 활용되는 발효 균주에 대한 항균 활성을 확인하기 위하여, broth micro dilution 방법으로 최소억제농도(Minimum inhibitory concentration, MIC)를 측정하였다.In order to confirm the antibacterial activity against the fermented strain used in the green tea fermented extract of the present invention, the minimum inhibitory concentration (MIC) was measured by the broth micro dilution method.

먼저, 96 웰(well) 플레이트에 OD600=0.1의 프로피오니박테리움 아크네스를 넣어준 후, 실시예 1 및 2, 비교예 1 내지 7에 사용된 발효 균주 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides), 락토바실러스 쿠르바투스(Lactobacillus curvatus), 류코노스톡 시트리움(Leuconostoc citreum)를 각각 사용하였다.First, after putting Propionibacterium acnes of OD600 = 0.1 in a 96 well plate, the fermentation strain Lactobacillus plantarum used in Examples 1 and 2 and Comparative Examples 1 to 7 ( Lactobacillus plantarum ), Lactobacillus mesenteroides ( Leuconostoc mesenteroides ), Lactobacillus curvatus ( Lactobacillus curvatus ), and Leuconostoc citreum ( Leuconostoc citreum ) were used, respectively.

상기 균주들을 최대 50 mg/mL로부터 2배씩 희석하여 처리하였다. 각 플레이트는 37º에서 24시간 배양한 다음, 세포의 성장을 억제하는 최소 농도로 MIC (Minimum Inhibitory concentration) 값을 구하였다. 공시균으로서 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium KCTC 3314)를 사용하였다. 모든 실험은 3회 이상 반복 수행하였다. The strains were treated by diluting twice from a maximum of 50 mg/mL. Each plate was incubated at 37º for 24 hours, and then the MIC (Minimum Inhibitory concentration) value was calculated as the minimum concentration for inhibiting the growth of cells. Propionibacterium acnes ( Propionibacterium KCTC 3314) was used as a test bacterium. All experiments were repeated at least 3 times.

모든 실험은 3회 이상 반복 수행하였다.All experiments were repeated at least 3 times.

화합물compound MIC 값(mg/mL)MIC value (mg/mL) PropionibacteriumPropionibacterium 실시예 1Example 1 2525 비교예 2Comparative Example 2 5050 비교예 3Comparative Example 3 5050 비교예 4Comparative Example 4 2525 비교예 5Comparative Example 5 5050

상기 표 2에 나타난 바와 같이, 락토바실러스 플란타룸 균주가 다른 균주에 비해 항균 활성이 우수하게 나타남을 확인하였다.As shown in Table 2, it was confirmed that the Lactobacillus plantarum strain showed superior antibacterial activity compared to other strains.

실험예 2. 락토바실러스 플란타룸 발효균주 및 공시균주 배양액에 대한 항균효능 확인Experimental Example 2. Confirmation of antimicrobial efficacy against Lactobacillus plantarum fermented strains and test strain cultures

본 발명의 녹차 발효 추출물의 발효균주인 실시예 1의 락토바실러스 플란타름 AMI-1205 KCCM12713P 및 공시균주인 실시예 2의 락토바실러스 플란타룸 KCCM 11322 배양액애 대한 항균효능을 비교하는 실험을 수행하였다.An experiment was conducted to compare the antimicrobial efficacy of the culture broth of Lactobacillus plantarum AMI-1205 KCCM12713P of Example 1, which is a fermentation strain of the green tea fermentation extract of the present invention, and Lactobacillus plantarum KCCM 11322, of Example 2, which is a known strain.

상기 균주의 여드름 유발 피부상재균에 대한 최소억제농도(Minimum inhibitory concentration, MIC)를 측정하기 위해, broth micro dilution 방법으로 분석을 진행하였다. In order to measure the minimum inhibitory concentration (MIC) of the strain against acne-causing dermatophytes, analysis was performed by the broth micro dilution method.

먼저, 96 웰(well) 플레이트에 OD600=0.1의 프로피오니박테리움 아크네스를 넣어준 후, 실시예 1 및 2, 비교예 1 내지 7을 최대 50 mg/mL로부터 2배씩 희석하여 처리하였다. 각 플레이트는 37º에서 24시간 배양한 다음, 세포의 성장을 억제하는 최소 농도로 MIC (Minimum Inhibitory concentration) 값을 구하였다. 공시균으로서 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium KCTC 3314)를 사용하였다. 모든 실험은 3회 이상 반복 수행하였다. First, after putting Propionibacterium acnes of OD600 = 0.1 in a 96 well plate, Examples 1 and 2 and Comparative Examples 1 to 7 were diluted twice from a maximum of 50 mg/mL and treated. Each plate was incubated at 37º for 24 hours, and then the MIC (Minimum Inhibitory concentration) value was calculated as the minimum concentration for inhibiting the growth of cells. Propionibacterium acnes ( Propionibacterium KCTC 3314) was used as a test bacterium. All experiments were repeated at least 3 times.

모든 실험은 3회 이상 반복 수행하였다.All experiments were repeated at least 3 times.

화합물compound MIC 값(mg/mL)MIC value (mg/mL) PropionibacteriumPropionibacterium 실시예 1Example 1 0.780.78 실시예 2Example 2 3.133.13

상기 표 3에 나타난 바와 같이, 락토바실러스 플란타룸으로 녹차 추출물을 발효시킬 경우, 최소억제농도가 낮아짐을 통해, 여드름 유발 피부상재균에 대한 항균활성이 뛰어남을 확인하였다.As shown in Table 3, when the green tea extract was fermented with Lactobacillus plantarum, it was confirmed that the antimicrobial activity against acne-causing skin flora was excellent by lowering the minimum inhibitory concentration.

실험예 3. 녹차 발효 추출물의 항산화 효과 확인Experimental Example 3. Antioxidant Effect of Green Tea Fermented Extract Confirmation

3-1. ABTS3-1. ABTS ++ 라디칼 소거활성 확인 Confirmation of radical scavenging activity

ABTS+[2,2'-아지노-비즈(3-에틸 벤조티아졸린-6-술폰산(ABTS+[2,2'-Azino-bis(3-ethyl benzothiazoline-6-sulfonic acid)]) 라디칼 소거활성은 수소 공여 항산화제(hydrogen-donating antioxidants)와 연쇄절단형 항산화제(chainbreaking antioxidants) 모두를 측정할 수 있으며 수용상(aqueous phase)과 유기상(organic phase) 모두에 적용 가능한 측정방법이다.ABTS + [2,2'-Azino-Beads (3-ethyl benzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS + [2,2'-Azino-bis (3-ethyl benzothiazoline-6-sulfonic acid)]) radical scavenging activity Is capable of measuring both hydrogen-donating antioxidants and chainbreaking antioxidants, and is a method applicable to both the aqueous and organic phases.

7 mM ABTS 용액에 과황화칼륨(potassium persulfate)이 2.45 mM 이 되도록 혼합한 후 암소에서 약 24시간 반응시키고 ABTS+ 용액을 시료와 혼합하여 암소에서 6분간 반응시켜 734 nm에서 흡광도를 측정하였다. 결과 값은 추출물 시료 처리군과 무처리군을 비교하여 하기 식 1을 이용한 계산을 통해 라디칼의 소거활성을 백분율(%)로 나타냈다.The 7 mM ABTS solution was mixed so that potassium persulfate became 2.45 mM, reacted in the dark for about 24 hours, and the ABTS + solution was mixed with the sample and reacted for 6 minutes in the dark, and the absorbance was measured at 734 nm. The resulting value was expressed as a percentage (%) of the radical scavenging activity through calculation using the following equation 1 by comparing the extract sample-treated group and the untreated group.

[식 1][Equation 1]

ABTS+ 소거활성(%) = [1 - (실시예 또는 비교예 시료처리군의 흡광도/ 시료 무처리군의 흡광도)] X 100ABTS + scavenging activity (%) = [1-(absorbance of sample treatment group in Example or Comparative Example / absorbance of sample untreated group)] X 100

ABTS+ 소거(%)ABTS + Elimination (%) 농도(μg/ml)Concentration (μg/ml) 6.256.25 12.512.5 2525 5050 100100 실시예 1Example 1 평균Average 40.6740.67 63.9063.90 89.0389.03 99.7499.74 99.4099.40 표준편차Standard Deviation 1.131.13 1.761.76 0.150.15 0.000.00 0.830.83 실시예 2Example 2 평균Average 37.337.3 50.850.8 77.877.8 99.799.7 99.899.8 표준편차Standard Deviation 0.40.4 0.70.7 0.60.6 0.10.1 0.10.1 비교예 1Comparative Example 1 평균Average 34.334.3 56.756.7 62.262.2 98.898.8 100.2100.2 표준편차Standard Deviation 0.80.8 1.21.2 1.11.1 0.10.1 0.00.0 비교예 2Comparative Example 2 평균Average 25.725.7 40.940.9 65.865.8 93.893.8 99.799.7 표준편차Standard Deviation 1.11.1 0.90.9 0.60.6 0.60.6 0.10.1 비교예 3Comparative Example 3 평균Average 26.826.8 43.243.2 68.968.9 96.096.0 99.899.8 표준편차Standard Deviation 0.50.5 0.40.4 0.10.1 0.20.2 0.00.0 비교예 4Comparative Example 4 평균Average 37.637.6 51.151.1 77.977.9 100.2100.2 100.2100.2 표준편차Standard Deviation 0.20.2 0.90.9 0.50.5 0.10.1 0.20.2 비교예 5Comparative Example 5 평균Average 27.427.4 44.844.8 72.272.2 97.497.4 100.1100.1 표준편차Standard Deviation 0.50.5 1.91.9 0.60.6 0.20.2 0.10.1 비교예 6Comparative Example 6 평균Average 28.828.8 46.146.1 74.074.0 98.398.3 99.699.6 표준편차Standard Deviation 0.80.8 0.80.8 0.70.7 0.10.1 0.40.4 비교예 7Comparative Example 7 평균Average 28.328.3 45.345.3 70.970.9 96.696.6 99.999.9 표준편차Standard Deviation 0.40.4 0.40.4 0.50.5 0.50.5 0.10.1

상기 표 4에 나타난 바와 같이, 락토바실러스 플란타룸을 이용한 녹차 발효 추출물의 ABTS+ 소거능이 다른 균주를 이용한 발효 추출물에 비해 뛰어남을 확인하였다.As shown in Table 4, it was confirmed that the ABTS + scavenging ability of the green tea fermented extract using Lactobacillus plantarum was superior to that of the fermented extract using other strains.

3-2. DPPH 소거활성 확인3-2. DPPH scavenging activity confirmation

DPPH 용액 180 μL에 실시예 1 및 2와 비교예 1 내지 7의 추출물을 각각 20 μL 첨가 후 빛을 외부로부터 차단하여 30분간 상온에서 반응시킨 다음 517 nm에서 흡광도를 측정하여 대조군에 대한 흡광도의 감소 비율로서 항산화 활성도를 나타내었다. 이때, 흡광도 감소 비율을 결정하기 위한 대조군으로는 항산화제인 아스코르브산을 사용하였으며, 시료와 동일한 함량을 첨가하여 동일한 방법으로 측정하였다. 이후 하기 식 2에 따라 DPPH소거 활성을 계산하였다.After adding 20 μL of each of the extracts of Examples 1 and 2 and Comparative Examples 1 to 7 to 180 μL of the DPPH solution, blocking the light from the outside, reacting at room temperature for 30 minutes, and then measuring the absorbance at 517 nm to decrease the absorbance for the control group. The antioxidant activity was shown as a ratio. At this time, as a control for determining the rate of decrease in absorbance, ascorbic acid, an antioxidant, was used, and the same amount as the sample was added and measured by the same method. Then, DPPH scavenging activity was calculated according to Equation 2 below.

[식 2][Equation 2]

DPPH 소거활성(%) = [1 - (실시예 또는 비교예 시료처리군의 흡광도/ 시료 무처리군의 흡광도)] X 100DPPH scavenging activity (%) = [1-(absorbance of sample treatment group in Example or Comparative Example / absorbance of sample untreated group)] X 100

DPPH 소거(%)DPPH elimination (%) 농도(μg/ml)Concentration (μg/ml) 6.256.25 12.512.5 2525 5050 100100 실시예 1Example 1 평균Average 23.323.3 36.436.4 56.356.3 76.076.0 90.890.8 표준편차Standard Deviation 2.22.2 2.62.6 1.61.6 5.35.3 1.81.8 실시예 2Example 2 평균Average 21.721.7 34.734.7 52.552.5 74.474.4 87.187.1 표준편차Standard Deviation 1.71.7 1.71.7 1.21.2 0.80.8 0.50.5 비교예 1Comparative Example 1 평균Average 18.618.6 28.128.1 44.944.9 67.067.0 86.486.4 표준편차Standard Deviation 0.80.8 0.40.4 0.00.0 0.40.4 1.41.4 비교예 2Comparative Example 2 평균Average 16.116.1 23.923.9 37.937.9 58.058.0 74.874.8 표준편차Standard Deviation 0.40.4 0.50.5 0.10.1 2.22.2 4.34.3 비교예 3Comparative Example 3 평균Average 17.017.0 25.725.7 40.640.6 59.759.7 80.580.5 표준편차Standard Deviation 0.70.7 0.30.3 0.50.5 1.61.6 0.10.1 비교예 4Comparative Example 4 평균Average 19.919.9 31.831.8 51.951.9 73.873.8 85.085.0 표준편차Standard Deviation 0.50.5 1.01.0 0.30.3 1.41.4 0.30.3 비교예 5Comparative Example 5 평균Average 18.318.3 28.528.5 41.541.5 55.455.4 75.175.1 표준편차Standard Deviation 0.70.7 1.31.3 2.42.4 3.13.1 4.74.7 비교예 6Comparative Example 6 평균Average 17.717.7 29.429.4 43.243.2 61.461.4 73.673.6 표준편차Standard Deviation 2.92.9 0.00.0 0.30.3 3.13.1 4.74.7 비교예 7Comparative Example 7 평균Average 17.517.5 25.825.8 42.142.1 64.164.1 82.682.6 표준편차Standard Deviation 0.50.5 1.41.4 1.01.0 1.21.2 1.81.8

상기 표 5에 나타난 바와 같이, 락토바실러스 플란타룸으로 녹차 추출물을 발효시킬 경우, 발효시키기 않은 녹차 추출물(비교예 1) 또는 다른 균주(비교예 2 내지 7)로 발효시킨 추출물과 비교하여 DPPH 소거능이 우수함을 확인하였다(도 2).As shown in Table 5, when the green tea extract is fermented with Lactobacillus plantarum, DPPH scavenging ability compared to the non-fermented green tea extract (Comparative Example 1) or the extract fermented with other strains (Comparative Examples 2 to 7) This excellence was confirmed (Fig. 2).

상기 ABTS+ 및 DPPH 소거능을 확인하는 실험을 통해, 락토바실러스 플란타룸 균주를 이용한 녹차 발효 추출물의 항산화 효과가 우수함을 확인하였으며, 농도 의존적으로 항산화 효과가 향상됨을 확인하였는 바, 상기와 같은 결과는 본 발명의 녹차 발효 추출물이 항산화 용도의 화장료 조성물로 활용될 수 있음을 시사한다.Through the experiment to confirm the ABTS + and DPPH scavenging ability, it was confirmed that the antioxidant effect of the green tea ferment extract using the Lactobacillus plantarum strain was excellent, and it was confirmed that the antioxidant effect was improved in a concentration-dependent manner. It suggests that the green tea fermented extract of the present invention can be used as a cosmetic composition for antioxidant purposes.

제조예 1. 에센스 제조Preparation Example 1. Essence Preparation

하기의 표 6과 같이 에센스 제형의 화장료 조성물을 제조하였다(단위: 중량%).A cosmetic composition of an essence formulation was prepared as shown in Table 6 below (unit: wt%).

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 실시예 1 또는 2의 녹차 발효 추출물Green tea ferment extract of Example 1 or 2 55 세테아릴알코올Cetearyl alcohol 22 세테아릴글루코사이드Cetearyl glucoside 1One 호호바씨오일Jojoba seed oil 55 실리카Silica 0.50.5 글리세린glycerin 1010 정제수Purified water To 100To 100

제조예 2. 크림 제조Preparation Example 2. Cream Preparation

하기의 표 7과 같이 크림 제형의 화장료 조성물을 제조하였다(단위: 중량%).As shown in Table 7 below, a cream-formed cosmetic composition was prepared (unit: wt%).

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 실시예 1 또는 2의 녹차 발효 추출물Green tea ferment extract of Example 1 or 2 55 스테아린산Stearic acid 1515 에탄올ethanol 1One 수산화칼륨Potassium hydroxide 0.70.7 글리세린glycerin 55 프로필렌글리콜Propylene glycol 33 방부제antiseptic 적량Appropriate amount incense 적량Appropriate amount 정제수Purified water to 100to 100

제조예 3. 동물용 건강기능식품용 사료의 제조Manufacturing Example 3. Preparation of feed for animal health functional food

기존사료(에이티바이오, AT Bio) 제조 마지막 공정인 오일 코팅 후 과정에서, 상기 실시예 1-2에서 제조한 녹차 발효 추출물을 스프레이로 1중량% 분무한 후 건조하여, 최종적으로 녹차 발효 추출물을 포함하는 항산화 및 프로바이오틱 활성이 우수한 사료를 제조하였다.In the process after oil coating, which is the last process of manufacturing conventional feed (AT Bio), the green tea ferment extract prepared in Example 1-2 was sprayed with 1% by weight and dried, finally, the green tea ferment extract A feed containing excellent antioxidant and probiotic activity was prepared.

전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시 예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단 일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다.The above description of the present invention is for illustrative purposes only, and those of ordinary skill in the technical field to which the present invention pertains will be able to understand that it can be easily modified into other specific forms without changing the technical spirit or essential features of the present invention. will be. Therefore, it should be understood that the embodiments described above are illustrative and non-limiting in all respects. For example, each component described as a single type may be implemented in a distributed manner, and similarly, components described as being distributed may also be implemented in a combined form.

본 발명의 범위는 후술하는 청구범위에 의하여 나타내어지며, 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.The scope of the present invention is indicated by the claims to be described later, and all changes or modified forms derived from the meaning and scope of the claims and the concept of equivalents thereof should be construed as being included in the scope of the present invention.

한국미생물보존센터(국외)Korea Microorganism Conservation Center (overseas) KCCM12713PKCCM12713P 2020050820200508

Claims (12)

녹차 발효 추출물을 포함하는 여드름 유발 피부상재균에 대한 항균용 조성물로서,
상기 발효 추출물은 락토바실러스 플란타룸 AMI-1205(Lactobacillus Plantarum AMI-1205) KCCM12713P 균주를 접종하여 수득한 것인, 항균용 조성물.
As a composition for antibacterial against acne-causing dermatophytes comprising a fermented green tea extract,
The fermentation extract is obtained by inoculating the strain Lactobacillus Plantarum AMI-1205 ( Lactobacillus Plantarum AMI-1205) KCCM12713P, antibacterial composition.
삭제delete 삭제delete 제1항에 있어서,
상기 항균용 조성물은 프로피오니박테리움 아크네(Propionibacterium acnes)에 대해 항균 활성을 가지는 것인, 항균용 조성물.
The method of claim 1,
The antibacterial composition is that of propionibacterium acnes ( Propionibacterium acnes ) to have an antibacterial activity, antibacterial composition.
제1항 또는 제4항의 조성물을 포함하는, 여드름 개선용 화장료 조성물.A cosmetic composition for improving acne, comprising the composition of claim 1 or 4. 녹차 발효 추출물을 포함하는 항산화 효능이 증진된 프로바이오틱스 조성물로서,
상기 발효 추출물은 락토바실러스 플란타룸 AMI-1205(Lactobacillus Plantarum AMI-1205) KCCM12713P 균주를 접종하여 수득한 것인, 프로바이오틱스 조성물.
As a probiotic composition with enhanced antioxidant efficacy comprising a green tea fermented extract,
The fermentation extract is obtained by inoculating the strain Lactobacillus Plantarum AMI-1205 ( Lactobacillus Plantarum AMI-1205) KCCM12713P, a probiotic composition.
삭제delete 삭제delete 제6항의 프로바이오틱스 조성물을 포함하는, 화장료 조성물.A cosmetic composition comprising the probiotic composition of claim 6. 제9항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 항산화용인 것인, 화장료 조성물.
The method of claim 9,
The cosmetic composition is for antioxidants, cosmetic composition.
제6항의 프로바이오틱스 조성물을 포함하는, 식품 조성물.A food composition comprising the probiotic composition of claim 6. 제11항에 있어서,
상기 식품 조성물은 동물용인 것인, 식품 조성물.
The method of claim 11,
The food composition is for animals, food composition.
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