KR102142318B1

KR102142318B1 - 천연식물 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물, 이를 포함하는 피부 외용제, 이를 포함하는 화장료 및 이를 포함하는 약제

Info

Publication number: KR102142318B1
Application number: KR1020130140680A
Authority: KR
Inventors: 김현정; 양미숙; 신진섭; 김한별; 황정아; 이진영
Original assignee: (주)아모레퍼시픽
Priority date: 2013-11-19
Filing date: 2013-11-19
Publication date: 2020-08-10
Also published as: CN104644494A; CN104644494B; SG10201407739UA; HK1204967A1; TWI663989B; TW201601774A; KR20150057378A

Abstract

본 발명은 한란 추출물; 및 녹차, 동백잎, 자란 및 백년초로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 추출물;을 유효성분으로 함유하는 것인 조성물, 상기 조성물을 포함하는 피부 외용제, 상기 조성물을 포함하는 화장료, 및 상기 조성물을 포함하는 약제에 관한 것이다.

Description

천연식물 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물, 이를 포함하는 피부 외용제, 이를 포함하는 화장료 및 이를 포함하는 약제 {COMPOSITION CONTAINING NATURAL PLANT EXTRACTS, EXTERNAL SKIN PREPARATION COMPRISING THE SAME, COSMETIC PREPARATION COMPRISING THE SAME AND PHARMACEUTICAL PREPARATION COMPRISING THE SAME}

본 발명은 천연식물 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물과 이를 포함하는 피부 외용제, 이를 포함하는 포함하는 화장료 및 이를 포함하는 약제에 관한 것으로, 보다 상세하게는 한란 추출물; 및 녹차, 동백잎, 자란 및 백년초로 이루어진 군에서 선택되는 어느 1종 이상의 추출물;을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항염 효과가 있는 조성물에 관한 것이다.

염증성 피부 질환으로는 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 지루성 피부염 (seborrhoic dermatitis), 여드름 등이 알려져 있다.

일반적으로 자극반응이나 염증반응의 기전을 살펴보면, 사람의 각질형성 세포나 랑게르한스 세포에서는 외부의 물질에 의해 다양한 싸이토카인을 만들어 방출할 수 있다. 이러한 싸이토카인은 인체 내 면역 체계 활성화 촉진 물질로서 피부의 자극유발이나 국소적인 염증반응의 진행에 필수적이다 (J Appl Toxicol 16:65-70, 1996). 실제로 자극성 접촉피부염에서 인터루킨-6 (Interleukin-6;IL-6), 인터루킨-1 (Interleukin-1;IL-1), 종양 괴사인자-α (Tumor necrosis factor-α;TNF-α)의 증가가 보고된 바 있다 (Contact Dermatitis 35:355-60, 1996, Dec).

현재까지는 상기와 같은 염증성 피부 질환의 치료를 위해 주로 항히스타민제, 비타민 연고, 부신피질호르몬제가 사용되고 있으나, 그 효과가 일시적인 경우가 대부분이고 부작용이 심한 경우도 많다.

따라서, 피부에서 발생할 수 있는 산화작용 및 염증 질환에 효과적으로 대처할 수 있으면서, 천연식물 추출물을 유효성분으로 함유하여 호르몬제 등에 비하여 부작용이 없는 조성물의 개발이 요구되고 있다.

대한민국 특허공개공보 제10-2013-0031988호 (2013.04.01)

본 발명은 복수의 천연식물 추출물을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항염증의 효과가 있는 조성물과 이러한 조성물을 포함하는 피부 외용제, 화장료, 및 약제를 제공하고자 한다.

본 발명은 한란 추출물; 및 녹차, 동백잎, 자란 및 백년초로 이루어진 군에서 선택되는 어느 1종 이상의 추출물;을 유효성분으로 함유하는 것인 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 피부 외용제를 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 화장료를 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 약제를 제공한다.

본 명세서에 따른 조성물은 2종 이상의 천연식물 추출물을 유효성분으로 함유하여, 1종 단독의 천연식물 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물에 비하여 활성산소를 제거하는 항산화 효과가 뛰어나고, 피부의 염증 질환을 경감시키는 항염 효과가 뛰어나다.

도 1은 시험예 1에서 비교예 1 내지 5 및 실시예 1 내지 5에 따른 각 조성물의 TNF-α 평가 결과를 도시한 것이다.
도 2는 시험예 2에서 비교예 1 내지 5 및 실시예 1 내지 5에 따른 각 조성물의 IL-6 평가 결과를 도시한 것이다.

본 명세서에 있어서, 한란 (寒蘭)은 난초과의 여러해살이 풀인 심비디움 칸란 (Cymbidium kanran)을 의미한다.

본 명세서에 있어서, 녹차는 차나무과의 카멜리아 시넨시스 (Camellia Sinensis)의 싹이나 잎을 이용하여 차엽 (茶葉) 속에 존재하는 산화 효소를 화열 (火熱)이나 증기로 처리함으로써 효소를 실활 (失活)시켜 제조한 것을 의미한다.

본 명세서에 있어서, 동백은 차나무과의 카멜리아 자포니카 (Camellia japonica)를 의미한다.

본 명세서에 있어서, 자란 (紫蘭)은 난초과의 블레틸라 스트리아타 (Bletilla striata)를 의미한다.

본 명세서에 있어서, 백년초는 선인장과의 오퓬티아 콕시넬리페라 (Opuntia Coccinellifera)를 의미한다.

상기 한란 추출물, 녹차 추출물, 동백잎 추출물, 자란 추출물 및 백년초 추출물은 각각 당업계에 공지된 통상의 방법에 따라, 즉, 통상적인 온도와 압력의 조건하에서 통상적인 용매를 사용하여 제조될 수 있다. 바람직하게는 물, 탄소수 1~4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 글리세린, 1,3-부틸렌 글리콜, 1,2-프로필렌 글리콜 및 1,3-프로필렌 글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 추출 용매로 추출된다.

상기 한란 추출물은 상기 한란의 전초, 즉, 풀 전체 (이하, 동일하다.)를 사용하여 추출할 수 있다. 또한, 상기 자란 추출물은 상기 자란의 전초를 사용하여 추출할 수 있다.

상기 녹차 추출물은 상기 녹차의 잎을 사용하여 추출할 수 있으며, 상기 동백잎 추출물은 상기 동백의 잎을 사용하여 추출할 수 있다.

상기 백년초 추출물은 상기 백년초의 열매를 사용하여 추출할 수 있다.

본 명세서의 일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 한란 추출물 및 녹차 추출물을 유효성분으로 함유하는 것이다.

상기 조성물에 한란 추출물 및 녹차 추출물이 혼합되어 포함됨으로써, 2종 이상의 천연식물 추출물을 유효성분을 하는 상기 조성물의 항산화 효과의 증진을 극대화시킬 수 있다.

본 명세서의 일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 한란 추출물 및 자란 추출물을 유효성분으로 함유하는 것이다.

상기 조성물에 한란 추출물 및 자란 추출물이 혼합되어 포함됨으로써, 2종 이상의 천연식물 추출물을 유효성분을 하는 상기 조성물의 TNF-α 억제의 측면에서 항염 효과의 증진을 극대화시킬 수 있다.

본 명세서의 일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 한란 추출물 및 동백잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 것이다.

상기 조성물에 한란 추출물 및 동백잎 추출물이 혼합되어 포함됨으로써, 천연식물의 단독 추출물을 포함하는 조성물에 비하여, TNF-α 억제의 측면에서 항염 효과의 증진을 극대화시킬 수 있다.

본 명세서의 일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 한란 추출물 및 백년초 추출물을 유효성분으로 함유하는 것이다.

상기 조성물에 한란 추출물 및 백년초 추출물이 혼합되어 포함됨으로써, 천연식물의 단독 추출물을 포함하는 조성물에 비하여, IL-6 억제의 측면에서 항염 효과의 증진을 극대화시킬 수 있다.

상기 조성물에 한란 추출물 및 녹차 추출물이 혼합되어 포함됨으로써, 2종의 천연식물 추출물을 유효성분을 조성물로서 TNF-α 억제 및 IL-6 억제를 극대화하여, 항염 효과를 극대화시킬 수 있다.

본 명세서의 일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 녹차 추출물, 한란 추출물, 동백잎 추출물, 자란 추출물 및 백년초 추출물을 유효성분으로 함유하는 것이다.

상기 녹차 추출물, 한란 추출물, 동백잎 추출물, 자란 추출물 및 백년초 추출물을 유효성분이 혼합되어 포함됨으로써, 항염 효과 및 항산화 효과의 증진을 극대화시킬 수 있다.

본 명세서의 일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 조성물 총 중량에 대하여, 상기 한란 추출물을 0.0001 중량% 이상이고 10 중량% 이하로 포함하고, 더 자세하게는 0.01 중량% 이상이고 5.0 중량% 이하로 포함한다. 그 함량이 0.0001 중량% 이상이면 상기 한란 추출물에 의한 항산화 효과 및 항염증 효과를 얻을 수 있고, 10 중량% 이하이면 함량 증가에 비하여 효과의 증가가 유효하여 오히려 효율적이기 때문이다.

본 명세서의 일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 조성물 총 중량에 대하여, 상기 녹차 추출물을 0.0001 중량% 이상이고 90 중량% 이하로 포함 하고, 더 자세하게는 0.01 중량% 이상이고 90 중량% 이하로 포함한다. 그 함량이 0.0001 중량% 이상이면 상기 녹차 추출물에 의한 항산화 효과 및 항염증 효과를 얻을 수 있고, 90 중량% 이하이면 함량 증가에 비하여 효과의 증가가 유효하여 오히려 효율적이기 때문이다.

본 명세서의 일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 조성물 총 중량에 대하여, 상기 동백잎 추출물을 0.0001 중량% 이상이고 90 중량% 이하로 포함 하고, 더 자세하게는 0.01 중량% 이상이고 90 중량% 이하로 포함한다. 그 함량이 0.0001 중량% 이상이면 상기 동백잎 추출물에 의한 항산화 효과 및 항염증 효과를 얻을 수 있고, 90 중량% 이하이면 함량 증가에 비하여 효과의 증가가 유효하여 오히려 효율적이기 때문이다.

본 명세서의 일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 조성물 총 중량에 대하여, 상기 자란 추출물을 0.0001 중량% 이상이고 10 중량% 이하로 포함 하고, 더 자세하게는 0.01 중량% 이상이고 5 중량% 이하로 포함한다. 그 함량이 0.0001 중량% 이상이면 상기 자란 추출물에 의한 항산화 효과 및 항염증 효과를 얻을 수 있고, 10 중량% 이하이면 함량 증가에 비하여 효과의 증가가 유효하여 오히려 효율적이기 때문이다.

본 명세서의 일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 조성물 총 중량에 대하여, 상기 백년초 추출물을 0.0001 중량% 이상이고 90 중량% 이하로 포함 하고, 더 자세하게는 0.01 중량% 이상이고 90 중량% 이하로 포함한다. 그 함량이 0.0001 중량% 이상이면 상기 백년초 추출물에 의한 항산화 효과 및 항염증 효과를 얻을 수 있고, 90 중량% 이하이면 함량 증가에 비하여 효과의 증가가 유효하여 오히려 효율적이기 때문이다.

본 명세서의 일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 항산화용이다. 상기 항산화용 조성물은 조성물에 포함된 2종 이상의 추출물이 유효성분으로, 피부 내 자유 라디칼을 소거 또는 억제하는 작용을 한다.

본 명세서의 일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 항염증용이다. 상기 항염증용 조성물은 조성물에 포함된 2종 이상의 추출물이 유효성분으로, 인터루킨-6 (Interleukin-6;IL-6), 인터루킨-1 (Interleukin-1;IL-1), 종양 괴사인자-α(Tumor necrosis factor-α;TNF-α를 억제 또는 감소시키는 작용을 한다.

본 발명은 전술한 조성물을 포함하는 피부 외용제를 제공한다.

상기 외용제는 외용으로 적용하는 제재를 모두 포함하는 개념으로, 피부를 통해 흡수하는 제제, 즉 경피 흡수제를 포함한다.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 피부는 눈가 피부를 포함한다.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 경피 흡수제의 구체적인 제형으로 외용 산제, 외용 정제, 외용 액제, 패치, 마이크로 니들, 연고제 또는 좌제를 예로 들 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명은 전술한 조성물을 포함하는 화장료를 제공한다.

상기 화장료는 전술한 조성물을 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화될 수 있다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로서, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는, 이온형 (리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한 포말 (foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다. 상기 화장료는 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.

또한, 상기 화장료는 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제 (foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.

본 발명은 전술한 조성물을 포함하는 약제를 제공한다.

상기 조성물에는 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 약제학적 보조제 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 추가로 함유할 수 있으며, 통상적인 방법에 따라 다양한 경구 또는 비경구 투여 형태로 제형화할 수 있다.

경구 투여용 제형으로는 예를 들면, 정제, 환제, 경질 및 연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 과립제 등이 있는데, 이들 제형은 유효성분 이외에 희석제 (예: 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로오스 및 글리신), 활택제 (예: 실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및 폴리에틸렌 글리콜)를 함유하고 있다. 정제는 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸스, 메틸셀룰로즈, 나트륨 카복시메틸셀룰로즈 및 폴리비닐피롤리딘과 같은 결합제를 더 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염과 같은 붕해제, 흡수제, 착색제, 향미제, 및 감미제 등의 약제학적 첨가제를 함유할 수 있다. 정제는 통상적인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 의해 제조될 수 있다. 또한, 비경구 투여용 제형의 대표적인 것은 주사용 제형으로 등장성 수용액 또는 현탁액이 바람직하다.

이하, 시험예 및 실시예를 들어 본 발명의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 시험예 및 실험예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 발명의 범주 및 범위가 하기 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.

<비교예 1> 한란 추출물의 제조.

한란의 전초 50 g에 정제수 950 g을 섞고 12시간 동안 80 ℃ 에서 열수 추출하였다. 이 추출액을 1㎛ 의 필터로 여과한 후 추출된 원액의 양이 3.5 g이 되도록 증발 농축시켜 시료를 제조하였다. 하기 시험예1 내지 3에서는 상기 한란 추출물 20 ㎍을 사용하였다.

<비교예 2> 자란 추출물의 제조.

자란의 전초 20 g에 정제수와 글리세린을 3 : 7의 중량비로 혼합한 용매 80 g을 섞고 25 ℃ 에서 3일간 추출하였다. 이 추출액을 1㎛ 의 필터로 여과하여 자란 추출물을 제조하였다. 하기 시험예1 내지 3에서는 상기 한란 추출물 20㎍을 사용하였다.

<비교예 3> 동백잎 추출물의 제조.

비교예 1에서 한란의 전초 대신, 동백의 잎 20 g을 사용하여 동백잎 추출물을 제조하였으며, 이외의 제조과정은 비교예 1과 동일하다. 하기 시험예1 내지 3에서는 상기 한란 추출물 20㎍을 사용하였다.

<비교예 4> 백년초 추출물의 제조.

비교예 1에서 한란의 전초 대신, 백년초의 열매 20 g을 사용하여 백년초 추출물을 제조하였으며, 이외의 제조과정은 비교예 1과 동일하다. 하기 시험예1 내지 3에서는 상기 한란 추출물 20㎍을 사용하였다.

<비교예 5> 녹차 추출물의 제조.

비교예 1에서 한란의 전초 대신, 녹차의 잎 20 g을 사용하여 녹차 추출물을 제조하였으며, 이외의 제조과정은 비교예 1과 동일하다. 하기 시험예1 내지 3에서는 상기 한란 추출물 20㎍을 사용하였다.

<실시예 1> 한란 및 자란 혼합 추출물의 제조.

비교예 1의 한란 추출물 10㎍과 비교예 2의 자란 추출물 10㎍을 혼합하여 한란 및 자란 혼합 추출물을 제조하였다.

<실시예 2> 한란 및 동백잎 혼합 추출물의 제조.

비교예 1의 한란 추출물 10㎍ 과 비교예 3의 동백잎 추출물 10㎍을 혼합하여 한란 및 동백잎 혼합 추출물을 제조하였다.

<실시예 3> 한란 및 백년초 혼합 추출물의 제조.

비교예 1의 한란 추출물 10㎍과 비교예 4의 백년초 추출물 10㎍을 혼합하여 한란 및 백년초 혼합 추출물을 제조하였다.

<실시예 4> 한란 및 녹차 혼합 추출물의 제조.

비교예 1의 한란 추출물 10㎍과 비교예 5의 녹차 추출물 10㎍을 혼합하여 한란 및 녹차 혼합 추출물을 제조하였다.

<실시예 5> 한란, 자란, 동백잎, 백년초 및 녹차 혼합 추출물의 제조.

비교예 1의 한란 추출물 4㎍, 비교예 2 의 자란 추출물 4㎍, 비교예 3의 동백잎 추출물 4㎍, 비교예 4의 백년초 추출물 4㎍ 및 비교예 5의 녹차 추출물 4㎍을 혼합하여 한란, 자란, 동백잎, 백년초 및 녹차 혼합 추출물을 제조하였다.

<시험예 1> 유기 라디칼 DPPH 평가.

상기 실시예 1내지 5에서 제조한 추출물들의 항산화 효과를 알아보기 위하여, 유기 라디칼인 DPPH (1,1-디페닐-2-피크릴하이드라질; 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl)의 환원에 의해 (항산화제는 산화됨) 발생되는 흡광도의 변화를 통하여 DPPH 산화 억제 효능을 비교 측정으로 항산화능을 평가하는 방법으로 수행하였다. 즉, 상기 실시예 1 내지 5에 수득한 추출물 및 비교예 1내지 5에서 수득한 추출물에 대하여 DPPH의 산화가 억제되어 흡광도가 대조군에 비해 감소되는 정도를 측정하여, 대조군의 흡광도에 비해서 50％ 이하의 흡광도를 나타내는 농도를 유효 항산화 농도로 평가하였다. 대조군과 각 추출물들은 각각 유효 항산화 농도를 3회씩 측정하여, 평균 유효 항산화 농도 결과값 및 대조군의 유효 항산화 농도에 대한 해당 추출물의 평균 유효 항산화 농도의 비를 표 1과 같이 정리하였다.

추출물	유효성분	유효성분 별 농도 (ppm)	평균 유효 항산화 농도 (ppm)	대조군 대비 평균 유효 항산화 농도 (%)
대조군	에탄올	20	0.49	100.00
비교예 1	한란	20	0.33	66.64
비교예 2	자란	20	0.43	87.20
비교예 3	동백잎	20	0.24	48.05
비교예 4	백년초	20	0.31	62.60
비교예 5	녹차	20	0.15	30.93
실시예 1	한란/자란	10/10	0.31	61.73
실시예 2	한란/동백잎	10/10	0.22	45.28
실시예 3	한란/백년초	10/10	0.28	57.21
실시예 4	한란/녹차	10/10	0.14	27.83
실시예 5	한란/자란/동백잎/백년초/녹차	4/4/4/4/4	0.11	22.64

상기 표 1과 같이, 비교예 2와 실시예1, 비교예 3과 실시예2, 비교예 4와 실시예 3 및 비교예 5와 실시예 4를 각각 비교하면 단일한 종류의 추출물을 유효성분으로 함유하는 비교예 2 내지 5에 비하여, 한란 추출물이 혼합된 실시예 1 내지 4의 항산화 효과가 더 우수한 것을 알 수 있다.

특히, 녹차 추출물을 단일 유효성분으로 함유하는 비교예 5에서 녹차 추출물에 한란 추출물이 혼합된 실시예 4의 경우, 항산화 효과의 증가가 더 우수함을 알 수 있다.

또한, 한란, 자란, 동백잎, 백년초 및 녹차 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 실시예 5의 경우 항산화 효과가 가장 뛰어남을 알 수 있다.

<시험예 2> TNF-α 억제효과 평가.

상기 실시예 1 내지 5에서 제조한 추출물들의 TNF-α 생성 억제효과를 확인하기 위하여, 인간 각질형성 세포주 (human keratinocyte cell line)인 HaCaT 세포 (한국세포주은행에서 분양 받음.)를 대상으로 하기와 같이 실험하였다.

HaCaT 세포를 48-공 평판배양기 (well-plate)에 1 X 10⁴ 세포/웰의 농도로 분주하고, 10% 혈청 함유 DMEM 배지 (Biowhittaker, Cat.#12-604F)에서 24 시간 배양한 후, 무혈청 배지에서 24시간 더 배양하였다. 이렇게 배양된 세포에서의 총 단백질 (total protein)을 3회씩 측정하여 그 평균 값으로 정량하였다. 배양된 세포를 PBS로 1회 세척한 후, 100 ㎕ PBS를 첨가한 상태에서 1 ㎍/㎖의 LPS를 대조군을 제외한 배지에 첨가한 후, PBS를 제거하고, 새로운 무혈청 배지에 대조군 및 비처리군을 제외한 실시예 1 내지 5 및 비교예 1 내지 5에서 제조된 각 추출물의 시료물질들을 10 ㎛의 농도로 첨가한 후 각 웰에 500㎕씩 처리하였다. 상기 시험물질을 처리하고 6시간 경과 후에 배지를 회수한 후 TNF-α ELISA 분석 키트 (BDBiosciences, Cat.#555212)를 이용하여 배지 내 TNF-α의 양을 3회씩 측정하여 그 평균값을 정량하였으며, 결과는 표 2 및 도 1의 그래프로 나타내었다.

추출물	유효성분	농도 (㎍)	LPS 처리량 (㎍/mL)	평균 TNF-α 정량 (㎍/mL)	평균 Protein 정량 (㎍/mL)	TNF-α/ Protein	대조군 대비 TNF-α/ protein (%)
대조군	-	-	-	0.2	1060.3	0.00	100.00
비처리군	-	-	1	1625.9	1377.7	1.18	624060.71
비교예 1	한란	20	1	1465.6	1610.0	0.91	480097.72
비교예 2	자란	20	1	1537.5	1487.9	1.03	543920.68
비교예 3	동백잎	20	1	1411.3	1529.8	0.92	485908.45
비교예 4	백년초	20	1	1439.2	1531.0	0.94	495150.75
비교예 5	녹차	20	1	1328.8	1510.6	0.88	463523.86
실시예 1	한란/자란	10/10	1	1447.3	1633.3	0.89	466899.44
실시예 2	한란/동백잎	10/10	1	1399.4	1615.8	0.87	456825.71
실시예 3	한란/백년초	10/10	1	1375.3	1621.4	0.85	446706.83
실시예 4	한란/녹차	10/10	1	1359.2	1689.1	0.81	424220.07
실시예 5	한란/자란/동백잎/백년초/녹차	4/4/4/4/4	1	1269.3	1608.2	0.79	415650.31

상기 표 2 및 도 1의 그래프와 같이, 비교예 2와 실시예1, 비교예 3과 실시예2, 비교예 4와 실시예 3 및 비교예 5와 실시예 4를 각각 비교하면 단일한 종류의 추출물을 유효성분으로 함유하는 비교예 2 내지 5에 비하여, 한란 추출물이 혼합된 실시예 1 내지 4의 항염 효과가 더 우수한 것을 알 수 있다.

특히, 자란 추출물을 단일 유효성분으로 함유하는 비교예 2에서 한란 추출물에 자란 추출물이 혼합된 실시예 1의 경우, TNF-α의 억제효과 측면에서 항염 효과의 증가가 더 우수함을 알 수 있다.

이와 함께, 2종의 천연식물 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물 중 한란 추출물에 녹차 추출물이 혼합된 실시예 4의 경우, TNF-α의 억제효과 측면에서 항염 효과가 가장 우수함을 알 수 있다.

또한, 한란, 자란, 동백잎, 백년초 및 녹차 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 실시예 5의 경우 항염 효과가 가장 뛰어남을 알 수 있다.

<시험예 3> IL-6 억제효과 평가.

상기 시험예 2에서 TNF-α ELISA 분석 키트 (BDBiosciences, Cat.#555212)를 이용하여 배지 내 TNF-α의 양을 측정한 것을 IL-6의 양을 각각 3회씩 측정하여 그 평균값을 정량한 것을 제외하고는 상기 시험예 2와 동일하게 시험하여 IL-6의 억제효과를 측정하였다. 그 결과는 표 3 및 도 2의 그래프로 나타내었다.

추출물	유효성분	농도 (㎍)	LPS 처리량 (㎍/mL)	평균 IL-6 정량 (㎍/mL)	평균 Protein 정량 (㎍/mL)	IL-6 / Protein	대조군 대비 IL-6 / protein
대조군	-	-	-	10.1	1060.3	0.01	100.00
비처리군	-	-	1	496.3	1377.7	0.36	3826.17
비교예 1	한란	20	1	249.1	1487.9	0.17	1755.88
비교예 2	자란	20	1	307.9	1610	0.19	1986.17
비교예 3	동백잎	20	1	256	1529.8	0.17	1759.69
비교예 4	백년초	20	1	283.3	1531	0.19	1950.35
비교예 5	녹차	20	1	193.6	1510.6	0.13	1347.91
실시예 1	한란/자란	10/10	1	303.7	1633.3	0.18	1943.97
실시예 2	한란/동백잎	10/10	1	245.8	1615.8	0.15	1603.06
실시예 3	한란/백년초	10/10	1	262.8	1621.4	0.16	1701.24
실시예 4	한란/녹차	10/10	1	184.6	1689.1	0.11	1150.84
실시예 5	한란/자란/동백잎/백년초/녹차	4/4/4/4/4	1	151.8	1608.2	0.09	992.87

상기 표 3 및 도 2의 그래프와 같이, 비교예 2와 실시예1, 비교예 3과 실시예2, 비교예 4와 실시예 3 및 비교예 5와 실시예 4를 각각 비교하면 단일한 종류의 추출물을 유효성분으로 함유하는 비교예 2 내지 5에 비하여, 한란 추출물이 혼합된 실시예 1 내지 4의 IL-6의 억제효과 측면에서 항염 효과가 더 우수한 것을 알 수 있다.

특히, 백년초 추출물을 단일 유효성분으로 함유하는 비교예 4에서 한란 추출물에 백년초 추출물이 혼합된 실시예 3의 경우, IL-6의 억제효과 측면에서 항염 효과의 증가가 더 우수함을 알 수 있다.

이와 함께, 2종의 천연식물 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물 중 한란 추출물에 녹차 추출물이 혼합된 실시예 4의 경우, IL-6의 억제효과 측면에서 항염 효과가 가장 우수함을 알 수 있다.

또한, 한란, 자란, 동백잎, 백년초 및 녹차 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 실시예 5의 경우 IL-6의 억제효과 측면에서 항염 효과가 가장 뛰어남을 알 수 있다.

Claims

녹차잎 추출물, 동백잎 추출물, 자란 추출물, 백년초 추출물 및 한란 추출물로 구성되는 혼합물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물로서,
상기 혼합물을 구성하는 녹차잎 추출물, 동백잎 추출물, 자란 추출물, 백년초 추출물 및 한란 추출물의 중량비는 1:1:1:1:1이고,
상기 녹차잎 추출물은 카멜리아 시넨시스(Camellia sinensis)의 잎으로부터 추출한 것이고,
상기 동백잎 추출물은 카멜리아 자포니카(Camellia japonica)의 잎으로부터 추출한 것이며,
상기 자란 추출물은 블레틸라 스트리아타(Bletilla striata)의 전초로부터 추출한 것이고,
상기 백년초 추출물은 오퓬티아 콕시넬리페라(Opuntia coccinellifera)의 열매로부터 추출한 것이며,
상기 한란 추출물은 심비디움 칸란(Cymbidium kanran)의 전초로부터 추출한 것임을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 조성물의 총 중량을 기준으로,
상기 녹차잎 추출물을 0.0001 중량% 내지 10 중량%로 포함하고,
상기 동백잎 추출물을 0.0001 중량% 내지 10 중량%로 포함하며,
상기 자란 추출물을 0.0001 중량% 내지 10 중량%로 포함하고,
상기 백년초 추출물을 0.0001 중량% 내지 10 중량%로 포함하며,
상기 한란 추출물을 0.0001 중량% 내지 10 중량%로 포함하는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
삭제
제1항에 있어서, 상기 조성물은 항염증용임을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제4항에 있어서, 상기 조성물은 아토피성 피부염(atopic dermatitis), 접촉성 피부염(contact dermatitis), 지루성 피부염(seborrhoic dermatitis) 및 여드름 피부염으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 염증성 피부 질환을 경감시키는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제4항에 있어서, 상기 조성물은 TNF-α(Tumor necrosis factor-α)의 발현을 억제하거나 감소시키는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제4항에 있어서, 상기 조성물은 IL-6(Interleukin-6)의 발현을 억제하거나 감소시키는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 항산화용임을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제8항에 있어서, 상기 조성물은 피부 내 자유 라디칼을 소거하거나 억제시키는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.