KR102443334B1 - 무궁화 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부재생 촉진용 조성물 - Google Patents
무궁화 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부재생 촉진용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 무궁화 및 타임의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부재생 촉진용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 조성물은 세포 독성이 없고, 산화질소(NO) 매개 염증 반응을 효과적으로 억제하며, 히알루론산의 생성을 촉진하고, 피부염의 중증도와 연관되어 있으며, 가려움 증세의 원인으로 알려진 사이토카인인 TSLP 단백질의 생성을 효과적으로 억제하고, 피부 상처 재생에 매우 효과적이므로, 항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부 재생 촉진을 위한 화장료, 식품, 및 약학적 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 세포 독성이 없고, 산화질소(NO) 매개 염증 반응을 효과적으로 억제하며, 히알루론산의 생성을 촉진하고, 피부염의 중증도와 연관되어 있으며, 가려움 증세의 원인으로 알려진 사이토카인인 TSLP 단백질의 생성을 효과적으로 억제하고, 피부 상처 재생에 매우 효과적이므로, 항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부 재생 촉진을 위한 화장료, 식품, 및 약학적 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.
Description
본 발명은 항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부재생 촉진 활성을 갖는 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 무궁화와 타임의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부재생 촉진용 조성물에 관한 것이다.
생물체의 항상성(homeostasis)을 유지하는 과정에서 중요한 역할을 담당하고 있는 물질 중 일부가 각종 생물체 유래의 생리 활성 물질이다. 지금까지 수많은 생리 활성 물질에 관해 많은 연구가 진행되고 있으며, 그 중, 미생물, 식물, 또는 동물체 등에서 분리된 생리 활성을 갖는 물질에 관한 연구는 생명과학 및 의학 분야에서 매우 중요한 영역이다.
한편, 염증반응은 세포 또는 조직의 손상이나 박테리아, 곰팡이, 바이러스, 다양한 종류의 알레르기 유발물질 등의 외부감염원에 감염되었을 때 국소 혈관과 체액 중 각종 염증 매개 인자 및 면역세포가 관련되어, 효소 활성화, 염증 매개 물질 분비, 체액 침윤, 세포 이동, 조직 파괴 등 일련의 복합적인 생리적 반응과 홍반, 부종, 발열, 통증 등 외적 증상을 나타낸다. 평상시의 염증반응은 외부감염원을 제거하고 손상된 조직을 재생하여 생명체 기능 회복 작용을 하지만, 항원이 제거되지 않거나 내부물질이 원인이 되어 염증반응이 과도하거나 지속해서 일어나면 오히려 점막 손상을 촉진하고, 그 결과 일부에서는 암 발생 등의 질환을 이끈다.
염증의 발생 원인으로서는 다양한 생화학적인 현상이 관여하고 있는 것으로 알려져 있는데, 특히 일산화질소(Nitric Oxide; NO)를 발생시키는 효소인 산화질소 합성 효소(Nitric Oxide Synthase; NOS)와 프로스타글란딘의 생합성과 관련된 효소들이 염증반응을 매개하는 데 있어서 가장 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 따라서 L-아르기닌으로부터 일산화질소를 생성시키는 효소인 산화질소 합성효소(NOS)나, 아라키돈산으로부터 프로스타글란딘 등을 합성하는데 관련된 효소인 사이클로옥시게나아제(COX)의 활성 저해를 통해 염증을 차단하는 것이 염증 치료제 개발에 목표가 되고 있다.
또한, 일반적으로 피부에 사용되는 보습용 화장료 조성물은 사람의 모발이나 피부 등에 수분을 일정량 유지함으로써 부드럽고 생기있게 하며, 갈라짐, 건조함 등의 손상을 방지해주는 역할을 한다. 즉, 피부 보습용 화장료 조성물은 피부나 모발에 일정량 이상의 수분을 공급하거나 수분이 유지함으로써 피부나 모발을 미화하고, 건강하게 유지하기 위한 목적으로 사용된다. 피부는 수분 유지에 필수적인 기능을 하는 기관으로, 수분 조절에 대략 2/3 정도의 비중을 담당하는 것으로 알려져 있다. 따라서, 식품, 화장품 분야에서는 수분의 공급, 유지, 즉 보습과 관련된 기능성 연구가 활발하게 진행되고 있다. 또한, 최근에는 천연물 등으로부터 얻은 생리 활성 물질을 화장료에 도입하여 피부 자체의 고유 방어 기능을 더욱 강화함으로써 피부의 보습력을 증가시키는 화장품의 개발이 활발하게 진행되는 추세이다.
또한, 아토피성 피부염(atopic dermatitis)은 만성적으로 재발하는 가려움성 피부염으로, 영유아기에 흔히 발생하고 환자나 가족 중에 가려움증, 피부건조증 또는 특징적인 습진을 동반하는 질환이다. 아토피성 피부염의 전형적인 증상은 손, 두피, 얼굴, 목, 팔꿈치, 무릎 등에서 나타나며, 피부가 매우 건조해지고 가려움증과 염증이 생기며 비늘처럼 벗겨지다가 심하게 긁으면 피부가 두꺼워지면서 깊게 주름이 잡히는 태선화 현상이다.
아토피 피부염의 원인은 아직까지 명확히 규명되어 있지 않으나, IgE의 비정상적 증가, 세포 면역의 중추적 역할을 담당하는 T 세포의 수적 감소와 기능 저하, 단핵구와 대식세포의 침윤, 비만세포와 호산구의 수적 증가, CD4+ T 림프구 등의 수적 증가 등의 면역학적 요인이 보고되어 있으며(J Invest Dermatol., 96:523-526, 1991; J Invest Dermatol., 97:389-394, 1991; Immunol., 11:81-88, 1999; Curr Drug Targets Inflamm Allergy., 2:199-120, 2003; J Allergy Clin Immunol., 107:871-877, 2001; Adv Immunol., 78:57, 2001; International Immunology, 14(7):767-773, 2002; Pediatr Allergy Immunol., 19:605-613, 2008), 특히 Th1 세포에 비해 Th2 세포의 수적 증가로 인한 Th1/Th2 불균형이 중요한 요인으로 알려져 있다(Kor J Pharmacogn, 43:59-65, 2012).
현재 아토피성 피부염 치료제로 염증반응과 사이토카인 생산을 억제하는 스테로이드제가 주로 이용되고 있으나, 장기간 투여할 경우 피부의 위축이나 성장 지연 가능성 등 여러 가지 부작용을 초래하여 최근에는 비스테로이드제의 사용이 증가하고 있다. 그러나 비스테로이드제 역시 홍반, 가려움, 부종, 짓무름 및 태선화 등의 증상과 면역력 약화 등의 다양한 부작용을 가지고 있어 근본적인 아토피성 피부염의 치료가 어려운 실정이다(Arellano FM et al., J Invest Dermatol. 2007 Apr;127(4):808-16.). 따라서 상대적으로 안전성이 높은 천연물로부터 치료 효과가 우수한 물질을 찾기 위한 연구가 필요하다.
따라서, 생체에 안전하고, 유효성분이 안정하며, 무엇보다도 기존의 염증 개선, 보습, 피부 가려움증 개선 및 피부 재생 효과가 있는 물질보다 효과가 우수한 천연소재의 개발이 절실히 요망되고 있다.
한편, 화장품 소재는 안전성, 효능, 물성 등이 균형을 이루어야 한다. 또한 경제성 확보도 중요한 요인으로서 화장품용 소재는 다양한 개발 방법을 이용하여 피부 투과, 노화 억제, 생리활성, 안전성 및 물성을 최적화하여 개발하게 된다. 화장품과 식품 및 의약품의 경계가 무너지면서 화장품의 안정성과 의약품, 건강기능식품 등의 효과성을 겸비한 복합 기능성 원료 및 바이오 소재를 통해 다양한 코스메슈티컬 제품들이 높은 성장세를 이어가고 있다.
이러한 배경 아래에서, 본 발명자들은 피부상태 개선에 대한 우수한 효과를 나타내는 천연소재들의 조합에 관하여 연구를 수행하였으며, 항염증, 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부 재생에 동시에 효과가 있는 천연소재들의 조합을 찾기 위해 예의 연구노력한 결과, 무궁화와 타임의 복합추출물이 항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부 재생 촉진의 목적으로도 유용하게 활용될 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서, 본 발명의 주된 목적은 항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부재생 촉진에 우수한 효과를 나타내는 무궁화 복합추출물을 유효성분으로 하는 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.
본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 무궁화 및 타임의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부재생 촉진용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명자들은 피부상태 개선의 효과가 우수한 식물추출물의 조합에 관하여 연구를 수행하였으며, 무궁화와 타임의 복합추출물이 인체에 독성을 나타내지 않고, 염증매개인자인 산화질소(NO)의 생성을 효과적으로 억제하여 염증반응의 억제에 효과가 있으며, 히알루론산의 생성을 촉진하여 우수한 보습 효과가 있고, 피부 가려움증의 인자인 TSLP(Thymic stromal lymphopoietin)의 생성을 효과적으로 억제하며, 피부 재생에 우수한 활성을 나타내는 것을 확인하였고, 피부상태 개선의 목적으로 사용될 수 있음을 확인하였다.
본 발명의 "무궁화(Hibiscus syriacus)"는 한반도 전역에서 자생하는 쌍떡잎식물 아욱목 아욱과의 낙엽관목을 의미하며, "타임(Thymus vulgaris)"은 쌍떡잎식물 통화식물목 꿀풀과의 여러해살이풀을 의미한다. 본 발명의 상기 무궁화 또는 타임 추출물은, 천연, 잡종 또는 변종 식물로부터 추출될 수 있고, 식물 조직 배양물에서도 추출할 수 있다.
본 발명에서 용어 "염증"은 생체 조직이 손상되었을 때에 체내에서 일어나는 방어적 반응을 총칭하는 의미로 사용되며, 구체적으로 외상이나 화상, 세균 침입 따위에 대하여 몸의 일부에 충혈, 부종, 발열, 통증을 일으키는 증상을 의미한다. 또한, 본 발명에서 "염증성 질환"은 염증을 주병변으로 하는 질병을 총칭하는 의미로서, 본 발명에서 상기 염증성 질환은 산화질소(NO) 매개 염증성 질환인 것을 특징으로 한다.
또한, 용어 "피부 보습"은 피부에 수분감을 증가시켜주고, 촉촉한 상태를 유지시키는 것을 의미한다.
또한, 용어 "피부 가려움증"은 피부를 긁거나 문지르고 싶은 욕망을 일으키는 불쾌한 감각을 의미하며, 하나의 예시로서, 피부 건조에 의한 가려움증; 두드러기에 의한 가려움증; 벌레 물림에 의한 가려움증; 땀띠, 여드름, 짓무름, 동상, 접촉성 피부염, 지루성 피부염 또는 건선 등으로 유발되는 가려움증; 각종 피부질환에 의한 가려움증; 두피 가려움증 등을 들 수 있다. 그러나, 본 발명에서는 이상에서 열거한 피부 가려움증 이외의 다양한 원인의 피부 가려움증을 배제하는 것이 아님은 물론이다. 본 발명은 당업계에 알려진 모든 가려움증, 예를 들어 피부과적 원인 가려움증, 전신성 원인 가려움증, 신경병증성 원인 가려움증 및 심인성 원인 가려움증 등을 포함한다.
또한, 용어 "피부 재생"이란 손상된 피부 세포 조직에서 피부 세포의 증식을 촉진하여 상처를 치유하는 모든 작용을 의미한다.
또한, 본 명세서에서 "유효성분"이란 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나, 또는 그 자체는 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "추출물"은 식물의 추출 처리에 따라 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다. 본 발명의 상기 추출물은 바람직하게 추출 후 건조 분말 형태로 제조되어 사용될 수 있다.
본 발명의 상기 무궁화와 타임의 추출에 있어서, 추출하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2종 이상의 추출방법을 병용하여 수행될 수 있다.
본 발명에서 상기 무궁화와 타임을 추출하는데 사용되는 추출 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물(정제수); 메탄올, 에탄올, 프로필알코올, 부틸알코올 등의 C1 내지 C4의 저급 알코올; 글리세린, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 등의 다가 알코올; 및 메틸아세테이트, 에틸아세테이트, 아세톤, 벤젠, 헥산, 디에틸에테르, 디클로로메탄 등의 탄화수소계 용매; 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있으며, 바람직하게, 물, 저급알코올, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸아세테이트를 단독으로 사용하거나 2종 이상 혼합하여 사용할 수 있다.
본 발명에서 열수 추출 또는 냉침 추출한 추출물은 부유하는 고체 입자를 제거하기 위해 여과, 예를 들어 나일론 등을 이용해 입자를 걸러내거나 냉동여과법 등을 이용해 여과한 후, 그대로 사용하거나 이를 동결건조, 열풍건조, 분무건조 등을 이용해 건조하여 사용할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에서, 상기 무궁화 및 타임은 1:0.5-2.0의 중량비로 배합되는 것이 바람직하며, 1:1의 중량비로 배합되는 것이 더욱 바람직하다. 본 발명자들은 상기 무궁화 및 타임을 다양한 비율로 혼합하여 복합 추출물을 제조하였으며, 다양한 비율로 혼합된 복합 추출물의 활성을 확인하기 위해 산화질소의 생성량을 측정하였다. 그 결과, 무궁화 및 타임의 조합이 전반적으로 우수한 산화질소 생성 억제 활성을 나타내는 것을 확인하였으며, 상기 무궁화 및 타임이 1:1의 중량 비율로 혼합된 조성물이 산화질소 생성 억제에 가장 우수한 시너지 효과가 있는 것을 확인할 수 있었다.
본 발명의 화장료 조성물에서, 상기 무궁화 및 타임의 복합추출물은 염증 개선에 우수한 효과가 있는데, 구체적으로 일산화질소(NO) 생성 억제를 통해 항염증 활성을 나타내는 것을 특징으로 한다(도 2 참조).
본 발명의 상기 무궁화 및 타임의 복합추출물은 피부 보습에 우수한 효과가 있는데, 구체적으로 히알루론산 합성을 촉진하여 피부 보습 활성을 나타내는 것을 특징으로 한다(도 3 참조).
본 발명의 상기 무궁화 및 타임의 복합추출물은 아토피 피부염과 가려움증 개선에 우수한 효과가 있는데, 구체적으로 피부염의 중증도와 연관되어 있으며, 가려움 증세의 원인으로 알려진 마커인 TSLP(Thymic stromal lymphopoietin)의 생성을 억제하여 피부 가려움증 개선의 활성을 나타내는 것을 특징으로 한다(도 4 참조).
또한, 본 발명의 상기 무궁화 및 타임의 복합추출물은 피부 상처 재생 촉진 활성을 나타내는 것을 특징으로 한다(도 5 참조).
본 발명의 화장료은 용액, 외용연고, 크림, 폼, 영양화장수, 유연화장수, 마스크 팩, 유연수, 유액, 메이크업베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린크림, 선오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패치 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알콜, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 제형에 따라 다양하다.
본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 이용될 수 있으며, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 비누인 경우에는 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알콜, 식물성 유, 글리세롤, 당 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 무궁화 및 타임의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부재생 촉진용 식품 조성물을 제공한다. 상기 무궁화 및 타임과 염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부재생 촉진은 상기 화장료 조성물에서 설명한 바와 같다.
본 발명의 식품 조성물은 염증 반응의 직접적인 매개 인자인 일산화질소(NO)의 생성을 억제하고, 피부 보습인자인 히알루론산의 생성을 효과적으로 촉진하며, 피부염의 중증도와 연관되어 있으며, 가려움 증세의 원인으로 알려진 사이토카인인 TSLP(thymic stromal lymphopoietin)의 생성을 억제하고, 피부 상처 재생에 우수한 효과가 있으므로 항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부재생 촉진용 식품 조성물로 유용하게 사용될 수 있다. 상기 식품 조성물은 건강기능식품의 형태로 사용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 식품 조성물은 무궁화와 타임 복합추출물의 분획물 또는 이의 가공물의 형태로 포함될 수 있다. 또한, 상기 조성물은 유효성분 이외에 식품학적으로 허용 가능한 식품보조첨가제를 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서, "식품보조첨가제"란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 건강기능식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 상기 예들에 의해 본 발명의 식품보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 식품 조성물에는 건강기능식품이 포함될 수 있다. 본 발명에 있어서, "건강기능식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 "기능성"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 당업계에서 통상적으로 사용되는 방법으로 제조 가능하며, 제조시에는 당업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다.
또한, 상기 건강기능식품의 제형 또한 건강기능식품으로 인정되는 제형이면 제한 없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부재생 촉진 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취가 가능하다.
본 발명의 건강기능식품이 취할 수 있는 형태에는 제한이 없으며, 통상적인 의미의 식품을 모두 포함할 수 있고, 기능성 식품 등 당업계에 알려진 용어와 혼용이 가능하다. 아울러 본 발명의 건강기능식품은 당업자의 선택에 따라 식품에 포함될 수 있는 적절한 기타 보조 성분과 공지의 첨가제를 혼합하여 제조할 수 있다. 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 본 발명에 따른 꽃송이버섯, 동충하초, 및 송로버섯 복합 추출물을 주성분으로 하여 제조한 즙, 차, 젤리 및 주스 등에 첨가하여 제조할 수 있다. 또한, 동물을 위한 사료로 이용되는 식품도 포함된다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 무궁화 및 타임의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증 및 피부 가려움증의 치료 또는 예방용 약학적 조성물을 제공한다. 상기 무궁화 및 타임과 염증 및 피부 가려움증은 상기 화장료 조성물에서 설명한 바와 같다.
본 발명의 약학적 조성물은 염증 반응의 직접적인 매개 인자인 일산화질소(NO)의 생성을 억제하고, Th2 매개성 면역질환을 유발하고, 피부염의 중증도와 연관되어 있으며, 가려움 증세의 원인으로 알려진 사이토카인인 TSLP(thymic stromal lymphopoietin)의 생성을 억제하는 우수한 효과가 있어 염증 및 피부 가려움증의 치료 또는 예방용 약학적 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 용어 "치료"는 본 발명에 따른 조성물의 투여로 상기 피부 가려움증, 및 염증 질환의 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미하고, 용어 "예방"은 본 발명에 따른 조성물의 투여로 상기 피부 가려움증, 및 염증 관련 질환의 발병을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 조성물이 약제학적 조성물로 제조되는 경우, 본 발명의 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 본 발명의 약제학적 조성물에 포함되는 약제학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약제학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약제학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 본 발명의 일 구현예에 따르면 비경구 방식으로 투여되고, 본 발명의 다른 구현예에 따르면 경피투여방식으로 투여된다.
본 발명의 약제학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물의 바람직한 투여량은 성인 기준으로 0.0001-100㎎/kg 범위 내이다.
본 발명의 약제학적 조성물은 당해 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나, 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액, 시럽제 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 산제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.
본 발명의 특징 및 이점을 요약하면 다음과 같다:
(a) 본 발명은 무궁화 및 타임의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부재생 촉진용 조성물을 제공한다.
(b) 본 발명의 조성물은 세포 독성이 없고, 산화질소(NO) 매개 염증 반응을 효과적으로 억제하며, 히알루론산의 생성을 촉진하고, 피부염의 중증도와 연관되어 있으며, 가려움 증세의 원인으로 알려진 사이토카인인 TSLP 단백질의 생성을 효과적으로 억제하고, 피부 상처 재생에 매우 효과적이므로, 항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부 재생 촉진을 위한 화장료, 식품, 및 약학적 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 무궁화와 타임 추출물을 인간각질형성세포에 처리한 후 세포 생존율의 변화를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 무궁화와 타임 추출물을 대식세포주인 RAW 264.7 세포에 처리한 후 일산화질소의 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 무궁화와 타임 추출물을 인간 섬유아세포(NHDF)에 처리한 후 히알루론산의 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 무궁화와 타임 추출물을 인간각질형성세포에 처리한 후 아토피성 피부염 및 피부 가려움증의 원인인 TSLP 단백질의 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 무궁화와 타임 추출물의 처리에 따른 피부 재생 활성을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 무궁화와 타임 추출물을 대식세포주인 RAW 264.7 세포에 처리한 후 일산화질소의 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 무궁화와 타임 추출물을 인간 섬유아세포(NHDF)에 처리한 후 히알루론산의 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 무궁화와 타임 추출물을 인간각질형성세포에 처리한 후 아토피성 피부염 및 피부 가려움증의 원인인 TSLP 단백질의 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 무궁화와 타임 추출물의 처리에 따른 피부 재생 활성을 측정하여 나타낸 그래프이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.
실시예 1. 무궁화 및 타임의 복합추출물의 제조
1-1. 무궁화 추출물의 제조
무궁화 전초 0.5kg을 정제수로 세척하고 건조시킨 다음, 분쇄하고 세말화하여 분말을 얻었다. 분말화된 무궁화에 10배 중량의 50% 에탄올을 가한 후, 하룻밤 동안 교반시키며 에탄올 용매 추출한 후, 여과하여 그 상등액을 동결건조하여 추출물을 수득하였다.
1-2. 타임 추출물의 제조
타임의 전초를 0.5kg으로 계량한 후, 정제수로 세척하고 건조하였다. 건조된 원료를 분쇄하고 세말화하여 분말을 얻었다. 분말화된 타임에 정제수를 용매로 사용하여 12시간 상온 환류추출한 후, 냉침시키고, 1.2㎛ 투과 사이즈를 갖는 여과지로 여과하여 여과액을 수득하였다. 수득한 여과액을 감압농축 및 감압 건조로 농축하여 타임 건조 분말을 제조하였다.
1-3. 무궁화 및 타임의 복합추출물의 제조
무궁화 전초 0.25kg을 정제수로 세척하고 건조시킨 다음, 분쇄하고 세말화하여 분말을 얻었다. 분말화된 무궁화에 10배 중량의 50% 에탄올을 가한 후, 하룻밤 동안 교반시키며 에탄올 용매 추출한 후, 여과하여 그 상등액을 동결건조하여 무궁화 추출물을 제조하였다.
타임의 전초를 0.25kg으로 계량한 후, 정제수로 세척하고 건조하였다. 건조된 원료를 분쇄하고 세말화하여 분말을 얻었다. 분말화된 타임에 정제수를 용매로 사용하여 12시간 상온 환류추출한 후, 냉침 시키고, 1.2㎛ 투과 사이즈를 갖는 여과지로 여과하여 여과액을 수득하였다. 수득한 여과액을 감압농축 및 감압 건조로 농축하여 타임 추출물을 제조하였다.
상기 제조된 무궁화 추출물과 타임 추출물을 혼합하여 무궁화와 타임의 복합추출물을 제조하였다.
실시예 2. 식물 추출물 첨가에 따른 세포 생존율 변화
무궁화와 타임의 단일 또는 복합추출물이 인간각질형성세포(HaCaT, Human immortalized keratinocyte)의 생장에 미치는 효과를 아래와 같은 방법으로 확인하였다.
우선, 10% FBS(fetal bovine serum, Cambrex)가 포함된 전용 배지인 DMEM(Dulbeccos modified Eagles medium) 배지에 인간각질형성세포를 24 well 세포 배양 접시에 1×105 농도로 접종한 후 24시간 동안, 37℃, 5% CO2 습윤 조건 하에서 배양하였다. 이후, 배지를 제거하고 무혈청 DMEM 배지로 희석한 실시예 1-1 내지 1-3의 무궁화와 타임의 단일 또는 복합추출물을 농도별(10 및 50 ㎍/mL)로 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 24시간 후, 1mg/mL의 MTT를 처리하고 2시간 후, 세포에 MTT 처리로 인해 생성된 포마잔(formazan)을 DMSO로 녹여 570nm에서 흡광도를 측정하였다.
실험 결과, 인간각질형성세포에 무궁화와 타임의 단일 또는 복합추출물을 처리한 경우, 단일 또는 복합추출물들이 인간각질형성세포의 세포 생존율에 크게 영향을 미치지 않는 것으로 확인되었으며, 이를 통해 무궁화와 타임의 복합추출물이 인체에 독성을 나타내지 않음을 확인할 수 있었다(도 1 참조).
실시예 3. 항염증 활성
본 발명의 무궁화와 타임의 복합추출물이 갖는 항염증 효과를 확인하기 위해, 염증 유발에 관여하는 대표적인 세포 독성물질인 일산화질소(nitric oxide, NO)의 생성 억제율을 측정하였다.
먼저, 대식세포주인 RAW 264.7 세포를 한국세포주은행(KTCC, Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였고, 10% FBS(Fetal bovine serum)를 함유한 DMEM(Dulbecco’s modified Eagle’s medium)에 10% FBS, 100㎍/㎖ 페니실린 및 100㎍/㎖ 스트렙토마이신을 첨가한 배지에 상기 세포를 접종하여 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다.
구체적으로, 상기 RAW 264.7 세포를 1×106 cells/mL의 농도(in DMEM)로 96 웰 플레이트에 접종하고 24시간 배양 후, 실시예 1에서 제조된 무궁화와 타임의 단일추출물과, 이들의 복합추출물을 각각 1, 10, 및 100㎍/㎖ 농도로 희석한 시료를 첨가하였고, 내독소로 알려진 LPS(1μg/ml)를 함유한 새로운 배지를 처리하여 24시간 배양하였다. 그 후, 세포 배양 상등액 100㎕와 Griess reagent[1%(w/v) sulfanilamide, 0.1%(w/v) naphtylethylenediamine in 2.5%(v/v) phosphoric acid] 100㎕를 혼합하여 96 웰 플레이트에서 10분 동안 반응시키고, ELISA 리더를 사용하여 540nm에서 흡광도를 측정하여 생성된 산화질소의 양을 측정하였다. 생성된 아질산염(nitrite)의 농도는 아질산나트륨(sodium nitrite)을 DMEM 배지에 용해한 표준 곡선을 이용하여 계산하였다. LPS를 처리한 대조군과 LPS를 처리하지 않은 대조군에서 생성된 아질산염의 생성량 차이를 기준으로 각 시료의 일산화질소 생성 저해 활성을 확인하였다.
실험 결과, 무궁화와 타임의 단일추출물들에 비해 이들의 복합추출물이 산화질소 생성 억제 효과가 더 우수한 것을 확인할 수 있었다.
구체적으로, 무궁화와 타임의 2종 복합추출물은 LPS처리 대조군과 비교하여 각각 21%(1㎍/㎖), 49%(10㎍/㎖) 및 65%(100㎍/㎖) 감소된 수준으로 산화질소 생성을 억제하여 이들의 단일추출물에 비해 산화질소 생성 억제에 우수한 시너지 효과를 보이는 것으로 관찰되었다(도 2 참조).
실시예 4. 피부 보습 활성
본 발명의 무궁화와 타임의 복합추출물이 갖는 피부 보습 효과를 검증하기 위해 이들이 히알루론산(Hyaluronan) 합성 촉진에 미치는 영향을 실험하였다.
히알루론산(HA, Hyaluronan, Hyaluronic acid)은 주로 표피 각질형성세포와 진피 섬유아세포에 의해 합성되며, 수분과 결합하여 세포가 정상적으로 활동할 수 있는 환경을 조성하는 중요한 역할을 하는 물질이다. 피부에서 히알루론산의 감소는 피부 탄력 저하 및 수분 함유량 감소의 직접적인 원인 중 하나이다. 따라서 본 실험에서는 인간 섬유아세포 내에서 히알루론산의 생성량을 확인하였다.
인간 섬유아세포(NHDF)를 24 well 세포배양 접시에 1㎖의 배양액을 넣고 약 1×105의 농도로 세포를 접종한 후, 37℃, 5% CO2 환경에서 24시간 동안 배양하였다. 그 후, 상기 실시예 1에 따라 준비된 무궁화와 타임의 단일추출물과 이들의 복합추출물을 각각 1, 10, 및 100㎍/㎖를 포함한 배지로 교체하여 24시간 배양하였다. 이후 배양액을 회수(harvest)하여 4℃, 7,500rpm 환경에서 5분간 원심분리(centrifuge)한 뒤, ELISA 방법을 이용하여 Hyaluronan(Hyaluronan kit, R&D Systems, Inc., Minneapolis, MN, USA)의 발현량 변화를 확인하였다.
그 결과, 도 3을 참조하면, 무궁화와 타임의 단일추출물 처리군에 비해 이들의 복합추출물 처리군은 1㎍/㎖ 용량에서 각각 105%, 및 107% 개선된 히알루론산 합성 증가 효과를 나타내었고, 10㎍/㎖ 용량에서 각각 116%, 및 112% 개선된 히알루론산 합성 증가 효과를 나타내었으며, 100㎍/㎖ 용량에서 각각 122%, 및 107% 개선된 히알루론산 합성 증가 효과를 나타내었다(도 3 참조).
상기와 같은 결과를 통해, 본 발명의 무궁화 및 타임 복합추출물은 무궁화와 타임의 2종 혼합에 따라 히알루론산 합성 증가에 대한 시너지 효과가 발생하는 것을 확인할 수 있었다.
실시예 5. 피부 가려움증 인자인 TSLP(thymic stromal lymphopoietin) 발현 억제
사이토카인인 TSLP(thymic stromal lymphopoietin)는 IL-17, IL-6, CD11c+ 골수 수지상세포(myeloid dendritic cell)를 유도하여 Th2 염증 반응을 일으키는 것으로 알려져 있으며, 아토피 피부염 또한 Th2 매개성 면역질환으로 알려져 있다.
또한, 최근에는 TSLP(Thymic stromal lymphopoietin)가 피부염의 중증도와 연관되어 있고, 가려움 증세의 원인이라고 알려져 피부 가려움증의 마커로 사용되고 있다(Wilson SR et al., The epithelial cell-derived atopic dermatitis cytokine TSLP activates neurons to induce itch. Cell. 2013;155(2):285-95).
아토피성 피부염의 원인인 TSLP 단백질의 발현에 무궁화와 타임의 복합추출물이 미치는 영향을 검증하기 위해 인간각질형성세포(HaCaT)를 대상을 실험을 수행하였다.
인간각질형성세포(HaCaT 5×105/well)를 FBS DMEM 배지에서 24시간 배양 후, FBS 없는 DMEM 배지에 실시예 1에서 제조한 무궁화와 타임의 복합추출물을 각각 1, 10 및 100㎍/㎖의 농도로 첨가하고, TNF-a 및 IFN-r(10ng/mL)을 희석하여 처리한 후, 추가 배양하였다. 24시간 경과 후, 각 well의 상층액을 human TSLP ELISA kit를 사용하여 제조사 프로토콜에 따라 정량하였다. 또한, 비교실험을 위해 양성대조군으로 덱사메타손(dexamethasone)(1㎍/mL)을 처리하였다.
실험 결과, 도 4에 나타낸 바와 같이, TNF-a 및 IFN-r에 의해 과발현된 TSLP 생성량이 본 발명의 무궁화와 타임의 복합추출물의 처리로 유의적으로 억제됨을 확인할 수 있었다.
구체적으로 무궁화와 타임의 복합추출물 처리군은 무궁화와 타임의 단일추출물 처리군에 비해 각각 6%(1㎍/mL), 19(10㎍/mL) 및 22%(100㎍/mL); 4%(1㎍/mL), 16%(10㎍/mL) 및 20%(100㎍/mL) 감소된 TSLP 생성량이 측정되었다. 또한, TNF-a 및 IFN-r(10ng/mL) 처리 음성대조군 대비 각각 17%(10㎍/mL) 및 29%(100㎍/mL) 감소된 TSLP 생성량이 측정되었고, 무궁화와 타임의 복합추출물 100㎍/mL 처리군에서는 덱사메타손(dexamethasone)을 처리한 양성대조군 대비 TSLP 생성 억제 효과가 우수한 것으로 나타났다.
상기와 같은 결과를 통해 본 발명의 무궁화와 타임의 복합추출물이 아토피에 매우 효과적이고, 종래 아토피 피부염에 사용되는 면역억제 화합물인 덱사메타손(dexamethasone)과 병행하여 사용할 수 있는 천연 약제로 사용할 수 있음을 확인할 수 있었다.
실시예 6. 상처 재생 활성
무궁화와 타임의 복합추출물이 갖는 피부 재생 활성을 실험하였다.
세포배양 100㎜ 디쉬에 1차 배양 피부 세포인 인간각질형성세포(HaCaT)가 80% 증식했을 때, 멸균된 tip(200ul)의 끝단을 이용하여 피부 세포에 상처를 주고, 무궁화와 타임의 복합추출물을 각각 1, 10, 및 100㎍/㎖ 농도로 주입하였다. 주입 48시간 경과 후, 세포 재생 효과를 확인하였다. 세포 증식의 측정은 MTT(methylthiazole-2-yl-2.5-diphenyl tetrazolium bromide) 분석 방법과 디프 퀵 스테인(Diff quic stain) 방법을 이용하여 세포염색 후 현미경으로 확인한 후, 무처리군 대비 세포 재생율을 측정하였다.
실험 결과, 무궁화와 타임의 복합추출물의 처리로 1, 10, 및 100㎍/㎖ 농도에서 시료 무처리군 대비 각각 112%, 128%, 및 137% 개선된 상처 수복율을 나타내었고, 이를 통해 피부 재생 효과가 있는 것을 확인할 수 있었다(도 5 참조).
또한, 무궁화와 타임의 복합추출물을 손상된 피부세포에 처리하는 경우, 재생된 피부세포의 형태적인 모양이 정상적인 피부세포와 동일하게 성장하는 것으로 관찰되었다.
상기와 같은 결과를 통해, 본 발명의 무궁화와 타임의 복합추출물은 세포 독성이 없고, 산화질소 생성 억제를 통해 항염증 활성에 기여하며, 피부 보습과 아토피 피부염에 효과가 있고, 피부 장벽 형성 및 피부 재생에 기여함으로써 피부 상태 개선에 우수한 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
Claims (8)
- 무궁화 및 타임의 복합추출물을 유효성분으로 포함하되,
상기 무궁화 및 타임은 1:0.5-2.0의 중량비를 갖는 것을 특징으로 하고,
상기 무궁화 및 타임의 복합추출물은 아토피 인자인 TSLP(thymic stromal lymphopoietin) 발현을 억제하여 피부 가려움증 개선 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는,
항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부재생 촉진용 화장료 조성물. - 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 무궁화 및 타임의 복합추출물은 일산화질소(NO) 생성 억제를 통해 항염증 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부재생 촉진용 화장료 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 무궁화 및 타임의 복합추출물은 히알루론산 합성을 촉진하여 피부 보습 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부재생 촉진용 화장료 조성물. - 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 무궁화 및 타임의 복합추출물은 피부 상처 재생 촉진 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부재생 촉진용 화장료 조성물. - 무궁화 및 타임의 복합추출물을 유효성분으로 포함하되,
상기 무궁화 및 타임은 1:0.5-2.0의 중량비를 갖는 것을 특징으로 하고,
상기 무궁화 및 타임의 복합추출물은 아토피 인자인 TSLP(thymic stromal lymphopoietin) 발현을 억제하여 피부 가려움증 개선 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는,
항염증, 피부 보습, 피부 가려움증 개선, 및 피부재생 촉진용 식품 조성물. - 무궁화 및 타임의 복합추출물을 유효성분으로 포함하되,
상기 무궁화 및 타임은 1:0.5-2.0의 중량비를 갖는 것을 특징으로 하고,
상기 무궁화 및 타임의 복합추출물은 아토피 인자인 TSLP(thymic stromal lymphopoietin) 발현을 억제하여 피부 가려움증 개선 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는,
항염증 및 피부 가려움증의 치료 또는 예방용 약학적 조성물.
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