KR102130032B1 - 공기오염물질 노출 여부 확인용 바이오마커 및 이를 이용한 공기오염물질 노출 확인 방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 공기오염물질 노출 여부 확인용 바이오마커에 대한 것으로, 구체적으로, 본 발명에 따른 바이오마커인 YWHAZ는 공기오염물질인 디젤배기입자(DEP)에 대한 노출에 의해 발현이 증가하므로, 디젤배기입자 노출 여부 확인용 바이오마커로서 유용하게 사용될 수 있다.

Description

공기오염물질 노출 여부 확인용 바이오마커 및 이를 이용한 공기오염물질 노출 확인 방법{BIOMARKER FOR IDENTIFYING EXPOSURE TO AIR POLLUTANTS AND METHOD FOR IDENTIFYING EXPOSURE TO AIR POLLUTANTS USING THE SAME}
본 발명은 공기오염물질 노출 여부 확인용 바이오마커에 관한 것으로, 구체적으로 개체가 공기오염물질인 디젤배기입자(DEP)에 노출이 되었는지를 판단하기 위한 바이오마커에 관한 것이다.
디젤배기입자(DEP)란 디젤연료의 연소에 의해 생성되어 디젤엔진 배기관에서 외부로 배출되는 배기물에 포함되는 모든 입자를 의미하는 것으로, 공기오염물질의 주요 구성성분일 뿐만 아니라 호흡기 질환을 유발하는 것으로 알려져 있다(Riedl, Marc et al., Journal of Allergy and Clinical Immunology 115.2 (2005): 221-228).
구체적으로, 영국에서 천식환자를 대상으로 디젤배기입자 노출에 따른 폐 기능 변화에 관한 연구를 수행한 결과, 대조군(공원 거리 노출 환자)에 비해 노력호기량(FEV) 및 강제호기량(FVC)이 각각 약 6.1% 및 5.4% 감소한 것으로 나타났다. 또한, 미국에서 성인을 대상으로 진행한 연구 결과, 도로 150m 외 거주자보다 도로 150m 내 거주자에서의 FEV가 감소하여 폐 기능이 저하됨이 보고되었다(한국공개특허 10-2015-0116082).
이렇듯, 디젤배기입자의 노출에 따른 호흡기 질환 발병 및 호흡기 기능 저하 등의 문제가 국제적으로 이슈화되고 있으나, 국내에서 디젤배기입자의 노출에 따른 정보 제공은 미미한 실정이다. 이에 따라, 디젤배기입자의 노출 여부를 확인할 수 있는 바이오마커 등과 같은 지표 물질의 개발이 필요하며, 이를 통한 디젤배기입자 노출에 대한 정보를 제공할 수 있는 방법의 개발이 필요한 실정이다.
한국공개특허 10-2015-0116082(2015.10.15)
Riedl, Marc, and David Diaz-Sanchez. "Biology of diesel exhaust effects on respiratory function." Journal of Allergy and Clinical Immunology 115.2 (2005): 221-228.
이에, 본 발명자들은 공기오염물질인 디젤배기입자의 노출 여부를 판단하기 하기 위한 바이오마커를 개발하고자, 농도 및 시간에 따른 디젤배기입자의 노출이 단백질의 발현에 어떠한 영향을 미치는지 연구하였다. 그 결과, 디젤배기입자에 노출된 마우스의 폐에서 특정 단백질의 발현이 증가되는 것을 확인하였고, 상기 특정 단백질이 디젤배기입자의 노출 여부 확인에 탁월한 효과가 있음을 발견함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 공기오염물질 노출 여부를 판단하기 위한 바이오마커 및 이를 이용한 공기오염물질 노출 여부에 대한 확인 방법을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 YWHAZ 단백질을 포함하는 공기오염물질 노출 여부 확인용 바이오마커를 제공한다.
또한, 본 발명은 YWHAZ 단백질 또는 이를 코딩하는 유전자에 대한 검출 제제를 포함하는 공기오염물질 노출 여부 확인용 키트를 제공한다.
또한, 본 발명은 1) 공기오염물질 노출이 의심되는 개체로부터 분리된 시료에서 YWHAZ의 발현량을 측정하는 단계; 2) 상기 발현량과 정상 대조군 시료의 발현량을 비교하는 단계; 및 3) 상기 발현량이 대조군에 비해 높은 경우, 개체가 공기오염물질에 대해 노출되었다고 판정하는 단계를 포함하는 공기오염물질 노출에 대한 정보 제공 방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 YWHAZ의 유전자 또는 그와 상보적인 핵산이 집적된 공기오염물질 노출 여부 확인용 DNA 마이크로어레이 칩 및 YWHAZ의 단백질 또는 이에 특이적으로 결합하는 항체가 집적된 공기오염물질 검출용 칩을 제공한다.
본 발명에 따른 바이오마커인 YWHAZ는 공기오염물질, 예를 들어 디젤배기입자의 노출에 의해 발현이 증가하므로, 디젤배기입자 노출 여부 확인용 바이오마커로서 유용하게 활용될 수 있다.
도 1은 디젤배기입자를 노출시킨 인간 기관지 상피세포의 총 단백질을 SDS-PAGE 상에서 나타낸 것이다.
도 2는 디젤배기입자를 노출시킨 인간 기관지 상피세포에서 YWHAZ의 발현이 증가한 것을 확인한 것이다.
도 3은 디젤배기입자를 노출시킨 마우스 모델의 폐 조직에서 YWHAZ의 발현이 증가한 것을 확인한 것이다.
본 발명은 일 측면은 YWHAZ 단백질을 포함하는 공기오염물질 노출 여부 확인용 바이오마커를 제공한다.
본 명세서에서 사용된 용어 "YWHAZ"는 14-3-3 단백질 제타(14-3-3 protein zeta) 또는 티로신 3-모노옥시게나제/트립토판 5-모노옥시게나제 활성화 단백질 제타(tyrosine 3-monooxygenase/tryptophan 5-monooxygenase activation protein zeta)로도 알려져 있다. 상기 단백질은 세포 생존에 중요한 세포 사멸 경로의 주요 조절 인자로서 많은 암 및 신경 퇴행성 질환에서 중요한 역할을 한다. 상기 단백질의 서열은 NP_663723.1(NCBI)를 참고할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 공기오염물질은 디젤배기입자일 수 있다. 구체적으로, 디젤배기입자는 디젤연료의 연소 시 발생되어 디젤엔진 배기관에서 외부로 배출되는 배기물에 포함된 모든 입자를 통칭한다. 디젤배기입자는 가스, 증기, 액체 에어로졸 및 입자 물질로 구성된 복잡한 혼합물이며, 이러한 물질들은 연소에 의해 생성된다. 디젤배기입자의 주요 화학 성분으로서, 일산화탄소, 이산화탄소, 질소산화물, 황산화물, 알코올, 알데히드, 케톤, 탄화수소, 다환 방향족 탄화수소 등이 포함된다. 세계보건기구(WHO) 산하 국제암연구소(IARC)는 2012년 6월 12일 디젤배기입자를 2A등급(발암추정물질)에서 1등급 발암물질로 상향조정하였으며, 디젤배기입자의 노출로 인해 기도과민성(airway hyperresponsiveness), 기도 염증, 천식, 폐암, 만성폐쇄성폐질환 등 다양한 호흡기 질환이 야기될 수 있다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 YWHAZ는 장기적 또는 주기적인 공기오염물질의 노출에 의해 발현이 증가되며, 이를 통해 공기오염물질, 구체적으로 디젤배기입자 노출 여부 확인용 바이오마커로서 사용 가능함을 확인하였다.
또한, 본 발명의 일 측면은 YWHAZ 단백질 또는 이를 코딩하는 유전자에 대한 검출 제제를 포함하는 공기오염물질 노출 여부 확인용 키트를 제공한다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 검출 제제는 상기 YWHAZ 단백질을 코딩하는 유전자에 상보적으로 결합할 수 있는 프라이머 또는 프로브일 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "프라이머"란, 자유 3말단 수산화기(free 3' hydroxyl group)를 가지는 핵산 서열로서, 상보적인 템플레이트(template)와 염기쌍(base pair)을 형성할 수 있고 템플레이트 가닥 복사를 위한 시작 지점으로 기능을 하는 짧은 핵산 서열을 의미한다. 프라이머는 적절한 완충 용액 및 온도에서 중합반응을 위한 시약 및 상이한 4가지 뉴클레오사이드 트리포스페이트의 존재하에서 DNA 합성을 개시할 수 있다. 이때, 중합반응을 위한 시약은 DNA 중합효소 또는 역전사효소일 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "프로브"란, 유전자 또는 mRNA와 특이적 결합을 이룰 수 있는 짧게는 수 염기 내지 길게는 수십 염기에 해당하는 RNA 또는 DNA 등의 핵산 단편을 의미한다. 이러한 프로브는 올리고뉴클레오타이드(oligonucleotide) 프로브, 단쇄 DNA(single stranded DNA) 프로브, 이중쇄 DNA(double stranded DNA) 프로브, RNA 프로브 등의 형태로 제작될 수 있고, 보다 용이하게 검출하기 위하여 라벨링될 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 프라이머 또는 프로브는 포스포르아미다이트 고체 지지체 방법 또는 기타 널리 공지된 방법을 사용하여 화학적으로 합성할 수 있다. 이러한 핵산은 또한 당업계에 공지된 많은 수단을 이용하여 변형시킬 수 있다. 이러한 변형의 예로는 메틸화, 캡화, 천연 뉴클레오타이드 하나 이상의 동족체로의 치환 및 뉴클레오타이드 간의 변형일 수 있다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 검출 제제는 상기 YWHAZ 단백질에 특이적으로 결합하는 항체일 수 있으며, 다클론 항체, 단클론 항체 또는 재조합 항체를 포함할 수 있다.
상기 단백질에 결합하는 항체는 당업계에 널리 공지된 기술을 이용하여 용이하게 제조할 수 있다. 예를 들어, 단클론 항체는 당업계에 널리 공지된 하이브리도마 방법(hybridoma method)(문헌 [Kohler et al., European Jounral of Immunology, 6:511-519, 1976] 참조), 또는 파지 항체 라이브러리(문헌 [Clackson et al., Nature, 352:624-628, 1991]; [Marks et al., J. Mol. Biol, 222:581-597, 1991] 참조) 기술을 이용하여 제조될 수 있다. 상기 방법으로 제조된 항체는 겔 전기영동, 투석, 염 침전, 이온교환 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피 등의 방법을 이용하여 분리 및 정제할 수 있다.
상기 항체를 이용하여 이와 결합한 표적 단백질의 양을 확인하기 위한 분석 방법으로는 웨스턴 블랏, ELISA(enzyme linked immunosorbent assay) 방사선면역분석(RIA: Radioimmunoassay), 방사면역확산법(radioimmunodiffusion), 오우크테로니(Ouchterlony) 면역확산법, 로케트(rocket) 면역전기영동, 조직면역염색, 면역침전분석법(Immunoprecipitation Assay), 보체 고정 분석법(Complement Fixation Assay), 유세포분석(Fluorescence Activated Cell Sorter, FACS), 단백질 칩(protein chip) 등이 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 키트는 공기오염물질, 구체적으로 디젤배기입자 노출 여부를 확인하기 위해 개체로부터 YWHAZ의 mRNA 또는 단백질 발현량을 측정함으로써 디젤배기입자 노출 여부를 확인하는데 사용될 수 있다. 또한, 상기 YWHAZ의 mRNA 또는 단백질 수준을 측정하기 위한 프라이머 또는 프로브 및 항체뿐만 아니라, 분석 방법에 적합한 한 종류 또는 그 이상의 다른 구성 성분 조성물, 용액 또는 장치가 포함될 수 있다.
구체적으로, 본 발명의 공기오염물질 노출 여부 확인용 키트는 RT-PCR을 수행하기 위해 필요한 필수 요소를 포함할 수 있다. 상기 RT-PCR 키트는 YWHAZ 유전자에 대한 특이적인 각각의 프라이머쌍 이외에도 테스트 튜브 또는 다른 적절한 컨테이너, 반응 완충액, 데옥시뉴클레오타이드(dNTPs), Taq-폴리머라아제 및 역전사효소와 같은 효소, DNase, RNAse 억제제, 멸균수 등을 포함할 수 있다. 또한, 정량 대조군으로 사용되는 유전자에 특이적인 프라이머쌍을 포함할 수 있다.
본 발명은 다른 측면은 1) 공기오염물질 노출이 의심되는 개체로부터 분리된 시료에서 YWHAZ의 발현량을 측정하는 단계; 2) 상기 발현량과 정상 대조군 시료의 발현량을 비교하는 단계; 및 3) 상기 발현량이 대조군에 비해 높은 경우, 개체가 공기오염물질에 대해 노출되었다고 판정하는 단계를 포함하는 공기오염물질 노출에 대한 정보 제공 방법을 제공한다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 시료는 개체의 기관지폐포세척액 또는 폐 세포, 구체적으로는 폐 상피세포일 수 있다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 YWHAZ의 발현량을 측정하는 단계는 YWHAZ의 mRNA 측정 또는 단백질 측정을 통해 수행할 수 있다. 구체적으로, 상기 mRNA 측정은 상기 YWHAZ 유전자에 특이적으로 결합하는 프로브 또는 프라이머를 이용하여 수행할 수 있으며, 상기 단백질 측정은 상기 YWHAZ 단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 이용하여 수행할 수 있다.
상기 mRNA 측정은 역전사효소 중합효소반응(RT-PCR), 경쟁적 역전사효소 중합효소반응(competitive RT-PCR), 실시간 역전사효소 중합효소반응(real time quantitative RT-PCR), RNase 보호 분석법(RNase protection method), 노던 블랏팅(northern blotting) 또는 유전자 칩을 이용해 측정할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 단백질 측정은 2차원 겔 전기 영동법(Two-dimensional(2-D) Electrophoresis), LC-MS/MS(Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry), 웨스턴 블랏, ELISA, 조직면역염색 또는 면역침전분석법을 이용해 측정할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명은 또 다른 측면은 YWHAZ의 유전자 또는 그와 상보적인 핵산이 집적된 공기오염물질 노출 여부 확인용 DNA 마이크로어레이 칩 및 YWHAZ의 단백질 또는 이에 특이적으로 결합하는 항체가 집적된 공기오염물질 검출용 칩을 제공한다.
상기 DNA 마이크로어레이 칩은 YWHAZ의 유전자 또는 그와 상보적인 핵산을 포함하는 것을 제외하고는 통상적인 마이크로어레이로 이루어진다. 상기 DNA 마이크로어레이 칩은 유전자 또는 그의 단편에 해당하는 프로브로 부착될 수 있다.
상기 마이크로어레이칩을 제작하는 방법은 하기와 같다. 상기 탐색된 바이오마커를 탐침 DNA 분자로 이용하여 DNA 마이크로어레이 칩의 기판 상에 고정화시키기 위해 파이조일렉트릭(piezoelectric) 방식을 이용한 마이크로피펫팅(micropipetting)법 또는 핀(pin) 형태의 스폿터(spotter)를 이용한 방법 등을 사용한다. DNA 마이크로어레이 칩 기판은 아미노-실란(amino-silane), 폴리-L-라이신(poly-L-lysine) 및 알데히드(aldehyde) 등의 활성기가 코팅될 수 있다. 또한, 상기 기판은 슬라이드 글래스, 플라스틱, 금속, 실리콘, 나일론 막 또는 니트로셀룰로스 막일 수 있다. 또한, 키트는 혼성화에 사용되는 완충용액, RNA로부터 cDNA를 합성하기 위한 역전사효소, cNTPs, rNTP(사전 혼합형 또는 분리 공급형), 형광 염색제의 화학적 유도제와 같은 표식시약, 세척 완충용액 등으로 구성될 수 있다.
이하, 본 발명을 하기 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이들만으로 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 디젤배기입자의 노출에 따른 인간 기관지 상피세포(NHBE)의 YWHAZ 발현 변화 확인
실시예 1.1. 세포 배양 및 디젤배기입자의 처리
인간 기관지 상피세포(cat#. CC-2540; Lonza, Basel, Switzerland)(3000 cells/cm2)를 T-플라스크 BEGM™BulletKit™(Lonza, Basel, Switzerland)에 37℃, 5% CO2 조건으로 배양하였다. 배지는 세포 포화도가 90%에 도달할 때까지 48시간마다 교체하였다. 실험에 사용되는 세포를 6-웰 플레이트에 계대배양을 하였다. 실험 24시간 전, 배지를 0.1%(v/v) FBS가 첨가된 BEBM(bronchial epithelial cell growth basal medium)으로 교체하여 30분 동안 배양한 후, 5 ㎍/㎖ 농도의 디젤배기입자를 8시간 및 24시간 동안 처리한 후, 다시 배양하였다.
실시예 1.2. 2차원 겔 전기영동 및 이미지 분석
세포 배양액을 원심분리하여 인간 기관지 상피세포를 수확하였고, 5 mM Tris-HCl(pH 7.4), 100 mM NaCl, 1% Triton X-100 및 2 mM PMSF를 포함하는 용해 완충액으로 파쇄시켰다. 상기 세포 용해물을 12,000×g에서 30분 동안 원심분리한 후, 상청액 부분을 수득하였다. 단백질 농도는 BCA 분석 키트(Pierce)로 측정하였다. Immobiline DryStrips(Amersham Biosciences)을 IPGphor system(Amersham Biosciences)에서 추출된 1 mg의 단백질로 수행되는 등전점전기영동(IEF)에 사용하였다. IEF 분리 이후, 상기 단백질들을 2차원 겔에서 SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate Poly Acrylamide Gel Electrophoresis)에 의해 분리하였다.
이미지 분석을 위해, 제조자의 지시에 따라 상기 겔을 쿠마시 브릴리언트 블루 G-250을 사용하여 시각화하였다. 상기 2-D 겔을 ImageScanner(Amersham Biosciences)의 전송 모드로 스캔하였다. 스팟 검출 및 매칭은 ImageMaster 2D version 5.0(Amersham Biosciences)을 사용하여 실시하였다. 디지털화된 이미지들을 스팟의 면적(스팟의 "용적") 뿐만 아니라 광학밀도를 통합시키면서 2-D 스팟의 강도를 측정하기 위해 ImageMaster 프로그램을 사용하여 분석하고 표준화하였다. 상기 강도 측정값들을 표준화하고, 통계분석을 위해 SPSS 12.0으로 전송하였다. 각 겔에서 확인된 모든 스팟들은 10 내지 200 kDa의 분자량 범위와 함께 pH 3 내지 10 범위에 국한되었다. 상기 2-D 겔 이미지를 마스터 겔 및 참조 맵으로서 사용하였다.
도 1에 나타낸 바와 같이, 디젤배기입자를 처리한 세포 추출물의 경우, 디젤배기입자를 5 ㎍/㎖ 농도로 8시간 동안 처리했을 때, 16개의 단백질 스팟이 변하였으며, 상기 단백질은 칼슘조절, 세포골격, 세포주기 조절 및 신호전달을 포함하는 것으로 나타났다. 상기와 같이, 디젤배기입자를 8시간 동안 처리한 세포에서 변화한 16개의 단백질을 하기 표 1에 나타내었다. 또한, 디젤배기입자를 5 ㎍/㎖의 농도로 24시간 동안 처리했을 때, 18개의 단백질 스팟이 변하였으며, 상기 단백질은 클로라이드 채널, 칼슘조절, 당분해효소, 세포골격, 작용조절 및 항균펩티드를 포함하는 것으로 나타났다. 상기와 같이, 디젤배기입자를 24시간 동안 처리한 세포에서 변화한 18개의 단백질을 하기 표 2에 나타내었다. 상기 스팟들을 겔로부터 잘라내었고, 겔에서 단백질을 소화시키기 위해 트립신과 함께 배양하였으며, 그 후 LC-MS/MS를 사용하여 분석하였다.
Figure 112018129407488-pat00001
Figure 112018129407488-pat00002
실시예 1.3. 웨스턴 블랏
50 mM Tris-HCL(pH 7.4), 50 mM NaCl, 0.1%(v/v) SDS, 1%(v/v) TritonX-100, 0.5 mM EDTA, 및 100 mM PMSF를 증류수에 첨가하여 단백질 용해 용액을 제조하였다. 디젤배기입자에 노출시킨 인간 기관지상피세포와 동물 모델의 폐 조직을 상기 단백질 용해 용액을 처리하여 균질화하였다. 그 후, 시료를 4℃에서 30분 동안 14,000 rpm으로 원심분리하였다. 원심분리한 용액에서 상층액을 수집하였다. 상층액 내 단백질들을 SDS-PAGE를 이용해 분리하였고, PVDF 막으로 이동시켰다. 블로킹(blocking) 과정을 진행하기 위해 막에 0.1%(v/v) Tween 20 및 5%(v/v) BSA를 첨가한 TBS 버퍼를 처리하여 상온에서 2시간 동안 반응시켰다. 그 후, 막을 0.1%(v/v) Tween 20을 첨가한 TBS 버퍼로 3번 세척하였다.
세척된 막에 토끼 항-YWHAZ 항체(1:1000, Abcam, Cambridge, MA, USA)를 처리하여 4℃에서 하룻밤 동안 반응시켰다. 다음날, 막을 0.1%(v/v) Tween 20을 첨가한 TBS 버퍼로 3번 세척하였다.
세척된 막에 겨자무과산화효소(HRP)가 표지된 염소 항-토끼 항체(Santa Cruz)를 처리하고 1시간 동안 반응시켰다. 그 후, 막을 0.1%(v/v) Tween 20을 첨가한 TBS 버퍼로 3번 세척하였다. 세척된 막에 마우스 항-염소(Santa Cruz) 항체를 처리하고 1시간 동안 반응시켰다. 측정은 WEST-ZOL 플러스 웨스턴 블랏 탐지 시스템(iNtRon, SungNam, 한국)을 이용하였다. 단백질의 상대량은 β-actin(Sigma-aldrich, St Louis, USA)을 통해 비교하였다.
웨스턴 블랏을 통한 디젤배기입자 노출에 따른 인간 기관지 상피세포의 YWHAZ의 발현 변화를 확인한 결과, 디젤배기입자에 노출된 경우 YWHAZ의 발현이 증가한 것으로 나타났다(도 2).
실시예 2. 디젤배기입자 노출에 따른 마우스의 YWHAZ 발현 변화 확인
실시예 2.1. 마우스 준비 및 디젤배기입자 노출
6주령 BALB/c 암컷 마우스를 챔버에 넣고, 매주 5일간 100 ug/m3 농도의 디젤배기입자를 4주 및 8주 동안 챔버에 노출하여 흡입시켰다. 대조군 마우스는 주위의 공기에 노출시켰다. 이후, 기관지폐포세척액(BALF)을 수집하였고, 폐 조직을 단백질 발현량 측정을 위해 가공하였다. 구체적으로, 폐 조직에 4%(v/v) 완충 파라포름알데히드(4% buffered paraformaldehyde)를 처리하고 파라핀에 고정시켰다. 폐 조직을 4 ㎛ 두께의 슬라이스로 잘랐다.
실시예 2.2. 웨스턴 블랏
인간 기관지 상피세포 대신 상기 실시예 2.1.의 파라핀화된 폐 조직을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1.3.과 실질적으로 동일한 방법으로 웨스턴 블랏을 수행하였다. 웨스턴 블랏을 통한 디젤배기입자 노출에 따른 마우스 폐 조직에서의 YWHAZ의 발현 변화를 확인한 결과, 디젤배기입자에 노출된 마우스에서 YWHAZ의 발현이 증가한 것으로 나타났다(도 3).

Claims (15)

  1. YWHAZ 단백질 또는 이를 코딩하는 유전자에 대한 검출 제제를 포함하는 공기오염물질 노출 여부 확인용 조성물로서,
    상기 공기오염물질은 디젤배기입자인, 공기오염물질 노출 여부 확인용 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 검출 제제가 상기 YWHAZ 단백질을 코딩하는 유전자에 상보적으로 결합할 수 있는 프라이머 또는 프로브인, 공기오염물질 노출 여부 확인용 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 검출 제제가 상기 YWHAZ 단백질에 특이적으로 결합하는 항체인, 공기오염물질 노출 여부 확인용 조성물.
  4. YWHAZ 단백질 또는 이를 코딩하는 유전자에 대한 검출 제제를 포함하는 공기오염물질 노출 여부 확인용 키트로서,
    상기 공기오염물질은 디젤배기입자인, 공기오염물질 노출 여부 확인용 키트.
  5. 삭제
  6. 제4항에 있어서,
    상기 검출 제제가 상기 YWHAZ 단백질을 코딩하는 유전자에 상보적으로 결합할 수 있는 프라이머 또는 프로브인, 공기오염물질 노출 여부 확인용 키트.
  7. 제4항에 있어서,
    상기 검출 제제가 상기 YWHAZ 단백질에 특이적으로 결합하는 항체인, 공기오염물질 노출 여부 확인용 키트.
  8. 1) 공기오염물질 노출이 의심되는 개체로부터 분리된 시료에서 YWHAZ의 발현량을 측정하는 단계;
    2) 상기 발현량과 정상 대조군 시료의 발현량을 비교하는 단계; 및
    3) 상기 발현량이 대조군에 비해 높은 경우, 개체가 공기오염물질에 대해 노출되었다고 판정하는 단계를 포함하는 공기오염물질 노출에 대한 정보 제공 방법으로서,
    상기 공기오염물질은 디젤배기입자인, 공기오염물질 노출에 대한 정보 제공 방법.
  9. 삭제
  10. 제8항에 있어서,
    상기 시료는 개체의 기관지폐포세척액 또는 폐 세포인, 공기오염물질 노출에 대한 정보 제공 방법.
  11. 제8항에 있어서,
    상기 YWHAZ의 발현량을 측정하는 단계가 YWHAZ의 mRNA 측정 또는 단백질 측정을 통해 수행하는, 공기오염물질 노출에 대한 정보 제공 방법.
  12. 제11항에 있어서,
    상기 mRNA 측정은 상기 YWHAZ 유전자에 특이적으로 결합하는 프로브 또는 프라이머를 이용하여 수행하는, 공기오염물질 노출에 대한 정보 제공 방법.
  13. 제11항에 있어서,
    상기 단백질 측정은 상기 YWHAZ 단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 이용하여 수행하는, 공기오염물질 노출에 대한 정보 제공 방법.
  14. YWHAZ의 유전자 또는 그와 상보적인 핵산이 집적된 공기오염물질 노출 여부 확인용 DNA 마이크로어레이 칩으로서,
    상기 공기오염물질은 디젤배기입자인, 공기오염물질 노출 여부 확인용 DNA 마이크로어레이 칩.
  15. YWHAZ의 단백질 또는 이에 특이적으로 결합하는 항체가 집적된 공기오염물질 노출 여부 확인용 칩으로서,
    상기 공기오염물질은 디젤배기입자인, 공기오염물질 노출 여부 확인용 칩.
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