KR102109780B1 - 에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법 - Google Patents

에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명에 따른 에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법은 (a) 에틸 락테이트(ethyl lactate) 용매와 천연물질을 혼합하여 혼합물을 얻는 단계, (b) 상기 혼합물로부터 추출액을 추출하는 단계 및 (c) 상기 추출액을 농축하여 농축된 추출액을 얻는 단계를 포함하여 천연물질로부터 추출물의 추출 수율이 우수하고 상기 추출액 내의 생리활성물질 함량을 증대시킬 수 있으며, 인체에 무해하고 독성이 없는 추출물을 수득할 수 있는 효과가 있다.

Description

에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법{METHOD FOR PRODUCING THE EXTRACTS OF NATURAL MATERIAL USING ETHYL LACTATE}
본 발명은 에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법에 관한 것으로서, 천연물질 추출물의 추출 효과가 우수하며 인체에 무해한 에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법에 관한 것이다.
식품, 화장품, 농약, 의약 업체들은 자연계 천연물질 예를 들어 식물, 해조류, 미세조류 등으로부터 추출물을 추출한다. 상기 추출된 추출물은 에센셜 오일, 안료, 약효물질, 향료 등의 제품에 사용된다. 상기 천연물질로부터 추출물을 추출하기 위해 열수 추출법, 초임계 추출법, 용매 추출법이 사용된다. 또한 상기 추출물의 추출에 사용되는 용매는 헥산, 에틸아세테이트, 메탄올, 물 등이 사용된다.
상기 용매는 천연물질에 녹아있는 상태에서 인체에 직접 접촉되므로 인체유해성이 없어야 한다. 그러나 메탄올 용매 및 헥산 용매는 인체에 유해하다. 또한 에틸 아세테이트 용매 및 헥산 용매는 천연물질로부터 추출물을 추출하는 수율이 낮다. 아울러 물 용매는 천연물질로부터 추출물을 추출하는 수율은 우수하나, 상기 천연물질로부터 추출된 추출물의 종류 및 추출물의 양이 적다.
따라서 천연물질로부터 추출물을 추출하는데 있어 보다 높은 효율을 구현할 수 있고, 인체에 무해한 용매에 대한 연구가 여전히 필요하다.
본 발명은 상기한 문제점을 해결하기 위해 신규의 용매를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
본 발명의 일실시예에 의하면, 본 발명에 따른 에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법은 (a) 에틸 락테이트(ethyl lactate) 용매와 천연물질을 혼합하여 혼합물을 얻는 단계, (b) 상기 혼합물로부터 추출액을 추출하는 단계 및 (c) 상기 추출액을 농축하여 농축된 추출액을 얻는 단계를 포함한다.
본 발명에 따른 에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법은 천연물질로부터 추출물의 추출 수율이 우수하고 상기 추출액 내의 생리활성물질 함량을 증대시킬 수 있는 효과가 있다.
또한, 본 발명에 따른 에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법은 에틸 락테이트를 용매로 사용함으로써 인체에 무해하고 독성이 없는 추출물을 수득할 수 있는 효과가 있다.
전술한 목적, 특징 및 장점은 상세하게 후술되며, 이에 따라 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 본 발명의 기술적 사상을 용이하게 실시할 수 있을 것이다. 본 발명을 설명함에 있어서 본 발명과 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 상세한 설명을 생략한다. 이하, 본 발명에 따른 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다.
본 발명은 이하에서 개시되는 실시예에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 수 있으며, 단지 본 실시예는 본 발명의 개시가 완전하도록 하며 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위하여 제공되는 것이다.
< 에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법>
본 발명에 따른 에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법은 (a) 에틸 락테이트(ethyl lactate) 용매와 천연물질을 혼합하여 혼합물을 얻는 단계, (b) 상기 혼합물로부터 추출액을 추출하는 단계 및 (c) 상기 추출액을 농축하여 농축된 추출액을 얻는 단계를 포함하여, 천연물질 추출물을 제조한다.
먼저, 본 발명에 따른 제조방법은 (a) 에틸 락테이트(ethyl lactate) 용매와 천연물질을 혼합하여 혼합물을 얻는 단계를 포함한다.
본 발명에 따른 제조방법은 에틸 락테이트(ethyl lactate)를 용매로 사용한다.
에틸 락테이트의 IUPAC 명칭은 에틸-2-하이드록시프로파노에이트(Ethyl-2-hydroxypropanoate)로서 락트산 및 에탄올로부터 형성된 에스테르 유도체이다.상기 에틸 락테이트는 2번 탄소에 하이드록시기(-OH)를 가지며, 구체적으로 하기 화학식 1구조이다.
[화학식 1]
Figure 112018077584880-pat00001
상기 에틸 락테이트는 와인, 닭고기 등 다양한 식품에 함유되어 있으며, -26℃ 내지 154℃ 에서 액체로 존재한다. 상기 에틸 락테이트는 용매로 사용될 수 있으며, 상기 에틸 락테이트 용매는 외관상 무색투명하다.
상기 에틸 락테이트 용매는 기존의 메탄올 용매 및 헥산 용매와 달리 독성이 없다. 또한 상기 에틸 락테이트 용매는 완전한 생분해가 가능하다. 아울러 상기 에틸 락테이트 용매는 에틸 락테이트의 분자 내에 -OH기를 포함하고 있는 양성자성 극성 용매인바 물, 알코올 등에 완전히 용해될 수 있다. 또한 상기 에틸 락테이트 용매는 천연물질로부터 추출물을 추출하는데 있어 수율이 우수하다. 아울러 상기 에틸 락테이트 용매는 천연물질로부터 추출물을 추출하는데 있어 상기 추출물의 종류 및 상기 추출물의 양을 증대시키는 효과가 있다.
상기 (a) 단계의 천연물질은 생약과 같은 식물로서 자연계에 존재하는 물질이다. 구체적으로 상기 (a) 단계의 천연물질은 건강(생강), 담배잎, 당귀, 대황, 마치현, 맥문동, 산수유, 상백피, 애엽, 유근피, 인삼, 작약, 적하수오, 천궁, 황기, 황칠잎, 감초, 박하, 제충국, 포포나무잎 등을 포함할 수 있다. 바람직하게는 상기 (a) 단계의 천연물질은 대황, 작약, 천궁, 당귀, 및 인삼 가운데 1종 이상을 포함할 수 있다.
바람직하게는, 상기 (a) 단계는 상기 에틸 락테이트(ethyl lactate) 용매와 상기 천연물질이 부피비가 5:1 내지 100:1의 범위로 혼합되어 수행될 수 있다. 보다 바람직하게는, 상기 에틸 락테이트 용매와 천연물질의 부피비는 15:1 내지 25:1의 범위일 수 있다. 상기 에틸 락테이트 용매/천연물질의 부피비가 5 미만인 경우 상기 천연물질로부터 추출물을 추출하는 수율이 저하될 수 있다. 또한 상기 에틸 락테이트 용매/천연물질의 부피비가 100을 초과하는 경우 상기 천연물질로부터 추출물을 추출하는 효율이 저하될 수 있다.
다음으로 본 발명에 따른 제조방법은 (b) 상기 혼합물로부터 추출액을 추출하는 단계를 포함한다.
상기 (b) 단계는 상기 혼합물을 교반하여 상기 에틸 락테이트 용매에 상기 천연물질을 균일하게 혼합하고, 일정 온도와 시간 동안 추출액을 추출하는 단계일 수 있다.
바람직하게는, 상기 (b) 단계에서 추출 공정은 20℃ 내지 200℃의 온도범위에서 1 내지 24시간 동안 수행될 수 있다. 보다 바람직하게는, 상기 (b) 단계에서 추출 공정은 60℃ 내지 180℃의 온도범위에서 2 내지 5시간 동안 수행될 수 있다. 상기 추출액을 추출하는 온도범위가 20℃ 미만인 경우 상기 천연물질로부터 추출물을 추출하는 수율이 저하될 수 있다. 또한 상기 추출액을 추출하는 온도범위가 200℃를 초과하는 경우 상기 천연물질로부터 추출된 추출물의 종류 및 추출물의 양이 저하될 수 있다.
다음으로 본 발명에 따른 제조방법은 (c) 상기 추출액을 농축하여 농축된 추출액을 얻는 단계를 포함한다.
상기 (c) 단계에서는 상기 추출액을 일정시간 동안 농축하는 단계를 거쳐 상기 추출액에 존재하는 에틸 락테이트 용매를 상당량 제거하고, 상기 추출액으로부터 농축된 추출액을 수득할 수 있다.
바람직하게는, 상기 (c) 단계는 상기 추출액에 존재하는 침천물 및 불순물을 여과한 후 상기 추출액을 농축하는 공정이 수행될 수 있다. 상기 추출액의 농축 공정은 공지의 농축 공정이 사용될 수 있으며 바람직하게는 진공감압농축기를 이용하여 수행될 수 있다. 상기 농축 공정에 의해서 상기 추출액에 포함된 에틸 락테이트 용매는 상당량 제거될 수 있다. 이에 따라, 상기 (c) 단계에서는 침전물, 불순물 및 에틸 락테이트 용매가 상당량 제거된 농축된 추출액을 수득할 수 있고, 상기 농축된 추출액으로부터 천연물질 추출물을 얻게 된다.
다음으로 본 발명에 따른 제조방법은 추가적으로 (d) 상기 농축된 추출액을 건조하는 단계를 더 포함할 수 있다.
상기 (d) 단계에 의해 상기 농축된 추출액에 존재하는 잔여분의 에틸락테이트 용매가 제거될 수 있다. 바람직하게는, 상기 (d) 단계에서는 상기 농축된 추출액의 손상을 최소화하기 위해 동결건조공정이 수행될 수 있다. 상기 동결건조공정에 의해 수득한 천연물질 추출물은 보존 기간이 증가되는 효과가 있다.
본 발명의 제조방법에 따라 제조된 상기 천연물질 추출물은 폴리페놀(polyphenol) 및 플라보노이드(flavonoid) 가운데 1종 이상의 성분을 포함할 수 있다. 상기 폴리페놀은 식물에서 발견되는 화학물질로서 인체 내의 활성 산소를 제거하는 황산화 효과가 있다. 또한, 상기 폴리페놀은 인체 내의 DNA, 세포구성 단백질 및 효소를 보호하는 효과가 있다. 아울러, 상기 폴리페놀은 항암작용과 함께 심장 질환을 막아주는 효과가 있다. 상기 플라보노이드는 상기 폴리페놀과 같이 식물에서 발견되는 화학물질로서 항알레르기, 항염증 등 생물학적 및 약리학적 효과가 있다.
또한, 상기 천연물질 추출물은 DPPH(1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) 라디칼 소거활성을 나타낼 수 있다. 상기 DPPH는 일종의 자유 라디칼로서 상기 천연물질 추출물은 인체 내의 유해한 물질인 DPPH 자유 라디칼을 소거하는 효과가 있다. 아울러, 상기 천연물질 추출물은 인체 내의 DPPH 라디칼을 소거함으로써 인체 내에 활성산소를 효과적으로 제거하는 항산화 활성 효과가 있다.
이하, 실시예를 통해 본 발명의 구체적인 태양을 살펴보기로 한다.
< 실시예 >
<실시예 1>
대황, 작약, 천궁, 당귀, 인삼, 박하, 제충국, 및 포포나뭇잎을 분쇄하여 에틸 락테이트(100%) 용매와 교반한 후 80℃에서 3시간 동안 추출하였다. 이후 상기 추출액을 여과한 후 진공감압농축기로 농축하여 농축된 추출액을 얻었다. 이후 상기 농축된 추출액을 동결건조하여 천연물질 추출물을 얻었다.
<실시예 2>
대황, 작약, 천궁, 당귀, 인삼, 박하, 제충국, 및 포포나뭇잎을 분쇄하여 에틸 락테이트(100%) 용매와 교반한 후 150℃에서 추출한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하다.
<비교예 1>
용매로서 메탄올(MeOH)을 사용하고 65℃에서 추출한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하다.
<비교예 2>
용매로서 헥산(Hexane)을 사용하고 65℃에서 추출한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하다.
<비교예 3>
용매로서 에틸 아세테이트(Ethyl acetate)를 사용하고 75℃에서 추출한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하다.
<비교예 4>
용매로서 물(H2O)를 사용하고 100℃에서 추출한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하다.
<실험예>
1. 폴리페놀(Polyphenol) 함량 측정
실시예 1,2 및 비교예 1 내지 4의 용매에 따른 시료별 폴리페놀(Polyphenol) 함량을 확인하기 위해, 1mg/mL 농도로 메탄올에 용해시킨 추출물 400μL 와 Folin-Denis reagent 400μL, 10% Na2CO3 400μL를 혼합하였다. 이후 상기 혼합액을 암실에서 50분간 반응시키고 원심분리기를 이용하여 13,000rpm에서 5분간 원심분리 하였다. 이후 상기 혼합액 중 상등액 120μL를 96-well plate에 분주하여 700nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준물질로 tannic acid를 이용하여 검량선을 작성하고, 각 추출물의 phenolic 화합물의 함량을 mg/g tannic acid equivalent(TAE)로서 하기 표 1에 나타내었다.
2. 플라보노이드(flavonoid) 함량 측정
실시예 1,2 및 비교예 1 내지 4의 용매에 따른 시료별 플라보노이드(flavonoid) 함량을 확인하기 위해, 1mg/mL 농도로 메탄올에 용해시킨 추출물 100μL와 10% aluminum nitrate 20μL, 1M potassium acetate 20μL, 메탄올 860μL를 혼합하였다. 이후, 상기 혼합액을 40분간 반응시킨 후 100μL를 96-well plate에 분주하고 420nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준물질로 rutin을 이용하여 검량선을 작성하고, 각 추출의 flavonoid 함량을 mg/g rutin equivalent (RE)로서 하기 표 2에 나타내었다.
3. DPPH 라디칼 소거활성 평가
실시예 1,2 및 비교예 1 내지 4의 용매에 따른 시료별 DPPH 라디칼 소거활성을 평가하기 위해, 메탄올에 희석한 추출물을 96well plate에 20μL씩 분주하고, 200μM DPPH(1-diphenyl-2-picryl hydrazyl)용액 180μL를 가하여 15분간 암실에서 반응시킨 후 517nm에서 흡광도를 측정하였다. 상기 결과에 기반하여 DPPH 라디칼 50%를 소거하는데 필요한 추출물의 농도를 나타내는 SC50 값을 산출하였다. 또한, 대조군으로서 ascorbic acid(비타민 C)의 SC50 값을 기준으로 각 추출물의 SC50 값을 비교한 Relative activity(%)를 산출하였다. 하기 [표 3] 및[표 4] 각각에 추출물의 SC50 및 Relative activity(%) 를 나타내었다. SC50 값이 낮고, Relative activity(%) 수치가 높을수록 우수한 DPPH 라디칼 소거활성을 가지는 것으로 판단한다.
4. 시료별 추출 수율 평가
실시예 1,2 및 비교예 1 내지 4의 용매에 따른 시료별 추출 수율을 확인하기 위해, 추출물의 무게(g)/시료의 무게(g) ×100에 의해 수율(%)을 측정하여 [표 5] 에 나타내었다.
시료별 폴리페놀(Polyphenol) 함량
폴리페놀(Polyphenol) 함량(mg/g(TAE))
대황 작약 천궁 당귀 인삼 박하 제충국 포포
나뭇잎
실시예1 208.70 63.70 21.07 23.90 21.00 - - -
실시예2 139.80 73.50 29.11 27.90 50.20 - - -
비교예1 7.30 97.40 20.36 7.30 10.10 - - -
비교예2 29.60 15.20 9.89 7.40 1.10 - - -
비교예3 217.70 33.10 18.30 10.80 3.90 - - -
비교예4 7.60 68.30 7.80 7.60 3.60 - - -
상기 표 1의 결과를 살펴보면 천궁, 당귀, 인삼으로부터 에틸 락테이트 용매를 사용하여 추출된 폴리페놀의 함량은 천궁, 당귀, 인삼으로부터 메탄올 용매, 헥산 용매, 에틸 아세테이트 용매 및 물을 사용하여 추출된 폴리페놀의 함량보다 높은 것을 알 수 있다. 특히 천궁, 당귀, 인삼으로부터 150℃의 에틸 락테이트 용매를 사용하여 추출된 폴리페놀의 함량이 가장 높은 것을 알 수 있다.
시료별 플라보노이드(flavonoid) 함량
플라보노이드(flavonoid) 함량 (mg/g(RE))
대황 작약 천궁 당귀 인삼 박하 제충국 포포
나뭇잎
실시예1 4.2 0.7 1.23 0.4 0.1 - - -
실시예2 0.0 1.7 1.85 0.8 0.5 - - -
비교예1 3.5 0.3 1.54 0.0 0.8 - - -
비교예2 0.4 -0.2 0.44 3.2 11.8 - - -
비교예3 -3.7 0.0 0.93 0.5 11.9 - - -
비교예4 0.0 -0.3 2.55 0.0 -1.6 - - -
상기 표 2의 결과를 살펴보면 특히 대황, 작약으로부터 에틸 락테이트 용매를 사용하여 추출된 플라보노이드의 함량은 비교예에서 사용된 용매로 추출된 플라보노이드 함량보다 높은 것을 알 수 있다.
시료별 DPPH 라디칼 소거활성 - SC50
SC50 (mg/mL)
대황 작약 천궁 당귀 인삼 박하 제충국 포포
나뭇잎
실시예1 0.316 0.974 7.321 11.07 9.487 0.503 0.799 2.138
실시예2 0.649 1.621 8.069 9.145 4.908 0.590 0.881 0.305
비교예1 0.302 1.081 7.413 16.47 23.62 0.924 1.105 1.762
비교예2 5.00 15.36 6.316 22.80 141.5 48.02 14.55 7.449
비교예3 0.176 0.987 4.080 13.77 29.53 3.904 6.509 8.643
비교예4 0.959 0.777 11.34 15.29 25.48 0.921 1.345 2.892
비타민 C(대조군) 0.054 0.105 0.184 0.105 0.184 0.076 0.201 0.201
시료별 DPPH 라디칼 소거활성 - Relative activity
Relative activity (%)
대황 작약 천궁 당귀 인삼 박하 제충국 포포
나뭇잎
실시예1 17.10 10.78 2.51 0.95 0.75 39.97 25.03 9.40
실시예2 8.32 6.48 2.28 1.15 1.45 34.06 22.70 65.82
비교예1 17.89 13.51 2.48 0.64 0.30 21.77 19.70 11.41
비교예2 1.08 0.68 2.91 0.46 0.05 0.42 1.37 2.70
비교예3 30.66 10.64 4.51 0.76 0.24 5.15 3.07 2.33
비교예4 5.63 9.71 1.62 0.69 0.28 21.82 14.87 6.95
비타민 C(대조군) 100 100 100 100 100 100 100 100
상기 표 3, 표 4의 결과를 살펴보면 특히 당귀, 인삼, 박하, 제충국, 포포 나뭇잎으로부터 에틸 락테이트 용매를 사용하여 추출된 항산화 물질의 함량이 비교예 대비 월등히 높은 것을 알 수 있다.
시료별 추출 수율
추출 수율 (%)
대황 작약 천궁 당귀 인삼 박하 제충국 포포
나뭇잎
실시예1 17.15 5.72 11.11 17.96 4.38 2.45 5.31 5.47
실시예2 44.20 27.57 33.26 6.65 8.63 6.80 6.37 11.58
비교예1 27.16 18.50 22.90 29.27 12.97 16.70 16.40 14.73
비교예2 0.43 0.30 3.33 1.13 0.97 2.40 2.83 3.02
비교예3 4.08 0.79 4.60 1.57 1.08 3.71 4.04 5.37
비교예4 43.60 25.86 29.02 68.96 7.30 28.06 20.26 19.14
상기 표 5의 결과를 살펴보면 대황, 작약, 천궁으로부터 에틸 락테이트 용매를 사용하여 추출하는 경우 특히 헥산 용매, 에틸 아세테이트 용매 대비 추출 수율이 우수한 것을 알 수 있다.
상기와 같이 에틸 락테이트 용매를 이용한 천연물질 추출은 헥산 용매 천연 및 에틸 아세테이트 용매를 이용한 천연물질 추출 대비 천연물질 추출물의 수율이 우수한 점을 알 수 있다. 또한 에틸 락테이트 용매를 이용한 천연물질 추출은 메탄올 용매, 헥산 용매, 에틸 아세테이트 용매 및 물 대비 폴리페놀 성분을 추출하는 효율이 우수한 점을 알 수 있다. 아울러 에틸 락테이트 용매를 이용한 천연물질 추출은 메탄올 용매 및 물 대비 플라보노이드 성분을 추출하는 효율이 우수한 점을 알 수 있다. 또한 에틸 락테이트 용매를 이용하여 인산, 박하, 제충국, 포포 나뭇잎으로부터 추출된 천연물질 추출물은 항산화 활성을 나타내는 성분의 함량이 높은 점을 알 수 있다.
이상과 같이 본 발명에 대해 설명하였으나, 본 명세서에 개시된 실시예에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 기술사상의 범위 내에서 통상의 기술자에 의해 다양한 변형이 이루어질 수 있음은 자명하다. 아울러 앞서 본 발명의 실시예를 설명하면서 본 발명의 구성에 따른 작용 효과를 명시적으로 기재하여 설명하지 않았을지라도, 해당 구성에 의해 예측 가능한 효과 또한 인정되어야 함은 당연하다.

Claims (7)

  1. (a) 에틸 락테이트(ethyl lactate) 용매와 천연물질을 혼합하여 혼합물을 얻는 단계;
    (b) 상기 혼합물로부터 추출액을 추출하는 단계; 및
    (c) 상기 추출액을 농축하여 농축된 추출액을 얻는 단계;를 포함하여 천연물질 추출물을 제조하며,
    상기 천연물질은 대황, 작약, 천궁, 당귀 및 인삼 가운데 1종 이상을 포함하고,
    상기 천연물질 추출물은 폴리페놀(polyphenol) 및 플라보노이드(flavonoid) 가운데 1종 이상의 성분을 포함하며,
    상기 (b) 단계는,
    상기 혼합물을 80℃ 내지 150℃에서 2 내지 5시간 동안 추출하는 것을 특징으로 하는
    에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 (c) 단계 이후,
    (d) 상기 농축된 추출액을 건조하는 단계;를 더 포함하는 것을 특징으로 하는
    에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법.
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 제 1항에 있어서,
    상기 천연물질 추출물은 DPPH(1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) 라디칼 소거활성을 갖는 것을 특징으로 하는
    에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법.
  6. 제 1항에 있어서,
    상기 (a) 단계는,
    상기 에틸 락테이트(ethyl lactate) 용매와 상기 천연물질이 부피비가 5:1 내지 100:1의 범위로 혼합되는 것을 특징으로 하는
    에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법.


  7. 삭제
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