KR102094608B1 - 혈액암의 분류 및 예후 판단에 필요한 정보를 제공하는 방법 - Google Patents

혈액암의 분류 및 예후 판단에 필요한 정보를 제공하는 방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 혈액암의 분류 및 예후 판단에 필요한 정보를 제공하는 방법 및 이 방법에 사용되는 조성물에 관한 것이다. 본 발명에서 NGAL 단백질의 수준은 다양한 종류의 혈액암의 분류와 예후 판단에 매우 유용하게 이용할 수 있다. 또한, NGAL 단백질 이외에 IL-6, IL-1β, 및 TNF-α으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 단백질의 수준을 더 측정함으로써 혈액암의 분류 및 예후 판단에 매우 정확하고 유용한 정보를 제공할 수 있다.

Description

혈액암의 분류 및 예후 판단에 필요한 정보를 제공하는 방법{Method for Providing Information on Classification and Prognosis of Hematologic Malignancy}
본 발명은 혈액암의 분류 및 예후 판단에 필요한 정보를 제공하는 방법 및 이 방법에 사용되는 조성물에 관한 것이다.
사망 질환의 원인으로 혈액 종양암의 발생빈도는 점차 증가하고 있는 추세이며, 이의 원인으로는 환자의 유전적 요인뿐 아니라 유해한 환경 노출, 바이러스 감염 등 다양한 요인들이 관여하고 있다. 이 중 감염과 이에 동반되는 염증이 암 발생의 위험 인자 중의 하나로 인식되고 있다.
염증이 지속되면 NF-kB (nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells), myeloid differentiation primary response gene 88, TLR4 (Toll-like receptor 4), TNF (tumor necrosis factor) receptor-associated factors 를 포함한 다양한 유전자들에 변이가 축적되고, 그렇게 되면 악성이 되기 전의(pre-malignant) 조혈간세포클론들은 세포자멸사(apoptosis)가 일어나지 않게 되거나 과증식 상태가 되며 이런 상태가 골수 악성 종양의 발생과 진행을 유도한다는 것이다.
NGAL(Neutrophil gelatinase-associated lipocalin)은 인간 호중구(neutrophil)의 과립으로부터 분리되어 그 특성이 분석된 당단백질이다. 이 단백질은 인간 호중구에서 MMP(matrix metalloproteinase)-9와 공유결합된 25-kDa 당단백질로 분리되었다. NGAL은 신장 손상의 바이오마커로서 역할을 하는 것으로 알려져 있으나, 최근 들어 세포 증식을 위한 철(iron)-반응성 유전자의 조절에 관여하고 허혈이나 조직손상과 같은 여러 병리적 상태에 반응하여 다른 조직에서도 발현되는 것으로 밝혀지고 있다. 또한, NGAL 단백질의 발현이 다양한 감염성 질환 및 염증성 질환 하에서 평가된 바 있고, 세포자멸사(아폽토시스, apoptosis), 염증(inflammation), 감염(infection), 면역 반응(immune response)와 같은 다양한 과정에 관여하는 지방-유래 인자, 아디포카인(adipokine)의 한 패밀리(family)로 인정되고 있다.
CRP (C-reactive protein), 인터루킨(IL)-1β, IL-6 및 TNF(tumor necrosis factor)-α들은 염증성 인자로 알려져 있다. CRP는 petraxins 수퍼패밀리에 속하는 간 기원 급성 단백질로 알려져 있다. IL-1 및 IL-6는 조혈줄기세포(HSCs) 증식 및 분화에 관련되어 만성 염증 동안 조혈줄기세포의 재생능력의 감소되는 결과를 가져온다.
본 명세서에서 언급된 특허문헌 및 참고문헌은 각각의 문헌이 참조에 의해 개별적이고 명확하게 특정된 것과 동일한 정도로 본 명세서에 참조로 삽입된다.
미국공개특허 제2011/0081650 A1호 한국공개특허 제10-2006-0095114호
X. Leng, et al., Lipocalin 2 is required for BCR-ABL-induced tumorigenesis, Oncogene 27(47) (2008) 6110-9.
본 발명자들은 바이오마커 단백질들의 발현을 측정함으로써 혈액암의 분류 및 예후 판단에 유익한 정보를 제공하는 방법을 개발하기 위해 연구 노력하였다. 그 결과, NGAL 단백질의 수준을 측정함으로써 혈액암의 예후 판단 뿐만 아니라 이의 분류에 매우 유용한 정보를 제공할 수 있음을 실험적으로 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 혈액암의 분류 또는 예후 판단에 필요한 정보를 제공하기 위하여, 생물학적 시료로부터 NGAL 단백질의 수준을 측정하는 방법을 제공하는 데에 있다.
본 발명의 다른 목적은 NGAL 단백질의 수준을 측정할 수 있는 제제를 포함하는 혈액암의 분류 또는 예후 판단용 조성물을 제공하는 데에 있다.
본 발명의 다른 목적 및 기술적 특징은 이하의 발명의 상세한 설명, 청구의 범위 및 도면에 의해 보다 구체적으로 제시된다.
본 발명의 일 양태에 따르면, 혈액암의 분류 또는 예후 판단에 필요한 정보를 제공하기 위하여, 생물학적 시료로부터 NGAL(Neutrophil Gelatinase-Associated Lipocalin) 단백질의 수준을 측정하는 방법을 제공한다.
본 명세서에서 사용된 용어 “NGAL 단백질의 수준”은 상기 단백질을 코딩하는 유전자로부터 발현된 NGAL 단백질의 생물학적 시료내의 양을 의미한다.
본 명세서에서 사용된 용어 “혈액암”은 혈액 및 림프계에 영향을 미치는 암으로서, 혈액 생성 조직(예를 들어, 골수) 또는 면역계 세포에서 발생되는 암을 통칭한다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 혈액암은 골수증식종양(myeloproliferative neoplasm, MPN), 급성골수성백혈병(acute myeloid leukemia, AML), 골수이형성증후군(myelodysplastic syndrome, MDS) 및 형질세포신생물(plasma cell neoplasms, PCN)으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있다.
본 명세서에서 사용된 용어 “혈액암의 분류(classifying)”는 혈액암을 이루는 하위 혈액암 종류로 나누는 것을 의미하며, 보다 구체적으로는 골수증식종양(MPN), 급성골수성백혈병(AML), 골수이형성증후군(MDS) 및 형질세포신생물(PCN)으로 이루어지는 군에서 어느 하나의 암으로 구분하는 것을 의미한다.
본 명세서에서 사용된 용어 “골수증식종양(MPN)은 골수에서 적혈구, 백혈구, 혈소판 등의 세포들이 과도하게 생성되는 질환들을 통칭하는 의미이다(Tefferi A, Vainchenker W (February 2011). J. Clin. Oncol. 29 (5): 573-82).
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 골수증식종양은 만성골수성백혈병(chronic myeloid leukemia, CML), 적혈구증가증(polycythemia vera, PV), 또는 혈소판증가증(thrombocythemia, ET)를 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용된 용어 “급성골수성백혈병(AML)”은 골수성 백혈구의 분화 단계 중 초기 단계에 있는 전구세포(precursor cell) 또는 줄기세포(stem cell)에 암적인 변이가 발생하여 과도한 분열이 일어나고, 이것이 골수 내에 축적되어 말초혈액에 골수아세포(myeloblast)가 나타나는 질환을 의미한다.
본 명세서에서 사용된 용어 “골수이형성증후군(MDS)”은 골수의 증식과 구성 세포들의 이형성, 비효율적인 조혈을 특징으로 하는 비정상적인 조혈모세포로부터 유래된 혈액 질환을 의미한다. 이러한 특징을 갖는 여러 종류의 질환들을 통칭하는 질환으로서, 노년층에서 많이 발생하는 것으로 알려져 있다. 골수이형성증후군은 명확한 원인 없이 발병한 일차성 골수이형성증후군과 다른 질병에 대한 방사선치료나 항암화학요법 후에 발병하는 이차성 골수이형성증후군으로 나눌 수 있다. 또한, 말초혈액과 골수속의 미성숙한 세포인 아세포(blast)의 비율, 세포들의 이상형성 정도에 따라 여러 단계로 분류할 수 있다.
본 명세서에서 사용된 용어 "형질세포신생물(PCN)"은 형질세포(plasma cell)의 과도한 증식에 기인하는 질병을 통칭하는 의미이다. 상기 형질세포신생물은 다발성골수증(Multiple Myeloma, MM), 이의 전단계인 의미불명의단세포군감마글로불린병증(monoclonal gammopathy of undetermined significance, MGUS), SMM(smoldering multiple myeloma), 단발성 골성 형질세포종(solitary osseous plasmacytoma), 단발성 비골성 형질세포종(solitary non-osseous plasmacytoma), 또는 중쇄병(heavy chain disease)을 포함할 수 있다.
본 명세서에서 용어 “혈액암의 예후 판단”은 혈액암 환자의 특정한 예후를 판단하는 것을 포함하는 의미이다. 상기 혈액암의 특정한 예후는 다음을 포함하나 이에 한정되지 않는다: (i) 다른 장기로의 전이 가능성, 또는 재발의 위험도 평가; (ⅱ) 혈액암의 진행 단계(stage)의 평가; (ⅲ) 치료하지 않은 경우 혈액암 환자의 예후 평가; (ⅳ) 치료방법(화학요법, 방사선 요법; 외과적 수술)에 대한 혈액암 환자의 반응성에 대한 평가; (ⅴ) 현재 또는 과거 치료방법에 대한 실제 혈액암 환자의 반응에 대한 진단; (ⅵ) 혈액암 환자의 치료에 대한 바람직한 방법의 선택; 및 (ⅶ) 혈액암 환자의 기대수명에 대한 예후 판단(예를 들어 전체 생존기간에 대한 예후 판단).
본 발명의 일 구현예에 따르면, 본 발명의 방법은 IL-6, IL-1β, 및 TNF-α으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 단백질의 수준을 더 측정할 수 있다.
본 명세서에서 상기 “IL-6, IL-1β, 또는 TNF-α의 단백질의 수준”은 상기 단백질을 코딩하는 유전자로부터 발현된 IL-6, IL-1β, 또는 TNF-α의 단백질의 생물학적 시료내의 양을 의미한다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, (i) NGAL 단백질의 수준이 대조군과 대비하여 더 낮은 경우 상기 혈액암을 급성골수성백혈병(AML) 또는 골수이형성증후군(MDS)으로 분류할 수 있다.
본 발명의 다른 구현예에 따르면, (i) NGAL 단백질의 수준이 대조군과 대비하여 더 낮고, (ⅱ) IL-1β의 수준이 대조군 대비하여 더 낮고, (ⅲ) TNF-α의 수준이 대조군과 대비하여 더 높은 경우에 혈액암을 급성골수성백혈병(AML) 또는 골수이형성증후군(MDS)으로 분류할 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현예에 따르면, (i) NGAL 단백질의 수준이 대조군과 대비하여 더 낮고, (ⅱ) IL-6 및 IL-1β의 수준이 대조군 대비하여 더 낮고, (ⅲ) TNF-α의 수준이 대조군과 대비하여 더 높은 경우에 혈액암을 급성골수성백혈병(AML)으로 분류할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, (i) NGAL 단백질의 수준이 대조군과 대비하여 더 높은 경우 혈액암을 만성골수성백혈병(CML) 또는 적혈구증가증(PV)으로 분류할 수 있다.
본 발명의 다른 구현예에 따르면, (i) NGAL 단백질의 수준이 대조군과 대비하여 더 높고, (ⅱ) IL-1β의 수준이 대조군 대비하여 더 낮고, (ⅲ) TNF-α의 수준이 대조군과 대비하여 더 높은 경우에 상기 혈액암을 만성골수성백혈병(CML) 또는 적혈구증가증(PV)으로 분류할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 생물학적 시료는 조직, 전혈, 혈청, 혈장, 체액, 소변, 세포, 세포 파쇄물 또는 세포 배양의 상등액이다.
본 발명의 보다 구체적인 일 구현예에 따르면, 상기 생물학적 시료는 전혈, 혈청, 혈장, 골수유래 조직, 또는 골수유래 세포이고, 가장 구체적으로는 골수유래 조직 또는 골수유래 세포이다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, NGAL 단백질의 수준을 측정할 수 있는 제제를 포함하는 혈액암의 분류 또는 예후 판단용 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 IL-6, IL-1β, 및 TNF-α으로이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 단백질의 수준을 측정할 수 있는 제제를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 혈액암은 골수증식종양(MPN), 급성골수성백혈병(AML), 골수이형성증후군(MDS) 및 형질세포신생물(PCN)으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 골수증식종양(MPN)은 만성골수성백혈병(chronic myeloid leukemia, CML), 적혈구증가증(polycythemia vera, PV), 또는 혈소판증가증(thrombocythemia, ET)를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 “NGAL, IL-6, IL-1β, 또는 TNF-α 단백질의 수준을 측정할 수 있는 제제”는 상기 단백질에 특이적으로 결합하는 항체일 수 있다.
예를 들어, 상기 제제는 상기 단백질, 이 단백질 유래 폴리펩타이드, 또는 이들의 단편에 면역학적으로 결합할 수 있는 항체 또는 이 항체의 단편을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
상기 항체는 폴리클로날 또는 모노클로날 항체이며, 바람직하게는 모노클로날 항체이다. 상기 항체는 당업계에서 통상적으로 실시되는 방법들, 예를 들어, 융합 방법(Kohler and Milstein, European Journal of Immunology, 6:511-519(1976)), 재조합 DNA 방법(미국 특허 제4,816,56호) 또는 파아지 항체 라이브러리 방법(Clackson et al, Nature, 352:624-628(1991) 및 Marks et al,J. Mol. Biol., 222:58, 1-597(1991))에 의해 제조될 수 있다.
상기 항체를 사용하여 특정 단백질의 수준을 측정하는 방법은 당업계에 공지된 다양한 면역학적 분석방법을 이용할 수 있으며, 예를 들어, 방사능면역분석, 방사능면역침전, 면역침전, ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay), 캡처-ELISA, 억제 또는 경쟁 분석, 샌드위치 분석, 유세포 분석(flow cytometry), 면역형광염색 및 면역친화성 정제를 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다.
구체적으로, 본 발명의 방법이 ELISA 방식으로 실시되는 경우, 본 발명의 특정 실시예는 (i) 분석하고자 하는 시료를 고체 기질의 표면에 코팅하는 단계; (ⅱ) 일차 항체로서 NGAL, IL-6, IL-1β, 또는 TNF-α 단백질에 대한 항체와 상기 시료를 반응시키는 단계; (ⅲ) 상기 단계 (ⅱ)의 결과물을 효소가 결합된 이차항체와 반응시키는 단계; 및 (ⅳ) 상기 효소의 활성을 측정하는 단계를 포함한다.
한편, 본 발명의 방법이 캡처-ELISA 방식으로 실시되는 경우, 본 발명의 특정 실시예는 (i) 포획항체(capturing antibody)로서 NGAL, IL-6, IL-1β, 또는 TNF-α 단백질에 대한 항체를 고체 기질의 표면에 코팅하는 단계; (ⅱ) 포획항체와 시료를 반응시키는 단계; (ⅲ) 상기 단계 (ⅱ)의 결과물을 시그널을 발생시키는 레이블이 결합되어 있고, 상기 조절자 단백질에 특이적으로 반응하는 검출항체(detecting antibody)와 반응시키는 단계; 및 (ⅳ) 상기 레이블로부터 발생하는 시그널을 측정하는 단계를 포함한다.
상기 ELISA 방법 및 캡처-ELISA 방법에서 최종적인 효소의 활성 측정 또는 시그널의 측정은 당업계에 공지된 다양한 방법에 따라 실시될 수 있다.
본 발명의 특징 및 이점을 정리하면 다음과 같다:
(i) 본 발명은 혈액암의 분류 및 예후 판단에 필요한 정보를 제공하는 방법 및 이 방법에 사용되는 조성물에 관한 것이다.
(ⅱ) 본 발명에서 NGAL 단백질의 수준은 다양한 종류의 혈액암의 분류와 예후 판단에 매우 유용하게 이용할 수 있다.
(ⅲ) 본 발명은 NGAL 단백질 이외에 IL-6, IL-1β, 및 TNF-α으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 단백질의 수준을 더 측정함으로써 혈액암의 분류 및 예후 판단에 매우 정확하고 유용한 정보를 제공할 수 있다.
도 1은 웨스턴 블롯을 통한 NGAL 및 염증성 사이토카인 IL-1β, IL-6, 및 TNF- α의 조합 분석 결과를 보여준다.
실시예
실험 방법
1. 샘플의 준비
고려대학교 안산병원의 혈액악성종양 환자 41명으로부터 골수(bone marrow, BM) 흡인물과 말초혈액(PB) 샘플을 수득하였다. 상기 샘플을 수집한 환자들은 세계보건기구 진단 기준에 따라 골수증식종양(MPN, n=12), 급성골수성백혈병(AML, n=5), 골수이형성증후군(MDS, n=13) 및 형질세포신생물(plasma cell neoplasms, PCN, n=6)의 각 질병으로 분류된 환자군들이다. 대조군으로는 골수(BM) 관여 없는 림프종(lymphoma) 환자(n=5)의 샘플을 사용하였다. 감염증, 염증성 질환 또는 신장 질환의 증상을 갖는 환자들은 실험군 및 대조군에서 제외시켰다. 샘플을 원심분리(3000 rpm, 10분) 수행한 후, EDTA(ethylene-diamine-tetra acetic acid)가 포함된 튜브에 넣은 후, 이로 부터 PB 혈장 및 BM 흡인물의 상등액을 수득하고, 분석시까지 -80℃에서 보관하였다. PB 및 BM 흡인물 샘플은 동시에 분석하였다. PB 및 BM 흡인물 샘플의 NGAL, IL-1b, IL-6, 및 TNF-α의 혈장 수준은 자동화 플랫폼의 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay) 및 웨스턴 블롯(western blot)을 사용하여 측정하였다.
2. 실험 계획
총 41개의 PB 혈장 및 BM 흡인물의 상등액 샘플을 자동화 플랫폼상에서 CRP 및 NGAL 테스트로 분석하였다. 이들 샘플들 중에서, 20개의 샘플을 웨스턴 블롯으로 NGAL, IL-6, IL-1β 및 TNF-α에 대해 분석하였다. NGAL 분석은, 자동화 플랫폼의 웨스턴 블롯 및 면역분석에 모노머형에 특이적인 모노클로날 항체를 사용하였다. 분석결과는 골수 특징을 포함하는 임상적 특징과의 연관성에 대해 평가하였다.
3. NGAL 및 CRP의 면역분석
마우스 모노클로날 항-NGAL (인간) 항체(BioProto Diagnostics, Gentofte, Denmark)를 사용하여, PB 혈장 및 BM 상등액에 대해 Cobas 8000 (Roche Diagnostics, Rotkreuz, Switzerland) 자동화 기기를 사용한 입자-증강 탁도 면역분석을 행하였다. 구체적으로, 3 ㎕의 샘플 및 150 ㎕의 반응 완충액을 5분간 반응시키고 50 ㎕ 면역입자 현탁액을 사용하여 5분간 추가 반응시켜서 NGAL의 수준을 측정하였다. NGAL의 농도는 50 ng/mL 부터 3000 ng/mL 까지 알고 있는 농도의 NGAL의 검정(calibration) 결과를 사용하여 준비한 검정 곡선(calibration curve)에 기초하여 흡광도 변화로부터 계산하였다. CRP 측정은 Cobas 8000 (Roche Diagnostics GmbH, Penzberg, Germany)을 사용하여 면역탁도분석(immunoturbidimetric assay) 분석을 사용하여 행하였다.
4. 웨스턴 블롯
BM 상등액과 PB 혈장의 일부를 취한 후, Quick Start Bradford Protein Assay Kit (Bio-Rad, Inc., Hercules, CA, USA)를 사용하여 총 단백질의 양을 측정하였다. 약 30 ㎍의 총 단백질을 12％ SDS-polyacrylamide 젤상의 각 레인에 로딩하였다. 트리스-글리신(tris-glycine) 완충액내에서 50V 하에서 4시간 - 6 시간 동안 전기영동을 행하여 단백질들을 분리하고, 트랜스퍼(transfer) 완충액내에서 4℃하에서, 100 mA로 6 시간동안 PVDF 멤브레인(Millipore Corporation, MA, USA)으로 이동시켰다. 각 블롯들은 TBS(tris-buffered saline) 및 0.1 Tween 20 (TBST)내의 5％ 탈지유내에서 상온에서 교반하면서 90분간 블로킹하였다. 제1차 항체들은 3％ 탈지유와 함께 TBST내에서 희석시켰다: 항-NGAL 항체 (1:1000, abcam, Cambridge, UK), 항-IL-1β 항체 (1:500, Santa Cruz, TX, USA), 항-IL-6 항체 (1:500 dilution, Santa Cruz), 항-TNF-α 항체 (1:1000, Cell Signaling Technology, MA, USA) 및 항-Transferrin 항체 (1:1000, Santa Cruz, TX, USA). 블롯을 각각의 제1차 항체로 4 ℃에서 하룻밤 반응시키고, TBST로 세척한 후, 호오스래디쉬 퍼옥시다아제(horseradish peroxidase)-컨쥬게이트된 제2차 항체(1:2000, Santa Cruz, TX, USA)와 함께 상온에서 90분간 반응시켰다. TBST로 확실하게 세척한 후, 블롯을 결과가 가시화될 때까지 NBT/BCIP 기질(Roche Applied Science)내에서 침지시켰다. 면역복합체는 ECL 시스템을 사용하여 검출하였다. 각 블롯의 상대적 강도는 Image J analysis software (National Institutes of Health, USA)를 사용하여 분석하였다.
5. 통계적 방법
Paired t-테스트 또는 Mann-Whitney U 테스트를 사용하여 PB 및 BM 샘플의 NGAL 및 CRP 수준을 분석하였다. Mann-Whitney U 테스트는 질병군 및 대조군 사이의 연속적인 변동을 비교하기 위해 사용하였다. 통계적 유의성은 P <0.05 또는 P <0.01 또는 P <0.001으로 정하였다. 모든 통계 분석에는 SPSS version 21.0 (SPSS, Chicago, USA)을 사용하였다.
실험 결과
1. 환자 특징 분석
평균 나이 63세 (35세 - 88세)이며 남성 53.7％(22/41) 여성 46.3% (19/41)인 총 41명의 환자로부터 BM 샘플과 PB 샘플을 쌍으로 수득하였다. 상기 샘플을 수득한 환자들은 골수증식종양(MPN, n=12), 급성골수성백혈병(AML, n=5), 골수이형성증후군(MDS, n=13), 형질세포신생물(PCN, n=6), 및 골수 관여 없는 림프종 환자(n=5, 대조군)으로 진단받은 환자들이다. MPN 샘플(n=12)은 만성골수성백혈병(CML, n=4), 적혈구증가증(polycythemia vera, PV, n=7), 및 혈소판증가증(thrombocythemia, ET, n=1)으로 구성되었다.
2. 말초혈액(PB) 및 골수(BM)에서의 NGAL 및 CRP 수준과 혈액악성 종양과의 관계
PB 및 BM 샘플(n=41)에서 NGAL 수준을 분석한 결과, 각각 163.0 ±258.3 및 413.1 ±616.2 ng/mL (평균±SD)이었다. PB 샘플에서의 NGAL 수준(PB-NGAL)은 MPN 군에서 가장 높은 값 (329.0 ± 417.1)(평균±SD)을 보였고, AML 군에서 가장 낮은 값 (30.8 ± 21.2)(평균±SD)을 나타내었다. 이와 유사하게, BM 샘플에서의 NGAL 수준(BM-NGAL)도 MPN 군에서 가장 높은 값(1184.9 ± 1045.0)(평균±SD)을 보였고, AML 군에서 가장 낮은 값(44.8 ± 52.1)(평균±SD)을 나타내었다 (표 1 참조). 이러한 결과는 통계학적으로 유의성 있는 결과이다.
또한, PB 샘플 및 BM 샘플(n=41)에서의 CRP 발현 수준은 각각 1.195 ± 2.160 및 1.187 ±2.087 mg/dL (평균±SD)이었다(표 1 참조). PB 샘플에서의 CRP 발현 수준(PB-CRP)은 AML 군에서 가장 높은 값(3.547 ± 2.472)(평균±SD)을 나타냈으며, PCN 군에서 가장 낮은 값(0.446 ± 0.844)(평균±SD)을 나타내었다. 이와 유사하게, BM 샘플에서의 CRP 발현 수준(BM-CRP)은 AML 군에서 가장 높은 값 (3.672 ± 2.782)(평균±SD)을 나타냈으며, PCN 군에서 가장 낮은 값(0.422 ± 0.796)을 나타내었다(표 1 참조). 총 샘플 및 각 질병군에 대해서, CRP의 발현 수준은 PB 및 BM에서 통계적으로 유의한 차이를 보여주지 않았다.
상기 결과로부터, NGAL의 경우 MPN 군에서 가장 높은 수준을 보였으나, AML 군에서는 가장 낮은 수준을 보였다. 이러한 경향은 PB 샘플 보다는 BM 샘플에서 더욱 두드러졌다. 이와 반대로, CRP의 경우 AML 군에서 가장 높은 수준을 보였으나, MPN 군에서는 낮은 값을 보였다는 것이 NGAL의 결과와 대비된다. 즉, 5개의 질환 군들 중에서, NGAL 및 CRP 수준에서 서로 반대되는 패턴을 보였다. 이러한 사실은 상기 두 개의 물질이 혈액암에서 염증 반응의 전개 양상에서 서로 반대되는 역할을 할 것이라는 점을 암시한다.
혈액악성 종양의 각 질병 그룹(MPN, AML, MDS, PCN)에 따라 PB 및 BM 샘플에서 NGAL 발현 수준 및 CRP 발현 수준은 다른 패턴을 보여주었다.
MPN 그룹에서, NGAL의 수준은 대조군 대비 높은 수준으로 측정되었으며, 이러한 NGAL 발현 수준 패턴은 PB 샘플(PB-NGAL) 보다 BM 샘플(BM-NGAL)에서 더욱 두드러지게 나타났다(P = 0.001).
MPN 그룹의 CML의 경우, BM-NGAL 수준(2458.1 ± 659.6 ng/mL)이 PB-NGAL 수준(595.0 ± 692.3 ng/mL) 보다 높게 나타났다. MPN 그룹의 PV의 경우도, BM- NGAL 수준(578.4 ± 393.7 ng/mL)이 PB-NGAL 수준(192.7 ± 91.5 ng/mL) 보다 높게 나타났다. 그러나, AML, MDS, 및 PCN 그룹들에서는, BM 및 PB에서의 NGAL 수준이 통계적으로 유의한 차이는 없었다. PB 및 BM 샘플(n=41)에서 CRP 수준의 측정 결과는 각각 1.195 ± 2.160 및 1.187 ±2.087 mg/dL 이었고, PB 샘플 및 BM 샘플에서의 통계적으로 유의한 차이는 없었고, 질병 그룹간에도 PB 샘플 및 BM 샘플간의 통계적으로 유의한 차이는 없었다(표 1).
그룹 NGAL (ng/ml) (평균±SD) p-값 CRP (mg/ml) (평균±SD) p-값
PB BM PB BM
MPN(n=12) 329.0±417.1 1184.9±1045.0 0.001* 0.449±1.145 0.430±1.095 0.665
AML(n=5) 30.8±21.2 44.8±52.1 0.834 3.547±2.472 3.672±2.782 0.602
MDS(n=13) 69.6±48.7 106.0±90.4 0.158 1.551±2.886 1.463±2.563 0.939
PCN(n=6) 179.6±133.4 392.2±307.8 0.078 0.446±0.844 0.422±0.796 0.631
Control
(n=5)		 85.0±22.3 203.1±78.9 0.016* 0.609±0.886 0.720±1.088 1.000
Total
(n=41)		 163.0±258.3 413.1±616.2 0.002* 1.195±2.160 1.187±2.087 0.865
*: 통계학적으로 유의성 있음 (p<0.05, by paired t-test or Mann-Whitney U test).
3. 자동화 NGAL 테스트를 통한 각 질병그룹의 BM-NGAL 수준의 비교 결과
대조군 BM-NGAL 수준(203.1 ± 78.9 ng/mL)과 비교하여, MPN의 BM-NGAL 수준이 유의하게 높았으나(1184.9 ± 1045.0 ng/mL; P<0.01), AML의 BM-NGAL 수준(44.8 ± 52.1 ng/mL; P<0.05) 및 MDS의 BM-NGAL(106.0 ± 90.4 ng/mL; P<0.05)은 유의하게 낮았다. MPN 그룹의 경우, CML (2458.1 ± 659.6 ng/mL) 및 PV (578.4 ± 393.7 ng/mL) 그룹은 BM-NGAL 수준이 대조군 대비 유의하게 높았다(표 2).
4. 자동화 NGAL 테스트를 통한 각 질병그룹의 PB-NGAL 수준의 비교 결과
대조군 PB-NGAL 수준(85.0 ± 22.3 ng/mL)과 비교하여, MPN 그룹의 PB-NGAL 수준(329.0 ± 417.1 ng/mL; P<0.01)은 유의하게 높았으나, AML 그룹의 PB-NGAL 수준(30.8 ± 21.2 ng/mL; P<0.05)은 유의하게 낮았다. 그러나, BM 샘플에서와는 다르게, PB-NGAL 수준은 MDS 그룹 및 대조군에서 통계학적으로 유의한 차이를 보여주지 않았다. MPN 그룹에서, CML 그룹의 PB-NGAL 수준 (595.0 ± 692.3 ng/mL) 및 PV 그룹의 PB-NGAL 수준 (192.7 ± 91.5 ng/mL)이 대조군과 비교하여 유의하게 높았다(표 2).
그룹 NGAL(ng/ml)
(평균±SD)		 p-값 그룹 NGAL (ng/ml)
(평균±SD)		 p-값
PB MPN(n=12) 329.0±417.1 0.006* BM MPN(n=12) 1184.9±1045.0 0.004*
AML(n=5) 30.8±21.2 0.016* AML(n=5) 44.8±52.1 0.028*
MDS(n=13) 69.6±48.7 0.218 MDS(n=13) 106.0±90.4 0.034*
PCN(n=6) 179.6±133.4 0.100 PCN(n=6) 392.2±307.8 0.201
Control(n=5) 85.0±22.3 Control(n=5) 203.1±78.9 　
*: 통계학적으로 유의성 있음 (p<0.05, by paired t-test or Mann-Whitney U test).
5. 자동화 면역분석을 통한 각 질병그룹의 CRP 수준의 비교 결과
대조군 BM-CRP 수준(0.720 ± 1.088 mg/dL)과 비교하여, AML 그룹에서의 BM-CRP 수준(3.672 ± 2.782 mg/dL; P<0.05)은 유의하게 높았다. 다른 질병 그룹은 대조군 대비하여 유의한 차이점이 나타나지 않았다. PB 샘플의 경우 모든 질병 그룹에서 대조군과 유의한 차이점이 나타나지 않았다.
6. 웨스턴 블롯을 통한 NGAL 및 염증성 사이토카인 IL-1β, IL-6, 및 TNF- α의 조합 분석 결과
웨스턴 블롯 방법을 통해 BM 및 PB 샘플에서 NGAL, IL-6, IL-1β 및 TNF-α 수준들을 측정한 후 이들의 상대적 수준을 서로 비교하였다.
CML 그룹(P < 0.01) 및 PV 그룹(P < 0.05)에서 BM-NGAL 수준이 PB-NGAL 수준 보다 유의성 있게 높았다. AML 그룹에서는 BM-IL-6 수준이 PB-IL-6 수준 보다 높았다(P < 0.05). IL-1β의 경우, 모든 질병 그룹들에서 BM-IL-1β 및 PB-IL-1β 수준들 사이에 통계적으로 유의한 차이는 나타나지 않았다. CML 그룹(P < 0.05) 및 MDS 그룹(P < 0.01)에서 BM-TNF-α 수준들은 PB-TNF-α 수준들과 비교하여 유의하게 높게 나타났다.
CML 그룹(P < 0.001) 및 PV 그룹(P < 0.05)에서, 대조군과 대비하여 BM-NGAL 수준이 유의성 있게 증가하였다. 반면, BM-NGAL 수준은 MDS 그룹 (P < 0.01)에서 유의성 있게 감소하였다. PB-NGAL에서는 PV 그룹만이 대조군과 비교시 유의성 있게(P < 0.05) 높은 수준을 나타내었다(도 1의 A).
BM-IL-6의 경우, 어떠한 질병 그룹도 대조군과 유의한 차이가 나타나지 않았다. PB-IL-6의 경우에서, AML 그룹은 대조군과 비교시 유의성 있게(P < 0.05) 낮은 수준을 나타내었다(도 1의 B).
BM- 및 PB-IL-1β의 경우, 각 질병 그룹들 모두는 대조군과 비교하여 유의성 있게 낮은 수준을 나타내었다(P < 0.001)(도 1의 C).
BM-TNF-α의 경우, 각 질병 그룹들 모두는 대조군과 비교하여 더 높은 수준을 보여주었다(P < 0.01)(도 1의 패널 D). PB-TNF-α의 경우, 대조군과 비교하여 AML 그룹 (P < 0.001), PV 및 MDS 그룹에서 (P < 0.01) 유의성 있게 더 높은 수준을 나타내었다(도 1의 D).
본 명세서에서 설명된 구체적인 실시예는 본 발명의 바람직한 구현예 또는 예시를 대표하는 의미이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 한정되지는 않는다. 본 발명의 변형과 다른 용도가 본 명세서 특허청구범위에 기재된 발명의 범위로부터 벗어나지 않는다는 것은 당업자에게 명백하다.

Claims (10)

  1. 생물학적 시료로부터 NGAL(Neutrophil Gelatinase-Associated Lipocalin), IL-1β 및 TNF-α 단백질의 수준을 각각 측정한 후, (ⅰ)상기 NGAL 단백질의 수준이 대조군과 대비하여 더 낮으면서, (ⅱ)상기 IL-1β 단백질의 수준이 대조군 대비하여 더 낮거나 또는 상기 TNF-α 단백질의 수준이 대조군과 대비하여 더 높은 경우에, 혈액암을 급성골수성백혈병(AML) 또는 골수이형성증후군(MDS)으로 분류하는 단계;
    를 포함하는, 혈액암의 분류 및 예후 판단에 필요한 정보를 제공하는 방법.
  2. 생물학적 시료로부터 NGAL(Neutrophil Gelatinase-Associated Lipocalin), IL-1β, 및 TNF-α 단백질의 수준을 각각 측정한 후, (ⅰ)상기 NGAL 단백질의 수준이 대조군과 대비하여 더 높으면서, (ⅱ) 상기 IL-1β 단백질의 수준이 대조군 대비하여 더 낮거나 또는 상기 TNF-α 단백질의 수준이 대조군과 대비하여 더 높은 경우에, 혈액암을 만성골수성백혈병(CML) 또는 적혈구증가증(PV)으로 분류하는 단계;
    를 포함하는, 혈액암의 분류 및 예후 판단에 필요한 정보를 제공하는 방법.
  3. 삭제
  4. 제 1 항에 있어서,
    IL-6 단백질의 수준을 더 측정하고, 상기 IL-6 단백질의 수준이 대조군 대비하여 더 낮은 경우에 상기 혈액암을 급성골수성백혈병(AML)으로 분류하는 것을 특징으로 하는, 혈액암의 분류 및 예후 판단에 필요한 정보를 제공하는 방법.
  5. 삭제
  6. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 생물학적 시료는 전혈, 혈청, 혈장, 골수유래 조직, 또는 골수유래 세포인 것을 특징으로 하는 혈액암의 분류 및 예후 판단에 필요한 정보를 제공하는 방법.
  7. 삭제
  8. 삭제
  9. 삭제
  10. 삭제
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Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012115885A1 (en) * 2011-02-22 2012-08-30 Caris Life Sciences Luxembourg Holdings, S.A.R.L. Circulating biomarkers

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SI1831699T1 (sl) * 2004-12-20 2010-03-31 Antibodyshop As Določanje nevtrofilnega lipokalina asociiranega z želatinazo ngal kot diagnostičnega markerja za ledvične bolezni
KR100681763B1 (ko) 2005-02-28 2007-02-15 재단법인 목암생명공학연구소 인간 리포칼린 2를 유효성분으로 포함하는 암 전이 억제용약학적 조성물, 이를 이용한 암 전이 억제 방법
KR20110081650A (ko) 2010-01-08 2011-07-14 삼성전자주식회사 발광 소자 및 그 제조 방법
KR20140067001A (ko) * 2011-08-08 2014-06-03 카리스 라이프 사이언스 룩셈부르크 홀딩스, 에스.에이.알.엘. 생물지표 조성물 및 방법

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012115885A1 (en) * 2011-02-22 2012-08-30 Caris Life Sciences Luxembourg Holdings, S.A.R.L. Circulating biomarkers

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Candido S et al, Oncotarget (2014), vol 5(6), pp 1576-1594.
Sanchez-Correa B et al, Cytokine(2012), vol 61(3), pp 885-891.
Shinky Mehta et al, International Journal of Research in Medical Sciences(2017.12.), vol 5, issue 12, pp 5307-5311.
Villalva C et al, Leuk Lymphoma(2008), vol 49(5), pp 984-988.

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