KR102068521B1 - 테레오그릴루신 2 펩타이드를 함유하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 화장료 조성물 - Google Patents

테레오그릴루신 2 펩타이드를 함유하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 화장료 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR102068521B1
KR102068521B1 KR1020180129690A KR20180129690A KR102068521B1 KR 102068521 B1 KR102068521 B1 KR 102068521B1 KR 1020180129690 A KR1020180129690 A KR 1020180129690A KR 20180129690 A KR20180129690 A KR 20180129690A KR 102068521 B1 KR102068521 B1 KR 102068521B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
peptide
acne
acid
oil
atopic dermatitis
Prior art date
Application number
KR1020180129690A
Other languages
English (en)
Inventor
황재삼
김인우
이준하
박신용
신용표
Original Assignee
대한민국(농촌진흥청장)
주식회사 피앤에스생명과학
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 대한민국(농촌진흥청장), 주식회사 피앤에스생명과학 filed Critical 대한민국(농촌진흥청장)
Priority to KR1020180129690A priority Critical patent/KR102068521B1/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102068521B1 publication Critical patent/KR102068521B1/ko

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/64Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/56Materials from animals other than mammals
    • A61K35/63Arthropods
    • A61K35/64Insects, e.g. bees, wasps or fleas
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/10Peptides having 12 to 20 amino acids
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/10Anti-acne agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04Antibacterial agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q17/00Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
    • A61Q17/005Antimicrobial preparations
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

본 발명은 왕귀뚜라미(Teleogryllus emma) 유래의 항균 펩타이드인 테레오그릴루신 2(teleogryllusine 2) 펩타이드를 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 프로프리움 박테리움(Proprium bacterium) 및 메티실린 내성 황색 포도상 구균(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)에 대한 항균효과가 우수하여, 여드름 또는 아토피의 개선용 화장료 또는 각종 약제학적 부형제를 포함하는 약학 조성물로서 용이하게 이용가능하다.

Description

테레오그릴루신 2 펩타이드를 함유하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 화장료 조성물 {COSMETIC COMPOSITION COMPRISING TELEOGRYLLUSINE 2 PEPTIDE FOR PREVENTING OR IMPROVING ACNE OR ATOPIC DERMATITIS}
본 발명은 테레오그릴루신 2 펩타이드를 함유하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
여드름은 사춘기에 접어든 10대의 피부에서 많이 생기는데, 10대 피부는 주로 중성이거나 지성이 많기 때문이다. 즉, 여드름은 지성피부에 많이 생기며, 이는 피지선에서 분비되는 피지인 기름의 분비가 많으면 각질층의 세포에 기름이 많아져서 세균이 번식하기 쉽고, 또한 모공이 막혀도 피지 분비는 줄어들지 않아 축적된 피지에 세균이 엉겨붙어서 여드름이 생기게 된다. 또한, 남성 호르몬 생성이 왕성해짐에 따라 피지선을 자극하여 피지의 분비는 더욱 활발해지고, 모공의 입구는 점점 막히게 된다. 최근 경제 발전 및 영양 상태 호전에 따라, 여드름 발생 연령이 더 앞당겨지고 있는 추세이다.
여드름은 얼굴은 물론 목, 등, 가슴 등 3백만개 이상이나 되는 피지선이 밀집되어 있는 곳에 주로 생기며, 여드름의 형태로는 폐쇄성 면포인 백포, 개방성 면포인 흑포, 붉은색 여드름, 화농성 여드름으로 나뉜다. 폐쇄성 면포란 분비되지 못한 피지가 피부 표면 아래에 1~2㎜로 뭉쳐 있는 상태로 좁쌀처럼 오돌도돌한 피부가 돌출되어 있는 것이 특징이고, 둘째로 개방성 면포인 흑포는 백포의 피지 덩어리가 모공을 막으면서 끝이 검은색으로 변해 생기는 것으로 흔히 점처럼 까맣게 보이는 여드름이 흑포이고 또 붉은색 여드름은 면포성 여드름이 세균에 감염된 상태로 빨갛게 주위가 부어오르고 통증이 오는 단계이다. 마지막으로 화농성 여드름은 여드름이 심하게 악화되어 노랗게 곪은 상태로 흉터를 남긴다.
여드름의 발병 원인은 아직도 명확하게 규명되어 있지 못하며, 다만 유전적 요인과 환경적 요인을 배제한다면, 남성 호르몬의 작용에 기인한 피지의 과다 분비, 피지선의 각질세포 과각화 및 여드름균인 프로피온 박테리움인 Propionibacterium acnes의 관여라는 3가지 요인의 복합적인 작용에 의해서 발생한다고 알려져 있다. 피지선 내에 여드름 균의 증식이 많아짐에 따라 여드름 균에 의해 피지를 구성하고 있는 트리글리세라이드(triglyceride)가 자유 지방산(free fatty acid)으로 전화되어서 자극원으로 작용하거나, 면포 유발성(comedogenic) 물질로 작용하여 여드름 생성을 촉진시키며, 이러한 반응이 더욱 진행되면 염증 반응까지 수반하게 되는 것이다.
아토피 피부염은 만성적인 피부 알레르기 질환 중 하나로서, Staphylococcus aureus는 아토피 피부염의 악화를 초래하는 가장 흔한 균으로 알려져 있으며, 근래에는 아토피 피부염에서 methicillin-resistant Staphylococcus aureus(MRSA)이 원인으로 급부상되고 있다(Arch Dermatol 2005, 141, 1520-1522; J Natl Med Assoc 2008, 100, 797-800; Cutis 2006, 78, 113-116).
이러한 여드름과 아토피 피부염을 일으키는 원인균은 각질의 손상을 통해 빠른 속도로 그 증상이 더욱 강화되는 피부질환으로 여겨지는데, 대한민국 등록특허 제10-1878069호에는 이러한 여드름 증상과 아토피 피부염을 동시에 개선할 수 있는 생약 조성물이 개시되어 있다.
한편, 항균 펩타이드는 박테리아, 곰팡이, 바이러스 등의 다양한 생물체에 작용하여 항균 활성을 나타내는 물질로서 다양한 항균 펩타이드와 그 용도가 개발되고 있다. 대한민국 등록특허 제10-0625875호에서는 아스퍼질러스 니듈란스로부터 분리한 펩타이드가 항균 및 항진균 활성을 나타내고, 대한민국 등록특허 제10-0964136호에서는 울도하늘소유충으로부터 분리한 펩타이드가 항균 및 항진균 활성을 나타내는 것으로 보고되고 있다. 대한민국 등록특허 제10-1620148호에서는 항균 펩타이드인 라우로일 베타-디펜신 3 및 3H, 신규 세포투과성 펩타이드를 함유함으로써 아토피 피부염 및 여드름 개선의 효과가 있는 화장료 조성물을 개시하고 있으며, 대한민국 등록특허 제10-0681701호에서는 헥사노일트리 펩타이드를 유효성분으로 함유하여 여드름 개선 및 완화의 효과를 나타내는 화장료 조성물을 개시하고 있다.
그러나 현재까지 왕귀뚜라미로부터 분리한 항균 펩타이드를 이용한 화장료 조성물에 대한 연구는 이루어지고 있지 않다. 대한민국 등록특허 제10-1856602호에 왕귀뚜라미(Teleogryllus emma) 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 건강기능식품이 개시되어 있기는 하나 이는 특정 항균 펩타이드를 추출하는 것을 목적으로 하고 있지 않으며, 화장료 조성물에 대한 용도도 개시되어 있지 않아 상기 왕귀뚜라미를 원료로 하는 화장료 조성물에 대한 추가적인 개발이 필요하다.
대한민국 등록특허 제10-0625875호 (발명의 명칭 : 아스퍼질러스 니듈란스로부터 분리한 신규 펩타이드 및 이를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물, 출원인 : 학교법인조선대학교, 등록일 : 2006.09.12) 대한민국 등록특허 제10-0964136호 (발명의 명칭 : 울도하늘소유충으로부터 분리한 항균 및 항진균 펩타이드 유전자 및 항균 및 항진균 활성을 가지는 합성 펩타이드, 출원인 : 대한민국, 등록일 : 2010.06.09) 대한민국 등록특허 제10-1620148호 (발명의 명칭 : 항균펩타이드 베타-디펜신 3 및 3H의 라우릭산 융합을 통한 장기지속형 유도체, 세포투과성 펩타이드 융합을 통한 피부투과형 유도체 개발과 이를 함유하는 화장료 조성물, 출원인 : 주식회사 바이오에프디엔씨, 등록일 : 2016.05.03) 대한민국 등록특허 제10-0681701호 (발명의 명칭 : 헥사노일트리펩타이드를 유효성분으로 함유하는 여드름완화용 화장료 조성물, 출원인 : 주식회사 코리아나화장품, 등록일 : 2007.02.06) 대한민국 등록특허 제10-1856602호 (발명의 명칭 : 왕귀뚜라미 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화 조성물, 출원인 : 안동대학교 산학협력단 외 1인, 등록일 : 2018.05.03.) 대한민국 등록특허 제10-1878069호 (발명의 명칭 : 생약 혼합물의 추출물과 편백 오일을 함유하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 조성물, 출원인 : 신덕현, 등록일 : 2018.07.06)
Roesch A, Linde HJ, Landthaler M, Vogt T. Elimination of a community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus infection in a nurse with atopic dermatitis. Arch Dermatol 2005, 141, 1520-1522. Hon KL, Leung AK, Kong AY, Leung TF, Ip M. Atopic dermatitis compli\-cated by methicillin-resistant Staphylococcus aureus infection. J Natl Med Assoc 2008, 100, 797-800. Suh LM, Honig PJ, Yan AC. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus skin abscesses in a pediatric patient with atopic dermatitis: a case report. Cutis 2006, 78, 113-116.
본 발명의 목적은 테레오그릴루신 2 펩타이드를 함유하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공하는 데에 있다.
본 발명은 하기 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 왕귀뚜라미(Teleogryllus emma) 유래의 테레오그릴루신 2(teleogryllusine 2) 펩타이드를 함유하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
서열번호 1: YIRIRISRKMKILKL-NH2
상기 테레오그릴루신 2 펩타이드는 프로프리움 박테리움(Proprium bacterium) 및 메티실린 내성 황색 포도상 구균(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA) 중 1종 이상에 대한 항균 활성을 나타낸다.
본 발명은 또한 상기 조성물을 포함하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 화장료 제형을 제공한다.
상기 화장료 제형은 세안제, 비누, 크림, 로션, 스킨, 젤, 수용성 리퀴드, 에센스, 페이스오일, 선크림, 선로션, 핸드크림, 풋크림, 바디로션, 바디크림, 바디오일, 맛사지크림, 마스크팩, 스킨커버, 립스틱, 립글로스, 메이크업베이스, 파운데이션, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이새도, 치크칼라, 아이브로우 펜슬, 클렌징폼, 클렌징 오일, 클렌징 로션, 클렌징 티슈, 헤어에센스, 샴푸, 린스 및 헤어트리트먼트로 이루어진 군 중에서 선택될 수 있다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 상기 테레오그릴루신 2(teleogryllusine 2) 펩타이드를 함유하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공할 수 있다.
본 발명은 왕귀뚜라미(Teleogryllus emma) 유래의 항균 펩타이드인 테레오그릴루신 2(teleogryllusine 2) 펩타이드를 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 프로프리움 박테리움(Proprium bacterium) 및 메티실린 내성 황색 포도상 구균(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)에 대한 항균효과가 우수하여, 여드름 또는 아토피의 개선용 화장료 또는 각종 약제학적 부형제를 포함하는 약학 조성물로서 용이하게 이용가능하다.
도 1은 테레오그릴루신 2 펩타이드의 항균활성을 분석한 결과이다.
도 2는 여드름 유발균에 대한 테레오그릴루신 2 펩타이드와 살리실산의 항균 활성을 비교한 결과이다.
도 3은 테레오그릴루신 2 펩타이드가 포함된 화장료 제형의 안정성을 시험한 결과이다.
이하 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 본 발명에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정하여 해석되지 않을 수 있으며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.
본 발명의 화장료 조성물은 테레오그릴루신 2(teleogryllusine 2) 펩타이드를 함유하는 것을 특징으로 한다.
상기 펩타이드는 왕귀뚜라미(Teleogryllus emma)로부터 분리된 것으로서, 여드름 유발균인 프로프리움 박테리움(Proprium bacterium) 및 병원성 세균인 메티실린 내성 황색 포도상 구균(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA) 중 1종 이상에 대한 항균 활성을 나타내어 여드름 또는 아토피의 예방/개선/치효 효과를 낼 수 있다.
상기 펩타이드는 카르복실 말단이 -NH2 형태 또는 -OH 형태일 수 있다.
상기 펩타이드의 아미노산 서열은YIRIRISRKMKILKL-NH2로서 14개의 아미노산으로 이루어지며, 테레오그릴루신 2(teleogryllusine 2)로 명명되어 있다(특허출원 제10-2017-0050774호).
상기 펩타이드는 왕귀뚜라미를 액체질소로 급속 동결하여 전체 RNA를 분리하고, 이를 RNA seq 분석법을 이용하여 왕귀뚜라미의 RNA 전사체들에 관한 유전자 정보를 확인한 후, 각각의 전사체들로부터 번역된 아미노산(펩타이드)의 서열을 바탕으로 기존의 밝혀진 항균 펩타이드의 성질을 이용하여 유니진을 선별함으로써 선택되었다.
상기 테레오그릴루신 2 펩타이드는 생리식염수, 유기용매 등에 잘 혼합되며, 안정성이 우수하다.
또한, 피부에 대한 효과를 향상시키기 위하여 상기 화장료 조성물은 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩타이드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 성분을 포함할 수도 있다.
수용성 비타민을 포함하는 경우, 바람직하게는, 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 피리독신, 염산피리독신, 비타민 B12, 판토텐산, 니코틴산, 니코틴산아미드, 엽산, 비타민 C, 비타민 H 등을 사용할 수 있다. 또한, 이들의 염 (티아민염산염, 아스코르빈산소듐염 등)이나 유도체(아스코르빈산-2-인산소듐염, 아스코르빈산-2-인산마그네슘염 등)도 적용할 수 있다. 유용성 비타민을 포함하는 경우, 바람직하게는, 비타민 A, 카로틴, 비타민 D2, 비타민 D3, 비타민 E(d1-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤) 등을 사용할 수 있다. 또한, 이들의 유도체(팔미틴산아스코르빈, 스테아르산아스코르빈, 디팔미틴산아스코르빈, 아세트산 dl-알파 토코페롤, 니코틴산 dl-알파 토코페롤비타민 E, DL-판토테닐알코올, D-판토테닐알코올, 판토테닐에틸에테르 등)도 적용할 수 있다.
고분자 펩타이드를 포함하는 경우, 바람직하게는, 콜라겐, 가수분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수분해 엘라스틴, 케라틴 등을 사용할 수 있다. 이러한 고분자 펩티드는 미생물의 배양액으로부터의 정제법, 효소법 또는 화학합성법 등의 통상의 방법에 의해 정제 취득할 수 있으며, 돼지나 소 등의 진피, 누에의 견섬유 등의 천연물로부터 정제하여 사용할 수도 있다.
고분자 다당을 포함하는 경우, 바람직하게는, 하이드록시에틸셀룰로오스, 잔탄검, 히알루론산소듐, 콘드로이틴 황산 또는 그 염(소듐염 등) 등을 사용할 수 있다.
스핑고 지질을 포함하는 경우, 바람직하게는, 세라미드, 피토스핑고신, 스핑고당지질 등을 들 수 있다. 스핑고 지질은 통상 포유류, 어류, 패류, 효모 또는 식물 등을 사용할 수 있다.
해초 엑기스를 포함하는 경우, 바람직하게는, 갈조 엑기스, 홍조 엑기스, 녹조 엑기스 등을 사용할 수 있으며, 이들의 해초 엑기스로부터 정제된 칼라기난, 아르긴산, 아르긴산소듐, 아르긴산칼륨 등도 적용할 수 있다.
또한, 상기 화장료 조성물에는 상기와 같은 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합해도 된다. 이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.
유지 성분으로서는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유 지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 들 수 있다.
이때, 에스테르계 유지로서는 트리 2-에틸헥산산글리세릴, 2-에틸헥 산산세틸, 미리스틴산이소프로필, 미리스틴산부틸, 팔미틴산이소프로필, 스테아르 산에틸, 팔미틴산옥틸, 이소스테아르산이소세틸, 스테아르산부틸, 리놀레산에틸, 리놀레산이소프로필, 올레인산에틸, 미리스틴산이소세틸, 미리스틴산이소스테아릴, 팔미틴산이소스테아릴, 미리스틴산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 세바신산 디에틸, 아디핀산디이소프로필, 네오펜탄산이소알킬, 트리(카프릴, 카프린산)글리 세릴, 트리 2-에틸헥산산트리메틸롤프로판, 트리이소스테아르산트리메틸롤프로판, 테트라 2-에틸헥산산펜타엘리슬리톨, 카프릴산세틸, 라우린산데실, 라우린산헥실, 미리스틴산데실, 미리스틴산미리스틸, 미리스틴산세틸, 스테아르산스테아릴, 올레 인산데실, 리시노올레인산세틸, 라우린산이소스테아릴, 미리스틴산이소트리데실, 팔미틴산이소세틸, 스테아르산옥틸, 스테아르산이소세틸, 올레인산이소데실, 올레 인산옥틸도데실, 리놀레산옥틸도데실, 이소스테아르산이소프로필, 2-에틸헥산산세 토스테아릴, 2-에틸헥산산스테아릴, 이소스테아르산헥실, 디옥탄산에틸렌글리콜, 디올레인산에틸렌글리콜, 디카프린산프로필렌글리콜, 디(카프릴,카프린산)프로필렌 글리콜, 디카프릴산프로필렌글리콜, 디카프린산네오펜틸글리콜, 디옥탄산네오펜틸 글리콜, 트리카프릴산글리세릴, 트리운데실산글리세릴, 트리이소팔미틴산글리세릴, 트리이소스테아르산글리세릴, 네오펜탄산옥틸도데실, 옥탄산이소스테아릴, 이소노 난산옥틸, 네오데칸산헥실데실, 네오데칸산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 이소스테아르산이소스테아릴, 이소스테아르산옥틸데실, 폴리글리세린올레인산에스 테르, 폴리글리세린이소스테아르산에스테르, 시트르산트리이소세틸, 시트르산트리 이소알킬, 시트르산트리이소옥틸, 락트산라우릴, 락트산미리스틸, 락트산세틸, 락 트산옥틸데실, 시트르산트리에틸, 시트르산아세틸트리에틸, 시트르산아세틸트리부틸, 시트르산트리옥틸, 말산디이소스테아릴, 하이드록시스테아르산 2-에틸헥실, 숙신산디 2-에틸헥실, 아디핀산디이소부틸, 세바신산디이소프로필, 세바신산디옥틸, 스테아르산콜레스테릴, 이소스테아르산콜레스테릴, 하이드록시스테아르산콜레스테 릴, 올레인산콜레스테릴, 올레인산디히드로콜레스테릴, 이소스테아르산피트스테릴, 올레인산피트스테릴, 12-스테알로일하이드록시스테아르산이소세틸, 12-스테알로일 하이드록시스테아르산스테아릴, 12-스테알로일하이드록시스테아르산이소스테아릴 등의 에스테르계 등을 들 수 있다.
또한, 탄화 수소계 유지로서는 스쿠알렌, 유동 파라핀, 알파-올레 핀올리고머, 이소파라핀, 세레신, 파라핀, 유동이소파라핀, 폴리부덴, 마이크로크리스탈린왁스, 와셀린 등의 탄화 수소계 유지 등을 들 수 있다.
또한, 실리콘계 유지로서는 폴리메틸실리콘, 메틸페닐실리콘, 메틸 시클로폴리실록산, 옥타메틸폴리실록산, 데카메틸폴리실록산, 도데카메틸시클로실 록산, 디메틸실록산 메틸세틸옥시실록산 공중합체, 디메틸실록산 메틸스테알록시 실록산 공중합체, 알킬 변성 실리콘유, 아미노 변성 실리콘유 등을 들 수 있다.
또한, 불소계 유지로서는 퍼플루오로폴리에테르 등을 들 수 있다. 동물 또는 식물 유지로서는 아보카도유, 아르몬드유, 올리브유, 참깨유, 쌀겨유, 새플라워유, 대두유, 옥수수유, 유채유, 행인(杏仁)유, 팜핵유, 팜유, 피마자유, 해바라기유, 포도종자유, 면실유, 야자유, 쿠쿠이너트유, 소맥배아유, 쌀 배아유, 시아버터, 월견초유, 마커데이미아너트유, 메도홈유, 난황유, 우지(牛脂), 마유, 밍크유, 오렌지라피유, 호호바유, 캔데리러왁스, 카르나바왁스, 액상 라놀린, 경화 피마자유 등의 동물 또는 식물 유지를 들 수 있다.
보습제로서는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자, 지용성 고분자 등을 들 수 있다. 수용성 저분자 보습제로서는 세린, 글루타민, 솔비톨, 만니톨, 피롤리돈-카르복실산소듐, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3\-부틸렌글리콜, 에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜B(중합도 n=2 이상), 폴리프로필렌 글리콜(중합도 n=2 이상), 폴리 글리세린B(중합도 n=2 이상), 락트산, 락트산염 등을 들 수 있다.
이때, 수용성 고분자로서는 카르복시비닐폴리머, 폴리아스파라긴산염, 트라가칸트, 잔탄검, 메틸셀룰로오스, 하이드록시메틸셀룰로오스, 하이드록시 에틸셀룰로오스, 하이드록시프로필셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 수용성 키 틴, 키토산, 덱스트린 등을 들 수 있다. 지용성 고분자로서는 폴리비닐피롤리돈 에이코센 공중합체, 폴리비닐피롤리돈 헥사데센 공중합체, 니트로셀룰로오스, 덱스트린지방산에스테르, 고분자 실리콘 등을 들 수 있으며, 지용성 저분자 보습제로서 는 콜레스테롤, 콜레스테롤에스테르 등을 들 수 있다.
보습제로는 장쇄 아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 하이드록시스 테아르산콜레스테릴, 12-하이드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산, 라놀린지방산 콜레스테릴에스테르 등을 들 수 있다.
계면 활성제로서는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제, 양성계면 활성제 등을 들 수 있다.
비이온성 계면 활성제로서는 자기 유화형 모노스테아르산글리세린, 프로필렌글리콜지방산에스테르, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스 테르, 솔비탄지방산에스테르, POE (폴리옥시에틸렌)솔비탄지방산에스테르, POE 솔 비트지방산에스테르, POE 글리세린지방산에스테르, POE 알킬에테르, POE 지방산에스테르, POE 경화피마자유, POE 피마자유, POE POP(폴리옥시에틸렌 폴리옥시프로필렌) 공중합체, POE POP 알킬에테르, 폴리에테르변성실리콘, 라우린산알카놀아미드, 알킬아민옥시드, 수소첨가대두인지질 등을 들 수 있다.
음이온성 계면 활성제로서는 지방산비누, 알파-아실술폰산염, 알킬 술폰산염, 알킬알릴술폰산염, 알킬나프탈렌술폰산염, 알킬황산염, POE 알킬에테르 황산염, 알킬아미드황산염, 알킬인산염, POE 알킬인삼염, 알킬아미드인산염, 알킬 로일알킬타우린염, N-아실아미노산염, POE 알킬에테르카르복실산염, 알킬술포숙신산염, 알킬술포아세트산소듐, 아실화 가수분해 콜라겐펩티드염, 퍼플루오로알킬인산에스테르 등을 들 수 있다. 양이온성 계면 활성제로서는 염화알킬트리메틸암모늄, 염화스테아릴트리메틸암모늄, 브롬화스테아릴트리메틸암모늄, 염화세토스테아릴트리메틸암모늄, 염화디스테아릴디메틸암모늄, 염화스테아릴디메틸벤질암모늄, 브롬화베헤닐트리메틸암모늄, 염화벤잘코늄, 스테아르산디에틸아미노에틸아미드, 스테아르산디메틸아미노프로필아미드, 라놀린 유도체 제4급 암모늄염 등을 들 수 있다.
양이온성 계면 활성제로서는 카르복시베타인형, 아미드베타인형, 술포베타인형, 하이드록시술포베타인형, 아미드술포베타인형, 포스포베타인형, 아미노카르복실산염형, 이미다졸린 유도체형, 아미드아민형 등의 계면 활성제를 들 수 있다.
유기 및 무기 안료로서는 규산, 무수규산, 규산마그네슘, 탤크, 세리사이트, 마이카, 카올린, 벵갈라, 클레이, 벤토나이트, 티탄피막운모, 옥시염화 비스무트, 산화지르코늄, 산화마그네슘, 산화아연, 산화티탄, 산화알루미늄, 황산 칼슘, 황산바륨, 황산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화철, 군청, 산화크롬, 수산화크롬, 칼라민 및 이들의 복합체 등의 무기 안료; 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐수지, 요소수지, 페놀수지, 불소수지, 규소수지, 아크릴수지, 멜라민수지, 에폭시수지, 폴리카보네이트수지, 디비닐벤젠 스티렌 공중합체, 실크파우더, 셀룰로오스, CI 피그먼트옐로우, CI 피그먼트오렌지 등의 유기 안료 및 이들의 무기 안료와 유기 안료의 복합 안료 등을 들 수 있다.
유기 분체로서는 스테아르산칼슘 등의 금속비누; 세틸린산아연소듐, 라우릴린산아연, 라우릴린산칼슘 등의 알킬인산금속염; N-라우로일-베타-알라닌칼슘, N-라우로일-베타-알라닌아연, N-라우로일글리신칼슘 등의 아실아미노산 다가금속염; N-라우로일-타우린칼슘, N-팔미토일-타우린칼슘 등의 아미드술폰산 다가금속염; N-엡실론-라우로일-L-리진, N-엡실론-팔미토일리진, N-알파-파리토일올니틴, N-알파-라우로일아르기닌, N-알파-경화우지지방산아실아르기닌 등의 N-아실염기성아미노산; N-라우로일글리실글리신 등의 N-아실폴리펩티드; 알파-아미노카프릴산, 알파-아미노라우린산 등의 알파-아미노지방산; 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 나일론, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리스티렌, 디비닐벤젠 스티렌 공중합체, 사불화에틸렌 등을 들 수 있다. 자외선 흡수제로서는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산 에틸렌글리콜, 살리신산페닐, 살리신산옥틸, 살리신산벤질, 살리신산부틸페닐, 살리신산호모멘틸, 계피산벤질, 파라메톡시계피산-2-에톡시에틸, 파라메톡시계피산옥틸, 디파라메톡시계피산모노-2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필 디이소프로필 계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 하이드록시메톡시벤조페논, 하이드록시메톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디하이드록시메톡시벤조페논, 디하이드 록시메톡시벤조페논디술폰산소듐, 디하이드록시벤조페논, 테트라하이드록시벤조페 논, 4-tert-부틸-4'-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-p-(카르보-2'-에틸헥실-1'-옥시)-1,3,5-트리아진, 2-(2-하이드록시-5-메틸페닐)벤조트리아졸 등을 들 수 있다.
살균제로서는 히노키티올, 트리클로산, 트리클로로하이드록시디페닐 에테르, 크로르헥시딘글루콘산염, 페녹시에탄올, 레조르신, 이소프로필메틸페놀, 아줄렌, 살리칠산, 진크필리티온, 염화벤잘코늄, 감광소 301호, 모노니트로과이어콜소듐, 운데시렌산 등을 들 수 있다.
산화 방지제로서는 부틸하이드록시아니솔, 갈릭산프로필, 엘리소르빈산 등을 들 수 있다. pH 조정제로서는 시트르산, 시트르산소듐, 말산, 말산소듐, 프말산, 프말산소듐, 숙신산, 숙신산소듐, 수산화소듐, 인산일수소소듐 등을 들 수 있다. 알코올로서는 세틸알코올 등의 고급 알코올을 들 수 있다.
또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또한, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총중량에 대하여 바람직하게는 0.01 내지 5 중량%, 더욱 바람직하게 0.01 내지 3 중량%로 배합된다.
상기 화장료 조성물은 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있다. 상기 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 테레오그릴루신 2 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예를 들면, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함할 수 있다.
상기 화장료 조성물이 적용된 제형은, 예를 들어, 세안제, 비누, 크림, 로션, 스킨, 젤, 수용성 리퀴드, 에센스, 페이스오일, 선크림, 선로션, 핸드크림, 풋크림, 바디로션, 바디크림, 바디오일, 맛사지크림, 마스크팩, 스킨커버, 립스틱, 립글로스, 메이크업베이스, 파운데이션, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이새도, 치크칼라, 아이브로우 펜슬, 클렌징폼, 클렌징 오일, 클렌징 로션, 클렌징 티슈, 헤어에센스, 샴푸, 린스, 헤어트리트먼트 등의 제형으로 제조될 수 있으며, 여드름 또는 아토피 피부염의 개선을 위해 적용될 수 있는 제형이라면 어떠한 것이라도 적용될 수 있다.
상기 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
상기 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 하이드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
상기 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예를 들어, 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비 탄의 지방산 에스테르를 사용할 수 있다.
상기 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에 틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성셀룰로오스, 알루미늄 메타하이드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
상기 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 리놀린유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
또 다른 양태로서 본 발명은 테레오글리루신 2를 함유하는 여드름/아토피 피부염의 치료 또는 예방용 약학 조성물에 관한 것이다. 상기 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 상기 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 펩타이드에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물의 투여량은 치료받을 대상의 연령, 성별, 체중과, 치료할 특정 질환 또는 병리 상태, 질환 또는 병리 상태의 심각도, 투여경로 및 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 일반적으로 투여량은 0.01㎎/㎏/일 내지 대략 2000㎎/㎏/일의 범위이다. 더 바람직한 투여량은 1㎎/㎏/일 내지 500㎎/㎏/일이다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물은 쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 주사에 의해 투여될 수 있다. 본 발명의 펩타이드는 독성 및 부작용이 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 투여 시에도 안심하고 사용할 수 있는 약제이다.
<실시예 1. 테레오그릴루신 2 펩타이드의 합성>
항균 펩타이드 유전자 선발을 위하여 왕귀뚜라미를 액체 질소로 급속 동결하여 전체 RNA를 분리하였고, 이를 RNA seq 분석법을 이용하여 왕귀뚜라미 전사체들에 관한 유전자 정보를 확인하였다. 각각의 전사체들로부터 번역된 아미노산의 서열을 바탕으로 기존의 항균 펩타이드 성질을 바탕으로 유니진 전 체를 filtration 하였으며 그 결과 15개 아미노산으로 구성된 YIRIRISRKMKILKL-NH2의 서열을 갖는 테레오그릴루신 2(Teleogryllusine 2)를 선별하였다. 다음으로는 이렇게 선별된 테레오그릴루신 2 펩타이드를 합성 및 분리 정제하였다.
이를 위해, Fmoc 아미노기 보호용기를 이용한 메리필드(Merrifield)의 액상 고상법(Merrifield, RB., J. Am. Chem. Soc., 85, 2149, 1963)을 사용하여 펩타이드를 제조하였다. 상기 펩타이드 합성의 방법은 Fmoc(9-fluorenylmethoxycarbonyl)를 아미노산의 N α-아미노 그룹 (amino group)의 보호기(protecting group)로 사용하는 고상법(solid phase method)으로 합성하였다.
구체적으로, 카르복실 말단이 -NH2 형태인 펩타이드는 Rink Amide MBHA-Resin을 출발물질로 사용하였으며, 카르복실 말단이 -OH 형태의 펩타이드는 Fmoc-아미노산-Wang Resin을 출발물질로 사용하였다. Fmoc-아미노산의 커플링 (coupling)에 의한 펩타이드 사슬의 연장(elongation)은 DCC(N\-hydroxybenzotriazole(HOBt)-dicyclo-hexylcar-bodiimide)법에 의하였다.
각 펩타이드의 아미노 말단의 Fmoc-아미노산을 커플링 시킨 후, 20% 피페리딘/N-메틸피롤리돈(NMP)용액으로 Fmoc기를 제거하고 NMP 및 디클로로메탄 (DCM)으로 여러 번 씻어준 다음 질소 가스로 말렸다.
여기에 TFA(trifluoroacetic acid) : phenol : thioanisole : H 2O : triisopropylsilane(85 : 5 : 5 : 2.5 : 2.5[v : v : v : v : v]) 혼합용액을 가하고 3시간 동안 반응시켜 보호기의 제거 및 레진으로부터 펩타이드를 분리시킨 다음, 디에틸에테르로 펩타이드를 침전시켰다. 이렇게 하여 얻은 조(crude) 펩타이드는 0.1% TFA가 포함된 아세토니트릴 농도 구배(acetonitrile gradient)로 하여 정제형 역상-HPLC 컬럼(reverse phase-HPLC column, Delta Pak, C18 300Å, 15㎛, 19.0㎜ㅧ30㎜, Waters)을 이용하여 정제하였다.
합성 펩타이드를 6N HCl로 110℃에서 24시간 동안 가수분해한 후, 얻어진 잔사를 감압농축 한 뒤, 0.02N HCl에 녹여서 아미노산 분석기(Hitachi 8500 A)로 아미노산 조성을 측정하였다. 또한 합성된 펩타이드의 시퀀스(sequence)를 바 탕으로 분자량을 계산하였고, MALDI 질량 분석법(matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometer)을 이용하여 정확한 분자량을 측정하였다.
그 결과 측정된 분자량과 계산된 분자량이 일치하므로 정확한 아미노산 서열을 가지는 항균 펩타이드가 합성되었음을 확인하였다.
<실시예 2. 여드름 또는 아토피 피부염 유발균에 대한 항균 효능 측정>
테레오그릴루신 2 펩타이드와 멜리틴에 대한 항균 활성을 비교 분석하기 위하여 RDA (Radial diffusion assay)를 수행하였다. 이때 꿀벌로부터 분리된 강력한 항균 펩타이드 멜리틴(melittin)을 본 발명에서 대조군으로 사용하였다. 본 발명에서 항균 펩타이드는 -20℃에 보관하며, 멸균된 3차 증류수에 녹여서 사용하였다.
항균 활성을 측정할 각각의 펩타이드들은 0.01 % acetic acid를 이용하여 200㎍/㎖의 농도로 준비하였다.
항균 펩타이드의 항균 활성을 측정하기 위하여, 먼저 여드름 유발균인 Proprium bacterium (Propionibacterium acnes[프로피오니박테리움 아크네스])와 병원성 세균이면서 아토피 피부염의 주요 유발인자로 알려진 methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)를 3%(w/v) TBS(tryptic soy broth)에서 37℃, 200rpm 조건하에서 18시간 배양한 후, 다시 동일한 조건으로 4 ㅧ 106 CFU(colony forming units)/㎖ 농도가 되도록 2시간 30분간 2차 배양하였다.
준비된 펩타이드 시료들로부터 각각 5㎕를 4 ㅧ 106 CFU로 계산된 대수증식기의 Propionibacterium acnes 또는 MRSA를 포함한 underlay agar(9 mM sodium phosphate, 1 mM sodium citrate, pH 7.4, 1 % agarose(w/v)와 30㎎/㎖ TSB powder)에 직경 3 mm well로 넣었다. 37℃에서 3시간 동안 뒤집은 채로 배양한 후, overlay agar(1 % agarose (w/v)와 60㎎/㎖ TSB powder)를 underlay agar 평판에 부어 37℃에서 18시간 동안 배양하였다. 세균이 성장하지 못한 명확한 영역(clear zone)의 부위들은 직경을 0.1 mm까지 측정하였고, 얻어진 결과들은 도 1과 같으며 측정값들은 units로 표현하였다(0.1㎜ = 1 units).
도 1(a)를 살펴보면, 멜리틴과 대비하며 테레오그릴루신 2(TE-2)는 Propionibacterium acnes 및 MRSA에 대한 유사 또는 더 나은 항균 활성을 나타내는 것을 확인할 수 있다. 이를 정량적으로 관찰하면 도 1(b)에서와 같이 펩타이드 농도에 따른 테리오 그릴루신 2의 Propionibacterium acnes에 대한 항균 활성은 거의 같은 정도인 것을 알 수 있으며, 특히, MRSA에 대해서는 항균 활성의 차이가 크게 나타나는 것을 알 수 있다.
다음으로 여드름/아토피 피부염 유발균에 대한 테레오그릴루신 2와 살리실산의 항균 활성 비교분석하기 위하여 RDA(Radial diffusion assay)를 수행하였다. 항균 펩타이드는 -20℃에 보관하며, 멸균된 3차 증류수에 녹여서 사용하였다. 살리실산은 0.5%, 0.7%, 1%, 3% 그리고 5%가 되도록 EtOH(99.9%)로 용해한 후, 증류수로 10배 희석하여 최종 농도는 0.05%, 0.07%, 0.1%, 0.3% 그리고 0.5%가 되도록 준비하여 사용하였다.
시험군들의 항균 활성을 측정하기 위하여, 먼저 여드름 유발균인 Proprium bacterium(Propionibacterium acnes)를 3%(w/v) TBS(tryptic soy broth)에서 37℃, 200rpm 조건하에서 18시간 배양한 후, 다시 동일한 조건으로 4 ㅧ 106 CFU(colony forming units)/㎖ 농도가 되도록 2시간 30분간 2차 배양하였다.
준비된 시료들로부터 각각 5㎕를 4 ㅧ 106 CFU로 계산된 대수증식기의 Propionibacterium acnes(P. acnes)를 포함한 underlay agar(9 mM sodium phosphate, 1 mM sodium citrate, pH 7.4, 1 % agarose (w/v)와 30㎎/㎖ TSB powder)에 직경 3 mm well로 넣었다. 37℃에서 3시간 동안 뒤집은 채로 배양한 후, overlay agar(1 % agarose (w/v)와 60㎎/㎖ TSB powder)를 underlay agar 평판에 부어 37℃에서 18시간 동안 배양하였다. 세균이 성장하지 못한 명확한 영역(clear zone)의 부위들은 직경을 0.1 mm까지 측정하였고, 얻어진 결과들은 도 2와 같다. 측정값들은 units로 표현하였다(0.1㎜ = 1 units).
도 2의 결과를 살펴보면, 테레오그릴루신 2는 살리실산에 비해 현저한 항균 활성을 나타내는 것을 확인할 수 있다.
다음으로 테레오그릴루신 2의 화장품 제형에서의 안정성과 이에 따른 항균성 유지정도를 확인하기 위하여 테레오그릴루신 2의 화장품 제형성분 혼합액에서 활성 유지 정도를 측정하였다. 화장품 기본 제형성분으로 글리세린, 프로판디올, 아시아티코사이드, 하이드록시에칠셀룰로오스, 판테놀, 트레할로스, 글라이신 등을 사용하였다. 증류수에 각 각의 제형성분을 용해한 후, 펩타이드의 농도가 1㎎/㎖이 되도록 용해한 후, 4℃에서 보관하였다. 4주 간격으로 일부를 취하여 colony count assay를 수행하였다.
Colony count assay를 위하여 1㎎/㎖의 농도로 준비된 펩타이드 혼합액 10㎕를 10mM Na-P(pH 7.4) buffer로 2 ㅧ 107 CFU/㎖로 준비된 여드름 유발균인 Propionibacterium acnes 또는 아토피 피부염 유발균인 MRSA 균주의 각각의 용액 980㎕와 혼합하였다. 그 후 37℃에서 60분 동안 반응시킨 뒤 혼합물 용액을 10mM Na-P(pH 7.4) buffer로 104배 희석한 후, 10㎕를 1.5% Bacto-agar (Difco, USA)가 포함된 tryptic soy agar plate(TSA, 1.5% agarose + 3% TSB)에 바로 도말하였다. 도말된 TSA plate는 37℃에서 하루 동안 배양한 후, plate로부터 생존한 집략들을 계수하였고 얻어진 결과는 도 3과 같다.
도 3의 결과를 살펴보면, 4개월 경과 후까지 테레오그릴루신 2을 포함하는 화장품 제형이 Propionibacterium acnes 및 MRSA 균주에 대한 항균 활성을 나타내는 것을 확인할 수 있으며, 이는 상기 테레오그릴루신 2가 화장료 조성물의 제형 내에서 안정하게 존재하는 것을 나타내는 결과이다.
따라서 상기 테레오그릴루신 2는 화장료 조성물로서 적용할 수 있을 정도의 상용성을 나타내며, 특히, 여드름 또는 아토피 유발 원인균에 대한 항균 활성을 나타내어 여드름과 아토피 피부염을 완화할 수 있는 기능성 화장료 조성물에 적용할 수 있는 것으로 확인된다.
본 발명은 상술한 바와 같이 바람직한 실시예를 들어 설명하였으나, 상기 실시예에 한정되지 아니하며 본 발명의 정신을 벗어나지 않는 범위 내에서 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 다양한 변형과 변경이 가능하다. 그러한 변형예 및 변경예는 본 발명과 첨부된 특허청구범위의 범위 내에 속하는 것으로 보아야 한다.
<110> REPUBLIC OF KOREA(MANAGEMENT : RURAL DEVELOPMENT ADMINISTRATION) PNS LifeScience, Inc. <120> COSMETIC COMPOSITION COMPRISING TELEOGRYLLUSINE 2 PEPTIDE FOR PREVENTING OR IMPROVING ACNE OR ATOPIC DERMATITIS <160> 1 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 15 <212> PRT <213> Unknown <220> <223> Teleogryllus emma <400> 1 Tyr Ile Arg Ile Arg Ile Ser Arg Lys Met Lys Ile Leu Lys Leu 1 5 10 15

Claims (7)

  1. 왕귀뚜라미(Teleogryllus emma) 유래의 하기 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 펩타이드를 함유하는 화장료 조성물.
    서열번호 1: YIRIRISRKMKILKL-NH2
  2. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 개선 효능이 있는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 펩타이드는 프로프리움 박테리움(Proprium bacterium) 및 메티실린 내성 황색 포도상 구균(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA) 중 1종 이상에 대한 항균 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  4. 제1항의 조성물을 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 제형.
  5. 제4항에 있어서,
    상기 화장료 제형은 세안제, 비누, 크림, 로션, 스킨, 젤, 수용성 리퀴드, 에센스, 페이스오일, 선크림, 선로션, 핸드크림, 풋크림, 바디로션, 바디크림, 바디오일, 맛사지크림, 마스크팩, 스킨커버, 립스틱, 립글로스, 메이크업베이스, 파운데이션, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이새도, 치크칼라, 아이브로우 펜슬, 클렌징폼, 클렌징 오일, 클렌징 로션, 클렌징 티슈, 헤어에센스, 샴푸, 린스 및 헤어트리트먼트로 이루어진 군 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 화장료 제형.
  6. 왕귀뚜라미(Teleogryllus emma) 유래의 하기 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 펩타이드를 함유하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
    서열번호 1: YIRIRISRKMKILKL-NH2
  7. 제6항에 있어서,
    상기 펩타이드는 프로프리움 박테리움(Proprium bacterium) 및 메티실린 내성 황색 포도상 구균(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA) 중 1종 이상에 대한 항균 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
KR1020180129690A 2018-10-29 2018-10-29 테레오그릴루신 2 펩타이드를 함유하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 화장료 조성물 KR102068521B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020180129690A KR102068521B1 (ko) 2018-10-29 2018-10-29 테레오그릴루신 2 펩타이드를 함유하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 화장료 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020180129690A KR102068521B1 (ko) 2018-10-29 2018-10-29 테레오그릴루신 2 펩타이드를 함유하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 화장료 조성물

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR102068521B1 true KR102068521B1 (ko) 2020-01-21

Family

ID=69369825

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020180129690A KR102068521B1 (ko) 2018-10-29 2018-10-29 테레오그릴루신 2 펩타이드를 함유하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 화장료 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR102068521B1 (ko)

Citations (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050172356A1 (en) * 1998-07-15 2005-08-04 The Horticulture And Food Research Institute Of New Zealand Nucleic acids encoding chimeric polypeptides allowing expression of plant-noxious proteins
KR20060039317A (ko) * 2004-11-02 2006-05-08 학교법인조선대학교 아스퍼질러스 니듈란스로부터 분리한 신규 펩타이드 및이를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물
KR100681701B1 (ko) 2005-12-30 2007-02-15 주식회사 코리아나화장품 헥사노일트리펩타이드를 유효성분으로 함유하는 여드름완화용 화장료 조성물
WO2010049454A2 (en) * 2008-10-28 2010-05-06 Nofima Ingrediens Antimicrobial composition from copepods
KR100964136B1 (ko) 2009-07-28 2010-06-21 대한민국 울도하늘소유충으로부터 분리한 항균 및 항진균 펩타이드 유전자 및 항균 및 항진균 활성을 가지는 합성 펩타이드
KR20130134097A (ko) * 2012-05-30 2013-12-10 경북대학교 산학협력단 귀뚜라미 추출물을 함유하는 피부염증 예방 또는 치료용 조성물
KR20160013328A (ko) * 2014-07-24 2016-02-04 대한민국(농촌진흥청장) 왕지네로부터 분리한 항균 펩타이드 스콜로펜드라신-6 및 그의 조성물
KR101620148B1 (ko) 2013-12-19 2016-05-12 주식회사 바이오에프디엔씨 항균펩타이드 베타-디펜신 3 및 3h의 라우릭산 융합을 통한 장기지속형 유도체, 세포투과성 펩타이드 융합을 통한 피부투과형 유도체 개발과 이를 함유하는 화장료 조성물
KR20160096548A (ko) * 2015-02-05 2016-08-16 이삼구 항산화, 항노화 및 피부미용 개선 효과가 증진된 귀뚜라미 및 이를 함유하는 화장료 조성물
KR101686428B1 (ko) * 2015-06-09 2016-12-15 대한민국 바퀴벌레에서 유래한 항균 펩타이드 페리플라네타신-2 및 그의 조성물
KR101856602B1 (ko) 2017-02-06 2018-05-11 안동대학교 산학협력단 왕귀뚜라미 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화 조성물
KR101878069B1 (ko) 2016-10-20 2018-07-12 신덕현 생약 혼합물의 추출물과 편백 오일을 함유하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 조성물

Patent Citations (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050172356A1 (en) * 1998-07-15 2005-08-04 The Horticulture And Food Research Institute Of New Zealand Nucleic acids encoding chimeric polypeptides allowing expression of plant-noxious proteins
KR20060039317A (ko) * 2004-11-02 2006-05-08 학교법인조선대학교 아스퍼질러스 니듈란스로부터 분리한 신규 펩타이드 및이를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물
KR100625875B1 (ko) 2004-11-02 2006-09-20 학교법인조선대학교 아스퍼질러스 니듈란스로부터 분리한 신규 펩타이드 및이를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물
KR100681701B1 (ko) 2005-12-30 2007-02-15 주식회사 코리아나화장품 헥사노일트리펩타이드를 유효성분으로 함유하는 여드름완화용 화장료 조성물
WO2010049454A2 (en) * 2008-10-28 2010-05-06 Nofima Ingrediens Antimicrobial composition from copepods
KR100964136B1 (ko) 2009-07-28 2010-06-21 대한민국 울도하늘소유충으로부터 분리한 항균 및 항진균 펩타이드 유전자 및 항균 및 항진균 활성을 가지는 합성 펩타이드
KR20130134097A (ko) * 2012-05-30 2013-12-10 경북대학교 산학협력단 귀뚜라미 추출물을 함유하는 피부염증 예방 또는 치료용 조성물
KR101620148B1 (ko) 2013-12-19 2016-05-12 주식회사 바이오에프디엔씨 항균펩타이드 베타-디펜신 3 및 3h의 라우릭산 융합을 통한 장기지속형 유도체, 세포투과성 펩타이드 융합을 통한 피부투과형 유도체 개발과 이를 함유하는 화장료 조성물
KR20160013328A (ko) * 2014-07-24 2016-02-04 대한민국(농촌진흥청장) 왕지네로부터 분리한 항균 펩타이드 스콜로펜드라신-6 및 그의 조성물
KR20160096548A (ko) * 2015-02-05 2016-08-16 이삼구 항산화, 항노화 및 피부미용 개선 효과가 증진된 귀뚜라미 및 이를 함유하는 화장료 조성물
KR101686428B1 (ko) * 2015-06-09 2016-12-15 대한민국 바퀴벌레에서 유래한 항균 펩타이드 페리플라네타신-2 및 그의 조성물
KR101878069B1 (ko) 2016-10-20 2018-07-12 신덕현 생약 혼합물의 추출물과 편백 오일을 함유하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 조성물
KR101856602B1 (ko) 2017-02-06 2018-05-11 안동대학교 산학협력단 왕귀뚜라미 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화 조성물

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Hon KL, Leung AK, Kong AY, Leung TF, Ip M. Atopic dermatitis compli\-cated by methicillin-resistant Staphylococcus aureus infection. J Natl Med Assoc 2008, 100, 797-800.
Journal of Life Science, Vol. 26, No. 6, pp. 737-748 (2016.) *
Roesch A, Linde HJ, Landthaler M, Vogt T. Elimination of a community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus infection in a nurse with atopic dermatitis. Arch Dermatol 2005, 141, 1520-1522.
Suh LM, Honig PJ, Yan AC. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus skin abscesses in a pediatric patient with atopic dermatitis: a case report. Cutis 2006, 78, 113-116.
황재삼, 완결과제 최종보고서, 과제번호 : PJ008158, 농촌진흥청, 국립농업과학원 (2015.03.06.) *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101754463B1 (ko) 사초과 식물 추출물을 함유하는 화장품 조성물 및 그 제조방법
KR100715485B1 (ko) 피부 미백 및 항노화 효과를 갖는 수련 뿌리 추출물을함유하는 화장료 조성물
KR20200071402A (ko) 왕지네 유래의 스콜로펜드라신-11 펩타이드를 유효성분으로 하는 항균, 항진균, 항염증 또는 항여드름용 조성물
JP2019513810A (ja) ざ瘡の処置および/または予防における使用のためのハルンガナ・マダガスカリエンシス(Harungana madagascariensis)葉抽出物
KR102136623B1 (ko) 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물 및 이를 포함하는 복합 방부제
KR20100094614A (ko) 흑마늘 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백 및 주름개선용 화장료 조성물
EP2717965B1 (de) Verwendung von epsilon-poly-l-lysin zur erhöhung der bioverfügbarkeit antimikrobieller peptide in menschlicher haut
JP4726109B2 (ja) 皮膚外用剤、それを用いる皮膚有害微生物の付着予防方法及び増殖防止方法
KR102107490B1 (ko) 수선화 추출물을 함유한 화장료 조성물
KR102068521B1 (ko) 테레오그릴루신 2 펩타이드를 함유하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 화장료 조성물
KR20050045428A (ko) 항산화 활성을 갖는 매화추출물을 포함하는 화장료 조성물
KR101887140B1 (ko) 열에 의한 피부 노화 예방용 조성물
KR101252468B1 (ko) 피부 트러블 개선용 화장품 조성물
KR20180031937A (ko) 항염효과를 갖는 피부개선용 화장료 조성물
KR20170022223A (ko) 리소좀을 유효성분으로 하는 미백 조성물
KR102121303B1 (ko) 황칠나무 추출물을 이용한 화장료 조성물
KR20210063048A (ko) 아롱 부챗말 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백용 의학적 조성물
KR101230588B1 (ko) 천연 비타민 및 식물 복합 추출물을 함유한 화장료 조성물
KR100829831B1 (ko) 식물 추출물을 포함하는 미백 화장료 조성물
KR101042690B1 (ko) 참나도히초미 추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화 및주름개선용 조성물
KR102234670B1 (ko) 스쿠알렌 및 달팽이알 추출물이 함유된 임신선 예방 또는 개선용 화장료 조성물
KR102599093B1 (ko) 편백나무가지 추출물을 유효성분으로 포함하는 기능성 화장료 조성물
KR101887168B1 (ko) 열에 의한 피부 노화 예방용 조성물
KR20240025806A (ko) 병풀 및 배초향 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 광노화 예방 또는 개선용 화장료 조성물
KR20240097556A (ko) 연자각 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 방지 및 항균 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant