KR100964136B1 - 울도하늘소유충으로부터 분리한 항균 및 항진균 펩타이드 유전자 및 항균 및 항진균 활성을 가지는 합성 펩타이드 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 딱정벌레목에 곤충에 속하는 울도하늘소(Psacothea hilaris) 유충으로부터 면역반응을 유도하여 분리된 새로운 항균 단백질 유전자 및 이의 아미노산 서열에 관한 것이다. 본 발명에 의해 화학적으로 합성된 펩타이드(사코더아신Ⅰ)는 그람음성균, 그람양성균 및 진균류에 대하여 강한 항균 작용을 나타내었다.
본 발명에 의한 상기 항균 펩타이드는 세포 독성이 없고, 항균활성이 강하므로 항진균제를 포함하는 항생제, 식품 방부제, 화장품 보존제, 의약품 보존제 등으로 사용할 수 있다.
Description
본 발명은 딱정벌레목에 속하는 울도하늘소(Psacothea hilaris)유충으로부터 분리된 신규 항균 펩타이드 유전자의 cDNA 염기서열 및 이를 암호화하는 아미노산 서열 및 성숙 단백질의 합성펩타이드에 관한 것이다.
본 발명에 의한 상기 항균 펩타이드는 세포 독성이 없고 탁월한 항균 활성을 나타냄과 동시에 인체에 안전하므로 천연항생제, 식품 방부제, 화장품 보존제, 의약품 보존제 등으로 사용할 수 있다.
병원성 미생물의 감염은 인간의 질병에서 가장 흔하고 치명적인 원인 중의 하나인데, 불행하게도 항생제의 남용으로 인하여 병원성 미생물의 항생제 저항성 (resistance)이 야기되었다.
실제로, 병원성 미생물이 새로운 항생제에 저항성을 나타내는 속도는 새로운 항생제의 유사체가 개발되는 속도보다 훨씬 더 빠르다. 예를 들면, 생명에 위협을 가할 수 있는 엔테로코쿠스 패칼리스(Enterococcus faecalis), 마이코박테리움 투 버쿨로시스(Mycobacterium tuberculosis) 및 슈도모나스 아루지노사(Pseudomonas aeruginosa) 등의 병원성 미생물 종들은 지금까지 알려진 모든 항생제에 대한 저항력이 생겼다(Stuart B. Levy, Scientific American, 46-53, 1998).
항생제에 대한 내성(tolerance)은 항생제에 대한 저항성(resistance)과는 구별되는 현상인데, 1970년대에 뉴모코커스(Pneumococcus sp.)에서 최초로 발견이 되었으며 페니실린의 작용 기작에 대한 중요한 단서를 제공하였다(Tomasz et al., Nature, 227, 138-140, 1970).
내성을 보이는 종은 통상적인 농도의 항생제 존재 하에서는 성장을 멈추지만 결과적으로 죽지는 않는다. 상기 내성은 항생제가 세포벽 합성 효소를 저해할 때 오토라이신(autolysin) 등과 같은 세균의 자가분해(autolytic) 효소의 활성이 발생하지 않기 때문에 생기는데, 이러한 사실로 인하여 페니실린은 내인성 가수분해 효소(endogenous hydrolytic enzyme)를 활성화시킴으로써 세균을 죽이며 세균은 또한 이들의 활성을 억제해서 항생제 치료 시에도 생존하게 된다.
병원성 미생물이 항생제에 대한 내성을 가지는 것은 임상적으로 대단히 중요한데, 내성 미생물을 박멸하는 것이 불가능하게 되면 임상적인 감염에서 항생제 치료의 효용이 떨어지기 때문이다(Handwerger and Tomasz, Rev . Infec . Dis., 7, 368-385, 1985).
아울러 내성이 생기는 것은 항생제에 대한 저항성이 생기게 되는 선행 조건이라고 간주되며, 이것은 항생제 치료에도 불구하고 살아남는 균주가 생기기 때문이다. 이러한 균주는 항생제에 저항성을 가지는 새로운 유전 요소를 획득해서 항생 제의 존재 하에서도 계속 성장하게 된다. 실제적으로 모든 저항성을 보이는 병원성 미생물들은 내성도 가지는 것으로 알려져 있으므로(Liu and Tomasz, J. Infect . Dis., 152, 365-372, 1985), 이러한 항생제 저항성을 가지는 병원성 미생물을 죽일 수 있는 신규의 항생제의 개발은 시급한 실정이다.
상기 살펴본 바와 같이, 항생제에 저항성을 나타내는 병원성 미생물들에 의한 피해를 막기 위하여 새로운 항생제의 개발이 필요하며, 아울러 오토라이신 활성과는 독립적으로 작용하는 새로운 항생제의 개발이 필요하다. 또한, 그러한 새로운 항생제를 병원성 미생물의 감염을 효과적으로 치료하기 위한 약물학적 조성물을 제공하는 것이 필요하다.
한편, 생물체의 항상성(homeostasis)을 유지하기 위한 과정에서 중요한 역할을 담당하고 있는 물질들 중 일부가 각종 생물체 유래의 생리 활성 물질이다.
지금까지 수많은 생리 활성 물질에 대해 많은 연구가 진행되고 있으며, 그 중, 각종 생물체에서 분리된 항균 펩타이드는 박테리아, 곰팡이 및 바이러스에 이르기까지 다양하게 작용하는 것으로 알려져 있다. 또한 항균 펩타이드들은 숙주 방어 및 선천적 면역계에 있어서 중요한 역할을 담당하는 것으로 알려져 있다 (Boman, H. G., Cell, 65, 205, 1991; Boman, H. G., Annu. Rev . Microbiol., 13, 61, 1995).
따라서 본 발명은 울도하늘소유충으로부터 분리된 신규 항균 펩타이드 유전자의 cDNA 염기서열 및 이를 암호화하는 아미노산 서열 및 성숙단백질의 합성펩타이드에 관한 것으로 세포 독성이 없고 탁월한 항균 활성을 나타냄과 동시에 인체에 안전하므로 천연항생제, 식품 방부제, 화장품 보존제, 의약품 보존제 등으로 사용할 수 있다.
본 발명의 목적은 그람 음성균, 그람양성균뿐만 아니라 인체 진균성 질환 예방 및 치료에 천연 항생제로 유용하게 사용될 수 있는 울도하늘소유충으로부터 분리된 신규 항균 펩타이드 유전자의 cDNA 염기서열 및 이를 암호화하는 아미노산 서열 및 성숙단백질의 합성펩타이드에 관한 것이다.
본 발명의 일 실시예는 서열번호 1로 표현되는, 울도하늘소(Psacothea hilaris ) 유충에서 분리한 항균 및 항진균 펩타이드의 유전자를 제공한다.
또한 본 발명의 다른 실시예는 서열번호 2로 표현되는, 울도하늘소(Psacothea hilaris ) 유충에서 분리한 항균 및 항진균 펩타이드의 유전자(서열번호 1)에서 연역된 아미노산을 제공한다.
또한, 본 발명의 또 다른 실시예는 서열번호 3으로 표현되는, 울도하늘소(Psacothea hilaris ) 유충에서 분리한 항균 및 항진균 펩타이드의 유전자에서 합성된 펩타이드(사코더아신 Ⅰ)를 제공한다.
또한, 본 발명의 또 다른 실시예는 서열번호 3으로 표현되는, 울도하늘소(Psacothea hilaris ) 유충에서 분리한 항균 및 항진균 펩타이드의 유전자에서 합성된 펩타이드(사코더아신 Ⅰ)를 유효성분으로 하는 약물 조성물을 제공한다.
상술한 목적을 달성하기 위하여 본 발명에서는,
울도하늘소유충으로부터 항균 펩타이드 유전자를 분리하기 위하여 먼저 울도하늘소 유충에 리포폴리사카라이드(lipopolysaccaride)를 주사하여 면역을 유도한 후, 액체질소로 급속 동결하여 전체 RNA를 분리하였다. 유도 발현된 곤충에서 특이적으로 나타나는 cDNA 마커를 찾기 위해서 Arbitrary primer를 이용하여 독특하게 발현된 유전자(differentially expressed gene)를 선발하는 GeneFishing Technology를 이용하였고, 그 결과 14개의 후보(candidate) cDNA 마커를 찾았다. 이들 마커 중 상동이 높은 노틴 유형(Knottin type)의 새로운 항진균(antifungal) 펩타이드의 부분 cDNA을 가지고 5'-RACE와 3'-RACE PCR방법을 사용하여 387bp 정도의 전체 길이의 cDNA(서열번호 1)를 얻을 수 있었다. 이 유전자의 cDNA는 전체 크기가 387bp이며, 103번째 염기에서 개시되어 283번째 염기 위치에서 종결되는 암호화 영역(open reading frame)을 가지고 있었다. 3' 말단부분의 염기서열에는 폴리(poly) A 염기를 포함하여 잠정 전사 종결신호인 'AAATAA'가 존재함을 확인할 수 있었고, cDNA의 ORF로부터 56개의 아미노산(서열번호 2)을 연역할 수 있었다.
본 발명은 울도하늘소(Psacothea hilaris ) 유충으로부터 분리된 새로운 항균 및 항진균 펩타이드 유전자의 cDNA 및 이를 암호화하는 아미노산의 서열을 제공한다. 본 발병에 의해 화학적으로 합성된 펩타이드(사코더아신Ⅰ)는 그람 음성균, 그람 양성균 및 진균류에 강한 항균 활성을 나타냄과 동시에 인체에 안전하므로 항진균제를 포함하는 항생제, 식품 방부제, 화장품 보존제, 의약품 보존제 등으로 사용할 수 있다.
이하 실시예에 의해 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 구체적으로 설명하는 것으로, 이들 실시예에 의해 본 발명의 범위가 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상적인 지식을 가진 자들에게 있어서 자명할 것이다. 또한 비록 구체적인 실시예로 제시되지는 않았지만, 항균 작용이 있는 본 발명에 의한 항균 펩타이드를 유효성분으로 함유하는 항생제용 약학적 조성물이 가능함이 당업자에게 당연할 것이다.
[실시예 1] 면역 유도한 울도하늘소 유충으로부터 항균·항진균 펩타이드 유전자 선발
울도하늘소 유충으로부터 항균 펩타이드 유전자를 분리하기 위하여 먼저 울도하늘소 유충에 리포폴리사카라이드(lipopolysaccaride)를 주사하여 면역을 유도 한 후 액체질소로 급속 동결하여 전체 RNA를 분리하였다. 유도 발현된 곤충에서 특이적으로 나타나는 cDNA 마커를 찾기 위해서 Arbitrary primer를 이용하여 특이하게 발현된 유전자(differentially expressed gene)를 선발하는 GeneFishing Technology를 이용하였고 그 결과 14개의 후보 cDNA 마커를 찾았다. 이들 마커 중 상동이 높은 노틴 유형(Knottin type)의 새로운 항진균(antifungal) 펩타이드의 부분 cDNA을 가지고 5'-RACE와 3'-RACE PCR방법을 사용하여 387bp정도의 전체길이의 cDNA(서열번호 1)를 얻을 수 있었다. 이 유전자의 cDNA는 전체 크기가 387bp이며, 103번째 염기에서 개시되어 283번째 염기 위치에서 종결되는 암호화 영역(open reading frame)을 가지고 있었다. 3' 말단부분의 염기서열에는 폴리(poly) A 염기를 포함하여 잠정 전사 종결신호인 'AAATAA'가 존재함을 확인할 수 있었고, cDNA의 ORF로부터 56개의 아미노산(서열번호 2)을 연역할 수 있었다. 상기의 항균펩타이드 유전자의 아미노산 서열 중 성숙 단백질은 34개의 아미노산(서열번호 3)으로 구성되어 있었다.
[실시예 2] 사코더아신 항균 및 항진균 펩타이드의 합성 및 분리 정제
상기 실시예 1에서 울도하늘소 유충에서 유래하는 항균 펩타이드 사코더아신Ⅰ을 합성 및 분리 정제하였다. 이때, 상기 사코더아신Ⅰ 펩타이드(서열번호 3)는 하기 표 1에 나타낸 바와 같다.
[표 1]
펩타이드 | 아미노산 서열(서열번호 3) |
사코더아신 Ⅰ | CIAKGNGCQPSGVQGNCCSGHCHKEPGWVAGYCK-NH2 |
먼저, 사코더아신Ⅰ 항균 및 항진균 펩타이드(서열번호 3)를 합성하기 위하여, 본 발명자들은 Fmoc 아미노기 보호용기를 이용한 메리필드(Merrifield)의 액상 고상법((Merrifield, RB., J. Am . Chem . Soc., 85, 2149, 1963)을 사용하여 항균 펩타이드를 제조하였다. 상기 항균 및 항진균 펩타이드 합성의 방법은 Fmoc(9-fluorenylmethoxycarbonyl)를 아미노산의 Nα-amino group의 보호기(protecting group)로 사용하는 고상법(solid phase method)으로 합성하였다. 구체적으로, 카르복실 말단이 -NH2 형태인 펩타이드는 Rink Amide MBHA-Resin을 출발물질로 사용하였으며, 카르복실 말단이 -OH 형태의 펩타이드는 Fmoc-아미노산-Wang Resin을 출발물질로 사용하였다. Fmoc-아미노산의 커플링(coupling)에 의한 펩타이드 사슬의 연장(elongation)은 N-hydroxybenzo-triazole(HOBt)-dicyclo-hexylcar-bodiimide (DCC)법에 의하였다. 각 펩타이드의 아미노 말단의 Fmoc-아미노산을 커플링 시킨 후, 20% 피페리딘/N-메틸피롤리돈(NMP) 용액으로 Fmoc기를 제거하고 NMP 및 디클로로메탄(DCM)으로 여러 번 씻어준 다음 질소 가스로 말렸다. 여기에 TFA (trifluoroacetic acid)-phenol-thioanisole-H2O-triisop-ropylsilane(85: 5: 5: 2.5: 2.5, vol./vol.) 용액을 가하고 3시간 동안 반응시켜 보호기의 제거 및 레진으로부터 펩타이드를 분리시킨 다음, 디에틸에테르로 펩타이드를 침전시켰다. 이렇게 하여 얻은 조(crude) 펩타이드는 0.1% TFA가 포함된 아세토니트릴 농도 구배(acetonitrile gradient)로 하여 정제형 역상-HPLC(reverse phase-HPLC) 컬럼(Delta Pak, C18 300Å, 15μ, 19.0㎜×30㎝, Waters)을 이용하여 정제하였다. 합성 펩타이드를 6N-HCl로 110℃에서 24시간 동안 가수분해한 후, 얻어진 잔사를 감압농축 한 뒤, 0.02 N-HCl에 녹여서 아미노산 분석기(Hitachi 8500 A)로 아미노산 조성을 측정하였다. 또한 합성된 펩타이드의 시퀀스(sequence)를 바탕으로 분자량을 계산하였고, MALDI 질량 분석법(matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometer)을 이용하여 정확한 분자량을 측정하였다. 그 결과 측정된 분자량과 계산된 분자량이 일치하므로 정확한 아미노산 서열을 가지는 항균 및 항진균 펩타이드(서열번호 3)가 합성되었음을 확인하였다.
[실시예 3] 사코더아신Ⅰ 항균 및 항진균 펩타이드(서열번호 3)의 병원성 미생물에 대한 항균 활성 조사
사코더아신Ⅰ 항균 및 항진균 펩타이드(서열번호 3)에 대한 항균 활성을 조사하기 위해 하기와 같이 수행하였다. 이때 꿀벌로부터 분리된 강력한 항균 펩타이드인 멜리틴(Melittin)을 본 실시예의 양성 대조구로 사용하였다. 본 실시예에서 항균 및 항진균 펩타이드(서열번호 3)는 -20℃에 보관하며, 멸균된 3차 증류수에 녹여서 사용하였다.
[항균 활성 측정]
항균 및 항진균 펩타이드(서열번호 3)의 항균 활성을 측정하기 위하여, 먼저 병원성 세균인 스태필로코쿠스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 앤테로코쿠스 파시움(Enterococcus faecium), 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes), 대장균 0-157(Escherichia coli 0-157), 슈도모나스 아루지노사(Pseudomonas aeruginosa)를 뮬러 힌톤(Mueller Hinton) 항균 활성 측정용 배지(소고기 추출 분말(Beef extract powder) 0.2%, 카제인의 산성 소화제(Acid digest of casein) 1.75%, 가용성 녹말(Soluble starch) 0.15%)로 1×106 세포/1mL의 균 수가 되도록 희석하여, 96-웰 플레이트에 100㎕씩 분주한 후, 항균 및 항진균 펩타 이드의 용액을 단계적으로 희석한 농도로 처리했다.
이어서, 37℃ 배양기에서 6시간 동안 진탕 배양을 하면서 ELISA 판독기 (reader)를 이용하여 620㎚의 파장 하에서 흡광도를 측정하여 최소 생육 저지농도 (MIC)를 측정하였으며, 얻어진 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
[항진균 활성 측정]
항균 및 항진균 펩타이드(서열번호 3)의 항진균 활성의 측정에는 병원성 진균인 캔디다 알비칸스(Candida albicans), 캔디다 파랍실로시스(Candida parapsilosis), 트리코스포론 베이겔라이(Trichosporon beigelii), 마라세지아 펄펄(Malassezia furfur)를 YPD 완전배지(포도당 2%, 펩톤(peptone) 1%, 효모 추출물(yeast extract) 0.5%, pH 5,5)에 배양하였다. 또한 YPD 액체 배지로 2×103 세포/1mL의 균수가 되도록 희석하여, 96-웰 플레이트에 100㎕씩 분주한 후, 항균 및 항진균 펩타이드의 용액을 단계적으로 희석한 농도로 처리했다.
이어서 28℃ 배양기에서 24시간 동안 진탕 배양한 후, MTT[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide] 용액 [5mg of MTT/mL of PBS (pH 7.4)]을 각각의 웰에 넣고, 37℃ 배양기에서 4시간 동안 배양하였다. 이어서 MTT에 의하여 생성된 포르마잔(Formazan)을 용해하기 위해 0.02 N-HCl이 포함된 20% SDS를 20㎕를 넣은 후, 37℃에서 16시간 반응시켰다.
다음으로 ELISA 판독기로 570nm의 파장 하에서의 각 웰의 흡광도를 측정하여 최소 생육 저지농도 (MIC)를 측정하였으며, 얻어진 결과를 하기 표 2에 나타내었 다.
[표 2] 사코더아신Ⅰ 항균 및 항진균 펩타이드(서열번호 3)의 병원성 미생물에 대한 최소 생육 저지 농도(MIC)
|
병원성 미생물에 대한 MICa(μM) | ||
사코더아신 Ⅰ 펩타이드 | 멜리틴(Melittin) | ||
그램 양성 세균 |
스태필로코쿠스 아우레우스 | 25 | 1.56 |
앤테로코쿠스 파시움 | 25 | 1.56 | |
프로피오니박테리움 아크네스 | 12.5 | 0.78 | |
그램 음성세균 | 대장균 0-157 | 12.5 | 0.78 |
슈도모나스 아루지노사 | 25 | 1.56~3.125 | |
진균 |
캔디다 알비칸스 | 12.5 | 3.125 |
캔디다 파랍실로시스 | 6.25 | 3.125 | |
트리코스포론 베이겔라이 | 6.25~12.5 | 1.56~3.125 | |
마라세지아 펄펄 | 12.5 | 1.56 | |
[주] a: 병원성 미생물의 생육이 전혀 안 되는 항균 펩타이드의 농도 |
[항균 활성]
상기 표 1을 참조하면, 사코더아신Ⅰ 펩타이드(서열번호 3)의 항균 활성은 그람 양성균과 음성균을 포함한 넓은 범위의 병원성 세균에서 항균 활성을 가짐을 알 수 있다. 또한 이때 최소 생육 저지 농도(MIC)는 대부분 12.5~25μM으로, 강력한 항균 펩타이드인 멜리틴보다 조금 약한 항균 활성을 나타냄을 확인할 수 있었다.
[항진균 활성]
상기 표 1을 참조하면, 사코더아신Ⅰ 펩타이드(서열번호 3)의 항진균 활성 측정의 결과, 병원성 진균에 대해서 6.25~12.5μM의 최소 생육 저지 농도(MIC)를 나타내었다. 이는 대조군인 사용된 강력한 항진균제인 멜리틴보다 조금 약한 항진균 활성으로 항균 펩타이드가 강력한 항진균 활성을 나타냄을 의미한다.
[실시예 4] 사코더아신Ⅰ 항균 및 항진균 펩타이드(서열번호 3)의 인간 적혈구 세포에 대한 세포 독성 측정
인간 적혈구 세포에 대한 세포 독성의 측정은 다음과 같이 실시하였다.
적혈구 세포(Human erythrocytes)를 인산-염화나트륨 완충액, pH 7.4(PBS)로 세 번 세척한 후, 인산-염화나트륨 완충액으로 희석하여, 8.0%의 적혈구 세포 용액을 제조하였다. 그런 후, 8.0% 적혈구 세포 용액을 96-웰 플레이트에 100㎕씩 분주한 후에 항균 및 항진균 펩타이드의 단계적으로 희석한 용액을 섞어주었다.
이어서 모든 웰 에 총액의 양이 200㎕가 되도록 생리 식염수(Saline 0.85 % NaCl)을 넣어주고, 37℃ 배양기에서 1시간 동안 배양하였다. 상기 배양이 끝난 후, 원심 분리기에서 1000rpm의 회전 속도로 10분간 원심 분리하여 상등액을 옆 웰로 옮겼다.
적혈구 세포에 대한 파괴능은 ELISA 판독기로 414nm의 파장 하에서의 흡광도를 측정하여 파괴능을 분석하였다. 그리고 대조군으로 0.1% 트리톤 X-100으로 처리하였을 경우의 값을 100% 파괴능으로 계산하였으며, 적혈구 세포만을 넣은 경우를 0% 파괴능으로 계산하였다. 이때 항균 및 항진균 펩타이드(서열번호 3)의 파괴능은 하기 수학식 1에 의하여 계산하였으며, 얻어진 결과를 하기 표 3에 나타내었다.
[수학식 1]
% 파괴능 = (노틴 유형(Knottin type) 펩타이드를 처리한 용액의 흡광도 414nm - 인산-염화나트륨 완충액의 흡광도 414nm)/(트리톤 X-100을 처리한 용액의 흡광도 414nm - 인산-염화나트륨 완충액의 흡광도 414nm) * 100.
[표 3] 인간 적혈구 세포(Human erythrocytes)에 대한 사코더아신Ⅰ항균 및 항진균 펩타이드(서열번호 3)의 세포 독성의 측정
|
% 인간 적혈구 파괴능a(μM) | |||||
100 | 50 | 25 | 12.5 | 6.25 | 3.125 | |
사코더아신 Ⅰ펩타이드 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
멜리틴 | 100 | 100 | 100 | 92 | 85 | 79 |
[주] a: 인간에 대한 세포 독성은 인간 적혈구 세포에 대한 항균 펩타이드의 파괴능으로 측정 |
상기 표 3을 참조하면, 사코더아신Ⅰ 항균 및 항진균 펩타이드(서열번호 3)는 모든 농도에서 세포 독성을 나타내지 않음을 확인할 수 있었다. 그에 비해 강력한 항균 펩타이드인 멜리틴의 경우에는 낮은 농도에서도 세포 독성이 매우 높게 나타냄을 확인 할 수 있었다. 이러한 결과는 본 발명에서 발견된 항균 펩타이드(서열번호 3)는 인간의 신체에 피해 없이 인간에 대해 사용할 수 있음을 의미한다.
도 1은 면역 유도된 울도하늘소유충에서 분리한 항균펩타이드 유전자의 전체 cDNA 염기서열(서열번호 1) 및 연역된 아미노산 서열(서열번호 2)을 나타낸 것이다.
<110> Republic of Korea
<120> Antimicrobial and antifungal peptide isolated from the larvae of
Psacothea hilaris and its synthetic peptide
<160> 3
<170> KopatentIn 1.71
<210> 1
<211> 387
<212> DNA
<213> Psacothea hilaris
<400> 1
gtagtgattc gcggatcctg acgctgcgtt tgctggcttt gatgaaaact tatttcaaca 60
agccgattta tcaaataacc tctttatcta ccaactcatc aaaatgaaat tcttcagtat 120
tttcttcatg gttgttcttg cacttcttgg tctgcaagac gcaaccgctt gcattgctaa 180
agtaatggct gccaacctag cggagttcaa ggcaactgtt gttcaggaca ctgtcacaag 240
gaaccaggct gggtagctgg ttactgcaaa tgatttaccc aactggctta ttggatttat 300
gtacccatat gtttttgtct ctctgttgtt tatcatgaat atataaaaat aataaaaaaa 360
tgtaactgta aaaaaaaaaa aaaaaaa 387
<210> 2
<211> 56
<212> PRT
<213> Psacothea hilaris
<400> 2
Met Lys Phe Phe Ser Ile Phe Phe Met Val Val Leu Ala Leu Leu Gly
1 5 10 15
Leu Gln Asp Ala Thr Ala Cys Ile Ala Lys Gly Asn Gly Cys Gln Pro
20 25 30
Ser Gly Val Gln Gly Asn Cys Cys Ser Gly His Cys His Lys Glu Pro
35 40 45
Gly Trp Val Ala Gly Tyr Cys Lys
50 55
<210> 3
<211> 34
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> synthetic peptide
<400> 3
Cys Ile Ala Lys Gly Asn Gly Cys Gln Pro Ser Gly Val Gln Gly Asn
1 5 10 15
Cys Cys Ser Gly His Cys His Lys Glu Pro Gly Trp Val Ala Gly Tyr
20 25 30
Cys Lys
Claims (4)
- 서열번호 1로 표현되는, 울도하늘소(Psacothea hilaris ) 유충에서 분리한 항균 및 항진균 펩타이드의 유전자.
- 서열번호 2로 표현되는, 울도하늘소(Psacothea hilaris ) 유충에서 분리한 항균 및 항진균 펩타이드의 유전자(서열번호 1)에서 연역된 아미노산.
- 서열번호 3으로 표현되는, 울도하늘소(Psacothea hilaris ) 유충에서 분리한 항균 및 항진균 펩타이드의 유전자에서 합성된 펩타이드(사코더아신 Ⅰ).
- 서열번호 3으로 표현되는, 울도하늘소(Psacothea hilaris ) 유충에서 분리한 항균 및 항진균 펩타이드의 유전자에서 합성된 펩타이드(사코더아신 Ⅰ)를 유효성분으로 하는 항균 및 항진균 제제용 약물 조성물.
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