KR101856602B1 - 왕귀뚜라미 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화 조성물 - Google Patents
왕귀뚜라미 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 왕귀뚜라미(Teleogryllus emma) 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 국내 토착종 귀뚜라미인 왕귀뚜라미의 추출물 및 이의 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 약학적 조성물, 건강 기능 식품 및 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 항산화 조성물의 유효성분으로서의 왕귀뚜라미 추출물 및 이의 에틸아세테이트 분획물은, 본 명세서의 실시예를 통해 증명된 바와 같이, 다양한 활성 라디칼에 대해 강력한 소거능을 가지며, 특히, 상기 에틸아세테이트 분획은 활성 음이온, 활성 양이온, nitrite에 대해 매우 강력한 소거능을 나타내며, 우수한 환원력을 동시에 나타낸다. 상기 유효성분은 추출액, 분말, 환, 정 등의 다양한 형태로 가공되어 항산화성 식품, 건강 기능 식품, 약학 조성물, 또는 의약품 첨가제 등의 용도에 적용되기에 매우 유용한 발명이다.
Description
본 발명은 왕귀뚜라미(Teleogryllus emma) 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 국내 토착종 귀뚜라미인 왕귀뚜라미의 추출물 및 이의 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 약학적 조성물, 건강 기능 식품 및 화장료 조성물에 관한 것이다.
산소 호흡을 하는 인체는 산화적 스트레스를 피할 수 없으며, 이러한 산화적 스트레스는 활성화된 산소종(reactive oxygen species)의 축척에 의해 나타나게 된다. 즉, 유기물의 대사과정 중 최종 전자수용체와 산소가 반응하여 물(H2O)로 전환되는 경우 세포독성이 나타나지 않지만, 비정상적인 반응에 의해 과산화수소(H2O2), 슈퍼옥사이드(O2·), 하이드록시 레디칼(OH·) 등이 생성되면, 활성화된 산소종들은 세포 내 높은 라디칼 농도를 유지시켜 단백질 또는 DNA의 손상을 유발하고, 다양한 산화적 스트레스를 유발하여 결국 세포 구조가 손상되고 세포의 기능을 잃거나 변질된다(Choi et al.. 2008. J. Korean Soc. Food Sci. Nutr. 37: 276-281). 또한, 최근의 연구결과는 심혈관계 질환과 관련된 혈전 생성에 산화적 스트레스가 직접 관련되어 있으며(Bijak M 등, 2012, Thrombosis Res. 130, 123-128), 산화적 스트레스에 의한 혈관내 fibrinogen의 구조적 변화가 혈전 생성을 촉진하여 혈류 흐름을 저해하여 혈전증을 유발할 수 있음이 알려져 있다(Martinez M 등, 2013. Free Radical Biol. Med. 65, 411-418). 실제 최근의 보고에 따르면 생체내의 산화적 스트레스는 발암, 노화, 치매, 염증 및 다양한 심혈관계 질병과 연관되어 있음이 확인되고 있다(Zhang et al., 2013. Chines J. Cancer biotheraphy, 20. 153-158; 조민현, 2014. J. Korean Soc. Pediatr. Nephrol. 18: 7-12: 신정희 외, 2012. 한국산학기술학회논문지 13: 3561-3569). 따라서, 안정성이 확보되면서, 다양한 활성 라디칼을 제거할 수 있는 천연물 성분은 건강상 상당한 도움을 기대할 수 있다고 판단된다.
현재까지, 다양한 활성 산소종 및 라디칼 물질들을 소거할 수 있는 다양한 물질들이 항산화제로 개발되어 있으며, 대표적으로 vitamin C, vitamin E, BHT(butylated hydroxy toluene) 및 BHA(butylated hydroxy anisole)등이 식품 첨가물, 건강기능식품 및 의약품으로 이용되고 있다. 그러나, 강력한 항산화력을 나타내는 화학합성 항산화제인 BHT 및 BHA의 부작용들이 보고(하현주 등, 2014. Korean J. Culinary Res. 20: 16-26; Choe and Yang, 1982. Korean J. Food Sci. Technol. 14: 283-288)되면서 화학합성 항산화제를 대치할 수 있는 강력한 천연물 항산화제 개발이 필요하게 되었으며, 특히, vitamin C와 같이 열에 약하며 매우 불안정한 물질들을 대치할 수 있는 내열성이 우수한 천연 항산화제 개발이 절실한 상태이다(Ahn et al., 2009. Korean J. Microbiol. Biotechnol. 37: 266-272; Kim et al., 2009. Korean J. Microbiol. Biotechnol. 37: 133-139).
한편, 귀뚜라미는 절지동물 메뚜기목 귀뚜라미과에 속하며, 전 세계 1,200여종이 존재하며 국내에는 약 30여종이 알려져 있다. 그중에서, 왕귀뚜라미(Teleogryllus emma)는 한국을 포함하는 동아시아에서 주로 서식하는 귀뚜라미로, 현재 외국에서 수입되어온 쌍별귀뚜라미와 달리 사계절이 뚜렷하고 겨울이 존재하는 우리나라의 기후에 적응한 국내 토착종이다. 몸은 광택이 나는 갈색이거나 흑갈색이며, 정수리는 앞쪽으로 갈수록 좁아진다. 겹눈의 안쪽은 노란색으로 둥근 얼굴의 흰색 가로띠와 이어져 있고, 더듬이는 가늘고 길어 실처럼 보인다. 앞가슴 등판은 머리보다 약간 좁고, 앞·뒤 양 가장자리의 테두리는 약간 뒤쪽으로 가면서 좁아지고 구부러져 있으며, 중앙은 약간 굵고 표면은 넓적하며 옆 조각의 앞모는 둥글고 연한 노란색 무늬가 있다. 국내에서는 정원과 주변 풀밭, 습기가 많고 어두운 창고와 화장실, 인가 등에서 흔히 발견되며, 귀뚜라미 종류 중에서 가장 흔하게 볼 수 있다. 한편, 2016년 국내에서 식용으로 등록된 쌍별귀뚜라미는 메뚜기목 귀뚜라미과의 곤충으로 아열대 지역에 서식하는 귀뚜라미로서 국내로 수입되어 식용, 약용, 애완용, 사료용, 교육용으로 사육되고 있는 곤충이다. 특히, 몸은 전체적으로 검고, 앞날개 기부에 노란 점이 있기 때문에 영어로 'two-spotted cricket', 우리말로는 쌍별귀뚜라미로 불린다.
현재 국내외 연구는 쌍별귀뚜라미에 집중되어 있으며, 왕귀뚜라미 연구는 매우 미진한 상태이다. 왕귀뚜라미에 관한 연구로는 왕귀뚜라미(Teleogryillus emma)알의 실내 인공 채란 및 저장(김남정 외, 2005. 한국응용곤충학회지, 44, 61-65), 왕귀뚜라미의 대량사육을 위한 인공먹이 개발(김남정 외, 2003. 한국응용곤충학회 2003년도 추계 학술발표회 p. 68-68) 및 왕귀뚜라미의 우수한 항염증 활성(황재삼 외;, 2015. 곤충 유용물질의 피부친화성 및 항염증 메카니즘 구명, 국립농업과학원) 등이 알려져 있으며, 왕귀뚜라미와 쌍별귀뚜라미의 비교 연구로 외래종 쌍별귀뚜라미(Gryllus bimaculatus)가 토착종 왕귀뚜라미(Teleogryllus emma)의 생존율에 미치는 영향(이은아 외, 2013. 생태와 환경, 46, 67-74), 2종의 귀뚜라미(Gryllus bimaculatus, Teleogryllus emma) 추출물의 면역 활성능 비교(서동환 외, 2003. 한국잠사학회 2003년도 제46회 춘계 학술연구 발표회 p.79)가 알려져 있을 뿐, 현재까지 왕귀뚜라미의 항혈전 활성에 대한 보고는 없는 실정이다.
한편, 쌍별귀뚜라미 연구로는 쌍별귀뚜라미의 사육밀도가 섭식량, 성충사망률 및 부화 약충수에 미치는 영향(박영규 외, 2013. 한국잠사곤충학회지 51, 89-94)이 보고되어 있으며, 사료 및 식용화를 위해 귀뚜라미 첨가 사료가 계육과 계란의 성분에 미치는 영향(안미영 외, 2000. 한국가금학회지 27, 197-202), 산지별 식용 귀뚜라미의 이화학적 특성(김은미 외, 2015. 한국식품저장유통학회지, 22, 831-837) 및 랫드에서 귀뚜라미 추출물을 반복투여한 경우 독성이 없음이 보고(황석연 외, 2004. 한국실험동물학회지 20, 194-199)되어 있다. 쌍별귀뚜라미의 유용 생리활성으로는 귀뚜라미의 물 및 메탄올 추출물이 알코올 대사에 미치는 효과(이용우 외, 2004. 생약학회지 35, 175-178), 귀뚜라미의 수용성 및 알콜 추출물의 간보호 효과(안미영 외, 2002, 한국식품과학회지 34, 684-687), TCDD(2, 3, 7, 8-Tetrachlorodibenzo-p-dioxin)에 의해 유발된 Rat의 간독성에 대한 귀뚜라미 추출물의 예방효과(박종배, 2004. 대전대학교 석사논문), 귀뚜라미를 사료로 첨가시 African catfish의 항산화 효소 활성 증대 및 생육속도 증대효과가 알려져 있으나(Taufek 외, 2016. Fish Physiol Biochem. 42, 1143-1155), 현재까지 쌍별귀뚜라미의 항혈전 효과도 알려진 바는 없다.
그러나, 메뚜기의 다양한 종에 대한 항산화 활성 결과는 부분적으로 알려져 있는데, 박 등은 탈귀뚜라미(Velarifictorus aspersus) 추출물에서는 항산화 활성이 없다고 보고(박자영 외, 2005. 약용곤충추출물 라이브러리를 이용한 항산화 활성의 초고속 검색, 한국식품저장유통학회지 12, 482-488)한 바 있으며, 반면, 섬서구 메뚜기, 벼메뚜기, 끝검은 메뚜기 용매 추출물에서 항산화 활성을 확인하였다고 보고하였다(박자영 외, 2006. 메뚜기류 추출물의 염증조절작용 및 세포사멸보호 효과, 한국식품저장유통학회지 12, 482-488). 그러나, 상기 메뚜기류에서 실제 사용한 시료농도와 활성 정도를 평가할 수 있는 자료는 제시되어 있지 않다. 한편, 김 등 역시 벼메뚜기에서항산화 활성을 보고한 바 있으나(김현진 외, 벼메뚜기의 한산화효과와 항균활성, 한국잠사곤충학회지, 2015. 53, 130-134), 실제 사용한 시료농도와 활성 정도를 평가할 수 있는 자료는 제시되어 있지 않다. 그러나, 현재까지 국내 토착종이면서 가장 흔하게 발견되는 왕귀뚜라미의 항산화 효과에 대한 보고는 전무한 실정이다.
또한, 왕귀뚜라미에 대한 특허는 전무한 상태이며, 쌍별귀뚜라미에 대해서는 대한민국 등록특허 제10-1661176호에 [식품용 귀뚜라미 원료의 제조방법 및 이에 따라 제조된 식품용 귀뚜라미 원료], 제10-1493916호에는 [곤충의 식용화 방법, 그 식용화된 곤충, 이러한 식용화된 곤충을 이용한 식품용 반죽의 제조방법], 제10-1686179호에는 고혈압 예방에 효과적인 [산화질소를 생성하는 아르기닌 함유가 증진된 귀뚜라미]가 알려져 있으며, 쌍별귀뚜라미의 용도와 관련하여, 제10-1429679호에 [귀뚜라미 추출물을 함유하는 피부미백용 화장료 조성물]이, 제10-1660381호에는 혈관신생 억제능 또는 혈관확장반응의 기능장애에 의한 질환 치료효과를 가지는 [곤충 N-글라이칸 및 이의 용도]가 등록되어 있으며, 공개특허 제10-2013-0134097호에는 [귀뚜라미 추출물을 함유하는 피부염증 예방 또는 치료용 조성물], 제10-2014-0036369호에는 [건조귀뚜라미를 이용한 펠렛 사료 제조방법], 제10-2016-0128113호에는 [식용곤충을 이용한 김 가공식품 제조방법], 제10-2016-0118860호에는 [분말 혼합물 및 곤충 국수]가 공개되어 있다. 또한, 국내 등록실용실안 제20-0477102호에는 [귀뚜라미 산란 및 부화기구]가, 제20-0477103호에는 [귀뚜라미 대량 포집기]가 등록되어 있다. 그러나, 귀뚜라미, 특히, 왕귀뚜라미의 항혈전 활성에 대한 보고는 전혀 없는 실정이다.
박자영 외, 2005. 약용곤충추출물 라이브러리를 이용한 항산화 활성의 초고속 검색, 한국식품저장유통학회지 12, 482-488
본 발명은 상기와 같은 종래 기술의 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 본 발명에서 해결하고자 하는 과제는 왕귀뚜라미 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 약학적 조성물, 건강 기능 식품 및 화장료 조성물을 제공하고자 하는 것이다.
상기와 같은 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 왕귀뚜라미(Teleogryllus emma) 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 왕귀뚜라미 추출물은 왕귀뚜라미 에탄올 추출물인 것이 바람직하다.
상기 왕귀뚜라미 에탄올 추출물은 왕귀뚜라미 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물인 것이 바람직하다.
또한, 본 발명은 왕귀뚜라미(Teleogryllus emma) 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 건강 기능 식품을 제공한다.
또한, 본 발명은 왕귀뚜라미(Teleogryllus emma) 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 항산화 조성물의 유효성분으로서의 왕귀뚜라미 추출물 및 이의 에틸아세테이트 분획물은, 본 명세서의 실시예를 통해 증명된 바와 같이, 다양한 활성 라디칼에 대해 강력한 소거능을 가지며, 특히, 상기 에틸아세테이트 분획은 활성 음이온, 활성 양이온, nitrite에 대해 매우 강력한 소거능을 나타내며, 우수한 환원력을 동시에 나타낸다. 상기 유효성분은 추출액, 분말, 환, 정 등의 다양한 형태로 가공되어 항산화성 식품, 건강 기능 식품, 약학 조성물, 또는 의약품 첨가제 등의 용도에 적용되기에 매우 유용한 발명이다.
도 1은 본 발명에서 사용된 왕귀뚜라미를 나타낸 것이다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명의 발명자들은 왕귀뚜라미를 대상으로 항산화 효능을 검정하기 위하여, 먼저 25℃의 사육상자에서 밀기울과 어분을 혼합한 사료를 공급하여 왕귀뚜라미를 성충으로 사육한 후, 날개를 제거한 후 24시간 절식 및 자연 배변을 유도하고, 이후 -20℃로 급속냉동하여 사멸시킨 다음 -50℃에서 동결건조하였으며, 이후 막자사발을 이용하여 왕귀뚜라미 분말을 제조하였다. 이후, 제조분말을 이용하여 에탄올 추출물을 조제하고, 상기 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 항산화 활성 성분으로 회수하였으며, 상기 에틸아세테이트 분획물은 인간 적혈구에 대해 용혈 활성은 전혀 나타내지 않으면서도, 열 안정성과 산 안정성이 우수한 특징을 가짐을 확인함으로써 상기 왈귀뚜라미 추출물 및 이의 에틸아세테이트 분획물을 항산화 조성물로 활용하고자 하였다.
구체적으로, 본 발명자들은 항염증, 간 보호, 항고혈압 효과가 있다고 알려진 왕귀뚜라미를 이용하여 항산화 조성물을 개발하기 위하여, 왕귀뚜라미를 대상으로 에탄올 추출물을 조제하고, 이들 추출물들을 대상으로 순차적 유기용매 분획물을 조제한 후, 이를 다양한 활성 라디칼에 대해 소거능을 평가한 결과, 왕귀뚜라미 추출물 및 이의 에틸아세테이트 분획물에서 강력한 항산화 활성을 나타냄을 확인하였다. 특히, 왕귀뚜라미 에탄올 추출물은 0.5mg/ml 농도에서 DPPH 음이온 소거능, ABTS 양이온 소거능, nitrite 소거능 및 환원력 평가 결과 각각 68.3%, 62.1%, 20.6% 및 0.337을 나타내어 상대적으로 nitrite 소거능과 환원력이 미약하였으나, 왕귀뚜라미 추출물의 에틸아세테이트 분획물은 0.5mg/ml 농도에서 DPPH 음이온 소거능, ABTS 양이온 소거능, nitrite 소거능 및 환원력 평가 결과 각각 59.3%, 68.4%, 76.5% 및 0.380을 나타내어 다양한 라디컬 소거능이 모두 우수하며 환원력도 우수한 것으로 확인되었다. 또한, 상기의 에틸아세테이트 분획물은 인간 적혈구에 대한 용혈활성을 나타내지 않아 급성독성을 유발하지 않음을 확인하였다.
이하에서는, 본 발명의 왕귀뚜라미 추출물 및 항산화 활성 분획물의 제조 방법 및 효능 실험 등을 보다 구체적으로 설명한다.
본 발명의 발명자들은 본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 왕귀뚜라미를 사육하는 단계; 성충의 전처리 및 동결건조 단계; 성충의 분말화 단계; 왕귀뚜라미 추출물을 조제하는 단계; 왕귀뚜라미 추출물로부터 헥센, 에틸아세테이트, 부탄올의 순차적 유기용매 분획물 조제 및 이후 얻어지는 물 잔류물의 조제 단계; 상기 추출물 및 분획물의 항산화 활성 평가 단계 및 에틸아세테이트 분획물의 활성물질의 안정성 조사 단계의 실험들을 수행하였다.
본 발명의 조성물에 포함되는 "왕귀뚜라미 사육단계"는 통상의 곤충 사육과 동일한 방법을 사용하며 25℃의 사육상자에서 밀기울과 어분을 혼합한 사료를 공급하여 왕귀뚜라미를 성충으로 사육하는 단계, 이후 성충의 날개를 제거한 후 24시간 절식 및 자연 배변을 유도하고 -20℃로 급속냉동하여 사멸시킨 다음 -50℃에서 동결건조하는 단계, 동결건조 성충을 막자사발을 이용하여 분말로 제조하여 용매로 추출하는 단계 및 상기 추출액을 0.06mm 이하의 여과망을 사용하여 여과하고, 이를 감압농축하는 단계에 의해 수득될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용매는 물(냉수, 열수), 주정, 탄소수 1~4의 무수 또는 함수 저급 알코올(메탄올, 에탄올, 주정, 프로판올, 부탄올 등), 상기 저급 알코올과 물과의 혼합용매, 헥센, 에틸아세테이트, 부탄올 등의 다양한 유기용매 등을 이용할 수 있으며, 열수, 또는 95% 에탄올 추출이 가장 바람직하다. 바람직한 구체예로서, 본 발명의 왕귀뚜라미를 열수 또는 에탄올로 추출할 수 있다. 또한, 상기 열수 또는 에탄올 추출물은 헥센, 에틸아세테이트 및 부탄올의 유기용매로 순차 또는 각각 분획하여 헥센 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물 및 물 잔류물을 추가적으로 수득할 수도 있다.
본 발명에서는, 왕귀뚜라미 에탄올 추출물과 이의 순차적 유기용매 분획물을 대상으로 0.5mg/ml 농도에서 다양한 라디칼 소거능과 환원력을 평가한 결과, DPPH 음이온 소거능은 에탄올 추출물에서, ABTS 소거능, nitrite 소거능 및 환원력은 에틸아세테이트 분획물에서 가장 우수함을 확인하였다. 현재 상업적으로 사용되고 있는 vitamin C에 비해 항산화력은 약하게 나타났으나, 우수한 내열성과 내산성, 혈장 안전성을 나타내어 향후 다양한 식품 및 화장품 등의 용도로 개발 가능함을 제시하고 있다.
본 발명의 왕귀뚜라미 추출물 및 이의 에틸아세테이트 분획물은 감압건조 및 동결건조, 또는 분무건조 등과 같은 통상적인 분말화 과정을 거쳐 분말로 제조될 수 있다. 이들은 혈장 내의 다양한 분해효소에 분해되지 않으며, 100℃의 열처리와 pH 2의 인체 위 내의 pH에서도 활성을 유지한다.
본 발명의 왕귀뚜라미 추출물, 바람직하게는 왕귀뚜라미 에탄올 추출물, 및 이의 에틸아세테이트 분획물은 강력한 항산화 활성을 나타내어 산화적 스트레스와 관련된 각종 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물, 건강 기능 식품 및 화장료 조성물의 소재로 사용될 수 있다.
상기 산화적 스트레스와 관련된 각종 질환은 비만증, 고혈압, 당뇨병, 동맥경화증, 간질환, 폐질환, 갑상선 기능항진증, 갑상선 기능 저하증, 만성피로증후군, 심장병, 고지혈증, 중풍, 신장질환, 통풍, 암, 노화 및 신경퇴행성 질환을 포함한다.
본 발명의 약학적 조성물은 각각의 사용 목적에 맞게 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁제, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구 제형, 멸균 주사용액의 주사제 등 다양한 형태로 제형화하여 사용할 수 있으며, 경구 투여하거나 정맥 내, 복강 내, 피하, 직장, 국소 투여 등을 포함한 다양한 경로를 통해 투여될 수 있다. 이러한 약학적 조성물에는 추가적으로 담체, 부형제 또는 희석제 등이 더 포함될 수 있으며, 포함될 수 있는 적합한 담체, 부형제 또는 희석제의 예로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리쓰리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 비정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 들 수 있다. 또한, 본 발명의 약학적 조성물은 충전제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제, 방부제 등을 추가로 더 포함할 수도 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에서, "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
바람직한 구체예로서, 본 발명의 약학적 조성물에서 항산화 활성이 우수한 왕귀뚜라미 추출물 또는 에틸아세테이트 분획물의 유효량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 당 1 내지 5,000mg, 바람직하게는 100 내지 3,000mg을 매일 또는 격일 투여하거나 1일 1 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나, 투여 경로, 질병의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다. 본 발명의 약학적 조성물은 다양한 경로를 통하여 대상에 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관 내(intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다. 본 발명에서 "투여"는 임의의 적절한 방법으로 환자에게 소정의 물질을 제공하는 것을 의미하며, 본 발명의 약학적 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 일반적인 모든 경로를 통하여 경구 또는 비경구 투여될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 유효성분을 표적 세포로 전달할 수 있는 임의의 장치를 이용해 투여될 수도 있다. 본 발명에서 "대상"은, 특별히 한정되는 것은 아니지만, 예를 들어, 인간, 원숭이, 소, 말, 양, 돼지, 닭, 칠면조, 메추라기, 고양이, 개, 마우스, 쥐, 토끼 또는 기니아 피그를 포함하고, 바람직하게는 포유류, 보다 바람직하게는 인간을 의미한다.
또한, 본 발명의 건강 기능 식품은 산화적 스트레스와 관련된 각종 질환의 개선에 효과적인 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있다.
본 발명의 항산화 활성이 우수한 왕귀뚜라미 추출물 또는 에틸아세테이트 분획물을 포함하는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있고, 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다.
본 발명의 활성 분획물은 일반적으로 전체 식품 중량의 0.01 내지 15중량%로 가할 수 있으며, 건강음료 조성물은 100 ml를 기준으로 0.02 내지 10g, 바람직하게는 0.3 내지 1g의 비율로 가할 수 있다. 본 발명의 건강 기능 식품은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 화합물을 함유하는 것 외에 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제, 예컨대, 천연 탄수화물 및 다양한 향미제 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
상기 천연 탄수화물의 예로는 포도당, 과당 등의 단당류, 말토오스, 수크로오스 등의 이당류 및 덱스트린, 시클로덱스트린 등의 다당류와 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리쓰리톨 등의 당알코올이 있다. 상기 향미제로는 타우마틴, 레바우디오시드 A, 글리시르히진, 사카린, 아스파르탐 등을 사용할 수 있다. 상기 향미제의 비율은 본 발명의 건강 기능 식품 100ml당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g을 사용한다. 상기 외에 본 발명의 건강 기능 식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물, 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.
그 밖에 본 발명의 건강 기능 식품은 천연 과일 주스 및 과일 주스 음료 및 야채 음료 등의 제조를 위한 과육을 함유할 수도 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 본 발명의 상기 활성 분획물 100 중량부 당 0.01 내지 약 20중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
본 발명의 항산화 활성이 우수한 왕귀뚜라미 추출물 또는 에틸아세테이트 분획물은 항산화용 기능성 화장료 조성물로서 사용될 수 있다.
상기 항산화 기능성 화장료 조성물은 주름 개선, 피부 노화 억제, 주근깨 예방, 잡티 생성 억제의 용도일 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 유효성분은 조성물 총 중량에 대해 0.01 내지 50중량%로 포함될 수 있으며, 바람직하게는 0.1 내지 20중량%, 더욱 바람직하게는 1 내지 10중량%이다. 이러한 함량 범위에서 적절한 제형 안정성을 확보할 수 있으며, 목적하는 항산화 효과를 기대할 수 있다.
본 발명의 상기 조성물은 본 발명의 항산화 활성이 우수한 왕귀뚜라미 추출물 또는 에틸아세테이트 분획물 외에도 본 발명의 유효 활성을 저해하지 않는 범위에서 항산화, 피부 노화 방지 및 피부 재생 촉진의 효과를 위한 공지의 천연물 추출물이나 기타 성분을 추가로 포함시켜 이용할 수 있다.
또한, 상기 조성물은 화장료 조성물에 통상적으로 첨가되는 성분들, 예를 들면, 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제와 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제나 담체를 포함하여 특정 제형으로 성형될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들면, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 팩, 비누, 계면활성제-함유 클린징, 오일 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 구체적으로는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이, 파우더, 팩트, 립글로즈, 립스틱, 섀도우, 샴푸 및 린스 등의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히, 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대, 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
이하, 본 발명의 구체적인 방법을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 하기 실시예는 본 발명의 바람직한 하나의 구체예일뿐이며, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예의 범위로 한정되는 것은 아니다.
[
실시예
]
실시예
1: 왕귀뚜라미 사육, 절식, 동결건조 및 분말 조제
귀뚜라미는 잡식성으로 사육이 용이하며, 대량사육 시스템이 이미 확립되어 있다. 국내에서는 2005년부터 농진청에서 애완용 곤충 왕귀뚜라미 사육법을 전파하여 애완곤충으로도 자리잡고 있으며(2005년 3월 28일 농촌진흥청 보도자료), 다양한 파충류의 먹이사료로 사육되어 폭넓게 이용되고 있는 실정이다. 본 실시예에서는 왕귀뚜라미 사육을 위해 25℃의 사육상자에서 밀기울과 어분을 혼합한 사료를 충분히 공급하며, 8개월 이상 사육하여 왕귀뚜라미 성충으로 사육하였다(도 1). 이후 성충의 날개를 제거한 후 24시간 절식 및 자연 배변을 유도하고 -20℃로 급속냉동하여 사멸시킨 다음 -50℃에서 동결건조하였으며, 동결건조물을 막자사발을 이용하여 분말로 제조하였다.
한편, 대조구로 시판 쌍별귀뚜라미를 상기와 같이 절식, 배변유도, 동결건조 및 분말을 제조하였으며, 귀뚜라미의 대조구로는 갈색거저리(밀웜) 유충의 동결건조 분말을 이용하였다.
실시예
2: 왕귀뚜라미 분말의
영영성분
분석
실시예 1에서 제조된 왕귀뚜라미, 쌍별귀뚜라미, 갈색거저리 분말을 이용하여 영양성분을 분석하였다. 단백질, 조지방, 조탄수화물 및 조회분 함량을 식품공전에서 정한대로 평가하였다.
그 결과, 표 1에 나타낸 바와 같이, 왕귀뚜라미는 쌍별귀뚜라미와 유사한 조단백질, 조탄수화물 함량을 보였으나, 조지질 함량은 약 2.12배, 조회분 함량은 0.74배로 나타났다. 반면, 왕귀뚜라미는 최근 각광받고 있는 갈색거저리 유충 분말과 비교시 조지질 함량은 0.73배로 적었으나, 조탄수화물과 조회분 함량은 1.66배 및 1.77배로 높게 나타났다. 따라서, 향후 왕귀뚜라미를 다양한 용도의 영양식품으로 개발 가능함을 알 수 있다.
실시예
3: 왕귀뚜라미 추출물 제조 및 추출물의 성분 분석
실시예 1에서 제조된 왕귀뚜라미, 쌍별귀뚜라미, 갈색거저리 분말을 대상으로 에탄올 추출물을 제조하였다. 이때, 각각의 곤충 시료에 대해 10배의 에탄올을 가하고, 상온에서 2회 반복 추출한 후 추출액을 모아 필터링한 후, 감압 농축하여 분말로 제조하였다. 조제된 왕귀뚜라미, 쌍별귀뚜라미, 갈색거저리 유충의 추출물의 성분 분석으로 총 폴리페놀, 총 플라보노이드, 총 당 및 환원당 함량을 측정하였다. 총 폴리페놀 함량은 추출 검액 400μl에 50μl의 Folin-ciocalteau, 100μl의 Na2CO3 포화용액을 넣고 실온에서 1시간 방치한 후 725nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 tannic acid를 사용하였다. 총 플라보노이드 함량은 각각의 시료를 18시간 동안 메탄올로 교반 추출하고, 여과한 추출 검액 400μl에 90% diethylene glycol 4ml를 첨가하고 다시 1N NaOH 40μl를 넣고 37℃에서 1시간 반응 후 420nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 rutin을 사용하였다. 환원당은 DNS법으로, 총 당은 phenol-sulfuric acid법을 이용하여 정량하였다.
그 결과, 표 2에 나타낸 바와 같이, 왕귀뚜라미 추출효율은 쌍별귀뚜라미에 비해 1.53배 높았으며, 갈색거저리에 비해서는 0.74배 낮았다. 이는 표 1의 영양성분 분석결과와 일치하며, 조지방 함량과 상관관계가 있는 것으로 판단된다. 추출물의 총 폴리페놀 함량 분석의 경우, 왕귀뚜라미와 쌍별귀뚜라미 추출물은 15.5~15.6mg/ml로 갈색거저리 유충의 2.6mg/ml에 비해 월등히 높았으며, 총 플라보노이드 함량도 귀뚜라미가 갈색거저리 유충보다 47배 높았다. 한편, 총 당 함량과 환원당 함량은 7.5~8.5mg/ml 정도로 나타나 왕귀뚜라미, 쌍별귀뚜라미 및 갈색거저리 유충에서 모두 유사하게 나타났다. 이러한 결과는 왕귀뚜라미 및 쌍별귀뚜라미 추출물은 매우 유사한 성분 함향을 나타내고 있음을 의미하고 있다.
실시예
4: 왕귀뚜라미 추출물의 항산화 활성 평가
실시예 3에서 제조된 왕귀뚜라미, 쌍별귀뚜라미 및 갈색거저리 유충 추출물의 항산화 활성을 평가하였으며, 추출물을 DMSO(dimethylsulfoxide)에 녹인 후 적당한 농도로 희석하여 DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) 음이온 라디칼 소거능, ABTS[2,2-azobis (3-ethylbenzo thiazoline-6-sulfonate)] 양이온 라디칼 소거능, nitrite 소거능 및 환원력 측정에 사용하였다. 먼저, DPPH 소거능의 경우 다양한 농도로 희석한 시료 20μl에, 99.5% 에탄올에 용해시킨 2x10-4M DPPH 용액 380μl를 넣고 혼합하여 37℃에서 30분 동안 반응시킨 후, 516nm에서 microplate reader(Asys Hitech, Expert96, Asys Co., Austria)를 사용하여 흡광도를 측정하였다. DPPH radical 소거능은 시료첨가구와 비첨가구의 백분율로 표시하였다. ABTS 소거능의 경우 7mM ABTS(Sigma Co., USA) 5ml와 140mM potassium persulfate 88ml를 섞은 후 상온에서 16시간 빛을 차단하여 ABTS 양이온을 형성시켰으며, 이후 이 용액을 414nm에서 흡광도 값이 1.5가 되도록 에탄올로 희석하였다. 조제된 희석용액 190ml와 다양한 농도로 조제된 시료 10ml를 혼합한 후 상온에서 6분간 반응시킨 후 734nm에서 흡광도를 측정하고, 다음의 식에 의해 ABTS radical 소거능을 계산하였다.
ABTS radical 소거능 (%) = [(C-S)/C] x 100,
C: 용매
대조구
DMSO
첨가시의 흡광도,
S: 시료 첨가시의 흡광도.
한편, nitrite 소거능 측정의 경우, 아질산염 용액(1mM)에 시료용액을 가하고, 여기에 0.1N HCl을 가해 pH 1.2로 조정한 후, 37℃에서 1시간 반응시킨 후 Griess reagent(Sigma Co., USA)를 가하고 혼합하였다. 이후 15분간 실온에서 방치 후 520nm에서 흡광도를 측정하여 잔존 nitrite 양을 측정하였다. nitrite 소거능(%)는 다음의 식에 의해 계산하였다.
NSA (%) = [1-(A-C)/B] x100,
A: 1mM nitrite 용액에 시료를 첨가하여 1시간 반응시킨 후의 흡광도,
B: 1mM nitrite 용액의 흡광도,
C: 왕귀뚜라미 추출물 시료의 흡광도.
상기의 항산화 실험에서 대조구로는 vitamin C(Sigma Co., USA)를 사용하였으며, 용매 대조구로는 DMSO를 사용하였다. 각각의 활성 평가는 각각 3회 반복한 실험의 평균과 편차로 표시하였으며, 최종적으로 각각의 항산화능은 50% 라디칼 소거능에 필요한 추출물의 농도(RC50)로 나타내었다.
한편, 환원력 평가의 경우 Oyaizu 등의 방법을 변형(안선미 등, 2011. J. Life Sci. 21: 576-583)하여 측정하였다. 에탄올에 용해한 시료 2.5ml에 0.2M sodium phosphate buffer(pH 6.6) 2.5ml와 10% potassium ferricyanide 2.5ml를 첨가하고, 50℃에서 20분간 반응시킨 후, 10% trichloroacetic acid 2.5ml를 첨가하여 반응을 종료하고 4,000rpm에서 10분간 원심분리하여 상등액을 회수하였다. 회수한 상등액은 증류수로 2배 희석한 후, 신선하게 조제된 0.1% ferric chloride 용액과 5:1(v/v) 비율로 혼합하고 700nm에서 흡광도를 측정하여 평가하였다. 각각의 항산화력 측정 결과는 표 3에 나타내었다.
그 결과, 표 3에 나타난 바와 같이, 왕귀뚜라미, 쌍별귀뚜라미 및 갈색거저리 유충의 에탄올 추출물을 0.5mg/ml의 농도로 하여 DPPH 음이온 소거능은 각각 68.3%, 25.5% 및 4.8%를 나타내어 왕귀뚜라미는 쌍별귀뚜라미에 비해 2.68배 높은 소거능을 보였으며, 최근 식용 및 사료로 각광받고 있는 갈색거저리 유충 추출물에 비해서는 14.23배 높은 소거능을 보였다. 또한, ABTS 양이온 소거능 평가에서도 왕귀뚜라미, 쌍별귀뚜라미 및 갈색거저리 유충의 에탄올 추출물은 각각 62.1%, 39.0% 및 18.4%를 나타내어 왕귀뚜라미는 쌍별귀뚜라미에 비해 1.59배 높은 소거능을 보였으며, 갈색거저리 유충 추출물에 비해서도 3.38배 높은 소거능을 보였다. 환원력 평가 경우에서도 왕귀뚜라미는 쌍별귀뚜라미에 비해 2.36배 높은 소거능을 보였으며, 갈색거저리 유충 추출물에 비해서도 9.91배 높은 소거능을 보였다. 반면, nitrite 소거능의 경우 왕귀뚜라미 추출물은 쌍별귀뚜라미 추출물보다 미약한 소거능을 나타내었으며, 갈색거저리 유충에 비해 1.24배 높게 나타났다.
실시예
5: 왕귀뚜라미 에탄올 추출물의
유기용매
순차적
분획물
조제 및 이들의 성분 분석
상기 실시예 3에서 제조된 왕귀뚜라미 추출물을 대상으로 헥센, 에틸아세테이트, 부탄올로 순차적 유기용매 분획하였으며, 최종적으로 물 잔류물을 각각 회수하였다. 이때, 추출효율, 유기용매 분획 효율, 추출물/분획물의 성분 분석 결과는 표 4에 나타내었다.
표 4에 나타낸 바와 같이, 왕귀뚜라미 에탄올 추출물의 86.3%는 헥센 분획으로 이행되어, 추출물의 대부분이 지질 성분임을 알 수 있었으며, 추출물중 물 잔류물이 9.2%, 부탄올 분획물이 5%, 에틸아세테이트 분획물은 3.4%를 차지하였다. 분획물의 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량 측정결과, 에틸아세테이트 분획에서 가장 높은 27.2mg/g 및 3.4mg/g을 나타내었으며, 총 당 및 환원당 함량은 부탄올 분획에서 가장 높은 215.1mg/g 및 207.8mg/g을 나타내었다.
실시예
6: 왕귀뚜라미 추출물의
분획물의
항산화 활성 평가
왕귀뚜라미 추출물의 분획물을 이용하여 실시예 4의 다양한 라디칼 소거능 및 환원력 평가와 동일한 방법으로 항산화 활성을 측정하였다. 그 결과는 표 5 및 표 6에 나타내었으며, 표 5와 표 6에서 0.5mg/ml 농도에서의 항산화 활성 및 50% 라디칼 소거능에 필요한 추출물의 농도(RC50)로 표시하였다.
먼저, 표 5에 나타낸 바와 같이, 왕귀뚜라미 추출물의 헥센 분획물, 부탄올 분획물 및 물 잔류물은 에탄올 추출물에 비해 0.2~0.4배의 DPPH 소거능, 0.2~0.5배의 ABTS 소거능, 0,05~0.6배의 환원력을 나타내어 항산화 활성은 인정되지 않았다. 반면, 에틸아세테이트 분획물은 0.5mg/ml 농도에서 DPPH 음이온 소거능, ABTS 양이온 소거능, nitrite 소거능 및 환원력 평가 결과 각각 59.3%, 68.4%, 76.5% 및 0.380을 나타내어 다양한 라디컬 소거능이 모두 우수하였으며, 왕귀뚜라미 추출물과 비교시 DPPH 음이온 소거능, ABTS 양이온 소거능, nitrite 소거능 및 환원력이 각각 0.95배, 1.0배, 3.7배 및 1.13배 증가되어 특히 에틸아세테이트 분획물은 왕귀뚜라미 에탄올 추출물에 비해 nitrite 소거능이 매우 강력함을 알 수 있었다. 실제적인 항산화능을 vitamon C와 비교한 결과에서도 왕귀뚜라미 에틸아세테이트 분획물은 정제되지 않은 상태에서도 매우 낮은 RC50 값을 나타내어 실제적인 항산화제로 개발 가능하다고 판단되었다.
실시예
6: 왕귀뚜라미 추출물 및 이의
분획물의
적혈구 용혈활성 평가
왕귀뚜라미는 현재 식품원재료로 등재되어 있지는 않으나, 과거로부터 튀김, 구이 등으로 전통적으로 식용하여 왔으며, 이미 안전성이 확보된 식재료이다. 또한, 왕귀뚜라미는 국내에서도 가장 흔한 귀뚜라미 종류로 식용 경험이 많이 보고되어 있다. 그러나, 항산화 조성물로 사용하는 경우의 잠재적 급성 독성을 평가하기 위해, 왕귀뚜라미 에탄올 추출물 및 이의 분획물의 인간 적혈구 용혈 활성을 평가하였으며, 그 결과는 표 7에 나타내었다. 이때 용혈 활성은 기존의 보고(김미선 외, 2016년, J. Life Sci. 26: 289~295)에 준해 평가하였으며, 간단하게는 PBS로 3회 수세한 인간 적혈구 100μl를 96-well microplate에 가하고 다양한 농도의 시료용액 100μl를 가한 다음 37℃에서 30분간 반응시켰으며, 이후, 반응액을 10분간 원심분리(1,500rpm)하여 상등액 100μl를 새로운 microtiter plate로 옮긴 후 용혈에 따른 헤모글로빈 유출 정도를 414nm에서 측정하였다. 시료의 용매 대조구로는 DMSO(2%)를 사용하였으며, 적혈구 용혈을 위한 실험 대조구로는 Triton X-100(1mg/ml)를 사용하였다. 용혈 활성은 다음의 수식을 이용하여 계산하였다.
(%)Hemolysis=[(Abs.S-Abs.C)/(Abs.T-Abs.C)]×100
Abs. S : 시료 첨가구의 흡광도,
Abs. C : DMSO 첨가구의 흡광도,
Abs
. T : Triton X-100
첨가구의
흡광도.
먼저, 대조구로 사용된 DMSO와 증류수는 적혈구 용혈 활성이 없었으며, Triton X-100은 1mg/ml 농도에서 적혈구를 100% 용혈시킴을 확인하였다. 한편, 왕귀뚜라미 에탄올 추출물과 이의 86.3%를 차지하는 헥센 분획물은 강력한 용혈활성이 나타났으며, 부탄올 분획은 중등도의 용혈활성을 나타내었다. 반면, 에틸아세테이트 분획물과 물 잔류물에서는 1mg/ml 농도까지 적혈구 용혈현상이 나타나지 않아 급성독성 및 적혈구 용혈 활성은 없음을 확인하였다. 이러한 결과는 왕귀뚜라미 추출물의 에틸아세테이트 분획은 식품용 항산화제로도 실제적 이용이 가능함을 제시하고 있다.
실시예
7: 왕귀뚜라미 추출물의 에틸아세테이트
분획물의
혈장, 산 및 열 안정성 평가
상기 실시예 5에서 얻은 왕귀뚜라미 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 대상으로 항산화 활성에 대한 혈장 안정성, 열 안정성 및 산 안정성을 확인하였다. 상기 에틸아세테이트 활성 분획물은 100℃에서 1시간 열 처리, pH 2(0.01M HCl)에서의 1시간 처리, 혈장에서 1시간 처리시에도 DPPH 소거능, ABTS 소거능의 소실이 없이 우수한 활성을 유지하였다. 따라서, 실시예 4의 분획물의 성분 분석 결과와 유기용매 분획 특성 및 상기의 안정성 결과를 고려할 때, 왕귀뚜라미 에틸아세테이트 분획물의 활성물질은 내열성 구조의 페놀성 화합물의 배당체로 예상된다.
Claims (5)
- 왕귀뚜라미(Teleogryllus emma) 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 건강 기능 식품.
- 제 1항에 있어서, 상기 왕귀뚜라미 에탄올 추출물은 왕귀뚜라미 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물인 것을 특징으로 하는 건강 기능 식품.
- 왕귀뚜라미(Teleogryllus emma) 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 화장료 조성물.
- 제 3항에 있어서, 상기 왕귀뚜라미 에탄올 추출물은 왕귀뚜라미 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 삭제
Priority Applications (1)
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|---|---|---|---|
| KR1020170015965A KR101856602B1 (ko) | 2017-02-06 | 2017-02-06 | 왕귀뚜라미 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
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|---|---|---|---|
| KR1020170015965A KR101856602B1 (ko) | 2017-02-06 | 2017-02-06 | 왕귀뚜라미 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화 조성물 |
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| KR1020170015965A KR101856602B1 (ko) | 2017-02-06 | 2017-02-06 | 왕귀뚜라미 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화 조성물 |
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Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102037531B1 (ko) | 2018-07-03 | 2019-10-28 | 안동대학교 산학협력단 | 왕귀뚜라미 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품 |
| KR20200004013A (ko) | 2018-07-03 | 2020-01-13 | 안동대학교 산학협력단 | 왕귀뚜라미 추출물의 헥센 분획물 또는 부탄올 분획물을 유효성분으로 포함하는 항균 조성물 |
| KR102068521B1 (ko) | 2018-10-29 | 2020-01-21 | 대한민국(농촌진흥청장) | 테레오그릴루신 2 펩타이드를 함유하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 화장료 조성물 |
| KR20200009184A (ko) | 2018-07-18 | 2020-01-30 | 안동대학교 산학협력단 | 꿀벌 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강기능식품 |
| KR20200058353A (ko) | 2020-05-19 | 2020-05-27 | 안동대학교 산학협력단 | 왕귀뚜라미 추출물의 헥센 분획물 또는 부탄올 분획물을 유효성분으로 포함하는 항균 조성물 |
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-
2017
- 2017-02-06 KR KR1020170015965A patent/KR101856602B1/ko active IP Right Grant
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102037531B1 (ko) | 2018-07-03 | 2019-10-28 | 안동대학교 산학협력단 | 왕귀뚜라미 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품 |
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| KR102475368B1 (ko) | 2020-06-12 | 2022-12-08 | 대한민국 | 테레오그릴루신 1 포함하는 신경염증성 질환의 예방 또는 치료용 조성물 |
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