KR102050506B1 - 망막 질환 예방, 개선, 완화 또는 치료용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 망막 질환의 예방, 개선, 완화 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 망막색소상피세포 내 산화를 억제하고 세포 사멸을 억제하여 다양한 병인에 의한 황반 변성과 같은 다양한 망막 질환을 예방, 개선, 완화 및 치료할 수 있는 우수한 효과를 갖는다. 따라서, 본 발명의 조성물은 우수한 망막 질환의 치료 또는 개선용 의약품, 건강기능식품, 의약외품,또는 사료첨가물 등 다양한 제품으로의 활용이 가능하다.

Description

망막 질환 예방, 개선, 완화 또는 치료용 조성물{Composition for preventing, improving, alleviating or treating macular disease}

본 발명은 다양한 망막 질환의 예방, 개선, 완화 또는 치료하기 위한 조성물에 관한 것이다.

정상 시력은 빛이 눈의 앞쪽으로 들어올 때 발생하며 이는 렌즈로 눈 뒤쪽 내부에 늘어서 있는 광수용체(photoreceptors)로 불리는 매우 민감하고 약한 세포 위로 초점을 맞춘다. 광수용체는 다른 신경세포(neurons)와 함께 눈의 망막을 구성한다. 황반(macula)은 선명한 중심시력을 담당하는 중심와(fovea)를 포함하는 눈의 뒤쪽 중심 부근에 위치하는 망막의 일부이다. 눈의 안쪽 망막의 중심부에 위치한 신경조직을 황반이라고 하는데, 빛 자극에 반응하는 시세포의 대부분이 이곳에 모여 있고 물체의 상이 맺히는 곳도 황반의 중심이므로 시력에 대단히 중요한 역할을 담당하고 있다.

망막은 다양한 원인에 의하여 망막염, 황반 변성, 당뇨병성 망막증, 황반 부종, 망막 손상, 녹내장, 시신경병증, 망막 혈관 질환, 안혈관 질환, 녹내장 등의 다양한 질환을 앓을 수 있는데, 특히 황반부(망막색소상피와 부르크막 및 맥락막 모세혈관 복합체)에 여러 가지 원인에 의해 변성이 일어나 시력 장애를 일으키는 안과 질환을 황반 변성(증)이라 하고, 황반 변성은 녹내장, 당뇨병성 망막 질환과 더불어 3대 실명 질환의 하나로 알려져 있다. 이러한 황반 변성은 중심 시력에 영향을 주어 시야 가운데가 흐릿하게 보이고, 중심 암점, 변시증(사물이 찌그러져 보이는 증상) 또는 국소 부분의 시력 상실로 인해 독서, 운전 등의 정교한 활동 수행을 곤란하게 할 수 있으며, 심할 경우 실명으로까지 이어지는 매우 심각한 질병이다.

황반 변성을 일으키는 가장 대표적인 원인으로는 연령 증가를 들 수 있으며, 그밖에 가족력, 인종, 흡연 등과도 어느 정도 연관성이 있다고 알려져 있다. 특히, 노인성(퇴행성) 황반 변성(AMD; age-related macular degeneration)은 이미 서구 사회에서 55세 이상의 노인에게서 실명을 일으키는 가장 흔한 질환이 된지 오래이며, 미국에서는 이미 노인 실명의 1위를 차지하고 있고, 국내에서도 고령화가 급속히 진행되면서 환자가 크게 늘고 있다. 이는 서구화된 식습관과 더불어 오존층 파괴로 인한 자외선 노출 증가로 인한 결과로 예측된다. 특히, 황반 변성은 본래 노인층에서 주로 발생하는 질환이었으나, 최근 들어 국내에서도 발명 연령대가 60대 노년층에서 4, 50대 중장년층으로 낮아지고 있는 추세로서, 중장년층 발병률 또한 최근 수년 동안 급속히 증가하고 있다.

황반 변성은 크게 건성과 습성 두 유형으로 분류할 수 있으며, 황반 변성 환자 중 약 90% 정도는 건성 황반 변성 환자이다. 황반 변성의 한 가지 형태인 건성 황반 변성은 위축성(비삼출성)으로 분류되어 지리적 위축(geographical atrophy)으로 불리우며, 드루젠(drusen)이 망막하 수준으로 망막상에 침착되는 초기 단계의 질병이다. 이러한 드루젠의 침착은 황반 조직의 노화 또는 박막화를 일으킬 수 있다. 이러한 드루젠 침착의 결과로서, 중심 시력의 손상이 점차 발생할 수 있다. 빈번히, 노인성 황반 변성은 건성 황반 변성과 함께 개시한다. 황반 변성 중 건성 형태일 경우, 초기에는 징후가 없어 자가진단이 어려운 것이 특징이고 서서히 진행되어 실명 위험성이 상대적으로 적지만, 건성 황반 변성은 아직까지 확립된 치료법이 없는 실정이므로, 예방의 필요성이 더욱 강조되고 있다.

습성 황반 변성은 불완전한 혈관이 망막하에서 비정상적으로 성장하고 누출을 개시하는 신생혈관 형태의 변성으로, 삼출성으로 분류된다. 이러한 누출의 결과로서, 영구적 손상이 망막의 광수용체 세포에서 발생하고, 이는 궁극적으로 이들 세포의 사멸 및 이에 따라 맹점(blind spot)을 유발한다. 시야 손실이 작을 수 있는 건성 황반 변성과는 달리, 습성 황반 변성에서 발생하는 시야 손실은 심각할 수 있다. 실제로, 노인성 황반 변성을 갖는 환자 중의 10%만이 습성 황반 변성을 겪지만, 현저한 시야 손실을 겪고 있는 노인성 황반 변성 환자 중의 66%는 당해 손실이 습성 황반 변성에 직접 기인할 수 있다고 보고되었다. 습성 황반 변성은 망막 내 또는 그 아래에 노폐물이 쌓여 신생혈관이 성장해 약한 신생혈관의 파열로 황반부에 손상을 주어 시력손실이 발생하는 반면, 건성 황반 변성은 황반부 조직이 얇아지거나 위축되어 노폐물이 쌓여 망막세포를 사멸시킨다.

한편, 글로벌데이터 사에 따르면, 현재 노인성 황반 변성 치료제는 대부분 타겟을 혈관내피세포 성장인자(VEGF)로 하고 있고, VEGF 저해제인 '루센티스 (라니비주맙)'와 '아바스틴 (베바시주맙)' 및 '아일리아 (애플리버셉트)'에 의해 전체 황반 변성 치료제 시장의 98%가 점유된 것으로 집계된다. 그러나 상기 노바티스의 '루센티스'는 약가가 매우 고가일 뿐만 아니라, 제넨테크 사에 따르면 라니비주맙이 뇌졸증 발생 위험을 높일 수도 있다고 경고한 바 있으며, 안 내에 주사하는 제제로 투여의 불편함이 단점으로 지적되고 있다. 더욱이, 이들 모두는 습성 황반 변성 치료제이고, 건성 황반 변성에 대한 치료제는 아직까지 없는 실정이다.

식약처에서 개별 인정형으로서 승인된 루테인은 망막의 황반을 보호하는 성분으로 황반색소밀도를 유지시켜 황반의 변성을 예방할 수 있지만, 루테인과 같은 카로티노이드를 함유한 보충제를 장시간 사용하면 폐암 발병 위험이 높아진다는 연구결과가 있고, 특히 흡연자에게는 더 위험한 것으로 나타났다. 이 밖에도 식약처에서 기능성 원료로 승인하지 않았지만 그 효능이 있다고 보고된 천연물에는 지아잔틴(zeaxanthin)과 베리류에 포함된 안토시아닌(anthocyanin) 성분 등이 있다.

그러나 아직 황반 변성 관련 연구가 매우 부족한 실정인바, 건성 황반 변성의 예방, 나아가서 개선 및 치료에 도움이 되는 의약품 및 건강기능식품의 개발이 절실히 요청된다.

1. 한국등록특허 등록특허 10-1692378 2. 한국공개특허 10-2014-0003407 3. 한국공개특허 10-2016-0108554

본 발명의 목적은 망막 질환의 예방, 나아가 개선 및 치료용 조성물을 제공하는데 있다.

상술한 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 다음 화학식 1로 표시되는 화합물의 망막 질환의 예방, 개선, 완화 또는 치료에 관한 용도를 제공한다.

[화학식 1]

상기 식에서, R은 수소 또는 알콕시(C_nH_2n＋1O^-)이며,

상기 _n은 정수임.

본 발명의 일 태양에 따르면, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 망막 질환의 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 망막 질환의 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물은 색소성 망막염 (RP), 레베르 선천 흑암시 (LCA), 스타가르트병, 어셔 증후군, 맥락막 결여, 로드-콘 또는 콘-로드 디스트로피, 섬모병증, 미토콘드리아 장애, 진행성 망막 위축증, 퇴행성 망막 질환, 노인성 황반 변성 (AMD), 습성 황반 변성, 건성 황반 변성, 지도상 위축증, 가족형 또는 획득 황반병증, 망막 광수용체 질환, 망막 색소 상피-계 질환, 당뇨병성 망막증, 낭포성 황반 부종, 포도막염, 망막박리, 외상성 망막 손상, 의원성 망막 손상, 황반 원공, 황반 모세관 확장증, 신경절 세포 질환, 시신경 세포 질환, 녹내장, 시신경병증, 허혈성 망막 질환, 미숙아 망막증, 망막 혈관 폐색, 가족형 마크로아뉴리즘, 망막 혈관 질환, 안혈관 질환, 녹내장으로 인한 망막신경세포 퇴화 및 허혈성 시신경병증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 망막 질환에 적용하는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따른 망막 질환의 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물은 안구 국소 투여용 안과용 조성물인 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따른 망막 질환의 예방, 개선 또는 치료용 안구 국소 투여용 안과용 조성물은 점안액 또는 안연고제로 제형화되는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 일 태양에 따르면, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 망막 질환의 예방, 개선 또는 완화용 식품 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 망막 질환의 예방, 개선 또는 완화용 식품 조성물은 색소성 망막염 (RP), 레베르 선천 흑암시 (LCA), 스타가르트병, 어셔 증후군, 맥락막 결여, 로드-콘 또는 콘-로드 디스트로피, 섬모병증, 미토콘드리아 장애, 진행성 망막 위축증, 퇴행성 망막 질환, 노인성 황반 변성 (AMD), 습성 황반 변성, 건성 황반 변성, 지도상 위축증, 가족형 또는 획득 황반병증, 망막 광수용체 질환, 망막 색소 상피-계 질환, 당뇨병성 망막증, 낭포성 황반 부종, 포도막염, 망막박리, 외상성 망막 손상, 의원성 망막 손상, 황반 원공, 황반 모세관 확장증, 신경절 세포 질환, 시신경 세포 질환, 녹내장, 시신경병증, 허혈성 망막 질환, 미숙아 망막증, 망막 혈관 폐색, 가족형 마크로아뉴리즘, 망막 혈관 질환, 안혈관 질환, 녹내장으로 인한 망막신경세포 퇴화 및 허혈성 시신경병증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 망막 질환에 적용되는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 일 태양에 따르면, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 망막 질환의 예방, 개선 또는 완화용 의약외품 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 망막 질환의 예방, 개선 또는 완화용 의약외품 조성물은 색소성 망막염 (RP), 레베르 선천 흑암시 (LCA), 스타가르트병, 어셔 증후군, 맥락막 결여, 로드-콘 또는 콘-로드 디스트로피, 섬모병증, 미토콘드리아 장애, 진행성 망막 위축증, 퇴행성 망막 질환, 노인성 황반 변성 (AMD), 습성 황반 변성, 건성 황반 변성, 지도상 위축증, 가족형 또는 획득 황반병증, 망막 광수용체 질환, 망막 색소 상피-계 질환, 당뇨병성 망막증, 낭포성 황반 부종, 포도막염, 망막박리, 외상성 망막 손상, 의원성 망막 손상, 황반 원공, 황반 모세관 확장증, 신경절 세포 질환, 시신경 세포 질환, 녹내장, 시신경병증, 허혈성 망막 질환, 미숙아 망막증, 망막 혈관 폐색, 가족형 마크로아뉴리즘, 망막 혈관 질환, 안혈관 질환, 녹내장으로 인한 망막신경세포 퇴화 및 허혈성 시신경병증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 질환에 적용하는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 일 태양에 따르면, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 망막 질환의 예방, 개선 또는 완화용 사료첨가물을 제공한다.

본 발명에 따른 망막 질환의 예방, 개선 또는 완화용 사료첨가물은 색소성 망막염 (RP), 레베르 선천 흑암시 (LCA), 스타가르트병, 어셔 증후군, 맥락막 결여, 로드-콘 또는 콘-로드 디스트로피, 섬모병증, 미토콘드리아 장애, 진행성 망막 위축증, 퇴행성 망막 질환, 노인성 황반 변성 (AMD), 습성 황반 변성, 건성 황반 변성, 지도상 위축증, 가족형 또는 획득 황반병증, 망막 광수용체 질환, 망막 색소 상피-계 질환, 당뇨병성 망막증, 낭포성 황반 부종, 포도막염, 망막박리, 외상성 망막 손상, 의원성 망막 손상, 황반 원공, 황반 모세관 확장증, 신경절 세포 질환, 시신경 세포 질환, 녹내장, 시신경병증, 허혈성 망막 질환, 미숙아 망막증, 망막 혈관 폐색, 가족형 마크로아뉴리즘, 망막 혈관 질환, 안혈관 질환, 녹내장으로 인한 망막신경세포 퇴화 및 허혈성 시신경병증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 질환에 적용하는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따른 조성물은 망막색소상피세포 내 산화를 억제하고, 세포사멸을 억제하는바, 다양한 병인에 의한 망막 질환을 치료할 수 있는 우수한 효과를 갖는다. 따라서, 본 발명에 따른 조성물은 망막 질환의 개선, 예방 및 치료용 의약품, 건강기능식품, 또는 의약외품 등 다양한 제품으로의 활용이 가능하다.

도 1은 비-아폽토시스 세포사멸 기전과 해당 기전의 주요 인자를 도시한 것이다(Nature Reviews Immunology 14, 759-767 (2014)).
도 2는 본 발명이 인간망막세포에 미치는 세포 사멸능 효과를 확인한 형광현미경 사진 결과이다.
도 3은 본 발명이 세포에 미치는 IC₅₀ 값을 측정한 결과이다.
도 4는 본 발명이 카스파제1에 미치는 영향을 확인한 웨스턴 블롯 결과이다.
도 5는 본 발명이 RIP1, RIP3 및 p-MLKL에 미치는 영향을 확인한 웨스턴 블롯 결과이다.
도 6은 본 발명이 PARP1에 미치는 영향을 확인한 웨스턴 블롯 결과이다.
도 7은 본 발명이 GPX4에 미치는 영향을 확인한 웨스턴 블롯 결과이다.

다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 일반적으로, 본 명세서에서 사용된 명명법은 본 기술분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다.

이하, 구체적으로 본 발명을 설명한다.

본 발명은 다음 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 염, 또는 이를 유효성분으로 포함하는 조성물의 의약적, 기능성 식품, 및 사료첨가제 등의 용도를 제공한다.

[화학식 1]

상기 식에서, R은 수소 또는 또는 알콕시(C_nH_2n＋1O^-)이며,

상기 _n은 정수임.

본 발명의 일 실시예에서는 본 발명에 따른 화합물이 망막색소상피세포 사멸 억제 효과가 있으며, 망막색소상피세포 내 활성산소종(ROS) 억제 효과가 있는 것으로 확인되었고,이를 통해, 본 발명의 화합물이 망막 질환의 예방, 개선, 완화 내지 치료에의 유용성을 발견하고 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 일 구현예로,화학식 1로 표시되는 화합물의 R은 수소 또는 알콕시(C_nH_2n＋1O^-)일 수 있다. 상기 알콕시에서 _n은 정수일 수 있으며, 바람직하게 _n은 1 내지 6일 수 있고, 더욱 바람직하게는 _n은 1 내지 3일 수 있다.예컨대, 상기 알콕시는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 부톡시, 펜톡시, 헥속시 등일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

구체적으로, 일 예시로,상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 화학식 1에서 R이 수소인, 다음의 화학식 2로 표시되는 다프네틴(Daphnetin, 7,8-디하이드록시크로멘-2-온(7,8-dihydroxychromen-2-one)일 수 있다.

[화학식 2]

다프네틴은 당업계 공지된 다양한 방법을 통해 수득할 수 있으며, 예컨대 화학적으로 합성하거나(Molecules, 18(12), 15613-15623, 2013 참조), 천연물로부터 추출할 수 있고(JAOCS, 80(1) 65-70, 2003 참조), 또는 상업적으로 유통되는 화합물을 입수할 수도 있다.

본 발명의 다른 구현예로, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은,화학식 1에서 R이 메톡시인, 다음 화학식 3으로 표시되는 프락세틴(Fraxetin, 7,8-디하이드록시-6-메톡시크로멘-2-온(7,8-dihydroxy-6-methoxychromen-2-one)일 수 있다.

[화학식 3]

프락세틴은 당업계 공지된 다양한 방법을 통해 수득할 수 있으며, 예컨대 화학적으로 합성할 수 있으며, 천연물로부터 추출할 수도 있고, 상업적으로 유통되는 화합물을 입수할 수도 있다.

본 명세서의 용어 '유효성분'이란 치료학적으로 활성이 있는 화합물 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 용매화물 및 수화물을 의미한다.

본 명세서의 용어 "화합물"은 해당 화학식으로 표시되는 화합물들뿐만 아니라, 이들의 클라드레이트(clathrates), 수화물, 용매화물, 결정질 및 비-결정질 형태, 동형체, 및 다형체를 포함하는 해당 화학식 화합물의 모든 형태를 포함하는 것으로 정의된다.

또한 용어 본 발명의 “화합물”은 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 언급되지 않을 경우 본 발명 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염도 포함하는 의미이다. 상기 화합물 및 염이 용매화물을 형성할 수 있거나, 실질적으로 착물화되지 않은 형태, 예컨대 무수 형태로 존재할 수 있음이 또한 이해된다.

본 명세서의 용어 "용매화물"은 용매 분자, 예컨대 결정화 용매가 결정 격자에 혼입된 분자 착물을 지칭한다. 용매화물에 혼입된 용매가 물일 때, 분자 착물은 수화물로 지칭된다. 약학적으로 허용되는 용매화물은 수화물, 알콕시화물, 예컨대 메탄올레이트 및 에탄올레이트, 아세토니트릴레이트 등을 포함한다. 이러한 화합물은 또한 다형체 형태로 존재할 수 있다.

본 발명의 명세서에서 용어 "염"은 모(parent) 화합물의 생물학적 효과 및 특성을 보유하고 있으며 투여되는 용량에서 생물학적으로 또는 다른 경우에 유해하지 않은 이들 염을 말하고, “약학적으로 허용 가능한 염”을 포함하는 의미이다. 본 발명의 화합물의 염은 무기 또는 유기 산 또는 염기로부터 제조될 수 있다. 본 발명의 화합물은 무기 또는 유기 산 또는 염기로부터 유도된 약학적으로 허용되는 염의 형태로 사용될 수 있다. 용어 '약학적으로 허용 가능한 염'이란 올바른 의학적 판단의 범위 내에서 과도한 독성, 자극, 알러지 반응 및 이와 유사한 것 없이 인간 및 하등 동물의 조직과 접촉시 사용되기에 적합하며 합리적인 이익/위험 비율에 상응하는 이들 염을 의미하고, 무기산 및 유기산으로부터 유도된 비독성 산부가 염을 의미한다. 예를 들어, S. M. Berge et al.는 J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66: 1 et seq에서 약학적으로 허용되는 염을 자세히 설명한다.

적합한 염 유도체로는 예를 들어, 할라이드, 토실레이트, 메실레이트, 티오시아네이트, 설페이트, 비설페이트, 설파이트, 비설파이트, 아릴설포네이트, 알킬설페이트, 푸마레이트, 옥살레이트, 포스포네이트, 포스페이트, 모노히드로젠-포스페이트, 디히드로젠포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스포네이트, 알카노에이트, 시클로알킬알카노에이트, 아릴알코네이트, 아디페이트, 알기네이트, 아스파르테이트, 벤조에이트, 푸마레이트, 글루코헵타노에이트, 글리세로포스페이트, 락테이트, 말레이트, 니코티네이트, 팔미테이트, 펙티네이트, 피크레이트, 피발레이트, 숙시네이트, 타르트레이트, 시트레이트, 캄포레이트, 캄포르술포네이트, 디글루코네이트, 트리플루오로아세테이트, 하이드로클로라이드, 하이드로브로마이드, 또는 살리실레이트 등이 포함되며, 이에 제한되지 않는다. 산부가염은 통상의 방법, 예컨대 화합물을 과량의 산 수용액에 용해시키고, 이 염을 수혼화성 유기용매, 예컨대 메탄올, 에탄올, 아세톤 또는 아세토니트릴을 사용하여 침전시켜서 제조할 수 있다. 동 몰량의 화합물 및 물 중의 산 또는 알코올을 가열하고, 이어서 상기 혼합물을 증발시켜서 건조시키거나 또는 석출된 염을 흡인 여과시킬 수 있다.

한편, 화합물이 망막 질환에 대한 예방 및 치료효과를 가지는 경우, 상기 염, 용매화물, 다형체 역시 동일한 효과를 가짐은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어 자명하다.

본 발명의 일 태양에 따르면, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 망막 질환 예방, 개선, 완화 또는 치료용 조성물을 제공한다. 상기 조성물은 다양하게 제품화될 수 있으며, 예를 들어, 약학 조성물, 건강기능식품을 포함하는 식품 조성물, 의약외품 조성물, 사료첨가제 등으로 제형화될 수 있다.

본 명세서의 용어 "예방"은, 예를 들어, 질환 원인에의 노출에 의해, 질병이 생길 위험이 있는 무증상 대상체에서, 질병 또는 질병과 관련된 증상의 출현을 차단함을 지칭한다.

본 명세서의 용어 "치료"는 발병된 후에 질병 또는 병리학적 상태의 징후 또는 증상을 개선하는 치료적 개재를 지칭한다. 상기 질병 또는 병리학적 상태의 징후 또는 증상과 관련한 "개선" 및 “완화”는 치료의 관찰 가능한 이로운 효과를 지칭한다. 이로운 효과는 걸리기 쉬운 대상에서 질병의 임상적인 증상의 지연된 발병, 질병의 일부 또는 모든 임상 증상의 중증도의 감소, 질병의 보다 느린 진행, 대상의 전반적인 건강 또는 복지의 개선, 또는 특정 질병에 특이적인 것으로 당업계에 널리 공지된 다른 변수에 의해 증명될 수 있다. 망막 질환의 치료는, 예를 들어, 시력의 개선, 망막 질환으로 인한 임상 증상의 감소, 또는 안구의 건조 정도, 예를 들어 망막 질환에 특이적인 것으로 당업계에 널리 공지된 다른 변수에 의해 증명될 수 있다.

본 발명의 명세서에서 용어 "유효성분으로 포함"하는 질병 또는 장애의 징후 또는 증상의 예방, 감소, 경감 또는 제거를 포함하나, 제한되지 않는 유익한 결과와 같은, 바람직한 생물학적 효과에 영향을 미치기에 충분한 양을 포함하는 것을 의미하고, 이 양을 “유효량”이라 한다. 따라서, 조성물 또는 방법의 각 활성 성분의 총량은 유의미한 개체의 이익을 나타내기에 충분하다. 따라서, 유효량은 투여되는 상황에 따라 달라질 것이다. 유효양은 1 이상의 예방적 또는 치료적 투여시 투여될 수 있다.

본 발명의 일 태양에 따르면, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 망막 질환의 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다. 본 발명에 따른 망막 질환의 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물은 안구 국소 투여용 안과용 조성물, 보다 구체적으로 점안액 또는 안연고제로 제형화될 수 있다.

본 발명의 일 태양에 따르면, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 망막 질환의 예방, 개선 또는 완화용 식품 조성물을 제공한다.

본 발명의 일 태양에 따르면, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 망막 질환의 예방, 개선 또는 완화용 의약외품 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 조성물은 다양한 망막 질환의 예방, 완화, 개선 및 치료에 사용될 수 있다.

망막 질환에는 예를 들어,망막순환장애에 속하는 질환으로,망막동맥폐쇄,망막정맥폐쇄, 망막정맥주위염, 고혈압망막병증, 당뇨망막병증, 미숙아망막병증 등이 있고, 망막염, 예를 들어,세균이나 진균에 의한 감각신경망막염증, 풍진에 감염된 모체에서 태어난 신생아에서 확인되는 망막색소상피염증, 결핵, 매독, 사르코이도증, 베체트병 등의 질환에 의해서 발생되는 망막염 등이 있으며,망막 변성,예를 들어,망막변성을 유발하는 질환으로 망막색소변성, 혈관무늬병증, 드루젠 등이 있으며, 황반 변성, 망막 박리 등이 있다.

구체적으로,본 발명이 사용될 수 있는 망막 질환에는 색소성 망막염 (RP), 레베르 선천 흑암시 (LCA), 스타가르트병, 어셔 증후군, 맥락막 결여, 로드-콘 또는 콘-로드 디스트로피, 섬모병증, 미토콘드리아 장애, 진행성 망막 위축증, 퇴행성 망막 질환, 노인성 황반 변성 (AMD), 습성 황반 변성, 건성 황반 변성, 지도상 위축증, 가족형 또는 획득 황반병증, 망막 광수용체 질환, 망막 색소 상피-계 질환, 당뇨병성 망막증, 낭포성 황반 부종, 포도막염, 망막박리, 외상성 망막 손상, 의원성 망막 손상, 황반 원공, 황반 모세관 확장증, 신경절 세포 질환, 시신경 세포 질환, 녹내장, 시신경병증, 허혈성 망막 질환, 미숙아 망막증, 망막 혈관 폐색, 가족형 마크로아뉴리즘, 망막 혈관 질환, 안혈관 질환, 녹내장으로 인한 망막신경세포 퇴화 및 허혈성 시신경병증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 질환에 적용할 수 있다.

본 발명에 따른 조성물은 다양한 기전을 통하여 망막 질환의 예방, 개선, 완화 및 치료에 효과적으로 작용할 수 있다. 세포의 사멸기전은 아폽토시스(apoptosis)와 비-아폽토시스(non-apoptosis)로 구별되고, 비-아폽토시스 세포 사멸(Non-apoptotic cell death)은 카스파제-의존적 기전(caspase-dependent pathway)과 카스파제-독립적 기전(caspase-independent pathway)으로 구별할 수 있다. 아울러, 아폽토시스(apoptosis) 이외의 카스파제-의존적 기전(caspase-dependent pathway)에는 파이롭토시스(pyroptosis)가 있고, 파이롭토시스(pyroptosis)와 관련된 주요 요소로는 카스파제 1(caspase 1)이 대표적이다. 카스파제-독립적 기전(caspase-independent pathway)에는 네크롭토시스(necroptosis), MPT-RN, 파르사나토스(parthanatos), 페롭토시스(ferroptosis)와 NETosis 등이 있다. 상기 각 사멸기전의 주요 요소(key molecule)는 네크롭토시스(necroptosis)는 RIPK3/MLKL이고, MPT-RN은 사이클로필린 D(cyclophilin D), 파르사나토스(parthanatos)는 PARP1, 페롭토시스(ferroptosis)는 GPX4(glutathione peroxidase 4), 그리고 NETosis는 PAD4이다(Nature Reviews Immunology 14, 759767 (2014)), 도 1 참고). 본 발명에 따른 조성물은 활성 산소종의 억제 및 제거 활성, 파이롭토시스 억제 활성, 네크롭토시스 억제 활성, 페롭토시스 억제 활성을 갖고, 보다 구체적으로 카스파제 감소에 의한 파이롭토시스 억제, RIPK1 증가, RIPK3 감소 및 p-MLKL 증가에 의한 네크롭토시스 억제, GPX4 감소에 의한 페롭토시스 억제 효과를 갖는 것으로 나타났다.

본 발명에 따른 조성물에는 화학식 1의 화합물 또는 그의 염이 최종 형태 중에 적어도 약 0.0001% ~ 90%, 0.001% ~ 90%, 0.01% ~ 90%, 0.1% ~ 90%, 0.1% ~ 90%, 0.1% ~ 80%, 0.1% ~ 70%, 0.1% ~ 60%, 0.1% ~ 50%, 0.1% ~ 40%, 0.1% ~ 30%, 0.1% ~ 20% 또는 0.1% ~ 10%의 범위로 포함될 수 있다. 상기 %는 조성물의 총 중량 대비 중량 또는 총 부피 대비 부피를 기준으로 계산할 수 있으며, 농도는 조성물의 목적하는 효과 또는 조성물이 혼입되는 제품에 따라 조정될 수 있다.

본 발명에 따른 조성물은 전신 또는 국소 적용될 수 있다. 통상적으로, 경구 투여, 정맥 주사 (주입 포함), 안구 국소 투여 (예, 안구주위 (예, 하위장부 (subTenon's)), 결막하, 안구내, 유리체내, 전방내, 망막하, 맥락막위 및 안구뒤 투여) 등에 의해 투여될 수 있다.

본 발명의 조성물은 생리학적으로 허용 가능한 첨가제를 추가로 함유할 수 있다. 상기 첨가제는 부형제, 희석제, 충전제, 용해제, 윤활제, 보조제, 결합제, 붕괴제, 피복제, 캡슐화제, 연고 기제, 좌약 기제, 에어로졸화제, 유화제, 분산제, 현탁제, 증점제, 긴장제 (tonicity agent), 완충제, 진정제, 방부제, 산화방지제, 교정제, 풍미제, 착색제, 시클로덱스트린 및 생분해성 중합체와 같은 기능성 물질, 안정화제와 같은, 본 발명의 화합물과 함께 사용되는 성분을 포함할 수 있다. 상기 첨가제는 당업계에 충분히 공지되어 있으며, 일반적인 약학문헌에 기재된 것들에서 선택될 수 있다.

본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 상기 조성물을 제형화할 경우에는 하나 이상의 완충제(예를 들어, 식염수 또는 PBS), 항산화제, 정균제, 킬레이트화제(예를 들어, EDTA 또는 글루타치온), 충진제, 증량제, 결합제, 아쥬반트(예를 들어, 알루미늄 하이드록사이드), 현탁제, 농후제 습윤제, 붕해제 또는 계면활성제, 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다.

경구 투여용 고체 조성물의 예는 정제, 구중정, 설하정, 캡슐제, 환약, 분말제, 과립제 등을 포함한다. 고체 조성물은 하나 이상의 활성 성분을 하나 이상의 불활성 희석제와 혼합함으로써 제조할 수 있다. 상기 조성물은 불활성 희석제 이외의 첨가제, 예를 들어 윤활제, 붕괴제 및 안정화제를 추가로 함유할 수 있다. 정제 및 환약은 필요에 따라 장용 또는 위장용 필름으로 피복할 수 있다. 이들은 2 이상의 층으로 피복될 수 있다. 이들은 또한 서방성 물질에 흡착될 수 있거나, 또는 마이크로캡슐화될 수 있다. 게다가, 상기 조성물은 젤라틴과 같은 용이하게 분해 가능한 물질에 의해 캡슐화될 수 있다. 이들은 또한 지방산 또는 이의 모노, 디 또는 트리글리세라이드와 같은 적절한 용매에 용해되어 연질 캡슐제가 될 수 있다. 설하정은 급속 작용 성질이 필요한 경우에 사용될 수 있다.

경구 투여용 액체 조성물의 예는 유화액, 용액, 현탁액, 시럽 및 엘릭시르 등을 포함한다. 상기 조성물은 통상적으로 사용되는 불활성 희석제, 예를 들어 정제수 또는 에틸 알코올을 추가로 함유할 수 있다. 상기 조성물은 불활성 희석제 이외에, 보조제, 예를 들어 습윤제 및 현탁제, 감미제, 풍미제, 향료 및 방부제와 같은 첨가제를 함유할 수 있다.

본 발명의 조성물은 하나 이상의 유효성분을 함유하는 스프레이 조성물의 형태일 수 있으며, 공지의 방법에 따라서 제조될 수 있다.

본 발명의 조성물은 하나 이상의 유효성분을 함유하는 비경구 투여용의 주사용 조성물의 형태일 수 있고, 상기 주사용 조성물의 예는 멸균 수성 또는 비수성 용액, 현탁액 및 유화액을 포함한다. 수성 용액 또는 현탁액용 희석제는, 예를 들어 주사용 증류수, 생리학적 식염수 및 링거액을 포함할 수 있다. 용액 및 현탁액 용의 비수성 희석제는, 예를 들어 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브유와 같은 식물성 오일, 에탄올 및 폴리소르베이트와 같은 알코올을 포함할 수 있다. 상기 조성물은 방부제, 습윤제, 유화제, 분산제 등과 같은 첨가제를 추가로 포함할 수 있다. 이들은, 예를 들어 세균 보유 필터에 의한 여과, 멸균자와의 배합, 또는 기체 또는 방사성 동위원소 조사 멸균에 의해 멸균될 수 있다. 주사용 조성물은 또한 사용전에 주사용 멸균 용매에 용해되도록 멸균 분말 조성물로서 제공될 수 있다.

본 발명의 조성물은 또한 점안액 및 안 연고와 같은 안과용 조성물로서 제제화될 수 있다. 상기 형태는 안과 분야에서 사용되는 안구 국소 투여용의 모든 안과용 제제를 포함할 수 있다. 점안액은 활성 성분을 식염수 및 완충액과 같은 멸균 수용액에 용해시킴으로써 제조된다. 점안액은 사용전에 용해되도록 분말 조성물로서 제공될 수 있거나, 또는 사용전에 용해되도록 분말 조성물과 배합함으로써 제공될 수 있다. 안 연고는 활성 성분을 연고 기제에 혼합함으로써 제조된다. 상기 제제는 통상적인 방법에 따라서 제조된다.

또한, 안과 분야에서 통상적으로 사용되는 첨가제가 필요에 따라 본 발명의 조성물에 첨가될 수 있다. 이러한 첨가제는, 예를 들어 완충제 (예, 붕산, 인산일수소나트륨 및 인산이수소나트륨), 방부제 (예, 벤잘코늄 클로라이드, 벤제토늄 클로라이드 및 클로로부탄올), 증점제 (예, 락토오스, 만니톨 및 말토오스와 같은 당류; 예, 히알루론산 또는 나트륨 히알루로네이트 및 칼륨 히알루로네이트와 같은 이의 염; 예, 콘드로이틴 설페이트와 같은 뮤코다당류; 예, 나트륨 폴리아크릴레이트, 카르복시비닐 중합체 및 가교 폴리아크릴레이트) 를 포함한다.

본 발명의 조성물을 안 연고로서 제조하는 경우, 조성물은 상기 첨가제 이외에, 통상적으로 사용되는 안 연고 기제를 함유할 수 있다. 이러한 안 연고 기제는 바셀린, 유동 파라핀, 폴리에틸렌, 셀렌 50, 플라스티베이스, 마크로골 또는 이들의 조합과 같은 오일 기제; 계면활성제로 에멀젼화한 유상 및 수상을 갖는 에멀젼 기제; 및 히드록시프로필메틸셀룰로오스, 카르복시프로필메틸셀룰로오스 및 폴리에틸렌 글리콜과 같은 수용성 기제를 포함하나, 이들로 제한되지 않는다.

본 발명의 점안액은 벤잘코늄 클로라이드와 같은 방부제를 함유하지 않는 멸균 단위 투여형 제제 (1 일형 또는 단일 단위 투여형) 로서 제제화할 수 있다.

안과용 조성물은 또한 눈의 뒷부분까지 활성 화합물을 지속적으로 제공하기 위해서, 겔 제제, 리포솜 제제, 지질 마이크로에멀젼 제제, 마이크로스피어 제제, 나노스피어 제제 및 임플란트 제제와 같은 서방성 형태를 포함한다.

본 발명에 사용되는 점안액의 활성성분의 농도 및 투여 횟수는, 예를 들어 사용되는 화합물, 피험자의 종류(예, 동물 또는 사람), 연령, 체중, 치료하고자 하는 증상, 원하는 치료 효과, 투여 방법, 투여량 및 치료 기간에 따라서 달라질 수 있다. 따라서, 적합한 농도 및 투여 횟수는 필요에 따라서 선택될 수 있다.

본 발명의 약학 조성물은 단일 활성성분 또는 2 종 이상의 활성 성분의 조합을 함유할 수 있다. 복수의 활성성분의 조합에 있어서, 이들의 각 함량은 이들의 치료 효과 및 안전성을 고려해서 적절히 증가 또는 감소될 수 있다.

또한, 본 발명의 제제는 본 발명의 목적에 반하지 않는 한, 기타 약리학적 활성 성분을 적절히 함유할 수 있다.

본 발명에서 사용된 용어 "건강기능식품"이라 함은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 말하며, 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다.

본 발명의 조성물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정할 수 있다. 상기 식품첨가물은 외관, 향미, 조직 또는 저장성을 향상시키기 위한 목적으로 보통 적은 양이 식품에 의도적으로 첨가되는 것을 가리키며, 식품의 품질을 개량하여, 보존성 또는 기호성을 향상시킬 뿐 아니라 영양가 및 식품의 실질적인 가치를 증진시킬 목적으로 사용하는 것을 의미한다. 이는, 식품위생법 제2조 제2호에서 정의하고 있는 바와 같이, 식품을 제조가공 또는 보존함에 있어 식품에 첨가, 혼합, 침윤, 기타의 방법으로 사용되는 물질일 수 있다.

본 발명의 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지류, 빵류, 쵸코렛류, 캔디류, 스넥류, 과자류, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있고, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함할 수 있으며, 동물을 위한 사료로 이용되는 식품을 포함한다.

본 발명의 건강기능식품은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 식품 첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전청에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다.

또한,본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.

또한, 상기 식품은 공지의 제조방법에 따라 정제, 과립, 분말, 캅셀, 액상의 용액 및 환 등의 제형으로도 제조될 수 있다. 본 발명의 화합물을 유효성분으로 포함하는 것 이외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며, 통상의 여러가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가성분으로 포함될 수 있다.

예를 들어, 정제 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효성분인 상기 화학식 1의 화합물을 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와 혼합한 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형할 수 있다. 또한 상기 정제 형태의 건강기능식품은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수도 있다.

캅셀 형태의 건강기능식품 중 경질 캅셀제는 통상의 경질 캅셀에 본 발명의 유효성분인 상기 화학식 1의 화합물을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 충진하여 제조할 수 있으며, 연질 캅셀제는 상기 화학식 1의 화합물을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 젤라틴과 같은 캅셀기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질 캅셀제는 필요에 따라 글리세린 또는 소르비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다.

환 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효성분인 상기 화학식 1의 화합물과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 제피제로 제피할 수 있으며, 또는 전분, 탈크와 같은 물질로 표면을 코팅할 수도 있다.

과립 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효성분인 상기 화학식 1의 화합물과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 교미제 등을 함유할 수 있다.

본 발명의 명세서에서 용어, "의약외품"은 사람이나 동물의 질병을 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 섬유, 고무제품 또는 이와 유사한 것, 인체에 대한 작용이 약하거나 인체에 직접 작용하지 않으며, 기구 또는 기계가 아닌 것과 이와 유사한 것, 감염 예방을 위하여 살균, 살충 및 이와 유사한 용도로 사용되는 제제 중 하나에 해당하는 물품으로서, 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것 및 사람이나 동물의 구조와 기능에 약리학적 영향을 줄 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것을 제외한 물품을 의미하며, 피부 외용제 및 개인위생용품도 포함한다. 상기 피부외용제는 특별히 이에 제한되지 않으나, 바람직하게는 연고제, 로션제, 스프레이제, 패치제, 크림제, 산제, 현탁제, 젤제 또는 젤의 형태로 제조되어 사용될 수 있다. 상기 개인위생용품에는 특별히 이에 제한되지 않으나, 바람직하게는 비누, 화장품, 물티슈, 휴지, 샴푸, 피부 크림, 얼굴 크림, 치약, 립스틱, 향수, 메이크업, 파운데이션, 볼터치, 마스카라, 아이섀도우, 선크림 로션, 모발손질 제품, 에어프레쉬너 젤 또는 세정 젤일 수 있다. 또한, 본 발명의 의약외품 조성물은 특별히 이에 제한되지는 않으나, 바람직하게는 소독청결제, 샤워폼, 안구 세정액, 물티슈, 핸드워시, 가습기 세정제, 연고제 및 필터 세정제로 이루어진 군으로부터 선택되는 제품의 형태로 제조되어 사용될 수 있다.

본 발명의 조성물을 의약외품 조성물에 첨가할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정할 수 있다.

또한,본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 망막 질환의 예방, 개선 또는 완화용 화장료 조성물로도 제공될 수 있다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 로션, 연고, 겔, 크림, 패치 또는 분무제 등을 포함하나 여기에 국한되는 것은 아니다. 본 발명에 따른 화장료 조성물을 제조함에 있어서, 통상적으로 함유되는 피부 외용제 조성물에 본 발명의 화합물을 1 내지 15 중량부, 바람직하게는 2 또는 10 중량부로 첨가할 수있다. 상기 피부 외용제 조성물에는 본 발명의 화합물에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 피부 외용제 조성물에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 또한 상기 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.

본 발명의 조성물은 또한, 망막 질환의 예방, 개선 또는 완화의 목적으로 사료첨가제로 사용할 수 있다.

본 발명에서 용어, "사료첨가제"는 영양소 보충 및 체중감소 예방, 사료 내 섬유소의 소화 이용성 증진, 유질개선, 번식장애 예방 및 수태율 향상, 하절기 고온 스트레스 예방 등 다양한 효과를 목적으로 사료에 첨가하는 물질을 포함한다. 본 발명의 사료첨가제는 사료관리법상의 보조사료에 해당하며, 탄산수소나트륨, 벤토나이트(bentonite), 산화마그네슘, 복합광물질 등의 광물질제제, 아연, 구리, 코발트, 셀레늄 등의 미량 광물질인 미네랄제제, 케로틴, 비타민 A D, E, 니코틴산, 비타민 B 복합체 등의 비타민제, 메티오닌, 라이신 등의 보호아미노산제, 지방산 칼슘염 등의 보호지방산제, 생균제(유산균제), 효모배양물, 곰팡이 발효물 등의 생균, 효모제 등이 추가로 포함될 수 있다.

본 발명에서 용어 "사료"는, 동물이 먹고, 섭취하며, 소화시키기 위한 또는 이에 적당한 임의의 천연 또는 인공 규정식, 한끼식 등 또는 상기 한끼식의 성분으로, 본 발명에 따른 비만 또는 지질관련 대사성 질환 예방 또는 개선용 조성물을 유효성분으로 푸함하는 사료는 당업계에 공지된 다양한 형태의 사료로 제조가능하며, 바람직하게는 농후 사료, 조사료 및/또는 특수사료가 포함될 수 있으나, 이로 한정되지 않는다.

상기 농후사료에는 밀, 귀리, 옥수수 등의 곡류를 포함하는 종자열매류, 곡물을 정제하고 얻는 부산물로서 쌀겨, 밀기울, 보릿겨 등을 포함하는 겨류, 콩, 유체, 깨, 아마인, 코코야자 등을 채유하고 얻는 부산물인 깻묵류와 고구마, 감자 등에서 녹말을 뺀 나머지인 녹말찌꺼기의 주성분인 잔존녹말질류 등의 찌꺼기류, 어분, 물고기찌꺼기, 어류에서 얻은 신선한 액상물(液狀物)을 농축시킨 것인 피시솔루블(fish soluble), 육분(肉粉), 혈분, 우모분, 탈지분유, 우유에서 치즈, 탈지유에서 카제인을 제조할 때의 잔액인 훼이(whey)를 건조한건조훼이 등의 동물질사료, 효모, 클로렐라, 해조류가 있으나 이에 제한되지 않는다.

상기 조사료에는 야초, 목초, 풋베기 등의 생초(生草)사료, 사료용 순무, 사료용 비트, 순무의 일종인 루터베어거 등의 뿌리채소류, 생초, 풋베기작물, 곡실(穀實) 등을 사일로에 채워 놓고 젖산발효시킨 저장사료인 사일리지(silage), 야초, 목초를 베어 건조시킨 건초, 종축용(種畜用) 작물의 짚, 콩과 식물의 나뭇잎이 있으며, 이에 제한되지 않는다. 특수사료에는 굴껍데기, 암염 등의 미네랄 사료, 요소나 그 유도체인 디우레이드이소부탄 등의 요소사료, 천연사료원료만을 배합했을 때 부족하기 쉬운 성분을 보충하거나, 사료의 저장성을 높이기 위해서 배합사료에 미량으로 첨가하는 물질인 사료첨가물, 식이보조제가 있으나 이에 제한되지 않는다.

본 발명에 따른 망막 질환의 예방, 개선 또는 완화용 사료첨가제는 당업계에 공지된 다양한 사료 제조방법에 따라 적절한 유효 농도 범위에서 퓨코스테롤, 모자반, 모자반 분쇄물, 모자반 추출물, 톳, 톳 분쇄물 또는 톳 추출물을 첨가하여 제조 가능하다.

본 발명에 따른 사료 첨가제는 망막 질환의 예방, 개선 또는 완화를 목적으로 하는 개체이면 제한없이 적용가능하다. 예를 들면, 개, 고양이, 원숭이, 토끼, 모르모트, 랫트, 마우스, 소, 양, 돼지, 염소 등과 같은 비인간동물, 조류 및 어류 등 어느 개체에도 적용이 가능하다.

또한 본 발명은, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 염의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 망막 질환의 예방, 개선, 완화 또는 치료 방법을 제공한다.

본 발명에 따라 치료될 적합한 개체는 포유동물 개체를 포함한다. 본 발명에 따른 포유동물은, 이에 한정되는 것은 아니지만, 인간, 개(canine), 고양잇과동물(feline), 소(bovine), 염소(caprine), 말(equine), 양(ovine), 돼지(porcine), 설치류(rodents), 토끼목(lagomorphs), 영장류(primates) 등을 포함하고, 자궁 내의(in utero) 포유동물을 포함한다. 개체는 양쪽 성(性) 모두 일 수 있고 발생(development)의 임의의 단계일 수 있다.

본 발명에 따른 치료 방법의 투여 경로는, 정맥내, 복막내, 피하, 두개내, 진피내, 균육내, 안내, 척수강내, 뇌내, 비강내, 근육을 통하여, 흡입에 의해, 경구로, 직장으로, 점적, 패치 및 임플란트에 의한 것을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 일례로, 경구 투여, 정맥 주사 (주입 포함), 안구 국소 투여 (예, 안구주위 (예, 하위장부 (subTenon's)), 결막하, 안구내, 유리체내, 전방내, 망막하, 맥락막위 및 안구뒤 투여) 등에 의해 투여될 수 있다.

본 발명에 따라, 포유동물, 특히 인간에게 투여된 화학식 1로 표시되는 화합물또는 이의 염의 투여량은 목적 반응을 초래하기에 충분하여야 한다. 이러한 반응은 치료가 요구되거나 바람직한 이익을 초래하는, 질병의 부작용의 예방 또는 반전을 포함한다. 당업자는 투여량이 다양한 인자, 예컨대 연령, 상태, 인간의 체중, 및 공급원, 질병의 구체적인 유형, 및 인간의 질병의 정도에 의존할 것임을 인식할 것이다. 투여량의 크기는 투여의 경로, 시기 및 빈도, 및 특정 화합물의 투여 및 바람직한 생리학적 효과에 수반될 수 있는 임의의 부작용의 존재, 성질 및 정도에 의해 결정될 것이다. 다양한 병태 또는 질병 상태가 다중 투여를 비롯한 연장된 치료를 필요로 할 수 있음이 당업자에게 인정될 것이다.

본 발명의 적합한 투여량 및 투여 섭생법은 당업자에게 공지된 통상적인 범위-측정 기술에 의해 결정될 수 있다. 일반적으로, 치료는 화합물의 최적 투여량보다 적은 보다 작은 투여량으로 개시된다. 이어서, 투여량은 환경 하에 최적 효과가 도달될 때까지 적은 증분만큼 증가된다. 본 발명의 방법은 전형적으로 동물 또는 포유동물의 체중 1 kg 당 약 0.1 내지 약 300 mg의 하나 이상의 상기 화합물의 투여를 포함할 것이다.

투여된 화합물의 치료 효과량은 목적 효과 및 상기 제시된 인자에 따라 변할 수 있다. 전형적으로, 투여량은 대상의 체중을 기준으로 0.01 내지 250 ㎎/㎏, 더욱 전형적으로 약 0.05 내지 100 ㎎/㎏, 예컨대 약 0.2 내지 약 80 ㎎/㎏, 약 5 내지 약 40 ㎎/㎏ 또는 약 10 내지 약 30 ㎎/㎏일 것이다. 따라서, 단위 투여 형태는 상기 인용된 적합한 범위 및 대사의 체중을 기준으로 제형화될 수 있다. 본원에 사용된 용어 "단위 투여 형태"는 치료될 대상에게 적절한 치료제의 물리적으로 별개의 단위를 지칭한다.

다르게는, 투여량의 신체 표면적을 기준으로 계산되고, 약 1 내지 약 200 ㎎/m², 예컨대 약 5 내지 약 100 ㎎/m²이 매일 대상에게 투여될 것이다. 특정 양태에서, 치료 효과량의 화합물의 투여는 매일 약 5 내지 약 50 ㎎/m², 예컨대 약 10 내지 약 40 ㎎/m²를 대상에게 투여함을 포함한다. 현재, 화합물의 단일 투여량이 적합한 것으로 여겨지지만, 치료 효과적인 투여량은 연장된 기간에 걸쳐 또는 매일 다중 투여로 공급될 수 있다. 따라서, 단위 투여 형태는 또한 상기 인용된 적합한 범위 및 바람직한 투여 계획을 기준으로 대상의 신체 표면적을 사용하여 계산될 수 있다.

본 발명에 따른 치료 방법을 통하여 다양한 망막 질환을 예방, 완화, 개선 및 치료할 수 있다. 본 발명을 통해 색소성 망막염 (RP), 레베르 선천 흑암시 (LCA), 스타가르트병, 어셔 증후군, 맥락막 결여, 로드-콘 또는 콘-로드 디스트로피, 섬모병증, 미토콘드리아 장애, 진행성 망막 위축증, 퇴행성 망막 질환, 노인성 황반 변성 (AMD), 습성 황반 변성, 건성 황반 변성, 지도상 위축증, 가족형 또는 획득 황반병증, 망막 광수용체 질환, 망막 색소 상피-계 질환, 당뇨병성 망막증, 낭포성 황반 부종, 포도막염, 망막박리, 외상성 망막 손상, 의원성 망막 손상, 황반 원공, 황반 모세관 확장증, 신경절 세포 질환, 시신경 세포 질환, 녹내장, 시신경병증, 허혈성 망막 질환, 미숙아 망막증, 망막 혈관 폐색, 가족형 마크로아뉴리즘, 망막 혈관 질환, 안혈관 질환, 녹내장으로 인한 망막신경세포 퇴화 및 허혈성 시신경병증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 질환을 예방, 완화, 개선 및 치료할 수 있다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예 등을 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.

실시예 1. 본 발명 화합물의 망막세포사멸 억제 효능

총 18개의 후보물질 화합물에 대하여 하이컨텐츠 스크리닝 시스템 및 초고속 스크리닝 시스템을 이용해 망막색소상피세포 사멸 억제 효능을 확인하였다. 세포 사멸 관련 마커로써 Annexin V-FITC와 PI(프로피디움 요오드화물, Propidium iodide)를 선정하고 검출 조건을 최적화하였다. 아폽토시스(Apoptosis)의 경우 FITC⁺/PI^-, 네크로시스(Necrosis)의 경우 FITC^+/-/PI⁺ 로 나타난다.

인간 망막색소상피세포 ARPE-19에 각 후보물질 100 μM농도로 24시간 동안 처리하고, 대조군으로 루테인(Lutein) 10 μM 및 비타민 C 100 μM도 24시간 동안 각각 처리하였다. 그 다음, 과산화수소(H₂O₂)를 24시간 동안 처리한 후, 인산완충식염수로 세포를 세척하고 Annexin V-FITC와 PI를 각각 15분 및 5분 처리하여 염색시킨 뒤, 이미지를 관찰하였다. 이때, FITC와 PI의 여기/발광파장은 각각 490/525㎚와 536/617㎚로 설정하였다.

실험 결과, 총 18개의 후보물질 화합물 중에서 본 발명의 화합물인 프락세틴과 다프네틴에서 특히 V-FITC^-/PI^-로, 형광이 관찰되지 않았다(도 2).

상기 결과를 통해, 프락세틴과 다프네틴에서 세포 사멸 억제 효능이 있는 것을알 수 있다.

실시예 2. 본 발명 화합물의 활성산소종 제거 효능

세포 내 활성산소종 제거 효능은, ARPE-19 세포에 프락세틴은 1μM, 3μM, 10μM, 15μM, 20μM, 25μM, 30μM, 100 μM의 농도로, 다프네틴은 1μM, 3μM, 5μM, 10μM, 20μM, 30μM, 100 μM의 농도로 24시간 동안 처리하고 산화스트레스 유발인자를 처리한 뒤 2 시간 경과하기 30분 전에 CM-H₂DCFDA를 넣고 산화스트레스 유발 2시간 후에 여기파장 495㎚, 발광파장 525㎚에서 형광값을 측정하였다.

실험 결과, 본 발명의 화합물인 프락세틴과 다프네틴의 농도의 형광값은 농도가 증가할 수록 감소하는 양상을 띄었으며, 프락세틴은 IC₅₀ 농도 17.28 μM에 해당하였고, 다프네틴의 경우 IC₅₀ 농도가 14.73 μM에 해당하였다(도 3).

상기 결과를 통해, 본 발명의 화합물인 프락세틴과 다프네틴의 농도가 증가할수록 활성산소종 억제 효능이 유효하게 증가하는 것을 알 수 있다.

실시예 3. 본 발명 화합물의 네크로시스 억제 효능

ARPE-19 세포에 200 μM tBHP (tert-buthyl hydroperoxide)에 의해 산화스트레스를 유발한 결과, FITC^+/-/PI⁺로 나타남에 따라 망막색소상피세포 사멸은 네크로시스(necrosis)에 의한 것임을 확인하였다. 다음 실험을 통해, 본 발명의 화합물 프락세틴과 다프넥틴이 어떤 기전을 통해서 망막색소상피세포의 네크로시스를 억제하는지 세포 사멸 기전의 주요 인자(key molecule) 변화를 웨스턴 블랏(western blot)을 이용해서 확인하였다.

(1) 파이롭토시스(Pyroptosis) 관련 카스파제 1(caspase1)의 변화

ARPE-19 세포에 100 μM 비타민 C, 30 μM 루테인, 그리고 프락세틴 10 μM, 20 μM, 30 μM의 농도, 다프네틴 1 μM, 3 μM, 10 μM, 30 μM의 농도로 24 시간 동안 처리한 뒤, 200 μM tBHP (tert-buthyl hydroperoxide)에 의해 산화스트레스를 유발시켰다. 24시간 뒤 스크래퍼를 이용해서 세포를 모은 뒤, 용해해서 단백질만 추출하였다. 분리해 낸 단백질의 농도를 측정한 뒤 동일한 양을 로딩해서 SDS-PAGE를 100V에서 1시간 반 내지 2시간 동안 실시하였다. SDS-PAGE를 통해 분리된 단백질은 막(membrane)을 옮기는 트랜스퍼를 실시하고, 비특이적 결합을 피하기 위해 5% 우태아혈청 용액에서 30분 동안 블로킹하였다. 그 뒤 1차 항체(caspase1)를 붙이고 4℃에서 밤새 반응시켰다. 다음날 TBS-T로 세척한 뒤, HRP-2차 항체를 붙이고 상온에서 2시간 동안 반응시켰다. 그 이후 TBS-T로 세척하고, ESL과 반응 시킨 뒤, chemidot 기기를 이용해서 밴드를 검출하였다.

실험 결과, 프락세틴과 다프네틴 모두에서 처리되는 농도가 증가될 수록 카스파제 1(caspase 1) 단백질의 발현 정도가 낮았다(도 4).

상기 결과를 통해, 프락세틴과 다프네틴은 카스파제 1이 관여하는 파이롭토시스(Pyroptosis)에 의한 세포사멸이 억제되는 것을 알 수 있다.

(2) 네크롭토시스(Necroptosis) 관련 RIP1, RIP3, 그리고 p-MLKL의 변화

ARPE-19 세포에 100 μM 비타민 C, 30 μM 루테인, 그리고 프락세틴 10 μM, 20 μM, 30 μM의 농도, 다프네틴 1 μM, 3 μM, 10 μM, 30 μM의 농도로 24 시간 동안 처리한 뒤, 200 μM tBHP(tert-buthyl hydroperoxide)에 의해 산화스트레스를 유발시켰다. 24시간 뒤 스크래퍼를 이용해서 모든 세포를 용해(lysis)하여 단백질만 추출하였다. 분리된 단백질의 농도를 측정한 뒤, 동일한 양을 SDS-PAGE를 100V에서 1시간 반 내지 2시간 동안 수행하였다. SDS-PAGE는 트랜스퍼를 실시하여 막에 옮긴 뒤, 비특이적 결합을 피하기 위해 5% 우태아혈청 용액에서 30분 동안 블로킹하였다. 그 뒤 1차 항체 (RIP1, RIP3, 또는 p-MLKL)를 붙이고 4℃에서 밤새 반응시켰다. 다음날 TBS-T로 세척을 하고 HRP-2차 항체와 결합을 유도하기 위하여 상온에서 2시간동안 반응시켰다. 상기 HRP-2차 항체의 결합이 완료된 막을 TBS-T로 세척하고, ESL과 반응시킨 뒤, chemidot 기기를 이용해서 밴드를 검출하였다.

실험 결과, 프락세틴과 다프네틴 모두 농도가 각각 10 μM에서 30μM 또는 1μM에서 30μM로 처리되는 농도가 증가할 수록 RIP1와 p-MLKL의 단백질 발현 양이 증가하고, 동시에 RIP3의 양은 감소하였다(도 5).

상기 결과를 통해 프락세틴과 다프네틴은 네크롭토시스에 의한 세포사멸을 억제하는 효과가 있음을 알 수 있다.

(3) 파르사나토스(Parthanatos) 관련 PARP1의 변화

ARPE-19 세포에 100 uM 비타민 C, 30 uM 루테인, 그리고 프락세틴 10 μM, 20 μM, 30 μM의 농도, 다프네틴 1 μM, 3 μM, 10 μM, 30 μM의 농도로 24 시간 동안 처리한 뒤, 200 μM tBHP (tert-buthyl hydroperoxide)에 의해 산화스트레스를 유발시켰다. 24시간 뒤 스크래퍼를 이용해서 세포를 모은 뒤, 용해를 해서 단백질만 추출한다. 분리해낸 단백질의 농도를 측정한 뒤 동일한 양을 SDS-PAGE에 넣어, 100V에서 1시간 반 내지 2시간 동안 실시하였다. SDS-PAGE를 통해 분리된 단백질은 트랜스퍼를 통해 막에 옮긴 뒤, 비특이적 결합을 피하기 위해 5%우태아혈청 용액에서 30분 동안 블로킹하였다. 그 뒤 1차 항체 (PARP1)를 붙이고 4℃에서 밤새 반응 시켰다. 다음날 TBS-T로 세척을 하고 HRP-2차 항체와 상온에서 2시간동안 반응시켰다. 상기 반응이 완료된 막을 TBS-T로 세척하고, ESL과 반응시킨 뒤 chemidot 기기를 이용해서 밴드를 검출하였다.

실험 결과, 프락세틴과 다프네틴 모두 각각 10 μM 및 1μM의 낮은 농도뿐만 아니라, 가장 높은 농도인 30μM에서도 PARP1의 단백질 발현 양이 대조군에 해당하는 비타민 C 및 루테인 처리군 비교하여 차이가 없었다(도 6).

상기 결과를 통해, tBHP-유발 망막색소상피세포의 사멸 및 프락세틴과 다프네틴의 세포사멸 억제 표적은 PARP1이 관여하는 파르사나토스와는 무관함을 알 수 있다.

(4) 페롭토시스(Ferroptosis) 관련 GPX4의 변화

ARPE-19 세포에 100 μM 비타민 C, 30 μM 루테인, 그리고 프락세틴 10 μM, 20 μM, 30 μM의 농도, 다프네틴 1 μM, 3 μM, 10 μM, 30 μM의 농도로 24 시간 동안 처리한 뒤, 200uM tBHP(tert-buthyl hydroperoxide)에 의해 산화스트레스를 유발시켰다. 24시간 뒤 스크래퍼를 이용해서 세포를 모은 뒤, 용해를 해서 단백질만 추출한다. 분리해낸 단백질의 농도를 측정한 뒤 동일한 양을 로딩해서 SDS-PAGE를 100V에서 1시간 반 내지 2시간 동안 실시하였다. SDS-PAGE를 통해 분리된 단백질은 막을 옮기는 트랜스퍼를 실시하고, 비특이적 결합을 피하기 위해 5% 우태아혈청 용액에서 30분 동안 블로킹하였다. 그 뒤 1차 항체 (GPX4)를 붙이고 4℃에서 밤새 반응시켰다. 다음날 TBS-T로 세척을 하고 HRP-2차 항체와 상온에서 2시간동안 반응시켰다. 상기 반응이 완료된 막을 TBS-T로 세척하고, ESL과 반응시킨 뒤 chemidot 기기를 이용해서 밴드를 검출하였다.실험 결과, 프락세틴과 다프네틴 각각에서 처리되는 농도가 증가할 수록 GPX4의 단백질 발현양이 감소함을 확인할 수 있었다(도 7).

이로써, 프락세틴과 다프네틴은 GPX4 단백질이 관여하는 페롭토시스에 의한 세포사멸을 억제하는 효과가 있음을 확인할 수 있었다.

이상에서, 출원인은 본 발명의 바람직한 실시 예들을 설명하였지만, 이와 같은 실시예들은 본 발명의 기술적 사상을 구현하는 일 실시예일 뿐이며 본 발명의 기술적 사상을 구현하는 한 어떠한 변경예 또는 수정예도 본 발명의 범위에 속하는 것으로 해석되어야 한다.

Claims (11)

1. 다음 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 황반 변성의 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물:
   [화학식 1]
   

   

   
   상기 식에서, R은 수소 또는 메톡시임.
2. 제1항에 있어서,
   상기 황반 변성은 노인성 황반 변성 (AMD), 습성 황반 변성 및 건성 황반 변성으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 황반 변성의 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물.
3. 제1항에 있어서, 상기 황반 변성은 건성 황반 변성인 것을 특징으로 하는 황반 변성의 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물.
4. 제1항에 있어서,
   상기 약학 조성물은 안구 국소 투여용 안과용 조성물인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
5. 제4항에 있어서,
   상기 안구 국소 투여용 안과용 조성물은 점안액 또는 안연고제로 제형화되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
6. 다음 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 황반 변성의 예방, 개선 또는 완화용 식품 조성물:
   [화학식 1]
   

   

   
   상기 식에서, R은 수소 또는 메톡시임.
7. 제6항에 있어서,
   상기 황반 변성은 노인성 황반 변성 (AMD), 습성 황반 변성 및 건성 황반 변성으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 황반 변성의 예방, 개선 또는 완화용 식품 조성물.
8. 다음 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 황반 변성의 예방, 개선 또는 완화용 의약외품 조성물:
   [화학식 1]
   

   

   
   상기 식에서, R은 수소 또는 메톡시임.
9. 제8항에 있어서,
   상기 황반 변성은 노인성 황반 변성 (AMD), 습성 황반 변성 및 건성 황반 변성으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 황반 변성의 예방, 개선 또는 완화용 의약외품 조성물.
10. 하기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 황반 변성의 예방, 개선 또는 완화용 사료 첨가물:
    [화학식 1]
    

    

    
    상기 식에서, R은 수소 또는 메톡시임.
11. 제10항에 있어서,
    상기 황반 변성은 노인성 황반 변성 (AMD), 습성 황반 변성 및 건성 황반 변성으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 황반 변성의 예방, 개선 또는 완화용 사료 첨가물.

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