KR102050015B1 - 유산균의 생리활성을 증진시키는 방법 - Google Patents
유산균의 생리활성을 증진시키는 방법 Download PDFInfo
- Publication number
- KR102050015B1 KR102050015B1 KR1020180066262A KR20180066262A KR102050015B1 KR 102050015 B1 KR102050015 B1 KR 102050015B1 KR 1020180066262 A KR1020180066262 A KR 1020180066262A KR 20180066262 A KR20180066262 A KR 20180066262A KR 102050015 B1 KR102050015 B1 KR 102050015B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- lactic acid
- acid bacteria
- mushroom
- activity
- shiitake
- Prior art date
Links
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 222
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 title claims abstract description 130
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 title claims abstract description 111
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 title claims abstract description 111
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 title claims abstract description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 title claims abstract description 17
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 claims abstract description 66
- 239000013028 medium composition Substances 0.000 claims abstract description 51
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 43
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 240000000599 Lentinula edodes Species 0.000 claims description 27
- 240000001462 Pleurotus ostreatus Species 0.000 claims description 24
- 235000001603 Pleurotus ostreatus Nutrition 0.000 claims description 24
- 244000057717 Streptococcus lactis Species 0.000 claims description 23
- 235000014897 Streptococcus lactis Nutrition 0.000 claims description 23
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 claims description 23
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 claims description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 16
- 240000000111 Saccharum officinarum Species 0.000 claims description 13
- 235000007201 Saccharum officinarum Nutrition 0.000 claims description 13
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 12
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 11
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 241000192130 Leuconostoc mesenteroides Species 0.000 claims description 10
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 235000001715 Lentinula edodes Nutrition 0.000 claims description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 claims description 7
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 6
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 5
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 claims description 5
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 claims description 5
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims description 3
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000008213 purified water Substances 0.000 claims description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 20
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 abstract description 9
- 238000012258 culturing Methods 0.000 abstract description 4
- 230000036039 immunity Effects 0.000 abstract description 4
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 abstract description 4
- 208000028774 intestinal disease Diseases 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 abstract description 3
- 239000006188 syrup Substances 0.000 abstract 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 abstract 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 57
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 33
- 101710148162 Pyrokinin-2 Proteins 0.000 description 19
- 101710204616 Pyruvate kinase 2 Proteins 0.000 description 19
- 101710185137 Pyruvate kinase II Proteins 0.000 description 19
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 14
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 12
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 8
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 8
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 7
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 7
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 6
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 6
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 6
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 6
- HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N (2s,4r)-4-[(3r,5s,6r,7r,8s,9s,10s,13r,14s,17r)-6-ethyl-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]-2-methylpentanoic acid Chemical compound C([C@@]12C)C[C@@H](O)C[C@H]1[C@@H](CC)[C@@H](O)[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)C[C@H](C)C(O)=O)CC[C@H]21 HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N 0.000 description 5
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 5
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 5
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 5
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 5
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 5
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 4
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 description 4
- 241000186779 Listeria monocytogenes Species 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 4
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 4
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 244000252132 Pleurotus eryngii Species 0.000 description 3
- 235000001681 Pleurotus eryngii Nutrition 0.000 description 3
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 3
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 3
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 3
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 3
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 3
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 3
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 3
- HVBSAKJJOYLTQU-UHFFFAOYSA-N 4-aminobenzenesulfonic acid Chemical compound NC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 HVBSAKJJOYLTQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000193755 Bacillus cereus Species 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- 241000588915 Klebsiella aerogenes Species 0.000 description 2
- 241000178948 Lactococcus sp. Species 0.000 description 2
- 241000192132 Leuconostoc Species 0.000 description 2
- 241001627205 Leuconostoc sp. Species 0.000 description 2
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 2
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 2
- 241001354013 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis Species 0.000 description 2
- 241000607760 Shigella sonnei Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 229940092559 enterobacter aerogenes Drugs 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 2
- 230000007760 free radical scavenging Effects 0.000 description 2
- 239000004519 grease Substances 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 2
- 239000006152 selective media Substances 0.000 description 2
- 229940115939 shigella sonnei Drugs 0.000 description 2
- VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N sodium nitrate Chemical compound [Na+].[O-][N+]([O-])=O VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N tetrachloromethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)Cl VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 2
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 2
- 210000004340 zona pellucida Anatomy 0.000 description 2
- 240000006439 Aspergillus oryzae Species 0.000 description 1
- 235000002247 Aspergillus oryzae Nutrition 0.000 description 1
- 241000193818 Atopobium Species 0.000 description 1
- 241000304886 Bacilli Species 0.000 description 1
- 241000219310 Beta vulgaris subsp. vulgaris Species 0.000 description 1
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 241000206594 Carnobacterium Species 0.000 description 1
- 241001107116 Castanospermum australe Species 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- YCAGGFXSFQFVQL-UHFFFAOYSA-N Endothion Chemical compound COC1=COC(CSP(=O)(OC)OC)=CC1=O YCAGGFXSFQFVQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241001360526 Escherichia coli ATCC 25922 Species 0.000 description 1
- 206010016952 Food poisoning Diseases 0.000 description 1
- 208000019331 Foodborne disease Diseases 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 206010022678 Intestinal infections Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N Methicillin Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C(=O)N[C@@H]1C(=O)N2[C@@H](C(O)=O)C(C)(C)S[C@@H]21 RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000202223 Oenococcus Species 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 241000192001 Pediococcus Species 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 208000004880 Polyuria Diseases 0.000 description 1
- 238000010632 SOD assay Methods 0.000 description 1
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 235000021536 Sugar beet Nutrition 0.000 description 1
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000500334 Tetragenococcus Species 0.000 description 1
- 241000207194 Vagococcus Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 235000013527 bean curd Nutrition 0.000 description 1
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 235000021279 black bean Nutrition 0.000 description 1
- UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N bromophenol blue Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 235000014048 cultured milk product Nutrition 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 102000038379 digestive enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108091007734 digestive enzymes Proteins 0.000 description 1
- 239000013024 dilution buffer Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000035619 diuresis Effects 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- FTSSQIKWUOOEGC-RULYVFMPSA-N fructooligosaccharide Chemical compound OC[C@H]1O[C@@](CO)(OC[C@@]2(OC[C@@]3(OC[C@@]4(OC[C@@]5(OC[C@@]6(OC[C@@]7(OC[C@@]8(OC[C@@]9(OC[C@@]%10(OC[C@@]%11(O[C@H]%12O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]%12O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]%11O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]%10O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]9O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]8O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]7O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]6O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]5O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]4O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]3O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]2O)[C@@H](O)[C@@H]1O FTSSQIKWUOOEGC-RULYVFMPSA-N 0.000 description 1
- 229940107187 fructooligosaccharide Drugs 0.000 description 1
- 239000008369 fruit flavor Substances 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 1
- 229940083124 ganglion-blocking antiadrenergic secondary and tertiary amines Drugs 0.000 description 1
- 210000004211 gastric acid Anatomy 0.000 description 1
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 230000008821 health effect Effects 0.000 description 1
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000007413 intestinal health Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229960003085 meticillin Drugs 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 1
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000004005 nitrosamines Chemical class 0.000 description 1
- XKLJHFLUAHKGGU-UHFFFAOYSA-N nitrous amide Chemical compound ON=N XKLJHFLUAHKGGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 238000012261 overproduction Methods 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 229960002181 saccharomyces boulardii Drugs 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000009759 skin aging Effects 0.000 description 1
- 230000037380 skin damage Effects 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000010344 sodium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004317 sodium nitrate Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 229950000244 sulfanilic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- -1 water 20-30% Chemical class 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/38—Chemical stimulation of growth or activity by addition of chemical compounds which are not essential growth factors; Stimulation of growth by removal of a chemical compound
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/21—Streptococcus, lactococcus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/31—Leuconostoc
-
- A23Y2240/00—
-
- A23Y2260/00—
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
본 발명은 유산균의 생리활성을 증진시키는 방법 및 유산균의 생리활성 증진용 유산균 배지 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 의하면 유산균의 생리활성이 증가되는 효과가 있다.
또한, 본 발명의 버섯 추출물 및 당밀 등을 포함하는 유산균 배지 조성물에 유산균을 접종하고 배양하여 얻은 유산균 배양물은 인체에 유해한 성분이 없어 그 자체로 식용으로 이용되기에 적합하며, 상기 조성물에 포함되어 있는 유산균은 생리활성이 증가할 뿐만 아니라 미백 활성 또는 다양한 균에 대한 항균 활성이 증진되므로, 섭취하는 경우 장까지 살아서 도달하기 쉽고 장내 균총을 조절하여 각종 장 질환을 억제하고 면역력을 증가시킬 수 있게 된다.
본 발명에 의하면 유산균의 생리활성이 증가되는 효과가 있다.
또한, 본 발명의 버섯 추출물 및 당밀 등을 포함하는 유산균 배지 조성물에 유산균을 접종하고 배양하여 얻은 유산균 배양물은 인체에 유해한 성분이 없어 그 자체로 식용으로 이용되기에 적합하며, 상기 조성물에 포함되어 있는 유산균은 생리활성이 증가할 뿐만 아니라 미백 활성 또는 다양한 균에 대한 항균 활성이 증진되므로, 섭취하는 경우 장까지 살아서 도달하기 쉽고 장내 균총을 조절하여 각종 장 질환을 억제하고 면역력을 증가시킬 수 있게 된다.
Description
본 발명은 유산균의 생리활성을 증진시키는 방법 및 유산균의 생리활성을 증진용 유산균 배지 조성물에 관한 것이다.
유산균(lactic acid bacteria)은 당류를 에너지원으로 사용하여 유산을 생성하는 세균으로 사람이나 포유동물의 소화관, 구강 및 질 등에서 발견되며, 각종 발효식품 등 자연계에 널리 분포되어 있다. 유산균은 인류가 가장 오랫동안 광범위하게 활용하고 있는 미생물 중 하나로서, 사람이나 동물의 장에 해로운 물질을 생성하지 않으며 장내에서 부패를 방지하는 순기능을 가진 미생물이다.
현재 유산균은 12개 속(Lactobacillus, Carnobacterium, Atopobium, Lactococcus, Pediococcus, Tetragenococcus, Leuconostoc, Weisella, Oenococcus, Enterococcus, Streptococcus, Vagococcus)으로 분류되며 일반적으로 우리가 사용하고 있는 유산균은 간균인 락토바실러스(Lactobacillus), 구균인 락토코커스 종(Lactococcus), 스트렙토코커스(Streptococcus), 류코노스톡(Leuconostoc), 그리고 페디오코커스 종(Pedicoccus) 등이다(BioWave, 2009, Vol. 11, No. 7, pp. 1-20).
한편, 프로바이오틱스(probiotics)란 숙주에게 건강효과를 나타내는 살아있는 미생물 또는 살아있는 미생물이 함유된 식품을 말하며(FAO/WHO 2001), 인체의 장내 미생물을 정상적인 수준으로 유지하고 조절하는 중요한 기능을 가지고 있다. 대표적인 프로바이오틱스로는 유산균과 비피더스(Bifidobacterium)가 있으며 그 외 효모(Saccharomyces cerevisiae와 Saccharomyces boulardii)와 사상균(Aspergillus oryzae) 등이 있다(BioWave, 2009, Vol. 11 No. 7, pp. 1-20).
유산균은 대표적인 프로바이오틱스로서, 항균 효과뿐만 아니라 숙주의 장내 균총(microflora)을 조절하여 각종 장 질환을 억제하고 면역력을 증강시키는 등 여러 측면에서 인간에 유익한 효과를 나타내기 때문에, 다양한 식품 소재로 개발하기 위한 관심이 높다. 이러한 유산균은 발효유 제품을 중심으로 각종 발효 식품, 장류, 음료, 의약품, 가축의 사료 첨가제 등에 이르기까지 인류 생활에 광범위하게 활용되고 있다. 최근에는 유산균의 영양적인 효과와 더불어 숙주의 장내에서 유산균의 다양한 건강 기능성을 강조한 연구들이 많이 이루어지고 있다.
한편, 다른 산업용 미생물과 달리 유산균 등의 프로바이오틱스 제품은 생균 자체를 이용하기 때문에 섭취 후, 장에 도달하기 전에 인체 내에서 다양한 스트레스에 노출된다. 위장에서는 pH 3 이하로 떨어지는 산성 환경에 노출되고 소장에서는 분비되는 소화효소와 담즙산 등의 영향을 받아 생존율이 크게 감소할 수 있다. 또한 장에 도달해서도 기존 장내 정착한 미생물과 경쟁함과 동시에 각종 유해 성분과 활성산소 등에 의한 성장 저해를 받게 된다(Immunology and Cell Biology, 2000, Vol. 78, pp. 8088; Am J Clin Nutr, 2001, Vol. 73, pp. 393S398S(suppl); Probiotic Bacteria and Enteric Infections, 2011, Chap. 2, pp. 41-63).
본 발명자들은 상기와 같은 문제점을 해결하고자 유산균의 생리활성을 증가시키기 위한 방법을 모색하는 과정에서, 표고버섯 및 느타리버섯의 추출물을 포함하는 배지 조성물에 유산균을 접종 및 배양하는 경우 유산균의 다양한 생리활성이 현저히 증가되는 것을 발견하고 본 발명을 완성하기에 이르렀다.
본 발명의 해결하고자 하는 과제는 유산균을 버섯 함유 배지 조성물에서 배양함으로써 유산균의 생리활성을 증진시키는 방법을 제공하는 것이다.
상기한 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 유산균을 버섯 함유 배지 조성물에서 배양하는 것을 특징으로 하는 유산균의 생리활성을 증진시키는 방법을 제공한다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 생리활성은 미백활성, 항균활성, 항산화 활성, 내산성 및 내담즙성으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 활성일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 유산균은 락토코커스(Lactococcus sp.) 및 류코노스톡(Leuconostoc sp.) 중에서 선택되는 1종 이상일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 유산균은 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) 또는 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 유산균은 표고버섯 유래의 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) 또는 느타리버섯 유래의 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 버섯은 표고버섯 및 느타리버섯 중에서 선택되는 1종 이상의 버섯 추출물일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 버섯 추출물은 표고버섯 및 느타리버섯 중에서 선택된 1종 이상의 버섯자실체를 고형분 기준으로 1 중량부에 대하여 5 내지 15 중량부의 물을 첨가하여 추출한 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 버섯 추출물은 표고버섯과 느타리버섯이 1:0.5~1.5의 중량비로 혼합된 버섯의 추출물일 수 있다.
본 발명은 또한, 표고버섯 및 느타리버섯 중에서 선택된 1종 이상의 버섯 추출물, 및 당밀 및 사탕수수 중에서 선택되는 1종 이상의 탄소원을 포함하는, 유산균의 생리활성 증진용 유산균 배지 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 배지 조성물은 상기 버섯 추출물 5 내지 20 중량%, 당밀 또는 사탕수수 중에서 선택되는 1종 이상의 탄소원 1 내지 10 중량%, 콩가루 1 내지 10 중량%, 올리고당 및 꿀 중에서 선택되는 1종 이상의 당류 1 내지 10 중량%, 소금 0.5 내지 1 중량% 및 잔량의 정제수를 포함하는 것일 수 있다.
또한, 본 발명은 유산균을 버섯 함유 배지에서 배양하는 것을 특징으로 하는 미백 활성 또는 항균 활성이 증진된 유산균 배양물의 제조방법을 제공한다.
본 발명에 의하면 유산균의 생리활성이 증가되는 효과가 있다.
또한, 본 발명의 버섯 추출물 및 당밀 등을 포함하는 유산균 배지 조성물에 유산균을 접종하고 배양하여 얻은 유산균 배양물은 인체에 유해한 성분이 없어 그 자체로 식용으로 이용되기에 적합하며, 상기 조성물에 포함되어 있는 유산균은 생리활성이 증가할 뿐만 아니라 미백 활성 또는 다양한 균에 대한 항균 활성이 증진되므로, 섭취하는 경우 장까지 살아서 도달하기 쉽고 장내 균총을 조절하여 각종 장 질환을 억제하고 면역력을 증가시킬 수 있게 된다.
도 1은 대조군(왼쪽) 및 비교예 1(오른쪽)에 따른 배지 조성물에서 배양된 PK-2 균 배양 농축액의 항균 활성을 나타내는 사진이다.
도 2는 대조군(왼쪽) 및 비교예 1(오른쪽)에 따른 배지 조성물에서 배양된 NK-3 균 배양 농축액의 항균 활성을 나타내는 사진이다.
도 3은 비교예 3(왼쪽) 및 실시예 1(오른쪽)에 따른 배지 조성물에서 배양된 PK-2 균 배양 농축액의 항균 활성을 나타내는 사진이다.
도 4는 비교예 3(왼쪽) 및 실시예 1(오른쪽)에 따른 배지 조성물에서 배양된 NK-3 균 배양 농축액의 항균 활성을 나타내는 사진이다.
도 5는 비교예 4(왼쪽) 및 실시예 2(오른쪽)에 따른 배지 조성물에서 배양된 PK-2 균 배양 농축액의 항균 활성을 나타내는 사진이다.
도 6은 비교예 4(왼쪽) 및 실시예 2(오른쪽)에 따른 배지 조성물에서 배양된 NK-3 균 배양 농축액의 항균 활성을 나타내는 사진이다.
도 2는 대조군(왼쪽) 및 비교예 1(오른쪽)에 따른 배지 조성물에서 배양된 NK-3 균 배양 농축액의 항균 활성을 나타내는 사진이다.
도 3은 비교예 3(왼쪽) 및 실시예 1(오른쪽)에 따른 배지 조성물에서 배양된 PK-2 균 배양 농축액의 항균 활성을 나타내는 사진이다.
도 4는 비교예 3(왼쪽) 및 실시예 1(오른쪽)에 따른 배지 조성물에서 배양된 NK-3 균 배양 농축액의 항균 활성을 나타내는 사진이다.
도 5는 비교예 4(왼쪽) 및 실시예 2(오른쪽)에 따른 배지 조성물에서 배양된 PK-2 균 배양 농축액의 항균 활성을 나타내는 사진이다.
도 6은 비교예 4(왼쪽) 및 실시예 2(오른쪽)에 따른 배지 조성물에서 배양된 NK-3 균 배양 농축액의 항균 활성을 나타내는 사진이다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 본 발명은 유산균을 버섯 함유 배지 조성물에서 배양하는 것을 특징으로 하는 유산균의 생리활성을 증진시키는 방법을 제공한다.
유산균 바이오매스(biomass)와 발효액의 산업적 이용에서 가장 중요한 요인은 배양 배지(cultural media)이다. 이 중에서도 MRS 배지는 유산균의 배양을 위해 널리 알려진 선택배지 및 분별배지이다. 그러나 상기 MRS 배지는 유산균의 생장에는 최적의 배지임에도 불구하고 상기 배지에서 배양된 유산균이나 배양액을 섭취하였을 경우에 인체에 유해한 것으로 알려져 있다. 이에 따라 유산균의 산업적인 생산을 위한 식용배지에 대한 많은 연구들이 있어왔다. 그러나 기존에 알려진 대표적인 유산균 배양용 배지들의 조성물에는 프락토올리고당, 펩톤, 유당, 탈지분유, 대두펩티드, 다양한 종류의 비타민 등이 비교적 값비싼 성분들이 다양하게 포함되어있으며, 다양한 각각의 균주의 특성에 따른 배지조성이 복잡한 것으로 알려져 있다.
이에 대하여, 본 발명자들은 식용 가능한 유산균을 쉽게 대량으로 생산할 수 있는 배지 조성물의 조성에 대하여 연구하던 중, 유산균을 버섯 함유 배지 조성물, 특히 표고버섯 및 느타리버섯 중에서 선택된 1종 이상의 버섯 추출물, 및 당밀 및 사탕수수 중에서 선택되는 1종 이상의 탄소원을 포함하는 배지 조성물에서 배양하는 경우 유산균의 생리활성이 증진됨을 구체적으로 확인하여 본 발명을 완성하게 되었다.
한편, 유산균의 배양에는 다양한 조성의 배지가 특별한 제한이 없이 이용될 수 있으나, MRS 배지의 경우 선택배지 및 분별배지로서 유산균의 생장 또는 생리활성 증진에 최적의 배지인 것으로 알려져 있어 활용가치가 높다. 그러나 상기 MRS 배지는 주로 연구용으로 사용될 뿐 식용으로 이용하는 것이 불가능하므로, 상기 MRS 배지를 이용하여 유산균 음료를 제조할 수는 없다.
본 발명에 의하면, 유산균의 생리활성이 증진될 뿐만 아니라 유산균 배양액 자체를 식용 또는 음용으로 활용할 수 있어 식품 또는 음료 산업에 유용하게 이용될 수 있다.
본 발명에 의하면, 유산균 배양에서 버섯 함유 배지 조성물을 첨가함으로써 유산균의 생리활성을 증진시킬 수 있게 된다.
상기 생리활성은 미백활성, 항균활성 및 항산화 활성, 내산성, 내담즙성으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 활성일 수 있다.
먼저, 본 발명에서 상기 유산균은 락토코커스 속(Lactococcus sp.) 또는 류코노스톡 속(Leuconostoc sp.)일 수 있다.
구체적으로, 상기 유산균은 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) 또는 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)일 수 있다. 또한, 본 발명에 적합한 유산균은 표고버섯 유래의 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) 또는 느타리버섯 유래의 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)일 수 있다.
또한, 본 발명의 버섯 함유 배지 조성물에서 상기 버섯은 표고버섯 및 느타리버섯 중에서 선택된 1종 이상의 버섯 추출물일 수 있다.
버섯(mushroom)은 분류학상 고등균류 중 담자균아강(Basidiomycotina)에 속하며, 풍미가 뛰어나고, 탄수화물, 단백질, 지질, 무기질, 비타민 및 미네랄 등의 각종 영양소를 다양하게 함유하고 있으며, 다양한 생리활성 물질들을 생산하여, 예로부터 식용 및 약용으로 널리 이용되어왔다. 특히 표고버섯과 느타리버섯은 영양학적 또는 약리학적으로 많은 연구가 진행되어 오고 있다.
식용으로 널리 이용되고 있는 표고버섯은 항암작용, 콜레스테롤 저하작용, 강장, 이뇨, 고혈압, 신장염, 천식, 위궤양 등의 치료에도 효능이 있어 약용으로도 널리 이용되고 있으며, 표고버섯의 열수 추출물은 혈청 및 간장의 지질 저하 작용 및 간손상 억제 작용이 보고된 바 있다.
또한, 느타리버섯의 다당류 추출물에는 혈청 콜레스테롤 저하 효과 및 사염화탄소 유발 간손상 억제 효과가 있다고 알려져 있으며, 느타리버섯 자실체 및 균사체의 추출물에는 항산화 효과가 있는 것으로 보고된 바 있다.
본 발명의 배지 조성물에는 상기 표고버섯 및 느타리버섯 중에서 선택된 1종 이상의 버섯의 추출물, 바람직하게는 표고버섯 및 느타리버섯이 혼합된 버섯의 추출물이 포함될 수 있다. 이 경우, 표고버섯과 느타리 버섯은 고형분을 기준으로 1:0.5~1.5의 중량비로 혼합된 것이 바람직하다.
상기 버섯 추출물은 표고버섯 및 느타리버섯 중에서 선택된 1종 이상의 버섯자실체를 고형분 기준으로 1 중량부에 대하여 5 내지 15 중량부의 물을 첨가하고 추출하여 제조된 것일 수 있다.
또한, 본 발명은 표고버섯 및 느타리버섯 중에서 선택된 1종 이상의 버섯 추출물, 및 당밀 및 사탕수수 중에서 선택되는 1종 이상의 탄소원을 포함하는, 유산균의 생리활성 증진용 유산균 배지 조성물을 제공한다.
상기 당밀(molasses)은 사탕무나 사탕수수에서 사탕을 뽑아내고 남은 검은빛의 즙액으로서, 설탕을 제조할 때에 부산물로 생산되는 자당을 함유하는 액체의 총칭을 의미한다. 당밀은 일반적으로 담황색의 투명하고 점조한 당액으로서 주로 수분 20~30%, 당분 60~70%(이중 자당 20~30%, 환원당 30~50%), 회분 5~10%, 유기비당분 2~3%으로 구성되어 있다. 상기 당밀은 주로 탄소원을 포함하고 있으며, 그 외 다양한 종류의 미네랄, 비타민, 생장소 등을 포함하고 있다. 액상이나 과립 형태를 사용할 수 있다.
상기 사탕수수는 벼과 다년초로서 쿠바, 태국, 호주 등 연평균 기온이 20℃ 이상인 열대, 아열대 지역에서 재배되며 줄기에 10~20%의 당분이 들어 있다.
상기 당밀 또는 사탕수수에는 기본적으로 다양한 비타민, 미네랄, 생장에 필요한 생장요소(growth factors) 등이 다량 포함되어 있다. 비타민과 미네랄은 정상적인 유산균 생장에 필요한 조성물로서 반드시 첨가되어야 하지만, 상기 당밀 또는 사탕수수를 이용하면 다양한 종류의 비타민이나 미네랄을 별도로 첨가하는 절차나 번거로움을 피할 수 있어 바람직하다.
본 발명의 배지 조성물은 상기 버섯 추출물 5 내지 20 중량%, 당밀 또는 사탕수수 중에서 선택되는 1종 이상의 탄소원 1 내지 10 중량%, 콩가루 1 내지 10 중량%, 올리고당 및 꿀 중에서 선택되는 1종 이상의 당류 1 내지 10 중량% 및 잔량의 정제수를 포함할 수 있다. 상기 배지 조성물은 소금 등의 무기물을 0.5 내지 1 중량% 추가하여 포함할 수 있다.
상기 버섯 추출물은 5 내지 20 중량%, 바람직하게는 6 내지 15 중량%로 포함될 수 있고, 상기 버섯 추출물이 상기 하한치 미만으로 포함하는 경우에는 상기 버섯 추출물로 인한 효과가 미미하여 본 발명에서 기대하는 효과가 나타나기 어렵고, 상기 상한치를 초과하는 경우에는 오히려 상기 배지 조성물로 배양되는 유산균의 생리활성이 감소하므로 바람직하지 않다.
상기 콩가루는 유산균 생장에서 주로 질소원으로 이용되며, 본 발명에서는 검정콩을 사용하였으며, 날콩 또는 살짝 볶은콩을 미세 분쇄하여 사용할 수 있다.
상기 당류도 당밀에서와 유사한 성분을 포함하고 있고, 탄소원으로 사용되며, 액상이나 과립의 형태로 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 유산균을 버섯 함유 배지에서 배양하는 것을 특징으로 하는 미백 활성 또는 항균 활성이 증진된 유산균 배양물의 제조방법을 제공한다.
상기 방법에 따라 제조된 유산균 배양물은 인체에 유해한 성분이 없어 그 자체로 식용으로 이용되기에 적합하며, 상기 배양물에 포함되어 있는 유산균은 생리활성이 증가할 뿐만 아니라 다양한 균에 대한 항균 활성이 증가하므로, 섭취하는 경우 장까지 살아서 도달하기 쉽고 장내 균총을 조절하여 각종 장 질환을 억제하고 면역력을 증가시킬 수 있게 된다. 또한, 상기 유산균 배양물은 티로시나제 저해 활성, 즉 미백 활성이 증가하므로, 멜라닌 과잉생산으로 인한 색소침착, 피부노화 및 손상 등을 방지할 수 있게 된다.
본 발명은 또한, 상기 유산균 배양물을 포함하는 식품 조성물을 제공한다. 상기 식품 조성물은 당 업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다. 본 발명에 의하면 상기 식품 조성물에서 상기 유산균 배양물의 함량은 전체 식품 조성물 총 중량에 대하여 5 내지 100 중량%로 함유될 수 있으며, 바람직하게는 10 내지 60 중량%로 함유될 수 있다. 상기 유산균 배양물의 함량이 상기 범위 미만인 경우에는 유산균 배양물에 의한 효과를 기대하기 어려운 문제가 있다.
상기 식품 조성물의 구체적인 예로서 본 발명의 유산균 배양물을 과립화, 캡슐화 또는 분말화하여 건강기능식품의 형태로 섭취할 수 있다.
본 발명은 또한, 상기 유산균 배양물을 포함하는 음료 조성물을 제공한다. 상기 음료 조성물에는 맛 또는 풍미를 위하여, 탄산, 다양한 과일향, 다양한 맛, 다양한 당류 등이 더 포함될 수 있다.
이하, 실시예에 의하여 본 발명을 상세히 설명하겠으나, 다음 실시예에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.
실시예
버섯 유래 유산균의 분리 및 배양
유기농 표고버섯과 느타리버섯을 구입하고, 이들 버섯으로부터 유산균을 농화 분리하고자 하였다.
이를 위하여 먼저, 각각의 버섯을 잘게 잘라 100 ㎖의 멸균된 0.82% 생리식염수(physiological saline)가 담긴 플라스크에 넣고 37℃의 분당 160회 회전하는 배양기에서 30분간 진탕한 후, 꺼내어 2시간 동안 부유물이 가라앉을 때까지 방치하였다. 0.002% bromophenol blue가 첨가된 MRS(Difco Co., Detroit, MI, USA) 고체평판배지에 100 ㎕의 상등액을 도말하고, 37℃에서 48 시간 동안 배양하였다. 배양된 고체배지 상에서 노란색을 띠는 집락을 선별하였으며, 3회에 걸쳐 순수배양의 계대를 통하여 6개의 유산균을 분리하였다. 이 균주들 가운데 균주의 생육과정에서 산을 생성하여 노란색을 띠는 2개의 균주를 선별하였다. 상기 선별된 균주는 표고버섯으로부터 분리된 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) PK-2 균주 및 느타리버섯으로부터 분리된 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) NK-3 균주였다. 각각의 분리세균은 MRS액체배지에 접종하여 진탕배양기(37℃, 160 rpm)에서 배양 유지하며 본 실험에 사용하였다.
버섯 추출물의 제조
시중에 판매 중인 표고버섯과 느타리버섯을 5 : 5로 혼합한 혼합물을 세절한 후, 생리식염수 100 ㎖가 들어있는 플라스크에 상기 세절한 버섯 10 g을 넣고 믹서로 갈아 버섯 분쇄액을 획득하였다. 그리고 상기 분쇄액을 4,000 rpm으로 10분간 원심분리한 후, 그 상등액을 공극이 0.45 ㎛인 membrane filter로 여과시켜 버섯추출물을 제조하였다.
유산균 배지 조성물의 제조
상기 버섯 추출물을 5 중량%, 10 중량%, 15 중량% 및 20 중량%로 포함하는 배지 조성물을 이용하여 유산균을 배양하였다. 이 경우, 버섯 추출물을 10 중량%로 포함하는 배지 조성물로 배양한 경우에 유산균의 생리활성 증진 효과가 가장 우수하였다. 이에 따라, 버섯 추출물을 10 중량%로 포함하는 배지 조성물을 중심으로 실험을 진행하였다.
하기 표 1의 조성에 따라 유산균 배지 조성물을 각각 제조하였다.
| 구분(중량%) | 실시예 1 | 실시예 2 | 실시예 3 | 비교예 2 | 비교예 3 | 비교예 4 |
| 버섯 추출물 | 10 | 10 | 20 | 10 | - | - |
| 당밀 | 5 | - | 5 | - | 5 | - |
| 사탕수수 | - | 5 | - | - | - | 5 |
| 콩가루 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 |
| 꿀 | 3 | 3 | 3 | 8 | 3 | 3 |
| NaCl | 0.82 | 0.82 | 0.82 | 0.82 | 0.82 | 0.82 |
| 증류수 | 잔량 | 잔량 | 잔량 | 잔량 | 잔량 | 잔량 |
| 총합 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
대조군으로는 유산균 배양을 위해서는 최적의 배지이지만 식용이 불가능한 MRS 배지를 이용하였다. 이때, 비교예 1의 배지 조성물로는 상기 버섯 추출물을 10 중량% 포함하는 MRS 배지를 이용하였다.
또한, 비교예 2의 배지 조성물의 경우, 당밀 또는 사탕수수 대신 탄소원으로써 당밀 등과 성분이 유사한 꿀을 8 중량%로 포함하도록 하였다.
유산균 배양물의 제조
상기 대조군, 실시예 또는 비교예의 배지 조성물에 상기 버섯 유래 유산균(락토코커스 락티스 PK-2 균주 또는 류코노스톡 메센테로이데스 NK-3 균주)을 각각 3 %(w/v) 접종한 후, 진탕배양기(37 ℃, 160 rpm)에서 72 시간 동안 배양하여 대조군, 실시예 또는 비교예에 따른 유산균 배양물을 제조하였다.
각각의 배지 조성물로부터 24 시간 간격으로 배양 상등액 1 ㎖를 취한 뒤, 상기 배양 상등액을 13,000 rpm에서 3 분간 원심분리하여 얻어진 상등액을 본 실험에서 사용하였다.
실험예
실험예 1: 내산성 측정
유산균의 위산에 대한 내성을 확인하기 위하여 인공 위액 조건에서 저항성 측정을 실시하였다. 락토코커스 락티스 PK-2와 류코노스톡 메센테로이데스 NK-3을 버섯추출물이 미첨가된 배지(0%)와 첨가된 배지(10%)에서 48시간동안 배양한 동량의 균체를 인공 위액 조건에서 2시간동안 노출시킨 후, 고체평판배지에 도말하여 생성되는 집락의 수를 계수하여 생존율을 비교하였다.
먼저, 인공 위액 조건을 조성하기 위하여 대조군, 실시예 및 비교예에 따른 배지 조성물에 1 ㎎/㎖의 pepsin(Sigma, USA)을 각각 첨가하여 pH를 2.5로 조정한 후, 상기 배지 조성물에 각각 유산균을 접종하고, 37℃의 분당 160회 회전하는 진탕배양기에서 48시간 동안 배양하였다. 배양액을 1 ㎖ 취하여 13,000 rpm에서 3분간 원심분리한 후, 균체를 회수하고 인공 위액조건의 상기 배지 조성물에 동량의 균주를 접종하였다. 37℃의 배양기에서 2시간동안 처리하였으며, PBS (phosphate buffered saline)로 3회 세척한 뒤, 100 ㎕의 시료를 희석하여, 대조군, 실시예 및 비교예에 따른 조성의 고체 배지에 각각 도말하였다. 도말한 고체배지는 37℃에서 48시간 동안 배양하여 생성된 집락의 수를 측정하여 하기 표 2에 나타내었다.
| 구분 | 생존율(%) | |
| 락토코커스 락티스 PK-2 | 류코노스톡 메센테로이데스 NK-3 | |
| 실시예 1 | 78.2 | 67.8 |
| 실시예 2 | 77.3 | 65.8 |
| 실시예 3 | 76.9 | 65.6 |
| 대조군 | 57.8 | 34.5 |
| 비교예 1 | 72.3 | 72.8 |
| 비교예 2 | 75.1 | 64.2 |
| 비교예 3 | 73.9 | 63.1 |
| 비교예 4 | 74.2 | 62.7 |
실험예 2: 내담즙성 측정
유산균의 담즙산 조건에서의 내성을 조사하기 위하여 인공 담즙산 조건에서의 내성을 측정하였다. 락토코커스 락티스 PK-2와 류코노스톡 메센테로이데스 NK-3을 버섯추출물이 미첨가된 배지(0%)와 첨가된 배지(10%)에서 48시간동안 배양한 동량의 균체를 인공 담즙산 조건에서 6시간동안 노출시킨 후, 고체평판배지에 도말하여 생성되는 집락의 수를 계수하여 생존율을 비교하고자 하였다.
먼저, 인공 담즙산 조건을 조성하기 위하여 pH를 8.0으로 조정한 대조군, 실시예 및 비교예에 따른 배지 조성물에 1 ㎎/㎖의 bile salt(Sigma, USA)를 각각 첨가하여 사용하였다. 그리고, 각각의 배지 조성물에 각 균주를 접종하여 진탕배양기(37℃, 160 rpm)에서 48시간동안 배양하였다. 이후, 배양액 1 ㎖을 취하여 13,000 rpm에서 3분간 원심분리한 후, 균체를 회수하고, 인공 담즙산조건의 상기 배지 조성물에 동량의 균체를 접종하였다. 37℃의 배양기에서 6시간동안 처리한 후, PBS로 3회 세척하고, 100 ㎕의 시료를 적절히 희석하여 대조군, 실시예 및 비교예에 따른 조성의 고체 배지에 도말하였다. 도말된 균주는 37℃에서 48시간동안 배양하였으며, 생성된 집락의 수를 확인하여 하기 표 3에 나타내었다.
| 구분 | 생존율(%) | |
| 락토코커스 락티스 PK-2 | 류코노스톡 메센테로이데스 NK-3 | |
| 실시예 1 | 29.6 | 37.2 |
| 실시예 2 | 26.6 | 28.4 |
| 실시예 3 | 26.1 | 33.5 |
| 대조군 | 18.4 | 12.6 |
| 비교예 1 | 24.7 | 23.3 |
| 비교예 2 | 23.2 | 26.7 |
| 비교예 3 | 14.5 | 16.3 |
| 비교예 4 | 14.3 | 14.2 |
실험예 3: 티로시나제 저해 활성 측정
락토코커스 락티스 PK-2와 류코노스톡 메센테로이데스 NK-3을 버섯추출물이 미첨가된 배지와 첨가된 배지에서 72시간 동안 배양하되, 매 24시간마다 배양액 시료를 샘플링하여 배양 시간 경과에 따른 티로시나제 저해활성을 측정하였다.
티로시나제 저해활성은 Yagi 등(1986)의 방법으로 측정하였다. 기질로서는 L-tyrosine을 0.1 M sodium phosphate buffer(pH 6.8)에 0.3 ㎎/㎖의 농도로 완전히 녹인 후, 공극이 0.45 ㎛인 syringe filter로 여과하여 사용하였다. 대조군, 실시예 및 비교예에 따른 시료액 250 ㎕에 상기 L-tyrosine 용액 200 ㎕를 혼합한 뒤, tyrosinase 50 ㎕를 첨가하여 37℃에서 10분간 반응시켰다. Buffer 500 ㎕를 첨가하여 총 부피를 1 ㎖로 맞춘 뒤, 475 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조군으로는 시료액 대신 0.1 M sodium phosphate buffer(pH 6.8)를 첨가하여 흡광도 값을 측정하고 하기 계산식에 따라 계산하여 하기 표 4에 나타내었다. 상기 표 5에서, 비교예 5는 비교예 3에 따른 유산균 배양물 100 중량부에 대하여 10 중량부의 상기 버섯 추출물을 혼합한 시료이다.
티로시나제 저해 활성(%) = [(C-T)/C] ㅧ 100
C : buffer 첨가 시 475 nm에서의 흡광도
T : 시료첨가시의 흡광도
| 구분 | 티로시나제 저해 활성(%) | |||||
| 락토코커스 락티스 PK-2 | 류코노스톡 메센테로이데스 NK-3 | |||||
| 24h | 48h | 72h | 24h | 48h | 72h | |
| 실시예 1 | 8.7 | 15.5 | 21.4 | 12.5 | 34.4 | 34.5 |
| 실시예 2 | 4.6 | 12.6 | 16.4 | 6.3 | 15.7 | 17.9 |
| 실시예 3 | 5.8 | 14.2 | 18.3 | 10.6 | 28.6 | 30.2 |
| 대조군 | 12.7 | 16.4 | 16.3 | 17.1 | 17.5 | 17.4 |
| 비교예 1 | 14.7 | 18.2 | 18.0 | 19.6 | 19.7 | 19.7 |
| 비교예 2 | 5.2 | 11.3 | 16.1 | 10.1 | 23.6 | 24.2 |
| 비교예 3 | 8.3 | 12.5 | 12.4 | 7.2 | 10.7 | 10.4 |
| 비교예 4 | 2.8 | 9.7 | 10.0 | 4.7 | 8.6 | 11.3 |
| 비교예 5 | 10.1 | 13.7 | 14.5 | 11.2 | 13.9 | 14.8 |
상기 표 5에 나타낸 바와 같이, 식용 가능한 유산균 배양물 중에서 실시예에 따른 유산균 배양물의 미백 활성이 보다 우수한 것을 확인할 수 있다. 특히, 버섯 함유 배지에서 배양하지 않은 유산균 배양물에 버섯 추출물을 혼합한 비교예 5의 경우 버섯 함유 배지에서 배양한 유산균 배양물인 실시예 1에 비해 티로시나제 저해 활성이 현저히 낮았다.
실험예 4: 항균활성 측정
유산균은 여러 항균활성 인자를 생성하여 병원성 미생물 및 부패성 미생물에 대하여 생장을 억제하는 능력을 가지고 있다. 또한 항균활성능력은 장내 균총의 개선을 통하여 장 건강을 향상시킬 수 있다. 두 분리균주 PK-2와 NK-3의 항균활성을 조사하기 위하여 disc diffusion assay를 실시하였다.
먼저, 유산균을 대조군, 실시예 및 비교예에 따른 배지 조성물에 각각 접종하여 배양기(37℃, 160 rpm)에서 48시간을 배양한 후, 배양액을 취하여 4,000 rpm으로 10분간 원심분리하고, 상등액을 회수하였다. 회수된 상등액은 공극이 0.45 ㎛인 syringe filter로 여과시킨 후, 동결건조기를 이용하여 20배로 농축시켰다. 농축 배양 상등액의 항균활성은 disc diffusion assay를 통하여 측정하였으며, 항균활성 실험을 위해 Bacillus cereus ATCC 14579, Enterobacter aerogenes ATCC 15038, Escherichia coli ATCC 25922, Listeria monocytogenes ATCC 19111, methicillin-resistant Staphylococcus aureus(MRSA) CCARM 3141, Staphylococcus aureus ATCC 12600, Salmonella enteritidis ATCC 18076, Shigella sonnei ATCC 9290 등의 식중독을 유발하는 균주들을 사용하였다. L. monocytogenes 균주는 brain-heart infusion(BHI)(Difco Co., Detroit, MI, USA) 액체배지에 접종하였으며, 그 외 균주들은 Luria-Bertani(LB)(Difco Co., Detroit, MI, USA) 액체배지에 접종하여 24시간동안 30℃에서 배양한 후 사용하였다. 배양된 균주는 고체평판배지에 도말하고, paper disc를 올려놓은 후, 상기 대조군, 실시예 및 비교예에 따른 농축 유산균 배양 상등액 20 ㎕를 흡수시켜 30℃에서 24시간동안 배양하였다. 배양된 배지에 올려놓은 paper disc 주변의 투명대 형성유무를 확인하는 방식으로 조사하였다.
상기 조사 결과를 도 1 내지 도 6에 나타내었다. 하기 도 1 내지 도 6에서, (A)는 바실러스 세레우스(Bacillus cereus), (B)는 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus), (C)는 MRSA, (D)는 리스테리아 모노사이토제니스(Listeria monocytogenes), (E)는 대장균(Escherichia coli), (F)는 엔테로박터 애로진스(Enterobacter aerogenes), (G) 살모넬라 엔테리티디스(Salmonella enteritidis) 및 (H) 시겔라 손네이(Shigella sonnei) 균에 대한 항균활성을 나타내는 것이며, 평판배지 내 왼쪽은 버섯 추출물 미첨가군이고, 오른쪽은 버섯추출물 첨가군이다.
도 1은 대조군(왼쪽) 및 비교예 1(오른쪽)에 따른 배지 조성물에서 배양된 PK-2 균 배양 농축액의 항균 활성을 나타내는 사진이다.
도 2는 대조군(왼쪽) 및 비교예 1(오른쪽)에 따른 배지 조성물에서 배양된 NK-3 균 배양 농축액의 항균 활성을 나타내는 사진이다.
도 3은 비교예 3(왼쪽) 및 실시예 1(오른쪽)에 따른 배지 조성물에서 배양된 PK-2 균 배양 농축액의 항균 활성을 나타내는 사진이다.
도 4는 비교예 3(왼쪽) 및 실시예 1(오른쪽)에 따른 배지 조성물에서 배양된 NK-3 균 배양 농축액의 항균 활성을 나타내는 사진이다.
도 5는 비교예 4(왼쪽) 및 실시예 2(오른쪽)에 따른 배지 조성물에서 배양된 PK-2 균 배양 농축액의 항균 활성을 나타내는 사진이다.
도 6은 비교예 4(왼쪽) 및 실시예 2(오른쪽)에 따른 배지 조성물에서 배양된 NK-3 균 배양 농축액의 항균 활성을 나타내는 사진이다.
상기 도 1 내지 도 6을 살펴보면, 공통적으로 버섯추출물이 첨가된 경우의 투명대가 첨가되지 않는 경우와 비교하여 그 크기가 다소 큰 것으로 관찰되어 버섯 추출물이 첨가된 경우에 항균활성이 증가하는 것으로 나타났다.
실험예 5: 항산화 활성 측정
5-1. DPPH 자유라디칼 소거능 측정
DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)는 매우 안정한 자유라디칼로 517 ㎚의 흡수 파장을 갖는 진한보라색의 화합물이다. 항산화제에 의해 탈색되므로 항산화 활성을 쉽게 측정할 수 있다.
DPPH는 시그마사(Sigma Co., Ltd,미국)에서 구입하여 사용하였다. 실시예 및 비교예의 배양물 50 ㎕에 DPPH 용액(0.1 mM, 에탄올) 950 ㎕을 가하여 혼합한 후, 실온에서 20분간 반응시킨 뒤 에탄올에 의해 생긴 불순물을 원심분리(10,000ㅧg, 5 min)를 통해 제거하고 UV-Vis spectrometer를 사용하여 517nm에서 흡광도를 측정하였으며, 대조군으로는 아스코르브산(Sigma Co. USA)을 사용하였다. 그 결과를 표 5에 나타내었다.
| 구분 | DPPH 자유라디칼 소거능(%) | |
| 락토코커스 락티스 PK-2 | 류코노스톡 메센테로이데스 NK-3 | |
| 실시예 1 | 75.2 | 80.3 |
| 실시예 2 | 70.3 | 66.3 |
| 실시예 3 | 72.3 | 75.8 |
| 대조군 | 44.3 | 40.0 |
| 비교예 1 | 70.1 | 56.1 |
| 비교예 2 | 57.3 | 61.5 |
| 비교예 3 | 49.0 | 53.3 |
| 비교예 4 | 44.8 | 50.8 |
5-2. SOD-유사활성 측정
SOD-유사활성은 체내에 생성된 활성산소를 제거하는 것과 관련이 있다. SOD(superoxide dixmutase)는 체내에서 생성된 활성산소를 과산화수소로 전환시키며, 과산화수소는 카탈라아제(catalase) 혹은 과산화효소(peroxidase)에 의하여 물과 산소로 전환된다.
실시예 및 비교예의 배양물의 SOD-유사활성은 SOD 분석 키트(Dojindo Molecular Technologies, Rockvile, USA)를 사용하였다. 96 웰 플레이트를 이용하여 각각의 배양물 20 ㎕씩 분주한 후 WST 워킹 솔루션 200 ㎕, 희석 버퍼 20 ㎕, 효소 워킹 솔루션 20 ㎕를 넣고 37℃에서 20분간 배양한 후 마이크로플레이트 리더로 450 nm에서 흡광도를 측정하였으며 대조군으로는 아스코르브산(Sigma Co. USA)을 사용하였다. 그 결과를 표 6에 나타내었다.
| 구분 | SOD-유사활성(%) | |
| 락토코커스 락티스 PK-2 | 류코노스톡 메센테로이데스 NK-3 | |
| 실시예 1 | 15.3 | 18.9 |
| 실시예 2 | 10.3 | 15.7 |
| 실시예 3 | 13.4 | 16.8 |
| 대조군 | 4.5 | 6.9 |
| 비교예 1 | 12.2 | 15.6 |
| 비교예 2 | 11.7 | 15.7 |
| 비교예 3 | 10.1 | 14.6 |
| 비교예 4 | 9.3 | 9.9 |
5-3. 아질산염 소거능 측정
야채류나 과실류에 다량 존재하는 질산염(nitrate)은 일정농도 이상 섭취할 경우, 소화기관 내 또는 식품의 저장 중에 질산 환원 효소나 질산염 환원 세균에 의하여 아질산염으로 환원되며, 단백질 식품이나 의약품 및 잔류 농약 등에 존재하는 2급, 3급의 아민(amine)류와 반응하게 되면 발암물질인 니트로사민(nitrosamine)을 생성하게 된다(Macrae R et al, 1993, Encyclopedia of food science food technology and nutrition, Academic press, 3240-3249).
락토코커스 락티스 PK-2와 류코노스톡 메센테로이데스 NK-3을 버섯추출물이 미첨가된 배지와 첨가된 배지에서 72시간 동안 배양하되, 매 24시간마다 배양액 시료를 샘플링하여 배양 시간 경과에 따른 아질산염 소거능을 측정하였다.
이에, 아질산염(NaNO2) 소거 작용은 Kato 등의 방법(Kato H et al, 1987, Inhibition of nitrosamine formation by nondialyzable melanoidins, Agric, Biol, Chem, 51:1333-1338)에 따라, 1 mM의 질산나트륨(NaNO2)용액 2 mL에 대조군, 실시예 및 비교예에 따른 시료액 4 ㎖을 첨가하고, 0.1N HCl(pH 1.2) 또는 0.2 M citrate buffer(pH 4.2, 6.0)를 사용하여 각각의 부피를 10 ㎖로 조정하였으며, 37℃에서 1시간동안 반응시킨 후 1 ㎖씩 취하였다. 1 ㎖씩 취한 반응 용액 각각에 2% 아세트산(acetic acid)을 5 ㎖를 첨가하고, 그리스 시약(Griess reagent, A:B=1:1, A; 1% sulfanilic acid in 30% acetic acid, B;1% naphyhlamine in 30% acetic acid) 0.4 ㎖ 첨가하여 혼합한 후, 실온에서 15분간 반응시켰다. 반응시킨 시료를 520 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 대조구는 상기 그리스 시약을 사용하였다. 그 결과를 표 7에 나타내었다.
| 구분 | 아질산염 소거능(%) | |||||
| 락토코커스 락티스 PK-2 | 류코노스톡 메센테로이데스 NK-3 | |||||
| 24h | 48h | 72h | 24h | 48h | 72h | |
| 실시예 1 | 7.0 | 14.7 | 15.3 | 13.7 | 17.8 | 18.9 |
| 실시예 2 | 7.0 | 8.2 | 10.3 | 8.9 | 15.6 | 15.7 |
| 실시예 3 | 6.9 | 13.4 | 14.6 | 9.1 | 15.9 | 16.2 |
| 대조군 | 2.6 | 4.4 | 4.5 | 4.3 | 5.8 | 6.9 |
| 비교예 1 | 6.9 | 10.1 | 12.2 | 8.9 | 13.8 | 15.6 |
| 비교예 2 | 6.1 | 11.2 | 11.7 | 11.6 | 14.3 | 14.8 |
| 비교예 3 | 4.9 | 8.7 | 10.1 | 13.1 | 13.9 | 14.6 |
| 비교예 4 | 5.1 | 8.5 | 9.3 | 4.8 | 8.6 | 9.9 |
비록 본 발명이 상기에 언급된 바람직한 실시예로서 설명되었으나, 발명의 요지와 범위로부터 벗어남이 없이 다양한 수정이나 변형을 하는 것이 가능하다. 또한, 첨부된 특허청구범위는 본 발명의 요지에 속하는 이러한 수정이나 변형을 포함한다.
Claims (11)
- 유산균을 버섯 함유 배지 조성물에서 배양하되,
상기 유산균은 표고버섯 유래의 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) 또는 느타리버섯 유래의 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)이고,
상기 버섯은 표고버섯 및 느타리버섯 중에서 선택되는 1종 이상의 버섯 추출물인 것을 특징으로 하는 유산균의 생리활성을 증진시키는 방법. - 제1항에 있어서,
상기 생리활성은 미백활성, 항균활성, 항산화 활성, 내산성 및 내담즙성으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 활성인 것을 특징으로 하는 유산균의 생리활성을 증진시키는 방법. - 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 버섯 추출물은 표고버섯 및 느타리버섯 중에서 선택된 1종 이상의 버섯자실체를 고형분 기준으로 1 중량부에 대하여 5 내지 15 중량부의 물을 첨가하여 추출한 것을 특징으로 하는 유산균의 생리활성을 증진시키는 방법. - 제1항에 있어서,
상기 버섯 추출물은 표고버섯과 느타리버섯이 1:0.5~1.5의 중량비로 혼합된 버섯의 추출물인 것을 특징으로 하는 유산균의 생리활성을 증진시키는 방법. - 표고버섯 및 느타리버섯 중에서 선택된 1종 이상의 버섯 추출물, 및 당밀 및 사탕수수 중에서 선택되는 1종 이상의 탄소원을 포함하는 유산균 배지 조성물로서,
상기 유산균은 표고버섯 유래의 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) 또는 느타리버섯 유래의 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)인 것을 특징으로 하는 유산균의 생리활성 증진용 유산균 배지 조성물. - 제9항에 있어서,
상기 배지 조성물은 상기 버섯 추출물 5 내지 20 중량%, 당밀 또는 사탕수수 중에서 선택되는 1종 이상의 탄소원 1 내지 10 중량%, 콩가루 1 내지 10 중량%, 올리고당 및 꿀 중에서 선택되는 1종 이상의 당류 1 내지 10 중량%, 소금 0.5 내지 1 중량% 및 잔량의 정제수를 포함하는 것을 특징으로 하는 유산균 배지 조성물. - 유산균을 버섯 함유 배지에서 배양하는 유산균 배양물의 제조방법으로서,
상기 유산균은 표고버섯 유래의 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) 또는 느타리버섯 유래의 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)이고,
상기 버섯은 표고버섯 및 느타리버섯 중에서 선택되는 1종 이상의 버섯 추출물인 것을 특징으로 하는 미백 활성 또는 항균 활성이 증진된 유산균 배양물의 제조방법.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020180066262A KR102050015B1 (ko) | 2018-06-08 | 2018-06-08 | 유산균의 생리활성을 증진시키는 방법 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020180066262A KR102050015B1 (ko) | 2018-06-08 | 2018-06-08 | 유산균의 생리활성을 증진시키는 방법 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR102050015B1 true KR102050015B1 (ko) | 2019-11-28 |
Family
ID=68730288
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020180066262A KR102050015B1 (ko) | 2018-06-08 | 2018-06-08 | 유산균의 생리활성을 증진시키는 방법 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR102050015B1 (ko) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20220135180A (ko) | 2021-03-26 | 2022-10-06 | 서울대학교산학협력단 | 유산균의 생리활성 효능 증진용 조성물 |
| KR102484272B1 (ko) * | 2022-03-31 | 2023-01-04 | 데이앤바이오 주식회사 농업회사법인 | 표고, 노루궁뎅이, 느타리 및 팽이의 유산균 복합 발효물을 이용한 식물성 천연 조미료 개발 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20020085159A (ko) | 2001-05-07 | 2002-11-16 | 김범규 | 버섯 분말 또는 버섯 추출물을 포함하는 유산균배지, 상기배지를 이용한 버섯 유산발효 조성물 및 상기 조성물의제조방법 |
| KR20140137496A (ko) * | 2013-05-22 | 2014-12-03 | 재단법인 임실치즈과학연구소 | 프로바이오틱스 유산균과 버섯자실체 추출물을 이용한 항산화 효과가 있는 발효유의 제조방법 |
-
2018
- 2018-06-08 KR KR1020180066262A patent/KR102050015B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20020085159A (ko) | 2001-05-07 | 2002-11-16 | 김범규 | 버섯 분말 또는 버섯 추출물을 포함하는 유산균배지, 상기배지를 이용한 버섯 유산발효 조성물 및 상기 조성물의제조방법 |
| KR20140137496A (ko) * | 2013-05-22 | 2014-12-03 | 재단법인 임실치즈과학연구소 | 프로바이오틱스 유산균과 버섯자실체 추출물을 이용한 항산화 효과가 있는 발효유의 제조방법 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Korean journal of food science and technology. 1996, vol. 28, no. 5, pp. 947-952.* * |
| 한명주. 버섯으로부터 유산균 증식제의 분리. 1998, 보고서. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20220135180A (ko) | 2021-03-26 | 2022-10-06 | 서울대학교산학협력단 | 유산균의 생리활성 효능 증진용 조성물 |
| KR102484272B1 (ko) * | 2022-03-31 | 2023-01-04 | 데이앤바이오 주식회사 농업회사법인 | 표고, 노루궁뎅이, 느타리 및 팽이의 유산균 복합 발효물을 이용한 식물성 천연 조미료 개발 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR101241385B1 (ko) | 김치유산균으로 발효한 쌀당화액을 유효성분으로 함유하는 항균 및 항바이러스 효과를 가진 쌀유산균발효식품조성물 | |
| KR101359368B1 (ko) | Ｇａｂａ가 함유된 발효물의 제조방법 | |
| KR102050015B1 (ko) | 유산균의 생리활성을 증진시키는 방법 | |
| KR20190091053A (ko) | 아미노산 강화분말을 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 조성물 및 그 제조방법 | |
| KR101005747B1 (ko) | 김치로부터 분리된 유산균 및 그의 용도 | |
| KR20140105197A (ko) | 유산균 배양액과 유산균 생균분말을 이용한 유산균 발효 소금 및 그 제조방법 | |
| Liu et al. | A review of fermented bee products: Sources, nutritional values, and health benefits | |
| KR102424598B1 (ko) | 항산화 활성, 항염 활성, 피부 미백 활성, 유해 미생물에 대한 항균 활성 및 항혈전 활성을 가지는 락토바실러스 펜토서스 okbl-l.pe 1 균주 및 이의 용도 | |
| KR20200042165A (ko) | 신규한 락토바실러스 살리바리우스 및 이를 유효성분으로 포함하는 양식 어류 및 갑각류용 사료첨가제 | |
| KR20220081475A (ko) | 항염 활성, 피부 미백 활성, 유해 미생물에 대한 항균 활성 및 항혈전 활성을 가지는 락토바실러스 플란타룸 okbl-l.pl 1 균주 및 이의 용도 | |
| KR100864006B1 (ko) | 김치로부터 분리된 유산균 및 그의 용도 | |
| KR100628417B1 (ko) | 밸리감자 품종으로부터 추출된 인체 장기능 강화용 감자추출물 및 이를 이용한 기능성 식품 | |
| KR20190071017A (ko) | 꿀벌 화분을 이용한 건강식품 제조방법 | |
| KR100526334B1 (ko) | 버섯 균사체를 이용한 발아 현미 가공식품 및 그제조방법 | |
| KR101969708B1 (ko) | 디아이와이 키트 형태의 유산균이 함유된 분말 막걸리 조성물, 그 조성물 제조방법 및 그 조성물에 의해 제조된 막걸리 | |
| KR101794637B1 (ko) | 바실러스 서브틸리스 균주를 이용한 마늘 발효물 및 이의 제조방법 | |
| KR101194798B1 (ko) | 김치로부터 분리된 유산균 및 그의 용도 | |
| CN112522053A (zh) | 一种针叶樱桃果酒的制备方法 | |
| KR20220009516A (ko) | 스피루리나 및 락토바실러스를 포함하는 건강기능식품 조성물 | |
| KR101924392B1 (ko) | 요구르트의 제조 방법 및 그에 의하여 얻어진 요구르트 | |
| KR100718344B1 (ko) | 김치 젖산균과 상황버섯 추출물을 이용하여 제조한 기능성발효식품 및 이의 제조방법 | |
| KR102681322B1 (ko) | 감마오리자놀, gaba 및 아미노산 함량이 증진된 나노화 처리한 미강 발효 추출물, 및 이의 제조방법 | |
| KR102604295B1 (ko) | 생물전환된 쌍별귀뚜라미 발효물을 포함하는 식품조성물 및 이의 제조방법 | |
| KR101194795B1 (ko) | 김치로부터 분리된 유산균 및 그의 용도 | |
| KR20180047239A (ko) | 삼잎국화 및 꾸지뽕 추출액을 이용한 발효식초의 제조방법 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant |