KR102049694B1 - 인삼 사포닌의 수용화 방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 (1) 인삼 또는 홍삼 농축액, 녹용 농축액, 물 및 유산균을 혼합하는 단계; 및 (2) 상기 (1)단계의 혼합한 혼합물을 발효하는 단계를 포함하는 인삼 또는 홍삼 사포닌 수용화 방법, 사포닌 함량이 증진된 인삼 또는 홍삼 발효물의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 사포닌 함량이 증진된 인삼 또는 홍삼 발효물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 인삼 사포닌의 수용화 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 Rg3 등으로 대표되는 난용성 인삼 사포닌을 Tween-80과 같은 계면 활성제 또는 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol), DMSO(Dimethyl sulfoxide)와 같은 유기 용제를 사용하지 않고, 순수한 물에 안정적으로 용해시킬 수 있는 인삼 사포닌 수용화 방법에 관한 것이다.
인삼은 다년생 초본으로 세계적으로 6-7종이 알려져 있으며, 현재 한국산 고려인삼(Panax ginseng C.A. MEYER), 미국산 광동인삼(Panax quinquefolium L.), 중국산 삼칠인삼(Panax notoginseng) 및 일본산 죽절인삼(Panax japonicus C.A. MEYER) 등이 약재로 사용되고 있다. 그 뿌리(Ginseng radix)는 가공법에 따라 백삼(Ginseng Radix alba)과 홍삼(Ginseng Radix Rubra)으로 나뉘어지는데, 백삼은 수삼(생인삼)을 햇볕 자연건조 등의 방법으로 익히지 않고 말린 것이며 홍삼은 수삼의 뿌리를 수증기 등으로 쪄서 말린 것으로 담황갈색 또는 적갈색을 띈다. 백삼과 다른 홍삼 특유의 색은 홍삼을 증숙할 때 열처리에 의해 인삼 전분이 호화(gelatinization)되고 아미노-카보닐반응(amino carbonyl reaction)에 의해 내용 조직색이 변하기 때문이다.
인삼 사포닌은 지용성의 스테롤 몸체에 포도당 또는 갈락토스 등의 당이 글리코시드 결합(glycosidic bond)으로 결합된 일종의 양쪽성 물질이기는 하지만, Rg3인 경우 물에 대한 용해도가 3mg/ℓ에 불과한 난용성 물질이다.
따라서, 인삼 또는 홍삼으로부터 사포닌을 용출해 낼 때에는 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol) 또는 DMSO(Dimethyl sulfoxide)와 같은 유기 용매의 단독 또는 물과의 혼합액으로 추출 정제하는 공정을 사용하여 왔다. 또한, 이들 물질을 식품, 화장품 등에 첨가할 때에도, 발효 주정이나 상기 유기 용매에 용해하여 첨가하는 방법으로 추출하였다.
항암, 항산화, 당뇨개선, 혈행개선, 면역력 증진의 목적으로 인삼 또는 홍삼제품의 수요가 꾸준히 늘고 있으며, 이의 기능의 향상을 위한 목적으로 인삼 사포닌의 고단위 섭취 또는 투여의 여러 가지 방법이 행하여 지고 있다. 이 방법에서 가장 일반적으로 행하여 지는 것으로서는, 인삼 또는 홍삼 사포닌을 오일에 용해한 후, 이를 소프트 캡슐화하여 투여하는 것으로서, 스위스 제약 회사에서 시판하는 제품이 있다. 이 제품은 500 mg 한 캡슐에 사포닌을 125 mg까지 용해한 것으로서, 시판중인 인삼, 홍삼 관련 제품 중에서 제품당 사포닌 함량이 가장 높은 경구 투여 제품이다.
경구 투여 제품인 경우에는 오일에 혼합할 수 있고, 여러 가지 계면 활성제를 이용할 수도 있다. 하지만, 약침과 같은 주사 용제는 기본적으로 물에 녹아야 하며, 계면활성제나 유기 용매를 사용할 수 없는 안전상의 제한이 있을 수밖에 없다. 따라서, 인삼 또는 홍삼 순수 추출물의 정제 여과물을 사용할 수밖에 없는데, 인삼, 홍삼 사포닌의 종류가 적거나 농도가 낮을 수밖에 없는 문제점에 부딪히게 된다.
한국공개특허 제2017-0067303호에는 수용성이 향상된 진세노사이드 화합물 K의 조성물이 개시되어 있고, 한국등록특허 제0841656호에는 인삼의 가용성분 제조방법이 개시되어 있으나, 본 발명의 인삼 사포닌의 수용화 방법과는 상이하다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 안출된 것으로서, 본 발명의 목적은 약침과 같은 주사 용제로 사용시 높은 사포닌 농도를 지닐 수 있는 인삼 또는 홍삼 발효물을 제조하기 위한, 인삼 또는 홍삼 사포닌 수용화 방법을 제공하는데 그 목적이 있다.
상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 (1) 에탄올에 침지한 후 건져낸 녹용에 물 및 단백질분해효소를 첨가한 후 효소반응시키는 단계; (2) 레시틴, 식용유 및 스테아린산나트륨을 혼합한 혼합물을 가열하여 지질 혼합물을 제조하는 단계; (3) 상기 (1)단계의 효소반응시킨 반응물 및 상기 (2)단계의 제조한 지질 혼합물과 사이클로덱스트린을 혼합한 후 농축하여 녹용 농축액을 제조하는 단계; (4) 인삼 또는 홍삼 농축액에 상기 (3)단계의 제조한 녹용 농축액과 물 및 유산균을 혼합하여 인삼 혼합물을 제조하는 단계; 및 (5) 상기 (4)단계의 제조한 인삼 혼합물을 발효하는 단계를 포함하는 인삼 또는 홍삼 사포닌 수용화 방법을 제공한다.
본 발명은 또한, (1) 에탄올에 침지한 후 건져낸 녹용에 물 및 단백질분해효소를 첨가한 후 효소반응시키는 단계; (2) 레시틴, 식용유 및 스테아린산나트륨을 혼합한 혼합물을 가열하여 지질 혼합물을 제조하는 단계; (3) 상기 (1)단계의 효소반응시킨 반응물 및 상기 (2)단계의 제조한 지질 혼합물과 사이클로덱스트린을 혼합한 후 농축하여 녹용 농축액을 제조하는 단계; (4) 인삼 또는 홍삼 농축액에 상기 (3)단계의 제조한 녹용 농축액과 물 및 유산균을 혼합하여 인삼 혼합물을 제조하는 단계; 및 (5) 상기 (4)단계의 제조한 인삼 혼합물을 발효하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 사포닌 함량이 증진된 인삼 또는 홍삼 발효물의 제조방법을 제공한다.
본 발명은 또한, 상기 방법으로 제조된 사포닌 함량이 증진된 인삼 또는 홍삼 발효물을 제공한다.
본 발명의 방법에 의해 가공된 인삼 또는 홍삼은 사포닌의 추출 수율이 크게 증가되어, 사포닌 수용화라는 본 발명의 목적이 극대화할 수 있는 효과가 있다.
도 1은 제조예 2의 홍삼 발효물의 사포닌 함량을 HPLC-MS로 분석한 결과이다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은
(1) 에탄올에 침지한 후 건져낸 녹용에 물 및 단백질분해효소를 첨가한 후 효소반응시키는 단계;
(2) 레시틴, 식용유 및 스테아린산나트륨을 혼합한 혼합물을 가열하여 지질 혼합물을 제조하는 단계;
(3) 상기 (1)단계의 효소반응시킨 반응물 및 상기 (2)단계의 제조한 지질 혼합물과 사이클로덱스트린을 혼합한 후 농축하여 녹용 농축액을 제조하는 단계;
(4) 인삼 또는 홍삼 농축액에 상기 (3)단계의 제조한 녹용 농축액과 물 및 유산균을 혼합하여 인삼 혼합물을 제조하는 단계; 및
(5) 상기 (4)단계의 제조한 인삼 혼합물을 발효하는 단계를 포함하는 인삼 또는 홍삼 사포닌 수용화 방법을 제공한다.
본 발명의 방법에서, 상기 사포닌은 바람직하게는 Rg1, Re, Rf, Rh1, Rg2, Rb1, Rc, Rb2, Rb3, Rg3 및 Rd로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 사포닌일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 방법에서, 상기 (1)단계는 바람직하게는 90~100%(v/v) 에탄올에 4~6분 동안 침지한 후 건져낸 녹용 80~120 g에 물 450~550 mL 및 단백질분해효소를 첨가한 후 40~50℃에서 20~28시간 동안 효소반응시킬 수 있으며, 더욱 바람직하게는 95%(v/v) 에탄올에 5분 동안 침지한 후 건져낸 녹용 100 g에 물 500 mL 및 단백질분해효소를 첨가한 후 45℃에서 24시간 동안 효소반응시킬 수 있다.
상기 단백질분해효소는 트립신 및 판크레아제 등과 같은 동물유래 단백질분해효소, 브로멜라민 및 파파야 같은 식물성 단백질분해효소와 미생물 유래 단백질분해효소로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 단백질 가수분해효소일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 알칼라제(Alcalase)로, 녹용 대비 0.4~0.6 unit/g, 바람직하게는 0.5 unit/g 농도로 첨가할 수 있다.
또한, 본 발명의 방법에서, 상기 (2)단계의 지질 혼합물은 바람직하게는 지질 혼합물 총 중량 기준으로, 레시틴 62~68 중량%, 식용유 27~33 중량% 및 스테아린산나트륨 4~6 중량%를 혼합한 후 75~85℃에서 15~25분 동안 가열하여 제조할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 지질 혼합물 총 중량 기준으로, 레시틴 65 중량%, 식용유 30 중량% 및 스테아린산나트륨 5 중량%를 혼합한 후 80℃에서 20분 동안 가열하여 제조할 수 있다.
또한, 본 발명의 방법에서, 상기 (3)단계의 녹용 농축액은 바람직하게는 효소반응시킨 반응물, 지질 혼합물 및 사이클로덱스트린으로 이루어진 혼합물 총 중량 기준으로, 효소반응시킨 반응물 83~87 중량%, 지질 혼합물 8~12 중량%와 사이클로덱스트린 4~6 중량%를 혼합한 혼합물을 농축하여 55~65 brix의 녹용 농축액을 제조할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 혼합물 총 중량 기준으로, 효소반응시킨 반응물 85 중량%, 지질 혼합물 10 중량%와 사이클로덱스트린 5 중량%를 혼합한 혼합물을 농축하여 60 brix의 녹용 농축액을 제조할 수 있다.
상기 (1) 내지 (3)단계에 걸쳐 제조된 녹용 농축액을 이용하여 인삼 또는 홍삼 발효물을 제조하는 것이 인삼 또는 홍삼에 함유된 소수성 사포닌의 수용성을 높여주어 인삼 또는 홍삼 발효물 내 소수성 사포닌류를 포함한 사포닌 함량을 증진시킬 수 있었다.
또한, 본 발명의 방법에서, 상기 (4)단계의 인삼 혼합물은 바람직하게는 인삼 혼합물 총 중량 기준으로, 인삼 또는 홍삼 농축액 8~12 중량%에 녹용 농축액 8~12 중량%, 물 78~82 중량% 및 유산균 0.08~0.12 중량%를 혼합하여 인삼 혼합물을 제조할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 인삼 혼합물 총 중량 기준으로, 인삼 또는 홍삼 농축액 10 중량%에 녹용 농축액 10 중량%, 물 79.9 중량% 및 유산균 0.1 중량%를 혼합하여 인삼 혼합물을 제조할 수 있다.
상기 유산균은 바람직하게는 락토바실러스 써모필러스(Lactobacillus thermophilus)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 방법에서, 상기 (5)단계의 발효는 바람직하게는 35~40℃에서 100~140시간 동안 발효할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 38℃에서 120시간 동안 발효할 수 있다.
상기 (4) 및 (5)단계에 거쳐 혼합 및 발효하는 것이 삼 특유의 쓴맛은 감소하면서 사포닌 성분이 다량 함유된 발효물로 제조할 수 있었다.
인삼 또는 홍삼 사포닌 수용화 방법은, 보다 구체적으로는
(1) 90~100%(v/v) 에탄올에 4~6분 동안 침지한 후 건져낸 녹용 80~120 g에 물 450~550 mL 및 단백질분해효소를 첨가한 후 40~50℃에서 20~28시간 동안 효소반응시키는 단계;
(2) 지질 혼합물 총 중량 기준으로, 레시틴 62~68 중량%, 식용유 27~33 중량% 및 스테아린산나트륨 4~6 중량%를 혼합한 후 75~85℃에서 15~25분 동안 가열하여 지질 혼합물을 제조하는 단계;
(3) 혼합물 총 중량 기준으로, 상기 (1)단계의 효소반응시킨 반응물 83~87 중량% 및 상기 (2)단계의 제조한 지질 혼합물 8~12 중량%와 사이클로덱스트린 4~6 중량%를 혼합한 혼합물을 농축하여 55~65 brix의 녹용 농축액을 제조하는 단계;
(4) 인삼 혼합물 총 중량 기준으로, 인삼 또는 홍삼 농축액 8~12 중량%에 상기 (3)단계의 제조한 녹용 농축액 8~12 중량%와 물 78~82 중량% 및 유산균 0.08~0.12 중량%를 혼합하여 인삼 혼합물을 제조하는 단계; 및
(5) 상기 (4)단계의 제조한 인삼 혼합물을 35~40℃에서 100~140시간 동안 발효하는 단계를 포함할 수 있으며,
더욱 구체적으로는
(1) 95%(v/v) 에탄올에 5분 동안 침지한 후 건져낸 녹용 100 g에 물 500 mL 및 단백질분해효소를 첨가한 후 45℃에서 24시간 동안 효소반응시키는 단계;
(2) 지질 혼합물 총 중량 기준으로, 레시틴 65 중량%, 식용유 30 중량% 및 스테아린산나트륨 5 중량%를 혼합한 후 80℃에서 20분 동안 가열하여 지질 혼합물을 제조하는 단계;
(3) 혼합물 총 중량 기준으로, 상기 (1)단계의 효소반응시킨 반응물 85 중량% 및 상기 (2)단계의 제조한 지질 혼합물 10 중량%와 사이클로덱스트린 5 중량%를 혼합한 혼합물을 농축하여 60 brix의 녹용 농축액을 제조하는 단계;
(4) 인삼 혼합물 총 중량 기준으로, 인삼 또는 홍삼 농축액 10 중량%에 상기 (3)단계의 제조한 녹용 농축액 10 중량%와 물 80 중량% 및 유산균 0.1 중량%를 혼합하여 인삼 혼합물을 제조하는 단계; 및
(5) 상기 (4)단계의 제조한 인삼 혼합물을 38℃에서 120시간 동안 발효하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명은 또한,
(1) 에탄올에 침지한 후 건져낸 녹용에 물 및 단백질분해효소를 첨가한 후 효소반응시키는 단계;
(2) 레시틴, 식용유 및 스테아린산나트륨을 혼합한 혼합물을 가열하여 지질 혼합물을 제조하는 단계;
(3) 상기 (1)단계의 효소반응시킨 반응물 및 상기 (2)단계의 제조한 지질 혼합물과 사이클로덱스트린을 혼합한 후 농축하여 녹용 농축액을 제조하는 단계;
(4) 인삼 또는 홍삼 농축액에 상기 (3)단계의 제조한 녹용 농축액과 물 및 유산균을 혼합하여 인삼 혼합물을 제조하는 단계; 및
(5) 상기 (4)단계의 제조한 인삼 혼합물을 발효하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 사포닌 함량이 증진된 인삼 또는 홍삼 발효물의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 사포닌 함량이 증진된 인삼 또는 홍삼 발효물의 제조방법은, 보다 구체적으로는
(1) 90~100%(v/v) 에탄올에 4~6분 동안 침지한 후 건져낸 녹용 80~120 g에 물 450~550 mL 및 단백질분해효소를 첨가한 후 40~50℃에서 20~28시간 동안 효소반응시키는 단계;
(2) 지질 혼합물 총 중량 기준으로, 레시틴 62~68 중량%, 식용유 27~33 중량% 및 스테아린산나트륨 4~6 중량%를 혼합한 후 75~85℃에서 15~25분 동안 가열하여 지질 혼합물을 제조하는 단계;
(3) 혼합물 총 중량 기준으로, 상기 (1)단계의 효소반응시킨 반응물 83~87 중량% 및 상기 (2)단계의 제조한 지질 혼합물 8~12 중량%와 사이클로덱스트린 4~6 중량%를 혼합한 혼합물을 농축하여 55~65 brix의 녹용 농축액을 제조하는 단계;
(4) 인삼 혼합물 총 중량 기준으로, 인삼 또는 홍삼 농축액 8~12 중량%에 상기 (3)단계의 제조한 녹용 농축액 8~12 중량%와 물 78~82 중량% 및 유산균 0.08~0.12 중량%를 혼합하여 인삼 혼합물을 제조하는 단계; 및
(5) 상기 (4)단계의 제조한 인삼 혼합물을 35~40℃에서 100~140시간 동안 발효하는 단계를 포함할 수 있으며,
더욱 구체적으로는
(1) 95%(v/v) 에탄올에 5분 동안 침지한 후 건져낸 녹용 100 g에 물 500 mL 및 단백질분해효소를 첨가한 후 45℃에서 24시간 동안 효소반응시키는 단계;
(2) 지질 혼합물 총 중량 기준으로, 레시틴 65 중량%, 식용유 30 중량% 및 스테아린산나트륨 5 중량%를 혼합한 후 80℃에서 20분 동안 가열하여 지질 혼합물을 제조하는 단계;
(3) 혼합물 총 중량 기준으로, 상기 (1)단계의 효소반응시킨 반응물 85 중량% 및 상기 (2)단계의 제조한 지질 혼합물 10 중량%와 사이클로덱스트린 5 중량%를 혼합한 혼합물을 농축하여 60 brix의 녹용 농축액을 제조하는 단계;
(4) 인삼 혼합물 총 중량 기준으로, 인삼 또는 홍삼 농축액 10 중량%에 상기 (3)단계의 제조한 녹용 농축액 10 중량%와 물 80 중량% 및 유산균 0.1 중량%를 혼합하여 인삼 혼합물을 제조하는 단계; 및
(5) 상기 (4)단계의 제조한 인삼 혼합물을 38℃에서 120시간 동안 발효하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명은 또한, 상기 방법으로 제조된 사포닌 함량이 증진된 인삼 또는 홍삼 발효물을 제공한다.
이하, 본 발명의 제조예 및 실시예를 들어 상세히 설명한다. 단, 하기 제조예 및 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 제조예 및 실시예에 한정되는 것은 아니다.
제조예
1. 녹용 효소분해 지질추출 농축액
(1) 녹용(상대 40 중량%, 중대 40 중량%, 하대 20 중량%) 원물을 95%(v/v) 에탄올에 5분 동안 침지한 후 건져내었다.
(2) 상기 (1)단계의 건져낸 녹용 원물 100 g에 정제수 500 mL와 녹용 원물 대비 알칼라제(Alcalase, Novozyme 사) 0.5 unit/g를 첨가한 후 45℃에서 24시간 동안 교반하면서 효소반응시켰다.
(3) 레시틴 65중량%, 식용유(콩기름) 30 중량% 및 스테아린산나트륨 5 중량%를 혼합한 혼합물을 80℃에서 20분 동안 교반하면서 가열하여 지질 혼합물을 제조하였다.
(4) 상기 (2)단계의 효소반응시킨 반응물(고형분 15 Brix) 85 중량%, 상기 (3)단계의 제조한 지질 혼합물 10 중량% 및 사이클로덱스트린 5 중량%를 혼합한 후 감압농축기로 50℃에서 60 brix가 될 때까지 농축하였다.
비교예
1. 녹용 농축액
(2) 녹용(상대 40 중량%, 중대 40 중량%, 하대 20 중량%) 원물 100 g에 정제수 500 mL를 첨가한 후 80℃에서 12시간 동안 추출한 후 감압농축기로 50℃에서 60 brix가 될 때까지 농축하여 녹용 농축액을 제조하였다.
비교예
2. 녹용 효소분해 농축액
(1) 녹용(상대 40 중량%, 중대 40 중량%, 하대 20 중량%) 원물을 95%(v/v) 에탄올에 5분 동안 침지한 후 건져내었다.
(2) 상기 (1)단계의 건져낸 녹용 원물 100 g에 정제수 500 mL 및 알칼라제(Alcalase, Novozyme 사) 0.5 unit/mL를 첨가한 후 45℃에서 24시간 동안 교반하면서 효소반응시켰다.
(3) 상기 (2)단계의 효소반응시킨 반응물(고형분 15 Brix) 85 중량%와 정제수 10 중량% 및 사이클로덱스트린 5 중량%를 혼합한 후 감압농축기로 50℃에서 60 brix가 될 때까지 농축하였다.
비교예
3. 녹용 지질추출 농축액
(1) 녹용(상대 40 중량%, 중대 40 중량%, 하대 20 중량%) 원물을 95%(v/v) 에탄올에 5분 동안 침지한 후 건져내었다.
(2) 상기 (1)단계의 건져낸 녹용 원물 100 g에 정제수 500 mL를 첨가한 후 80℃에서 12시간 동안 추출하여 녹용 추출액을 제조하였다.
(3) 레시틴 65중량%, 식용유(콩기름) 30 중량% 및 스테아린산나트륨 5 중량%를 혼합한 혼합물을 80℃에서 20분 동안 교반하면서 가열하여 지질 혼합물을 제조하였다.
(4) 상기 (2)단계의 제조한 녹용 추출액 85 중량%, 상기 (3)단계의 제조한 지질 혼합물 10 중량% 및 사이클로덱스트린 5 중량%를 혼합한 후 감압농축기로 50℃에서 60 brix가 될 때까지 농축하였다.
제조예
2. 홍삼 혼합
발효물
(1) 분쇄한 홍삼 10 g에 정제수 300 mL를 첨가한 후 90℃에서 6시간 동안 추출한 후 여과하고 감압농축기로 50℃에서 60 brix가 될 때까지 농축하여 홍삼 농축액을 제조하였다.
(2) 상기 (1)단계의 제조한 홍삼 농축액 10 중량%, 상기 제조예 1의 제조한 녹용 효소분해 지질 추출 농축액 10 중량%, 정제수 79.9 중량% 및 106~8 CFU/mL 농도의 락토바실러스 써모필러스(덴마크 크리스찬 한센사 YX-11 요구르트 스타터 균주) 0.1 중량%를 혼합하였다.
(3) 상기 (2)단계의 혼합한 혼합물을 교반하면서 38℃에서 120시간 동안 발효하였다.
비교예
4. 홍삼 혼합
발효물
(1) 60 brix 홍삼 농축액 10 중량%, 정제수 89.9 중량% 및 락토바실러스 써모필러스(덴마크 크리스찬 한센사 YX-11 요구르트 스타터 균주) 0.1 중량%를 혼합하였다.
(2) 상기 (1)단계의 혼합한 혼합물을 교반하면서 38℃에서 120시간 동안 발효하였다.
비교예
5. 홍삼 혼합
발효물
상기 제조예 2의 방법으로 홍삼 혼합 발효물을 제조하되, 상기 (2)단계에서 제조예 1의 녹용 효소분해 지질추출 농축액 대신 비교예 1의 녹용 농축액 10 중량%를 사용하여, 홍삼 혼합 발효물을 제조하였다.
비교예
6. 홍삼 혼합
발효물
상기 제조예 2의 방법으로 홍삼 혼합 발효물을 제조하되, 상기 (2)단계에서 제조예 1의 녹용 효소분해 지질추출 농축액 대신 비교예 2의 녹용 효소분해 농축액 10 중량%를 사용하여, 홍삼 혼합 발효물을 제조하였다.
비교예
7. 홍삼 혼합
발효물
상기 제조예 2의 방법으로 홍삼 혼합 발효물을 제조하되, 상기 (2)단계에서 제조예 1의 녹용 효소분해 지질추출 농축액 대신 비교예 3의 녹용 지질추출 농축액 10 중량%를 사용하여, 홍삼 혼합 발효물을 제조하였다.
실험예
1. 홍삼 혼합
발효물의
사
포닌
분석
본 발명에 의하여 제조된 홍삼 혼합 발효물과 90% 에탄올을 1:1 비율로 혼합한 후, 침전물을 0.1 ㎛ 필터로 여과한 후, 감압 농축하여 에탄올을 제거하고 고형분 1.5 Brix%의 홍삼 사포닌 용액을 제조하였다. 이 용액을 표 1과 같은 조건으로 HPLC-MS 분석을 실시하였다.
| (1) 사용 HPLC | Thermo사 HPLC Ultimate3000 | |
| (2) 이동상 | A(0.1%formic acid/Water) | B(0.1%formic acid/MeOH) |
| 0분 | 10% | 90% |
| 10분 | 10% | 90% |
| 45분 | 70% | 30% |
| 50분 | 10% | 90% |
| 60분 | 10% | 90% |
| (3) 유량 | 0.4 mL/min | |
| (4) 컬럼 | Shisedo 2.7um 2.1mm*150mm 온도: 45도 | |
| (5) 주입량 | 20㎕ | |
| (6) 검출기 | Thermo사 MSD TSQ Plus | |
| (7) 검출기 모드 | Con voltage 100으로 positive mode | |
실시예
1. 홍삼 혼합
발효물의
사포닌 함량
제조예 2와 비교예 4 내지 7의 홍삼 혼합 발효물의 사포닌 함량을 측정한 결과는 하기 표 2와 같다. 그 결과, 제조예 2의 홍삼 혼합 발효물은 비교예 4의 홍삼 혼합 발효물에 포함되지 않은 Rh1, Rg2, Rc, Rb2, Rb3가 생성됨을 확인할 수 있었고, 또한, 비교예 4 내지 7에 비해 제조예 2의 홍삼 혼합 발효물이 11종의 사포닌 함량이 대폭 증진됨을 확인할 수 있었다. 또한, 11종의 총 사포닌 함량에서도 비교예들에 비해 제조예 2의 홍삼 혼합 발효물이 1.3~10배 이상 증진됨을 확인할 수 있었다(표 2).
| 사포닌 종류 | 제조예 2 | 비교예 4 | 비교예 5 | 비교예 6 | 비교예 7 |
| Rg1 | 24 | 3.64 | 6.7 | 21 | 8.9 |
| Re | 26 | 4.17 | 12.5 | 21 | 18 |
| Rf | 4 | 2.4 | 2.8 | 3.5 | 3 |
| Rh1 | 6 | - | - | 3.8 | 0.5 |
| Rg2 | 6 | - | - | 5 | 2 |
| Rb1 | 30 | 4.14 | 13.8 | 27 | 21 |
| Rc | 23 | - | - | 20 | 13 |
| Rb2 | 29 | - | - | 13 | 8 |
| Rb3 | 1 | - | - | - | - |
| Rg3 | 10 | 0.39 | 2.8 | 7 | 3.9 |
| Rd | 0.8 | 0.12 | 0.6 | 0.7 | 0.65 |
| 합계 | 159.8 | 14.86 | 39.2 | 122 | 78.95 |
Claims (6)
- (1) 에탄올에 침지한 후 건져낸 녹용에 물 및 단백질분해효소를 첨가한 후 효소반응시키는 단계;
(2) 레시틴, 식용유 및 스테아린산나트륨을 혼합한 혼합물을 가열하여 지질 혼합물을 제조하는 단계;
(3) 상기 (1)단계의 효소반응시킨 반응물 및 상기 (2)단계의 제조한 지질 혼합물과 사이클로덱스트린을 혼합한 후 농축하여 녹용 농축액을 제조하는 단계;
(4) 홍삼 농축액에 상기 (3)단계의 제조한 녹용 농축액과 물 및 유산균을 혼합하여 홍삼 혼합물을 제조하는 단계; 및
(5) 상기 (4)단계의 제조한 홍삼 혼합물을 발효하는 단계를 포함하는 홍삼 사포닌 수용화 방법. - 제1항에 있어서, 상기 사포닌은 Rg1, Re, Rf, Rh1, Rg2, Rb1, Rc, Rb2, Rb3, Rg3 및 Rd로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 사포닌인 것을 특징으로 하는 홍삼 사포닌 수용화 방법.
- 제1항에 있어서,
(1) 에탄올에 침지한 후 건져낸 녹용 80~120 g에 물 450~550 mL 및 단백질분해효소를 첨가한 후 효소반응시키는 단계;
(2) 지질 혼합물 총 중량 기준으로, 레시틴 62~68 중량%, 식용유 27~33 중량% 및 스테아린산나트륨 4~6 중량%를 혼합한 후 가열하여 지질 혼합물을 제조하는 단계;
(3) 혼합물 총 중량 기준으로, 상기 (1)단계의 효소반응시킨 반응물 83~87 중량% 및 상기 (2)단계의 제조한 지질 혼합물 8~12 중량%와 사이클로덱스트린 4~6 중량%를 혼합한 혼합물을 농축하여 녹용 농축액을 제조하는 단계;
(4) 홍삼 혼합물 총 중량 기준으로, 홍삼 농축액 8~12 중량%에 상기 (3)단계의 제조한 녹용 농축액 8~12 중량%와 물 78~82 중량% 및 유산균 0.08~0.12 중량%를 혼합하여 홍삼 혼합물을 제조하는 단계; 및
(5) 상기 (4)단계의 제조한 홍삼 혼합물을 발효하는 단계를 포함하는 홍삼 사포닌 수용화 방법. - (1) 에탄올에 침지한 후 건져낸 녹용에 물 및 단백질분해효소를 첨가한 후 효소반응시키는 단계;
(2) 레시틴, 식용유 및 스테아린산나트륨을 혼합한 혼합물을 가열하여 지질 혼합물을 제조하는 단계;
(3) 상기 (1)단계의 효소반응시킨 반응물 및 상기 (2)단계의 제조한 지질 혼합물과 사이클로덱스트린을 혼합한 후 농축하여 녹용 농축액을 제조하는 단계;
(4) 홍삼 농축액에 상기 (3)단계의 제조한 녹용 농축액과 물 및 유산균을 혼합하여 홍삼 혼합물을 제조하는 단계; 및
(5) 상기 (4)단계의 제조한 홍삼 혼합물을 발효하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 사포닌 함량이 증진된 홍삼 발효물의 제조방법. - 제4항에 있어서,
(1) 에탄올에 침지한 후 건져낸 녹용 80~120 g에 물 450~550 mL 및 단백질분해효소를 첨가한 후 효소반응시키는 단계;
(2) 지질 혼합물 총 중량 기준으로, 레시틴 62~68 중량%, 식용유 27~33 중량% 및 스테아린산나트륨 4~6 중량%를 혼합한 후 가열하여 지질 혼합물을 제조하는 단계;
(3) 혼합물 총 중량 기준으로, 상기 (1)단계의 효소반응시킨 반응물 83~87 중량% 및 상기 (2)단계의 제조한 지질 혼합물 8~12 중량%와 사이클로덱스트린 4~6 중량%를 혼합한 혼합물을 농축하여 녹용 농축액을 제조하는 단계;
(4) 홍삼 혼합물 총 중량 기준으로, 홍삼 농축액 8~12 중량%에 상기 (3)단계의 제조한 녹용 농축액 8~12 중량%와 물 78~82 중량% 및 유산균 0.08~0.12 중량%를 혼합하여 홍삼 혼합물을 제조하는 단계; 및
(5) 상기 (4)단계의 제조한 홍삼 혼합물을 발효하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 사포닌 함량이 증진된 홍삼 발효물의 제조방법. - 제4항 또는 제5항의 방법으로 제조된 사포닌 함량이 증진된 홍삼 발효물.
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