KR102044936B1

KR102044936B1 - 낙상홍 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물

Info

Publication number: KR102044936B1
Application number: KR1020180010771A
Authority: KR
Inventors: 박성민; 이정노; 유화선; 이경순
Original assignee: 주식회사 코씨드바이오팜
Priority date: 2018-01-29
Filing date: 2018-01-29
Publication date: 2019-11-14
Also published as: KR20190091784A

Abstract

본 발명은 낙상홍(Ilex serrata Thunb) 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 탁월한 피부 주름개선능, 피부 미백능, 항염능 및 피부 보습능을 발휘한다.

Description

낙상홍 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 {Cosmetic composition containing the extract of Ilex serrata Thunb}

본 발명은 낙상홍 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 낙상홍 추출물을 함유하는 피부주름 개선용, 피부 미백용, 항염용 및 피부 보습용 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부는 몸의 표면으로부터 체액 증발에 의한 과다한 수분의 손실을 막고, 외부로부터 유해물질들의 침입을 방지하는 양방향으로 우리의 몸을 보호하는 중요한 방어벽의 역할을 한다. 그 외에 체온조절, 배설, 피부 호흡, 특정 물질에 대한 선택적 흡수 등 다양한 생리적 기능을 담당하기도 한다.

피부노화는 자외선 스트레스, 질병상태, 환경인자, 상처, 나이가 들어감에 따라 활성산소종이 활성화되어 야기될 수 있다. 활성산소종이 활성화되면, 피부의 주요 구성물질인 지질, 단백질, 다당류 및 핵산 등이 산화되어 피부 세포 및 조직이 파괴되고, 결국 피부 노화 현상이 초래된다. 특히, 피부 장벽의 기능을 수행하는 지질층의 지질 조성과 함량이 변화하면서 그 기능이 급격히 저하되어 피부 수분 함량이 감소하게 되면 피부가 건조해지고, 기미, 주근깨, 색소 침착 및 다양한 피부 병변이 유발된다.

한편, 피부 노화는 콜라겐 분해 효소인 기질 금속 단백질 분해 효소(Matrix Metalloproteinase-1; MMP-1)에 의해서 촉진될 수 있다. 즉, 생체 내에서는 콜라겐과 같은 세포 외 기질의 합성과 분해가 적절하게 조절되지만, 노화가 진행되면 콜라겐 합성이 감소하고 콜라겐 분해 효소인 MMP-1의 발현이 촉진되어 피부의 탄력이 저하되고 주름이 생기게 된다. 따라서, 피부 노화 및 주름을 방지하기 위해서는 세포 내에서 활성화가 유도되는 MMP-1 발현을 조절하거나 그 활성을 억제할 필요가 있다.

한편, 피부 노화와 별개로 피부색이 변화하는 문제가 있는데, 이와 같은 피부색의 변화에 중요한 원인이 되는 것은 색소 침착이다. 일반적으로, 피부색에 영향을 미치는 색소로는 멜라닌, 멜라노이드, 카로틴, 헤모글로빈 등이 있는데, 이중 가장 중요한 색소는 멜라닌이다. 멜라닌은 자외선을 흡수 또는 산란시켜 자외선으로부터 피부가 손상되는 것을 방지하는데 큰 역할을 하며, 활성 산소종을 제거하는 기능이 탁월하지만, 때로는 멜라닌 자체가 활성 산소를 발생시키기도 하고, 과다 생성될 경우 피부 변색을 유발하기도 한다. 따라서, 피부 변색을 방지하기 위해서는 멜라닌 생성을 억제할 필요가 있다.

염증은 세포나 조직이 손상을 받으면 그 반응을 최소화하고 손상된 부위를 원상으로 회복시키려는 일련의 방어 작용으로 나타나는 것이며, 염증을 유발하는 원인으로 외상, 화상, 동상, 방사능 등에 의한 물리적 요인과 산(acid)과 같은 화학물질에 의한 화학적 요인이 있으며, 그 외에 혈관이나 호르몬 불균형에 의해서도 일어난다. 피부에서 발생하는 염증은 피부자극으로 말미암은 경우가 많은데, 피부 이상을 유발시켜 노화를 가속화 시킨다. 염증을 소실시키기 위해 염증원의 제거, 생체반응 및 증상을 감소시키는 작용을 하는 것을 항염 효과라고 한다. 다양한 염증 매개인자 중 아질산염(Nitrite; NO)의 생성 억제는 항염증 활성의 중요한 지표로 판단된다.

한편, 낙상홍(Ilex serrata Thunb)은 감탕나무과에 속하고, 아시아 일대에서 자생하며 나무의 높이는 보통 2~3m 정도이고, 잎은 긴 타원형으로 4~8cm 정도로 작은 구슬모양의 열매를 갖고 있다. 토양과는 무관하며 건조하지 않은 지역이면 추위와 관계없이 성장이 가능하고, 내조성과 내공해성이 좋아 바닷가뿐만 아니라, 도심지에서도 좋은 성장을 보이고 있으며, 내염성 수종으로 분류되어 간척지 권장수종으로도 분류되어 있다.

종래에 알려진 낙상홍에 대한 연구는 항산화 효능에 대한 것으로, 화장료 조성물로서의 연구 결과는 미흡한 실정이었다.

대한민국 등록특허 제10-1456182호 (등록일자: 2014.10.23)에는, 감탕나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈관신생 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강기능식품에 대해 기재되어 있다. 대한민국 등록특허 제10-1301012호 (등록일자: 2013.08.22)에는, 감탕나무과 마테 발효물을 함유하는 피부 외용제 조성물에 대해 기재되어 있다.

본 발명은 낙상홍 추출물(Ilex serrata Thunb)을 함유하는 주름 개선, 피부 미백, 피부자극 완화, 피부 보습용 화장료 조성물을 개발하여 제공하고자 한다.

본 발명은 낙상홍(Ilex serrata Thunb) 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 낙상홍 추출물은, 일 예로 낙상홍의 꽃, 잎, 열매, 줄기 및 뿌리 중 선택되는 어느 하나 이상으로부터 얻은 추출물일 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 낙상홍 추출물은, 바람직하게 총 중량 대비 0.0001~30중량% 함유되는 것이 좋다.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 낙상홍 추출물은, 일 예로, 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸 아세테이트, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 추출용매를 이용한 용매 추출법으로 제조된 것일 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 화장료 조성물은, 바람직하게 피부주름 개선용일 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 화장료 조성물은, 바람직하게 피부 미백용일 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 화장료 조성물은, 바람직하게 피부자극 완화용일 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 화장료 조성물은, 바람직하게 피부 보습용일 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 낙상홍 추출물을 함유하여 피부주름 개선, 피부 미백, 피부염증 완화, 피부 보습 효과가 우수하다.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 천연 추출물을 유효성분으로 함유하기 때문에 합성 화학물질을 함유하여 피부에 자극을 주는 여러 화장료에 대한 소비자의 거부감을 해소할 수 있다.

도 1은 낙상홍 추출물의 농도에 따른 세포 생존율을 측정한 그래프이다.
도 2는 낙상홍 추출물의 농도에 따른 MMP-1 생성 억제능을 측정한 그래프이다.
도 3은 낙상홍 추출물의 농도에 따른 멜라닌 생성 억제능을 측정한 그래프이다.
도 4는 낙상홍 추출물의 농도에 따른 NO 생성 억제능을 측정한 그래프이다.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 낙상홍 추출물은, 일 예로, 낙상홍의 꽃, 잎, 열매, 줄기 및 뿌리 중 선택되는 어느 하나 이상에서 얻은 추출물일 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 낙상홍 추출물을 얻는 방법은 특별한 것으로 한정되는 것은 아니며, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 다양한 추출 방법을 이용할 수 있다. 예를 들면, 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 헥산 용매를 각각 단독 또는 이들을 2종 이상 혼합한 혼합용매를 추출 용매로 이용하여 추출할 수 있다.

또한, 본 발명의 낙상홍 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물뿐만 아니라 다른 방법을 덧붙여 추출된 추출물도 포함한다. 예컨대, 초고압 추출법에 의한 추출; 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 이용한 분리; 다양한 크로마토그래피, 예를 들어 크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 크로마토그래피에 의한 분리 등 추가적 방법을 덧붙여 추출 또는 분리/정제한 추출물도 포함하는 것이다. 낙상홍을 초고압 추출하는 경우, 바람직하게는 압력 100~3000 MPa, 온도 40~90℃에서 20~30시간 처리하며, 더욱 바람직하게는 압력 500~1000 MPa, 온도 40~60℃에서 23~25시간 처리하는 것이 좋다. 또한, 초고압 추출 시 pH는 특정 pH에 한정하는 것은 아니나, 바람직하게는 초고압기 내부 물의 pH를 1~6으로 낮춰 처리하는 것이 좋다. 본 발명은 상기와 같이 초고압 처리한 낙상홍 추출물을 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 헥산 및 그의 혼합물로부터 선택된 용매를 이용하여 환류 추출하고 냉침한 후, 여과시킨 여과액을 농축조로 이송하여 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결건조할 수도 있다. 또한, 본 발명은 이렇게 수득한 추출물, 감압농축물 또는 동결건조물을 정제수, 에탄올, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 액상으로 제형화할 수도 있다.

한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 낙상홍 추출물은, 총 중량 대비 0.0001~30중량% 첨가되는 것이 좋다. 0.001 중량% 미만으로 포함되는 경우에는 본 발명에서 확인한 여러 피부 기능성의 발휘 효과가 미미하고, 30.0 중량%를 초과하는 경우에는 재료 투입량 대비 효율성이 떨어져 경제적이지 못하다.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 화장 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제 예컨대 친수성 또는 친유성 겔화제, 친수성 또는 친유성 활성제, 보존제, 항산화제, 용매, 방향제, 충전제, 차단제, 안료, 흡취제, 염료 등을 함유할 수 있다. 이들 다양한 보조제의 양은 당해 분야에서 통상적으로 사용되는 양이며, 예컨대 조성물 총중량에 대해 0.0001 내지 30중량%이다. 다만, 어떠한 경우라도 보조제 및 그 비율은 본 발명에 따른 화장료 조성물의 바람직한 성질에 악영향을 미치지 않도록 선택될 것이다.

한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 화장료 조성물은, 피부주름 개선용, 피부 미백용, 피부자극 완화용, 피부 보습용일 수 있다. 본 발명의 실험예에서는 낙상홍 추출물의 우수한 세포 생존율, MMP-1 생성 억제 (주름 개선), 멜라닌 생성 억제능 (미백), NO 생성 억제능 (자극 완화), 피부 보습능을 확인하였다.

이하, 본 발명에 대해 하기 실시예에서 더욱 상세히 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니고, 이와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 모두 포함한다.

[ 실시예 : 낙상홍 추출물의 제조]

낙상홍(Ilex serrata Thunb) 전초를 음건하여 파쇄 후 100g을 10배 가량의 70% (v/v) 에탄올 수용액에 상온에서 3일간 추출하였다. 추출로 얻은 추출물은 와트만(whatman) #5 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 50℃ 이하에서 감압 농축 및 동결 건조하였다. 상기 감압농축 및 동결건조물이 0.001 내지 30.0중량 % 함유되게 정제수, 에탄올, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 분산 및 용해하여 하기 실험에서 사용할 추출물을 최종 제조하였다.

[ 실험예 1 : 낙상홍 추출물의 세포 생존율 측정]

본 실험예에서는 상기 실시예에서 수득한 낙상홍 추출물의 세포에 미치는 독성을 측정하고자 하였다. 세포 독성은 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2-5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) 시약을 이용하여 세포 생존율을 측정하는 'Mosmann'의 방법을 변형하여 실시하였다.

‘인간 피부 섬유아세포(HDFn, Human Dermal Fibroblast neonatal)'를 96-웰 플레이트(well plate)에 2×10⁴ cells/well의 농도로 분주하여, 37℃, 5% CO₂ 조건에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 배지를 제거하고, 상기 실시예에서 수득한 추출물을 10, 30, 100 ㎍/㎖ 농도별로 각각 처리한 배지에 24시간 동안 배양하였다. 그 후, 5㎎/㎖로 녹인 MTT 시약을 30 ㎕ 넣고, 10분 동안 교반한 후 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.

그 결과, 낙상홍 추출물은 100㎍/㎖까지 세포독성이 나타나지 않음을 확인하였다. 이로부터 본 발명의 낙상홍 추출물이 인체에 무해하며 안정성이 우수함을 확인할 수 있었다 (도 1).

[ 실험예 2 : 낙상홍 추출물의 MMP -1 생성 억제능 측정]

본 실험예에서는 실시예에서 수득한 본 발명의 낙상홍 추출물의 MMP-1 생성 억제 효과를 확인하고자 하였다.

인간 피부 섬유하세포를 24-웰 플레이트((well plate)에 2×10⁵ cells/well의 농도로 분주하여, 37℃, 5% CO₂ 조건에서 24시간 동안 배양하였다. 생리 식염액(Phosphate buffer saline, PBS)으로 2회 세척하여 준 뒤, 생리 식염액을 넣은 채로 UV 조사기를 이용하여 6J/㎝² 만큼의 UV를 조사시켜 주었다. 상기 실시예의 낙상홍 추출물을 2% FBS를 첨가한 DMEM 배지 및 대조군으로 낙상홍 추출물이 포함되지 않은 2% DMEM 배지에서 48시간 동안 배양하였다.

배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 MMP-1 분석 킷트(R&D system, 미합중국)를 이용하여 새로 합성된 MMP-1의 양(ng/㎖)을 측정하고, 하기 수학식 1에 따라 MMP-1 생성 억제율(%)을 계산하였다.

[수학식 1]

MMP-1 생성 억제율(%) = 1-

X 100

실험 결과, 본 발명의 낙상홍 추출물은 MMP-1 생성 억제 효능이 매우 우수하였으며, MMP-1 생성 억제효능이 있는 것으로 알려진 물질인 아데노신(Adenosine)과 같은 농도에서 본원발명의 낙상홍 추출물이 더 뛰어난 효능을 발휘함을 확인하였다.

여러 종류의 물질이 혼합된 추출물 수준에서 상기와 같은 정도의 MMP-1 생성 억제율을 나타낸 것은 본 발명 낙상홍 추출물이 뛰어난 피부 주름 개선 효과를 나타내는 것을 의미한다 (도 2).

[ 실험예 3: B16F10 멜라닌 형성 세포를 이용한 멜라닌 생성 억제효과 확인]

본 실험예에서는 낙상홍 추출물의 미백 효과를 확인하기 위해 B16F10 멜라닌 형성 세포에 대한 멜라닌 생성 억제 정도를 알아보고자 하였다. 이때, 미백제로 잘 알려진 알부틴을 비교샘플로 사용하였다.

본 실험 예에서 사용한 B16F10 멜라닌 형성 세포는 마우스에서 유래한 세포로, ATCC(American Type Culture Collection)로부터 분양받아 사용하였다. B16F10 멜라닌 형성 세포를 6웰 플레이트에 각 웰당 2×10⁵농도로 분주하고, 세포를 부착시킨 후 독성을 유발하지 않는 농도로 분주하고, 상기 실시예에서 수득된 낙상홍추출물을 처리하여 72시간 동안 배양하였다.

72시간 배양 후, 세포를 트립신-EDTA로 떼어내고, 세포수를 측정한 다음 원심분리하여 세포를 회수하였다. 세포 내 멜라닌의 정량은 로탄(Lotan: Cancer Res., 40: 3345-3350, 1980)의 방법을 변형하여 실시하였다. 셀 펠릿을 PBS로 1회 세척한 후 균질화 버퍼액(50 mM 소듐 포스페이트, pH6.8, 1% Triton X-100, 2 mM PMSF) 1 ml를 첨가하여 5분간 와류하여 세포를 파쇄하였다. 원심분리(3,000rpm, 10분)하여 얻은 세포 여액에 1N NaOH(10% DMSO)를 첨가하여 추출된 멜라닌을 용해한 후, 마이크로 플레이트 판독기로 405 nm에서 멜라닌의 흡광도를 측정한 다음 멜라닌을 정량하여 시료의 멜라닌 생성 저해율(%)을 측정하였다. B16F10 멜라닌 형성 세포의 멜라닌 생성 저해율(%)은 하기 수학식 2에 의하여 계산하였다.

[수학식 2]

멜라닌생성저해율(%) =

X 100

A: 시료를 첨가하지 않은 웰의 멜라닌 양

B: 시료를 첨가한 웰의 멜라닌 양

그 결과, 본 발명의 낙상홍 추출물은 100 ug/ml 농도에서 뛰어난 멜라닌 생성 억제능을 나타냄을 확인하였으며, 이는 본 발명 낙상홍 추출물이 뛰어난 피부 미백 개선 효과를 나타내는 것을 의미한다 (도 3).

[ 실험예 4 : 낙상홍 추출물의 NO 생성 억제 효과 측정]

본 실험예에서는 본 발명의 낙상홍 추출물의 피부자극 완화효과를 측정하기 위하여 NO 생성을 억제 효과를 확인하고자 하였다. 뮤린 마크로파지 세포주 (Murine macrophage cell line)인 RAW 264.7 세포(한국 세포주 은행, 대한민국)를 96-웰 마이크로 플레이트(Nunc, 덴마크)에 각 웰당 1×10⁵ 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지(Sigma, 미합중국) 및 37℃의 조건에서 24시간 동안 배양한 후 상기 실시예의 낙상홍 추출물을 첨가한 DMEM 배지 및 대조군으로 낙상홍 추출물이 포함되지 않은 DMEM 배지에서 2시간 동안 처리 후, LPS(1 ug/mL)를 처리하여 24시간 배양하였다. 생성된 NO는 Griess 시약을 이용하여 세포 배양액 중에 존재하는 NO₂ ^-의 형태로 측정하였다. 세포 배양 상층액 100 ul와 griess시약[A: 1%(w/v) sulfanilamide, B: 0.1%(w/v) naphylethylenediamine in 2.5%(v/v) phosphoric acid)을 1:1 비율로 혼합하여 100 ul, ELISA reader를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준농도 곡선은 NaNO₂ (sodium nitrite)를 연속 희석(1~100 uM)하여 얻었으며, 결과는 도 4에 나타내었다.

실험 결과, 본 발명의 실시예에서 수득한 낙상홍 추출물은 농도의존적으로 NO 생성을 억제하며, 최대 58%까지 NO 생성을 억제함을 확인하였다. 이를 통해 본 발명 낙상홍 추출물이 뛰어난 피부자극완화 효과를 나타냄을 확인하였다 (도 4).

[ 제조예 : 낙상홍 추출물을 함유하는 화장료 제조]

상기 실시예의 낙상홍 추출물을 10.0 중량% 함유하는 화장료 조성물을 하기 표 1의 조성으로 제조하였고, 제조예라 하였다. 한편, 낙상홍 추출물이 포함되지 않은 화장료 조성물을 제조하여 비교제조예 1 내지 3이라 하였다.

한편, 효능의 비교를 위해 낙상홍 추출물 대신에 미백 고시 성분인 알부틴을 포함하는 화장료 조성물(비교제조예 1)과 보습제로서 글리세린 및 부틸렌글라이콜을 포함하는 화장료 조성물(비교제조예 2), 주름 개선 고시 성분인 아데노신을 포함하는 화장료 조성물(비교제조예 3)을 하기 표 1에 나타내었다.

구분	성분	제조예 (중량%)	비교제조예1 (중량%)	비교제조예2 (중량%)	비교제조예3 (중량%)
A	실시예	10.0	-	-	-
	알부틴	-	2.0	-	-
	글리세린	-	-	5.0	-
	부틸렌글라이콜	-	-	5.0	-
	아데노신	-	-	-	3.0
	EDTA-2Na	0.02	0.02	0.02	0.02
	정제수	to 100	to 100	to 100	to 100
B	세토스테아릴알코올	2.0	2.0	2.0	2.0
	글리세릴스테아레이트	1.5	1.5	1.5	1.5
	마이크로크리스탈린	0.7	0.7	0.7	0.7
	스쿠알란	5.0	5.0	5.0	5.0
	유동파라핀	3.0	3.0	3.0	3.0
	트리옥타노인	5.0	5.0	5.0	5.0
	폴리솔베이트	1.2	1.2	1.2	1.2
	솔비탄스테아레이트	0.5	0.5	0.5	0.5
	토코페릴아세테이트	0.2	0.2	0.2	0.2
	사이클로메치콘	3.0	3.0	3.0	3.0
	BHT	0.05	0.05	0.05	0.05
C	향, 방부제	적량	적량	적량	적량

[실험예 5 : 낙상홍 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 미백효능 개선 효과]

본 실험예에서는 낙상홍 추출물을 함유하는 화장료의 피부 미백 효과에 대한 임상실험을 실시하였다. 임상시험은 각 화장료의 실제 사용 테스트를 통하여 평가하였다. 임상실험은 낙상홍 추출물을 함유하는 제조예와 비교제조예 1의 알부틴을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물의 미백 효과를 확인 및 비교 평가하였다.

임상 실험을 위하여, 색소침착증을 가지고 있는 건강한 성인 여성 30명을 무작위로 10명씩 2개 그룹(A, B)으로 나눈 후, A 그룹을 대상으로 제조예의 화장료 조성물을, B 그룹을 대상으로 비교제조예 1의 화장료 조성물을 각각 1일 2회씩 8주간 도포하였다. 이후, 피부색의 변화를 분광광도계(spectrophotometer, Minolta CM600-d)를 이용하여 색의 밝기 변화(ΔL)를 측정하고, 복수의 숙련자에 의한 객관적 육안관찰과 피검자에 의한 주관적 육안관찰을 실시하여 미백효과를 측정하였다. 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다. 이때, 미백 효능 정도를 다음의 미백 효능 평가 기준에 따라 분류하여 평가하였다.

<미백효능 평가 기준>

-3: 매우악화 -2: 악화 -1: 약간 악화 0: 변화 없음

1: 약간 개선 2: 개선 3: 매우 개선

피검자	피부색의 밝기변화(ΔL)		숙련자의 객관적 평가(ΔL)		피검자의 주관적 평가(ΔL)
피검자	A 그룹	B 그룹	A 그룹	B 그룹	A 그룹	B 그룹
1	3.4	1.7	2	0	1	1
2	2.0	1.9	0	1	2	1
3	2.8	1.5	1	1	2	0
4	3.2	1.7	2	0	1	0
5	3.5	2.1	2	1	1	1
6	3.1	2.0	2	0	1	1
7	4.0	2.4	1	1	2	1
8	3.7	1.7	1	1	1	0
9	3.8	1.1	2	1	1	1
10	3.1	1.8	1	0	1	0
평균	3.26	1.79	1.4	0.6	1.3	0.6

실험 결과, 제조예의 낙상홍 추출물을 함유하는 피부미백 화장료 조성물을 도포한 A 그룹의 피부색의 밝기변화의 평균값은 3.26(p<0.05), 알부틴을 함유한 피부미백 화장료 조성물을 도포한 B그룹의 피부색 밝기변화의 평균값은 1.79(p<0.05)이었다.

한편, 숙련자에 의한 미백 평가에서 숙련자에 의한 미백 평가에서 A그룹의 평균값은 1.4, B그룹의 평균값은 0.6이었으며, 피검자에 의한 미백 평가에서는 A그룹의 평균값은 1.3, B그룹의 평균값은 0.6으로 나타났다. 이를 통해, 본 발명의 낙상홍 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부미백 화장료 조성물의 미백효능이 더 우수한 것을 확인할 수 있었다.

[실험예 6 : 낙상홍 추출물을 함유하는 화장료의 피부 보습력 개선효과 확인]

본 실험예에서는 상기 제조예에서 제조한 낙상홍 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 피부 보습력 개선 효과를 확인하고자 하였다.

피부 질환이 없는 20~40대 40명을 대상으로 1조 당 20명씩 2개조로 나누고, 각 조별로 상기 제조예 및 비교제조예 2의 화장료를 얼굴 및 전박부에 도포하게 하였다. 미리 도포 시작 전 항온, 항습 조건(24℃, 습도 40%)에서 수분측정기(conneometer, CM820 courage Khazaka electronic GmbH, Germany)를 이용하여 피부 전도도를 측정하여 그 증가율을 평가하였다. 그 결과는 하기 표 3에 나타내었다.

시료명	1주 후	2주 후	4주 후
제조예	57	60	66
비교제조예 2	25	29	34

실험결과, 본 발명의 낙상홍추출물을 함유하는 화장료인 제조예는 비교제조예 2의 낙상홍 추출물을 함유하지 않는 화장료에 비하여 피부 전도도 증가율이 매우 우수함을 확인할 수 있었다. 일반적으로, 피부 전도도는 피부 수분량에 비례하므로, 상기의 결과는 낙상홍 추출물을 함유하는 본 발명 화장료 조성물이 피부 수분 함량을 높게 유지하여 우수한 피부 보습 효과를 발휘함을 확인할 수 있었다.

[실험예 7 : 낙상홍 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 피부 주름 개선효과 확인]

본 실험예에서는 낙상홍 추출물을 함유하는 화장료의 피부 주름 개선효과에 대한 임상실험을 실시하였다. 임상시험은 각 화장료의 실제 사용 테스트를 통하여 평가하였다.

즉, 임상실험은 실험예에서 효능을 나타내었던 실시예를 포함하고 있는 제조예와 낙상홍 추출물 대신에 주름 개선 기능성 고시 원료인 아데노신을 포함하는 비교제조예 3의 화장료 조성물을 함유하는 화장료의 사용으로 인한 피부 주름 개선 효과를 확인 및 비교 평가하였다.

실험자(20~35세 여성) 20명을 대상으로 낙상홍 추출물을 포함하는 화장료를 얼굴 왼쪽에 도포한 제조예 실험군과 아데노신(3%)을 포함하는 화장료를 얼굴 오른쪽 부위에 도포한 비교제조예 3 실험군으로 나누어 실험을 진행하였다. 피부 주름 개선 효과는 제품 사용 전과 8주간 사용 후의 각 피검자의 주름 개선 효과를 숙련된 의사의 육안 관찰 및 기기측정(cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)을 통하여 평가하였으며, 실험 결과는 하기의 표 4에 나타내었다.

	주름 개선 효과			유효율(%)
	우수	약간	없음	유효율(%)
제조예 (실시예)	14	2	4	75.0
비교제조예 3 (아데노신 3%)	15	3	2	82.5

상기 표 4의 결과에서도 알 수 있듯이, 본 발명의 낙상홍 추출물을 함유한 제조예의 화장료 조성물은 주름 개선 효능이 있다고 알려진 아데노신을 함유하는 비교제조예 3과 유사한 효능을 나타내었다. 또한, 본 발명의 낙상홍 추출물을 함유하는 화장료를 피부에 도포한 대부분의 피검자들에게서 피부 자극이 관찰되지 않았다.

Claims

낙상홍(Ilex serrata Thunb) 추출물을 함유하며,
상기 낙상홍 추출물은,
낙상홍의 꽃, 잎, 열매, 줄기 및 뿌리 중 선택되는 어느 하나 이상으로부터 얻은 추출물인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
삭제
제1항에 있어서,
상기 낙상홍 추출물은,
총 중량 대비 0.0001~30중량% 함유되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 낙상홍 추출물은,
물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸 아세테이트, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 추출용매를 이용한 용매 추출법으로 제조된 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은,
피부주름 개선용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은,
피부 미백용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은,
피부 염증 개선용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은,
피부 보습용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
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