KR101999060B1 - 세제용 리포좀의 제조방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 세제용 리포좀의 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 항산화 및 항염증 효과가 있으며 안전한 세제용 리포좀의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명에 따른 세제용 리포좀의 제조방법은 에탄올(ethanol) 100 중량부에 40 내지 60 중량부의 포스파티딜콜린 (phosphatidylcholine)을 용해시키는 인지질 용해 단계(S10); 상기 인지질 용해 단계(S10) 후, 오미자 계면활성제를 첨가하여 교반하는 1차 교반단계(S20); 상기 1차 교반단계(S20) 후, 에센셜 오일을 첨가하여 교반하는 2차 교반단계(S30); 상기 2차 교반단계(S30) 후, 유자 추출물을 첨가하여 수화액정을 형성하고 정제수를 첨가하여 리포좀을 제조하는 리포좀 제조단계(S40); 및 상기 제조된 리포좀을 분산시키는 분산단계(S50);를 포함한다.
본 발명에 따른 세제용 리포좀의 제조방법은 에탄올(ethanol) 100 중량부에 40 내지 60 중량부의 포스파티딜콜린 (phosphatidylcholine)을 용해시키는 인지질 용해 단계(S10); 상기 인지질 용해 단계(S10) 후, 오미자 계면활성제를 첨가하여 교반하는 1차 교반단계(S20); 상기 1차 교반단계(S20) 후, 에센셜 오일을 첨가하여 교반하는 2차 교반단계(S30); 상기 2차 교반단계(S30) 후, 유자 추출물을 첨가하여 수화액정을 형성하고 정제수를 첨가하여 리포좀을 제조하는 리포좀 제조단계(S40); 및 상기 제조된 리포좀을 분산시키는 분산단계(S50);를 포함한다.
Description
본 발명은 세제용 리포좀의 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 항산화 및 항염증 효과가 있으며 안전한 세제용 리포좀의 제조방법에 관한 것이다.
면 섬유의 공극은 약 10㎛ 수준이며, 기존의 세탁세제는 이러한 공극으로의 침투가 어려워 섬유 내에 오염물질이 세탁되지 않고 잔존하는 경우가 많다. 기존의 섬유유연제, 탈취제 등 섬유 제품에 적용된 캡슐(capsule) 기술은 천연 또는 합성 고분자를 이용하여 외벽을 제조한다. 주로, 멜라민, 요소 수지를 사용하여 제조하고 있으나 제조과정에서 포름알데히드도 사용하여 미반응 포름알데히드가 잔존할 수 있기 때문에 유해성 노출의 우려가 있다. 또 다른 캡슐 기술로는 화장품에 적용되는 리포좀이 있으나 기존의 리포좀을 제조하는 피막형성법은 클로로포름(Chloroform)과 같은 유독성 물질을 사용하여 제조되므로 대량 생산 시 환경오염의 우려가 있으며, 제품에 유독성 물질이 함유되는 위험성이 있다.
종래에 제조되는 세제는 피부가 민감한 소비자에게는 부적합하므로 대한민국 등록특허 제 10-0868197호 '발아 현미 추출물을 함유하는 나노 리포좀'에서는 민감성 피부의 자극 유발 개선하기 위해 발아 현미 추출물을 함유하는 나노 리포좀 및 이를 함유하고 있는 섬유용 세제 조성물을 개발하였으며, 이는 민감성 피부 자극 완화 효과가 우수하여 유아 및 일반용 세제에 함유될 수 있으나, 항균, 항산화 등 다른 효과를 추가하기 위해서는 별도의 살균제 등 화학 원료를 첨가하여야 하며, 별로도 첨가되는 살균제 등은 기존에 사용중인 것으로 친환경 소재가 아니며, 민감한 유아용 피부에 자극이 되는 문제가 있다.
따라서, 본 발명은 천연소재의 에센셜 오일을 사용하여 피부에 자극이 적으며 대량 생산에도 환경오염이 적은 친환경 소재를 사용하는 세제용 리포좀에 대한 개발이 요구된다.
본 발명은 상기 문제점을 해결하기 위한 것으로, 본 발명의 목적은 천연 소재로부터 항염증, 항산화, 항균 등 생리활성 기능을 가지는 친환경 소재를 이용하여 제조되어 유아 및 일반용 세제에 첨가되어도 안전한 세제용 리포좀의 제조방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 대량생산에도 안전성과 경제성이 높은 세제용 리포좀의 제조방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 유연성이 있는 탄성 리포좀을 제조하여 섬유의 공극이 좁거나, 다층구조의 섬유제품에도 세척 및 기능성을 향상시킬 수 있는 세제용 리포좀의 제조방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 목적들은 이상에서 언급한 목적으로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 목적들은 아래의 기재로부터 본 발명의 기술분야에서 통상의 지식을 지닌 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
본 발명은 상기의 목적을 달성하기 위해서, 본 발명에 따른 세제용 리포좀의 제조방법은 에탄올(ethanol) 100 중량부에 40 내지 60 중량부의 포스파티딜콜린 (phosphatidylcholine)을 용해시키는 인지질 용해 단계(S10); 상기 인지질 용해 단계(S10) 후, 오미자 계면활성제를 첨가하여 교반하는 1차 교반단계(S20); 상기 1차 교반단계(S20) 후, 에센셜 오일을 첨가하여 교반하는 2차 교반단계(S30); 상기 2차 교반단계(S30) 후, 유자추출물을 첨가하여 수화액정을 형성하고 정제수를 첨가하여 리포좀을 제조하는 리포좀 제조단계(S40); 및 상기 제조된 리포좀을 분산시키는 분산단계(S50);를 포함한다.
상기 인지질 용해 단계(S10)는 60 ~ 70℃의 온도를 유지하며 상기 포스파티딜콜린을 용해하는 것을 특징으로 한다.
상기 1차 교반단계(S20)는 3 내지 10중량부의 오미자 계면활성제를 첨가하여 교반하는 것을 특징으로 한다.
상기 에센셜 오일은 정향오일, 팔각 회향 오일, 편백 오일 중 1종 이상을 선택하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 세제용 리포좀의 제조방법은 백본(backbone)에 포스파티딜콜린 (phosphatidylcholine)과 오미자 계면활성제, 에센셜 오일 및 유자 추출물을 함유시켜 리포좀의 안정성을 높이며, 천연 소재의 재료를 사용하므로 인체에 무해할 뿐만 아니라 항균, 항산화 등의 효과가 있다.
도 1은 본 발명의 세제용 리포좀 제조방법의 순서도이다.
도 2는 에센셜 오일의 항산화 효과 실험 결과를 나타내는 그래프이다.
도 3(a)는 에센셜 오일의 항균성 효과 실험 결과를 나타내는 사진이고, 도 3(b)는 에센셜 오일의 항균성 효과 실험 결과의 측정값을 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명의 세제용 리포좀의 입자크기 및 제타전위를 측정한 그래프이며, 도 4(a)는 에센셜 오일이 첨가된 리포좀들의 결과이고, 도 4(b)는 유자추출물이 첨가된 리포좀들의 결과이며, 도 4(c)는 에센셀 오일 및 유자추출물이 첨가된 리포좀들의 결과를 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 세제용 리포좀의 포집효율 측정 결과를 나타낸 그래프이다.
도 6은 본 발명의 세제용 리포좀의 항산화 효과 결과를 나태낸 그래프이다.
도 2는 에센셜 오일의 항산화 효과 실험 결과를 나타내는 그래프이다.
도 3(a)는 에센셜 오일의 항균성 효과 실험 결과를 나타내는 사진이고, 도 3(b)는 에센셜 오일의 항균성 효과 실험 결과의 측정값을 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명의 세제용 리포좀의 입자크기 및 제타전위를 측정한 그래프이며, 도 4(a)는 에센셜 오일이 첨가된 리포좀들의 결과이고, 도 4(b)는 유자추출물이 첨가된 리포좀들의 결과이며, 도 4(c)는 에센셀 오일 및 유자추출물이 첨가된 리포좀들의 결과를 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 세제용 리포좀의 포집효율 측정 결과를 나타낸 그래프이다.
도 6은 본 발명의 세제용 리포좀의 항산화 효과 결과를 나태낸 그래프이다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 첨부되는 도면과함께 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
아래 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 실시를 위한 구체적인 내용을 상세히 설명한다. 도면에 관계없이 동일한 부재번호는 동일한 구성요소를 지칭하며, "및/또는"은 언급된 아이템들의 각각 및 하나 이상의 모든 조합을 포함한다.
비록 제1, 제2 등이 다양한 구성요소들을 서술하기 위해서 사용되나, 이들 구성요소들은 이들 용어에 의해 제한되지 않음은 물론이다. 이들 용어들은 단지 하나의 구성요소를 다른 구성요소와 구별하기 위하여 사용하는 것이다. 따라서, 이하에서 언급되는 제1 구성요소는 본 발명의 기술적 사상 내에서 제2 구성요소일 수도있음은 물론이다.
본 명세서에서 사용된 용어는 실시예들을 설명하기 위한 것이며, 본 발명을 제한하고자 하는 것은 아니다. 본 명세서에서, 단수형은 문구에서 특별히 언급하지 않는 한 복수형도 포함한다. 명세서에서 사용되는 "포함한다(comprises)" 및/또는 "포함하는(comprising)"은 언급된 구성요소 외에 하나 이상의 다른 구성요소의 존재 또는 추가를 배제하지 않는다.
다른 정의가 없다면, 본 명세서에서 사용되는 모든 용어(기술 및 과학적 용어를 포함)는 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 공통적으로 이해될 수 있는 의미로 사용될 수 있을 것이다. 또 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 용어들은 명백하게 특별히 정의되어 있지 않는 한 이상적으로 또는 과도하게 해석되지 않는다.
이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다.
도 1은 본 발명의 세제용 리포좀 제조방법의 순서도이다.
도 1을 참조하면, 먼저 인지질 용해 단계(S10)는 에탄올(ethanol) 100중량부에 40 내지 60 중량부의 포스파티딜콜린(pohsphatidylcholine)을 용해시키며, 바람직하게는 55 내지 60 중량부의 포스파티딜콜린을 용해시키는 것이 바람직하다.
상기 포스파티딜콜린은 레시틴(Lecithin)이라고도 하며 가장 대표적인 인지방질이다. 구조는 글리세린(glycerin)에 2분자의 지방산과 인산, 콜린(choline)이 결합하고 천연의 건은 위치에 콜린이 결합한 것만이 존재한다. 지방산 부분에서는 palmitic acid, stearic acid가 많으며 메탄올, 에탄올, 벤젠, 에틸에테트, 석유 에테르, 클로로포름에 가용되나 아세톤에 불용성인 물질이다. 유화작용을 가지며 대두에서 얻은 레시틴이 주로 사용되며, 포스파티딜콜린을 레시틴이라고도 한다.
상기 인지질 용해 단계(S10)는 60 ~ 70℃의 온도를 유지하며 상기 포스파티딜콜린을 용해시켜 인지질 용해액을 제조하는 것이 바람직하다. 60 ~ 70℃의 온도를 유지하는 이유는 상기 포스파티딜콜린의 상전이 온도인 55℃ 이상의 온도를 유지시켜 상기 포스파티딜콜린을 완전히 용해하기 위한 것이다.
다음은 1차 교반 단계(S20)로 상기 인지질 용해액에 오미자 계면활성제를 첨가하여 1차 교반하는 단계이다. 상기 오미자 계면활성제는 본 발명자의 이전 특허 제10-1054903호, 제10-1425023호에서 제안한 바에 따라 얻어진 것이다.
오미자 종자(씨)에는 고미신(gomisin), 시산드롤(schisandrol), 시산드린(shinsandrin), 시산드린C(shisandrin C)등 리그난계 유효성분이 함유되어 있어 항균, 항산화, 피부진정, 보습, 미백작용이 탁월하다. 상기 이전 특허에서 제안된 기술에 따라 본 발명에서 사용되는 오미자는 오미자 주정 공장에서 1차 가공이 끝난 후 버려졌던 오미자의 부산물을 재활용하는 것으로 자원 재활용 측면에서도 우수한 장점이 있다. 상기 본 발명자의 이전 특허의 제안 방법에 따라 얻어진 오미자 계면활성제의 항염증, 항균, 항산화 기능에 대해서는 상기 특허에서 인증되었다.
상기 오미자 계면활성제는 상기 인지질 용해액에 3 내지 10중량부를 첨가하여 2~5분간 교반하며, 바람직하게는 5 내지 7 중량부의 상기 오미자 계면활성제를 첨가하여 2분간 교반하는 것이 바람직하다.
2차 교반단계(S30)는 상기 1차 교반 단계(S20) 후, 에센셜 오일을 첨가하여 교반하는 것이다. 상기 에센션 오일은 정향오일, 팔각 회향 오일, 편백 오일 중 1종 이상을 선택하여 첨가한다.
정향은 도금양과 식물의 일종이며 주로 꽃봉오리를 말린 것이 향신료나 향수 등의 원료로 이용되고 있다. 정향의 강하고 달콤한 향기와 혀가 얼얼한 자극적인 맛이 특징이며, 효능으로는 부패방지와 살균력이 좋은 특징이 있다. 정향의 꽃봉오리의 잎에서 추출된 오일은 화장품의 원료나 담배의 향기 성분으로 이용되고 있으며, 통증 완화, 항균, 바이러스 감소에 효과가 있다. 또한, 정향추출물은 Eugenol 성분을 87% 함유하고 있으며, 상기 Eugenol은 항우울 작용에 효과를 보이는 것이다.
팔각 회향은 Illicium verum Hooker fil. (붓순나무과 Illiciaceae)의 열매로서 그대로 또는 끓는 물에 데쳐서 말린 것이며, 대회향(大茴香)이라고도 한다. 팔각 회향 오일은 팔각 회향의 잘 익은 열매 및 씨를 건조한 것에서 유래한 휘발성 오일을 말한다. 팔각 회향의 주성분인 trans-anethole은 기억증진, 항염증, 진통완화, 진정효과, 피부에 해로운 외부물질을 제거하는 효과가 있다.
편백 오일은 테르펜계 성분의 함량이 많으며 테르펜계 성분의 효과는 공기전화, 향균, 항바이러스, 건조예방, 항우울작용, 항스트레스 등의 효과를 나타낸다. 본 발명에서는 히노키 편백 오일(히노키 아스나로)을 첨가한다.
상기 2차 교반단계(S30)는 0.5 내지 3 중량부의 정향 오일, 0.5 내지 3 중량부의 팔각 회향 오일, 0.5 내지 3 중량부의 편백 오일 중 1종 이상의 에센셜 오일을 선택하여 첨가하여 1 내지 5분간 교반한다. 바람직하게는 0.6 중량부의 정향 오일, 0.6 중량부의 팔각 회향 오일, 0.6 중량부의 편백 오일을 상기 1차 교반된 혼합물에 첨가하여 2분간 교반하는 것이 바람직하다.
다음은 상기 2차 교반단계(S30) 후, 유자추출물을 첨가하여 수화액정을 형성하고 정제수를 첨가하여 리포좀을 제조하는 리포좀 제조단계(S40);
상기 유자 추출물은 본 발명자의 이전 특허인 한국등록특허 제10-1490089호, 한국등록특허 제10-1496624호에서 제안된 유자 추출물 제조 방법에 따라 얻어지며, 상기 특허에 따라 제조된 유자 추출물은 섬유 보호, 항산화, 아토피 억제, 항염증의 효과를 나타낸다.
상기 유자 추출물 0.5 내지 3 중량부를 첨가하여 3 내지 5분간 교반시켜 수화액정을 형성한다.
그 후, 상기 에탄올 100중량부에 대하여 1500 내지 1900 중량부인 60℃의 증류수를 일시에 첨가하고 10분 내지 15분 교반하여 리포좀(liposome)을 제조한다.
마지막으로 분산단계(S50)는 상기 제조된 리포좀을 균일하게 분산시키기 위하여 60~70℃의 온도를 유지하며 초음파(sonication)를 이용하여 30분간 리포좀을 분산한 후, 서서히 식혀 본 발명에 따른 리포좀을 제조한다.
상기 본 발명의 바람직한 세제용 리포좀 제조방법에 따라 제조된 리포좀은 코어(core)에 수용성 성분인 유자 추출물이 위치하며, 백본(backbone)에 에센션 오일과 오미자 계면활성제가 위치하여 안정성이 높으며 천연 소재의 재료를 사용하므로 인체에 무해할 뿐만 아니라 항균, 항산화 등의 효과가 있다.
이하 본 발명의 구성을 하기 실시예를 통해 상세히 설명하도록 한다.
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시험예
1-
에센셜
오일의 항산화 실험>
DMSO(Dimethylsulfoxide)를 이용하여 설정된 희석농도에서 에센셜 오일들의 항산화 활성을 측정하였다. 항산화 활성 측정 방법은 DPPH 자유 라디칼 소거능 측정방법과 ABTS assay법의 두 가지 방법으로 측정하였다.
1) DPPH 자유 라디칼 소거능 측정 방법
1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH, Sigma, USA)은 MeOH or EtOH에 녹여 0.06 mM/ml의 농도가 되게 제조하였다. 각각의 시료 100 ul와 DPPH 용액 100 ul을 균일하게 혼합한 다음 실온에서 암실 조건으로 30분간 방치한 후 96-well microplate spectrophotometer(분광광도계)로 517 nm에서 흡광도를 측정하였다.
2) ABTS assay법
7 mM ABTS solution와 2.45 mM K2S2O8 solution을 제조하여 2개의 시료를 1:1 비율로 섞는 후 16시간 암실에서 반응 시켰다. 반응 후 734nm 파장에서 OD값이 0.7±0.02이 되도록 DW로 희석하여 solution으로 사용하였다. 50 ul의 샘플과 200 ul solution을 넣어 6분간 방치시킨 후 96-well microplate spectrophotometer(분광광도계)로 734nm 파장에서 측정하였다.
두 실험에 따른 측정 결과는 도 2에 나타내었으며, 도 2를 참조하면 본 발명에 포함되는 정향 오일, 팔각 회향 오일, 편백 오일 중 정향 오일의 항산화성이 가장 우수하였으며, 정향 오일과 편백 오일은 100배 희석까지 항산화력이 존재하였다.
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시험예
2-
에센셜
오일의 항균성 실험>
Disc paper를 이용한 항균 활성 측정법과 LB broth(액체 배지)를 이용한 항균 활성 측정법의 두 가지 방법으로 에센셜 오일 및 정유추출물의 항균성 실험을 하였다.
1) Disc paper를 이용한 항균 활성 측정법
편백 오일(①), 정향 오일(②), 정향·팔각 복합 정유 추출물(③), 팔각 회향 오일(④)의 4가지 시료를 10㎕를 사용하여 실험하였으며, 배양된 균주는 E.coli, S. aureus, B. subtilis의 세가지로 메틸렌 블루로 염색 후 cell counting 하여 3.0×105이 되도록 준비하였다.
2) 액체 배지(LB broth)를 이용한 항균 활성 측정법
편백 오일(①), 정향 오일(②), 팔각 회향 오일(③), 정향·팔각 복합 정유 추출물(④)의 4가지 시료를 40㎕를 사용하여 실험하였으며, 새로운 배지에 밤새(overnight) 배양된 각각의 균주 및 시료를 1%씩 첨가한 후 밤새 배양하여 샘플에 의한 균주의 생장속도를 확인하였다.
항균 활성 측정법의 결과는 도 3(a)에 나타내었으며, LB broth(액체 배지)를 이용한 항균 활성 측정법의 결과는 도 3(b)에 나타내었다.
도 3을 참조하면, 항균성은 편백 오일이 가장 우수하며 정향 오일, 정향·팔각 복합 정유 추출물, 팔각 회향 오일 순으로 항균 활성을 보였다. 팔각 회향 오일은 액체상에서 항균성이 향상되었으며, S.aureus 균에서는 활성이 현저히 낮았다.
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실시예
1>
둥근 플라스크에 에탄올 100 중량부와 포스파티딜콜린 57 중량부를 넣어 60℃까지 가열하여 포스파티딜콜린이 전부 용해될 때까지 용해시켰다. 그 후, 오미자 계면활성제 5.7 중량부를 상기 둥근 플라스크에 첨가하여 2분간 교반시키고, 정향 오일, 팔각 회향 오일, 편백 오일을 각각 0.6 중량부 첨가하여 2분간 교반시켰다. 또한, 유자 추출물 0.6 중량부를 첨가하여 5분간 교반시켜 수화액정을 만들고 60℃의 물 32ml를 첨가하여 10분간 교반하여 리포좀을 제조한 후, 제조된 리포좀을 30분간 초음파 처리하고 서서히 식혔다.
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실시예
2>
둥근 플라스크에 에탄올 100 중량부와 포스파티딜콜린 57 중량부를 넣어 60℃까지 가열하여 포스파티딜콜린이 전부 용해될 때까지 용해시켰다. 그 후, 오미자 계면활성제 5.7 중량부를 상기 둥근 플라스크에 첨가하여 2분간 교반시키고, 정향 오일, 팔각 회향 오일, 편백 오일을 각각 1.2 중량부 첨가하여 2분간 교반시켰다. 또한, 유자 추출물 1.2 중량부를 첨가하여 5분간 교반시켜 수화액정을 만들고 60℃의 물 32ml를 첨가하여 10분간 교반하여 리포좀을 제조한 후, 제조된 리포좀을 30분간 초음파 처리하고 서서히 식혔다.
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실시예
3>
둥근 플라스크에 에탄올 100 중량부와 포스파티딜콜린 57 중량부를 넣어 60℃까지 가열하여 포스파티딜콜린이 전부 용해될 때까지 용해시켰다. 그 후, 오미자 계면활성제 5.7 중량부를 상기 둥근 플라스크에 첨가하여 2분간 교반시키고, 정향 오일, 팔각 회향 오일, 편백 오일을 각각 2.2 중량부 첨가하여 2분간 교반시켰다. 또한, 유자 추출물 2.2 중량부를 첨가하여 5분간 교반시켜 수화액정을 만들고 60℃의 물 32ml를 첨가하여 10분간 교반하여 리포좀을 제조한 후, 제조된 리포좀을 30분간 초음파 처리하고 서서히 식혔다.
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비교예 - 에센셜
오일 포함>
둥근 플라스크에 에탄올 100 중량부와 포스파티딜콜린 57 중량부를 넣어 60℃까지 가열하여 포스파티딜콜린이 전부 용해될 때까지 용해시켰다. 그 후, 오미자 계면활성제 5.7 중량부를 상기 둥근 플라스크에 첨가하여 2분간 교반시키고, 정향 오일, 팔각 회향 오일, 편백 오일을 0.6, 1.2, 2.2, 3.4 중량부씩 첨가하여 2분간 교반시키고 60℃의 물 32ml를 첨가하여 10분간 교반하여 리포좀을 제조한 후, 제조된 리포좀을 30분간 초음파 처리하고 서서히 식혔다. 상술한 방법과 상술된 방법으로 제조된 리포좀을 비교예 1, 2, 3, 4라 하였다.
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비교예 - 유자
추출물 포함>
둥근 플라스크에 에탄올 100 중량부와 포스파티딜콜린 57 중량부를 넣어 60℃까지 가열하여 포스파티딜콜린이 전부 용해될 때까지 용해시켰다. 그 후, 오미자 계면활성제 5.7 중량부를 상기 둥근 플라스크에 첨가하여 2분간 교반시키고, 유자 추출물을 0.6, 1.2, 2.2 중량부를 첨가하여 5분간 교반시켜 수화액정을 만들고 60℃의 물 32ml를 첨가하여 10분간 교반하여 리포좀을 제조한 후, 제조된 리포좀을 30분간 초음파 처리하고 서서히 식혔다. 상술한 방법과 상술된 방법으로 제조된 리포좀을 비교예 5, 6, 7이라 하였다.
하기 [표 1]에는 상술한 실시예 1~3, 비교예 1~7의 방법에 따라 첨가되는 조성물의 조성비를 표시하였으며, 상술한 방법으로 제조된 리포좀의 입자크기, 제타전위 및 포집효율 특성을 비교하였다.
단위 : 중량부 | 에탄올 | 포스파티딜콜린 | 오미자 계면활성제 | 정향오일 | 팔각회향 오일 | 편백오일 | 유자 | |
비교예1(EO1) | 100 | 57 | 5.7 | 0.6 | 0.6 | 0.6 | - | |
비교예2(EO2) | 100 | 57 | 5.7 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | - | |
비교예3(EO3) | 100 | 57 | 5.7 | 2.2 | 2.2 | 2.2 | - | |
비교예4(EO4) | 100 | 57 | 5.7 | 3.4 | 3.4 | 3.4 | - | |
비교예5(EY1) | 100 | 57 | 5.7 | - | - | - | 0.6 | |
비교예6(EY2) | 100 | 57 | 5.7 | - | - | - | 1.2 | |
비교예7(EY3) | 100 | 57 | 5.7 | - | - | - | 2.2 | |
실시예1(EOY1) | 100 | 57 | 5.7 | 0.6 | 0.6 | 0.6 | 0.6 | |
실시예2(EOY2) | 100 | 57 | 5.7 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | |
실시예3(EOY3) | 100 | 57 | 5.7 | 2.2 | 2.2 | 2.2 | 2.2 |
<
시험예
3- 세제용
리포좀의
입자크기 및
제타전위
측정>
리포좀의 입자크기 및 제타전위 측정은 제조된 리포좀 용액 1ml를 취하여 나노입자분석기(Dydnamic light scattering, Zetasizer Nano ZS90, Malvern)로 3회씩 측정하여 평균값을 확인하였다. 측정값은 [표 2]에 나타내었으며, 그래프는 도 4에 나타내었다.
Size(nm) | Zeta(mV) | |
비교예1(EO1) | 81.76 ± 4.52 | -96.37 ± 2.07 |
비교예2(EO2) | 116.67 ± 15.67 | -102.00 ± 1.00 |
비교예3(EO3) | 196.20 ± 8.20 | -70.17 ± 3.23 |
비교예4(EO4) | 250.37 ± 21.37 | -43.70 ± 2.30 |
비교예5(EY1) | 40.56 ± 0.43 | -13.4 ± 3.1 |
비교예6(EY2) | 74.42 ± 0.88 | -9.5 ± 0.28 |
비교예7(EY3) | 69.6 ± 3.09 | -9.25 ± 0.85 |
실시예1(EOY1) | 158.43 ± 0.37 | -61.00 ± 0.60 |
실시예2(EOY2) | 218.63 ± 14.23 | -50.53 ± 0.37 |
실시예3(EOY3) | 262.63 ± 27.97 | -46.1 ± 0.30 |
도 4를 참조하면, 도 4 (a)는 에센셜 오일만 사용한 리포좀의 입자 크기 및 제타전위 측정 그래프로, 에센셜 오일의 함량이 증가하면 입자크기가 증가하며, 제타전위는 에센셜 오일의 함량이 증가할수록 포집되지 못한 에센셜 오일의 영향으로 음전하가 감소하였다.
도 4 (b)는 유자 추출물만 사용한 리포좀의 입자 크기 및 제타전위 측정 그래프로, 유자 추출물의 함량이 증가하면, 입자크기가 증가하며 제타전위의 음전하가 감소하였다.
도 4 (c)는 에센셜 오일 및 유자 추출물을 사용한 리포좀의 입자 크기 및 제타전위 측정 그래프로, 에센셜 오일 및 유자 추출물의 함량이 증가하면 입자크기는 증가하며 제타전위의 음전하는 감소하였다.
유자 추출물만 사용한 비교예 5, 6, 7은 입자크기는 100nm 이하로 작았지만 제타전위(안정성)는 음전하의 값이 높을수록 리포좀이 안정한 것으로 비교예 5, 6, 7의 리포좀은 안정성이 낮음을 확인하였다. 따라서, 본 발명의 목적에 따른 세제용 리포좀을 만족하는 입자크기와 제타전위를 가진 리포좀은 비교예 1, 2, 3, 실시예 1, 2임을 확인하였다.
<
시험예
4- 세제용
리포좀의
포집효율
측정>
리포좀의 총 페놀 함량을 측정하여 포집효율을 확인하였다. 리포좀의 총 페놀 함량을 측정하기 위해 시료를 전처리하고 총 페놀 함량 측정 방법에 따라 측정하였다.
1) 시료 전처리 방법
제조된 리포좀을 1ml 채취하여 14000rpm, 4℃ 조건에서 10분간 원심분리를 하여 상층액을 제거하고 리포좀의 순수 무게를 측정하였다. 측정된 무게의 10배가 되도록 에탄올을 첨가 후 현탁하고 초음파 처리(25℃, 10분)를 하여 리포좀을 완전히 파쇄 시켰다. 파쇄된 리포좀 혼합액을 14000rpm, 4℃ 조건에서 10분간 원심분리하여 상층액을 회수하여 준비하였다.
2) 총 페놀 함량 측정 방법(폴린-시오칼토 반응)
시료 전처리에서 얻어진 리포좀 혼합액 300㎕에 1.5ml 폴린-시오칼토 시약을 첨가하였다. 그 후, 실온에서 30분간 반응시킨 후 750nm로 측정하였다. 이를 환산하여 포집효율(%)를 계산하였다.
페놀 함량 측정 방법의 결과는 도 5에 나타내었으며, 포집효율은 실시예 1(EOY1)이 가장 높은 효율을 나타내었고, 그 뒤로 비교예 2(EO2)가 높은 효율을 나타내었다. 유자 추출물만 포함된 비교예 5, 6, 7은 현저히 낮은 포집 효율을 나타내었다.
<
시험예
5- 세제용
리포좀의
항산화 효과 확인>
상술한 시험예 3(세제용 리포좀의 입자크기 및 제타전위 측정), 시험예 4(세제용 리포좀의 포집효율 측정) 결과 세제용 리포좀에 가장 적합하게 제조된 실시예 1의 리포좀에 대해 항산화 효과를 확인하였다.
전처리 방법은 상기 포집효율 측정 실험 시 시행한 방법과 동일하며, 항산화 효과를 확인하기 위해 상술한 DPPH 자유 라디칼 소거능 측정 방법으로 항산화 효과를 측정하였다.
대조군으로는 포스파티딜콜린을 제외하고 첨가제를 첨가하여 실시예 1과 같은 농도가 되도록 희석하여 대조군 1(EOY1 -PC)를 제조하여 대조군의 항산화 효과를 확인하였다.
항산화 효과 실험 결과는 도 6에 나타내었으며, 실시예 1의 항산화 효과는 대조군 대비 54.68%로 확인되었으며, 실시예 1은 항산화 효과를 가지는 것으로 나타났다.
이상과 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 실시예를 설명하였지만, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해되어야 한다.
S10 : 인지질 용해 단계
S20 : 1차 교반 단계
S30 : 2차 교반 단계
S40 : 리포좀 제조단계
S50 : 분산단계
S20 : 1차 교반 단계
S30 : 2차 교반 단계
S40 : 리포좀 제조단계
S50 : 분산단계
Claims (4)
- 세제용 리포좀의 제조방법에 있어서,
에탄올(ethanol) 100 중량부에 40 내지 60 중량부의 포스파티딜콜린 (phosphatidylcholine)을 용해시키는 인지질 용해 단계(S10);
상기 인지질 용해 단계(S10) 후, 오미자 계면활성제를 첨가하여 교반하는 1차 교반단계(S20);
상기 1차 교반단계(S20) 후, 에센셜 오일을 첨가하여 교반하는 2차 교반단계(S30);
상기 2차 교반단계(S30) 후, 유자 추출물을 첨가하여 수화액정을 형성하고 정제수를 첨가하여 리포좀을 제조하는 리포좀 제조단계(S40); 및
상기 제조된 리포좀을 분산시키는 분산단계(S50);를 포함하되,
상기 에센셜 오일은 정향 오일, 팔각 회향 오일, 편백 오일 중 1종 이상을 선택하여 제조되는 것을 특징으로 하는 세제용 리포좀의 제조방법. - 제 1항에 있어서,
상기 인지질 용해 단계(S10)는 60 ~ 70℃의 온도를 유지하며 상기 포스파티딜콜린을 용해하는 것을 특징으로 하는 세제용 리포좀의 제조방법. - 제 1항에 있어서,
상기 1차 교반단계(S20)는 3 내지 10중량부의 오미자 계면활성제를 첨가하여 교반하는 것을 특징으로 하는 세제용 리포좀의 제조방법. - 삭제
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