KR101974338B1 - 사위질빵 또는 끈끈이대나물 추출물을 포함하는 피부염증 완화용 저자극성 화장품 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 사위질빵 또는 끈끈이대나물 추출물 중 하나 이상을 포함하는 피부염증 완화용 화장품 조성물에 관한 것으로, 특히 세포에서의 산화질소 발생을 감소시킴으로 항염 효능을 나타내며 또한 저자극성이어서, 상기 피부염증 완화용 화장품으로 효과적으로 사용될 수 있다.

Description

사위질빵 또는 끈끈이대나물 추출물을 포함하는 피부염증 완화용 저자극성 화장품 조성물{Hypoallergenic Cosmetic composition comprising the extract of Clematis apiifolia DC. or Silene armeria L. for alleviating skin inflammation}

본 발명은 사위질빵 또는 끈끈이대나물 추출물을 포함하는 피부염증 완화용 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부는 외부 환경에 직접적으로 노출되는 신체 부위로서, 우리 몸의 중요한 기관들을 보호하는 보호막 역할을 할 뿐만 아니라 수분 증발을 조절하고 바이러스 침투와 같은 외부 감염으로부터 몸을 보호하는 기능을 한다. 하지만, 과도한 자외선이나 오염물질 등에 노출되면 홍반, 부종, 가려움 등의 피부 자극 및 염증 반응이 유발된다. 이러한 환경유해인자에 의한 피부 트러블은 미관상 문제가 될 뿐만 아니라, 염증 반응 과정에서 생성되는 물질들이 부수적으로 피부의 색소 침착을 일으키고, 피부 탄력 섬유의 붕괴를 촉진시켜 피부 주름 증가에까지 영향을 미치는 것으로 알려져 있다.

염증(inflammation)은 외상이나 화상과 같은 물리화학적인 요인 또는 세균이나 바이러스와 같은 생물학적 요인에 의해 생체 조직이 손상을 입었을 때에 체내에서 일어나는 방어적 반응으로, 충혈, 부종, 발열, 통증 등의 증상이 특징적이다. 생화학적으로는, 염증은 염증유발 인자가 생체에 작용할 때 염증소에서의 항체나 히스타민, 세로토닌 등의 화학물질을 함유한 혈장 성분이나 조직액의 국소적 삼출, 백혈구의 침윤, 회복을 위한 섬유 증생 등의 생체 측에서 생기는 반응 현상을 말한다. 염증유발 인자의 종류, 양이나 생체 측의 면역 상태에 따라서 염증 반응이 생기는 양상은 다르다.

염증반응이 일어나면 여러 가지 염증인자들이 만들어지는데, 염증인자에는 inducible nitric oxide synthase (iNOS)에 의해서 만들어지는 nitric oxide (NO)와 cyclooxygenase-2 (COX-2)에 의해서 만들어지는 prostaglandin E₂ (PGE₂) 등이 있다. 이러한 염증 인자는 염증반응의 전사인자인 nuclear factor-kB (NF-kB)를 활성화시키며, 그 결과 과량의 NO와 PGE₂를 생성하여 염증을 일으킨다. 포유동물 세포의 nitric oxide synthase (NOS)의 경우, 유사형태가 3가지 존재하는데 neuronal NOS (nNOS), endothelial NOS (eNOS), 그리고 inducible NOS (iNOS)이다. 그 중에서 특히 iNOS가 염증반응에 관여하는데, iNOS의 경우 Interferon-gamma, lipopolysaccharide (LPS), 그리고 여러 가지 염증성 사이토카인의 자극이 있을 때 발현된다 (John TG et al., Curr Opin Chem Biol, 4, 687-695, 2002; John WC, Int Immunopharmacol, 1, 1397-1406, 2001). PGE₂는 cyclooxygenase (COX)에 의해서 arachidonic acid로부터 생산된다. 즉 COX-2 발현, NO, PGE₂의 생산과 더불어 iNOS의 발현은 면역세포의 대표적인 염증인자이다.

사위질빵(Clematis apiifolia)은 미나리아재비과에 속하는 낙엽이 지는 넓은잎나무로 한국·중국·일본 등지에 분포한다. 사위질빵은 세포독성, 항균 등에 대해 보고된 바 있지만, 항염증 효능에 대해서는 보고된 바가 없다.

끈끈이대나물(Silene armeria)은 석죽과에 속하는 한해살이 또는 두해살이 풀이며 유럽 원산으로, 지베렐린 대사와 줄기 성장, 항진균, 항균에 대해 보고된 바 있지만, 항염증 효능에 대해서는 보고된 바가 없다.

벌개미취(Aster koraiensis Nakai)는 주로 제주도와 경기도 이남의 논두렁이나 습지에서 자라는 여러해살이풀로 한국 특산식물이며, 항암, 항균, 항진균 활성이 있다고 보고되어있다(김창민 등, (1998) 완역 중약대사전; Kim, H. K et al (2004) Kor. J. Food Preserv. 11: 88-93; Heo, S. I. et al(2005) Kor. J. Pharmacogn. 36: 164-170).

대한민국 등록특허 제10-0845469호는 ‘벌개미취추출물 및 그를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물 및 건강기능식품’에 관한 것으로 벌개미취 추출물의 당뇨합병증에 대한 효과가 개시되어 있다.

대한민국 등록특허 제10-0966657호는 ‘항균용 시레네 아르메리아 추출물 및 이를 함유한 약제학적 조성물’에 관한 것으로 시레네 아르메리아(끈끈이대나물) 추출물의 항균활성에 대해 개시되어 있다.

본원은 사위질빵 또는 끈끈이대나물 추출물을 함유하는, 염증 매개 물질의 생성을 저해하여 피부염증을 완화시키는 저자극성 화장품 조성물을 제공하고자 한다.

한 양태에서 본원은 사위질빵 또는 끈끈이대나물 중 하나 이상의 추출물을 포함하는, 피부 염증 완화용 화장품 조성물을 제공한다.

본원에 따른 추출물은 각각 피부 염증 완화 효과를 나타내므로, 단독으로는 물론 조합으로 사용될 수 있다.

본원에 따른 조성물은 벌개미취 추출물을 추가로 포함할 수 있으며, 벌개미취 또한 피부 염증 완화 효과를 나타내므로, 조합으로 사용될 수 있다.

본원에 따른 추출물에서 사위질빵, 끈끈이대나물 또는 벌개미취는 각각 꽃, 가지, 줄기, 잎, 미성숙열매, 또는 열매를 포함하는 지상부; 뿌리줄기; 및 뿌리 중 선택된 하나 이상의 부위가 사용될 수 있다.

일 구현예에서 사위질빵은 뿌리, 상기 끈끈이대나물은 꽃, 상기 벌개미취는 지상부가 사용될 수 있으나, 다른 부위의 사용을 배제하는 것은 아니다.

본원에 따른 추출물은 극성, 비극성의 다양한 용매, 또는 유기용매를 사용하여 추출될 수 있다. 일 구현예에서, 상기 추출물은 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜, 클로로포름, 아세톤, 프로필렌글리콜, 초산에틸, 부틸렌글리콜, 및 에테르로 구성된 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상의 혼합 유기 용매의 추출물이다.

본원에 따른 추출물은 세포, 특히 대식세포의 산화질소 생성 저해를 통해 피부 염증을 효과적으로 완화할 수 있다.

다른 양태에서 본원은 또한 본원에 따른 조성물을 피부에 적용 또는 도포하는 것을 포함하는 피부염증 완화를 위한 화장 방법을 제공한다.

본원에 따른 방법에서 피부염증 완화는 상기 추출물에 의한 대식세포에서의 산화질소생성 저해에 의한 것으로, 효과적 염증의 완화가 가능하다.

본 발명의 사위질빵 또는 끈끈이대나물 추출물을 하나 이상 포함하는 조성물은 iNOS 유도 발현의 억제 작용을 통하여 항염증 효과를 나타내며 피부에 자극이 거의 없어, 항염증 기능성 화장료 소재로 사용될 수 있으며 자극완화의 기능성 소재로도 활용 가능하다.

도 1은 본원의 일 구현예에 따른 사위질빵의 NO 생성 억제 효능을 나타낸 그래프이다.
도 2는 본원의 일 구현예에 따른 끈끈이대나물의 NO 생성 억제 효능을 나타낸 그래프이다.
도 3은 본원의 일 구현예에 따른 벌개미취의 NO(nitric oxide) 생성 억제 효능을 나타낸 그래프이다.

본원은 사위질빵 및 끈끈이대나물 추출물이 피부염증방응을 완화시킬수 있다는 것과 상기 추출물이 피부에 대해 자극이 거의 없는 저자극성이라는 것을 밝혔다. 특히 상기 추출물이 iNOS 유도 발현의 억제 작용을 통하여 염증 완화 효과를 갖는다는 것을 규명하였다.

이에 한 양태에서 본원은 사위질빵 또는 끈끈이대나물 추출물로부터 선택되는 하나 이상의 추출물을 포함하는, 피부염증 완화용 화장품 조성물에 관한 것이다.

본원에 따른 추출물에 포함되는 사위질빵(Clematis apiifolia)은 미나리아재비과에 속하는 낙엽이 지는 넓은잎나무로 한국·중국·일본 등지에 분포한다. 덩굴을 이루면서 뻗어나가며 잎은 1회 3출 겹잎으로 마주나며 꽃은 8-9월경에 피는데, 여러 개의 흰색 꽃이 잎겨드랑이에서 원추꽃차례를 이루면서 달린다. 각각의 꽃은 십자형으로 퍼져 마치 꽃잎과 비슷한 모양을 하고 있는 4개의 꽃받침조각을 가지고 있으며, 꽃잎은 없다. 열매는 수과로, 길이 10-12mm 정도의 흰 털이 붙어 있으며 가을에 익는다(국가표준식물목록, 산림청 국가생물종지식정보시스템, 농업과학기술원 잡초마당). 상기 사위질빵은 세포독성, 항균 등에 대해 보고된 바 있지만, 항염증 효능에 대해서는 보고된 바가 없다.

본원에 따른 추출물에 포함되는 끈끈이대나물(Silene armeria)은 석죽과에 속하는 한해살이 또는 두해살이 풀이며 유럽 원산으로, 정원과 해변에 나며 높이는 50cm이다. 전체가 분을 뒤집어쓴 것 같이 흰빛이 나고, 털이 없으며, 줄기 윗부분의 마디 밑에서 점액을 분비한다. 잎은 어긋나며 난형이거나 넓은 피침형이고, 길이 3-4.5cm에 끝이 뾰족하고, 잎자루는 없다. 꽃은 줄기 끝이나 가지 끝에 모여서 달리고, 홍색 또는 흰색, 화관의 지름은 1cm 가량이며 꽃받침은 곤봉 모양으로 길이는 15㎜이다. 가장자리가 흰색이고 막질이며 꽃잎은 5장으로 수평으로 퍼지고, 부수체가 있으며, 끝이 갈라진다. 화관통 안쪽에 작은 비늘 조각이 있고, 수술은 10개, 암술대는 3개이다. 열매는 삭과이며, 긴 타원형이고, 자루가 있으며, 6개로 갈라진다 (국가 표준 식물 목록, 산림청 국가 생물종 지식정보시스템). 끈끈이대나물은 지베렐린 대사와 줄기 성장, 항진균, 항균에 대해 보고된 바 있지만, 항염증 효능에 대해서는 보고된 바가 없다.

본원에 따른 추출물은 단독 또는 조합으로 사용되어 우수한 염증 완화 효과를 나타낼 수 있다.

또한 본원에 따른 화장품은 벌개미취를 추가로 포함할 수 있다.

본원에 따른 추출물에 포함되는 벌개미취(Aster koraiensis Nakai)는 국화과(Compositae)에 속하며 Gymnaster koraiensis 라고도 한다. 주로 제주도와 경기도 이남의 논두렁이나 습지에서 자라는 여러해살이풀로 한국 특산식물이며, 어린 순은 식용으로 사용한다. Aster속의 식물들 중 가새쑥부쟁(A. incises)은 이뇨제로, 참취(A. scaber)는 두통, 현기증에 사용하였고, 항산화 효과에 대한 연구도 다양하게 이루어지고 있다. 한의학적으로는 개미취(A. tataricus)와 벌개미취 뿌리를 자원(紫苑)이라 하여 윤폐하기(潤肺下氣), 화담지해(化痰止咳) 등에 사용하였다. 현재까지 알려진 벌개미취의 생리 활성 연구로는 벌개미취 뿌리의 분획물이 항암, 항균, 항진균 활성이 있다고 보고되었을 뿐, 벌개미취에 대한 생리 활성에 대한 연구는 미비한 상황이며(김창민 등, (1998) 완역 중약대사전; Kim, H. K et al (2004) Kor. J. Food Preserv. 11: 88-93; Heo, S. I. et al(2005) Kor. J. Pharmacogn. 36: 164-170), 항염 효능에 대하여는 알려진 바가 없다.

상기 사위질빵, 끈끈이대나물 및 벌개미취 추출물을 제조함에 있어서, 본원에 따른 생리활성을 포함하는 한, 꽃, 가지, 줄기, 잎, 미성숙열매, 열매를 포함하는 지상부; 뿌리줄기; 및 뿌리 중 선택된 하나 이상의 부위가 사용될 수 있다.

일 구현예에서는 특히 특정 부위가 사용되며, 특정 부위의 효과가 보다 우수한 것으로 나타났으며, 사위질빵은 뿌리, 끈끈이대나물은 꽃, 벌개미취는 지상부가 사용될 수 있으나, 다른 부위의 사용을 배제하는 것은 아니다.

본원의 일 구현예에 따르면 사위질빵은 뿌리와 지상부 추출물로 항염효능을 분석한 결과 IC₅₀가 각각 >0.5, >50 ug/ml로 활성의 차이가 있었으며 끈끈이대나물도 꽃, 전초의 IC₅₀가 각각 >5, >50 ug/ml로 나타나 활성이 우수한 사위질빵의 뿌리, 끈끈이대나물의 꽃 부위가 사용될 수 있으며, 벌개미취는 특히 지상부가 사용될 수 있다. 하지만 이는 상대적인 비교로서, 상대적 활성이 낮은 것도 염증 완화 효과를 나타내기 때문에, 다른 부위의 사용을 배제하는 것은 아니다.

본 명세서에서 사용된 용어 "추출물(extract)"이란 천연물로부터 분리된 활성성분 즉, 목적하는 활성을 보이는 물질을 의미한다. 상기 추출물은 물을 포함하는 극성 또는 비극성 용매, 또는 적절한 유기용매 예를 들어, 메탄올, 에탄올 등, 또는 이들의 혼합용매를 이용하는 추출과정으로 획득할 수 있으며, 추출물, 이의 건조 분말 또는 이를 이용하여 제형화된 모든 형태를 포함한다. 또한 상기 추출물에는 상기 추출과정을 거친 추출물을 분획한 것도 포함된다.

상기 용매는 물을 포함하는 극성, 비극성 용매 또는 유기용매 또는 이들의 혼합용매일 수 있다. 이로 제한하는 것은 아니나, 구체적으로는 물, 메탄올, 에탄올, 부탄올, 프로판올 및 이소프로판올 등을 포함하는, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 클로로포름, 아세톤, 프로필렌글리콜, 초산에틸, 부틸렌글리콜 등의 극성용매와 에테르, 헥산 또는 디클로로메탄의 비극성용매와 같은 유기용매 또는 이들의 혼합용매일 수 있고, 특히 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합용매일 수 있으며, 더욱 특히는 물, 약 50 내지 100%의 메탄올, 에탄올 등의 탄소수 1 내지 4의 알코올일 수 있다. 본원에 따른 일 구현예에서는 유기용매, 특히 메탄올이 용매로 사용되어 우수한 효과를 나타낸다.

본원의 추출물은 통상의 식물 추출물의 공지된 일반적 제조방법을 사용하여 제조될 수 있으며, 특별히 제한되지 않는다. 예를 들면, 초음파 추출법, 환류 냉각 추출법, 열수 추출법 또는 상기 용매를 추출용매로 하여 공지의 방법에 의해 제조하는 방법일 수 있다(예를 들어 Nomura T. Phenolic compounds of the mulberry tree and related plants. In: Herz, W.; Grisebach, H.; Kirby, G.W.; Tamm, Ch. (eds.) Fortschritte der chemie organischer naturstoffe. Springer-Veriag, Wien, 53:87-201 (1988)). 또한 추출과정을 거친 추출물은 이후, 헥산, 메틸렌클로라이드, 아세톤, 에틸아세테이트, 클로로포름 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 용매로 분획과정을 더욱 실시할 수 있다. 상기 분획 시 용매는 2종 이상 개별적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있으며, 용매의 극성에 따라 순차적으로 사용하여 각 용매의 추출물을 제조할 수 있다. 추출물 제조온도는 약 4 내지 120℃일 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 추출시간은 특별히 한정되지는 않으나 약 10분 내지 30일 일 수 있으며, 통상의 추출기기, 초음파분쇄 추출기 또는 분획기를 이용할 수 있다. 제조된 추출물은 이후 감압 여과 또는/및 동결건조하여 용매를 제거할 수 있다. 예를 들면, 본원에 따른 식물에 용매를 약 1:1 내지 1:20 중량비로 가열 순환식 추출탱크에 넣고, 정제수 또는 식용 알콜을 가하여 약 80 내지 100℃에서 약 6-24시간 정도 추출한 후 여과하여 여액을 얻고, 잔여물에 다시 정제수 또는 식용 알콜을 가하여 동일한 과정을 수회 반복할 수 있다. 여액을 합하여, 그 자체로 사용하거나, 이를 진공 농축기로 감압하에서 농축한 후, 열풍 또는 동결 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 분쇄하여 사용할 수 있다.

본원의 일 구현예에서, 본원의 사위질빵, 끈끈이대나물 및 벌개미취 추출물은 가속용매추출장치(ASE)를 이용하여 추출하는 방법으로 실시될 수 있다. 추출 온도는 약 30 내지 150℃일 수 있으나, 이에 한정되진 않는다. 추출시간은 한정되진 않으나 30분 내지 수일 일 수 있으며, 통상의 추출 기기나 초음파분쇄 추출기를 이용할 수 있다. 제조된 추출물은 이후 감압 여과 및 건조하여 사용될 수 있다. 본원에서 건조공정은 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조, 감압건조, 포말건조, 고주파건조 또는 적외선건조 등을 포함하는 방법으로 수행할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본원에 따른 사위질빵, 끈끈이대나물 및 벌개미취 추출물은 iNOS(inducible Nitric oxide synthase) 유도 발현의 억제 작용을 통하여 산화질소(nitric oxide) 생성이 억제됨으로써 염증완화 효과를 나타낸다. 특히 일구현예에서는 대식세포에서 내독소인 LPS(Lipopolysaccharide)에 의해 증가된 iNOS 발현량을 감소시킴으로 염증반응을 근본적으로 억제할 수 있다.

또한 본원의 상기 추출물은 홍반, 부종, 가려움증 등의 피부자극을 거의 나타내지 않으므로 피부에 대해 저자극성이다. 상기 홍반은 피부가 붉게 변하는 것과 혈관의 확장으로 피가 많이 고이는 것을 말하며, 상기 부종은 조직 내에 림프액이나 조직의 삼출물 등의 액체가 고여 과잉 존재하는 상태이고, 상기 가려움증은 피부 질환의 두드러진 증상으로, 피부를 긁거나 문지르고 싶은 충동을 일으키는 불유쾌한 감각을 말한다.

본원에 따른 화장품은 특히 피부 각질세포에 작용할 수 있다. 피부의 최외각층에 존재하는 각질세포(각질형성세포, Keratinocyte)는 섬유아세포, 내피세포 및 진피세포에 주로 있는 면역세포들과 상호작용하여 염증반응의 개시, 조정, 조절에 중요한 역할을 한다. 피하의 염증반응과 관련하여 피부자극은 가장 일반적인 유해반응이며 임상적으로 접촉성 피부염의 70%는 피부자극으로 설명될 수 있다. 홍반, 부종, 균열, 수분손실, 표피탈락, 간지럼증 및 통증은 자극성 또는 알러지성 접촉성 피부염의 대표적 증상들이다. 이것은 세포의 항상성에 이상이 오고 염증반응이 일어나 생기는 증상들이다.

본원에 따른 추출물 또는 화장품 조성물은 피부에 대한 염증을 완화시킨다. 또한 본원에 따른 추출물 또는 화장품 조성물은 피부에 대해 거의 자극을 나타내지 않는 저자극성이다.

이런 측면에서 본원은 사위질빵, 끈끈이대나물 또는 벌개미취 추출물을 포함하는 피부 염증의 완화 또는 개선용 저자극성 화장품 조성물로 제공될 수 있다. 이러한 피부 염증의 완화 또는 개선용 저자극성 화장품 조성물은 피부염증억제 목적으로 사용될 수 있다.

따라서 본원에 따른 사위질빵, 끈끈이대나물 또는 벌개미취 추출물을 포함하는 화장품용 조성물은 미용 또는 성형 목적으로 사용될 수 있다.

본원에서 사용된 용어 ‘화장품’은 인체를 청결미화하여 용모를 밝게 변화시키거나 피부의 건강을 유지 또는 증진하기 위하여 인체에 사용되는 물품을 의미하며, 인체에 대한 작용이 경미한 것을 말한다. 통상적인 의미로서 로션, 크림, 오일, 세정용 제품 및 기능성 화장품을 모두 포함한다. 기능성 화장품이란 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 화장품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 화장품군이나 화장품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 화장품을 의미한다.

본원에 따른 화장품 조성물은 화장품, 예를 들면, 크림, 로션, 앰플, 스킨, 에센스, 샴푸, 비누 등으로 제공될 수 있으며, 다른 측면에서 기초 화장품 조성물(화장수, 크림, 에센스, 클렌징 폼 및 클렌징 워터와 같은 세안제, 팩, 보디오일), 색조 화장품 조성물(화운데이션, 립스틱, 메이크업 베이스), 또는 마스크 팩 또는 팩의 형태로 제조될 수 있다.

본원에 따른 화장품 조성물이 적용될 수 있는 부위는 피부 염증이 유발될 수 있는 부위에 사용될 수 있으며, 이러한 피부염증이 유발될 수 있는 피부를 포함하는 신체 부위를 포함하며, 예를 들면, 얼굴, 목, 손등, 두피 등을 포함할 수 있으나, 이로 제한하는 것은 아니다. 적용되는 부위에 다양한 투여 경로, 예를 들면 전신 또는 국소, 특히 국소 투여, 경피, 또는 주사, 특히 경피 경로로 투여될 수 있다.

본원에 따른 화장품 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 본원의 추출물을 포함하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 화장품, 예를 들면 크림의 경우, 식물성 오일, 유화제, 증점제, 향료, 물, 산화방지제, 및 UV 흡수제를 포함할 수 있다.

본원에 따른 조성물에 포함되는 추출물의 함량은 목적하는 제품의 구체적 용도 또는 제형 등에 따라 달라질 수 있으나, 전체 조성물 중에 약 0.001 내지 약 50 중량%로 포함될 수 있으나, 이 범위를 벋어나는 것을 제외하는 것은 아니다.

본원의 추출물을 포함하는 화장용 조성물은 상기 추출물 이외에 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및/또는 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함할 수 있다.

본원의 추출물을 포함하는 화장용 조성물은 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 조성물을 포함할 수 있다.

수용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 피리독신, 염산피리독신, 비타민 B12, 판토텐산, 니코틴산, 니코틴산아미드, 엽산, 비타민 C, 비타민 H 등을 들 수 있으며, 그들의 염 (티아민염산염, 아스코르빈산나트륨염 등)이나 유도체 (아스코르빈산-2-인산나트륨염, 아스코르빈산-2-인산마그네슘염 등)도 본 발명에서 사용할 수 있는 수용성 비타민에 포함된다. 수용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 수득할 수 있다.

유용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 A, 카로틴, 비타민 D2, 비타민 D3, 비타민 E (d1-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤) 등을 들 수 있으며, 그들의 유도체 (팔미틴산아스코르빈, 스테아르산아스코르빈, 디팔미틴산아스코르빈, 아세트산 dl-알파 토코페롤, 니코틴산 dl-알파 토코페롤비타민 E, dl-판토테닐알코올, D-판토테닐알코올, 판토테닐에틸에테르 등) 등도 본 발명에서 사용되는 유용성 비타민에 포함된다. 유용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 취득할 수 있다.

고분자 펩티드로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 콜라겐, 가수 분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수 분해 엘라스틴, 케라틴 등을 들 수 있다. 고분자 펩티드는 미생물의 배양액으로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 정제 취득할 수 있으며, 또는 통상 돼지나 소 등의 진피, 누에의 견섬유 등의 천연물로부터 정제하여 사용할 수 있다.

고분자 다당으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 히드록시에틸셀룰로오스, 크산탄검, 히알루론산나트륨, 콘드로이틴 황산 또는 그 염(나트륨염 등) 등을 들 수 있다. 예를 들어, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 등은 통상 포유동물이나 어류로부터 정제하여 사용할 수 있다.

스핑고 지질로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 세라미드, 피토스핑고신, 스핑고당지질 등을 들 수 있다. 스핑고 지질은 통상 포유류, 어류, 패류, 효모 또는 식물 등으로부터 통상의 방법에 의해 정제하거나 화학 합성법에 의해 취득할 수 있다.

해초 엑기스로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 갈조 엑기스, 홍조 엑기스, 녹조 엑기스 등을 들 수 있으며, 또, 이들의 해초 엑기스로부터 정제된 칼라기난, 아르긴산, 아르긴산나트륨, 아르긴산칼륨 등도 본 발명에서 사용되는 해초 엑기스에 포함된다. 해초 엑기스는 해초로부터 통상의 방법에 의해 정제하여 취득할 수 있다.

본원의 추출물을 포함하는 화장용 조성물에는 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합해도 된다.

이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.

유지 성분으로서는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 들 수 있다.

에스테르계 유지로서는 트리2-에틸헥산산글리세릴, 2-에틸헥산산세틸, 미리스틴산이소프로필, 미리스틴산부틸, 팔미틴산이소프로필, 스테아르산에틸, 팔미틴산옥틸, 이소스테아르산이소세틸, 스테아르산부틸, 리놀레산에틸, 리놀레산이소프로필, 올레인산에틸, 미리스틴산이소세틸, 미리스틴산이소스테아릴, 팔미틴산이소스테아릴, 미리스틴산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 세바신산디에틸, 아디핀산디이소프로필, 네오펜탄산이소알킬, 트리(카프릴, 카프린산)글리세릴, 트리2-에틸헥산산트리메틸롤프로판, 트리이소스테아르산트리메틸롤프로판, 테트라2-에틸헥산산펜타엘리슬리톨, 카프릴산세틸, 라우린산데실, 라우린산헥실, 미리스틴산데실, 미리스틴산미리스틸, 미리스틴산세틸, 스테아르산스테아릴, 올레인산데실, 리시노올레인산세틸, 라우린산이소스테아릴, 미리스틴산이소트리데실, 팔미틴산이소세틸, 스테아르산옥틸, 스테아르산이소세틸, 올레인산이소데실, 올레인산옥틸도데실, 리놀레산옥틸도데실, 이소스테아르산이소프로필, 2-에틸헥산산세토스테아릴, 2-에틸헥산산스테아릴, 이소스테아르산헥실, 디옥탄산에틸렌글리콜, 디올레인산에틸렌글리콜, 디카프린산프로필렌글리콜, 디(카프릴,카프린산)프로필렌글리콜, 디카프릴산프로필렌글리콜, 디카프린산네오펜틸글리콜, 디옥탄산네오펜틸글리콜, 트리카프릴산글리세릴, 트리운데실산글리세릴, 트리이소팔미틴산글리세릴, 트리이소스테아르산글리세릴, 네오펜탄산옥틸도데실, 옥탄산이소스테아릴, 이소노난산옥틸, 네오데칸산헥실데실, 네오데칸산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 이소스테아르산이소스테아릴, 이소스테아르산옥틸데실, 폴리글리세린올레인산에스테르, 폴리글리세린이소스테아르산에스테르, 시트르산트리이소세틸, 시트르산트리이소알킬, 시트르산트리이소옥틸, 락트산라우릴, 락트산미리스틸, 락트산세틸, 락트산옥틸데실, 시트르산트리에틸, 시트르산아세틸트리에틸, 시트르산아세틸트리부틸, 시트르산트리옥틸, 말산디이소스테아릴, 히드록시스테아르산 2-에틸헥실, 숙신산디2-에틸헥실, 아디핀산디이소부틸, 세바신산디이소프로필, 세바신산디옥틸, 스테아르산콜레스테릴, 이소스테아르산콜레스테릴, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 올레인산콜레스테릴, 올레인산디히드로콜레스테릴, 이소스테아르산피트스테릴, 올레인산피트스테릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소세틸, 12-스테알로일히드록시스테아르산스테아릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소스테아릴 등의 에스테르계 등을 들 수 있다.

탄화 수소계 유지로서는 스쿠알렌, 유동 파라핀, 알파-올레핀올리고머, 이소파라핀, 세레신, 파라핀, 유동 이소파라핀, 폴리부덴, 마이크로크리스탈린왁스, 와셀린 등의 탄화 수소계 유지 등을 들 수 있다.

실리콘계 유지로서는 폴리메틸실리콘, 메틸페닐실리콘, 메틸시클로폴리실록산, 옥타메틸폴리실록산, 데카메틸폴리실록산, 도데카메틸시클로실록산, 디메틸실록산ㆍ메틸세틸옥시실록산 공중합체, 디메틸실록산ㆍ메틸스테알록시실록산 공중합체, 알킬 변성 실리콘유, 아미노 변성 실리콘유 등을 들 수 있다.

불소계 유지로서는 퍼플루오로폴리에테르 등을 들 수 있다.

동물 또는 식물 유지로서는 아보카도유, 아르몬드유, 올리브유, 참깨유, 쌀겨유, 새플라워유, 대두유, 옥수수유, 유채유, 행인(杏仁)유, 팜핵유, 팜유, 피마자유, 해바라기유, 포도종자유, 면실유, 야자유, 쿠쿠이너트유, 소맥배아유, 쌀 배아유, 시아버터, 월견초유, 마커데이미아너트유, 메도홈유, 난황유, 우지(牛脂), 마유, 밍크유, 오렌지라피유, 호호바유, 캔데리러왁스, 카르나바왁스, 액상 라놀린, 경화피마자유 등의 동물 또는 식물 유지를 들 수 있다.

보습제로서는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자, 지용성 고분자 등을 들 수 있다.

수용성 저분자 보습제로서는 세린, 글루타민, 솔비톨, 만니톨, 피롤리돈-카르복실산나트륨, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜B(중합도 n = 2 이상), 폴리프로필렌글리콜(중합도 n = 2 이상), 폴리글리세린B(중합도 n = 2 이상), 락트산, 락트산염 등을 들 수 있다.

지용성 저분자 보습제로서는 콜레스테롤, 콜레스테롤에스테르 등을 들 수 있다.

수용성 고분자로서는 카르복시비닐폴리머, 폴리아스파라긴산염, 트라가칸트, 크산탄검, 메틸셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 수용성 키틴, 키토산, 덱스트린 등을 들 수 있다.

지용성 고분자로서는 폴리비닐피롤리돈ㆍ에이코센 공중합체, 폴리비닐피롤리돈ㆍ헥사데센 공중합체, 니트로셀룰로오스, 덱스트린지방산에스테르, 고분자 실리콘 등을 들 수 있다.

에몰리엔트제로서는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산, 라놀린지방산콜레스테릴에스테르 등을 들 수 있다.

계면 활성제로서는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제, 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.

비이온성 계면 활성제로서는 자기 유화형 모노스테아르산글리세린, 프로필렌글리콜지방산에스테르, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 솔비탄지방산에스테르, POE (폴리옥시에틸렌)솔비탄지방산에스테르, POE 솔비트지방산에스테르, POE 글리세린지방산에스테르, POE 알킬에테르, POE 지방산에스테르, POE 경화피마자유, POE 피마자유, POEㆍPOP (폴리옥시에틸렌ㆍ폴리옥시프로필렌) 공중합체, POEㆍPOP 알킬에테르, 폴리에테르변성실리콘, 라우린산알카놀아미드, 알킬아민옥시드, 수소첨가대두인지질 등을 들 수 있다.

음이온성 계면 활성제로서는 지방산비누, 알파-아실술폰산염, 알킬술폰산염, 알킬알릴술폰산염, 알킬나프탈렌술폰산염, 알킬황산염, POE 알킬에테르황산염, 알킬아미드황산염, 알킬인산염, POE 알킬인삼염, 알킬아미드인산염, 알킬로일알킬타우린염, N-아실아미노산염, POE 알킬에테르카르복실산염, 알킬술포숙신산염, 알킬술포아세트산나트륨, 아실화 가수분해 콜라겐펩티드염, 퍼플루오로알킬인산에스테르 등을 들 수 있다.

양이온성 계면 활성제로서는 염화알킬트리메틸암모늄, 염화스테아릴트리메틸암모늄, 브롬화스테아릴트리메틸암모늄, 염화세토스테아릴트리메틸암모늄, 염화디스테아릴디메틸암모늄, 염화스테아릴디메틸벤질암모늄, 브롬화베헤닐트리메틸암모늄, 염화벤잘코늄, 스테아르산디에틸아미노에틸아미드, 스테아르산디메틸아미노프로필아미드, 라놀린 유도체 제 4급 암모늄염 등을 들 수 있다.

양성 계면 활성제로서는 카르복시베타인형, 아미드베타인형, 술포베타인형, 히드록시술포베타인형, 아미드술포베타인형, 포스포베타인형, 아미노카르복실산염형, 이미다졸린 유도체형, 아미드아민형 등의 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.

유기 및 무기 안료로서는 규산, 무수규산, 규산마그네슘, 탤크, 세리사이트, 마이카, 카올린, 벵갈라, 클레이, 벤토나이트, 티탄피막운모, 옥시염화비스무트, 산화지르코늄, 산화마그네슘, 산화아연, 산화티탄, 산화알루미늄, 황산칼슘, 황산바륨, 황산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화철, 군청, 산화크롬, 수산화크롬, 칼라민 및 이들의 복합체등의 무기 안료 ; 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐수지, 요소수지, 페놀수지, 불소수지, 규소수지, 아크릴수지, 멜라민수지, 에폭시수지, 폴리카보네이트수지, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 실크파우더, 셀룰로오스, CI 피그먼트옐로우, CI 피그먼트오렌지 등의 유기 안료 및 이들의 무기 안료와 유기 안료의 복합 안료 등을 들 수 있다.

유기 분체로서는 스테아르산칼슘 등의 금속비누 ; 세틸린산아연나트륨, 라우릴린산아연, 라우릴린산칼슘 등의 알킬인산금속염 ; N-라우로일-베타-알라닌칼슘, N-라우로일-베타-알라닌아연, N-라우로일글리신칼슘 등의 아실아미노산 다가금속염 ; N-라우로일-타우린칼슘, N-팔미토일-타우린칼슘 등의 아미드술폰산 다가금속염 ; N-엡실론-라우로일-L-리진, N-엡실론-팔미토일리진, N-알파-파리토일올니틴, N-알파-라우로일아르기닌, N-알파-경화우지지방산아실아르기닌 등의 N-아실염기성아미노산 ; N-라우로일글리실글리신 등의 N-아실폴리펩티드 ; 알파-아미노카프릴산, 알파-아미노라우린산 등의 알파-아미노지방산 ; 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 나일론, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리스티렌, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 사불화에틸렌 등을 들 수 있다.

자외선 흡수제로서는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산에틸렌글리콜, 살리신산페닐, 살리신산옥틸, 살리신산벤질, 살리신산부틸페닐, 살리신산호모멘틸, 계피산벤질, 파라메톡시계피산-2-에톡시에틸, 파라메톡시계피산옥틸, 디파라메톡시계피산모노-2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필ㆍ디이소프로필계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 히드록시메톡시벤조페논, 히드록시메톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디히드록시메톡시벤조페논, 디히드록시메톡시벤조페논디술폰산나트륨, 디히드록시벤조페논, 테트라히드록시벤조페논, 4-tert-부틸-4'-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-p-(카르보-2'-에틸헥실-1'-옥시)-1,3,5-트리아진, 2-(2-히드록시-5-메틸페닐)벤조트리아졸 등을 들 수 있다.

살균제로서는 히노키티올, 트리클로산, 트리클로로히드록시디페닐에테르, 크로르헥시딘글루콘산염, 페녹시에탄올, 레조르신, 이소프로필메틸페놀, 아줄렌, 살리칠산, 진크필리티온, 염화벤잘코늄, 감광소 301호, 모노니트로과이어콜나트륨, 운데시렌산 등을 들 수 있다.

산화 방지제로서는 부틸히드록시아니솔, 갈릭산프로필, 엘리소르빈산 등을 들 수 있다.

pH 조정제로서는 시트르산, 시트르산나트륨, 말산, 말산나트륨, 프말산, 프말산나트륨, 숙신산, 숙신산나트륨, 수산화나트륨, 인산일수소나트륨 등을 들 수 있다.

알코올로서는 세틸알코올 등의 고급 알코올을 들 수 있다.

또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총중량에 대하여 바람직하게는 0.01 - 5 % 중량, 보다 바람직하게는 0.01 - 3 % 중량로 배합된다.

본원의 추출물을 포함하는 화장용 조성물은 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있다.

본원에 따른 화장품 조성물은 화장품용으로/피부학적으로 허용가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다. "화장품용으로/피부학적으로 허용가능한"은 지나친 독성, 불상용성, 불안정성, 자극, 알러지 반응 등이 없이 조직(예를 들어, 피부 또는 모발)과 접촉하여 사용하기에 적합함을 의미한다.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 유액, 크림, 화장수, 팩, 파운데이션, 로션, 미용액, 모발화장료 등을 들 수 있다.

구체적으로, 본 발명의 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저의 제형을 포함한다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

또 다른 측면에서 본원은 사위질빵, 끈끈이대나물 및 벌개미취 추출물로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 추출물을 포함하는 상기 조성물을 적용하는 것을 포함하는 피부염증을 완화시키는 화장 방법에 관한 것이다.

상술한 바와 같이 본원에 따른 상기 추출물은 항염증 효능을 가지고 저자극성이므로, 피부 염증을 완화시키기 위해 사용될 수 있으며, 추출물 및 처리방법에 대하여는 앞선 기재 및 본원의 실시예 등에 기재된 것을 참조할 수 있다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위해서 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐 본 발명이 하기의 실시예에 한정되는 것은 아니다.

실시예

실시예 1. 벌개미취, 사위질빵, 끈끈이대나물 추출물의 제조

사위질빵, 끈끈이대나물 및 벌개미취의 분말시료 각각 100, 62, 100g을 50℃ 온도에서 메탄올을 용매로 사용하여 가속용매추출장치(ASE)를 사용하여 30분간 2회 반복 추출하고 여과한 후 50℃의 감압농축장치에서 용매를 제거하여 각각 13, 6, 15g의 추출물을 얻었다.

실시예 2. 산화질소(Nitric oxide) 생성 효소인 iNOS 저해 활성을 통한 항염 활성 분석

상기 실시예에서 얻은 시료의 시험관 내 시험법(in vitro)인 산화질소(Nitric oxide) 생성 저해 활성을 확인하기 위하여 문헌에 기재된 방법(Pyee Y et al, J Nat Prod, 77(4) 917-24, 2014)을 응용하여 하기와 같이 실험을 수행하였다.

염증 반응 및 외상이 있을 때 발현이 증가하는 산화질소 생성효소 iNOS (inducible nitric oxide synthase)에 대한 본 발명에 따른 추출물의 저해 활성을 시험하였다.

구체적으로 3 x 10⁵ cells/ml의 RAW 264.7 (ATCC^® TIB-71^TM)세포를 10% FBS (Fetal bovine serum)가 포함된 (Dulbeco's Modified Eagle's Medium (DMEM) 배지(medium))로 24-웰 플레이트의 각 웰에 1ml씩 넣고 24시간 배양하였다. 24시간 후 부착된 세포를 PBS (phosphate-buffered saline)으로 세척 후 10% FBS-DMEM 배지와 본 발명의 추출물(사위질빵, 끈끈이대나물 및 벌개미취 추출물을 각각 2.5, 5, 10, 20μg/ml)로 처리하고 30분 후, 염증을 유발하는 물질인 내독소로 1μg/ml LPS (lipopolysaccharide, 지질다당류)를 넣어 주고 37℃, 5% CO₂에서 20시간 배양하였다 (실험군). 블랭크(blank)로서 LPS 및 본 발명에 따른 조성물 첨가 없이 배양된 대식세포주인 RAW 264.7 세포(ATCC^® TIB-71^TM)와 대조군으로서 LPS만 첨가되어 배양된 RAW 264.7 세포를 사용하였다.

각 웰의 상층액을 100μl씩 취하여 술파닐아미드(Sulfanilamide) 용액 및 N-(1-나프틸)-에틸렌디아민 (N-(1-naphtyl)-ethylenediamine) 용액과 각각 90μl씩과 반응시킨 후 540nm에서 흡광도를 측정하여 배양액에 생성된 질산염(nitrate) 또는 아질산염(nitrite)의 양을 확인하여 그 결과를 도 1, 2 및 3에 나타내었다.

NaNO₂ 용액을 이용하여 표준 검량선을 작성하고 측정한 흡광도를 바탕으로 하기 수학식 1에 의해 대조군에 대한 실험군의 각 실험 물질 처리에 따른 NaNO₂ 농도로 환산하여 LPS만 처리한 군과 비교하는 방법으로 시료의 산화질소(NO) 생성 저해 활성을 평가하였다. 하기 수학식 1을 이용하여 질산염 농도로 저해율(%)을 구한 후 IC₅₀ 값을 산출하였다. IC₅₀ 값은 50% 억제율에 대한 시험 물질의 농도이다.

[수학식 1]

도 1에 나타난 바와 같이 사위질빵의 경우는 2.5, 5, 10, 20μg/ml의 농도 처리시 LPS 단독 처리구에 비해 NO 생성이 각각 농도 의존적으로 17.7, 33.2, 49.5, 70.0% 억제되었고, IC₅₀은 10.2μg/ml 이었다.

도 2에 나타난 바와 같이 끈끈이대나물은 2.5, 5, 10, 20μM의 농도를 처리한 결과 LPS 단독 처리구에 비해 NO 생성이 각각 4.5, 8.6, 14.7, 72.5% 억제되었고, IC₅₀은 18.8μg/ml 이었다.

도 3에 나타난 바와 같이, 벌개미취를 2.5, 5, 10, 20μg/ml의 농도를 처리한 결과 LPS 단독 처리구에 비해 NO 생성이 각각 농도 의존적으로 5.5, 25.0, 40.4, 62.5% 억제되었고 IC₅₀은 16.5μg/ml 이었다.

상기 결과는 본원에 따른 추출물이 세포에서 iNOS 활성 저해를 통해 NO 생성을 억제하여 염증 반응을 근본적으로 효과적으로 억제할 수 있음을 나타낸다.

양성 대조 물질로 사용한 2-Amino-5,6-dihydro-6-methyl-4H-1,3-thiazine hydrochloride (AMT)는 50μM에서 90% 이상 NO 생성을 저해하는 것으로 나타났으며 iNOS 생성 저해 효과가 시료 자체(벌개미취, 사위질빵, 끈끈이대나물)의 독성에 의한 것인지를 확인하기 위해서 MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide, Sigma-Aldrich, USA) 분석을 수행하였다.

그 결과 벌개미취, 사위질빵, 끈끈이대나물의 최고 농도인 20μg/ml 에서 세포 독성(세포 생존율(cell viability))이 나타나지 않아 본원에 따른 사위질빵, 끈끈이대나물 및 벌개미취에 의한 효과가 독성에 의한 것이 아님을 확인할 수 있었다.

실시예 3. 인체피부 안전성 평가 (벌개미취 추출물 외 2종 추출물의 인체피부 일차자극 평가)

시험 시료에 대한 객관적인 평가를 위해 식품의약품안전청 고시 제2004-80호 기능성화장품등의 심사에 관한 규정 중 안전성에 관한 제출 자료에 해당하는 인체첩포시험을 실시하였으며 본 시험법은 의약품 등의 독성시험기준에 고시된 평가법이다.

- 피험자 수 : 30명 이상

- 시험제품 : 기능별 생분해성 마이크로니들 시제품군과 기능별 화장료 시제품군, 병행 화장료군

- 투여농도 및 용량 : 원료에 따라서 사용 시 농도를 고려해서 여러 단계의 농도와 용량을 설정하여 실시하며 완제품의 경우는 제품의 특성에 따라 그대로 적용

- 첩포 부위 : 사람의 상등부(정중선의 부분은 제외) 또는 전완부등 인체사용 시험을 평가 적정부위 폐쇄 첩보

- 관찰 : 첩포 24시간 또는 48시간 후에 첩포를 제거하고, 피부 반응 관찰 및 판정

- 결과해석 : 판독기준은 Frosch & Kligman 과 The Cosmetic, Toiletry, and Fragrance Association(CTFA)을 변형한 아래와 같은 기준에 따랐다.

[표 1] Grading scales to evaluate the severity after patch test

보다 자세하게는 벌개미취 추출물 외 2종 추출물의 인체피부에 대한 일차자극 유무를 확인하고자 선정기준 및 제외기준에 부합하는 20~50세의 여성피험자 32명(평균 40.6±8.8세)을 대상으로 인체 첩포시험을 실시하였다. 모든 시료는 1%의 농도로 증류수에 희석하여 48시간 동안 첩포하였으며, 첩포를 제거한 후에는 skin marker로 시험 부위를 표시하고 30분, 48, 72시간 후에 각 시험 부위를 관찰하였다. 시험결과, 모든 시료에서는 아무런 피부반응이 관찰되지 않았다.

따라서, 본원에 따른 사위질빵, 끈끈이대나물 및 벌개미취 추출물은 인체피부 일차자극 측면에서 저자극 범주로 인체피부에 안전한 것으로 판단되었다.

[표 2] 피부 1차 자극시험 결과 (n=32)

이하, 본 발명의 제형예로서 크림 조성물, 마사지크림 조성물, 로션 조성물, 스킨로션 조성물, 에센스 조성물, 팩 조성물 및 클렌징폼 조성물을 예시하고 있으나, 본 발명의 화장료 조성물을 포함하는 제형은 이에 한정되는 것은 아니다.

제형예 1. 크림 조성물

유상과 수상을 각각 75℃로 가열 혼합한 후 실온으로 냉각한다.

제형예 2. 맛사지크림 조성물

유상과 수상을 각각 75℃로 가열 용해 혼합한 후 실온으로 냉각한다.

제형예 3. 로션 조성물

유상과 수상을 각각 75℃로 가열 혼합 유화한 후 실온으로 냉각한다.

제형예 4. 스킨로션 조성물

수상과 에탄올상을 각각 제조 혼합한 후 여과한다.

제형예 5. 에센스 조성물

수상과 에탄올상을 각각 제조 혼합한 후 여과한다.

제형예 6. 팩 조성물

수상과 에탄올상을 각각 분산 용해하여 혼합시킨 후 실온으로 냉각한다.

제형예 7. 클렌징폼 조성물

수상과 오일상을 각각 분산 용해하여 혼합 검화한 후 실온으로 냉각한다.

이상에서 본원의 예시적인 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본원의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구범위에서 정의하고 있는 본원의 기본 개념을 이용한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본원의 권리범위에 속하는 것이다.

본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는, 달리 정의되지 않는 이상, 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미로 사용된다. 본 명세서에 참고문헌으로 기재되는 모든 간행물의 내용은 본 발명에 도입된다.

Claims (9)

1. 끈끈이대나물의 메탄올 추출물을 포함하는, 피부 염증 완화용 화장품 조성물.
   
2. 제 1 항에 있어서, 상기 조성물은 벌개미취 또는 사위질빵 메탄올 추출물을 추가로 포함하는 것인, 피부 염증 완화용 화장품 조성물.
   
3. 제 2 항에 있어서,
   상기 사위질빵, 끈끈이대나물 또는 벌개미취는 각각 꽃, 가지, 줄기, 잎, 미성숙열매, 또는 열매를 포함하는 지상부; 뿌리줄기; 및 뿌리 중 선택된 하나 이상의 부위인, 피부염증 완화용 화장품 조성물.
   
4. 제 3 항에 있어서,
   상기 사위질빵은 뿌리, 상기 끈끈이대나물은 꽃, 상기 벌개미취는 지상부의 추출물인, 피부염증 완화용 화장품 조성물.
   
5. 삭제
6. 삭제
7. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
   상기 추출물은 세포의 산화질소 생성 저해를 통한 피부 염증 완화인, 피부 염증 완화용 화장품 조성물.
   
8. 제 1 항 또는 제 2 항에 따른 조성물을 피부에 적용하는 것을 포함하는 피부염증 완화를 위한 화장 방법.
   
9. 제 8 항에 있어서, 상기 피부염증 완화는 상기 추출물에 의한 대식세포에서의 산화질소생성 저해에 의한 것인, 피부염증 완화를 위한 화장 방법.

Images