KR101876911B1 - 흑목이버섯 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선 및 보습용 화장료 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 흑목이버섯(Auricularia auricula) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선 및 보습용 화장료 조성물 및 건강기능성 식품에 관한 것으로, 본 발명의 흑목이버섯 열수 추출물은 다양한 생리활성 분석을 통해 피부건강 개선 효능이 우수한 뷰티 소재로써 다양한 피부 개선 관련 제품으로 활용될 수 있음을 시사하였고, 나아가 이너뷰티(inner beauty) 소재로써 식품 또는 관련 제품 개발에도 유용하게 활용될 수 있을 것이다.
Description
본 발명은 흑목이버섯 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선 및 보습용 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 흑목이버섯 열수 추출물의 항산화 효과, 프로콜라겐 합성 촉진 및 HAS(hyaluronic acid synthase)-3의 발현 증대 효과에 관한 것이다.
흑목이버섯(Auricularia auricula)은 목이과의 버섯으로, 불규칙한 귀 또는 접시상의 형태를 가진다. 생것 상태로는 젤라틴질이지만 건조하면 수축하여 단단해진다. 흑목이 야생종은 자실체의 지름이 2~7cm의 크기로 여름에서 가을에 걸쳐 물참나무, 너도밤나무 등의 활엽수의 고목에 군생한다. 시판품의 건조흑목이는 균상 또는 나무 재배에 의한 것이다. 독특한 이 촉감을 상미하여 중국요리에 쓰인다. 흑목이(건조)의 성분은 100g 중 수분 13.7g, 단백질 9.0g, 지방 1.0g, 탄수화물 60.7g, 섬유질 11.7g, 회분 4.6g, 칼슘 180mg, 인 210mg, 철 44.0mg, 칼륨 1,200mg, 비타민 B1 0.19mg, B2 1.10mg, 니아신(niacin) 4.1mg이다. 유사한 것으로 털목이버섯(Auricularia polytricha)이 있는데, 흑목이버섯 보다 약간 크고 흑목이버섯과 같이 이용되고 있으나 품질은 흑목이버섯 보다 떨어진다.
흰목이버섯(Tremella fuciformis)은 흰목이 과에 속하는 식물로 원산지는 중국, 일본, 한국 등이며 구릉지대 및 산간부 활엽수의 썩은 나무에 발생한다. 자실체의 지름은 3~8cm로 순백색이고 반투명한 젤라틴과 유사하며, 인간의 귀와 유사한 형태로 인해 은이(銀耳)라 불린다. 중국 전통 약학 이론과 중국 고대 한방 의학서에 의하면 흰목이버섯은 만성 기관지염의 치료에 사용될 뿐만 아니라, 당, 송시대에는 미용식품으로 섭취하였다고 기록되었다.
현재 환경오염과 환경 호르몬, 잘못된 식습관 등으로 인해 피부 건조증, 피부염, 아토피 등의 다양한 피부질환들이 남녀노소 구분 없이 발병하고 있어 피부건강에 대한 관심이 뜨거우며, 피부질환을 앓고 있지 않아도 피부 상태 개선 및 유지에 많은 노력을 기울이고 있는 실정이다.
이에 본 발명자들은 흑목이버섯과 흰목이버섯 각각의 피부건강 개선 효능에 관한 연구를 수행하고 효능 비교를 통해 우수 소재 발굴 및 뷰티 소재로서의 가능성을 확인하고자 하였고, 흑목이버섯과 흰목이버섯의 추출물을 제조하여 생리활성을 분석한 결과 흑목이버섯 열수 추출물의 피부건강 개선과 관련된 생리활성 효능이 흰목이버섯 열수 추출물 보다 우수한 것을 확인하였다.
한편, 한국등록특허 제1516384호에는 '흰목이 버섯 추출물의 제조방법 및 이를 포함하는 화장료 조성물'이 개시되어 있고, 한국공개특허 제2011-0052095호에는 흰목이 버섯 추출물 및 히아루론산을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 '흰목이 버섯 추출물을 함유하는 피부 보습용 화장료 조성물'이 개시되어 있으나, 본 발명의 흑목이버섯 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선 및 보습용 화장료 조성물에 대해서는 기재된 바가 없다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명자들은 흑목이버섯과 흰목이버섯의 열수 추출물을 제조하여 각 추출물의 생리활성을 분석한 결과, DPPH 자유 라디칼 소거능 및 SO 소거능 분석을 통한 항산화 활성 비교에서 흰목이버섯 열수 추출물에 비해 흑목이버섯 열수 추출물이 우수한 효능을 보임을 확인하였고, 콜라겐의 전구물질인 프로콜라겐의 합성 촉진능과 보습인자인 히알루론산의 합성효소인 HAS-3의 mRNA 발현 증가 수준을 비교한 결과에서도 흑목이버섯 열수 추출물이 무처리 대조군 및 흰목이버섯 열수 추출물에 비해 우수한 효과를 보이는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 흑목이버섯(Auricularia auricula) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선 및 보습용 화장료 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 흑목이버섯 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선 및 보습 증진용 건강기능성 식품을 제공한다.
본 발명의 흑목이버섯 열수 추출물은 다양한 생리활성 분석을 통해 피부건강 개선 효능이 우수하여 뷰티 소재로써 다양한 피부 개선 관련 제품으로 활용될 수 있음을 시사하였고, 나아가 이너뷰티(inner beauty) 소재로써 식품 또는 관련 제품 개발에도 활용하여 고부가가치를 지닌 기능성 제품 개발 창출에도 유용하게 이용될 수 있을 것이다.
도 1은 293T 세포에 대한 흑목이버섯(A)과 흰목이버섯 열수 추출물(B)의 세포독성을 분석한 결과이다. 각 추출물의 단위는 ㎍/㎖ 이다.
도 2는 HaCaT 세포에 대한 흑목이버섯(A)과 흰목이버섯 열수 추출물(B)의 세포독성을 분석한 결과이다. 각 추출물의 단위는 ㎍/㎖ 이다.
도 3은 흑목이버섯(A)과 흰목이버섯 열수 추출물(B)의 DPPH 자유 라디칼 소거능을 분석한 결과이다.
도 4는 흑목이버섯(A)과 흰목이버섯 열수 추출물(B)의 SO 소거능을 분석한 결과이다.
도 5는 흑목이버섯(A)과 흰목이버섯 열수 추출물(B)의 프로콜라겐(procollagen) 합성능을 분석한 결과로, control은 동결건조한 흑/흰목이버섯 열수 추출물을 녹이는데 사용한 DMSO(dimethyl sulfoxide)이다.
도 6은 흑목이버섯(A)과 흰목이버섯 열수 추출물(B)의 HAS-3 발현 유도 수준을 분석한 결과로, control은 동결건조한 흑/흰목이버섯 열수 추출물을 녹이는데 사용한 DMSO이다.
도 2는 HaCaT 세포에 대한 흑목이버섯(A)과 흰목이버섯 열수 추출물(B)의 세포독성을 분석한 결과이다. 각 추출물의 단위는 ㎍/㎖ 이다.
도 3은 흑목이버섯(A)과 흰목이버섯 열수 추출물(B)의 DPPH 자유 라디칼 소거능을 분석한 결과이다.
도 4는 흑목이버섯(A)과 흰목이버섯 열수 추출물(B)의 SO 소거능을 분석한 결과이다.
도 5는 흑목이버섯(A)과 흰목이버섯 열수 추출물(B)의 프로콜라겐(procollagen) 합성능을 분석한 결과로, control은 동결건조한 흑/흰목이버섯 열수 추출물을 녹이는데 사용한 DMSO(dimethyl sulfoxide)이다.
도 6은 흑목이버섯(A)과 흰목이버섯 열수 추출물(B)의 HAS-3 발현 유도 수준을 분석한 결과로, control은 동결건조한 흑/흰목이버섯 열수 추출물을 녹이는데 사용한 DMSO이다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 흑목이버섯(Auricularia auricula) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선 및 보습용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 화장료 조성물에서, 상기 흑목이버섯 추출물은 건조된 흑목이버섯의 물, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 또는 이의 혼합 용매 추출물일 수 있고, 바람직하게는 건조된 흑목이버섯의 열수 추출물일 수 있고, 구체적으로는 건조된 흑목이버섯 90~110g에 증류수를 2.5~3.5L 넣고 110~130℃의 온도에서 0.5~1.5시간동안 추출하고 원심분리하여 상층액만을 회수하여 동결건조하여 제조된 것일 수 있고, 더욱 구체적으로는 건조된 흑목이버섯 100g에 3차 증류수를 3L 넣고 121℃에서 1시간 동안 추출하고 원심분리하여 제조된 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 화장료 조성물은 우수한 자유 라디칼 소거능과 더불어 콜라겐의 전구물질인 프로콜라겐의 합성을 촉진시키는 효과와 히알루론산 합성효소-3(HAS-3)의 발현 수준을 증가시키는 효과를 가진 흑목이버섯 추출물을 유효성분으로 포함하고 있으므로, 피부 주름 개선 및 보습의 기능을 가진 화장료 조성물이다.
본 발명의 화장료 조성물에는 상기 유효성분 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭과 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 스킨, 스킨 소프트너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐로션, 영양로션, 마사지크림, 영양크림, 아이 크림, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 클렌징폼, 클렌징 워터, 클렌징 로션, 클렌징 크림, 바디로션, 바디클렌져, 비누 및 파우더의 화장품 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로 히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명은 또한, 흑목이버섯(Auricularia auricula) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선 및 보습 증진용 건강기능성 식품을 제공한다.
본 발명의 건강기능성 식품에 있어서, 상기 흑목이버섯 추출물은 전술한 바와 같다.
본 발명의 상기 피부 주름 개선 및 보습 증진용 건강기능성 식품은 다양한 형태의 식품 첨가제 또는 기능성 식품을 제공할 수 있다. 상기 피부 주름 개선 및 보습 증진용 건강기능성 식품으로 예를 들면, 침출차, 액상차, 음료, 발효유, 치즈, 젤리, 요구르트, 주스, 생균 제제 및 건강보조식품 등으로 가공될 수 있으며, 그 외 목적에 따라 다양한 식품 첨가제의 형태로 사용될 수 있다. 또한, 건강기능성 식품의 제형은 용액, 유화물, 점성형 혼합물, 타블렛, 분말, 환 등의 다양한 형태일 수 있으며, 이는 단순 음용, 주사투여, 스프레이 방식 또는 스퀴즈 방식 등의 다양한 방법으로 투여될 수 있다.
바람직하게는, 상기 피부 주름 개선 및 보습 증진용 건강기능성 식품은 이너뷰티 푸드(inner beauty) 형태로 섭취함으로써 더욱 우수한 효과를 갖는 장점을 가진다. 상기 이너뷰티(inner beauty)는 '먹는 화장품 또는 뷰티 푸드'로 일컬어지는 푸드로, 피부에 좋은 여러 가지 성분을 몸속으로 흡수시켜 피부 체질을 건강하게 바꾸는 식품을 지칭하며, 피부 타입에 맞는 화장품을 고르듯 피부 컨디션과 라이프스타일을 고려해 개개인에게 맞는 이너뷰티 푸드를 선택하여 섭취할 수 있다. 보다 바람직하게는 상기 화장료 조성물을 포함하는 화장품과 상기 추출물을 포함하는 이너뷰티 푸드를 혼용할 경우, 화장품만 사용하는 것에 비해 피부 주름 개선 및 보습 증진 효과가 월등히 높아져 더욱 효과적인 피부 주름 개선 및 보습 증진 효과를 볼 수 있는 장점을 가진다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
재료 및 방법
1. 흑/흰목이버섯 열수 추출물 제조
흑/흰목이버섯의 생리활성을 분석하고자 흑목이버섯과 흰목이버섯 각각의 열수 추출물을 제조하였다. 농업회사법인 버섯마루(유)에서 제공받은 건흑목이버섯과 건흰목이버섯 100g에 3차 증류수를 3L씩 넣고 121℃에서 1시간 동안 추출하였다. 1시간 경과 후, 원심분리하여 상층액만 회수한 다음 동결건조하여 흑목이버섯 열수 추출물은 25.74g을, 흰목이버섯 열수 추출물은 30.75g을 얻었다. 하기 생리활성 실험을 위해서 동결건조된 각각의 열수 추출물 분말은 DMSO에 녹여서 사용하였다.
2. 흑/흰목이버섯 열수 추출물의 생리활성 분석
2-1. 세포독성 분석
흑/흰목이버섯 열수 추출물의 안전성을 알아보기 위해 인간 정상 세포주(cell line) 293T(human kidney epithelial cell)와 인간 각질세포주 HaCat(human keratinocyte) 세포에서 MTS[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium] 어세이(Promega, 미국) 방법을 이용하여 세포 생존율을 분석하였다. 각각의 세포를 96웰 플레이트에 2x104 세포/웰로 분주한 다음 농도별로 희석한 흑목이버섯 열수 추출물과 흰목이버섯 열수 추출물을 각각 0, 1, 10, 25, 50, 100, 250, 500 및 1,000㎍/㎖의 농도로 처리하고 CO2 배양기(37℃, 5% CO2)에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 MTS 용액을 첨가하고, 다시 4시간 동안 배양한 후 490nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포의 생존율은 다음과 같이 계산하였다.
세포 생존율(%) = (시료 첨가군의 흡광도/대조군의 흡광도) X 100
2-2. 흑/흰목이버섯 열수 추출물의 항산화 효능 분석
1) DPPH 자유 라기칼 소거능 분석
DPPH 자유 라디칼 소거능 측정법을 사용하여 흑/흰목이버섯 열수 추출물의 항산화 활성을 확인하였다. 먼저 DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)를 에탄올에 용해하여 0.1mM 농도의 DPPH 용액으로 준비하고, 100, 250, 500 및 1,000㎍/㎖의 농도별로 희석한 흑목이버섯 열수 추출물과 흰목이버섯 열수 추출물을 각각 0.1mM DPPH 용액과 1:1로 섞어 96웰 플레이트에 처리하였다. 10㎍/㎖ 농도의 아스코르브산을 반응의 양성 대조군로 사용하였다. 37℃에서 30분 동안 반응시킨 다음, 517nm에서 흡광도를 측정하고 아래 식을 활용하여 DPPH 자유 라디칼 소거능을 산출하였다.
DPPH 자유라디칼 소거능(%) = 1 - (시료 흡광도/대조군 흡광도) X 100
2) Superoxide anion(SO) 소거능 분석
SO 소거능은 SOD 측정 키트(Sigma, 미국)를 이용하여 확인하였다. 흑목이버섯 열수 추출물과 흰목이버섯 열수 추출물을 각각 100, 250, 500 및 1,000㎍/㎖의 농도별로 희석한 다음, 키트 내 반응 용액에 섞어 96웰 플레이트에 넣고 37℃에서 20분간 반응시켰다. 450nm 파장에서 흡광도를 측정 후, 아래 식을 통해 SO 소거능을 산출하였다.
SO 소거능(%) = (대조군 흡광도-시료 흡광도)/대조군 흡광도 X 100
2-3. 흑/흰목이버섯 열수 추출물의 프로콜라겐(procollagen) 합성 촉진 효능 분석
흑/흰목이버섯 열수 추출물의 콜라겐 합성 촉진 효능을 분석하였다. 먼저, 인간 각질 세포주인 HaCat 세포를 10% FBS가 첨가된 DMEM 배지를 이용하여 6웰 플레이트에 1x106 세포/웰 씩 분주한 다음 CO2 배양기(37℃, 5% CO2)에서 24시간 동안 배양하였다. 24시간 경과 후, 흑목이버섯 열수 추출물과 흰목이버섯 열수 추출물을 각각 1,000㎍/㎖ 농도로 처리하고 다시 24시간 동안 배양하였다. 24시간 경과 후, 콜라겐 생성량은 프로콜라겐 Type I C-peptide(PIP) EIA 키트(TaKaRa, 일본)를 이용하여 측정하였다.
2-4. 흑/흰목이버섯 열수 추출물의 보습증진 효능 분석
흑/흰목이버섯 열수 추출물의 보습증진 효능을 HAS(hyaluronic acid synthase)-3의 발현 분석을 통해 확인하였다. 인간 각질 세포주인 HaCat 세포를 10% FBS가 첨가된 DMEM 배지를 이용하여 6웰 플레이트에 1.5x106 세포/웰로 분주한 다음 CO2 배양기(37℃, 5% CO2)에서 24시간 동안 배양하였다. 24시간 경과 후, 흑목이버섯 열수 추출물과 흰목이버섯 열수 추출물을 각각 1,000㎍/㎖ 농도로 처리하고 다시 24시간 동안 배양하였다. 24시간 경과 후, 총 RNA를 추출하고 cDNA를 합성하였다. HAS-3의 발현 분석은 실시간 중합효소연쇄반응(real-time PCR) 분석을 통해 확인하였다.
실시예 1. 흑/흰목이버섯 열수 추출물의 세포독성 분석
흑/흰목이버섯 열수 추출물의 안전성을 알아보기 위해 인간 정상 세포주인 293T(human kidney epithelial cell)와 인간 각질세포주인 HaCat(human keratinocyte) 세포에서 MTS 어세이 방법을 이용하여 세포의 생존율을 측정하였다.
그 결과 흑/흰목이버섯 열수 추출물 모두 293T 세포와 HaCat 세포에서 1,000㎍/㎖ 농도까지 처리하였어도 세포독성이 나타나지 않았다(도 1 및 도 2). 이 결과를 통해 흑목이버섯 열수 추출물과 흰목이버섯 열수 추출물의 안전성을 확인할 수 있었다.
실시예 2. 흑/흰목이버섯 열수 추출물의 항산화 활성 분석
활성산소는 superoxide anion(SO) 라디칼, 과산화수소(H2O2), 히드록실 라디칼, 1중항 산소(singlet oxygen)가 존재하며 자외선, 음주, 흡연, 스트레스, 환경오염 등 다양한 원인에 의해서 발생하고, 발생된 활성산소는 세포를 손상시켜 암·당뇨·심장질환·고혈압 등 각종 성인병을 일으키기도 한다. 피부에서 이러한 활성산소종은 피부 속 콜라겐 파괴에 따른 피부노화와 주름 등을 유발하고, 색소 침착을 일으켜 기미, 주근깨 등의 원인이 되기도 한다. 이에 본 발명에서는 흑/흰목이버섯 열수 추출물의 활성산소 제거 활성을 확인하고자 하였다.
우선, 흑/흰목이버섯 열수 추출물의 항산화 활성을 DPPH 자유 라디칼 소거능 분석을 통해 확인하였다. 그 결과, 흑목이버섯 열수 추출물은 처리농도 의존적으로 DPPH 자유 라디칼 소거능이 증가하는 것이 확인되었다(도 3A). 흑목이버섯 열수 추출물 1,000㎍/㎖ 농도 처리 시 약 41%의 소거능이 확인되었다. 그에 반해 흰목이버섯 열수 추출물은 1,000㎍/㎖ 농도 처리 시 약 8%의 DPPH 자유 라디칼 소거능이 확인되었다(도 3B).
또한, 흑/흰목이버섯 열수 추출물의 항산화 활성을 SO 소거능 분석을 통해 확인하였다. SO 소거능 역시 흑목이버섯 열수 추출물은 처리농도 의존적으로 증가하는 것이 확인되었는데, 흑목이버섯 열수 추출물 1,000㎍/㎖ 농도 처리 시 약 87%의 SO 소거능이 확인되었다(도 4A). 반면, 흰목이버섯 열수 추출물은 1,000㎍/㎖ 농도에서만 약 24%의 SO 소거능이 확인되었고, 그 보다 낮은 농도에서는 SO 소거능을 확인할 수 없었다(도 4B).
상기와 같은 결과들을 토대로, 흑목이버섯 열수 추출물이 흰목이버섯 열수 추출물보다 우수한 항산화 활성을 가지고 있음을 알 수 있었다.
실시예 3. 흑/흰목이버섯 열수 추출물의 프로콜라겐 합성 촉진능 분석
콜라겐은 피부를 구성하는 주요단백질로 콜라겐의 생성 및 유지는 피부건강에 매우 중요하다고 알려져 있다. 이에 본 발명에서는 흑/흰목이버섯 열수 추출물의 콜라겐 합성 촉진 효능을 프로콜라겐 Type I C-peptide(PIP) EIA 키트를 이용하여 분석하였다.
그 결과, 흑목이버섯 열수 추출물과 흰목이버섯 열수 추출물 모두 DMSO 대조군에 비해 각각 약 2.3배 및 약 1.5배 높은 프로콜라겐의 합성양을 확인할 수 있었다(도 5). 특히 흑목이버섯 열수 추출물은 흰목이버섯 열수 추출물보다 1.5배 정도 높은 프로콜라겐 합성 촉진 효능을 보였다.
실시예 4. 흑/흰목이버섯 열수 추출물의 보습 증진 효능 분석
피부는 필라그린(filaggrin), 히알루론산(hyaluronic acid, HA), 요소(urea), 시트레이트(citrate), 젖산(lactate), 글리세롤 등의 다양한 함습인자에 의해 보습장벽 기능을 수행한다. 이중 HA는 분자량이 20-40만에 이르는 고분자화합물로써 표피의 수분 증발을 막아 피부의 탄력성을 유지할 뿐만 아니라, 영양성분의 저장과 확산, 세포 이동 등에도 관여하는 것으로 알려져있다. HA는 주로 각질형성세포(keratinocytes) 및 섬유아세포(fibroblast)의 히알루론산 합성효소(hyaluronic acid synthase, HAS)에 의해 합성되어 세포외기질에 축적된다. 지금까지 알려진 HAS 유전자는 HAS-1, HAS-2 및 HAS-3의 세 가지 형태가 보고되었으며, 이들의 발현저하로 인한 보습장벽의 결함은 표피의 위축, 주름형성, 피부 수분량 감소, 탄력성 저하 등 피부노화를 일으키는 것으로 보고되었다.
본 발명에서는 흑/흰목이버섯 열수 추출물에 의한 보습증진 효능을 확인하고자 흑/흰목이버섯 열수 추출물에 의한 HAS-3의 mRNA 발현 증가 수준을 분석하였다. 그 결과, 흑목이버섯 열수 추출물은 DMSO 대조군에 비해서는 1.2배 이상 그리고 흰목이버섯 열수 추출물에 비해서는 약 1.3배 이상 높은 HAS-3의 mRNA 발현을 유도하는 것이 확인되었다(도 6).
상기의 결과들을 토대로, 흑목이버섯 열수 추출물은 흰목이버섯 열수 추출물에 비해 항산화 활성이 우수하며, 프로콜라겐 합성 촉진 및 HAS-3 발현 유도 효과가 좋은 것으로 확인되어, 피부 주름 개선 및 보습용 화장료의 원료로 유용하게 사용될 수 있을 것으로 판단되었다.
Claims (7)
- 흑목이버섯(Auricularia auricula) 열수 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물.
- 삭제
- 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 스킨, 스킨 소프트너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐로션, 영양로션, 마사지크림, 영양크림, 아이 크림, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 로션, 클렌징 크림, 바디로션, 바디클렌져, 비누 및 파우더로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가지는 것을 특징으로 하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 중에서 선택된 하나 이상의 보조제를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물.
- 흑목이버섯(Auricularia auricula) 열수 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 건강기능성 식품.
- 삭제
- 제5항에 있어서, 상기 건강기능성 식품은 이너뷰티 푸드(inner beauty food)인 것을 특징으로 하는 피부 주름 개선용 건강기능성 식품.
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| AMND | Amendment | ||
| E601 | Decision to refuse application | ||
| AMND | Amendment | ||
| X701 | Decision to grant (after re-examination) | ||
| GRNT | Written decision to grant |