KR101876506B1 - 유청 단백질 기반의 푸코잔틴 미세분말 및 이의 제조방법 - Google Patents
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Abstract
본 명세서에는 유청 단백질 기반의 푸코잔틴 미세분말 및 이의 제조방법이 개시된다. 상기 푸코잔틴 미세분말은 푸코잔틴이 유청 단백질로 코팅 또는 캡슐화되고 나노 크기의 입도를 갖는 것으로서, 푸코잔틴 미세분말은 푸코잔틴을 화학적으로 안정화시키고 유제품 또는 물에 쉽게 용해되어 생체에 효과적으로 흡수되며 푸코잔틴의 높은 생리활성을 구현할 수 있는 효과가 있다.
Description
본 명세서에는 유청 단백질 기반의 푸코잔틴 미세분말 및 이의 제조방법이 개시된다.
푸코잔틴(fucoxanthin)은 카로티노이드(carotenoid) 색소류 잔토필의 일종으로서, 갈조식물과 황색식물에 함유되어 있고 에폭사이드와 수산기들을 갖는 알렌 구조(allene structure)를 가지고 있다. 생리활성 면에서, 푸코잔틴은 비만, 당뇨, 암, 그리고 염증 등에 효과가 있다고 보고된 바 있다[Maeda H, Tsukui T, Sashima T, Hosokawa M and Miyashita K. (2008). Seaweed carotenoid, fucoxanthin, as a multi-functional nutrient. Asia Pac J Clin Nutr, 17:196-199].
푸코잔틴의 생산은 대부분 육상식물 및 해양 거대조류(다시마 등), 혹은 이를 섭취하는 생물의 내장에서 추출하여 왔으나, 함유량이 매우 적어 생산 원가가 매우 비싼 단점이 있다. 최근에는, 미세조류에서 기존 원료 대비 10배에서 최대 200배 이상을 함유하고 있는 것이 확인되어 이러한 색소류의 생산이 육상식물 및 거대조류로부터 미세조류로 확대되고 있다.
한편, 푸코잔틴은 폴리엔(polyene) 구조로 인하여 빛, 열 그리고 산소에 대해서 매우 불안정하다[Delgado-Vargas F, Jimenez AR and Paredes-Lopez O. (2000). Natural pigments: carotenoids, anthocyanins, and betalains-characteristics, biosynthesis, processing, and stability. Crit Rev Food Sci Nutr, 40:173-289]. 따라서, 푸코잔틴의 높은 생리활성을 얻기 위해서는, 푸코잔틴이 화학적으로 안정해야 하고 생체에 흡수가 효과적으로 잘 되어야 한다.
일 측면에서, 본 명세서는 푸코잔틴을 화학적으로 안정화시키고 용해도 및 생체 이용률을 높이기 위해 유청 단백질로 코팅 또는 캡슐화한 나노 입자 크기의 푸코잔틴 미세분말을 제조하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
다른 측면에서, 본 명세서는 푸코잔틴을 화학적으로 안정화시키고 용해도 및 생체 이용률을 높이기 위해 유청 단백질로 코팅 또는 캡슐화한 나노 입자 크기의 푸코잔틴 미세분말을 제공하는 것을 목적으로 한다.
일 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 (1) 푸코잔틴을 알코올 용매에 용해시켜 푸코잔틴 용액을 제조하는 단계; (2) 유청 단백질 용액을 제조하는 단계; (3) 상기 푸코잔틴 용액 및 유청 단백질 용액을 혼합하여 균질화하는 단계; 및 (4) 상기 균질화한 혼합 용액을 건조시키는 단계;를 포함하는 푸코잔틴 미세분말의 제조방법을 제공한다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 (1)단계에서 푸코잔틴은 해조류 또는 미세조류에서 분리된 것이고 80% 이상의 순도를 갖는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 (1)단계에서 알코올 용매는 탄소수 1 내지 6의 알코올 용매일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 (1)단계에서 알코올 용매는 에탄올 용매일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 (2)단계에서 유청 단백질 용액은 유청 단백질 용액 중량을 기준으로 20 내지 50 wt%의 유청 단백질을 포함하는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 (3)단계에서 균질화는 1,000 내지 10,000 rpm으로 교반하는 단계를 포함할 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 (4)단계는 균질화한 혼합 용액을 분무건조(spray drying)하여 푸코잔틴 미세분말을 제조하는 것일 수 있다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 푸코잔틴을 포함하는 코어; 및 상기 코어의 외면에 형성되고, 유청 단백질(whey protein)을 포함하는 외층;을 포함하는 용해도가 증진된 푸코잔틴 미세분말을 제공한다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 푸코잔틴 미세분말은 1 ㎛ 이하의 평균 입경을 갖는 것일 수 있다.
일 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 푸코잔틴을 화학적으로 안정화시키고 용해도 및 생체 이용률을 높이기 위해 유청 단백질로 코팅 또는 캡슐화한 나노 입자 크기의 푸코잔틴 미세분말을 제조하는 방법을 제공하는 효과가 있다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 푸코잔틴을 화학적으로 안정화시키고 용해도 및 생체 이용률을 높이기 위해 유청 단백질로 코팅 또는 캡슐화한 나노 입자 크기의 푸코잔틴 미세분말을 제공하는 효과가 있다.
본 명세서에 따른 푸코잔틴 미세분말은 나노 크기의 평균 입경을 가져 유제품 또는 물에 쉽게 분산 및 용해되며 화학적 안정성이 높아 생체에 효과적으로 흡수되어 푸코잔틴의 높은 생리활성을 구현할 수 있는 효과가 있다.
도 1은 본 명세서의 일 시험예에 따른 균질화 처리 시간에 따른 푸코잔틴 미세분말의 입도 변화를 나타낸 것이다.
도 2는 본 명세서의 일 시험예에 따른 균질화 처리 속도에 따른 푸코잔틴 미세분말의 입도 변화를 나타낸 것이다.
도 3은 본 명세서의 일 실시예에 따른 푸코잔틴 미세분말의 SEM 사진을 나타낸 것이다.
도 4는 본 명세서의 일 실시예에 따른 푸코잔틴 미세분말의 포집 효율을 유청 단백질 용액의 농도(10 wt%, 20 wt% 및 30 wt%) 변화에 따라 나타낸 것이다.
도 5는 종래 푸코잔틴 분말이 (a) 물 및 (b) 우유에 녹지 않고 상층부에 떠 있는 모습을 나타낸 것이다.
도 6은 본 명세서에 따른 푸코잔틴 미세분말이 유제품 및 물에 대해 잘 용해되는 모습을 나타낸 것이다.
도 7은 위장관 모사액의 위액(gastric juice) 및 장액(intestinal juice)에서 푸코잔틴 미세분말로부터 용출되는 푸코잔틴의 함량을 비교한 것이다(casein: 카제인으로 코팅된 푸코잔틴 미세분말에 대한 실험 결과, WPI: 본 명세서에 따른 유청 단백질로 코팅된 푸코잔틴 미세분말에 대한 실험 결과).
도 2는 본 명세서의 일 시험예에 따른 균질화 처리 속도에 따른 푸코잔틴 미세분말의 입도 변화를 나타낸 것이다.
도 3은 본 명세서의 일 실시예에 따른 푸코잔틴 미세분말의 SEM 사진을 나타낸 것이다.
도 4는 본 명세서의 일 실시예에 따른 푸코잔틴 미세분말의 포집 효율을 유청 단백질 용액의 농도(10 wt%, 20 wt% 및 30 wt%) 변화에 따라 나타낸 것이다.
도 5는 종래 푸코잔틴 분말이 (a) 물 및 (b) 우유에 녹지 않고 상층부에 떠 있는 모습을 나타낸 것이다.
도 6은 본 명세서에 따른 푸코잔틴 미세분말이 유제품 및 물에 대해 잘 용해되는 모습을 나타낸 것이다.
도 7은 위장관 모사액의 위액(gastric juice) 및 장액(intestinal juice)에서 푸코잔틴 미세분말로부터 용출되는 푸코잔틴의 함량을 비교한 것이다(casein: 카제인으로 코팅된 푸코잔틴 미세분말에 대한 실험 결과, WPI: 본 명세서에 따른 유청 단백질로 코팅된 푸코잔틴 미세분말에 대한 실험 결과).
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
일 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 (1) 푸코잔틴을 알코올 용매에 용해시켜 푸코잔틴 용액을 제조하는 단계; (2) 유청 단백질 용액을 제조하는 단계; (3) 상기 푸코잔틴 용액 및 유청 단백질 용액을 혼합하여 균질화하는 단계; 및 (4) 상기 균질화한 혼합 용액을 건조시키는 단계;를 포함하는 푸코잔틴 미세분말의 제조방법을 제공한다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 (1)단계에서 푸코잔틴은 80% 이상, 더욱 구체적으로 80 내지 99%의 순도를 갖는 것일 수 있다.
하기 화학식 1의 구조를 갖는 푸코잔틴은 갈조류가 띠는 갈색의 원인물질이며 엽록체의 부분색소이기도 하다. 푸코잔틴은 갈조식물과 황색식물에 함유되어 있으며, 예컨대 미역, 모자반, 다시마, 톳 등의 해조류, 페오닥틸룸 트리코르누툼(Phaeodactylum tricornutum), 아이소크리시스 갈바나(Isochrysis galbana), 체토세로스 그라실리스(Chaetoceros gracilis), 사이린드로데카 클로스테리움(Cylindrotheca closterium), 오돈텔라 아루리타(Odontella aurita) 등의 미세조류로부터 분리될 수 있다. 본 명세서에 따른 푸코잔틴은 당해 기술분야에서 이용되는 통상의 방법에 따라 추출 또는 분리될 수 있으며, 시판되는 것 등의 제한이 없이 사용 가능하다.
[화학식 1]
예시적인 일 구현예에서, 상기 (1)단계에서 알코올 용매는 탄소수 1 내지 6의 알코올 용매일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 (1)단계에서 알코올 용매는 에탄올 용매일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 (1)단계에서 푸코잔틴 용액은 계면활성제를 더 포함하여 유청 단백질로 코팅 또는 캡슐화한 푸코잔틴 미세분말의 원활한 제조가 가능하다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 (2)단계에서 유청 단백질 용액은 유청 단백질을 물에 용해시킨 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 (2)단계에서 유청 단백질 용액은 유청 단백질 용액 중량을 기준으로 20 내지 50 wt%의 유청 단백질을 포함하는 것일 수 있다. 예컨대, 상기 유청 단백질 용액은 20 wt% 이상, 25 wt% 이상, 30 wt% 이상, 35 wt% 이상, 40 wt% 이상, 45 wt% 이상 또는 50 wt% 이상이면서 50 wt% 이하, 45 wt% 이하, 40 wt% 이하, 35 wt% 이하, 30 wt% 이하, 25 wt% 이하 또는 20 wt% 이하의 유청 단백질을 포함하는 것이 푸코잔틴의 포집 효율 면에서 바람직할 수 있다. 이에 따라, 푸코잔틴의 포집 효율을 높이고 화학적 안정성이 우수한 나노 크기의 푸코잔틴 미세분말을 제공하는 효과가 있다.
우유를 치즈로 가공할 때 형성되는 부산물인 수용액 상태의 유청에는 우유의 주된 카제인 단백질을 제외한 나머지 20%의 단백질과 유당, 락토알부민, 락토글로불린, 무기질 등이 포함되어 있다. 한편, 유청 단백질은 탈지유를 20 ℃에서 pH 4.6으로 조정하였을 때 침전되는 카제인을 제거한 유청에 함유되어 있는 가용성 단백질들을 의미한다. 유청 단백질에는 80%의 단백질을 함유하는 농축 유청 단백질(WPC, Whey Protein Concentrate), 90%의 단백질을 함유하고 농축 유청 단백질에서 유당과 비단백질 성분을 제거한 고순도의 유청 단백질인 분리 유청 단백질(WPI, Whey Protein Isolate), 85%의 단백질을 함유하고 유청 단백질을 가수분해하여 아미노산 펩타이드 형태로 만들어 놓은 유청 단백질인 가수분해 유청 단백질(Whey Protein Hydrolysate)이 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 (3)단계에서 균질화하기 전에 혼합 용액을 1시간 이상, 예컨대 1 내지 10시간, 또는 1 내지 5시간, 또는 1 내지 3시간 동안 교반하여 안정화하는 단계를 더 포함할 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 (3)단계에서 균질화는 1,000 내지 10,000 rpm으로 교반하는 단계를 포함할 수 있다. 예컨대, 상기 균질화는 1,000 rpm 이상, 2,000 rpm 이상, 3,000 rpm 이상, 4,000 rpm 이상 또는 5,000 rpm 이상이면서 10,000 rpm 이하, 9,000 rpm 이하, 8,000 rpm 이하, 7,000 rpm 이하, 6,000 rpm 이하 또는 5,000 rpm 이하로 교반하는 단계를 포함할 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 (3)단계에서 균질화 시간은 30초 내지 600초, 또는 30초 내지 500초, 또는 30초 내지 400초, 또는 30초 내지 300초일 수 있다.
상기 균질화는 혼합물의 각 성분들을 분산시켜 전체를 균질하게 하는 공정을 의미한다. 상기와 같이 균질화함으로써 유청 단백질로 둘러싸인 푸코잔틴 미세분말 구조를 형성하여 푸코잔틴의 화학적 안정성을 증가시킬 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 (4)단계는 균질화한 혼합 용액을 분무건조(spray drying)하여 푸코잔틴 미세분말을 제조하는 것일 수 있다. 분무건조는 혼합 용액을 뜨거운 바람 중에 분무 분산시켜 열풍으로 수분을 제거하고 급속히 건조시켜 파우더 상태의 생성물을 얻는 건조법을 의미한다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 방법은 70% 이상, 구체적으로 70 내지 99%, 또는 70 내지 90%, 75 내지 85%, 70 내지 80%, 또는 75 내지 80%의 푸코잔틴 포집 효율을 가질 수 있다. 푸코잔틴 포집 효율(Encapsulation efficiency)은 실질적으로 미세분말 입자 내 포집되어 있는 푸코잔틴의 함량을 퍼센트로 나타낸 것을 의미한다(포집된 푸코잔틴의 실제 함량/이론적 함량 × 100).
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 푸코잔틴을 포함하는 코어; 및 상기 코어의 외면에 형성되고, 유청 단백질(whey protein)을 포함하는 외층;을 포함하는 화학적 안정성 및 용해도가 증진된 푸코잔틴 미세분말을 제공한다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 푸코잔틴 미세분말은 푸코잔틴이 유청 단백질로 둘러싸인 구조를 갖는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 푸코잔틴 미세분말의 형태는 구형 (bulb shape)일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 푸코잔틴 미세분말은 1 ㎛ 이하의 평균 입경을 갖는 것일 수 있다. 다른 측면에서, 상기 푸코잔틴 미세분말은 100 nm 이상, 200 nm 이상 또는 300 nm 이상이면서 900 nm 이하, 800 nm 이하, 700 nm 이하, 600 nm 이하, 500 nm 이하, 400 nm 이하 또는 300 nm 이하의 평균 입경을 갖는 것일 수 있다. 평균 입경은 미세분말 입자들의 평균 직경을 말한다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 푸코잔틴 미세분말은 200 내지 1000 nm, 또는 200 내지 700 nm의 입경을 갖는 것일 수 있다.
본 명세서는 해조류 또는 미세조류에서 분리된 80% 이상의 순도를 갖는 푸코잔틴을 높은 포집 효율로 코팅 또는 캡슐화하여 화학적 안정성이 우수한 푸코잔틴 미세분말을 제공하는 효과가 있다. 상기 푸코잔틴 미세분말은 pH, 빛, 열 및 산소 등에 대한 화학적 안정성이 높다.
또한, 본 명세서에 따른 푸코잔틴 미세분말은 나노 크기의 평균 입경을 갖는 것으로서 푸코잔틴의 용해도를 증가시키고 푸코잔틴의 분산성을 높여 용해 시 응집 현상이 발생하는 것을 방지한다. 따라서, 유제품 또는 물에 쉽게 용해 및 분산되어 식품 소재로 활용이 높고 생체에 효과적으로 흡수되어 높은 생리활성을 구현할 수 있는 효과가 있다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 상기 푸코잔틴 미세분말을 포함하는 식품 또는 식품 조성물을 제공한다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실시예 1. 푸코잔틴 미세분말의 제조
BioOne Co. Ltd.(Gangneung-si, Gangwon-do, Korea)에서 구입한 푸코잔틴 분획 분말과 Sigma-Aldrich(St. Louis, MO, USA)에서 구입한 유청 단백질을 이용하여 하기와 같은 방법으로 푸코잔틴 미세분말을 제조하였다.
우선, 푸코잔틴 10 mg을 1 mL의 에탄올 용매에 용해시킨 후 5 mL 글리세롤 및 3 mL Tween 20을 첨가하여 혼합하였다. 또한, 유청 단백질 10 g을 50 mL의 3차 증류수에 용해시켜 20 wt%의 유청 단백질 용액을 제조하였다. 이후, 상기 푸코잔틴 용액과 유청 단백질 용액을 혼합하여 1시간 동안 교반하여 안정화한 다음, 혼합 용액을 Ultra-Turrax homogenizer로 5,000 rpm에서 5분간 교반하여 균질화하였다. 균질화한 혼합 용액은 분무건조하여 나노 크기의 푸코잔틴 미세분말을 수득하였다.
시험예 1. 푸코잔틴 미세분말의 입경
상기 실시예 1에서 균질화 처리 시간을 1분, 3분 및 5분으로 변화시켜 이에 따른 미세분말의 입자 크기 변화를 관찰하였으며, 또한 균질화 처리 속도를 5,000 rpm, 7,000 rpm 및 9,000 rpm으로 변화시켜 이에 따른 미세분말의 입자 크기 변화를 관찰하였다. 입자의 크기 분석은 NanoZS(Malvern Instruments, Worcestershire, UK)를 이용하여 분석하였다.
그 결과, 도 1 및 2에서 보는 바와 같이 균질화 처리 시간 및 속도가 증가할수록 입자 크기가 감소하였으며, 푸코잔틴 미세분말은 약 200 내지 700 nm의 나노 크기 입도를 갖는 것을 알 수 있었다. 이에 따라, 본 명세서에 개시된 푸코잔틴 미세분말은 음료 제형에 적용 시 용해도를 높일 수 있을 뿐만 아니라 수용액 내에서 분산성을 높여 하층부에 응집 현상이 발생하는 것을 방지할 수 있음을 확인하였다.
시험예 2. 푸코잔틴 미세분말의 형태 및 포집효율
상기 제조된 푸코잔틴 미세분말의 형태는 FE-SEM (SU70, Hitachi, Tokyo, Japan)을 통해 관찰하였다.
그 결과, 도 3에서 보는 바와 같이 푸코잔틴 미세분말의 형태는 구형에 가깝고 거의 균일한 것을 알 수 있었다.
또한, 푸코잔틴 미세분말의 포집 효율 (Encapsulation efficiency)은 실질적인 입자 내 함유된 푸코잔틴의 함량으로서, 정확히 측정된 양 (0.1 g)을 에탄올에 분산 및 용해시키고 1시간 동안 초음파 처리하여 하기 식과 같이 측정되었다. 이론적 함량은 제조 과정 동안 어떠한 손실 없이 모든 푸코잔틴이 입자 내 포집되었음을 가정한 것이다.
포집 효율 (Encapsulation efficiency, %) = 포집된 푸코잔틴의 실제 함량 (actual amount) / 이론적 함량 (theoretical amount) × 100
그 결과, 3차 증류수에 용해시킨 유청 단백질의 용액을 10 wt%, 20 wt% 및 30 wt%의 농도(%, w/w)로 하여 제조된 푸코잔틴 미세분말의 포집 효율을 측정한 결과, 농도가 증가할수록 높은 포집 효율을 나타내는 것을 확인하였고, 약 80%에 해당하는 푸코잔틴 포집 효율을 나타내어 유청 단백질은 푸코잔틴의 우수한 포집 효율과 미세분말 나노입자의 높은 안정성을 제공할 수 있음을 알 수 있었다(도 4 참조).
시험예 3. 푸코잔틴 미세분말의 용해도
상기 실시예 1에서 제조한 푸코잔틴 미세분말과 종래 푸코잔틴 분말을 각각 교반(stirring) 또는 와류 혼합(vortex mixing) 방법으로 5분간 유제품 및 물에 용해시켜 그 용해도를 관찰한 결과, 종래 푸코잔틴 분말과 달리 실시예 1의 푸코잔틴 미세분말은 유제품 및 물에 쉽게 용해 및 분산되는 것을 알 수 있었다(도 5 및 6 참조).
도 5에서 (a)는 종래 푸코잔틴 분말을 물에 용해시킨 결과, (b)는 종래 푸코잔틴 분말을 우유에 용해시킨 결과를 나타낸다. 도 5의 (a) 사진에서 좌측 사진은 푸코잔틴이 물에 녹지 않아 물에 떠 있는 모습을 나타내며, 우측 사진은 온도를 가하여 교반 시간을 증가시켰을 때에도 여전히 상층부와 하층부에 용해되지 않은 푸코잔틴의 응집 현상이 발생하였음을 나타낸다. 도 5에서 보는 바와 같이, 종래 푸코잔틴 분말은 유제품 및 물에 용해되지 않음을 알 수 있었다. 반면, 실시예 1의 푸코잔틴 미세분말은 도 6에서 보는 바와 같이, 전지분유, 탈지분유 및 물에 용해 시 유제품을 비롯한 물에도 잘 용해되는 것을 알 수 있었다.
시험예 4. 푸코잔틴 미세분말의 화학적 안정성
푸코잔틴은 낮은 pH와 산소에 의해 쉽게 분해될 수 있고, 위장관에서 소화 과정 동안 푸코잔틴은 위산과 산화적 화학 물질에 의해 이러한 요인에 노출된다. 따라서, 소화 과정 동안 푸코잔틴의 소화 안정성은 식품 소재 개발에 있어서 중요한 요소이다.
본 시험예에서는 위장관 모사액, pH 2의 위액(gastric juice)과 pH 7의 장액(intestinal juice)에서 푸코잔틴 미세분말로부터 용출되는 푸코잔틴의 함량을 분석하여 상기 실시예 1에서 제조한 푸코잔틴 미세분말의 화학적 안정성을 시험하였다.
그 결과, 도 7에서 보는 바와 같이 위액에서는 미세분말 내 푸코잔틴이 용출되지 않고 보호된 채로 존재하지만 장액에서는 유청 단백질의 코팅이 풀어지면서 푸코잔틴이 용출되는 것을 확인하였다. 이에 따라, 본 명세서에 따른 푸코잔틴 미세분말은 위산에 의해 보호되어 장에 도달된 후 푸코잔틴을 용출시켜 생체에 효과적으로 흡수되어 높은 생리활성을 구현할 수 있음을 알 수 있었다. 즉, 본 명세서에 따른 푸코잔틴 미세분말은 우수한 소화 안정성 및 생체 접근률을 나타내는 효과가 있다.
시험예 5. 푸코잔틴의 함량 분석
본 명세서에서 푸코잔틴은 다이오드 어레이 디텍터(1200 series, Agilent, Santa Clara, CA, USA)와 연결된 고압 액체 크로마토그래피(High pressure liquid chromatography)로 정량하였다. 분리를 위해 YMC C-30 카로티노이드 컬럼(150 × 4.6 mm 내경, 3 μm 입자 크기, Waters, Milford, MA, USA)을 사용하였고, 메탄올 및 물 용매 시스템을 이동상으로 35 ℃의 컬럼 온도로 0.7 mL/min의 유량에서 실시하였다. 메탄올/물 비율은 20분 이상 90:10 내지 100:0으로 증가시켰고 다음 5분간 100% 메탄올에서 고정하였다. 450 nm에서 얻은 크로마토그램을 푸코잔틴의 정량 분석에 사용하였다.
시험예 6. 통계적 분석
모든 시험은 3번 반복하였고 모든 데이터는 평균±표준편차로 나타내었다. 평균 간 유의적 차이는 t-test 및 one-way ANOVA(P < 0.05)로 분석되었다.
이상, 본 발명내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의해 정의된다고 할 것이다.
Claims (9)
- 푸코잔틴 미세분말의 제조방법으로,
(1) 푸코잔틴을 에탄올 용매에 용해시켜 푸코잔틴 용액을 제조하는 단계;
(2) 유청 단백질 용액을 제조하는 단계;
(3) 상기 푸코잔틴 용액 및 유청 단백질 용액을 혼합하고 1,000 rpm 이상에서 교반하여 균질화하는 단계; 및
(4) 상기 균질화한 혼합 용액을 건조시키는 단계;를 포함하고,
상기 유청 단백질 용액은 유청 단백질 용액 중량을 기준으로 20 내지 50 wt%의 유청 단백질을 포함하며,
상기 푸코잔틴 미세분말은 푸코잔틴이 유청 단백질로 코팅된 구형 (bulb shape)의 나노입자인 것인, 푸코잔틴 미세분말의 제조방법.
- 제 1항에 있어서,
상기 (1)단계에서 푸코잔틴은 해조류 또는 미세조류에서 분리된 것이고 80% 이상의 순도를 갖는 것인, 푸코잔틴 미세분말의 제조방법.
- 삭제
- 삭제
- 제 1항에 있어서,
상기 (2)단계에서 유청 단백질 용액은 유청 단백질 용액 중량을 기준으로 30 내지 50 wt%의 유청 단백질을 포함하는, 푸코잔틴 미세분말의 제조방법.
- 제 1항에 있어서,
상기 (3)단계에서 균질화는 1,000 내지 10,000 rpm으로 교반하는 단계를 포함하는, 푸코잔틴 미세분말의 제조방법.
- 제 1항에 있어서,
상기 (4)단계는 균질화한 혼합 용액을 분무건조(spray drying)하여 푸코잔틴 미세분말을 제조하는 것인, 푸코잔틴 미세분말의 제조방법.
- 제 1항, 제 2항, 제 5항 내지 제 7항 중 어느 한 항의 제조방법에 따라 제조된 용해도가 증진된 푸코잔틴 미세분말.
- 제 8항에 있어서,
상기 푸코잔틴 미세분말은 200 내지 700 nm의 평균 입경을 갖는 것인, 용해도가 증진된 푸코잔틴 미세분말.
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