KR101832065B1 - Method for Preparing Liquefied Fertilizer - Google Patents
Method for Preparing Liquefied Fertilizer Download PDFInfo
- Publication number
- KR101832065B1 KR101832065B1 KR1020160111381A KR20160111381A KR101832065B1 KR 101832065 B1 KR101832065 B1 KR 101832065B1 KR 1020160111381 A KR1020160111381 A KR 1020160111381A KR 20160111381 A KR20160111381 A KR 20160111381A KR 101832065 B1 KR101832065 B1 KR 101832065B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- liquid fertilizer
- amino acid
- microorganism
- tuna
- fermentation
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
- C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
- C05F1/00—Fertilisers made from animal corpses, or parts thereof
- C05F1/002—Fertilisers made from animal corpses, or parts thereof from fish or from fish-wastes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
- C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
- C05F11/00—Other organic fertilisers
- C05F11/08—Organic fertilisers containing added bacterial cultures, mycelia or the like
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
- C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
- C05F17/00—Preparation of fertilisers characterised by biological or biochemical treatment steps, e.g. composting or fermentation
- C05F17/20—Preparation of fertilisers characterised by biological or biochemical treatment steps, e.g. composting or fermentation using specific microorganisms or substances, e.g. enzymes, for activating or stimulating the treatment
-
- C05G3/0064—
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
- C05G—MIXTURES OF FERTILISERS COVERED INDIVIDUALLY BY DIFFERENT SUBCLASSES OF CLASS C05; MIXTURES OF ONE OR MORE FERTILISERS WITH MATERIALS NOT HAVING A SPECIFIC FERTILISING ACTIVITY, e.g. PESTICIDES, SOIL-CONDITIONERS, WETTING AGENTS; FERTILISERS CHARACTERISED BY THEIR FORM
- C05G5/00—Fertilisers characterised by their form
- C05G5/20—Liquid fertilisers
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/10—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture
- Y02A40/20—Fertilizers of biological origin, e.g. guano or fertilizers made from animal corpses
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02W—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
- Y02W30/00—Technologies for solid waste management
- Y02W30/40—Bio-organic fraction processing; Production of fertilisers from the organic fraction of waste or refuse
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Environmental & Geological Engineering (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Fertilizers (AREA)
Abstract
Description
본 발명은 참치 가공 잔재물의 효소 처리 및 발효시킨 아미노산 액상 비료와 이의 제조방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 식물 병원균 저항성 및 생육촉진기능이 향상된 참치 가공 잔재물을 효소 및 발효시킨 아미노산 액상 비료와 이의 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to an amino acid liquid fertilizer obtained by enzymatic treatment and fermentation of tuna processing residues and a method for preparing the same, and more particularly, to an amino acid liquid fertilizer obtained by fermenting a tuna processing residue with improved plant pathogen resistance and growth promoting function, ≪ / RTI >
잘 알려진 바와 같이, 유기농업에서 양분관리는 퇴비, 유기질 비료와 같은 유기성 자재 그리고 녹비를 통하여 공급하는 것을 기본으로 하지만, 작물 재배시 주변 환경으로 유출되거나 작물생장에 이용된 양분을 토양에 보충하기 위해 추가양분이 규칙적으로 요구된다. 예를 들어, 유기농 고추의 재배에도 기비(밑거름)로 녹비작물 또는 유기질 비료를 사용하고 생육중기 이후 다양한 유기자원을 이용하여 액상비료(액체비료: 이하 "액비"라 함)를 제조하여 추비(웃거름)로 사용하고 있는 실정이다. 이처럼 액비는 속효성 비료로 볼 수 있으며, 관수를 통하거나 엽면에 시비하여 작물의 생육을 촉진시킬 수 있다.As is well known, nutrient management in organic agriculture is based on supplying organic matter such as compost, organic fertilizer, and green grass. However, in order to replenish the nutrients that are released into the surrounding environment or used for growing crops Additional nutrients are regularly required. For example, in the cultivation of organic peppers, green grass crops or organic fertilizers are used as a foundation, and liquid fertilizer (liquid fertilizer: hereinafter referred to as "fertilizer") is produced using various organic resources after the middle of growing season, ). As such, the liquid fertilizer can be regarded as a quick-acting fertilizer.
한편, 본 출원인(주식회사 현대에프앤씨)이 제조하고 있는 액비는 습식 분쇄한 참치 부산물을 단백질 분해효소(protease)로 분해반응시키고 압착한 액상에 제품화에 필요한 무기영양분(K, P)을 조절한 것으로, 액상 아미노산형 비료로 작물 생육용 친환경 유기농자재 액비로 목록공시(제품명: 풍작-L, 공시번호: 11-유기-2-505)를 받아 장미를 비롯한 고등 원예단지에 공급하고 있는 실정이다.Meanwhile, the liquid fertilizer manufactured by the present applicant (Hyundai E & C Co., Ltd.) is a product obtained by decomposing wet pulverized tuna byproduct with a protease and controlling inorganic nutrients (K, P) It is a liquid amino acid type fertilizer that receives the list of environmentally friendly organic ingredients for growing crops (Product name: Pungchul-L, Publication No. 11- Organic-2-505) and supplies them to rose and other high-level gardening complexes.
본 출원인은 기존 판매 제품인 아미노산 액비(제품명: 풍작-L)의 저장성을 높이고 미생물 농약적 기능을 부가하는 기능성 액비를 개발하기 위한 것으로, 그 중요성을 살펴보면 다음과 같다.The applicant of the present invention is to develop a functional liquid fertilizer which enhances the shelf life of amino acid liquid fertilizer (product name: Fruit-L) and adds microbial pesticidal function to the existing commercial product, and its significance is as follows.
본 출원인이 제조하여 판매하고 있는 액비(제품명: 풍작-L)는 단백질 분해효소에 의해 제조됨으로써 단백질 분해산물의 분자량이 높아 작물의 흡수능이 일부 방해를 받고, 또 참치가 가진 어유가 유화되지 않아 어유의 고유취가 살포시 사용상 불편한 점이 있었다. 따라서 단백질 분해효소를 분비하는 미생물과 지방산 분해능을 지닌 미생물로 혼합 배양하여, 단백질을 보다 균질한 아미노산으로 숙성시키고 어유가 발효과정 중에 유화되어 고유의 어유 냄새를 저감시켜 사용에 편리성을 주고자 한다. 나아가 식물병원성 저항 미생물을 첨가하여 미생물 농약 기능을 가지게 하는 것으로 발효공정을 첨가하고 유용 미생물을 첨가하는 공정 개선으로 고기능성 액비가 공급된다면 영농에 영양성과 병원성 저감 효과를 동시에 구현하여 작물의 생육을 돕고 병충해 구제를 위하여 농약의 사용을 억제하여 친환경 농업이 되도록 할 수 있다는 것에 그 중요성이 있다.Lactic acid produced by the present applicant (product name: Pomegranate-L) is produced by proteolytic enzymes, so that the molecular weight of the protein degradation product is high, so that the absorption ability of the crop is partially disturbed and the fish oil of the tuna is not emulsified, There is a disadvantage in use of the spray of the unique odor. Therefore, it is mixed and cultured with a microorganism that secretes a protease and a microorganism having the ability to decompose a fatty acid, and the protein is aged with a more homogeneous amino acid, and the fish oil is emulsified during the fermentation process to reduce the inherent fish oil odor, . In addition, by adding plant pathogenic resistance microorganism, microorganism pesticide function is added. By adding fermentation process and adding processable microorganisms, if high-functioning liquid is supplied, nutritional and pathogenic reduction effect can be realized simultaneously in farming, It is important to reduce the use of pesticides and to make them eco-friendly for pest and disease relief.
한편, 아미노산 비료와 관련된 선행기술문헌으로는 아래의 특허문헌 1 내지 특허문헌 6이 제시되어 있다.On the other hand, the prior art documents related to amino acid fertilizers include the following Patent Documents 1 to 6.
상기 특허문헌 2 내지 6에 개시된 아미노산 비료는 주로 가축 혈분이나 아미노산 조미산업 부산물, 탈털이나 우모의 효소분해액 그리고 해조추출물에 아미노산을 첨가하는 방식 등을 이용하여 아미노산 액비를 제조하는 선행기술문헌이다.The amino acid fertilizers disclosed in the
상기의 특허문헌에서 보는 바와 같이 참치 부산물을 이용한 직접적인 특허문헌은 찾아볼 수 없으며, 본 발명자가 특허출원한 "참치부산물을 주성분으로 하는 비료의 제조방법(특허문헌 1)"이 유일하다. 상기 특허문헌 1은 참치부산물과 유기농자재를 혼합하여 발효한 것으로 본 발명과는 다소 다른 충작과 관련된 선행기술이다.As can be seen from the above patent documents, there is no direct patent literature using tuna by-products. The only patent application of the present inventor is "a method for producing a fertilizer containing tuna by-products as a main component (patent document 1)". The above patent document 1 is a prior art related to a case somewhat different from the present invention in which a tuna by-product and an organic material are mixed and fermented.
한편, 상기 특허문헌 1과 같이 참치 부산물을 효소 분해한 아미노산 액비(제품명: 풍작-L)의 주원료가 되는 참치와 그 부산물로는 식용으로 가공되는 참치어종으로 주로 황다량어를 사용하며, 그 중에서도 등뼈, 지느러미, 껍질, 머리(어두), 혈분(고기살이 많음), 톱밥(냉동 참치 절단 가공시 발생) 등이 사용된다. 이러한 참치와 그 부산물은 건조한 후의 단백질은 53~55%, 회분(Ca, P 성분)은 8.0~12%이며, 일반적인 천연 유기성물질에 비해 매우 높은 성분함량을 포함하고 있다. 또한 참치 부산물은 우수한 단백질을 함유하고 있으며, 비타민(B1, B2, B6, E 등)은 물론 무기질(Ca, Fe, Mg 등)이 다량 함유되어 있다. 또한 효소분해에 의해 20여종의 아미노산은 토양미생물 증식을 활성화하여 유기물 분해를 촉진하고, 암모니아태 질소로 토양내 분해와 미네랄화는 물론 아미노산 형태로 직접 뿌리에 흡수된다. 따라서 참치 부산물을 이용한 유기질 비료는 지하부 및 지상부의 생육촉진과 일조 부족시 냉해와 병해 예방에 매우 효능을 발휘한다.On the other hand, as in Patent Document 1, the tuna which is the main ingredient of the amino acid solution of the tuna by-product (product name: Pomegranate-L) and the by-product thereof are mainly used as the tuna fish species processed for edible purposes, Spines, fins, skin, hair (dark), blood (with a lot of flesh), and sawdust (occurring when cutting frozen tuna). These tuna and its by-products contain 53 ~ 55% of protein after drying and 8.0 ~ 12% of ash (Ca, P component) and contain very high content of ingredients compared with general natural organic materials. In addition, tuna by-products contain excellent proteins and contain large amounts of minerals (Ca, Fe, Mg, etc.) as well as vitamins (B1, B2, B6 and E). In addition, 20 kinds of amino acids by enzymatic decomposition promote the decomposition of organic matter by promoting the microbial growth of soil, and ammonia nitrogen is absorbed in roots as amino acid form as well as decomposition and mineralization in soil. Therefore, organic fertilizer using tuna byproducts is very effective in promoting the growth of underground and above ground parts, and preventing cold damage and disease when lack of sunshine.
뿐만 아니라 참치의 성분 중 글라이신(Glysine)은 질소와 카리의 흡수를 촉진하고 아스파르트산(Aspartic acid)과 세린(Serine)은 인산과 카리의 흡수를 촉진하며 일부 아미노산에 의해 맛, 당도, 저장성을 증대하는 효과가 매우 크다. 또한 소량의 오일(EPA, DHA 등)이 함유되어 있으므로 일부 유해 곤충의 기피물질로서 줄기, 잎, 주위 토양에서 서식이나 산란을 현격히 줄일 수 있다.In addition, glycine, a component of tuna, promotes the absorption of nitrogen and carrie, while aspartic acid and serine promote absorption of phosphoric acid and caries, and increase taste, sugar and storage by some amino acids The effect is very large. In addition, since it contains a small amount of oil (EPA, DHA, etc.), it is possible to reduce habitat and scattering in stems, leaves and surrounding soil as a repellent of some harmful insects.
오늘날에는 이와 같은 참치 부산물을 효소(알카리제)로 분해 처리하고 액상을 분리하여 제품화하여 시판하고 있지만, 기존 제품의 저장성의 문제해결과 병원 미생물 방제의 친환경적 기능성을 시장에서 요구하고 있는 실정이다.Today, such tuna byproducts are decomposed into enzymes (alkalis) and liquid products are separated and commercialized. However, there is a demand in the market for solving the problem of the storage stability of existing products and the environmentally friendly function of the microbial control of the hospital.
본 발명은 참치가공 잔재물을 효소 처리한 액비의 식물 병원균 저항성 및 생육촉진 기능을 개선한 참치 가공 잔재물의 효소 처리 및 발효시킨 아미노산 액상 비료와 이의 제조방법을 제공하는데 그 목적이 있다.It is an object of the present invention to provide an amino acid liquid fertilizer and a method for producing the same, wherein the tuna processing residues are enzymatically treated and fermented with a tuna processing residue, which improves the plant pathogen resistance and growth promoting function of the livestock.
본 발명은 유기산 생성 미생물로 발효하여 살균공정을 생략하고 저장성을 향상시킬 수 있도록 하는 참치 가공 잔재물의 효소 처리 및 발효시킨 아미노산 액상 비료와 이의 제조방법을 제공하는데 그 목적이 있다.It is an object of the present invention to provide an amino acid liquid fertilizer which is fermented with an organic acid-producing microorganism, which is capable of eliminating a sterilization process and improving storage stability, by enzymatic treatment and fermentation of a tuna processing residue.
본 발명은 미생물 발효를 통해 참치가공 부산물 내에 함유된 어유로 인한 고유 취기 저감으로 살포가 용이한 참치 가공 잔재물의 효소 처리 및 발효시킨 아미노산 액상 비료와 이의 제조방법을 제공하는데 그 목적이 있다.An object of the present invention is to provide an amino acid liquid fertilizer and a method for producing the same, wherein the tuna processing residue is easily fermented by reducing the intrinsic odor due to fish oil contained in the tuna processing by-product through microbial fermentation.
본 발명은 식물 병원균 저항성 미생물을 이용하여 미생물 농약 기능을 추가한 참치 가공 잔재물의 효소 처리 및 발효시킨 아미노산 액상 비료와 이의 제조방법을 제공하는데 그 목적이 있다.It is an object of the present invention to provide an amino acid liquid fertilizer and a method for producing the amino acid liquid fertilizer by enzymatically treating and fermenting tuna processing residues added with a microbial pesticide function using a plant pathogenic microorganism.
본 발명은 종래의 참치가공 부산물을 효소 분해하여 생산하는 액체 비료에 비해 생산기간이 4~5일로 상당히 짧으며, 풍부한 아미노산을 함유하여 식물의 생장에 큰 도움을 줄 수 있는 참치 가공 잔재물의 효소 처리 및 발효시킨 아미노산 액상 비료와 이의 제조방법을 제공하는데 그 목적이 있다.The present invention relates to an enzyme treatment of tuna processing residues which can significantly contribute to the growth of plants by containing amino acids in a considerably short period of 4 to 5 days compared with the conventional liquid tanning processing byproducts produced by enzymatic digestion And fermented amino acid liquid fertilizer and a method for producing the same.
본 발명은 참치 가공 잔재물을 효소 처리한 액상 비료를 제조할 때, 단백질 분해 미생물, 식물 병원성 저항균, 식물 유산균 각 2%와, 당밀 3% 및, 전지분유 0.1%를 투입하여 발효시키는 과정으로 이루어지는 것을 특징으로 한다.The present invention relates to a process for fermenting a liquid fertilizer obtained by enzymatically treating a tuna processing residue by adding 2% each of proteolytic microorganism, phytopathogenic microorganism, plant lactic acid bacterium, 3% molasses and 0.1% .
이때, 본 발명에서 사용되는 단백질 분해 미생물은 Bacillus sutillus LH1 임을 특징으로 한다.Herein, the proteolytic microorganism used in the present invention is characterized by being Bacillus sutillus LH1.
상술한 바와 같이 본 발명의 실시 예에 따른 참치 가공 잔재물의 효소 처리 및 발효시킨 아미노산 액상 비료와 이의 제조방법은 아래와 같은 많은 효과를 달성한다.As described above, the amino acid liquid fertilizer which has been subjected to the enzymatic treatment and fermentation of the tuna processing residue according to the embodiment of the present invention and its manufacturing method achieve the following many effects.
첫 번째로, 본 발명은 효소 및 미생물적으로 아미노산 발효가 되어 식물에 흡수가 빠른 질소 성분을 가지고 있으며, 이로 인해 작물의 생장촉진과 수확량의 증가를 가져와 미나리 등의 수경재배에 효과적으로 웃거름용 액비로 사용할 수 있다. 특히, 미나리 균핵병에 대한 길항 기능을 지닌 미생물을 함유하고 있어 우수한 액체비료가 될 것으로 판단된다.Firstly, the present invention has a nitrogen component which is enzymatically and microbiologically fermented by amino acid fermentation and is rapidly absorbed by plants, thereby promoting the growth of crops and increasing the yield of the crops. As a result, Can be used. Especially, it is considered to be an excellent liquid fertilizer because it contains a microorganism having an antagonistic function against scalloping glanders.
두 번째로, 본 발명은 영농작물의 수확 증가를 통한 수익을 증대할 수 있으며, 이에 따라 한번 사용해 본 농가에서는 지속적 구매효과를 가져다 줄 것으로 판단되어 생산회사의 매출이 증가할 것으로 기대된다.Secondly, the present invention can increase profit through increased harvesting of agricultural crops, and thus, it is expected that the farmers will have a continuous purchasing effect, and the sales of production companies are expected to increase.
세 번째로, 본 발명은 고영양성을 지니고 저렴한 참치 가공 잔재물을 사용함으로 환경적으로 볼 때. 수산가공 잔재물의 효율적 육상 처분 방법인 고부가 가치 생태적 선순환 구조를 지속적으로 유지할 수 있다.Thirdly, the present invention is environmentally friendly because of the use of highly nutritious and inexpensive tuna processing residues. Value-added ecological virtuous cycle structure, which is an efficient land disposal method for fishery processing residues.
네 번째로, 본 발명은 호기적 고온고속 발효로 생선 특유의 구린내가 나지 않아 시비가 용이할 뿐만 아니라 종전의 액체 비료와 다른 작업환경을 개선하는 효과가 있다.Fourth, the present invention is not only in that the fermentation of high-speed high-speed fermentation by aerobic high-temperature fermentation does not occur, but also has the effect of improving the working environment as well as the conventional liquid fertilizer.
다섯 번째로, 본 발명은 액체 비료(제품명: 풍작-BL) 생산의 발효생산 기간이 상당히 짧아 제조 생산성이 높아져 생산공장에서 생산단가를 낮게 가져갈 수가 있어 설비 증설과 기술인력이 필요하여 고용창출의 효과와 유관산업의 고품질 산업화에 영향을 미칠 수 있다.Fifthly, the present invention is based on the fact that since the fermentation production period of the liquid fertilizer (product name: PURPOSE-BL) is considerably short, the manufacturing productivity is increased, and the production unit cost can be lowered in the production plant, And high-quality industrialization of related industries.
여섯 번째로, 본 발명은 유기농에 의한 친환경농업 생산품을 요구하는 식단의 웰빙시대 참여와 더불어 고등화훼를 통한 고품질 원예작물의 생산 및 향후 도심지 식물 농업의 활성화를 시킬 수 있을 것으로 기대된다.Sixth, the present invention is expected to enable the production of high-quality horticultural crops through high-level flowers and the activation of urban plant agriculture in the future along with the participation of the well-being period in the diet requiring eco-friendly agricultural products by organic farming.
도 1은 본 발명의 바람직한 일 실시 예에 따른 참치 가공 잔재물의 효소 처리 및 발효시킨 아미노산 액상 비료와 이의 제조방법을 순차적으로 보여주고 있는 도면이다.
도 2a는 농업유전자원센터에서 분양받은 병원성 미생물, 구체적으로는 KACC 40457(Sclerotinia sclerotiorum), KACC 40124(Rhizoctonia solani), KACC 40241(Fusarium sp .,), KACC 40180(hytophthora capsici)의 병원성 미생물을 보여주고 있는 각 사진이다.
도 2b는 미생물자원센터에서 분양받은 병원성 미생믈, 구체적으로는 KCTC 6084(Fusarium oxysporum f. sp . cucumerinum), KCTC 6104(Glomerella cingulata)의 병원성 미생물을 보여주고 있는 각 사진이다.
도 2c는 자굴산 미나리 밭에서 분리한 자굴산 미나리 곰팡이를 보여주고 있는 사진이다.
도 3은 미생물자원센터에서 분양받은 길항 미생물, 구체적으로는 KCTC 3554(Paenibacillus polymyxa), KCTC 1643(Pseudomonas putida), KCTC 9204(Streptomyces sp .)의 길항 미생물을 보여주고 있는 각 사진이다.
도 4는 식물 병원균들에 대한 다양한 갈항 미생물의 paper disc method 결과, 구체적으로는 1은 Fusarium oxysporum f. sp . cucumerinum의 결과를 보여주고 있으며, 2는 Fusarium sp.,3의 결과를 보여주고 있으며, 3은 Rhizoctonia solani의 결과를 보여주고 있으며, 4는 Phytophthora capsici의 결과를 보여주고 있으며, 5는 Glomerella cingulata의 결과를 보여주고 있으며, 6은 Sclerotinia sclerotiorum의 결과를 보여주고 있으며, 7은 Fungus of field-dropwort의 결과를 보여주고 있는 각 사진이다. 상기 도면에 표기된 A는 Pseudomonas putida이며, B는 Bacillus subtilis이며, C는 Streptomyces sp.,이며, D는 Bacillus subtilis이고, E는 Paenibacillus polymyxa이고, F는 Bacillus sp. LH1이다.
도 5는 시간에 따른 Bacillus sp. LH1의 생육과 pH 변화를 보여주고 있는 그래프이다.
도 6은 자굴산 밭 미나리의 균핵병균과 Bacillus sp. LH1의 dual culture method 결과를 보여주고 있는 사진이다.
도 7은 배지에 배양된 순수 분리균, 구체적으로는 왼쪽에서부터 무1, 무2, 배1, 배2, 유1의 순수 분리균을 보여주고 있는 각 사진이다.
도 8은 시간에 따른 Lactobacillus curvatus의 생육과 pH 변화를 보여주고 있는 그래프이다.
도 9는 배양된 선별 분리 미생물 균주, 구체적으로는 왼쪽은 Bacillus subtilis LH1의 균주를 보여주고 있는 사진이며, 오른쪽은 Lactobacillus curvatus의 균주를 보여주고 있는 사진이다.
도 10은 본 발명의 방법으로 제조된 참치 가공 잔재물을 효소 처리한 액상 비료(제품명: 풍작-BL)의 유효성분 및 유해성분 분석 시험성적서이다.
도 11은 본 발명에 따른 유효 미생물의 시험성적서이다.
도 12는 본 발명에 따른 병원성 미생물의 시험성적서이다.
도 13은 본 발명에 따른 비효ㆍ비해 시험성적서이다.FIG. 1 is a diagram sequentially showing an amino acid liquid fertilizer obtained by enzymatic treatment and fermentation of a tuna processing residue according to a preferred embodiment of the present invention and a method for producing the same.
Figure 2a shows pathogenic microorganisms distributed in the Center for Agricultural Genetic Resources, specifically, KACC 40457 ( Sclerotinia sclerotiorum ), KACC 40124 ( Rhizoctonia solani ), KACC 40241 ( Fusarium sp ., ), KACC 40180 ( hytophthora capsici ), which is a pathogenic microorganism.
Figure 2b sprocket pathogenic microorganisms in the microorganism pre-sale received resource center, specifically, KCTC 6084 (Fusarium oxysporum f. Sp . Cucumerinum), KCTC 6104 (Glomerella cingulata ), respectively.
FIG. 2C is a photograph showing the submerged foliar fungus separated from the subspecies field.
FIG. 3 is a graph showing the distribution of antagonistic microorganisms prevalent in the microbial resource center, specifically, KCTC 3554 ( Paenibacillus polymyxa ), KCTC 1643 ( Pseudomonas putida ), KCTC 9204 ( Streptomyces sp . ).
Figure 4 shows the results of the paper disc method of various crab microbes on plant pathogens, specifically 1 in Fusarium oxysporum f. sp . cucumerinum , 2 shows the results of Fusarium sp., 3 , and 3 shows the results of Rhizoctonia solani , and 4 is Phytophthora capsici , and 5 shows Glomerella cingulata , 6 shows the results of Sclerotinia sclerotiorum , and 7 shows the results of the Fungus of field-dropwort. A shown in the figure is Pseudomonas putida , B is Bacillus subtilis , C is Streptomyces sp., D is Bacillus subtilis , E is Paenibacillus polymyxa , F is Bacillus sp. LH1.
Figure 5 shows the time course of Bacillus sp. This graph shows the growth and pH change of LH1.
Fig. 6 is a graph showing the distribution of the Bacillus sp. This is a photograph showing the result of the dual culture method of LH1.
FIG. 7 is a photograph showing purely isolated bacteria isolated from pure cultures cultured on a medium, specifically, 1, 2, 1, 2, and 1 from the left.
8 is a graph showing the growth and pH change of Lactobacillus curvatus with time.
FIG. 9 is a photograph showing the strains of cultivated sorted isolated microorganisms, specifically, on the left, Bacillus subtilis LH1, and on the right is a photograph showing strains of Lactobacillus curvatus .
Fig. 10 is a test report for analyzing an active ingredient and a harmful component of a liquid fertilizer (product name: Pomegranate-BL) obtained by enzymatically treating a tuna processing residue produced by the method of the present invention.
11 is a test report of an effective microorganism according to the present invention.
12 is a test report of a pathogenic microorganism according to the present invention.
Fig. 13 is an ineffective and comparative test report according to the present invention.
이하 본 발명의 실시 예를 첨부된 도면을 참조하여 설명하면 다음과 같다. 후술 될 상세한 설명에서는 상술한 기술적 과제를 이루기 위해 본 발명에 있어 한 개의 대표적인 실시 예를 제시할 것이다. 그리고 본 발명으로 제시될 수 있는 다른 실시 예들은 본 발명의 구성에서 설명으로 대체한다. Hereinafter, embodiments of the present invention will be described with reference to the accompanying drawings. In the following detailed description, one exemplary embodiment of the present invention will be described in order to accomplish the above-mentioned technical problems. And other embodiments which may be presented by the present invention are replaced by descriptions in the constitution of the present invention.
본 발명에서는 참치 부산물을 효소 분해한 아미노산 액비에 보다 아미노산이 흡수형으로 개선하는 단백질 발효와 식물 병원균 저항성 및 특유의 취기를 구수한 냄새로 전환하는 방법을 더한 공정 개선에 따른 경제성 있는 고품질의 액비를 제조할 수 있는 방법을 제안한다.In the present invention, a method of converting an amino acid solution obtained by enzymatically digesting a tuna by-product into a protein fermentation in which the amino acid is improved in an absorption-type manner, a resistance to plant pathogens and a unique odor, We suggest a way to do this.
구체적으로는, 본 발명은 참치 부산물을 효소 분해한 아미노산 액상 비료를 제조할 때, 단백질 분해 미생물과 식물 병원성 저항균 및 당밀을 투입하는 발효공정을 수행하여 별도의 살균공정을 거치지 않고도 아미노산 액비가 가진 제품의 성능과 더불어 보다 더 생체흡수가 용이하게 하여 작물생육을 높이고, 식물 병해에 대한 저항성을 높일뿐만 아니라 오일의 미생물학적 유화로 고유 취기를 저감하여 살포 사용에 용이성을 가진 참치 가공 잔재물의 효소 처리 및 발효시킨 아미노산 액상 비료와 이의 제조방법을 구현하고자 한다.Specifically, the present invention relates to a method for producing an amino acid liquid fertilizer obtained by enzymatically digesting a tuna by-product, which comprises fermenting a protein-degrading microorganism, a plant pathogenic antibacterial agent and molasses into a fermentation process, In addition to the performance of the product, it further enhances the growth of crops by increasing the bioavailability and enhances the resistance to plant diseases, as well as the enzymatic treatment of tuna processing residues with ease of application by reducing the intrinsic odor due to microbiological emulsification of oil And fermented amino acid liquid fertilizer and a method for producing the same.
본 발명에서 구현하고자 하는 제조공정은, 효소반응 공정 후 아미노산 및 발효 미생물로 2차 발효를 하고, 저장성을 위해 종전에 살균처리하던 것을 유기산 생성 미생물로 발효하여 생산된 유기산에 의해 pH가 3.5까지 내려감으로써 저장성이 자동적으로 생성됨은 물론 향상된다. 따라서 본 발명에서는 종래에 실시하던 살균단계를 생략하였으며, 또한 발효 공정시 병원성 미생물에 대하여 저항성 물질생산 미생물을 함께 첨가함으로써 미생물 농약 기능도 나타내도록 하였다.The production process to be implemented in the present invention is characterized in that after the enzymatic reaction process, secondary fermentation with amino acid and fermenting microorganism and sterilization treatment prior to storage are performed by the organic acid produced by fermentation with an organic acid-producing microorganism, The storability is automatically generated as well as improved. Therefore, in the present invention, the conventional sterilization step is omitted, and microorganism pesticide functions are also shown by adding microorganisms resistant to the pathogenic microorganisms in the fermentation process.
본 발명과 같은 방법으로 액상 비료를 제조하게 되면, 보다 저분자의 흡수율이 높은 아미노산 형태로 변환되고 식물 병원성 저항균의 투입으로 내병성을 지니며, 영양원 및 당밀을 투입하여 발효를 진행하면 살균의 과정을 거치지 않더라도 발효 과정에서 발생한 유기산 발효로 자체 저장성을 높일뿐만 아니라 변질성을 낮춤으로 인해 살균공정의 생략에 의한 아미노산의 열화방지와 투입 에너지를 절감하는 효과를 볼 수 있으며, 나아가 어유의 유화되고 황함유 아미노산이 당과의 발효과정을 통해 반응하여 고유 취기(즉, 역한 냄새)까지도 저감된 한층 향상된 아미노산 액비를 제조할 수 있는 방법이다.When the liquid fertilizer is produced by the same method as the present invention, it is converted into an amino acid form having a higher absorption rate of low molecular weight and is endowed with the introduction of plant pathogenic antimicrobial. When fermentation is performed by feeding nutrient source and molasses, It is possible to prevent deterioration of amino acid and to reduce input energy by omitting the sterilization process due to lowering of the deterioration property as well as to enhance the self-storage property of the organic acid fermentation broth generated in the fermentation process. Further, It is a method capable of producing a further improved amino acid solution in which the amino acid is reacted through the fermentation process with the sugar to reduce the intrinsic odor (i.e., odor).
한편, 본 발명에서는 위에서 보았듯이 참치 가공 잔재물을 효소 처리한 액상 비료를 제조할 때 영농작물의 질병과 병충해를 예방하기 위해 길항성이 있는 병원성 미생물을 발효단계에서 투입하였으며, 상기 병원성 미생물은 한국미생물자원센터와 농업유전자원정보센터의 홈페이지를 검색하여 대표적으로 상업성을 지니고 대규모 영농작물인 부추, 양파, 고추와 미나리에 대한 주요 미생물적 병인을 유발하는 미생물을 검색하여 아래와 같이 분양하여 병원성 미생물로서 사용하였다.In the meantime, in the present invention, when preparing a liquid fertilizer obtained by enzymatically treating a tuna processing residue, the pathogenic microorganism having an antagonistic property is introduced in the fermentation stage in order to prevent diseases and pests of agricultural crops. It searches the homepage of the Resource Center and the Agricultural Genetic Resources Information Center to search for microorganisms causing major microbiological pathogenesis of large-scale agricultural crops such as leek, onion, pepper and parsley, which are typically commercialized. They are sold as follows and used as pathogenic microorganisms Respectively.
본 발명에 사용된 식물 병원균의 종류는 총 7가지이며, 아래에서 구체적으로 제시한다. 분양받은 식물 병원균의 각 사진은 도 2a 내지 도 3c와 같다.There are seven types of plant pathogens used in the present invention, and they are specifically shown below. Each photograph of the plant pathogenic bacteria that has been put into sale is shown in FIGS. 2A to 3C.
① Fusarium oxysporum f. sp . cucumerinum: 부추와 양파의 시들음병 원인균으로 미생물자원센터에서 분양받았다.① Fusarium oxysporum f. sp . Cucumerinum : A causative organism of leek and onion was sold at the Microbiological Resource Center.
② Fusarium sp .: 부추와 양파의 시들음병 원인균으로 농업유전자원정보센터에서 분양받았다.② Fusarium sp . : It was sold at the Agricultural Genetic Resources Information Center as a cause of wilt disease of leek and onion.
③ Rhizoctonia solani: 부추와 양파의 잘록병 원인균으로 농업유전자원정보센터에서 분양받았다.③ Rhizoctonia solani : Leek and onion are the causative agents of the disease and have been sold at the Agricultural Genetic Resources Information Center.
④ Phytophthora capsici: 고추의 역병 원인균으로 농업유전자원정보센터에서 분양받았다.④ Phytophthora capsici : It was sold at the Agricultural Genetic Resources Information Center as a cause of P. aeruginosa .
⑤ Glomerella cingulata: 고추의 탄저병 원인균으로 미생물자원센터에서 분양받았다.⑤ Glomerella cingulata : Anthracnose caused by red pepper was distributed at the microbial resource center.
⑥ Sclerotinia sclerotiorum: 미나리의 균핵병 원인균으로 농업유전자원정보센터에서 분양받았다.⑥ Sclerotinia sclerotiorum: Sclerotinia sclerotiorum was licensed from the Agricultural Genetic Resources Information Center.
⑦ 자굴산 곰팡이: 자굴산 미나리밭의 병든 미나리에서 직접 채취하였다. 자굴산 미나리밭에서 분리한 자굴산 미나리 질병 원인곰팡이의 5.8S rRNA분류결과 진균류의 자낭균류의 흰곰팡이로, 균핵병을 야기하는 Sclerotinia sclerotiorum로 동정되었고, 5.8S rRNA의 유전자 염기서열을 나타내었다.⑦ Jaguksan mildew: It was collected directly from the diseased buttercups of Mt. As mildew fungi cause diseases of the buttercup jagulsan classification of 5.8S rRNA of fungi Ascomycetes separated from jagulsan buttercup field, Sclerotinia causing gyunhaekbyeong sclerotiorum , and showed the nucleotide sequence of 5.8S rRNA.
Sclerotinia sclerotiorum strain XJSHZ-3의 5.8S-RNA의 gene bank와 유전자 서열(origin)은 아래와 같다. Sclerotinia The gene bank and gene sequence of 5.8S-RNA of sclerotiorum strain XJSHZ-3 are as follows.
Sclerotinia sclerotiorum strain XJSHZ-3 internal transcribed spacer 1, partial sequence; 5.8S ribosomal RNA gene, complete sequence; and internal transcribed spacer 2, partial sequence Sclerotinia sclerotiorum strain XJSHZ-3 internal transcribed spacer 1, partial sequence; 5.8S ribosomal RNA gene, complete sequence; and internal transcribed
GenBank: JN012606.1GenBank: JN012606.1
본 발명에서 사용된 길항미생물의 종류는 총 6가지이며, 아래에서 구체적으로 제시하고자 한다. 분양받은 길항 미생물의 사진은 도 3과 같다.There are six kinds of antagonistic microorganisms used in the present invention, and will be specifically described below. The photograph of the pre-cultured antagonistic microorganism is shown in FIG.
① Pseudomonas putida (A): 미생물자원센터에서 분양받았으며, 생성산물로 catechol 2,3-oxygenase를 생성하고 cellulase와 protease의 효소를 생성한다.① Pseudomonas putida (A): It is distributed at the microbial resource center. It produces
② Bacillus subtilis (B): 청국장으로부터 추출하였다.② Bacillus subtilis (B): extracted from Chungkookjang.
③ Streptomyces sp . (C): 미생물자원센터에서 분양받았으며, 생성산물로 lincomycin을 생성하고 cellulase와 protease의 효소를 생성한다.③ Streptomyces sp . (C): It is distributed at the microbial resource center. It produces lincomycin as a product and produces cellulase and protease enzymes.
④ Bacillus subtilis KCCM 41462 (D): 한국미생물보존센터에서 분양받았다.④ Bacillus subtilis KCCM 41462 (D): It was sold at the Korea Microorganism Conservation Center.
⑤ Paenibacillus polymyxa (E): 미생물자원센터에서 분양받았으며, 생성산물로 cellulase와 protease의 효소를 생성한다.⑤ Paenibacillus polymyxa (E): It is distributed in the microbial resource center. It is a product of production of enzyme of cellulase and protease.
⑥ Bacillus SP. LH1 (F): 볏짚에서 분리한 자체 보관균주이다.⑥ Bacillus SP. LH1 (F) is a self-contained strain isolated from rice straw.
한편, 본 발명에서는 병원성 미생물에 대한 길항 미생물을 다음과 같은 방법으로 실험하여 선별하였다.In the present invention, antagonistic microorganisms against pathogenic microorganisms were tested and selected in the following manner.
1. 실험방법1. Experimental Method
가. 배지 및 배양 조건end. Medium and culture conditions
식물 병원균의 생육은 Potato Dextrose Agar (Potato dextrose borth 24 g/L, agar 15 g/L; 25℃)을 사용하였고 길항 미생물의 생육은 Bacillus 속은 Luria Bertani (Tryptone 10 g/L, Yeast extract 5 g/L, NaCl 10 g/L; 25℃), Pseudomonas putida는 Benzoate Medium ((NH4)2HPO4 3 g/L, KH2PO4 1.2 g/L, NaCl 5 g/L, MgSO47H2O 0.2 g/L, Yeast extract 0.5 g/L, Na-benzoate 3 g/L, AGAR 20 g/L; 25℃), Strepomyces sp.는 Bennett's Medium (Yeast extract 1 g/L, Beef extract 1 g/L, N-Z amine 2 g/L, glucose 10 g/L, agar 15 g/L; 25℃), Panibacillus polyxa는 Nutrient Agar (Beef extract 3 g/L, peptone 5g/L, agar 15 g/L; 30℃)을 사용하였다. 그리고 길항 미생물의 액체 배양은 Nutrient broth를 사용하여 shaking incubator에서 배양하였다.(rpm: 130)Growth of plant pathogens Potato Dextrose Agar (Potato dextrose borth 24 g / L, agar 15 g / L; 25 ℃) was used as the growth of the antagonistic microorganism is Bacillus genus Luria Bertani (Tryptone 10 g / L , Yeast extract 5 g / Pseudomonas putida was prepared by adding Benzoate Medium ((NH4) 2HPO4 3 g / L, KH2PO4 1.2 g / L, NaCl 5 g / L, MgSO47H2O 0.2 g / L, Yeast extract 0.5 g / L, NaCl 10 g / L; L, Na-benzoate 3 g / L, AGAR 20 g / L; 25 ° C), Strepomyces sp. Nutrient Agar (Beef extract 3 g / L, peptone 5 g / L, agar 15 g / L; 30 ° C) was used as the panibacillus polyxa . Liquid cultures of antagonistic microorganisms were cultured in a shaking incubator using Nutrient broth (rpm: 130)
나. 길항성 시험I. Antagonistic test
분양받은 식물 병원균, 길항 미생물 및 직접 채취한 자굴산 미나리 병원균의 활성을 높이기 위해 사전 고체 배지에 계대배양하였다. 길항 미생물은 액체 배지에서 배양하여 paper disc method를 실시하였다. 길항 미생물 접종생체량은 배양액을 600nm에서 OD값을 측정하여 OD값이 0.4일때 32ul을 주입하는 것을 기준으로 하여 모든 길항 미생물의 액체 배양액을 OD값으로 조정하여 paper disc에 각 배양액을 적셨다. 반면 대조군실험의 미생물 배양액만 넣지 않고 같은 조건으로 실시하였다.In order to increase the activity of plant pathogens, antagonistic microorganisms, and direct - harvested Mycobacterium tuberculosis pathogens, they were subcultured in pre - solid medium. Antagonistic microorganisms were cultured in liquid medium and subjected to paper disc method. The biomass of the antagonistic microorganism was measured by measuring the OD value of the culture solution at 600 nm. When the OD value was 0.4, 32 .mu.l was injected, and the OD of each antagonistic microorganism was adjusted to the OD value. On the other hand, the microorganism culture of the control experiment was not added and the same conditions were used.
배양된 식물 병균사체의 일부를 PDA 배지 중앙에 접종하고, 그 배지의 중앙으로부터 2.5cm 떨어진 6방향으로 6개의 paper disc (Diameter: 0.5cm)를 올려놓았다. 올려놓은 paper disc에 6종의 액체 배양된 길항 미생물을 각각 적시고 25℃에 배양 3일부터 관찰하여 7일째 배양일에 식물 병원균에 대한 길항 미생물의 영향을 조사하였다.A part of the cultured plant mycelium was inoculated into the center of the PDA medium, and six paper disks (Diameter: 0.5 cm) were placed in six directions 2.5 cm away from the center of the medium. The effect of antagonistic microorganisms on plant pathogens was investigated on the 7th day after culturing at 25 ℃ for 3 days by wetting 6 liquid cultured antagonistic microorganisms on paper discs.
2. 실험 결과2. Experimental results
가. 길항 균주end. Antagonistic strain
식물 병원균에 길항력을 나타내는 균주를 찾기 위해 paper disc method로 균사체의 성장억제 정도를 조사한 결과는 아래의 표 1과 같다. 표 1은 식물 병원균에 대한 길항 균주들의 억제능을 조사한 결과값이다.Table 1 shows the results of investigating the inhibition of mycelial growth by the paper disc method in order to find strains showing pathway resistance in plant pathogenic bacteria. Table 1 shows the results of inhibition of antagonistic strains against plant pathogenic bacteria.
1) Fusarium oxysporum f. sp . cucumerinum: 부추와 양파의 시들음병 원인균1) Fusarium oxysporum f. sp . cucumerinum : causative bacteria of leek and onion
2) Fusarium sp .: 부추와 양파의 시들음병 원인균2) Fusarium sp . : Wiltful disease caused by leek and onion
3) Rhizoctonia solani: 부추와 양파의 질록병 원인균3) Rhizoctonia solani : the quality of leek and onion
4) Phytophthora capsici: 고추의 역병 원인균4) Phytophthora capsici : Plague causative bacteria of pepper
5) Glomerella cingulata: 고추의 탄저병 원인균5) Glomerella cingulata : Anthracnose causing bacteria of pepper
6) Sclerotinia sclerotiorum: 미나리의 균핵병 원인균6) Sclerotinia sclerotiorum : Sclerotinia causing bacteria
7) Jagul Mt . Fungus(자굴산 곰팡이): 자굴산 미나리 밭의 곰팡이병 분리균7) Jagul Mt. Fungus : Fungus isolates from mallow field
*1) A, Pseudomonas putida * 1) A, Pseudomonas putida
*2) B, Bacillus subtilis * 2) B, Bacillus subtilis
*3) C, Streptomyces sp.* 3) C, Streptomyces sp.
*4) D, Bacillus subtilis * 4) D, Bacillus subtilis
*5) E, Paenibacillus polymyxa * 5) E, Paenibacillus polymyxa
*6) F, Bacillus sp. LH1* 6) F, Bacillus sp. LH1
상기 표 1에서 보는 바와 같이, Fusarium oxysporum f. sp . cucumerinum에는 A, B, C, D, E, F가 각각 4, 6, 9, 6, 10, 13mm의 길항력이 나타났으며(도 4의 1 참조), Fusarium sp .에는 A, C, E, F가 각각 2, 5, 4, 7mm의 길항력이 나타났다(도 4의 2 참조). Rhizoctonia solani에는 A, B, C, D, E, F가 각각 4, 11, 10, 5, 4, 13mm의 길항력이 나타났으며(도 4의 3 참조), Phytophthora capsici에는 A, B, C, D, E, F가 각각 15, 15, 15, 15, 16, 16mm의 길항력이 나타났고(도 4의 4 참조), Glomerella cingulata에서 A, C, E, F가 각각 5, 10, 110, 13mm의 길항력이 나타났으며(도 4의 5 참조), Sclerotinia sclerotiorum에는 B, C, F가 각각 9, 1, 10mm의 길항력이나타났다(도 4의 6 참조). 마지막으로 자굴산 곰팡이에서는 B, C, D, E, F가 각각 10, 2, 7, 11, 12의 길항력이 나타났다(도 4의 7 참조).As shown in Table 1, Fusarium oxysporum f. sp . cucumerinum had include A, B, C, D, E, F, respectively 4, 6, 9, 6, 10, born this way receive drag of 13mm (see Fig. 1 of 4), Fusarium sp . , A, C, E, and F were 2, 5, 4, and 7 mm, respectively (see FIG. Rhizoctonia solani, the A, B, C, D, E, F This was 4, the road drag of 11, 10, 5, 4, 13mm appeared respectively (see 3 in Fig. 4), Phytophthora C, E, and F were found in the glomerella cingulata (Fig. 4), and the A, B, C, D, E, and F of the capsici showed 15, 15, 15, 15, 16, (See 5 in Fig. 4), and Sclerotinia < RTI ID = 0.0 > Sclerotiorum showed B, C, F of 9, 1, and 10 mm, respectively (see 6 in FIG. 4). Finally, in the submicron fungus, B, C, D, E, and F were 10, 2, 7, 11, and 12, respectively.
상기 표 1과 도 4에서 보는 바와 같이, F 균주인 Bacillus sp. LH1는 식물 병원균 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7에 대한 생육억제능이 7~16mm로 골고루 높게 나타나서 모든 식물 병원균에 대한 길항력이 가장 우수하다는 것을 확인할 수 있었다. 따라서 본 발명에서는 Bacillus sp. LH1를 길항 균주로 선정하였다.As shown in Table 1 and FIG. 4, Bacillus sp. LH1 showed a high level of inhibition of growth on
상기 "Bacillus sp. LH1"의 미생물 기탁번호는 아래와 같다.The microorganism deposit number of " Bacillus sp. LH1" is as follows.
본 발명에서 선별된 길항 균주인 Bacillus sp. LH1의 균체 생산을 위해 도 4에 도시한 발효 배양배지(Luria Bertani (Tryptone 10 g/L, Yeast extract 5 g/L, NaCl 10 g/L; 25℃))에서 생육곡선(growth curve)을 작성하여 최대 증식말기를 산정하여 접종용 균체로서 수거하였다. 즉, 도 5의 생육곡선 그래프에서 보는 바와 같이 4시간 정도에서 최대 증식상태를 나타내어 균체를 이 시기에 회수하였다.In the present invention, the selected antagonistic strain, Bacillus sp. For the production of LH1 cells, a growth curve was prepared in the fermentation culture medium (Luria Bertani (Tryptone 10 g / L, Yeast extract 5 g / L, NaCl 10 g / L; And the end stage of maximum proliferation was calculated and collected as inoculum cells. That is, as shown in the growth curve graph of FIG. 5, the maximum proliferation state was observed at about 4 hours, and the cells were collected at this time.
나. 선별 미생물의 동정I. Identification of selected microorganisms
본 발명에서는 참치 가공 잔재물을 효소 처리한 액상 비료를 제조할 때, 바람직하게는 발효단계에서 투입되는 식물 병원균에 대한 길항 미생물은 Bacillus sp. LH1이며, 상기 Bacillus sp. LH1의 16S rRNA 분류결과 Bacillus subtilis로 동정되어 "Bacillus subtilis LH1"로 명명하였다.In the present invention, when preparing a liquid fertilizer obtained by enzymatically treating a tuna processing residue, the antagonistic microorganism to the plant pathogenic bacteria introduced in the fermentation step is preferably Bacillus sp. LH1, and the Bacillus sp. The 16S rRNA classification of LH1 identified Bacillus subtilis as " Bacillus subtilis LH1".
Bacillus sp. BAB-3807의 5.8S rRNA 분석에 대한 gene bank와 유전자 서열(origin)은 아래와 같다. Bacillus sp. The gene bank and gene sequence for 5.8S rRNA analysis of BAB-3807 are as follows.
Bacillus sp. BAB-3807 16S ribosomal RNA gene, partial sequence Bacillus sp. BAB-3807 16S ribosomal RNA gene, partial sequence
GenBank : KJ588869.1GenBank: KJ588869.1
한편, 본 발명에서는 액비가 주로 공급되는 수요처와 향후 수경재배에 대한 시장성을 고려할 때, 자굴산 밭 미나리의 균핵병에 대한 길항성이 매우 긴요할 것으로 판단되어, 도 6에서와 같이 자굴산 밭 미나리 균핵병균과 길항 미생물인 Bacillu subtilis . LH1 균과의 길항적 억제능을 따라 살펴보았는데, 병원균의 증식이 억제되어 미생물 농약적 기능성을 보여주고 있다.In the present invention, it is considered that the antagonistic to the sclerotinia of the subspecies of the subspecies is very important in view of the demand for the main application of the liquid fertilizer and the marketability for the hydroponic cultivation in the future. As shown in FIG. 6, Antagonistic microorganism Bacillus subtilis . The inhibitory effect of LH1 on the antagonistic activity of LH1 was inhibited by the inhibition of growth of pathogenic microorganisms.
또 한편으로, 본 발명에서는 발효 아미노산 액비의 저장성 개선을 위해 유기산 생성을 하는 균주를 보완하기로 하여, 생존력이 강한 식물 유산균을 선별하여 첨가하기로 하였다.On the other hand, in the present invention, in order to improve the shelf life of the fermented amino acid solution, it is intended to supplement the strains producing organic acids and to selectively add plant viable bacteria having high viability.
즉, 유산균이 풍부하다고 알려진 잘 익은 김치와 시중에 판매되는 유산균 음료로부터 유산균을 분리하였으며, 김치는 무김치와 배추김치 두 종류와, 유산균 음료는 한 종류를 사용하여 총 3가지 시료로부터 유산균을 분리하였다.That is, lactic acid bacteria were isolated from ripe kimchi which is known to be rich in lactic acid bacteria and commercially available lactic acid bacteria beverages. Two kinds of kimchi were isolated from lactic acid bacteria using three kinds of kimchi, .
배지의 종류는 유산균 이엠베지를 사용하였고 각 시료를 0.85% 생리식염수로 연속희석방법으로 1,000배 희석하였으며, 희석된 시료를 20ul씩 spreading하여 30℃에서 배양시킨 후 특징있는 colony를 따서 각각 streaking하여 순수 분리하였다. 순수 분리한 균은 무김치에서 2종(무1, 무2), 배추김치에서 2종(배1, 배2), 유산균 음료에서 1종(유1)으로 총 5종이며, 도 7과 같다.The medium was diluted 1,000 times by serial dilution with 0.85% physiological saline. The diluted samples were spread at 20 each at 30 째 C, streaked with characteristic colonies, Respectively. The pure isolates were five kinds (1, 2, 2) in mulch kimchi, 2 (1 and 2) in cabbage kimchi, and 1 (1) in lactic acid bacteria beverage.
순수 분리한 균 5종에 대해 앞서 실시한 식물병원 미생물에 대한 길항조사를 하였으며, 실험방법은 길항 미생물 선별방법과 동일한 방법으로 진행하였고 실험결과 5종 모두 식물병원 미생물에 대한 생육억제능은 나타나지 않았다.Antimicrobial susceptibility test of 5 kinds of pure isolates was carried out in the same manner as the antagonistic microorganism screening method. The experimental results showed that none of 5 species showed inhibitory effect on the growth of plant microbes.
무김치에 분리한 유산균 무2의 16S rRNA 분류 동정결과 Lactobacillus curvatus로 동정되었으며, 상기 Lactobacillus curvatus의 16S rRNA 분석에 대한 gene bank와 유전자 서열(origin)은 아래와 같다.As a result of 16S rRNA classification of
Lactobacillus curvatus gene for 16S rRNA, partial sequence, strain: Ni998 Lactobacillus curvatus gene for 16S rRNA, partial sequence, strain: Ni998
GENbank : AB600200.1GENbank: AB600200.1
균 동정을 통해 선별된 Lactobacillus curvatus의 생육곡선을 작성하여 생육도를 알아보았으며, 도 8과 같이 14시간 정도서 최대 증식 상태를 나타내었고, pH는 12시간 배양기간에 6.0으로 감소되었으며, 영양분이 풍부한 상태라면 유기산을 보다 많이 생산하여 더 낮은 pH 상태를 나타낼 수 있다.Growth curves of Lactobacillus curvatus selected by germination were examined and the degree of viability was determined. As shown in FIG. 8, the maximum growth was observed at about 14 hours. The pH was decreased to 6.0 during the 12 hour incubation period. If it is in a rich state, it can produce a higher amount of organic acid and exhibit a lower pH state.
한편, 본 발명에서는 선별된 미생물인 길항 미생물 Bacillus subtilis LH1와 유산균 Lactobacillus curvatus의 균주 이전을 용이하게 하고 저장성을 높이기 위해 미생물 동결건조 샘플을 제작하였다. 동결건조 샘플 제작 전 Bacillus subtilis LH1와 Lactobacillus curvatus의 배양은 앞에서 설명한 길항 미생물의 선별 및 유산균의 선별에서와 동일한 배지 및 배양 조건으로 실험하였다. 동결건조 샘플 제작 전 배양된 미생물 균주는 도 9와 같다. 미생물 동결건조는 미생물자원센터에 의뢰하여 동결건조 샘플을 각각 10개씩 제작하였다.In the present invention, a freeze-dried microorganism sample was prepared in order to facilitate the transfer of strains of the selected microorganism, Bacillus subtilis LH1, and lactic acid bacteria Lactobacillus curvatus . Bacillus subtilis LH1 and Lactobacillus curvatus were cultured in the same medium and culture conditions as in the selection of antagonistic microorganisms and selection of lactic acid bacteria. The microorganism strains cultured before the preparation of the lyophilized sample are shown in Fig. Microbial lyophilization was commissioned by the Microbiological Resource Center and 10 lyophilized samples were prepared.
또한, 본 발명에서는 참치 부산물을 효소 분해한 후, 미생물에 의한 아미노산 발효를 하기 위해 첨가한 단백질 분해능을 가지고 아미노산 발효를 하는 균주의 선택은 병원성 미생물에 대한 길항성 미생물인 Bacillus subtilis LH1이 지닌 단백질과 지질분해능을 이용하기로 하여 단백질 분해 미생물로 선정하였다. 그리고 비료공정규격설정 및 지정고시에 미생물을 사용한 미생물 비료의 토양미생물제제에 해당되는 Bacillus 균을 선택하는 것이 향후 토양미생물제제로의 선정을 감안하여 이 균으로 단백질 분해균을 정하였다.In addition, in the present invention, the selection of a strain that performs amino acid fermentation with protein decomposition added to the amino acid fermentation by microorganisms after enzymatic degradation of the tuna by-product is performed using a protein of Bacillus subtilis LH1, a pathogenic microorganism, Lipid degradation ability was used as a proteolytic microorganism. In order to select Bacillus bacterium, which is a soil microorganism preparation using microorganism as a microbial fertilizer, the microorganism was selected as a soil microbial agent.
한편, 본 발명에서는 '참치 가공 잔재물을 효소 처리한 액상 비료의 제조방법'을 구현하기 위하여, 바람직하게는 미생물을 접종하기 위하여 산소를 공급하는 장치를 사용하고 또한 고온발효에 따른 공기 내 산소전달효율 문제와 발효시 거품이 발생하는 것을 억제하기 위한 장치를 사용하였다.In the present invention, in order to realize a method of producing a liquid fertilizer in which a tuna processing residue is subjected to enzymatic treatment, it is preferable to use an apparatus for supplying oxygen to inoculate microorganisms, A device was used to prevent problems and foaming during fermentation.
즉, 발효기의 운전이 45~55℃로 운전되기에 공급에서 산소용해율을 높이려면, 물리적 방법으로 미세기포가 공급되면 발효기에서 산소의 전달율이 높아진다. 그래서 본 발명에서는 고압분산기를 통한 미세 공기 방울을 발효기에 공급하였다. 이때 상기 고압분산기는 공기량이 3L/minㆍea이고, 공기압이 1.5kg/㎠이다.That is, since the operation of the fermenter is operated at 45 to 55 ° C, if the micro-bubbles are supplied by the physical method, the oxygen transfer rate in the fermenter is increased. Thus, in the present invention, fine air bubbles through a high-pressure disperser were supplied to the fermenter. At this time, the air pressure of the high-pressure disperser is 3 L / min · ea and the air pressure is 1.5 kg /
또한, 상기 발효기에 용존산소를 증가시키고 거품이 발생하는 것을 방지하기 위하여, 통상의 순산소 발생기를 통해 산소 농도를 90% 이상으로 공급하게 되는데, 공기 공급량을 줄여 발효과정 중 발생하는 거품으로 인한 발효물의 소실과 관리를 용이하였다.In order to increase the dissolved oxygen in the fermenter and to prevent foaming, the oxygen concentration is supplied to 90% or more through a conventional pure oxygen generator. The amount of air supplied is reduced so that the fermentation Water loss and management were facilitated.
이와 같이 충분한 용존산소(바람직하게는, 7mg/L 이상)를 유지하였으며, 종래의 미생물 투입 발효기 운전 시험에서와 같은 대량 거품의 발생에 따른 배양액 소실과 오염의 문제를 해결하였다.Thus, sufficient dissolved oxygen (preferably, 7 mg / L or more) was maintained, and the problem of the disappearance of the culture liquid and contamination due to the generation of massive bubbles as in the conventional microbial fermenter operation test was solved.
이상과 같이 본 발명의 바람직한 일 실시 예에 따른 참치 가공 잔재물을 효소 처리한 액상 비료의 제조방법은 단백질 분해 미생물, 길항성 미생물, 유기산 생성미생물 및 식물 병원성 미생물을 접종하고, 미생물 영양원으로 당밀 3%와 초기 유도배양을 위해 전지분유 10%를 투입하는 발효공정을 실시하였으며, 미생물을 살리기 위해 종래의 살균공정을 생략하였다. 또한, 액비 제조과정에서 용존산소 2mg/L 이상 유지하고 최종 pH 4.0 내외로 하여 강한 어분 취기(즉, 역한 냄새)를 60%까지 줄였다. As described above, the method for preparing the liquid fertilizer by treating the tuna processing residues according to the preferred embodiment of the present invention comprises inoculating proteolytic microorganisms, pathogenic microorganisms, organic acid-producing microorganisms, and phytopathogenic microorganisms, And 10% of whole milk powder for the initial induction culture. The conventional sterilization process was omitted in order to save microorganisms. In addition, during the process of preparing the liquefied soybeans, it was maintained at over 2 mg / L of dissolved oxygen, and the final pH was reduced to about 4.0, thereby reducing the strong fish meal (ie, smell) by 60%.
도 1에서 보는 바와 같이, 구체적인 발효단계는 참치부산물 300g을 습식 파쇄한 후 40℃의 온수 300L를 발효기(즉, 심부배양기 type, 용량 800L)에 넣고 온도를 40℃로 설정하고 천천히 교반(약 30rpm)하면서 상업용 단백질 분해효소 0.2%를 투입한 다음, 고형 단백질의 물리ㆍ화학적인 액화 및 아미노산화를 충분히 발생시킨다. 이때 효소분해 완성의 판정은 시료를 2시간 단위로 샘플링하여 현미경으로 관찰하여(×200) 큰 고형물이 보이지 않을 때까지 실시하였다. 경과시간은 대략 12~15hrs 정도에서 효소분해가 완성되었다.As shown in FIG. 1, 300 g of tuna by-product was wet-milled and 300 L of hot water at 40 ° C was placed in a fermenter (i.e., a deep-incubator type, capacity 800 L) and the temperature was set to 40 ° C. ), 0.2% of commercial protease is added, and then physicochemical liquefaction and amino acidization of solid protein are sufficiently generated. At this time, the determination of completion of the enzyme decomposition was performed by sampling the sample in units of 2 hours and observing with a microscope (x 200) until a large solid was not seen. Enzyme decomposition was completed at about 12 ~ 15hrs elapsed time.
이후, 단백질분해 및 길항 미생물(Bacillus sutillus LH1)과 식물 유산균을 각각 2%씩 투입하고 영양분으로 당밀 3%를, 그리고 초기유도발효 기질로 탈지분유 0.1%를 투입한 다음, 여기에 순산소 7~8L/min을 공급하면서 30rpm의 속도로 교반하였다. 그 결과 구수한 생선 냄새가 나고 용존산소는 5~8mg/L로 충분히 호기상태를 유지하였다. 따라서 충분한 산소의 공급이 이루어지고 고온 고농도의 유기질 발효기에 원활히 진행됨을 판단할 수 있다.Then, 2% of proteolytic and antagonistic microorganisms ( Bacillus sutillus LH1) and plant lactic acid bacteria were added, and 3% of molasses and 0.1% of skim milk powder were added as nutrients. And stirred at a speed of 30 rpm while supplying 8 L / min. As a result, odor of fresh fish and smell of dissolved oxygen were maintained at 5 ~ 8mg / L. Therefore, it can be judged that sufficient oxygen is supplied and the organic fermentation process proceeds smoothly at high temperature and high concentration.
이때, 미생물의 증식은 현미경으로 관찰하여 대략 106CFU/㎖ 이상을 나타내었고, 최종 pH가 4.0 내외 일 때까지 운전하였는데, 약 40hrs이 지나 목표점에 도달하였다. 충분히 미생물이 생산한 유기산에 의해 pH가 미생물 생육을 억제할 수 있는 정도로 낮아져, 살균공정을 생략하고, 필터프레스(200/hr)로 여과하여 본 발명의 액상 비료를 제조하였다.At this time, the growth of the microorganism was observed by a microscope, and it was found to be about 10 6 CFU / ㎖ or more, and it was operated until the final pH was about 4.0, and the target reached about 40 hrs later. The pH was lowered to such an extent that the microbial growth could be suppressed by the organic acid sufficiently produced by the microorganism, and the sterilization step was omitted and filtration was performed with a filter press (200 / hr) to prepare the liquid fertilizer of the present invention.
이상과 같은, 발효 조건을 정리하면 표 2와 같다. 상기 표 2는 참기 가공 부산물의 기능성 액비화를 위한 Pilot plant 발효기의 운전요소를 나타낸 것이다.Table 2 summarizes the fermentation conditions as described above. Table 2 shows operating factors of a pilot plant fermenter for functional liquefaction of porridge processing by-products.
순산소 공급7 ~ 8L / min
Pure oxygen supply
유지DO 2mg / L or more
maintain
106 CFU/㎖ 이상Microbial growth
10 6 CFU / ml or more
투입Organic acid-producing bacteria
input
발효균 투입Exhaled amino acid
Fermenting bacteria input
(구수한 냄새)Odor reduction
(Fresh smell)
한편, 본 발명에서는 상기와 같은 참치 가공 잔재물을 효소 처리한 액상 비료의 제조방법으로, 바람직하게는 발효단계(단백질분해 미생물, 식물 병원성 저항균, 식물 유산균 각 2%, 당밀 3%, 전지분유 0.1% 투입하여 발효단계를 수행함)을 진행하고 종래의 살균공정을 생략하면서 제조된 액상 비료를 친환경 농자재 목록공시 항목에 준한 공인시험을 실시하였으며, 구체적인 시험 방법 및 결과는 아래와 같다.The present invention also provides a method for producing a liquid fertilizer obtained by enzymatically treating a tuna processing residue as described above, wherein the fermentation step (protein-digesting microorganism, phytopathogenic microorganism, plant
1. 주성분 검사1. Principal component inspection
공인분석기관인 제일분석센터에 의뢰하여 친환경농자재 지정항목인 유효성분과 유해성분 검사를 친환경 목록공시에 준하여 실시하였다.We commissioned Jeil analysis center, an authorized analytical agency, to test the validity items and harmful components designated as eco - friendly farm products according to the eco - list disclosure.
유효성분으로 질소는 1.54%로 종래의 효소 분해한 아미노산 액비(상품명: 풍작-L)의 질소함량 1.45%보다 다소 증가하였다. 인산은 0.32% 그리고 가리는 0.25%를 함유하고 있었다. 유해성분은 비소, 카드늄, 수은, 납, 크롬, 구리, 니켈, 그리고 아연, 모두가 기준치 이내로 적합하였으며(풍작-BL 유효성분표 및 유해성분표 참조), 아래의 표 3 내지 표 7에서 구체적으로 나타내었다. 상기 표 5와 표 6은 도 10의 시험성적서, 바람직하게는 풍작-BL(본 발명의 방법으로 제조된 참치 가공 잔재물을 효소 처리한 액상 비료)의 유효성분 및 유해성분 부석 시험성적서를 토대로 하여 작성하였다.The nitrogen content of the active ingredient was 1.54%, which was slightly higher than the nitrogen content (1.45%) of the conventional enzyme-digested amino acid solution (trade name: PF-L). Phosphoric acid contained 0.32% and 0.25% of glutinous rice. All of the harmful components are suitable within the standard values (both the efficacy-BL efficacy and harmfulness indexes), and are shown in Tables 3 to 7 below, in which all of arsenic, cadmium, mercury, lead, chromium, copper, . The above Tables 5 and 6 are prepared based on the test results shown in FIG. 10, preferably on the basis of the active ingredient and the harmful component pumice test results of the pomegranate-BL (liquid fertilizer obtained by enzymatically treating the tuna processing residue produced by the method of the present invention) Respectively.
2014. 7. 15.
July 15, 2014.
제일분석센터
First Analysis Center
2015.10.21.
October 21, 2015.
제일분선센터
First Division Center
상기 표 3 내지 표 7에서 보는 바와 같이, 친환경농자재 목록공시는 유효성분이나 함량의 보증기준은 없고, 유해성분이 기준치 이내이기 때문에 상기 두 항목에서는 친환경농자재 등록이 가능한 것으로 조사되었고, 평가의 정량적 지표를 만족하였다.As shown in Tables 3 to 7, the disclosure of the list of environmentally friendly farming materials does not have a guideline for guaranteeing the effective ingredient or the content, and since the hazard component is within the standard value, it is possible to register the environmentally friendly farming materials in the above two items. Satisfaction.
2. 미생물 검사2. Microbiological tests
본 발명에 따른 기능성 액비 시제품(상품명: 풍작-BL)에 함유된 유효 미생물 시험과 병원성 미생물 시험을 목원대학교 미생물생태자원연구소에 시험의뢰하여 시험성적서를 받았다. 유효 미생물의 동정 및 생균수 측정결과에서 유효 미생물의 동정은 16S rRNA 유전자 전염기서열 해석을 통해 Bacillus subtilis subsp . subtilis로 동정되어(동아대 산학단에서 동정분석 의뢰하여 얻은 자료와 99% 이상 유사) 시제품의 유효 미생물과 일치하였고, 그 개체수는 2.4×108CFU/㎖로 정량적 목표로 제시한 108CFU/㎖ 이상보다 높은 유효 미생물을 함유하고 있어(도 11의 유효미생물 시험성적서 참조) 유효 미생물 수의 정량적 지표를 만족하였다.Effective microbial test and pathogenic microorganism test contained in the functional liquid fertilizer product (trade name: FUKUSHI-BL) according to the present invention were submitted to Mokpo National University Institute of Microbiology and Ecology and received a test report. Identification of effective microorganisms and identification of viable microorganisms were carried out by sequencing analysis of 16S rRNA gene sequences. Bacillus subtilis subsp . subtilis (99% similar to the data obtained from Donga University), and the population was in agreement with the effective microorganism of the prototype. The population of the sample was 2.4 × 10 8 CFU / ㎖, which was quantified as 10 8 CFU / ㎖ (Refer to the test report of effective microorganism in Fig. 11) and satisfied the quantitative index of the number of effective microorganisms.
또한, 본 발명의 기능성 액비 시제품(상품명: 풍작-BL)에 함유된 병원성 미생물 시험결과는 병원성 대장균 불검출, 병원성 살모넬라 불검출, 황색포도상구균 불검출, 리스테리아 모노사이토제네스 불검출 및 바실러스 세레우스 불검출로 조사되어, 병원성 미생물 불검출의 정량적 지표를 만족하였다(도 12의 병원성 미생물 시험성적서 참조).The pathogenic microorganism test results contained in the functional liquid fertilizer product of the present invention (trade name: FUKUSHI-BL) were examined by pathogenic Escherichia coli not detected, pathogenic Salmonella not detected, S. aureus not detected, Listeria monocytogenes not detected, and Bacillus cereus not detected, And met the quantitative index of non-detection of pathogenic microorganisms (see the test results of pathogenic microorganisms in FIG. 12).
3. 비효ㆍ비해 검사3. Ineffective and comparative inspection
비효ㆍ비해 검사는 목원대학교 미생물생태자원연구센터에 본 발명의 기능성 액비 시제품(상품명: 풍작-BL)에 대해 상추를 대상으로 그 생육, 수확량 및 비해조사를 대전광역시 서구 평촌동 453-4 권오현씨 비닐하우스에서 2015년 09월 08일로부터 2015년 10월 21일까지 실시하였다.The non-fermentation test was conducted at Mokwon University's microbiological ecological resources research center on the growth and yield of lettuce for the functional livestock product of the present invention (trade name: Pungjak-BL), and compared with 453-4 Pyeongchon-dong, Seo-gu, Daejeon House from September 08, 2015 to October 21, 2015.
그 결과는 상추의 생육양상이 다소 향상되고, 상추의 수확량이 7~10% 향상되었고, 상추의 비해는 없었다. 따라서 친환경농자재 공시목록이 가능한 것으로 판단되고, 미생물 농약 기능에 관한 것은 좀 더 추가적인 시험을 거쳐야 할 것으로 판단된다(도 13의 비효ㆍ비해 시험성적서 참조).The results showed that the growth pattern of lettuce was slightly improved, the yield of lettuce was improved by 7 ~ 10%, and there was no difference between lettuce and lettuce. Therefore, it is considered that the list of environmentally friendly agricultural materials is possible, and it is considered that the microbial pesticide function should be further tested (refer to the test report of the ineffectiveness and the ineffectiveness in FIG. 13).
Claims (5)
상기 액상 비료를 제조할 때, 단백질 분해 미생물, 식물 병원성 저항균, 식물 유산균, 당밀, 전지분유를 투입하여 발효시키는 공정으로 이루어짐을 특징으로 하는 참치 가공 잔재물의 효소 처리 및 발효시킨 아미노산 액상 비료의 제조방법.
The present invention relates to an amino acid liquid fertilizer obtained by enzymatic treatment and fermentation of tuna processing residues,
Wherein the liquid fertilizer is produced by adding a proteolytic microorganism, a plant pathogenic antibacterial agent, a plant lactic acid bacterium, molasses, and whole milk powder to ferment the tuna processing residue, and producing the fermented amino acid liquid fertilizer Way.
상기 액상 비료를 제조할 때, 단백질 분해 미생물, 식물 병원성 저항균, 식물 유산균 각 2중량%와;
당밀 3중량% 및,
전지분유 0.1중량%를 투입하여 발효시키는 과정으로 이루어짐을 특징으로 하는 참치 가공 잔재물의 효소 처리 및 발효시킨 아미노산 액상 비료의 제조방법.
The method according to claim 1,
When preparing the liquid fertilizer, 2% by weight of each of proteolytic microorganism, phytopathogenic microorganism, and plant lactic acid bacteria;
3% by weight of molasses,
And adding 0.1 wt% of powdered milk to ferment the tuna processing residue. The method for producing amino acid liquid fertilizer according to claim 1,
상기 단백질 분해 미생물은 Bacillus sutillus LH1 임을 특징으로 하는 참치 가공 잔재물의 효소 처리 및 발효시킨 아미노산 액상 비료의 제조방법.
3. The method according to claim 1 or 2,
Wherein the proteolytic microorganism is Bacillus sutillus LH1. The method for producing amino acid liquid fertilizer by enzymatic treatment and fermentation of tuna processing residues.
상기 발효과정을 할 때, 순산소 7~8L/min을 투입하는 것을 특징으로 하는 참치 가공 잔재물의 효소 처리 및 발효시킨 아미노산 액상 비료의 제조방법.
3. The method according to claim 1 or 2,
Wherein the fermentation process is carried out by introducing 7 to 8 L / min of pure oxygen. The method for producing amino acid liquid fertilizer according to claim 1,
참치 부산물, Bacillus sutillus LH1(기탁번호: KCTC13030BP) 단백질 분해 미생물, 식물 병원성 저항균, 식물 유산균, 당밀, 전지분유를 투입하여 발효시킨 액상비료인 것을 특징으로 하는 참치 가공 잔재물의 효소 처리 및 발효시킨 아미노산 액상 비료."
In the amino acid liquid fertilizer which has been subjected to the enzymatic treatment and fermentation of the tuna processing residue,
Which is a liquid fertilizer obtained by fermenting a tuna by-product, Bacillus sutillus LH1 (Accession No: KCTC13030BP), a proteolytic microorganism, a plant pathogenic bacterium, a plant lactic acid bacterium, molasses, whole milk powder, Liquid fertilizer. "
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020160111381A KR101832065B1 (en) | 2016-08-31 | 2016-08-31 | Method for Preparing Liquefied Fertilizer |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020160111381A KR101832065B1 (en) | 2016-08-31 | 2016-08-31 | Method for Preparing Liquefied Fertilizer |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR101832065B1 true KR101832065B1 (en) | 2018-02-23 |
Family
ID=61387178
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020160111381A KR101832065B1 (en) | 2016-08-31 | 2016-08-31 | Method for Preparing Liquefied Fertilizer |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
KR (1) | KR101832065B1 (en) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR102124585B1 (en) | 2019-10-11 | 2020-06-18 | 엄세용 | manufacturing method of fermented amino acid fertilizer and fermented amino acid fertilizer manufactured by the method |
KR20200079675A (en) * | 2018-12-26 | 2020-07-06 | 강원도 | Compost tea using functional compost, method of manufacturing the same and use of the same |
CN114829321A (en) * | 2019-12-17 | 2022-07-29 | 植物响应公司 | Methods and systems for reducing pathogens in organic materials |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP3375901B2 (en) | 1998-12-15 | 2003-02-10 | 大東肥料株式会社 | Slow release organic liquid composite fertilizer and method for producing the same |
KR101187327B1 (en) * | 2012-03-06 | 2012-10-02 | 주식회사 현대에프앤씨 | Method of organic fertilizer |
-
2016
- 2016-08-31 KR KR1020160111381A patent/KR101832065B1/en active IP Right Grant
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP3375901B2 (en) | 1998-12-15 | 2003-02-10 | 大東肥料株式会社 | Slow release organic liquid composite fertilizer and method for producing the same |
KR101187327B1 (en) * | 2012-03-06 | 2012-10-02 | 주식회사 현대에프앤씨 | Method of organic fertilizer |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20200079675A (en) * | 2018-12-26 | 2020-07-06 | 강원도 | Compost tea using functional compost, method of manufacturing the same and use of the same |
KR102161110B1 (en) * | 2018-12-26 | 2020-09-29 | 강원도 | Compost tea using functional compost, method of manufacturing the same and use of the same |
KR102124585B1 (en) | 2019-10-11 | 2020-06-18 | 엄세용 | manufacturing method of fermented amino acid fertilizer and fermented amino acid fertilizer manufactured by the method |
CN114829321A (en) * | 2019-12-17 | 2022-07-29 | 植物响应公司 | Methods and systems for reducing pathogens in organic materials |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Stephens et al. | Inoculant production and formulation | |
KR101408683B1 (en) | Organic fertilizer containing antifungal valuable microbes as effective ingredient and its preparation method | |
CN102965320B (en) | Bacillus subtilis for preventing and controlling plant fungal disease and application of bacillus subtilis | |
US20120015806A1 (en) | Novel formulation of microbial consortium based bioinoculant for wide spread use in agriculture practices | |
US20110214463A1 (en) | Antagonistic bacteria for controlling the fusarium wilt of continuous cropping banana and their microbial organic fertilizer | |
JP6376751B2 (en) | Use of Bacillus bacteria in a recycling-type agricultural cycle | |
CN107245461B (en) | Bacillus amyloliquefaciens B6 and application thereof | |
CN107532139A (en) | Microorganism consortium | |
US10000427B2 (en) | Phosphate solubilizing rhizobacteria bacillus firmus as biofertilizer to increase canola yield | |
CN105859338A (en) | Functional microbial soil conditioner and preparation method thereof | |
CN106854627A (en) | A kind of composite bacteria agent for promoting the flat angle stratiomyiid larval growth of speck and application | |
KR101832065B1 (en) | Method for Preparing Liquefied Fertilizer | |
Adelere et al. | Valorization of feather by Bacillus safensis and Aquamicrobium defluvii for growth promotion in leafy vegetables | |
CN111548948B (en) | Microbial agent JF for preventing and treating stem rot of corn in saline-alkali soil and preparation method thereof | |
CN115838668B (en) | Preparation method of pig manure composite fermentation microbial inoculum, fermentation microbial inoculum prepared by using same, pig manure bio-organic fertilizer and preparation method and application thereof | |
KR101139794B1 (en) | Biological control of plant diseases by mixed Bacillus subtilis M27 and 5M43 | |
CN107227270B (en) | Biological control microbial inoculum for soil-borne diseases, biological control substrate for soil-borne diseases, and preparation method and use method thereof | |
KR101437489B1 (en) | Organic fertilizer containing valuable microbes as effective ingredient and its preparation method | |
CN101693883B (en) | Microbial agent for degrading phoxim pesticide and preparation method thereof | |
Omokaro et al. | Cultivation of mushroom (Pleurotus ostreatus) and the microorganisms associated with the substrate used. | |
KR101548483B1 (en) | Bacillus subtilis sw002 | |
KR100616408B1 (en) | Turfgrass growth promoter comprising Rhizopus oligosporus and methods of promoting growth of turfgrass by using it | |
CN107557310B (en) | Bacillus pumilus FE05 and application thereof | |
KR101829986B1 (en) | Method for manufacturing fertilizer from crushed skate | |
KR100849407B1 (en) | Method for improving plant growth using the self-circulation system of soil-favorable microorganisms |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
GRNT | Written decision to grant |