KR101548483B1 - Bacillus subtilis sw002 - Google Patents

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KR101548483B1 KR1020150050540A KR20150050540A KR101548483B1 KR 101548483 B1 KR101548483 B1 KR 101548483B1 KR 1020150050540 A KR1020150050540 A KR 1020150050540A KR 20150050540 A KR20150050540 A KR 20150050540A KR 101548483 B1 KR101548483 B1 KR 101548483B1
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Abstract

The present invention relates to a novel strain of Bacillus subtilis, specifically, to a novel strain of Bacillus subtilis having an enzyme activity, acid resistance, bile acid tolerance and an antibacterial activity, and to a microbial agent thereof. The present invention can be used as a fermented agent for an enzyme, a livestock feed additive, production of a fermentation feed, fermentation of excrement, a soil conditioner, a fermented agent for herb medicines, and a water quality improvement agent, etc.

Description

불용성인산 분해효소생성능과 포도상구균에 대한 항균력이 우수한 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002[수탁번호:KACC92034P]{Bacillus subtilis sw002}Bacillus subtilis sw002 (accession number: KACC92034P) {Bacillus subtilis sw002}, which has excellent insecticidal activity against insoluble phosphatase and antibiotic resistance against staphylococci,

본 발명은 신규주 바실러스 서브틸리스에 관한 것으로서, 특히, 효소활성, 내산성, 내담즙산성 및 항균력을 가지는 신균주 바실러스 서브틸리스 및 그 미생물제제에 관한 것이다.
The present invention relates to a novel strain of Bacillus subtilis, and more particularly to a new strain Bacillus subtilis having enzyme activity, acid resistance, bile acid resistance and antimicrobial activity and a microorganism preparation thereof.

오늘날 농업은 화학비료나 농약의 과다사용, 염류의 집적현상 등을 초래하여 농가의 소득저하, 작물의 품질저하 등이 많이 나타나고 있는 실정이다. 화학비료나 농약의 사용을 줄이거나 대체 할 수 있는 생물학적처리가 대두되고 있으며, 특히 토양생태계의 변화나 생물학적 방제의 기술이 미생물에 의해 가능하다는 것이 국내·외 여러 연구자들에 의해 입증되어지고 있다.Today, agriculture causes excessive use of chemical fertilizers and pesticides, accumulation of salts, and so on. Biological treatments that can reduce or replace the use of chemical fertilizers or pesticides are emerging. In particular, it has been proven by domestic and foreign researchers that changes in soil ecosystems and techniques for biological control are possible by microorganisms.

즉, 농업생산성을 지속하기 위해서는 토양의 건전성 확보가 필수적인데, 이는 무엇보다도 농업의 지속성을 위협하는 큰 요인인 화학비료 및 농약의 과다사용과 장기연용에 따른 토양악화에 있다.
In other words, in order to sustain agricultural productivity, it is necessary to secure the soundness of soil. Above all, it is the overuse of chemical fertilizer and pesticide, which is a major factor that threatens the sustainability of agriculture.

특히, 화학비료의 연용은 토양을 산성화시킬 뿐 아니라 토양 내 염류집적에 의해 토양의 물리성을 악화시킴으로서 잠재적인 농업 생산성을 감소시킨다.In particular, the use of chemical fertilizers not only acidifies the soil but also reduces the potential agricultural productivity by aggravating the physical properties of the soil by the accumulation of salts in the soil.

바실러스 속(Bacillus sp.) 균주는 그람양성 간균으로서 토양 내에서 쉽게 분리 될 수 있다. 또한, 여러 가지 분해효소를 이용하여 토양내의 염류집적현상을 해소 할 뿐만 아니라 세포외로 분비되는 여러 가지 항균물질를 이용하여 항진균활성을 가지는 장점이 있어 토양 미생물제제의 개발에 많은 관심의 대상이 되어지고 있다.
The Bacillus sp. Strain is a gram-positive bacterium and can be easily isolated in soil. In addition, the use of various degrading enzymes not only solves the accumulation of salts in the soil but also has the advantage of having antifungal activity by using various antimicrobial substances secreted from the cell, and thus it has become a subject of interest in the development of soil microbial preparations .

그러나 현재, 상기와 같은 효능들만 언급되어 있는 바실러스 속 균주만 알려져 있을 뿐, 토양내 유기물분해를 촉진하면서 식물의 생장과 발달을 위해 매우 중요한 필수 영양원소인 인(phosphorus)을 가용화하는 효과를 나타내는 균주는 알려진 바가 없다. However, only a Bacillus subsp. Strain having only the above-mentioned merits mentioned above is known, and a strain showing the effect of solubilizing phosphorus, which is an essential nutrient element that is very important for the growth and development of plants, Is not known.

즉, 토양 내에 존재하는 대부분의 인은 화학적으로 공고하게 결합된 불용성 복합체나 유기적으로 결합된 파이테이트(phytate)와 같은 상태로 존재하여 식물이 전혀 사용할 수 없는 불용성 인산염으로 존재한다.In other words, most of the phosphorus present in the soil exists as a chemically solidly insoluble complex or an organically bound phytate, and is present as an insoluble phosphate which the plant can not use at all.

따라서 농작물의 생산성을 향상시키기 위하여 과도한 무기인산비료를 농토에 공급하는 시비가 반복되고 있다.
Therefore, in order to improve the productivity of crops, the application of excessive inorganic phosphoric acid fertilizer to agricultural land is repeated.

이러한 인산의 과도한 공급은 일부분만이 농작물에 흡수되고 나머지는 수분과 함께 토양 표층으로 이동하면서 수분은 증발하고 염류만 쌓이게 되어 농작물의 생장이 정상적으로 이루어지지 않는 염류장해 토양이 된다. 염류가 과도하게 집적된 토양은 식물의 영양분 흡수와 생육을 방해함으로써 각종 질병 감염 위험을 높이며, 지표수의 부영양화와 지하수의 오염을 초래하게 된다.
The excess supply of phosphoric acid is absorbed only by the crops and the rest is moved to the surface layer of the soil together with the water, so that the water evaporates and accumulates only the salts, which makes the soil as a soil which does not grow properly. Soils with excessive concentrations of salts increase the risk of infectious diseases by interfering with the nutrient uptake and growth of the plants, causing eutrophication of surface waters and groundwater contamination.

한편, 특허문헌 0001 내지 0006 등에 공지되어 있는 예처럼 미생물을 이용한 프로바이오틱스, 사료첨가제, 환경 개선제, 토양미생물비료는 주로 바실러균, 효모균, 곰팡이균, 유산균, 방선균, 광합성균 등의 유익한 균을 이용하여 가축 사료의 효율을 증진시키거나 면역력을 증진시켜 폐사율을 감소시키고, 악취감소, 퇴비부숙촉진 등의 효과를 얻고 있다. 또한 다양함 종류가 아닌 일부의 효소만 생산하는 단점이 있다.
On the other hand, probiotics, feed additives, environmental remedies, and soil microbial fertilizers using microorganisms such as those known in Patent Documents 0001 to 0006 and the like utilize beneficial bacteria such as Bacillus, Yeast, Fungus, Lactobacillus, To improve the efficiency of livestock feed, to improve immunity, to reduce mortality, to reduce odor, and to promote compost composting. In addition, there are disadvantages of producing only some enzymes, not various kinds.

(0001) 등록특허 제1380738호(0001) Patent No. 1380738 (0002) 등록특허 제1085832호(0002) Patent No. 1085832 (0003) 등록특허 제0380192호(0003) Patent No. 0380192 (0004) 등록특허 제100382호(0004) Patent No. 100382 (0005) 등록특허 제134562호(0005) Patent No. 134562 (0006) 등록특허 제165955호(0006) Patent No. 165955

본 발명은 유기물의 분해력이 우수한 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)를 배양하여 액상, 동결건조 또는 탈지강, 미강, 대두박 등의 곡물부산물에 흡착,건조하여 제조한 배양물을 효소발효제, 가축사료첨가제, 발효사료제조, 분뇨발효, 토양개량제, 한약재발효제, 수질개선제로 사용함으로써 유기물을 신속하게 분해하여 발효시간을 단축하고 토양에 살포하여 토질개선, 수확량증대, 유해균억제하고 가축에 첨가시 소화율향상, 성장촉진, 분변의 악취감소, 파리감소, 면역성 증가로 인한 질병발생감소 등의 효과와 폐수에 첨가시 수질을 개선하고 악취를 개선하는 탁월한 미생물제제를 제공하는 것을 목적으로 한다.
Bacillus subtilis, which has excellent decomposition ability of organic matter, is cultivated and adsorbed on a by-product of grains such as liquid, freeze-dried or degreasing steel, rice bran or soybean meal, dried and the resulting product is treated with an enzyme fermentation agent, It is used as fermented feed preparation, manure fermentation, soil improvement agent, herbal medicines fermentation agent and water quality improvement agent to rapidly decompose organic matter, shorten fermentation time and spread it on soil, improve soil, increase yield, suppress harmful bacteria, It is an object of the present invention to provide an excellent microorganism preparation which improves the quality of water and improves the odor when added to wastewater, such as growth promotion, reduction of odor of feces, reduction of flies, reduction of occurrence of diseases due to increase of immunity, and the like.

상기와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명은,According to an aspect of the present invention,

불용성인산 분해효소생성능과 포도상구균에 대한 항균력이 우수한 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002[수탁번호:KACC92034P]를 제공한다. Bacillus subtilis sw002 (accession number: KACC92034P), which is excellent in the ability to produce insoluble phospholipase and has antibacterial activity against Staphylococcus aureus.

아울러 본 발명은 상기 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002를 유효성분으로 포함하는 효소발효제, 분뇨처리용 미생물제, 가축사료용 미생물제, 작물생육촉진 미생물제, 발효액비제조용 미생물제, 수질개선제 및 어류용 사료첨가제를 제공한다.
In addition, the present invention relates to the aforementioned Bacillus subtilis The present invention also provides an enzyme fermentation agent containing subtilis sw002 as an active ingredient, a microorganism for processing manure, a microorganism for livestock feed, a microorganism for accelerating crop growth, a microorganism for producing fermentation broth, a water quality improving agent and a feed additive for fish.

이하, 본 발명에 대하여 상세히 설명하면 다음과 같다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 단백질, 전분, 섬유소, 인 및 지방 분해효소의 활성이 우수하고, 내담즙산성 및 내산성이 우수하며, 대장균, 살모넬라균, 황색포도상구균 등에 대한 항균성이 높은 특성을 가지는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002[수탁번호:KACC92034P]에 관한 것이다. 본 발명의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002[수탁번호:KACC92034P]는 2015년 01월 29일자로 국립농업과학원 농업유전자원센터에 미생물 수탁번호 KACC92034P로 기탁되었다.
The present invention relates to a bacterium belonging to the genus Bacillus subtilis (Bacillus subtilis) having excellent antibacterial activity against E. coli, Salmonella and Staphylococcus aureus, having excellent activity of protein, starch, fibrin, phosphorus and lipolytic enzymes, Bacillus subtilis ) sw002 [accession number: KACC92034P]. Bacillus subtilis sw002 (accession number: KACC92034P) of the present invention was deposited on January 29, 2015 with the microorganism deposit number KACC92034P at the National Institute of Agricultural Science and Technology.

본 발명의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002[수탁번호:KACC92034P]의 미생물학적 특징은 다음과 같다.Of the present invention, Bacillus subtilis (Bacillus subtilis ) sw002 [Accession number: KACC92034P] is as follows.

1) 균의 형태1) Types of bacteria

LB 한천평판배지에서 37 ℃, 2일간 배양했을 때 균의 형태When cultured in LB agar plate medium at 37 ° C for 2 days,

그람(Gram) 염색 : 양성Gram stain: positive

포자 : 있음Spores: Yes

세포의 형태: 간균Cell morphology: Bacillus

운동성: 양성
Motility: Positive

2) 생리적 성질2) Physiological properties

생장가능온도 : 10 ~ 55℃Growth temperature: 10 ~ 55 ℃

최적 생장온도: 25 ~ 45℃Optimum growth temperature: 25 ~ 45 ℃

생장가능 pH : 3.0 ~ 8.5Growth possible pH: 3.0 ~ 8.5

최적 pH : 5.0 ~ 7.5Optimum pH: 5.0 to 7.5

산소에 대한 영향 : 통성혐기성
Influence on oxygen: Tonic anaerobic

본 발명은 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002[수탁번호:KACC92034P]균을 배양하여 효소발효제, 가축사료첨가제, 발효사료제조, 분뇨발효, 토양개량제, 한약재발효제, 수질개선제로 사용했을 때, 발효시간 단축, 대사생성물 및 균체량 증가, 사료효율증진, 증체량향상, 소화율향상에 따른 분변량 감소, 육질, 육량등급증진, 유질유량증가, 수질개선, 분뇨발효촉진, 발효촉진, 폐사율감소, 악취감소, 작물의 발아율향상 및 생육촉진 효과 등이 있다.The present invention relates to the use of Bacillus subtilis When the fermentation broth was used as an enzyme fermenting agent, a livestock feed additive, a fermented feed preparation, a manure fermentation, a soil improvement agent, an herbicide fermentation agent and a water quality improver, the fermentation time was shortened, metabolism products and cell mass were increased, Improvement of feed efficiency, improvement of weight gain, reduction of fecal matter by improvement of digestibility, improvement of meat quality, improvement of meat quality, improvement of water quality, improvement of water quality, promotion of manure fermentation, promotion of fermentation, reduction of mortality, reduction of odor, have.

또한 본 발명은 유기물 분해력이 우수한 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002[수탁번호:KACC92034P]균을 배양하여 단독으로 사용하거나 효모균, 방선균, 광합성균, 유산균, 곰팡이균 등과 함께 동결건조물로 만들어 혼합하여 사용하거나, 각각 탈지강, 대두박, 미강 등의 곡물가공 부산물에 흡착시켜 사용하는 경우 그 효과를 극대화할 수 있다.
The present invention also relates to a method for producing a lyophilized product, which comprises culturing Bacillus subtilis sw002 (accession number: KACC92034P) having excellent decomposition ability for organic substances and using it alone or in combination with yeast, actinomycetes, photosynthetic bacteria, lactic acid bacteria, Or when they are adsorbed on the byproducts of grain processing such as degreasing steel, soybean meal, rice bran, etc., the effect can be maximized.

도 1은 벼 육묘장에서 실시예 1의 첨가구 및 무첨가가 살포된 육묘들을 촬영한 사진이다.Fig. 1 is a photograph of seedlings of Example 1 and seedlings sprayed with no additive in a nursery. Fig.

이하, 본 발명을 실시예를 들어 상세히 설명하면 다음과 같고, 본 발명의 권리범위는 하기의 실시예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to Examples, but the scope of the present invention is not limited to the following Examples.

[실시예 1][Example 1]

먼저, 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P)균의 배양은 포도당 26g, 당밀 5g, 효모 추출물 10g, 소이펩톤 5g, 천일염 2g을 물 1ℓ에 넣고 pH 6.5로 조절한 후 121℃에서 15분간 멸균하였다. 멸균된 배지를 30℃로 냉각한 후 동일한 배지에서 미리 37℃에서 24시간 배양한 종배양액을 1%정도 접종하고, 발효조에서 37℃, 200rpm, 1vvm으로 배양하였다. 이때 얻어지는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002(KACC92034P)의 균 수는 단위 ml 당 108 c.f.u(colony forming unit)이었다.First, Bacillus subtilis Subtilis sw002 (KACC92034P ) was prepared by adding glucose (26 g), molasses (5 g), yeast extract (10 g), soy peptone (5 g ) and sodium chloride (2 g) in 1 liter of water to pH 6.5 and sterilized at 121 ° C for 15 minutes. The sterilized medium was cooled to 30 DEG C, and the seed culture was inoculated at about 1% in the same medium at 37 DEG C for 24 hours, and cultured in a fermenter at 37 DEG C, 200 rpm, and 1 vvm. The number of Bacillus subtilis sw002 (KACC92034P) obtained at this time was 10 8 cfu (colony forming unit) per ml.

바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 균은 바실러스균(고초균)의 일종으로 탄수화물, 단백질, 지방, 섬유소 등을 분해하는 작용을 할 뿐만 아니라 음식물 및 사료, 토양의 유기물을 신속히 분해하여 소화흡수를 촉진하고 효소 및 아미노산, 비타민, 미네랄, UGF 등의 대사생성물을 생산하여 인간 및 가축의 생체 신진대사를 촉진시키는 역할을 하고, 토양의 질을 개선하는 작용을 한다.Bacillus subtilis subtilis) sw002 (KACC92034P) bacteria promote carbohydrate, protein, fat, food, feed, digestion and absorption rapidly decompose organic matter in the soil, as well as to act to decompose the cellulose, such as a type of Bacillus bacterium (Bacillus subtilis) and an enzyme and Amino acids, vitamins, minerals, and UGF to promote the metabolism of human and livestock, and improve the soil quality.

상기와 같이 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 균을 배양한 후, 동결건조 또는 그 액상배양액을 탈지강, 미강, 대두박, 소맥피, 맥강, 왕겨 등의 곡물 가공 부산물 1 : 액상배양액 0.5 ~ 1 중량비로 혼합하여 45℃ 건조기에서 수분 함량이 10%이하가 될 때까지 건조시켰다.
As described above, Bacillus subtilis subtilis) sw002 (KACC92034P) After culturing the bacteria, freeze-dried or liquid culture medium for degreasing steel, rice bran, soybean meal, wheat blood, maekgang, grain processing by-products such as rice hulls 1 were mixed in a liquid culture medium 0.5 to 1 weight ratio of 45 ℃ And dried until the moisture content in the drier became 10% or less.

[실험예 1] 효소 활성측정[Experimental Example 1] Enzyme activity measurement

실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양물을 10배 희석하여 조효소액을 만들고, 시중에서 판매되고 있는 A사, B사, C사, D사 및 E사 바실러스 서브틸리스 배양물이 함유되어 있는 제품을 각 구입하여 10배 희석하여 조효소액을 만들어 아래와 같이 각 효소별 각각의 기질이 들어있는 배지를 사용하여 기질 분해 정도를 판정함으로써 효소 활성을 측정하였다.Of Example 1 Bacillus subtilis (Bacillus subtilis) sw002 (KACC92034P) creating a crude enzyme solution to the culture was diluted 10 times, and a commercially available A company, B company, C company, D Company and E four Bacillus subtilis products in the culture it contained each in The enzyme activity was measured by determining the extent of substrate degradation using a medium containing each substrate for each enzyme as follows.

선발균주의 단백질분해효소(protease), 전분분해효소(amylase), 섬유소분해효소(Cellulase), 불용성인산 분해효소(ability phosphate solubilizing), 지방분해효소(Lipase)생성유무를 Soluble starch, Skim milk, Carboxyl Methyl Cellulose, Sodium phytate, Tributyrin, Ca3(PO4)2를 각각 첨가한 한천배지에서 생기는 투명환(clear zone)의 형성 정도에 따라 효소의 활성능력을 측정하였다.Soluble starch, skim milk, and carboxylates were tested for the presence of protease, amylase, cellulase, ability phosphate solubilizing, and lipase in selected strains. Activity of enzyme was measured according to the degree of clear zone formation in agar medium supplemented with Methyl Cellulose, Sodium phytate, Tributyrin, and Ca3 (PO4) 2.

효소의 활성측정Enzyme activity measurement 단백질
분해효소
protein
Lytic enzyme
전분
분해효소
Starch
Lytic enzyme
섬유소
분해효소
fibrin
Lytic enzyme
불용성인산
분해효소
Insoluble phosphoric acid
Lytic enzyme
지방
분해효소
Fat
Lytic enzyme
실시예 1
Example 1
++++++ ++++++ ++++++ ++++ ++++
A사
바실러스 서브틸리스
Company A
Bacillus Subtilis
++ ++++ ++ -- --
B사
바실러스 서브틸리스
Company B
Bacillus Subtilis
++ ++ -- -- --
C사
바실러스 서브틸리스
Company C
Bacillus Subtilis
++++ ++++ -- -- --
D사
바실러스 서브틸리스
Company D
Bacillus Subtilis
++ ++ -- ++ ++
E사
바실러스 서브틸리스
Company E
Bacillus Subtilis
++ ++ ++ -- ++

(-: 활성없음, +; 활성 있음, ++: 활성우수, +++: 활성 매우 우수)
(-: no activity, +; active, ++: active superior, +++: very active)

효소의 활성능력 측정결과, 표 1과 같이 A사 내지 E사의 바실러스 서브틸리스 제품은 단백질 및 전분에 대해 활성이 적고, 섬유소, 불용성인산 및 지방에 대해서는 활성이 적거나 없었으나, 이와 달리 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양물은 단백질, 전분 및 섬유소에 대해서는 활성이 매우 우수하게 측정되었고, 또한 불용성인산 및 지방에 대해서도 활성이 우수하게 측정되었다.
As a result of the measurement of the enzyme activity, the activity of the Bacillus subtilis products of the A to E companies was low in the protein and the starch and the activity was little or no in the case of the fibrin, the insoluble phosphoric acid and the fat as shown in Table 1, 1 of Bacillus subtilis subtilis) sw002 (KACC92034P) cultures protein, was measured to have excellent activity for the starch and cellulose, it has also been determined to have excellent activity even for water-insoluble phosphate, and fat.

[실험예 2] 내산성 및 내담즙산성 시험[Experimental Example 2] Acid resistance and bile acid resistance test

실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 균의 내산성 및 내담즙산성을 확인하기 위하여, 내산성시험의 경우 바실러스 서브틸리스의 배양액을 TS Broth 1% 접종하여 37℃에서 24시간 동안 호기적으로 배양한 후, 배양액을 10% HCl을 이용하여 pH 2로 조절하여 2시간 동안 처리하였다. 그 후 초기 생균수 대비 pH 2 처리 후 생균수의 비율로 나타냈다. 그리고, 내담즙산성 시험의 경우 바실러스 서브틸리스 균주에 1.0wt% 담즙(bile)을 첨가한 후 생장여부를 확인하였다. Of Example 1 Bacillus subtilis (Bacillus subtilis) sw002 (KACC92034P) were cultured as for the order to determine the acid resistance and bile acid of the bacteria, in the case of the acid resistance test was inoculated to the culture of Bacillus subtilis TS Broth 1% 24 hours at 37 ℃ aerobic, the culture medium And treated with 10% HCl at pH 2 for 2 hours. And then the ratio of the number of viable cells after the pH 2 treatment to the number of the initial viable cells. In the case of the bile acid test, 1.0 wt% bile (bile) was added to the Bacillus subtilis strain, and the growth was confirmed.

비교군으로서 바실러스 서브틸리스 ATCC 6633, 바실러스 서브틸리스 ATCC 33068, 바실러스 서브틸리스 ATCC 9372 및 바실러스 서브틸리스 KCTC 1331도 동일한 조건으로 처리하여 그 결과를 하기 표 2로 나타내었다.
As a comparative group, Bacillus subtilis ATCC 6633, Bacillus subtilis ATCC 33068, Bacillus subtilis ATCC 9372 and Bacillus subtilis KCTC 1331 were treated under the same conditions, and the results are shown in Table 2 below.

내산성 및 내담즙산성 시험결과Results of acid resistance and bile acid test 균주Strain 내담즙산성My bile acid 내산성(%)Acid resistance (%) 실시예 1Example 1 >1.0%> 1.0% 100100 바실러스 서브틸리스 ATCC 6633Bacillus subtilis ATCC 6633 >1.0%> 1.0% 7575 바실러스 서브틸리스 ATCC 33068Bacillus subtilis ATCC 33068 >1.0%> 1.0% 6060 바실러스 서브틸리스 ATCC 9372Bacillus subtilis ATCC 9372 >1.0%> 1.0% 1515 바실러스 서브틸리스 KCTC 1331Bacillus subtilis KCTC 1331 >1.0%> 1.0% 8585

상기 표 2에서 나타낸 바와 같이, 내담즙산성은 실시예 1 뿐만 아니라 다른 기존의 바실러스 서브틸리스 ATCC 6633 등 모두 1.0wt% 담즙이 첨가되었을 때 생육이 가능한 것으로 확인되었다.As shown in Table 2, it was confirmed that the bile acid tolerance was improved when 1.0 wt% bile was added to all of the conventional Bacillus subtilis ATCC 6633 as well as Example 1.

그러나, 내산성에 대해서는 실시예 1과 바실러스 서브틸리스 KCTC 1331 균주는 pH 2 처리를 한 후에도 생균수에 크게 변화가 없는 것으로 확인되었고, 특히, 실시예 1의 경우 100%로서 내산성이 매우 우수하였다. 그러나, 바실러스 서브틸리스 ATCC 9372는 산성 조건에 취약한 것으로 확인되었다. However, with respect to the acid resistance, it was confirmed that the number of viable cells in Example 1 and the strain of Bacillus subtilis KCTC 1331 did not significantly change even after the pH 2 treatment. In particular, in Example 1, 100% was excellent in acid resistance. However, Bacillus subtilis ATCC 9372 was found to be vulnerable to acidic conditions.

즉, 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 균은 내담즙산성 및 내산성에서 다른 기존의 바실러스 균종에 비하여 매우 우수하였다.
That is, the exemplary Bacillus subtilis (Bacillus of Example 1 subtilis ) sw002 (KACC92034P) was superior to other conventional Bacillus species in bile acid and acid tolerance.

[실험예 3] 유해세균에 대한 항균력 평가[Experimental Example 3] Evaluation of antibacterial activity against harmful bacteria

실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 균의 항균력 측정을 위해 대장균(E. coli), 살모넬라균(Salmonella typhimurium), 황색포도상구균 (Staphylococcus aureus)을 각각 액상배양하였다. 3개의 프라스크에 LB 한천배지를 제조한 후 121℃로 1.5기압에서 15분간 고압멸균한 후 무균상자(Clean bench)에서 40℃까지 식힌 후 각각의 프라스크에 대장균, 살모넬라균, 황색포도상구균 배양액을 100㎕ 주입 후 흔들어 준 뒤 멸균된 Petri dish에 분주하여 대장균, 살모넬라균, 황생포도상구균의 검정균주Pate를 만든다. Of Example 1 Bacillus subtilis (Bacillus subtilis a) sw002 (KACC92034P) for measuring antibacterial activity of the bacteria Escherichia coli (E. coli), Salmonella (Salmonella typhimurium), Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus) were each liquid culture. LB agar medium was prepared in 3 plats and sterilized at 121 ° C for 1.5 minutes under high pressure at 121 ° C. After cooling to 40 ° C in a clean bench, the culture broth of Escherichia coli, Salmonella and Staphylococcus aureus After shaking, 100 μl of the solution is shaken, and the solution is dispensed into a sterilized Petri dish to produce a test strain of Escherichia coli, Salmonella, and Staphylococcus aureus.

실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 균과, 실험예 1에서 구입한 제품들을 100배 희석하여 Paper disc에 100㎕씩 로딩하여 검정균주 Plate에 붙여서 24시간동안 37℃로 Incubator에서 배양하고 형성된 Clear zone 발생여부를 확인하고 측정하였고, 그 결과를 표 3으로 나타냈다.
Of Example 1 Bacillus subtilis (Bacillus subtilis) sw002 (KACC92034P) bacteria and, in Experimental Example 1 was diluted 100-fold the products purchased from the Clear to zone occurrence loads by 100㎕ in Paper disc incorporated with a test strain cultured on Plate Incubator to 37 ℃ for 24 hours and formed And the results are shown in Table 3.

항균력 실험결과Results of antibacterial experiments 대장균
크리어존(mm)
Escherichia coli
Cree Zone (mm)
살모넬라
크리어존(mm)
Salmonella
Cree Zone (mm)
황색포도상구균
크리어존(mm)
Staphylococcus aureus
Cree Zone (mm)
실시예 1Example 1 88 77 88 A사 바실러스 서브틸리스A company Bacillus subtilis 22 44 1One B사 바실러스 서브틸리스B Company Bacillus Subtilis 1One 22 33 C사 바실러스 서브틸리스C Bacillus Subtilis 44 55 33 D사 바실러스 서브틸리스D Bacillus Subtilis 1One 22 44 E사 바실러스 서브틸리스E Bacillus Subtilis 1One 1One 1One

표 3과 같이 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 균은 타사의 바실러스 서브틸리스에 비하여 크러이어존이 7mm 이상으로 넓는 등 항균성이 매우 우수하였다.
Of Example 1 as shown in Table 3 Bacillus subtilis (Bacillus subtilis ) sw002 (KACC92034P) was superior to other Bacillus subtilis strains by having more than 7mm of crorial zone.

[실험예 4] 매실의 분해 및 발효상태 측정[Experimental Example 4] Measurement of decomposition and fermentation state of plum

매실효소의 제조시 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양물을 0.1wt% 첨가하여 제조된 매실효소(첨가구)와, 첨가하지 않은 상태로 제조된 매실효소(무첨가구)를 비교하여 매실의 분해 및 발효상태를 측정하였다.The bacillus subtilis of Example 1 ( Bacillus sp. The decomposition and fermentation state of plum was measured by comparing the mussel enzyme prepared by adding 0.1 wt% of cultured subtilis sw002 (KACC92034P ) and the mussel enzyme prepared without addition.

매실효소를 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 첨가구와 무첨가구로 나누어, 각각 25℃에서 30일간 보관한 후 회수하여 발효상태를 확인하였고, 그 결과는 표 4와 같다.
Of plum enzyme Example 1 Bacillus subtilis (Bacillus subtilis) and sw002 (KACC92034P) is added without additives sphere sphere divided, each at 25 ℃ 30 ilgan storage after recovery was confirmed that the fermentation conditions and the results are shown in Table 4.

매실의 분해 및 발효상태 측정결과Results of decomposition and fermentation of plum
30일 경과30 days past
매실상태Plum condition 원액 색깔Undiluted solution
무첨가구

No additives

매실형태 유지

Keep plum shape

갈색

Brown

첨가구

Shu Furniture

매실형태 유지하고 있지 않음

Does not maintain plum shape

진한 갈색

Dark brown

표 4에서 보는 바와 같이 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002(KACC92034P) 배양물이 0.1wt% 첨가된 첨가구는 무첨가구에 비해 매실의 분해상태가 개선되었고 발효에 의한 매실의 농도가 훨씬 진하게 우러나오는 것을 확인하였다.
As shown in Table 4, the addition of 0.1 wt% of the culture of Bacillus subtilis sw002 (KACC92034P) of Example 1 improved the decomposition of plums and the concentration of plums due to fermentation I confirmed that it was coming out much darker.

[실험예 5] 암모니아가스 억제효과 측정[Experimental Example 5] Ammonia gas inhibiting effect measurement

실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양물을 돈분, 계분에 0.1wt% 첨가한 후, 첨가하지 않은 돈분, 계분과 비교하여 암모니아가스 억제효과를 측정하였다. 각각의 실험군은 35℃에서 10일, 30일, 90일 경과후 검지관을 이용하여 암모니아가스 농도를 측정하였고, 그 결과는 표 5와 같다.
Of Example 1 Bacillus subtilis (Bacillus subtilis) was measured sw002 (KACC92034P) was added to the culture swine, 0.1wt% to manure, pig manure without addition, compared to the manure ammonia gas inhibitory effect. Ammonia gas concentration was measured at 35 ° C, 10 days, 30 days, and 90 days after each experiment group using a detector tube. The results are shown in Table 5.

암모니아가스 억제효과 측정결과Ammonia gas inhibition effect measurement result 구분division 10일 경과10 days past 20일 경과20 days past 30일 경과 30 days past 계분
Stairway
0.1wt% 첨가0.1wt% added 8ppm8 ppm 3ppm3 ppm 0ppm0 ppm
미첨가Not added 32ppm32ppm 55ppm55ppm 47ppm47ppm 돈분
Swine
0.1wt% 첨가0.1wt% added 10ppm10ppm 4ppm4 ppm 0ppm0 ppm
미첨가Not added 55ppm55ppm 79ppm79 ppm 45ppm45ppm

표 5에서 보는 바와 같이 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002(KACC92034P) 배양물이 0.1wt% 첨가되었을 때 돈분 및 계분에서 모두 현저히 암모니아 농도가 줄어든 것을 확인하였다.
As shown in Table 5, when the culture of Bacillus subtilis sw002 (KACC92034P) of Example 1 was added in an amount of 0.1 wt%, it was confirmed that the ammonia concentration was remarkably decreased in both pork and paddy fields.

[실험예 6] 육계의 출하률 등 측정[Experimental Example 6] Measurement of broiler churn rate

육계 12,000마리씩을 각각 2개의 군으로 나누고, 한 군(첨가구)에는 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양물을 사료에 0.1wt% 정도 섞어 투여하고, 다른 한 군(무첨가구)에는 기존의 사료만을 투여한 후 비교하여 출하률,증체량, 사료섭취량, 사료요구율, 암모니아가스 발생량, 파리 발생량, 생육상태 등을 확인하였고, 그 결과는 표 6으로 나타냈다.
The broilers 12,000 rats each divided into two groups, one group (impregnated furniture), the first embodiment of the Bacillus subtilis (Bacillus subtilis) sw002 (KACC92034P) administering about 0.1wt% and mix the culture in the diet, and another group (no addition old), after administration of only a conventional feed compared to shipping rate, body weight gain, feed intake and feed conversion, and ammonia generation amount , The amount of flies produced, and the state of growth. The results are shown in Table 6.

육계의 출하률 등 측정결과Measurement results such as broiler churn rate 구분 division 첨가구Shu Furniture 무첨가구No additives 비고Remarks 투입수(마리) Number of inputs (horses) 12,00012,000 12,00012,000

×: 발생 않함
△: 약간 발생
○: 많이 발생


×: No occurrence
Δ: Slight occurrence
○: many occur
출하수(마리)Number of shipment (horses) 11,569 11,569 11,25811,258 출하률(%) Shipment rate (%) 96.4% 96.4% 93.8% 93.8% 출하일령(일)Date of shipment (Sun) 3232 3434 평균출하체중(Kg)Average shipment weight (Kg) 1.67 1.67 1.661.66 사료요구율(%)Feeding rate (%) 1.651.65 1.721.72 암모니아가스Ammonia gas 4ppm4 ppm 21ppm 21 ppm 파리발생Flies

표 6에서 보는 바와 같이 출하률, 증체량, 사료섭취량, 사료요구율, 암모니아가스 발생량, 파리 발생량, 생육상태 등을 확인한 결과 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양물을 투여한 첨가구가 생산률, 육계의 생육상태 및 그 환경이 매우 우수하였다. 이 결과에 의하여 악취감소 및 파리발생이 눈에 띄게 줄어들어 가축뿐만 아니라 축사환경의 개선으로 생육촉진 및 생산성의 향상이 입증되었다.
Shipping rates as shown in Table 6, body weight gain, feed intake and feed conversion, ammonia gas generation, generation Paris, Bacillus subtilis of exemplary results confirm the growth conditions, such as for example 1 (Bacillus subtilis ) sw002 (KACC92034P) cultivars were excellent in the production rate, broiler growth condition and environment. As a result, odor reduction and flies were remarkably reduced, and it was proved that the improvement of the growth promotion and the productivity were improved by improving the environment of the housing as well as the livestock.

[실험예 7] 육성돈의 증체량 등의 측정[Experimental Example 7] Measurement of weight gain and the like of breeding pigs

육성돈 50두를 각각 2개의 군으로 나누고 한 군(첨가구)에는 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양물을 사료에 0.1wt% 정도 섞어 투여하고, 다른 한 군(무첨가구)에는 기존의 사료만을 투여한 후 비교하여 증체량, 사료섭취량, 사료요구율, 암모니아 및 파리발생 등을 확인하였고, 그 결과를 표 7로 나타냈다.
Grower divides the group into two groups each of two 50 (impregnated furniture) is Example 1 of Bacillus subtilis (Bacillus Compared subtilis) sw002 (KACC92034P) administering about 0.1wt% and mix the culture to the feed and, in the other group (no addition old) after administration of only the conventional feed for weight gain, feed intake and feed conversion, ammonia and the like generated Paris And the results are shown in Table 7.

육성돈의 증체량 등의 측정결과Measurement results such as the weight gain of breeding pigs 구분division 첨가구Shu Furniture 무첨가구 No additives 비고Remarks 공시두수(마리)Disclosure 5050 5050

×: 발생 않함
△: 약간 발생
○: 많이 발생


×: No occurrence
Δ: Slight occurrence
○: many occur
공시평균체중(Kg)Disclosed average weight (Kg) 18.118.1 18.2 18.2 출하평균체중(Kg)Shipment Average Weight (Kg) 115.4115.4 108.6108.6 증체량(Kg/일)Weight gain (kg / day) 1.071.07 0.990.99 사료섭취량(kg/일)Feed intake (kg / day) 2.632.63 2.582.58 사료요구율Feed rate 2.53 2.53 2.68 2.68 암모니아ammonia 4ppm4 ppm 15ppm15 ppm 파리발생Flies

표 7에서 보는 바와 같이 생육상태, 생육환경 등에 있어서 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양물을 투여한 첨가구가 매우 우수함을 확인하였다. 또한 암모니아 농도와 파리발생도 줄어들어 사육환경이 개선되었다.
In embodiments such as the growth conditions, the growth environment, as shown in Table 7 of Example 1 Bacillus subtilis (Bacillus subtilis ) sw002 (KACC92034P) cultures were very good. Ammonia concentration and flies also decreased, improving the breeding environment.

[실험예 8] 비거세우의 증체량 측정[Experimental Example 8] Measurement of weight gain of non-steers

생후 12개월령의 비거세우를 대조구 20두, 시험구 22두로 나누고, 대조구에는 시판 배합사료와 볏짚을 급여하고, 시험구에는 대조구사료에 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양물을 0.1wt% 첨가한 후 증체량을 측정하였고, 그 결과는 표 8로 나타냈다.
Bacillus subsp. ≪ RTI ID = 0.0 > Bacillus < / RTI > ( Bacillus subtilis) in Example 1 was fed to the control diet, subtilis) sw002 (KACC92034P) was measured after addition of the culture 0.1wt% weight gain, and the results are shown in Table 8.

비거세우의 증체량 측정결과The result of the measurement 구 분division 개시체중(kg)Starting weight (kg) 종료체중(kg)Finished weight (kg) 증체량(kg)Weight gain (kg) 대조구Control 353353 675675 322322 시험구Test section 349349 724724 375375

표 8에서 보는 바와 같이 대조구에 비하여 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양물을 첨가한 시험구가 대조구에 비하여 증체량이 크게 향상된 것을 확인할 수 있다.
It conducted compared to the control as shown in Table 8 of Example 1 Bacillus subtilis (Bacillus The results are summarized as follows: (1) The weight gain of the test group supplemented with subtilis sw002 (KACC92034P) culture was significantly improved compared with the control group.

[실험예 9] 젖소의 유량 등의 측정[Experimental Example 9] Measurement of flow rate and the like of a cow

젖소 80두를 대상으로 1개월과 4개월은 기존사료급여, 2개월과 3개월은 기존사료에 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양물을 0.1wt% 급여 후 유량, 유지방, 유단백, 체세포수, 질병발생을 조사하였고, 그 결과를 표 9로 나타냈다.
Intended for cows 80 both one month and four months of Bacillus subtilis (Bacillus of Example 1 to an existing feeding, 2 months and 3 months old Feed subtilis) sw002 (KACC92034P) culture of a 0.1wt% benefit after flow, milk fat, milk protein, can be somatic, we investigated the disease outbreaks, The results are shown in Table 9.

젖소의 유량 등의 측정결과Measurement results such as flow rate of cow 구분division 유량(kg)Flow rate (kg) 유지방(%)butterfat(%) 유단백(%)Milk protein (%) 체세포수(만)Somatic cell count (million) 질병발생우Illness outbreak 대조구Control 29.329.3 3.833.83 3.173.17 2222 00 시험구Test section 31.231.2 3.913.91 3.233.23 1515 00

표 9에서 보는 바와 같이 시험구는 대조구에 비하여 유량, 유지방, 유단백 모두 증가하였고 체세포수와 질병발생이 줄어들어 우유의 등급 및 품질이 향상되었다.
As shown in Table 9, milk, milk fat and milk protein were increased in the test group compared with the control group, and the number of somatic cells and the occurrence of diseases were reduced, and the milk grade and quality were improved.

[실험예 10] 거세한우의 육질등급 및 육량등급의 측정[Experimental Example 10] Measurement of meat quality grade and meat quality of Hanwoo steer

거세한우 비육중기부터 비육후기까지 약 1년간 티엠알사료에 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양물을 0.1wt% 첨가한 첨가구 91두와 무첨가구 91두를 출하성적을 비교하였고, 육질등급 측정결과를 표 10로 나타냈고, 육량등급 측정결과를 표 11으로 나타냈다.
Castration beef feedlot finishing from about one year to the mid late TM Bacillus according to the first embodiment seen in the feed subtilis (Bacillus Subtilis ) sw002 (KACC92034P) Cultures were added with 91 wt% of the culture, 91 of them were added and 91 of them were not added. The results of measurement of meat quality were shown in Table 10, and the results of measurement of meat quality were shown in Table 11 .

거세한우의 육질등급 측정결과Meat quality grade of Hanwoo steers 등급Rating 1++1 ++ 1+1+ 1One 22 33 AA BB CC 첨가구
(%)
Shu Furniture
(%)
34.134.1 30.830.8 23.123.1 12.112.1 -- 58.258.2 33.033.0 8.88.8
무첨가구
(%)
No additives
(%)
16.316.3 33.333.3 34.534.5 14.914.9 1.11.1 26.826.8 44.944.9 28.228.2

거세한우의 육량등급의 측정결과Measurement results of meat grade of Hanwoo steers 도체중량
(kg)
Conductor weight
(kg)
등지방두께
(mm)
Backfill thickness
(mm)
등심단면적
(cm2)
Sirloin cross-sectional area
(cm2)
육량지수Meat index 근내지방도
(No)
Intramuscular fat map
(No)
첨가구Shu Furniture 451451 12.912.9 90.6590.65 64.864.8 6.256.25 무첨가구No additives 425425 16.3416.34 89.989.9 62.1462.14 5.45.4

위 표 10 및 표 11에서 확인되는 바와 같이 첨가구는 비첨가구에 비하여 육질등급과 육량등급이 월등히 개선되었다.
As shown in the above Table 10 and Table 11, the addition level of the addition group was significantly improved compared to the non-addition level.

[실시예 11] 비육우의 소화율 측정[Example 11] Measurement of digestibility of beef cattle

비육우 10마리씩을 각각 2개의 군으로 나누고, 한 군(첨가구)에는 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양물을 사료에 0.1wt% 정도 섞어 투여하고, 다른 한 군(무첨가구)에는 기존의 사료만을 투여한 후 5일 후부터 약 10일간 배설물의 소화율을 측정하기 위하여 분변량을 측정하였고, 그 결과를 표 12으로 나타냈다.
For cattle 10 rats each divided into two groups, one group (impregnated furniture), the first embodiment of the Bacillus subtilis (Bacillus subtilis) sw002 (KACC92034P) administering about 0.1wt% and mix the culture in the diet, and another group (no addition old) is measured bunbyeonryang to measure the digestibility of about 10 days excretion after 5 days of administration of only a conventional feed And the results are shown in Table 12.

비육우의 소화율 측정결과Results of digestibility measurement of cattle 구분division 분변량Fecal matter 무첨가No additives 351.5kg351.5kg 첨가구Shu Furniture 246.1kg246.1 kg

표 12에서 보는 바와 같이 첨가구에서 배설물의 양이 30% 줄어들었으며 이는 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양물에 의한 사료의 소화율이 높아진 결과로 추측된다.
As shown in Table 12 were reduced, the amount of slurry of 30% in the impregnated furniture that of Example 1 Bacillus subtilis (Bacillus It is assumed as a result of the hydrogenation rate subtilis) sw002 (KACC92034P) feed by the culture higher.

[실시예 12] 바실러스 서브틸리스 배양 비교시험[Example 12] Bacillus subtilis culture comparative test

실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양배지와 시중에서 사용되는 A사 내지 E사의 바실러스 서브틸리스를 분리하여 완전용해가 가능한 배지 LB배지와, 시중에서 판매되고 있는 S사 바실러스배양배지를 이용하여 37℃에서 200rpm, 48시간 진탕배양한 후 10,000rpm에서 원심분리하여 상등액은 버리고 잔존한 양의 중량을 측정하여 대사생성물 및 균체의 양을 비교하였다. 그리고 그 결과를 표 13로 나타냈다.
Of Example 1 Bacillus subtilis (Bacillus subtilis) sw002 (KACC92034P) culture medium and separating the company A to E's Bacillus subtilis used in the commercially available full dissolution is possible medium LB medium and, at 37 ℃ using an 'S Bacillus culture media that are available on the market After shaking culture at 200 rpm for 48 hours, the supernatant was discarded by centrifugation at 10,000 rpm, and the amount of the remaining amount was measured to compare the amounts of metabolites and cells. The results are shown in Table 13.

바실러스 서브틸리스 배양 비교시험결과Comparison test results of Bacillus subtilis culture LB배지LB medium S사 바실러스 배양배지S Company Bacillus culture medium 실시예 1Example 1 1.54g1.54 g 2.33g2.33 g A사 바실러스 서브틸리스A company Bacillus subtilis 1.39g1.39 g 1.31g1.31 g B사 바실러스 서브틸리스B Company Bacillus Subtilis 1.59g1.59 g 1.54g1.54 g C사 바실러스 서브틸리스C Bacillus Subtilis 1.42g1.42g 1.45g1.45 g D사 바실러스 서브틸리스D Bacillus Subtilis 1.41g1.41 g 1.28g1.28 g E사 바실러스 서브틸리스E Bacillus Subtilis 1.37g1.37g 1.79g1.79 g

표 13에서 보는 바와 같이 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002(KACC92034P) 배양배지가 다른 바실러스 서브틸리스에 비해 1.5배의 대사생성물 및 균체양이 증가되었다.
As shown in Table 13, the culture medium of Bacillus subtilis sw002 (KACC92034P) of Example 1 showed 1.5 times higher metabolic products and cell masses than the other Bacillus subtilis.

[실시예 13] 육모의 발아율 및 성장률 측정[Example 13] Measurement of germination rate and growth rate of hair growth

실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양물을 1,000배 희석하여 벼 육모장에 살포하여 살포하지 않은 육모와 비교하여 생장력을 비교시험하였고, 그 시험결과는 도 1로 나타냈다.Of Example 1 Bacillus subtilis (Bacillus subtilis ) sw002 (KACC92034P) culture was diluted 1,000 times and sprayed on the rice paddy field, and the growth power was compared with that of the non-sprayed hair growth. The results of the test are shown in Fig.

도 1과 같이 첨가구가 무첨가구에 비해 발아율 및 성장률이 높았다.
As shown in Fig. 1, the germination rate and growth rate were higher than those of the non-additive group.

[실시예 14] 돈분뇨 발효 비교시험[Example 14] Comparison test of fermentation of manure with manure

실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양액을 돈분뇨 400톤의 발효조에 200리터를 투입하여 폭기를 한 후 액비발효효과를 측정하였고, 그 결과를 표 14으로 나타냈다.
Of Example 1 Bacillus subtilis (Bacillus subtilis) after the sw002 (KACC92034P) a culture aeration charged into a 200-liter fermentation tank of money 400 ton manure were measured manure fermentation effects, The results are shown in Table 14.

돈분뇨 발효 비교시험결과Comparison of fermentation effluent from manure 구분division 액비 완성기간Completion period 무첨가구No additives 45일45 days A사 바실러스 서브틸리스 제품
0.05% 첨가
A Company Bacillus Subtilis Products
0.05% added
42일42 days
실시예 1의 바실러스 서브틸리스 배양액
0.05% 첨가
The Bacillus subtilis culture solution of Example 1
0.05% added
36일36 days

표 14에서 보는 바와 같이 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002(KACC92034P) 배양액은 무첨가구 및 A사 A사 바실러스 서브틸리스 제품에 대히하여 액비완성기간이 6~9일 단축되었다.
As shown in Table 14, the cultivation solution of Bacillus subtilis sw002 (KACC92034P) of Example 1 was shortened by 6 to 9 days in terms of the duration of the liquid pot for the non-additive group and the Bacillus subtilis product of the A group.

[실시예 15] 폐수처리 비교시험[Example 15] Waste water treatment comparative test

실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양물을 육계가공공장 폐수처리장에 매일 50ppm 첨가한 후 방류수의 수질을 측정하였고, 그 결과를 표 15로 나타냈다.
Of Example 1 Bacillus subtilis (Bacillus subtilis) sw002 (KACC92034P) after 50ppm added daily to cultures in broiler processing plant waste water treatment of the effluent water was measured, The results are shown in Table 15.

폐수처리 비교시험결과Comparative test results of wastewater treatment 시험항목Test Items 배출허용기준Emission Standards 첨가전 배출수Drain before addition 첨가후 배출수Drain after addition pHpH 5.8∼8.65.8-8.6 6.96.9 7.17.1 COD(mg/L)COD (mg / L) 90 이하90 or less 85.785.7 25.425.4 BOD(mg/L)BOD (mg / L) 80 이하Below 80 60.260.2 12.512.5 SS(mg/L)SS (mg / L) 80 이하Below 80 36.636.6 7.07.0 n-H(광유류)(mg/L)n-H (optical oil) (mg / L) 5 이하5 or less 3.33.3 0.40.4 n-H(동,식물류)(mg/L)n-H (copper, plant) (mg / L) 30 이하30 or less 15.415.4 1.01.0 T-N(mg/L)T-N (mg / L) 60 이하60 or less 43.23843.238 1.7881.788 T-P(mg/L)T-P (mg / L) 8 이하8 or less 7.3517.351 5.4965.496 색도(도)Chromaticity (degrees) 300 이하300 or less 175.5175.5 20.120.1

[실시예 16] 양만장 비교시험[Example 16] Comparative test of two sheets

실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양액을 장어 양식을 하는 지수식 양만장에 20ppm씩 5일간격으로 첨가하여 장어의 활동상태와 수질 상태를 점검하였고, 그 결과를 표 16로 나타냈다.
Of Example 1 Bacillus subtilis (Bacillus Subtilis ) sw002 (KACC92034P) culture medium was added at an interval of 5 days to the exponential growth rate of 20 ppm per day to examine the activity and water quality of the eel. The results are shown in Table 16.

양만장 비교시험결과Comparison of test results 구분division 치어폐사율Chilling mortality 장어 활동성Eel activity 수질상태Water quality 무첨가구No additives 보통usually 보통usually 불량Bad A사 바실러스 서브틸리스 제품
20ppm 첨가
A Company Bacillus Subtilis Products
20ppm addition
절감Reduction 활발함Active 보통usually
실시예 1 바실러스 서브틸리스 배양액
20ppm 첨가
Example 1 Bacillus subtilis culture solution
20ppm addition
많이 절감Much saved 활발함Active 양호Good

표 16에서 확인되는 바와 같이 실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002(KACC92034P) 배양액을 첨가한 경우 무첨가구 등에 비하여 장어의 활동성이 크게 우수하고, 치어폐사율도 낮았다.
As shown in Table 16, when the culture medium of Bacillus subtilis sw002 (KACC92034P) of Example 1 was added, the activity of the eel was significantly superior to that of the non-supplemented group, and the pear mortality was also low.

[실시예 17] 피망 등 엽면시비[Example 17] Foliar fertilization such as bell pepper

실시예 1의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis ) sw002(KACC92034P) 배양물을 500배 희석하여 피망, 오이고추, 딸기, 가지에 각각 엽면시비 및 관주를 하였고, 그 결과, 다음과 같은 현상이 관찰되었다. Of Example 1 Bacillus subtilis (Bacillus subtilis ) sw002 (KACC92034P) cultures were diluted 500 times, and then foliar application and control were applied to bell pepper, cucumber red pepper, strawberry, and branches. As a result, the following phenomenon was observed.

피망은 잎이 넓어지고 옆면의 두께가 두터워 지는 느낌이 있으며, 잎의 색깔이 진초록에 가까워지면서 윤기가 흘렀고, 신선한 색감이 나타나기 시작하였고, 과피가 약간 두꺼웠으며 피망이 약간 길어지고 윤기가 흘렀다.The green pepper has a broad leaf and a thick side face. The leaf has a shiny color as it approaches the initial level, the fresh color begins to appear, the rind is slightly thick, and the green pepper is slightly longer and shiny.

그리고 오이고추는 잎이 넓어지고 두께가 두꺼워지고 잎색깔이 더 진하였고, 곡과와 기형의 발생이 현저히 줄어들었다.And the cucumber pepper has wider leaf, thicker thickness and more leaf color, and the occurrence of gingival and anomalies is remarkably reduced.

딸기의 경우 꽃이 많이 폈고, 당도가 2~3 brix로 향상되었고, 잎과 딸기의 색깔이 진해졌고, 잎이 두꺼워졌으며 뿌리의 활착이 좋아졌다.Strawberries were bloomed, sugar content was improved to 2 ~ 3 brix, the color of leaves and strawberries became thicker, the leaves became thicker, and the rooting of the roots became better.

오이의 경우 꽃이 많이 폈고, 수확량이 증가하였으며, 크기가 좀더 길고 컸다.The cucumbers were large in number of flowers, increased in yield, and longer in size.

Claims (8)

불용성인산 분해효소생성능과 포도상구균에 대한 항균력이 우수한 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002[수탁번호:KACC92034P].
Bacillus subtilis sw002 (Accession number: KACC92034P), which has excellent ability to produce insoluble phosphatase and antibiotic resistance against Staphylococcus aureus.
제1항의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002를 유효성분으로 포함하는 효소발효제.
The method of claim 1, wherein the Bacillus subtilis subtilis ) sw002 as an active ingredient.
제1항의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002를 유효성분으로 포함하는 분뇨처리용 미생물제.
The method of claim 1, wherein the Bacillus subtilis subtilis ) sw002 as an active ingredient.
제1항의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002를 유효성분으로 포함하는 가축사료용 미생물제.
The method of claim 1, wherein the Bacillus subtilis Subtilis ) sw002 as an active ingredient.
제1항의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002를 유효성분으로 포함하는 작물생육촉진 미생물제.
The method of claim 1, wherein the Bacillus subtilis subtilis ) sw002 as an active ingredient.
제1항의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002를 유효성분으로 포함하는 발효액비제조용 미생물제.
The method of claim 1, wherein the Bacillus subtilis subtilis ) sw002 as an active ingredient.
제1항의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002를 유효성분으로 포함하는 수질개선제.
The method of claim 1, wherein the Bacillus subtilis subtilis ) sw002 as an active ingredient.
제1항의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) sw002를 유효성분으로 포함하는 어류용 사료첨가제.The method of claim 1, wherein the Bacillus subtilis subtilis ) sw002 as an active ingredient.
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