KR101825135B1 - 쇠뜨기 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 조성물 - Google Patents

쇠뜨기 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 조성물 Download PDF

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권보라
최영지
김미희
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김광상
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김민지
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Abstract

본 발명은 쇠뜨기 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 조성물에 관한 것으로, 상세하게는 고초균 배양액을 이용하여 발효시킨 쇠뜨기 발효물이 쇠뜨기 추출물에 비해 증진된 피부 보습효과를 나타내므로, 쇠뜨기 발효물을 유효성분으로 함유하는 본 발명의 조성물은 피부 보습용 화장품 또는 피부 보습용 건강기능식품으로 유용하게 사용될 수 있다.

Description

쇠뜨기 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 조성물{Composition for skin moisturizing comprising fermented Equisetum arvense as effective component}
본 발명은 쇠뜨기 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 화장료 또는 피부 보습용 건강기능식품 조성물에 관한 것이다.
피부는 외부를 덮고 있는 기관으로 바깥쪽에서부터 표피, 진피 및 피하지방층의 독특한 세 개의 층으로 구성되어 있다. 표피는 중층편평상피의 각질형성세포가 대부분을 차지하고 있다. 콜라겐 섬유와 탄력 섬유 같은 기질 단백질로 이루어진 진피는 표피 아래에 위치하며, 피하지방층은 지방세포로 구성되어 있다. 상기 구조로 이루어진 피부는 체온 조절과 다양한 외부 자극으로부터 몸을 보호함과 동시에 내측의 수분을 막는 장벽 기능이 있다. 이를 위하여 피부의 표피층은 분화되는 과정을 통하여 수분을 함유하면서 얇은 각질층(stratum corneum)으로 발달하게 된다. 각질층을 구성하고 있는 세포에는 수용성 성분인 고농도의 천연보습인자(Natural Moisturizing Factor, MMF)가 존재하여 피부가 유연성을 나타내도록 작용함은 물론 적절한 수분을 유지할 수 있도록 하여 피부 보습에 중요한 역할을 담당하고 있다.
한편, 바람, 추운 날씨, 햇빛, 자외선 노출 등과 같은 환경의 변화 혹은 세안, 면도, 화장습관, 냉/난방에 의한 생활방식의 변화에 따른 피부 환경 변화와 더불어 사회생활에서 발생하는 각종 스트레스, 연령 증가에 따른 자연적인 피부 노화 등 여러가지 원인으로 인하여 각질층의 수분이 감소하여 피부가 건조해지고 윤기를 잃어 칙칙해 보이는 등의 현상이 발생한다. 이처럼 각질층의 보습 상태는 피부의 외형(피부의 유연성 및 거친 정도)과 직접적으로 연관되어 있으며, 각질층의 피부 수분 함량은 피부의 컨디션 및 투과성과 관련되는 피부 막 항상성에 영향을 미치므로, 화장품 또는 바르는 의약품의 흡습도가 달라질 수 있어 피부 보습이 중요한 요소로 작용하고 있다. 따라서 피부가 보습력 및 탄력을 잃지 않도록 피부의 보습력을 유지해주고, 그 효과를 지속시키는 화장료 조성물 또는 건강기능식품에 대한 요구가 증가하는 추세이다.
한편, 쇠뜨기(Equisetum arvense L.)는 전국의 산과 들에서 자라는 다년생 초본이다. 햇살이 잘 들어오는 곳이나 양지바른 곳에서 자란다. 키는 30~40cm이고, 생식경은 이른 봄에 나와 줄기 끝에 마치 아파트와 같은 모양으로 포자낭수를 형성한다. 영양경은 속이 비어 있고 비스듬히 자라다가 지상에서 곧게 서며 세로로 모가 나있다. 줄기는 약용으로 쓰인다. 필두엽이라고도 한다. 풀밭에서 자라며 땅속줄기가 길게 뻗으면서 번식한다. 이른 봄에 자라는 것은 생식줄기인데, 그 끝에 포자낭수가 달린다. 가지가 없고 마디에 비늘 같은 연한 갈색잎이 돌려난다. 영양줄기는 생식줄기가 스러질 무렵에 자라는데, 곧게 서며 높이 30~40cm로 녹색이고 마디와 능선이 있으며, 마디에 비늘 같은 잎이 돌려나고 가지가 갈라진다. 포자낭수는 타원 모양인데 육각형의 포자엽이 밀착하여 거북의 등처럼 되며, 안쪽에는 각각 7개 내외의 포자낭이 달린다. 쇠뜨기란 소가 뜯는다는 뜻으로, 역시 소가 잘 먹는다. 생식줄기는 식용하며, 영양줄기는 이뇨제로 쓴다. 북반구의 난대 이북에서 한 대까지 널리 분포한다.
한편, 발효는 미생물이 자신이 가지고 있는 효소를 이용해 유기물을 분해시키는 과정이다. 발효공정을 거치게 되면 미생물의 분해 작용을 통해 새로운 유기산 및 각종 분해 산물로 인한 활성 성분의 생성, 풍미 향상, 독성의 감소 등과 같은 많은 장점을 가지고 있어, 발효제품의 인기가 점점 높아지고 있다.
한편, 한국등록특허 제1473940호의 당약, 작약, 쇠뜨기 및 복숭아 복합추출물을 함유하는 탈모예방 및 두피개선용 화장료 조성물에서는 쇠뜨기 추출물의 보습효과가 개시되어 있으나, 본 발명의 쇠뜨기 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 조성물에 관해 개시된 바 없다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 보습효과가 증진된 쇠뜨기 발효물을 생성하는 최적의 조건을 확립하고, 상기 조건으로 제조된 쇠뜨기 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 조성물을 제공하며, 상기 조성물이 추출물에 비해 피부 보습효과가 우수하다는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 쇠뜨기 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 화장료 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 쇠뜨기 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
본 발명은 쇠뜨기 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 쇠뜨기 발효물은 고초균(Bacillus subtilis)을 이용하여 발효기간이 단축되고, 쇠뜨기 추출물에 비해 증진된 피부 보습효과를 나타내므로, 피부 보습을 위한 화장품 또는 건강기능식품의 소재로 사용할 수 있다.
도 1은 발효 2일 차 쇠뜨기 발효물의 농도별 세포독성을 확인한 결과이다. control은 무처리 음성대조군이고, 쇠뜨기 발효 전은 쇠뜨기 열수 추출물이다.
도 2는 쇠뜨기 발효물의 발효기간에 따른 필라그린(a) 및 히알루론산합성효소-3(HAS-3)(b)의 발현을 확인한 결과이다. 음성대조군은 무처리 군이고, 쇠뜨기 발효 전은 쇠뜨기 열수 추출물이다.
도 3은 발효 2일 차 쇠뜨기 발효물의 농도에 따른 필라그린(a) 및 히알루론산합성효소-3(HAS-3)(b)의 발현을 확인한 결과이다. 음성대조군은 무처리 군이고, 쇠뜨기 발효 전은 쇠뜨기 열수 추출물이다.
도 4는 발효 2일 차 쇠뜨기 발효물의 농도에 따른 히알루론산 생성 정도를 확인한 결과이다. 음성대조군은 무처리 군이고, 쇠뜨기 발효 전은 쇠뜨기 열수 추출물이다.
본 발명은 쇠뜨기 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 일 실시예에서 상기 쇠뜨기 발효물은 쇠뜨기 열수 추출물의 발효물인 것이지만, 이에 한정하지 않는다.
상기 발효는 고초균(Bacillus subtilis) 배양액을 접종하여 35~40℃에서 1~3일 동안 발효시키는 것이며, 바람직하게는 고초균 배양액을 접종하여 37℃에서 2일 동안 발효시키는 것이지만, 이에 한정하지 않는다.
상기 고초균 배양액은 영양배지(nutrient broth)에 고초균을 접종하여 35~40℃에서 16~20시간 배양하여 형성하는 것이지만 이에 한정하지 않는다.
본 발명의 일 구현예에서 쇠뜨기 발효물의 제조방법은
1) 물에 쇠뜨기 건조분말을 3~7%(w/v) 첨가하여 열수 추출하는 단계;
2) 상기 단계 1)의 열수 추출물에 고초균(Bacillus subtilis) 배양액을 접종하는 단계;
3) 상기 단계 2)의 고초균 배양액이 접종된 열수 추출물을 35~40℃에서 1~3일 동안 발효시키는 단계;
4) 상기 단계 3)의 발효액을 멸균하는 단계; 및
5) 상기 단계 4)의 멸균된 발효액을 원심분리하여 회수하는 단계;를 포함하는 것이며,
보다 바람직하게는
1) 증류수에 쇠뜨기 건조분말을 5%(w/v) 첨가하여 121℃에서 15분 동안 열수 추출하는 단계;
2) 상기 단계 1)의 열수 추출물에 고초균(Bacillus subtilis) 배양액 1%(v/v)를 접종하는 단계;
3) 상기 단계 2)의 고초균 배양액이 접종된 열수 추출물을 37℃에서 2일 동안 발효시키는 단계;
4) 상기 단계 3)의 발효액을 121℃에서 15분 동안 멸균하는 단계; 및
5) 상기 단계 4)의 멸균된 발효액을 8000rpm에서 20분 동안 원심분리하여 상등액을 회수하는 단계;를 포함하는 것이지만, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 상기 피부 보습용 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있고, 보다 상세하게는, 스킨, 스킨 소프트너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐로션, 영양로션, 마사지크림, 영양크림, 아이 크림, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 클렌징폼, 클렌징 워터, 클렌징 로션, 클렌징 크림, 바디로션, 바디클렌져, 비누 또는 파우더의 화장품 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로 히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 상기 유효성분 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭과 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
또한, 본 발명은 쇠뜨기 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 건강기능식품 조성물에 관한 것이다.
상기 건강기능식품 조성물은 분말, 과립, 환, 정제, 캡슐, 캔디, 시럽 또는 음료의 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 건강기능식품 조성물을 식품첨가물로 사용하는 경우, 상기 건강기능식품 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 양은 그의 사용 목적에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시 본 발명의 건강기능식품 조성물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가된다. 그러나 건강을 목적으로 장기간 섭취하는 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로 사용될 수 있다.
상기 건강기능식품의 종류에 특별한 제한은 없다. 상기 건강기능식품 조성물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
또한, 본 발명의 건강기능식품 조성물은 식품, 특히 기능성 식품으로 제조될 수 있다. 본 발명의 기능성 식품은 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함하며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소 및 조미제를 포함한다. 예컨대, 드링크제로 제조되는 경우에는 유효성분 이외에 천연 탄수화물 또는 향미제를 추가 성분으로서 포함시킬 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 모노사카라이드(예컨대, 글루코오스, 프럭토오스 등), 디사카라이드(예컨대, 말토스, 수크로오스 등), 올리고당, 폴리사카라이드(예컨대, 덱스트린, 시클로덱스트린 등) 또는 당알코올(예컨대, 자일리톨, 소르비톨, 에리쓰리톨 등)인 것이 바람직하다. 상기 향미제는 천연 향미제(예컨대, 타우마틴, 스테비아 추출물 등)와 합성 향미제(예컨대, 사카린, 아스파르탐 등)를 이용할 수 있다.
상기 건강기능식품 조성물 이외에 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 더 함유할 수 있다. 이러한 상기 첨가되는 성분의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 건강기능식품 조성물 100 중량부에 대하여, 0.01 내지 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
이하, 제조예 및 실시예를 이용하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 이들 제조예 및 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들에 의해 제한되지 않는다는 것은 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어 자명한 것이다.
제조예 1. 쇠뜨기 발효물의 제조
쇠뜨기 발효물을 제조하기 위해 쇠뜨기 건조분말을 증류수에 5%(w/v) 첨가하여 121℃에서 15분 동안 열수 추출하였다. 이후 상기 쇠뜨기 열수 추출물에 영양배지에서 18시간 동안 배양한 고초균(Bacillus subtilis JAMI KcA#4) 배양액을 1%(v/v) 접종하여 37℃에서 1, 2, 3, 4 및 5일 동안 각각 발효시킨다. 그 후, 발효기간을 달리하여 발효한 발효액을 121℃에서 15분 동안 멸균하고, 멸균된 발효액을 8000rpm에서 20분 동안 원심분리하여 상등액을 실험의 시료로 사용하였다.
실시예 1. 세포생존율 확인
인간 각질형성세포주(Human keratinocyte cell line)인 HaCaT 세포주를 이용하여 제조예 1의 발효 2일 차 쇠뜨기 발효물을 농도별(0.1%, 0.3%, 0.5%, 1.0%, 2.0%, 및 3.0%)로 처리한 후 MTS[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium] 분석을 실시하여 세포생존율을 측정하였다.
세포를 96-웰 플레이트에 웰당 2.0×104 세포를 분주한 다음, 제조예 1의 발효 2일 차 쇠뜨기 발효물 시료를 농도별로 처리하여 37℃ 및 5% CO2의 조건으로 24시간 동안 배양하였다. 배양한 후 MTS 용액을 첨가하고 4시간 동안 다시 배양한 후 마이크로플레이트 리더(microplate reader)를 이용하여 490nm에서 흡광도를 측정하였으며, 세포 생존율은 하기 식 1을 이용하여 계산하였다.
[식 1]
세포 생존율(%)= 시료 첨가군의 흡광도/대조군의 흡광도×100
그 결과, 도 1에 나타난 바와 같이 쇠뜨기 발효물은 세포생존율에 영향을 미치지 않아 세포 독성이 없는 것으로 확인하였다.
실시예 2. 쇠뜨기 발효 기간별 보습인자의 mRNA 발현변화
쇠뜨기 발효물의 최적의 발효기간을 확인하기 위해 발효 기간을 달리하여 발효시킨 쇠뜨기 발효물을 각질형성세포인 HaCaT 세포주에 처리하여 보습인자(필라그린 및 히알루론산합성효소)의 mRNA 변화를 확인하였다.
HaCaT 세포를 6-웰 플레이트에 웰당 1.0×106 세포로 접종(seeding)하여 24시간 경과 후, 제조예 1의 발효기간을 달리한 시료를 0.5%(v/v) 농도로 처리하여 24시간 동안 5% CO2가 공급되는 37℃의 항온 세포 배양기에서 배양하였다. 배양된 세포는 RNeasy Plus Mini Kit(Qiagen) 시약을 이용하여 총 mRNA를 추출하고, 추출된 총 mRNA를 주형으로 cDNA를 합성하고 PCR 분석을 통해 mRNA 발현량을 확인하였다.
그 결과, 도 2에 나타난 바와 같이 필라그린(filaggrin) 및 히알루론산합성효소-3(hyaluronan synthase-3, HAS-3)의 mRNA 발현은 발효 2일 차 쇠뜨기 발효물을 처리하였을 경우 가장 증가하였으며, 발효 전 쇠뜨기 추출물인 열수 추출물에 비해 보습인자의 발현이 증진되는 효과를 확인하였다. 따라서 이후 실시예에서는 발효 2일 차 쇠뜨기 발효물을 이용하여 실험을 진행하였다.
실시예 3. 쇠뜨기 발효물의 농도별 보습인자의 mRNA 발현변화
발효 2일 차 쇠뜨기 발효물의 최적 농도를 확인하기 위해 발효 2일 차 쇠뜨기 발효물을 농도별(0.1%, 0.3%, 0.5%, 1.0%, 2.0%, 및 3.0%)로 처리하여 보습인자(필라그린 및 히알루론산합성효소)의 mRNA 발현변화를 실시간 PCR(real-time polymerase chain reaction)을 통해 정량분석하였다.
HaCaT 세포를 6-웰 플레이트에 웰당 1.0×106 세포로 접종(seeding)하여 24시간 경과 후, 제조예 1의 발효 2일 차 쇠뜨기 발효물을 농도를 달리하여 처리한 후 24시간 동안 5% CO2가 공급되는 37℃의 항온 세포 배양기에서 배양하였다. 배양된 세포는 RNeasy Plus Mini Kit(Qiagen) 시약을 이용하여 총 mRNA를 추출하고, 추출된 총 mRNA를 주형으로 cDNA를 합성한 후, 실시간 PCR 분석을 통해 mRNA 발현량을 확인하였다.
그 결과, 도 3a에 나타난 바와 같이 필라그린의 발현은 쇠뜨기 발효물을 1.0%(v/v) 이상 처리하였을 경우 쇠뜨기 열수 추출물에 비해 증진되는 것을 확인하였고, 3.0%(v/v) 처리하였을 경우 열수 추출물에 비해 필라그린의 발현이 약 3배 이상 증진되는 효과를 확인하였다.
또한, 도 3b에 나타난 바와 같이 HAS-3의 발현은 0.3%(v/v) 이상 처리하였을 경우 쇠뜨기 열수 추출물에 비해 증가하였고, 3.0%(v/v) 처리하였을 경우 열수 추출물에 비해 HAS-3의 발현이 약 2배 증진되는 효과를 확인하였다.
필라그린과 HAS-3 모두 쇠뜨기 발효물 농도 의존적으로 mRNA의 발현이 증가하였다.
실시예 4. 쇠뜨기 발효물의 농도별 히알루론산의 발현변화
보습 인자인 히알루론산 발현에 가장 효과적인 쇠뜨기 발효물의 농도를 확인하기 위해 발효 2일 차 쇠뜨기 발효물을 농도별(0.1%, 0.3%, 0.5%, 1.0% 및 2.0%)로 처리하여 히알루론산 생성 정도를 ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay) kit를 통해 확인하였다.
HaCaT 세포를 6-웰 플레이트에 웰당 1.0×106 세포로 접종(seeding)하여 24시간 경과 후, 제조예 1의 발효 2일 차 쇠뜨기 발효물을 농도를 달리하여 처리한 후 24시간 동안 5% CO2가 공급되는 37℃의 항온 세포 배양기에서 배양하였다. 세포 배양 후, 히알루론산-ELISA kit(Corgenix Inc., USA)를 이용하여 제조사의 프로토콜에 따라 HaCaT 세포가 분비하는 배양액 내의 히알루론산의 양을 측정하였다.
그 결과, 도 4에 나타난 바와 같이 쇠뜨기 발효물을 처리한 모든 처리군에서 쇠뜨기 열수 추출물에 비해 증가된 히알루론산 발현을 확인하였으며, 히알루론산의 발현은 쇠뜨기 발효물 2.0%(v/v) 처리시 가장 우수하였다.
이를 통해 쇠뜨기 발효물은 쇠뜨기 열수 추출물에 비해 증진된 피부 보습효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.

Claims (7)

1) 물에 쇠뜨기 건조분말을 3~7%(w/v) 첨가하여 열수 추출하는 단계;
2) 상기 단계 1)의 열수 추출물에 고초균(Bacillus subtilis) 배양액을 접종하는 단계;
3) 상기 단계 2)의 고초균 배양액이 접종된 열수 추출물을 35~40℃에서 1~3일 동안 발효시키는 단계;
4) 상기 단계 3)의 발효액을 멸균하는 단계; 및
5) 상기 단계 4)의 멸균된 발효액을 원심분리하여 상등액을 회수하는 단계;를 포함하여 제조되는 쇠뜨기 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 화장료 조성물.
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제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 스킨, 스킨 소프트너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐로션, 영양로션, 마사지크림, 영양크림, 아이 크림, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 클렌징폼, 클렌징 워터, 클렌징 로션, 클렌징 크림, 바디로션, 바디클렌져, 비누 및 파우더로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형으로 제조되는 것을 특징으로 하는 피부 보습용 화장료 조성물.
1) 물에 쇠뜨기 건조분말을 3~7%(w/v) 첨가하여 열수 추출하는 단계;
2) 상기 단계 1)의 열수 추출물에 고초균(Bacillus subtilis) 배양액을 접종하는 단계;
3) 상기 단계 2)의 고초균 배양액이 접종된 열수 추출물을 35~40℃에서 1~3일 동안 발효시키는 단계;
4) 상기 단계 3)의 발효액을 멸균하는 단계; 및
5) 상기 단계 4)의 멸균된 발효액을 원심분리하여 상등액을 회수하는 단계;를 포함하여 제조되는 쇠뜨기 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 건강기능식품 조성물.
제6항에 있어서, 상기 조성물은 분말, 과립, 환, 정제, 캡슐, 캔디, 시럽 및 음료 중에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조되는 것을 특징으로 하는 피부 보습용 건강기능식품 조성물.
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