KR101802515B1

KR101802515B1 - Ａｐ를 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 조성물

Info

Publication number: KR101802515B1
Application number: KR1020160167868A
Authority: KR
Inventors: 손성향
Original assignee: 아주대학교산학협력단
Priority date: 2016-12-09
Filing date: 2016-12-09
Publication date: 2017-11-29

Abstract

본 발명은 뱀독을 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 AP(Agkistrodon piscivorus piscivorus) 또는 NM(Naja melanoleuca)를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물, 의약외품 조성물, 및 상기 조성물을 개체에 투여하는 단계 또는 개체의 피부에 도포하는 단계를 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료 방법에 관한 것이다. 본 발명의 뱀독을 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 조성물은 피부 궤양이 유발된 마우스에서 C-C 케모카인 수용체(C-C chemokine receptor type 1, CCR1)의 발현을 증가시킴으로써 피부 궤양 치료 효능이 뛰어나, 피부 궤양 치료, 특히 베체트병(Behcet's disease) 또는 버거씨병(Buerger's disease)의 치료를 위한 피부 외용제를 비롯한 의약품 등에 적용되어 유용하게 사용될 수 있을 것이다.

Description

ＡＰ를 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 조성물{COMPISITION FOR TREATING OR PREVENTING ANTIINFLAMMATORY DISEASE INCLUDING AGKISTRODON PISCIVOROUS PISCIVOROUS}

베체트병(Behcet's disease)은 희귀난치성 염증성 질환으로 구강 및/또는 생식기의 반복적인 아프타성 궤양, 포도막염(uveitis) 및 피부 병변을 증상으로 한다. 임상 증상은 피부궤양뿐만 아니라 관절, 중추신경계(central nervous system), 위장, 신장, 비뇨생식기, 폐, 심혈관, 장출혈, 장천공 등의 소화기계 관련, 상하대 정맥증후군, 대동맥 역류 등의 증상이 동반된 심각한 만성적 염증이 다면적으로 나타난다. 이러한 증상은 전신성의 혈관염과 관련된 것으로, 베체트병의 중심적인 병리 생리학적 특징이다. 베체트병의 정확한 발병은 불명확하게 남아있으나, 자가면역(autoimmune)과 자가염증성(autoinflammatory) 반응이 중요한 원인이 된다.

베체트병에서 세포의 침입형태는 대식세포(macrophage)와 수지상세포(dendritic cell), CD4+ 및 CD8+ T세포 및 호중구(neutrophil)가 관여한다. 또한 싸이토카인(cytokine) 생산의 증가와도 연관된다.

베체트병 환자에서 싸이토카인 인터루킨-10(IL-10)과 C-C 케모카인 수용체 (C-C chemokine receptor type 1, CCR1) gene variation에 관한 결과는 이미 보고되었다. IL-10과 GM-CSF는 CCR1 activator 기능을 하며, 베체트병 환자의 혈청에서 IL-10 수준이 낮게 발현하고 있다. 따라서 CCR1 activator 인 IL-10을 이용하여 CCR1 발현을 증가시킬 수 있을 것이다. 그러나, IL-10의 치료제로서의 기능을 확인한다 하여도, 제조비용이 비싸고 냉장 보관 등의 보관 관련 비용도 비싼 단점이 있다.

선행특허

1. 대한민국 공개특허 10-2016-0118417

이에 본 발명자들은 종래 베체트병 치료제의 문제점을 해결할 수 있고 베체트병을 포함하는 염증성 질환의 근본적인 치료를 위한 방법을 개발하기 위하여 예의 노력한 결과, 뱀의 독으로서 AP(Agkistrodon piscivorus piscivorus) 또는 NM(Naja melanoleuca)를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 를 완성하기에 이르렀다.

본 발명의 하나의 목적은 뱀독으로서 AP(Agkistrodon piscivorus piscivorus) 또는 NM(Naja melanoleuca)를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 하나의 목적은 AP(Agkistrodon piscivorus piscivorus) 또는 NM(Naja melanoleuca)를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 치료용 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 하나의 목적은 AP(Agkistrodon piscivorus piscivorus) 또는 NM(Naja melanoleuca)를 유효성분으로 포함하는 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 염증성 질환의 치료 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 하나의 목적은 AP(Agkistrodon piscivorus piscivorus) 또는 NM(Naja melanoleuca)를 유효성분으로 포함하는 조성물을 개체의 피부에 도포하는 단계를 포함하는, 염증성 질환의 치료 방법을 제공하는 것이다.

본 발명에 따른 뱀독으로서 AP(Agkistrodon piscivorus piscivorus) 또는 NM(Naja melanoleuca)를 유효성분으로 포함하는 조성물은 피부 궤양이 유발된 마우스에서 C-C 케모카인 수용체(C-C chemokine receptor type 1, CCR1)의 발현을 증가시키는 것으로 확인되었다. 따라서, 피부 궤양 치료 효능이 뛰어나, 피부 궤양 치료, 특히 베체트병(Behcet's disease) 또는 버거씨병(Buerger's disease)의 치료를 위한 피부 외용제를 비롯한 의약품 등에 적용되어 유용하게 사용될 수 있을 것으로 기대된다.

도 1은 본 발명에 따른 AP(Agkistrodon piscivorus piscivorus) 또는 NM(Naja melanoleuca)을 활동성 베체트병 마우스에 투여한 후 5일 이후의 마우스의 피부 궤양의 나타낸다.

본 발명은 뱀독으로서 AP(Agkistrodon piscivorus piscivorus) 또는 NM(Naja melanoleuca)를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 조성물의 약제학적 및 의약외품에서의 용도뿐만 아니라 상기 조성물을 이용한 염증성 질환의 치료 방법을 제공하고자 한다.

본 명세서에서 사용된 용어 “베체트병”은 희귀난치성 염증성 질환으로, 증상이 있는 경우 활동성 베체트병(symptomatic Behcet's Disease)으로, 증상이 없는 경우 비활동성(asymptomatic Behcet's Disease)으로 나뉜다.

제1구현예에 따르면,

본 발명은 뱀독으로서 AP(Agkistrodon piscivorus piscivorus) 또는 NM(Naja melanoleuca)를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명에 따른 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물에 있어서, 상기 AP 또는 NM은 C-C 케모카인 수용체(C-C chemokine receptor type 1, CCR1)의 발현을 증가시킬 수 있다.

본 발명에 따른 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물에 있어서, 상기 염증성 질환은 피부 궤양을 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물에 있어서, 상기 염증성 질환은 베체트병(Behcet's disease) 또는 버거씨병(Buerger's disease)일 수 있다.

본 발명에 따른 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물에 있어서, 상기 염증성 질환은 베체트병 또는 버거씨병으로부터 유발된 피부 궤양을 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 다양한 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 예를 들면, 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽 등의 경구형 제형으로 제형화할 수 있고, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 다만, 본 발명의 조성물은 염증성 질환의 치료라는 목적상 피부 외용제의 형태로 제공되는 것이 가장 바람직할 수 있다. 구체적으로, 액제, 연고제, 크림제, 로션제, 스프레이제, 패취제, 겔제 또는 에어로졸제 등의 피부 외용제의 형태로 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 제형에 따라 약학적으로 허용가능한 담체, 예를 들면 완충제, 보존제, 무통화제, 가용화제, 등장제, 안정화제, 기제, 부형제, 윤활제 등 당업계에 공지된 담체를 추가로 포함하여 제조할 수 있다. 예를 들면, 궤양 부위에 국부적으로 사용되는 피부 외용제인 경우에는 통상적인 첨가제, 예를 들면 보존제, 의약 침투를 보조하는 용매, 연고 및 크림의 경우 연화제 등을 포함할 수 있으며, 에탄올 또는 올레일 알코올과 같은 통상적 담체를 함유할 수 있다.

본 발명에 따른 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 염증성 질환의 치료에 일반적으로 사용되는 화합물, 예를 들면 항생제, 항염증제, 피부치료용 조제, 마취제 및 진통제 등을 추가로 포함할 수 있다. 이는, 각각의 제형에 따라 약간씩 변화될 수 있으며, 바람직하게는 피부 외용제의 형태로 제공되는 경우에 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명에 따른 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여될 수 있다. 상기 용어 "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 건강상태, 궤양의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다.

제2구현예에 따르면,

본 발명은 뱀독으로서 AP(Agkistrodon piscivorus piscivorus) 또는 NM(Naja melanoleuca)를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 치료용 의약외품을 제공하고자 한다.

본 명세서에서 사용된 용어 “의약외품”은 사람이나 동물의 질병을 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 섬유, 고무제품 또는 이와 유사한 것, 인체에 대한 작용이 약하거나 인체에 직접 작용하지 아니하며, 기구 또는 기계가 아닌 것과 이와 유사한 것, 감염형 예방을 위하여 살균, 살충 및 이와 유사한 용도로 사용되는 제제 중 하나에 해당하는 물품으로서, 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것 및 사람이나 동물의 구조와 기능에 약리학적 영향을 줄 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것을 제외한 물품을 의미한다.

본 발명의 조성물을 의약외품 첨가물로 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 또는 의약외품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다.

본 발명의 의약외품 조성물은 이에 제한되지는 않으나, 바람직하게는 소독청결제, 샤워폼, 구강 청정제(가그린), 물티슈, 세제비누, 핸드워시, 가습기 충진제, 마스크, 연고제 또는 필터충진제일 수 있다.

제3현예에 따르면,

본 발명은 뱀독으로서 AP(Agkistrodon piscivorus piscivorus) 또는 NM(Naja melanoleuca)를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 염증성 질환의 예방 또는 치료 방법을 제공하고자 한다. 본 발명의 AP 또는 NM를 유효성분으로 포함하는 조성물에 관해서는 전술한 바와 같으며, 이의 염증성 질환에서의 효능에 대해서도 전술한 바와 같다.

본 명세서에서 사용된 용어 “개체”는 쥐, 가축, 인간 등을 포함하는 포유 동물을 비롯한 모든 동물을 의미한다.

본 발명의 상기 조성물을 개체에 투여함으로써 염증성 질환을 치료하거나 염증성 질환의 치료를 촉진하는 용도로 사용할 수 있으며, 바람직하게 피부 외용제의 형태로 제공되는 경우, 개체의 피부에 도포함으로써 염증성 질환을 치료하는 데에 이용할 수 있다. 또한, 염증성 질환의 치료를 위한 치료 방법뿐만 아니라 염증성 질환과 관련되거나 염증성 질환의 결과로 발생한 다양한 질환의 치료에도 이용 가능하다.

제4구현예에 따르면,

본 발명은 뱀독으로서 AP(Agkistrodon piscivorus piscivorus) 또는 NM(Naja melanoleuca)를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 개체의 피부에 도포하는 단계를 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료 방법을 제공하고자 한다.

본 발명의 AP(Agkistrodon piscivorus piscivorus) 또는 NM(Naja melanoleuca)를 유효성분으로 포함하는 조성물은 약제학적 조성물 등으로 사용할 경우에도 부작용이 발생하지 않을 수 있으므로, 안전하게 의약품 및 의약외품에 포함되어 유용하게 사용될 수 있다.

이하, 본 발명을 하기 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

< 실시예 >

실시예 1. 마우스의 준비

마우스는 ICR strain 4주령을 사용하였다. 정상 마우스에는 피부 도포를 하기 전에 털을 깎은 후에 NM, AP가 포함된 용액을 면봉에 묻혀서 도포하였다. 경구투여의 경우 같은 양을 경구투여 하였다. 베체트병 마우스에는 궤양, 홍반 등의 피부 증상 부위에 NM, AP가 포함된 용액을 면봉에 묻혀서 도포하였다.

실시예 2. 유세포분석법 (Flow cytometry )

마우스의 말초혈액세포를 분리한 후 적혈구를 제거하고, 형광이 표지된 항-CCR1 항체를 세포와 반응시킨 후 유세포분석기로 분석하여 각 마우스에서 CCR1을 발현하는 세포의 빈도를 측정하였다. 마우스의 림프노드에서 세포를 분리한 후 같은 방법으로 항체와 반응시킨 후 분석하였다.

< 실험예 >

실험예 1. 베체트병 마우스에서 CCR1 발현 특성 확인

베체트병 마우스에서 CCR1 발현 특성을 확인하기 위하여, 정상 마우스(대조군), 활동성 베체트병 마우스 및 비활동성 베체트병 마우스 각각에서 PBMC 및 Lymph Node를 분리하고 CCR1의 발현을 유세포분석법에 따라 분석하여, 그 결과를 하기의 표 1에 나타내었다.

[표 1]

상기 표 1에 나타낸 바와 같이, CCR1의 발현은 대조군(PBMC: surface 8.35±1.32%, cytoplasm 65.61±14.15%, 및 Lymph Node: surface 10.15±4.18%, cytoplasm 50.26±11.52%) 및 비활동성 베체트명 바우스(PBMC: surface 11.92±3.09%, cytoplasm 64.34±4.60%, 및 Lymph Node: surface 10.75±2.59%, cytoplasm 72.7±26.88%)와 비교해서 활동성 베체트병 마우스(PBMC: surface 7.92±2.73%, cytoplasm 30.37±19.47%, 및 Lymph Node: surface 8.94±2.43%, cytoplasm 64.90±17.62%)에서 더 낮게 발현되는 것으로 나타났다. 따라서, 베체트병이 발병되지 않은 마우스와 비활동기의 베체트병 발명 마우스와 달리 활동기의 베체트병 마우스의 PBMC 및 Lymph Node에서 CCR1의 발현이 현저하게 낮은 것으로 확인되었다.

실험예 2. 본 발명에 따른 NM이 정상 마우스에서 CCR1 발현 특성에 미치는 영향 확인

본 발명에 따른 뱀독 NM이 정상 마우스에서 CCR1 발현 특성을 확인하기 위하여, 정상 마우스의 피부(국소 투여) 및 구강(구강 투여)에 각각 NM을 처리한 후 PBMC 및 Lymph Node을 분리하고 CCR1의 발현을 유세포분석법에 따라 분석하여, 그 결과를 하기의 표 2에 나타내었다.

[표 2]

상기 표 2에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 NM을 정상 마우스의 피부(PBMC: surface 8.16±2.53%, cytoplasm 70.93±11.36%, 및 Lymph Node: surface 11.86±1.34%, cytoplasm 56.66±8.79%) 및 구강(PBMC: surface 11.73±6.17%, cytoplasm 61.81±12.3%, 및 Lymph Node: surface 10.66±3.46%, cytoplasm 60.5±19.14%)에 투여한 경우, 정상 마우스(PBMC: surface 8.35±1.32%, cytoplasm 65.61±14.15%, 및 Lymph Node: surface 10.15±4.18%, cytoplasm 50.26±11.52%)에서 CCR1의 발현에 비해 다소 증가하는 것으로 확인되었다.

실험예 3. 본 발명에 따른 AP가 정상 마우스에서 CCR1 발현 특성에 미치는 영향 확인

본 발명에 따른 뱀독 AP가 정상 마우스에서 CCR1 발현 특성을 확인하기 위하여, 정상 마우스의 피부(국소 투여) 및 구강(구강 투여)에 각각 AP을 처리한 후 PBMC 및 Lymph Node을 분리하고 CCR1의 발현을 유세포분석법에 따라 분석하여, 그 결과를 하기의 표 3에 나타내었다.

[표 3]

상기 표 3에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 AP를 정상 마우스의 피부(PBMC: surface 8.88±3.71%, cytoplasm 58.23±14.20%, 및 Lymph Node: surface 14.75±3.67%, cytoplasm 50.6±18.50%) 및 구강(PBMC: surface 10.2±3.98%, cytoplasm 49.18±14.27%, 및 Lymph Node: surface 17.51±4.74%, cytoplasm 63.98±15.44%)에 투여한 경우, 정상 마우스(PBMC: surface 8.35±1.43%, cytoplasm 65.61±14.15%, 및 Lymph Node: surface 10.15±4.18%, cytoplasm 50.26±11.52%)에서 CCR1의 발현에 비해 다소 증가하는 것으로 확인되었다.

실험예 4. 본 발명에 따른 AP 및 NM이 활동성 베체트병 마우스에서 CCR1 발현 특성에 미치는 영향 확인

본 발명에 따른 뱀독 AP 및 NM이 활동성 베체트병 마우스에서 CCR1 발현 특성을 확인하기 위하여, 활동성 베체트병 마우스의 피부(국소 투여)에 AP 및 NM을 처리한 후 PBMC 및 Lymph Node을 분리하고 CCR1의 발현을 유세포분석법에 따라 분석하여, 그 결과를 하기의 표 4에 나타내었다. 또한, 활동성 베체트병 마우스에 AP 및 NM을 투여한 후 5일 이후의 마우스의 피부 궤양의 변화를 도 1에 나타내었다.

[표 4]

상기 표 4에 나타낸 바와 같이, 활동성 베체트명 마우스에 AP(PBMC: surface 19.02±7.70%, cytoplasm 58.51±9.35%, 및 Lymph Node: surface 25.5±6.30%, cytoplasm 38.5±18.12%) 및 NM(PBMC: surface 18.88±5.72%, cytoplasm 78.52±8.27%, 및 Lymph Node: surface 22.31±7.19%, cytoplasm 53.01±10.46%)을 각각 투여한 경우 AP 또는 NM을 투여하지 않은 그룹(PBMC: surface 7.92±2.73%, cytoplasm 30.37±19.47%, 및 Lymph Node: surface 8.94±2.43%, cytoplasm 64.9±17.62%)에 비해 CCR1의 발현이 현저히 증가하는 것으로 확인되었다.

이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims

AP(Agkistrodon piscivorus)를 유효성분으로 포함하는 피부 궤양의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물로서,
상기 AP는 C-C 케모카인 수용체(C-C chemokine receptor type 1, CCR1)의 발현을 증가시키고,
상기 피부 궤양은 베체트병(Behcet's disease) 인 것을 특징으로 하는 피부 궤양의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
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삭제
삭제
제 1 항에 있어서,
상기 약제학적 조성물은 액제, 연고제, 크림제, 로션제, 스프레이제, 패취제, 겔제 또는 에어로졸제인 것을 특징으로 하는 것인, 피부궤양의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
제 1 항에 의한 조성물은 피부궤양의 예방 또는 치료용 외약외품.
제 1 항에 따른 약제학적 조성물을 인간을 제외한 포유동물에 투여하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 베체트병의 예방 또는 치료 방법.
제 1 항에 따른 약제학적 조성물을 인간을 제외한 포유동물의 피부에 도포하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 베체트병의 예방 또는 치료 방법.