KR101783550B1 - 가야보리수 추출물을 포함하는 직장암 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents
가야보리수 추출물을 포함하는 직장암 예방 또는 치료용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 가야보리수 잎 또는 열매의 열수 추출물과 에탄올 추출물 또는 이들의 혼합추출물을 유효성분으로 포함하는 직장암 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 상기 가야보리수 잎 또는 열매의 열수 추출물과 에탄올 추출물 또는 이들의 혼합추출물은 직장암 세포의 세포사멸을 효과적으로 유도하였고 암세포의 증식을 억제하였으며 특히, 가야보리수 잎 에탄올 추출물이 가장 뛰어난 항암 효과를 보였다.
Description
본 발명은 가야보리수 잎, 열매 또는 이들의 혼합추출물을 포함하는 직장암 치료용 조성물에 대한 것이다.
국내 합천군 가야면에서 널리 분포하고 있는 핑크팝 보리수(Pinkpop borisu)는 보리수나무과(Elaeagnaceae) 보리수나무속(Elaeagnus)에 속하는 낙엽활엽 관목인 보리수나무(Elaeagnus umbellata Thunb., Autumn olive)이며, 가야보리수라고 불린다. 민간에서는 보리똥나무 또는 뻘똥으로도 알려져 있다.
이는 거제, 고성 등의 지역에서 재배되어 6∼7월 수확되는 뜰보리수(Elaeagnus multiflora Thunb.) 및 7∼8월에 화천, 춘천 등의 지역에서 재배되며 주황색 원형모양의 둥근 열매를 갖는 갈매보리수나무(일명 비타민나무, Hippophae rhamnoides L.)와는 달리 10∼11월에 열매가 포도송이처럼 열려 붉은색으로 익는다. 열매는 길이 1cm의 구형으로 다소 떫은맛과 단맛을 가지며, 잎은 어긋나고 타원형으로 윗부분은 짙은 녹색을 띈다. 보리수나무의 열매, 잎과 뿌리를 중국에서 우내자 또는 호퇴자라고 하며, 이질, 지혈, 지사제로 사용되고 있다. 한편 우리나라에서는 보리수나무의 열매를 한방에서는 목반하(木半夏)라고 하며 효능으로는 설사, 출혈, 소화불량 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있으며, 민간에서는 열매뿐만 아니라 잎, 뿌리 및 가지를 기침, 천식 등의 치료에 많이 사용하고 있다.
현재 합천군 일대에서 무농약 유기농으로 재배되고 있으며, 잎과 열매는 식용으로 허가되었으나 체계적인 연구가 전무한 상태이다.
한편, 직장암은 수십년 동안의 기초 임상 연구에도 불구하고, 인간의 가장 치명적인 비-전염성 질병 중 하나로 남아있다. 최근, 분자 수준에서 직장암이 어떻게 작용하는지에 대한 연구가 많이 이루어지고 있으나, 임상의들은 여전히, 한 세대 전의 종양학자들에게 알려져 있는 수술, 방사선 및 화학요법과 같은 치료 방법에 의존하고 있다.
특히 화학요법의 경우, 암세포의 성장을 효과적으로 억제하기도 하지만, 때로는 정상 세포에 대해서 독성을 나타내기도 한다. 따라서 직장암에 대해 뛰어난 치료 효과를 보이면서도, 정상세포에 대한 독성이 적은 천연물에 대한 연구가 요구되고 있다.
따라서 본 발명은 천연물 유래 추출물을 유효성분으로 포함하는 직장암 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는데 그 목적이 있다.
또한, 본 발명은 천연물 유래 추출물을 유효성분으로 포함하는 직장암 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공하는데 또 다른 목적이 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 가야보리수 잎 또는 열매를 물, C1 내지 C4 알콜 및 이들의 혼합으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 용매로 추출한 가야보리수 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 직장암 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 가야보리수 혼합추출물을 유효성분으로 포함하는 직장암 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 또다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 가야보리수 잎 또는 열매를 물, C1 내지 C4 알콜 및 이의 혼합으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 용매로 추출한 가야보리수 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 직장암 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다.
또한, 본 발명은 가야보리수 혼합추출물을 유효성분으로 포함하는 직장암 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다.
상기 혼합추출물은 가야보리수 잎 추출물 및 열매 추출물을 30 내지 70 부피%로 혼합하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따르면, 가야보리수 잎 또는 열매의 열수 추출물과 에탄올 추출물 또는 이들의 혼합추출물은 직장암 세포의 세포사멸을 효과적으로 유도하였고 암세포의 증식을 억제하였으며 특히, 가야보리수 잎 에탄올 추출물이 가장 뛰어난 항암 효과를 보였다. 따라서 본 발명의 가야보리수 잎 또는 열매의 열수 추출물과 에탄올 추출물 또는 이들의 혼합추출물은 직장암 예방 또는 치료용 조성물로 유용하게 활용될 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 가야보리수 추출물을 직장암 세포에 처리한 후, 세포사멸을 확인한 결과이고,
도 2는 본 발명에 따른 가야보리수 추출물을 직장암 세포에 처리한 후, 증식 억제 효과를 확인한 결과이고,
도 3은 라이코펜(Lycopene) 표준물질을 이용하여 제조한 검량선(Calibration curve)이고,
도 4는 가야보리수 열매 열수 추출물과 가야보리수 열매 에탄올(Ethanol, EtOH) 추출물 내 라이코펜 함량을 측정한 HPLC(high performance liquid chromatography) 결과이다.
도 2는 본 발명에 따른 가야보리수 추출물을 직장암 세포에 처리한 후, 증식 억제 효과를 확인한 결과이고,
도 3은 라이코펜(Lycopene) 표준물질을 이용하여 제조한 검량선(Calibration curve)이고,
도 4는 가야보리수 열매 열수 추출물과 가야보리수 열매 에탄올(Ethanol, EtOH) 추출물 내 라이코펜 함량을 측정한 HPLC(high performance liquid chromatography) 결과이다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명은 가야보리수 잎 또는 열매를 물, C1 내지 C4 알콜 및 이들의 혼합으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 용매로 추출한 가야보리수 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 직장암 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 추출물은 물 또는 에탄올(ethanol, EtOH) 추출물인 것이 바람직하나, 이에 제한되는 것은 아니다.
추출 방법은 상기 용매를 사용하여 냉침, 온침, 가열 등 통상의 추출방법으로 가능하며, 이때, 증류수 추출은 고온에서 열탕추출과정을 거치는 것이 바람직하며 알코올 및 에틸 아세테이트 추출은 상온에서 추출작업을 거치는 것이 바람직하며, 추출액을 진공회전증발기를 이용하여 감압농축하고 동결건조하여 분말상태의 식물 추출물을 제조할 수 있다.
더불어 본 발명은 가야보리수 혼합추출물을 유효성분으로 포함하는 직장암 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 혼합추출물은 가야보리수 잎 추출물 및 열매 추출물이 30 내지 70 부피%로 혼합되며, 보다 바람직하게는 3:7 또는 7:3의 부피비율로 혼합되나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 추출물은 가야보리수 잎 또는 열매를 물, C1 내지 C4 알콜 및 이들의 혼합으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 용매로 추출할 수 있으며, 물 또는 에탄올 추출물인 것이 바람직하나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 약학 조성물은 약학 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함할 수 있다.
본 발명에서 사용가능한 담체, 부형제 또는 희석제로는, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 또는 광물유 등을 들 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 화합물은 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제할 수 있다.
또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물의 유효성분인 가야보리수 추출물의 사용량은 환자의 나이, 성별, 체중, 질환에 따라 달라질 수 있으나, 0.001 내지 100 mg/kg으로, 바람직하게는 0.01 내지 10 mg/kg을 일일 1회 내지 수회 투여할 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 약학 조성물의 투여량은 투여경로, 질병의 정도, 성별, 체중, 나이 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
상기 약학 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 기관지내 흡입, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내(intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.
또한, 본 발명은 가야보리수 잎 또는 열매를 물, C1 내지 C4 알콜 및 이의 혼합으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 용매로 추출한 가야보리수 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 직장암 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다.
상기 추출물은 물 또는 에탄올 추출물인 것이 바람직하나, 이에 제한되는 것은 아니다.
더불어 본 발명은 가야보리수 혼합추출물을 유효성분으로 포함하는 직장암 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다.
상기 혼합추출물은 가야보리수 잎 추출물 및 열매 추출물이 30 내지 70 부피%로 혼합되며, 보다 바람직하게는 3:7 또는 7:3의 부피비율로 혼합되나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 추출물은 가야보리수 잎 또는 열매를 물, C1 내지 C4 알콜 및 이들의 혼합으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 용매로 추출할 수 있으며, 물 또는 에탄올 추출물인 것이 바람직하나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 건강기능식품은 분말, 과립, 정제, 캡슐, 시럽 또는 음료의 형태로 제공될 수 있으며, 상기 건강기능식품은 유효성분인 가야보리수 추출물에 다른 식품 또는 식품 첨가물과 함께 사용되고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 그의 사용 목적 예를 들어 예방, 건강 또는 치료적 처치에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
상기 건강기능식품에 포함된 가야보리수 추출물은 상기 약학 조성물의 유효용량에 준해서 사용할 수 있으나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있으며, 유효성분은 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있음은 확실하다.
상기 건강기능식품의 종류에는 특별한 제한이 없고, 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등을 들 수 있다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 다만 하기의 실시예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 실시예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
<
실시예
1>
가야보리수
추출물 제조
경남 합천 지역에서 얻은 건조 상태의 가야보리수 잎 또는 열매를 분쇄기로 분쇄하고 70% 에탄올(Duksan, Ansan, Korea)로 3회 반복 추출하여 추출하였다. 추출한 시료는 여과지(Advantec, No. 5A, Tokyo, Japan)로 여과한 후 감압농축기를 이용하여 농축하였다.
이를 통해 가야보리수 잎 EtOH; 24.92g, 가야보리수 열매 EtOH; 213.78g, 가야보리수 잎 열수; 9.58g, 가야보리수 열매 열수; 39.02g, 가야보리수 혼합추출물(잎3:열매7 열수); 32.59g, 가야보리수 혼합추출물(잎7:열매3 열수); 26.79g을 각각 수득하였다. 이를 동결건조하여 실험에 사용하였다.
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실시예
2> 세포사멸 유도 효과 확인
직장암 세포주에 상기 실시예 1에서 제조한 가야보리수 추출물을 처리한 후 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) 시약을 이용하여 세포사멸 유도 효과를 확인하였다.
인간 유래 직장암 세포주인 HT29 세포는 한국세포주은행(KCLB, Seoul, Korea)으로부터 분양받았으며, 10% 소태아혈청(fetal bovine serum, FBS, Gibco BRL, Rockville, MD, USA)과 항생제(antibiotics)인 페니실린/스트렙토마이신(penicillin/streptomycin)을 1% 첨가한 RPMI 1640 배지(Welgene, Gyeongsan, Korea)를 이용하여 5% CO2, 37℃ 배양기에서 2 내지 3회 계대 배양한 후 사용하였다.
HT29 세포를 6웰 플레이트에 5×104 cells/well이 되게 분주하여 5% CO2, 37℃ 배양기에서 24시간 동안 예비 배양한 후 각 추출물을 10, 100, 500 또는 1000 μg/ml로 처리하고 24시간 배양하였다. 그 후 각 웰에 인산완충식염수(phosphate buffer saline, PBS)에 녹인 MTT(5 mg/mL) 용액 10 μL를 넣고 배양기에서 4시간 동안 반응시켰다. 배양 종료 후 상등액을 제거하고, 각 웰에 디메틸 설폭사이드(dimethyl sulfoxide, DMSO) 100 μL를 첨가하였다. 생성된 포르마잔 크리스탈(formazan crystal)을 용해시키고 550 nm 파장에서 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay) 리더기(SPECTRA max 340PC, Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)로 흡광도를 측정하였다. 측정한 포르마잔의 생성 정도는 추출물을 처리하지 않은 세포의 값과 비교하여 백분율(%)로 표시하였다.
그 결과 도 1과 같이, 가야보리수 추출물 모두, 농도의존적으로 직장암 세포의 사멸을 유도하였다. 특히 500 μg/mL에서 증식 억제율을 비교하면 가야보리수 잎 열수 추출물에서 33.47±2.81%, 가야보리수 잎 EtOH 추출물에서 66.76±4.69%로 나타나, 가야보리수 잎 열수 추출물에서 강한 활성을 확인할 수 있었다.
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실시예
3> 암세포 증식 억제 효과 확인
직장암 세포주에 상기 실시예 1에서 제조한 가야보리수 추출물을 처리한 후 SRB(sulforhodamine B, Sigma, S-9012) 시약을 이용하여 암세포 증식 억제 효과를 확인하였다.
HT29 세포를 96 웰 플레이트에 5×104 cells/well이 되게 분주하여 5% CO2, 37℃ 배양기에서 24시간 동안 예비 배양한 후 각 추출물을 농도별로 처리하고 24시간 배양하였다. 그 후 상등액을 아스피레이터(aspirator)로 조심스럽게 제거하고, 냉장 보관한 10%(w/v) TCA(trichloroacetic acid)를 각 웰에 100 μL씩 첨가한 후 1시간 동안 4℃에서 냉장 방치하였다. 그 후, TCA를 제거하고 증류수로 5번 세척한 다음 실온에서 건조하였다. 각 웰에 1%(v/v) 아세트산(acetic acid)에 녹인 0.4%(w/v) SRB 용액 100 μL를 첨가하여 30분 동안 염색한 후, 1%(v/v) 아세트산 용액으로 5번 세척한 다음 건조시켰다. 그 후 pH 10.5의 10 mM 트리스 버퍼(Tris buffer) 100 μL로 염색된 SRB를 녹인 후 565 nm 파장에서 ELISA 리더기를 이용하여 흡광도를 측정하고 하기 수학식 1을 통해 암세포 증식 억제 효과를 확인하였다.
[수학식 1]
세포독성(Cytotoxicity)(%)=(1-시료 첨가구의 흡광도/시료 무첨가군의 흡광도)×100
그 결과 도 2와 같이, 가야보리수 잎 EtOH 추출물, 가야보리수 잎 열수 추출물에서 암세포 증식에 대해 농도의존적인 저해효과를 확인하였으며, 33.333 μg/mL농도에서 증식 억제율을 비교하면 가야보리수 잎 열수 추출물은 22.81±2.80%, 보리수 잎 EtOH 추출물은 69.16±4.89%으로 나타나 가야보리수 잎 EtOH 추출물이 강한 암세포 증식 억제 활성을 가지는 것을 확인하였다. 또한 가야보리수 혼합추출물의 경우 잎의 함량에 대비하여 암세포 증식 억제 활성이 나타났다.
<
실시예
4>
가야보리수
열매 추출물의
라이코펜
(
Lycopene
) 정량 분석
상기 실시예 1에서 제조한 가야보리수 열매 열수 추출물 또는 가야보리수 열매 EtOH 추출물의 라이코펜 함유량을 HPLC(high performance liquid chromatography)로 측정하여, 용매에 따른 라이코펜 추출을 확인하였다. 이때 용매는 HPLC grade(Merck Inc. Darmstadt, Germany)을 사용하였다. HPLC 분석 조건은 하기 표 1과 같다.
분석 장비 | Agilent technology 1200 series |
컬럼(Column) | Grace Hillic (250 x 4.6 mm) |
유속(Flow rate) | 1.0 ml/min |
주입 볼륨 (injection volume) |
5μl |
컬럼 온도 (column temperature) |
36℃ |
유동상(mobile phase) | A:증류수에 용해한 0.1% 포름산(Formic acid), B:아세토나이트릴(acetonitrile)에 용해한 0.1% 포름산 |
검출기(Detector) | UV, 254 nm |
등용매(Isocratic) | 20% B |
실행시간(Run time) | 20분 |
더불어 라이코펜 표준물질(Sigma chemical Co. St. Louis, MO, USA)을 메탄올(Methanol, MeOH)에 녹여 저장용액(stock solution)을 제조하였고 이를 농도 범위 100 ppm 내지 1000 ppm으로 희석하고 측정하여 도 3과 같이 검량선을 제조하였다.
더불어 가야보리수 열매 열수 추출물과 가야보리수 열매 EtOH 추출물은 10,000 ppm으로 제조하여 분석에 사용하였다.
도 3의 검량선을 기반으로 각 추출물에 포함된 라이코펜 함량을 측정한 결과는 하기 표 2 및 도 4와 같다.
샘플명 | 면적 | 농도(ppm) | 함유량(μg/mg) |
가야보리수 열매 열수 추출물 |
691 | 354.58 | 35.46 |
가야보리수 열매 EtOH 추출물 |
803 | 412.74 | 41.27 |
상기 표 2 및 도 4와 같이, EtOH를 용매로 사용하여 추출한 경우 열수 추출보다 더 많이 라이코펜을 추출할 수 있는 것을 확인하였다.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
Claims (6)
- 가야보리수 잎의 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는 직장암 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 가야보리수 잎의 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는 직장암 예방 또는 개선용 건강기능식품.
- 삭제
- 삭제
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020160063560A KR101783550B1 (ko) | 2016-05-24 | 2016-05-24 | 가야보리수 추출물을 포함하는 직장암 예방 또는 치료용 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020160063560A KR101783550B1 (ko) | 2016-05-24 | 2016-05-24 | 가야보리수 추출물을 포함하는 직장암 예방 또는 치료용 조성물 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR101783550B1 true KR101783550B1 (ko) | 2017-10-24 |
Family
ID=60299476
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020160063560A KR101783550B1 (ko) | 2016-05-24 | 2016-05-24 | 가야보리수 추출물을 포함하는 직장암 예방 또는 치료용 조성물 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
KR (1) | KR101783550B1 (ko) |
-
2016
- 2016-05-24 KR KR1020160063560A patent/KR101783550B1/ko active IP Right Grant
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
FOOD SCI. BIOTECHNOL.19(6).2010* |
XINLUN GUO et al, ‘Cloning and Expression Analysis of Carotenogenic Genes during Ripening of Autumn Olive Fruit (Elaeagnus umbellata)’, J. Agric. Food Chem., 2009, Vol.57, 5334-5339* |
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