KR101675609B1

KR101675609B1 - １-피라졸로［４,３-ｃ］이소퀴놀린 유도체, 그의 제조법 및 그의 치료 용도

Info

Publication number: KR101675609B1
Application number: KR1020117027900A
Authority: KR
Inventors: 죠르쥐 델레트레; 스테파니에 데프레트; 프랑끄 알레; 로렝 쉬오; 파비엔느 톰송
Original assignee: 사노피
Priority date: 2009-04-24
Filing date: 2010-04-22
Publication date: 2016-11-11
Also published as: KR20120007060A; CN102459260A; CA2791947A1; FR2944792A1; AU2010240742B2; WO2010122272A1; RU2011147658A; MX2011011246A; MY156362A; FR2944792B1; PT2421864E; BRPI1013724A2; AU2010240742A1; UY32575A; TW201041887A; HK1167387A1; SG175338A1; PL2421864T3; TWI468405B; AR076393A1

Abstract

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
<화학식 I>

상기 식에서,
R₁은 1개 이상의 할로겐 원자에 의해 임의로 치환된 페닐 기이고;
R₂는 수소 원자 또는 할로겐 원자 또는 시아노 기; -C(=O)Y 기 (여기서, Y는 수소 원자, 또는 -NH₂ 또는 -OR_a 기임); -C(=S)NH₂ 기; -C(=NH)NH-OH 기; -CH₂OH 또는 -CH₂F 기; -CH=N-OH 기; -CH=CH₂ 또는 -C≡C-R_a 기;

또는

를 나타내고, 여기서 R_a는 수소 또는 (C₁-C₄)알킬 기이고;
R₃은 수소 원자 또는 (C₁-C₄)알킬 기이고;
R₄는 -NH₂, (C₁-C₄)알킬, (C₁-C₄)플루오로알킬 또는 (C₃-C₇)시클로알킬 기이다.

Description

１-피라졸로［４,３-Ｃ］이소퀴놀린 유도체, 그의 제조법 및 그의 치료 용도{1-PYRAZOLO[4,3-C]ISOQUINOLINE DERIVATIVES, PREPARATION THEREOF AND THERAPEUTIC USE THEREOF}

본 발명은 1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 유도체, 및 치료제로서, 특히 항암제로서 그의 적용에 관한 것이다. 본 발명은 또한 이들 본 발명의 화합물의 제조 방법, 및 상기 방법의 일부 반응 중간체에 관한 것이다.

[발명의 설명]

사용된 정의

본 발명의 문맥에서, 특정 용어의 의미는 다음과 같다:

ㆍ 할로겐 원자 (Hal): 불소, 염소, 브롬 또는 요오드 원자;

ㆍ 알킬 기: 1 내지 6개의 탄소 원자 (유리하게는 1 내지 4개의 탄소 원자)를 포함하는, 선형 또는 분지형 포화 지방족 탄화수소 기는 알칸으로부터 수소 원자를 제거함으로써 수득된다. 예로는 기 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸 또는 tert-부틸이 포함된다;

ㆍ 알콕시 기: -O-알킬 기 (여기서, 알킬 기는 상기 정의된 바와 같음);

ㆍ 플루오로알킬 기: 1개 이상의 수소 원자 대신에 1개 이상의 불소 원자를 포함하는 알킬 기;

ㆍ 시클로알킬 기: 3 내지 7개의 탄소 원자 (이들 모두 시클릭 구조체의 일부를 형성함)를 포함하는 시클릭 알킬 기. 예로는 기 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸 또는 시클로헥실이 포함된다;

ㆍ 보호기: 원치않는 화학 반응으로부터 화학적 관능기를 보호하기 위해 의도된 기이며, 이는 보호 단계에서 도입되어, 후속 단계에서 방출된다. 보호기의 예는 문헌 [T.W.Greene et al., "Protective Groups in Organic Synthesis", 3^rd edition, 1999, Wiley-Interscience] 또는 [J.F.W. McOmie "Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, 1973]에서 확인될 것이다. 보호기의 예로는 tert-부틸 카르바메이트 (BOC) 또는 [2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸 (SEM) 기가 포함된다.

제1 측면에서 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물을 제공한다.

<화학식 I>

상기 식에서,

R₁은 1개 이상의 할로겐 원자에 의해 임의로 치환된 페닐 기를 나타낸다. 보다 특히, 이는 2,6-디플루오로페닐 기이다.

R₂는

- 수소 또는 할로겐 원자 또는 시아노 기;

- 기 -C(=O)Y (여기서, Y는 수소 원자 또는 기 -NH₂ 또는 -OR_a를 나타냄);

- 기 -C(=S)NH₂;

- 기 -C(=NH)NH-OH;

- 기 -CH₂OH 또는 -CH₂F;

- 기 -CH=N-OH;

- 기 -CH=CH₂ 또는 -C≡C-R_a;

- 기

(4-피라졸릴) 또는

(3-트리아졸릴)

을 나타내고;

여기서, R_a는 수소 원자 또는 (C₁-C₄)알킬 기를 나타낸다. 보다 특히, R_a는 수소 원자를 나타낸다. R₂는 보다 특히 표 I에 예시된 기 R₂로부터 선택될 수 있다.

R₃은 수소 원자 또는 (C₁-C₄)알킬 기를 나타낸다. 보다 특히, R₃은 수소 원자를 나타낸다.

R₄는 -NH₂, (C₁-C₄)알킬, (C₁-C₄)플루오로알킬 또는 (C₃-C₇)시클로알킬 기를 나타낸다. R₄는 보다 특히 표 I에 예시된 기 R₄로부터 선택될 수 있다.

화학식 I의 화합물 중에 하기 화학식 II의 화합물의 하위군이 특징적이다.

<화학식 II>

상기 식에서, R₂ 및 R₄는 상기 정의된 바와 같다.

본 발명의 화합물에는 보다 특히 표 I의 화합물이 포함된다.

본 발명의 화합물은 염기 형태 또는 산 부가염 형태로 존재할 수 있다. 이들 염은 유리하게는 제약상 허용되는 산에 의해 제조되지만, 예를 들어 화합물의 정제 또는 단리를 위해 사용가능한 다른 산의 염 또한 본 발명의 일부를 형성한다. 상기 화합물은 또한 적절한 경우 1개 이상의 비대칭 탄소 원자를 포함할 수 있다. 이 경우, 이들은 거울상이성질체 또는 부분입체이성질체의 형태로 존재할 수 있다. 이들 거울상이성질체 및 부분입체이성질체 및 또한 이들의 혼합물은 본 발명의 일부를 형성한다.

제2 측면에서, 본 발명은 본 발명의 화합물의 제조 방법, 및 또한 상기 방법과 관련있는 일부 반응 중간체를 제공한다.

화학식 I의 화합물의 제조

화학식 I의 화합물은 반응식 1에 따라 P₁ 및 P₂로부터 출발하여 수많은 단계를 통해 제조된다.

<반응식 1>

단계 (i)은 P₁과 P₂의 뷔흐발트-하르트비히(Buchwald-Hartwig) 커플링에 의해 P₃을 수득하는 것을 포함한다.

PG는 피라졸 고리의 NH 관능기를 위한 보호기를 나타내고, X는 -CN, -CHO, -CH=CH₂, -H, -F, -C≡C-SiMe₃, -COOR_a 또는

기 중 하나를 나타낸다.

이러한 유형의 커플링은 팔라듐 착체 ((0) 또는 (II) 산화 상태, 임의로 동일계 내에서 제조됨)의 존재 하에 수행된다. 예를 들어, Pd(PPh₃)₄, PdCl₂(PPh₃)₂, Pd(OAc)₂ 또는 PdCl₂(dppf), Pd₂(dba)₃, 또는 Pd(OAc)₂ 및 9,9-디메틸-4,5-비스(디페닐포스피노)크산텐의 혼합물을 사용할 수 있다. 가장 흔히 사용되는 착체는 팔라듐(0) 착체이다. 커플링은 염기의 존재 하에 유리하며, 이는 예를 들어 K₂CO₃, NaHCO₃, Et₃N, K₃PO₄, Ba(OH)₂, NaOH, KF, CsF, Cs₂CO₃ 등일 수 있다. 커플링은 극성 용매, 예컨대 1,4-디옥산 중에서 수행될 수 있다. 팔라듐-기재 촉매계의 예는 문헌 [Guram, A.; Rennels, R.; Buchwald, S. ACIEE 1995, 34, 1348]; [Louie, J.; Hartwig, J. Tet. Lett. 1995, 3609]; [Wolfe, J.; Wagaw, S.; Buchwald, S. J. Am. Chem. Soc. 1996, 118, 7215]; [Driver, M.; Hartwig, J. J. Am. Chem. Soc. 1996, 118, 7217]; [Hamann, B.; Hartwig, J. J. Am. Chem. Soc. 1998, 120, 7369]; [Kawatsura, M.; Hartwig, J. J. Am. Chem. Soc. 1999, 121, 1473]에서 확인될 것이다.

치환기 X가 상기 정의된 치환기 R₂ 중 하나를 나타내는 경우, 화학식 I의 화합물은 경로 1의 단계 (ii)에서 보호기 PG의 탈보호 이후에 수득된다. 탈보호 조건은 PG의 성질에 따라 좌우되며, 당업자에게 공지되어 있다 (예를 들어, 문헌 [T.W.Greene et al., "Protective Groups in Organic Synthesis", 3^rd edition, 1999] 참조). 예를 들어, SEM ([β-(트리메틸실릴)에톡시]메틸)의 경우, 탈보호는 산, 예컨대 트리플루오로아세트산 (TFA) 또는 염산의 존재 하에 수행된다.

치환기 X가 치환기 R₂ 중 하나를 나타내지 않는 경우, 당업자에게 공지된 하나 이상의 화학 반응을 이용하여, 치환기 X를 치환기 R₂로 전환시킨다. 경로 2에 따라, 단계 (ii')에서 P₃을 P₃ ^*으로 전환시킨 다음, 단계 (iii')에서 PG를 탈보호시킨 후에 화학식 I의 화합물을 수득한다. 대안적인 경로 3에 따라, 화학식 I의 화합물에 대해 직접적으로 전환이 수행된다.

전환 X ⇒ R₂의 예는 하기에서 확인될 것이다:

ㆍ X = -CN ⇒ R₂= -C(=O)NH₂ (단계 2 - 실시예 4 및 실시예 14) 또는 -C(=O)OH: 예를 들어 수산화나트륨에 의한 니트릴 관능기의 가수분해;

ㆍ X = -CN ⇒ R₂ = -C(=S)NH₂ (실시예 9): 이 반응은 마이크로웨이브에 의해 메탄올 중 암모늄 술피드를 사용하여 수행될 수 있다 (문헌 [Synlett 2004, 14, 2615-2617] 참조);

ㆍ X = -CN ⇒ R₂ = -C(=O)H: 이 환원은 디이소부틸알루미늄 히드라이드의 존재 하에 수행될 수 있다 (단계 1 - 실시예 23);

ㆍ X = -C(=O)H ⇒ R₂ = -CH=N-OH: NH₂OH의 존재 하에 알데히드 관능기의 옥심 관능기로의 전환 (실시예 20);

ㆍ X = -C(=O)H ⇒ R₂ = -CH₂OH (실시예 3): 알데히드 관능기를 환원시키는 작용제에 의해, 예를 들어 NaBH₄에 의해 알데히드 관능기의 환원;

ㆍ X = -C≡C-SiMe₃ ⇒ R₂ = -C≡CH (단계 4 - 실시예 7): 테트라부틸암모늄 플루오라이드의 존재 하에 수행될 수 있는 반응;

ㆍ X = -C(=O)H ⇒ -CH₂OH ⇒ R₂ = -CH₂F (단계 1 - 실시예 17): 불소화는 디에틸아미노황 트리플루오라이드 (DAST)에 의해 수행된다 (문헌 [A.H. Fauq, "N,N-Diethylaminosulfur Trifluoride" in Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, Ed: L. Paquette 2004, J. Wiley & Sons, New York] 참조);

ㆍ X = -C≡C-SiMe₃ ⇒ -C≡CH ⇒ R₂ =

: 1,2,3-트리아졸 고리의 제조를 허용하는, 알킨 관능기와 트리메틸실릴 아지드 N₃SiMe₃ 사이의 휘스겐(Huisgen) 고리부가 반응.

화합물 P ₁ 의 제조

X가 -H, -Hal, -COOH 또는 -CN을 나타내는 화합물 P₁은 반응식 2에 따라 염기성 매질 중에서 P₄를 브롬화시킨 후, 보호기 PG로 보호시킴으로써 수득된다. 브롬화는 예를 들어 극성 용매, 예컨대 DMF 중에서 KOH의 존재 하에 브롬에 의해 수행된다. 염기, 예컨대 디이소프로필에틸아민 (DIPEA)의 존재 하에 SEM-Cl에 의해 도입된 SEM 기, 또는 Cl-SO₂NMe₂에 의해 도입된 SO₂NM_e2 기 (실시예 1 참조)는 사용될 수 있는 보호기의 예이다.

<반응식 2>

X가 -CHO, -CH=CH₂, -C≡C-SiMe₃ 또는

나타내는 화합물 P₁은 X가 -I를 나타내고 A가 수소 원자 (P₅) 또는 PG (P₁)를 나타내는 경우에 대한 상기 화합물 P₅ 또는 P₁로부터 출발하여 하나 이상의 단계로 수득된다 (반응식 3):

<반응식 3>

반응식 3에 상술된 반응은 다음과 같다:

ㆍ X = -CH=CH₂의 경우: -CH=CH-SnBu₃ 및 팔라듐(0) 착체를 사용하는 스틸(Stille) 반응;

ㆍ X = -CHO의 경우: 예를 들어 사산화오스뮴을 사용하는 산화 반응;

ㆍ X = -C≡C-SiMe₃의 경우: HC≡C-SiMe₃ 및 팔라듐(0) 또는 (II) 착체 및 구리 염의 존재 하에서의 소노가시라(Sonogashira) 반응 (이 반응의 더욱 상세한 내용에 대해서는 문헌 [Chem. Rev. 2007, 107(3), 874-922] 참조; 또한 단계 2 - 실시예 7 참조);

ㆍ X =

의 경우: 팔라듐(0) 또는 (II) 착체 및 염기의 존재 하에 4-피라졸보론산과의 스즈끼(Suzuki) 커플링 (상응하는 피나콜 에스테르를 사용하는 것이 가능함).

X가 -COO(C₁-C₄)알킬을 나타내는 화합물 P₁은 X = -COOH인 상응하는 화합물 P₁의 에스테르화에 의해 자체적으로 수득된다.

화합물 P ₄ 의 제조

X가 -H 또는 -Hal을 나타내는 화합물 P₄는, 시판되는 제품이거나 (예를 들어 X=I, CAS 번호 31827-94-8) 또는 산성 매질 중에서 상응하는 아세토페논의 브롬화에 의해 제조되는 P₆ (반응식 4)으로부터 수득된다 (단계 1 - 실시예 1 참조).

<반응식 4>

단계 (i): P₆과 칼륨 프탈이미드의 반응에 의해 P₇이 수득된다. 상기 반응은 극성 용매, 예컨대 DMF 중에서 수행될 수 있다 (단계 2 - 실시예 1 또는 단계 1 - 실시예 6 참조);

단계 (ii): P₇과 N,N-디메틸포름아미드 디에틸 아세탈의 반응에 의해 P₈이 수득된다. 상기 반응은 환류 하에 N,N-디메틸포름아미드 디에틸 아세탈 중에서 직접적으로 수행될 수 있다 (단계 1 - 실시예 3 참조);

단계 (iii): P₈과 히드라진 수화물의 반응에 의해 P₉가 수득된다. 상기 반응은 극성 용매, 예컨대 에탄올 중에서 수행될 수 있다 (단계 4 - 실시예 1 또는 단계 3 - 실시예 6 참조);

단계 (iv): P₉와 산 클로라이드 R₁COCl의 아실화 반응에 의해 P₁₀이 수득된다. 상기 반응은 염소화 용매, 예컨대 DCM 중에서 친핵성 촉매, 예컨대 피리딘의 존재 하에 수행될 수 있다;

단계 (v): P₁₀의 비스클러-나피에랄스키(Bischler-Napieralski) 고리화 반응에 의해 P₄가 수득된다. 상기 반응은 P₂O₅ 및 페닐포스핀 산 디클로라이드의 존재 하에 100℃ 초과의 온도에서 수행될 수 있다 (단계 6 - 실시예 1 또는 단계 5 - 실시예 6 참조). POCl₃를 사용하는 것 또한 가능하다.

X가 -CN을 나타내는 화합물 P₄는 X가 -I를 나타내는 상응하는 보호된 화합물 P₄의 시안화에 의해 수득된다. 예를 들어, Zn(CN)₂ 및 팔라듐(0) 착체가 사용된다 (로센먼드-브라운(Rosenmund-Braun) 반응: 문헌 [Chem. Rev. 1951, 49, 392] 참조).

P ₂ 의 제조

P₂는 반응식 5에 따라 아민 관능기로 보호된 아미노피페리딘으로부터 출발하여 제조될 수 있다 (또한 WO 2003082871 단계 1-4 - 실시예 4, pp. 34-36 참조):

<반응식 5>

PG'는 아민 관능기의 보호기를 나타낸다. 이는 유리하게는 BOC (tert-부톡시카르보닐)이다.

따라서, 본 발명은 또한

(i) 팔라듐 착체 및 임의로 염기의 존재 하에 반응식 1에 정의된 화합물 P₁ 및 P₂를 커플링시키고,

(ii) 이전 단계 (i)에서 수득된 생성물을 탈보호시키는 것을 포함하는, 하기 화학식의 화합물의 제조 방법을 제공한다.

(상기 식에서, R₁, R₃ 및 R₄는 상기 정의한 바와 같고, X는 수소 또는 불소 원자, 기 시아노, -C(=O)H, -CH=CH₂, -C≡C-SiMe₃, -COOR_a (여기서, R_a는 수소 원자 또는 (C₁-C₄)알킬 기를 나타냄), 또는 기

를 나타냄)

본 발명은 추가로 화학식

의 화합물 (상기 식에서, X는 -CN, -CHO, -CH₂OH, -C≡CH 또는 -C≡C-SiMe₃ 기를 나타내고, A는 수소 원자 또는 보호기 PG를 나타냄)로부터,

(i) ㆍ 기 X = -CN을 기 R₂ = -C(=O)NH₂ 또는 -C(=O)OH로 가수분해시키고;

ㆍ 암모늄 술피드의 존재 하에 마이크로웨이브에 의해 기 X = -CN을 기 R₂ = -C(=S)NH₂로 전환시키고;

ㆍ 기 X = -CN을 기 R₂ = -C(=O)H로 환원시키고;

ㆍ NH₂OH의 존재 하에 기 X = -C(=O)H를 기 R₂ = -CH=N-OH로 전환시키고;

ㆍ 기 X = -C(=O)H를 기 R₂ = -CH₂OH로 환원시키고;

ㆍ 기 X = -C≡C-SiMe₃을 기 R₂ = -C≡CH로 전환시키고;

ㆍ 기 X = -CH₂OH를 기 R₂ = -CH₂F로 불소화시키고;

ㆍ 트리메틸실릴 아지드 N₃SiMe₃의 존재 하에 고리부가에 의해 기 X = -C≡CH를 기 R₂ =

로 전환시키고;

(ii) 적절한 경우, 이전 단계 (i)에서 수득된 생성물을 탈보호시키는 것을 포함하는, 하기 화학식 I의 화합물의 제조 방법을 제공한다.

<화학식 I>

(상기 식에서, R₁, R₃ 및 R₄는 상기 정의한 바와 같고, R₂는 -C(=O)NH₂, -C(=S)NH₂, -C(=O)H, -CH=N-OH, -CH₂OH, -CH₂F, -C≡CH 또는

기 중 하나를 나타냄)

화학식 I의 화합물은 또한 반응식 6에 따라 P₁ 및 P'₂로부터 출발하여 제조될 수 있다:

<반응식 6>

단계 (i)은 P₁과 P'₂ 사이의 부흐발트-하르트비히 커플링에 의해 P'₃을 수득하는 것을 포함한다. PG는 피라졸 고리의 NH 관능기를 위한 보호기를 나타내고, PG'는 아민 관능기를 위한 보호기를 나타내고, X는 -CN, -CHO, -CH=CH₂, -H, -F, -C≡C-SiMe₃, -COOR_a 또는

기 중 하나를 나타낸다.

단계 (ii)에서, 아민 관능기를 탈보호시켜 P'₄를 수득한 다음, 이를 단계 (iii)에서 R₄SO₂Cl과 반응시켜 P'₅를 수득한다. 이어서, 피라졸 고리의 NH 관능기를 탈보호시켜 화학식 I의 화합물을 수득한다.

따라서, 본 발명은 또한

(i') 하기 화학식 P'₄의 화합물을 R₄SO₂Cl과 반응시키고

<화학식 P'₄>

(ii') 이전 단계 (i')에서 수득된 생성물을 탈보호시키는 것을 포함하는, 하기 화학식의 화합물의 제조 방법을 제공한다.

를 나타냄)

본 발명은 또한 화학식

(반응식 1) 또는 화학식

(반응식 6)의 화합물을 제공하며, 상기 식에서

ㆍ R₁, R₂, R₃ 및 R₄는 상기 정의한 바와 같고;

ㆍ X는 수소 또는 불소 원자, 기 시아노, -C(=O)H, -CH=CH₂ , -C≡C-SiMe₃, -C≡CH, -COOR_a (여기서, R_a는 수소 원자 또는 (C₁-C₄)알킬 기를 나타냄), 또는 기

를 나타내고;

ㆍ PG는 피라졸 기의 NH 관능기를 위한 보호기를 나타내고;

ㆍ B는 수소 원자 또는 아민 관능기를 위한 보호기 PG'를 나타낸다.

PG는 보다 특히 SEM 또는 SO₂NMe₂를 나타내고, PG'는 BOC를 나타낸다.

제3 측면에서, 본 발명은 상기 정의된 화합물을 제약상 허용되는 부형제와 함께 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 상기 부형제는 제약 형태 및 원하는 투여 방식에 따라 당업자에게 공지된 통상의 부형제로부터 선택된다.

제4 측면에서, 본 발명은 상기 정의된 화합물을 포함하는 의약, 및 또한 의약의 제조에서의 상기 정의된 화합물의 용도를 제공한다. 상기 화합물은 하나 이상의 다른 항암제와 조합되어 투여될 수 있다. 이러한 치료는 동시에, 개별적으로 또는 순차적으로 투여될 수 있다. 상기 치료는 치료될 질환 및 종양에 따라 진료의에 의해 채택될 것이다.

제5 측면에서, 본 발명은 또한 유효량의 본 발명에 따른 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 수화물 또는 용매화물 중 하나를 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 나타낸 병리상태의 치료 방법을 제공한다.

<실시예>

하기 실시예는 본 발명에 따른 일부 화합물의 제조를 설명한다.

LC-MS-DAD-ELSD 분석

칼럼: 아틀란티스(Atlantis) T3; 3.0 x 50 mm; 입도 3 ㎛; 워터스(Waters) 186003721

용리액 유속 = 0.8 ml/분; 오븐 온도: LC=35℃; DAD 파장 200-400 nm 혼합물 A (물/포름산 0.1％) 및 아세토니트릴 B를 이용하여 7분 구배: 0 분 (95％ A; 5％ B); 5 분 (5％ A; 95％ B); 5.5 분 (5％ A; 95％ B); 6.5 분 (95％ A; 5％ B); 7 분 (95％ A; 5％ B).

¹ H NMR 분석

¹H NMR 스펙트럼은 DMSO-d₆에서 브루커 400 MHz 기기에서 수득하였다. 화학적 이동은 ppm으로 주어진다.

표 I의 화합물의 제조

실시예 1 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c] 이소퀴놀린-7-카르복스아미드

단계 1: 1 ℓ 3구형 플라스크를 500 mL의 빙초산 중 50 g의 4-요오도아세토페논으로 충전하였다. 이어서, 실온에서 (RT) 10.4 mL의 브롬을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 (RP) 증발시켰다. 조 생성물을 대략 200 mL의 톨루엔으로 3회, 이어서 200 mL의 메틸렌 클로라이드 (DCM)로 1회 녹인 후, 감압 하에 (RP) 매회 농축시켜, 미량의 모든 아세트산 및 브롬을 제거하였다. 수득된 오렌지색 고체를 실온에서 데시케이터에서 진공 하에 건조시켰다. 이로써 66 g의 2-브로모-1-(4-요오도페닐)에타논을 오렌지색 고체의 형태로 수득하였고, 이를 하기 단계에 그대로 사용하였다.

단계 2: 500 ml 둥근 바닥 플라스크를 140 mL의 DMF 중의 66 g의 2-브로모-1-(4-요오도페닐)에타논 및 38 g의 칼륨 프탈이미드로 충전하였다. 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반하고, 형성된 침전물을 유리 프릿 상에서 여과하고, 50 mL의 이소프로필 에테르로 3회 세척하였다. RP 하에 건조시켜, 80 g의 2-[2-(4-요오도페닐)-2-옥소에틸]이소인돌-1,3-디온을 백색 고체의 형태로 수득하였고, 이를 하기 단계에 그대로 사용하였다.

단계 3: 500 ml 둥근 바닥 플라스크를 134 mL의 N,N-디메틸포름아미드 디에틸 아세탈 중 81.6 g의 2-[2-(4-요오도페닐)-2-옥소에틸]이소인돌-1,3-디온으로 충전하였다. 반응 혼합물을 환류 하에 5 시간 동안 가열한 다음, 빙조에 의해 0℃로 냉각시켰다. 형성된 침전물을 유리 프릿 상에서 흡인에 의해 여과한 다음, 50 mL의 이소프로필 에테르로 2회 세척한 후, 50 mL의 이소프로필 에테르로 2회 정화 세척 (교반하지 않고 케이크를 세척함)하였다. RP 하에 건조시켜, 2-[2-디메틸아미노-1-(4-요오도벤조일)-비닐]이소인돌-1,3-디온의 E 및 Z 이성질체의 혼합물 79 g을 오렌지색-황색 고체의 형태로 수득하였다.

단계 4: 1 ℓ 둥근 바닥 플라스크를 실온에서 535 mL의 에탄올 중 2-[2-디메틸아미노-1-(4-요오도벤조일)비닐]이소인돌-1,3-디온의 E 및 Z 이성질체의 혼합물 78.3 g으로 충전하였다. 갈색 현탁액을 수득하였고, 이를 21 mL의 히드라진 수화물과 혼합하였다. 현탁액을 환류 하에 가열하였다. 30 분 동안 가열한 후, 혼합물이 증점되는 것으로 관찰되었고, 레몬 황색을 나타내었다. 상기 현탁액을 환류 하에 4 시간 30 분 동안 교반한 다음, 혼합물을 실온으로 만들었다. 현탁액을 프릿 상에서 흡입에 의해 여과하고, 침전물을 100 mL의 에탄올로 2회 세척하였다. 이로써 여과물을 수득한 후, 증발시켜, 46 g의 황색 고체 1을 수득하였고, 원래의 침전물 2가 잔류하였으며, 이를 40℃에서 RP 하에 건조시켜, 39 g의 크림색 분말을 수득하였다. 1을 15 분 동안 300 mL의 AcOEt 중에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 이 작업을 매회 150 mL의 AcOEt를 사용하여 13회 반복하였다. 다양한 여과물을 합하고, RP 하에 농축시켰다. 이로써 24.3 g의 금황색 고체가 수득되었다. 2를 300 mL의 AcOEt에 녹였다. 혼합물을 여과하고, 상기 작업을 매회 150 mL의 AcOEt를 사용하여 7 회 반복하였다. 다양한 여과물을 합하고, RP 하에 농축시켰다. 이로써 7.3 g의 레몬 황색 고체를 수득하였다. 두 배치를 합하여, 31.6 g의 3-(4-요오도페닐)-1H-피라졸-4-일아민 (오렌지색 고체)을 수득하였다.

단계 5: 2 ℓ 둥근 바닥 플라스크를 425 mL의 DCM 및 278 mL의 피리딘 중 31.5 g의 3-(4-요오도페닐)-1H-피라졸-4-일아민으로 충전하였다. 혼합물을 빙조에 의해 0℃로 냉각시키고, 13.9 mL의 2,6-디플루오로벤조산의 클로라이드를 첨가하였다. 온도를 3 시간에 걸쳐 실온으로 점차 되돌렸다. RP 하에 용매를 증발시킨 후, 물을 조 반응 생성물에 첨가한 다음, 수성상을 AcOEt로 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시켰다. 이어서, AcOEt를 진공 하에 증발시켜, 2,6-디플루오로-N-[5-(4-요오도페닐)-1H-피라졸-4-일]벤즈아미드 및 N-[1-(2,6-디플루오로-벤조일)-5-(4-요오도페닐)-1H-피라졸-4-일]-2,6-디플루오로벤즈아미드의 혼합물 49.2 g을 오렌지색 발포체의 형태로 수득하였고, 이를 그대로 사용하였다. 조 반응 생성물을 처리하여 목적 생성물을 단독으로 수득하였는데, 3 ℓ 둥근 바닥 플라스크에서 2,6-디플루오로-N-[5-(4-요오도페닐)-1H-피라졸-4-일]벤즈아미드 및 N-[1-(2,6-디플루오로-벤조일)-5-(4-요오도페닐)-1H-피라졸-4-일]-2,6-디플루오로벤즈아미드의 혼합물 49.2 g을 실온에서 아르곤 하에 950 mL의 에탄올 및 470 mL의 THF에 용해시킨 다음, 385 mL의 5N 수산화나트륨 수용액을 첨가하였다. 실온에서 1 시간 동안 교반한 후, 혼합물을 1025 mL의 2N 염산에 부었다. 이를 AcOEt로 추출하고, 유기상을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 다음, RP 하에 농축시켰다. 이로써 조 생성물을 수득하였고, 이를 570 mL의 DCM에 현탁시키고, DCM의 환류 하에 15 분 동안 교반하였다. 빙조에 의해 냉각시킨 후, 침전물을 흡인에 의해 여과하고, 30 mL의 빙냉의 DCM으로 2회 세척하였다. 이로써 25.8 g의 2,6-디플루오로-N-[5-(4-요오도페닐)-1H-피라졸-4-일]벤즈아미드 (크림색 고체)를 수득하였다.

단계 6: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 500 ml 둥근 바닥 플라스크를 9.2 g의 2,6-디플루오로-N-[5-(4-요오도페닐)-1H-피라졸-4-일]벤즈아미드, 168 mL의 페닐포스핀 산 디클로라이드 및 46.3 g의 오산화인으로 충전하였다. 165℃에서 23 시간 후, 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 260 mL의 물 및 400 g의 얼음의 혼합물에 부었다. 온도를 40℃로 상승시켰다. 930 mL의 3M 탄산나트륨 용액에 이어, 110 mL의 28％ 수성 암모니아를 천천히 첨가하여 중화를 수행하였다. 1150 ml (1회) 및 550 mL (2회)의 AcOEt로 추출을 수행하였다. 유기 추출물을 합하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 다음, RP 하에 농축시켰다. 수득된 고체를 220 mL의 DCM 중에서 환류 하에 15 분 동안 교반하고, 빙조를 이용하여 냉각시킨 다음, 여과하고, 28 mL의 빙냉의 DCM으로 2회 세척하였다. 진공 하에 40℃에서 건조시켜, 7.4 g의 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-요오도-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (크림색 고체)을 수득하였다.

단계 7: 1000 ml 둥근 바닥 플라스크를 아르곤 하에 190 mL의 테트라히드로푸란 및 20 mL의 디메틸포름아미드 (DMF) 중 7.4 g의 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-요오도-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린으로 충전하고, 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 1 g의 NaH (액체 페트롤라툼의 현탁액 중 50％)를 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 30 분 동안 교반한 다음, 동일한 온도에서 2.7 mL의 디메틸술파모일 클로라이드와 혼합하였다. 실온에서 1 시간 후, 조 생성물을 포화 NH₄Cl 용액에 부었다. 수성상을 300 mL의 AcOEt로 3회 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 다음, RP 하에 농축시켰다. DCM/메탄올 혼합물 (98/02 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (40-63 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여, 위치적 위치이성질체 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-요오도피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-1-술폰산 디메틸아미드 및 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-요오도피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-2-술폰산 디메틸아미드의 혼합물 9 g을 고체의 형태로 수득하였다.

단계 8: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 응축기를 구비한 500 ml 둥근 바닥 플라스크를 100 mL의 DMF 중 5.4 g의 단계 7에서 수득된 고체로 충전하였다. 반응 혼합물에 아르곤을 10 분 동안 버블링시킨 후, 1.6 g의 시안화아연 및 0.28 g의 Pd(PPh₃)₄를 첨가하고, 혼합물을 교반하면서 130℃에서 1 시간 30 분 동안 가열하였다. 조 반응 생성물을 100 부피의 물에 첨가하고, 수성상을 400 mL의 AcOEt로 3회 추출한 다음, 유기 추출물을 합하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, RP 하에 농축시켰다. 수득한 잔류물을 디이소프로필 옥시드 중에 페이스트화하고, 여과하고, 데시케이터에서 35℃에서 건조시켰다. 이로써 7-시아노-5-(2,6-디플루오로페닐)피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-1-술폰산 디메틸아미드의 위치이성질체의 혼합물 3.3 g (크림색 고체)을 수득하였다.

단계 9: 250 ml 둥근 바닥 플라스크를 160 mL의 DCM 중 7-시아노-5-(2,6-디플루오로페닐)피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-1-술폰산 디메틸아미드의 혼합물 4 g으로 충전하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 108 mL의 TFA를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 6 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 600 mL의 물에 녹이고, 50 mL의 0.75 M 암모니아 용액을 첨가하였다. 수성상을 150 mL의 AcOEt로 3회 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 포화 NaCl 용액으로 세척한 다음, MgSO₄ 상에서 건조시켰다. RP 하에 AcOEt를 농축시켜, 2.6 g의 5-(2,6-디플루오로페닐)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴 (베이지색 고체)을 수득하였다.

단계 10: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 250 ml 둥근 바닥 플라스크를 85 mL의 DMF 중 2.6 g의 5-(2,6-디플루오로페닐)-1H-피라졸로[4,3-c] 이소퀴놀린-7-카르보니트릴, 0.87 mL의 브롬 및 1.5 g의 KOH로 충전하였다. 실온에서 1 시간 동안 교반한 후, 혼합물을 빙수에 부었다. 수성상을 150 mL의 AcOEt로 3회 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, RP 하에 증발시켰다. 이로써 3.3 g의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴 (담황색 고체)을 수득하였고, 이를 하기 단계를 위해 그대로 사용하였다.

단계 11: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 250 ml 둥근 바닥 플라스크를 85 mL의 DMF 중 3.3 g의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1H-피라졸로[4,3-c] 이소퀴놀린-7-카르보니트릴, 10.6 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 및 3.2 mL의 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드로 충전하였다. 실온에서 5 시간 후, 혼합물을 8 부피의 빙수에 부었다. 수성상을 200 mL의 AcOEt로 3회 추출하고, 유기 추출물을 합하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, RP 하에 농축시켰다. DCM 및 메탄올 (99.5/0.5 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (40-63 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여, 한편으로 2.1 g의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴을 백색 고체의 형태로 수득하였다.

다른 한편으로, 1.2 g의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴 (백색 고체)을 수득하였다.

단계 12: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 150 ml 둥근 바닥 플라스크를 27 mL의 1-4-디옥산 중 1 g의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴로 충전하였다. 반응 혼합물을 통해 아르곤을 10 분 동안 버블링시킨 후, 692 mg의 1-메탄술포닐-피페리딘-4-일아민, 4 g의 탄산세슘, 135 mg의 9,9-디메틸-4,5-비스(디페닐포스피노)크산텐 및 43 mg의 팔라듐(II) 아세테이트를 첨가하였다. 반응 혼합물을 환류 하에 4 시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. DCM 및 AcOEt (85/15 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (40-63 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여, 1 g의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴 (황색 고체)을 수득하였다.

단계 13: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 250 ml 둥근 바닥 플라스크를 96 mL의 DCM 중 1 g의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴로 충전하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 10.7 mL의 TFA를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 100 mL의 물에 녹이고, 100 mL의 AcOEt로 3회 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 이로써 992 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴 트리플루오로아세테이트를 수득하였고, 이를 하기 단계에 그대로 사용하였다.

단계 14: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 250 ml 둥근 바닥 플라스크를 992 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴 트리플루오로아세테이트, 63 mL의 에탄올, 30 mL의 THF 및 10 mL의 9.3N 수산화나트륨으로 충전하였다. 환류 하에 3 시간 후, 혼합물을 냉각시키고, 인산이수소칼륨의 1M 수용액 250 mL에 부었다. 혼합물을 AcOEt로 추출하고, 포화 수성 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축에 의해 건조시켰다. 조 고체를 20 mL의 DMF에 용해시킨 다음, 1 g의 벤조트리아졸-1-일옥시트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오라이드 (BOP), 323 mg의 1-히드록시벤조트리아졸 (HOBT), 170 mg의 염화암모늄 및 1 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (DIPEA)을 첨가하였다. 실온에서 2 시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 인산이수소칼륨의 1M 수용액에 이어 포화 수성 NaCl 용액으로 세척하였다. MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시킨 후, DCM, 메탄올 및 4N 메탄올성 암모니아 (90/10/1 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (40-63 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여, 321 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복스아미드 (레몬 황색 고체)를 수득하였다.

실시예 2 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드 옥심

단계 1: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 격막을 구비한 250 ml 둥근 바닥 플라스크를 80 mL의 DMF 중 실시예 1의 단계 6에서 제조된 2.4 g의 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-요오도-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린, 0.80 mL의 브롬 및 1.4 g의 KOH로 충전하였다. 실온에서 1 시간 후, 혼합물을 빙수에 부었다. 유기상을 150 mL의 AcOEt로 3회 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, RP 하에 증발시켰다. 이로써 2.23 g의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-7-요오도-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (크림색 고체)을 수득하였고, 이를 하기 단계를 위해 그대로 사용하였다.

단계 2: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 250 ml 둥근 바닥 플라스크를 11 mL의 DMF 중 2.22 g의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-7-요오도-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린으로 충전하였다. 혼합물을 통해 아르곤을 10 분 동안 버블링시킨 후, 1.47 mL의 트리부틸비닐스탄난 및 481 mg의 비스(트리페닐포스펜)팔라듐(II) 디클로라이드를 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 1 시간 동안 가열한 다음, 냉각시킨 후, 진공 하에 증발에 의해 건조시켰다. 이로써 오일을 수득하였고, 이를 350 mL의 AcOEt 및 300 mL의 20％ 수성 KF 용액에 녹였다. 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반한 다음, 현탁액을 클라셀 플로(Clarcel Flo)의 층을 보유한 유리 프릿 상에서 여과하였다. 유기상을 AcOEt로 추출한 다음, 포화 수성 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, RP 하에 증발에 의해 건조시켰다. 이로써 3.1 g의 조 생성물을 수득하였고, 이를 DCM 및 메탄올 (95/5 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (20-45 ㎛) 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여, 1.44 g의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-7-비닐-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (담황색 고체)을 수득하였다.

단계 3: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 150 ml 둥근 바닥 플라스크를 13 mL의 THF 중 1 g의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-7-비닐-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린으로 충전한 다음, 7 mL의 물, 13 mL의 tert-부탄올, 0.79 mL의 2-메틸-2-프로판올 중 사산화오스뮴의 2.5％ 용액, 및 1.7 g의 과요오드산나트륨을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반한 다음, 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 이로써 1.047 g의 조 생성물을 수득하였고, 이를 DCM 및 메탄올 (95/5 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (20-45 ㎛) 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여, 686 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드 (크림색 고체)를 수득하였다.

단계 4: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 150 ml 둥근 바닥 플라스크를 20 mL의 DMF 중 780 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드, 2.5 mL의 디이소프로필에틸아민 및 0.75 mL의 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드로 충전하였다. 혼합물을 실온에서 24 시간 동안 교반한 다음, 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 이로써 1.18 g의 조 생성물을 수득하였고, 이를 DCM 및 메탄올 (99.5/0.5 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (20-45 ㎛) 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여, 한편으로 545 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1-(2-트리메틸실라닐에톡시메틸)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드를 크림색 고체의 형태로 수득하였고

다른 한편으로 354 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-(2-트리메틸실라닐에톡시메틸)-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드 (크림색 고체)를 수득하였다.

단계 5: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 50 ml 둥근 바닥 플라스크를 12.5 mL의 1,4-디옥산 중 348.4 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-(2-트리메틸실라닐에톡시메틸)-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드로 충전하였다. 아르곤을 10 분 동안 버블링시킨 후, 초기 충전물을 320 mg의 1-메탄술포닐피페리딘-4-일아민, 1.1 g의 탄산세슘, 62 mg의 9,9-디메틸-4,5-비스(디페닐포스피노)크산텐 및 20 mg의 팔라듐(II) 아세테이트와 혼합하였다. 혼합물을 환류 하에 4 시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 이를 DCM 및 AcOEt (85/15 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (20-45 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 217 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드 (황색 고체)를 수득하였다.

단계 6: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 100 ml 둥근 바닥 플라스크를 8.5 mL의 피리딘 중 211 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드로 충전하고, 36 mg의 히드록실아민 히드로클로라이드를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 64 시간 동안 교반하였다. 이를 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 AcOEt에 녹이고, 인산칼륨의 1M 수용액에 이어, 포화 수성 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. DCM 및 AcOEt (75/25 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (20-45 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여, 184 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드 옥심 (황색 고체)을 수득하였다.

단계 7: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 격막을 구비한 50 ml 둥근 바닥 플라스크를 15 mL의 DCM 중 180 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드 옥심으로 충전하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 1.8 mL의 TFA를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 6 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 50 mL의 물 및 2 mL의 0.75M 수성 암모니아 용액에 녹였다. 이를 AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. DCM 및 메탄올 (92.5/7.5 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (20-45 ㎛) 상의 크로마토그래피에 의해, 63 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드 옥심 (레몬 황색 고체)을 수득하였다.

실시예 3 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-일]메탄올

단계 1: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 250 ml 둥근 바닥 플라스크를 1.5 mL의 THF 및 1.5 mL의 메탄올 중 실시예 2의 단계 5에서 제조된 45 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드로 충전하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 5.5 mg의 NaBH₄를 첨가하고, 혼합물을 30 분 동안 교반하였다. 이어서, 1.5 mL의 아세톤을 첨가하고, 혼합물을 포화 수성 중탄산나트륨 용액에 부었다. 이를 AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 이로써 46 mg의 [5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-일]메탄올을 수득하였고, 이를 하기 단계를 위해 그대로 사용하였다.

단계 2: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 30 ml 둥근 바닥 플라스크를 4 mL의 DCM 중 46 mg의 [5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-일]메탄올로 충전하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 0.45 mL의 TFA를 첨가하고, 혼합물을 RT에서 2 시간 동안 교반하였다. 이를 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 25 mL의 물 및 0.75 mL의 0.75M 수성 암모니아 용액에 녹였다. 이를 AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. DCM 및 메탄올 (92.5/7.5 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (20-45 ㎛) 상의 크로마토그래피에 의해, 13 mg의 [5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-일]메탄올 (황색 고체)을 수득하였다.

실시예 4 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(트리플루오로메탄술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복스아미드

단계 1: 실시예 1, 단계 12에서와 같이 절차를 수행하였다. 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 50 ml 둥근 바닥 플라스크를 4 mL의 1,4-디옥산 중 200 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴로 충전하였다. 아르곤을 10 분 동안 버블링시킨 후, 269 mg의 1-트리플루오로메탄술포닐피페리딘-4-일아민 트리플루오로아세테이트, 543 mg의 탄산세슘, 22 mg의 9,9-디메틸-4,5-비스(디페닐포스피노)크산텐 및 8.7 mg의 팔라듐(II) 아세테이트를 첨가하였다. 혼합물을 2 시간 동안 환류 하에 가열하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 이를 AcOEt 및 헵탄 (40/60 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 272 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(트리플루오로메탄술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴 (연황색 고체)을 수득하였다.

1,1-디메틸에틸 (1-트리플루오로메탄술포닐피페리딘-4-일)카르바메이트의 합성

자석 교반기를 구비한 150 ml 둥근 바닥 플라스크를 아르곤 하에 35 mL의 DCM 중 2 g의 4-N-boc-아미노피페리딘, 82 mg의 4-디메틸아미노피리딘 (DMAP) 및 1.86 mL의 트리에틸아민으로 충전하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 1.6 mL의 트리플루오로메탄술포닐 클로라이드를 적가하였다. 혼합물을 0℃에서 30 분 동안 교반한 다음, 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 이를 100 mL의 포화 수성 중탄산나트륨 용액에 부었다. 이를 AcOEt로 추출하고, 포화 수성 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축에 의해 건조시켰다. DCM 및 메탄올 (98/02 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 크로마토그래피에 의해, 1.5 g의 1,1-디메틸에틸 (1-트리플루오로메탄술포닐피페리딘-4-일)카르바메이트 (크림색 고체)를 수득하였다.

150 ml 둥근 바닥 플라스크를 30 mL의 DCM 중 1.37 g의 1,1-디메틸에틸 (1-트리플루오로메탄술포닐피페리딘-4-일)카르바메이트로 충전하였다. 3 mL의 TFA를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 이를 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 30 mL의 물 및 2 mL의 0.75M 수성 암모니아 용액에 녹였다. 생성물을 AcOEt로 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 이로써 1.2 g의 1-트리플루오로메탄술포닐피페리딘-4-일아민 트리플루오로아세테이트 (회백색 고체)를 수득하였다.

단계 2: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 30 ml 둥근 바닥 플라스크를 272 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(트리플루오로메탄술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴, 10 mL의 에탄올, 5 mL의 THF 및 0.611 mL의 9.3N NaOH로 충전하였다. 환류 하에 2 시간 후, 혼합물을 냉각시키고, 50 mL의 인산이수소칼륨의 1M 수용액을 부었다. 생성물을 AcOEt로 추출하고, 포화 수성 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축에 의해 건조시켰다. 수득한 조 고체를 4 mL의 DMF에 용해시킨 다음, 275 mg의 벤조트리아졸-1-일옥시트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오라이드 (BOP), 84 mg의 1-히드록시벤조트리아졸 (HOBT), 44 mg의 염화암모늄 및 2 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (DIPEA)을 첨가하였다. 실온에서 3 시간 후, 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 수성 NaCl 용액으로 세척하였다. MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시킨 후, 300 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(트리플루오로메탄술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복스아미드를 수득하였다.

단계 3: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 50 ml 둥근 바닥 플라스크를 8 mL의 DCM 중 300 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(트리플루오로메탄술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복스아미드로 충전하였다. 3 mL의 TFA를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 이를 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 30 mL의 물 및 2 mL의 0.75M 수성 암모니아 용액에 녹였다. 생성물을 AcOEt로 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. AcOEt로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 크로마토그래피에 의해, 30 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(트리플루오로메탄술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복스아미드 (연황색 고체)를 수득하였다.

실시예 5 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-7-비닐-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린

단계 1: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 250 ml 둥근 바닥 플라스크를 10 mL의 DMF 중 실시예 2의 단계 2에서 제조된 380 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-7-비닐-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린, 1.2 mL의 디이소프로필에틸아민 및 0.37 mL의 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드로 충전하였다. 혼합물을 실온에서 24 시간 동안 교반한 다음, 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 이로써 548 mg의 조 생성물을 수득하였고, 이를 DCM 및 메탄올 (99.5/0.5 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (20-45 ㎛) 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여, 한편으로 198 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1-(2-트리메틸실라닐에톡시메틸)-7-비닐-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린을 크림색 고체의 형태로, 다른 한편으로 194 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-(2-트리메틸실라닐에톡시메틸)-7-비닐-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (크림색 고체)을 수득하였다.

단계 2: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 30 ml 둥근 바닥 플라스크를 5 mL의 1,4-디옥산 중 189 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-(2-트리메틸실라닐에톡시메틸)-7-비닐-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린으로 충전하였다. 아르곤을 10 분 동안 버블링시킨 후, 130 mg의 1-메탄술포닐피페리딘-4-일아민, 453 mg의 탄산세슘, 25 mg의 9,9-디메틸-4,5-비스(디페닐포스피노)크산텐 및 8 mg의 팔라듐(II) 아세테이트를 첨가하였다. 혼합물을 환류 하에 4 시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 이를 DCM 및 AcOEt (85/15 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 96 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-7-비닐-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (황색 고체)을 수득하였다.

단계 3: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 30 ml 둥근 바닥 플라스크를 8 mL의 DCM 중 92 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-7-비닐-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린으로 충전하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 0.9 mL의 TFA를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 30 mL의 물 및 1.5 mL의 0.75M 수성 암모니아 용액에 녹였다. 생성물을 AcOEt로 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 이를 DCM/메탄올 혼합물 (95/05 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 이로써 14 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-7-비닐-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (황색 고체)을 수득하였다.

실시예 6 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린

단계 1: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 50 ml 둥근 바닥 플라스크를 10 mL의 DMF 중 4.2 g의 2-브로모-1-(4-플루오로페닐)에타논 및 3.6 g의 칼륨 프탈이미드로 충전하였다. 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반하고, 형성된 침전물을 유리 프릿 상에서 여과하고, 50 mL의 이소프로필 에테르로 3회 세척하였다. 이를 RP 하에 건조시킨 후, 5 g의 2-[2-(4-플루오로페닐)-2-옥소에틸]이소인돌-1,3-디온 (백색 고체)을 수드하였고, 이를 하기 단계에 그대로 사용하였다. 융점 (코플러): 140℃;

단계 2: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 격막 및 자석 교반기를 구비한 100 ml 둥근 바닥 플라스크를 25 mL의 N,N-디메틸포름아미드 디에틸 아세탈 중 5 g의 2-[2-(4-플루오로페닐)-2-옥소에틸]이소인돌-1,3-디온으로 충전하였다. 혼합물을 환류 하에 15 시간 동안 가열한 다음, 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시켰다. 형성된 침전물을 유리 프릿 상에서 흡인에 의해 여과하고, 50 mL의 이소프로필 에테르로 2회 세척한 다음, 50 mL의 이소프로필 에테르로 2회의 정화 세척 (교반하지 않고 케이크를 세척함)을 수행하였다. RP 하에 건조시켜, 2-[2-디메틸아미노-1-(4-플루오로벤조일)-비닐]이소인돌-1,3-디온의 E 및 Z 이성질체의 혼합물 4.5 g (오렌지색-황색 고체)을 수득하였다. m.p. (코플러): 228℃;

단계 3: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 효과적인 자석 교반기 및 응축기를 구비한 1 ℓ 둥근 바닥 플라스크를 실온에서 30 mL의 에탄올 중 4.5 g의 2-[2-디메틸아미노-1-(4-플루오로벤조일)비닐]이소인돌-1,3-디온으로 충전하였다. 이로써, 갈색 현탁액을 수득하였고, 이를 20 mL의 에탄올 중 1.62 mL의 히드라진 수화물과 혼합하였다. 현탁액을 환류시까지 가열하였다. 30 분 동안 가열한 후, 상기 혼합물이 증점되어 레몬 황색을 나타내는 것으로 관찰될 수 있었다. 이 현탁액을 환류 하에 3 시간 동안 교반한 다음, 혼합물을 실온으로 만들었다. 불용물을 프릿 상에서 여과하고, 2 x 20 mL의 이소프로필 에테르로 세척하였다. 여과물을 농축에 의해 건조시켜, 6 g의 베이지색 고체를 수득하였다. 조 혼합물을 50 mL의 물 및 20 mL의 2M 염산과 혼합하였다. 50 mL의 AcOEt를 첨가하고, 불용물을 여과하였다. 수성상을 분리하고, 3 x 15 mL의 AcOEt에 녹였다. 수성상을 2M 수산화나트륨의 첨가에 의해 pH 11로 염기성화시킨 다음, 3 x 20 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 중성 pH가 수득될 때까지 유기상을 물로 세척하였다. 이를 AcOEt로 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축에 의해 건조시켰다. 이로써 1.93 g의 3-(4-플루오로페닐)-1H-피라졸-4-일아민 (연보라색 오일)을 수득하였다.

단계 4: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 둥근 바닥 플라스크를 20 mL의 DCM 및 15 mL의 피리딘 중 1.93 g의 3-(4-플루오로페닐)-1H-피라졸-4-일아민으로 충전하였다. 혼합물을 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시키고, 1.7 mL의 2,6-디플루오로벤조산 클로라이드를 첨가하였다. 온도를 3 시간에 걸쳐 실온으로 점차 상승시켰다. RP 하에 용매를 증발시킨 후, 물을 조 반응 혼합물에 첨가한 다음, 수성상을 AcOEt로 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시켰다. 이어서, AcOEt를 진공 하에 증발시켜, 2,6-디플루오로-N-[5-(4-플루오로페닐)-1H-피라졸-4-일]벤즈아미드 및 N-[1-(2,6-디플루오로벤조일)-5-(4-플루오로페닐)-1H-피라졸-4-일]-2,6-디플루오로벤즈아미드의 혼합물 3 g을 베이지색 고체의 형태로 수득하였고, 이를 그대로 사용하였다. 조 반응 생성물을 처리하여 목적 생성물을 수득하였는데: 둥근 바닥 플라스크에서 6-디플루오로-N-[5-(4-플루오로페닐)-1H-피라졸-4-일]벤즈아미드 및 N-[1-(2,6-디플루오로벤조일)-5-(4-플루오로페닐)-1H-피라졸-4-일]-2,6-디플루오로벤즈아미드의 혼합물 3 g을 실온에서 및 아르곤 하에 20 mL의 메탄올 및 12 mL의 테트라히드로푸란에 용해시킨 다음, 6 mL의 5N 수산화나트륨 수용액을 첨가하였다. 실온에서 1 시간 후, 혼합물을 6 mL의 5N 염산에 부었다. 이를 AcOEt로 추출하고, 유기상을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 다음, RP 하에 농축시켰다. 이로써 2.6 g의 2,6-디플루오로-N-[5-(4-플루오로페닐)-1H-피라졸-4-일]벤즈아미드 (크림색 고체)를 수득하였다.

단계 5: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 250 ml 둥근 바닥 플라스크를 2.6 g의 2,6-디플루오로-N-[5-(4-플루오로페닐)-1H-피라졸-4-일]벤즈아미드, 60 mL의 페닐포스핀 디클로라이드 및 17.5 g의 오산화인으로 충전하였다. 165℃에서 23 시간 동안 가열한 후, 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 260 mL의 물 및 400 g의 얼음의 혼합물에 부었다. 온도를 40℃로 상승시켰다. 혼합물을 120 mL의 28％ 수성 암모니아의 첨가에 의해 천천히 중화시켰다. 이를 AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 다음, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM 및 메탄올 (99/1 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 680 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (크림색 고체)을 수득하였다.

단계 6: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 250 ml 둥근 바닥 플라스크를 10 mL의 DMF 중 680 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린, 0.21 mL의 브롬 및 344 mg의 KOH로 충전하였다. 실온에서 5 시간 후, 혼합물을 빙수에 부었다. 수성상을 3 x 150 mL의 AcOEt로 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, RP 하에 증발시켰다. 이로써 770 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (황색 고체)을 수득하고, 이를 하기 단계를 위해 그대로 사용하였다.

단계 7: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 50 ml 둥근 바닥 플라스크를 15 mL의 DMF 중 770 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린, 2.5 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 및 0.76 mL의 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드로 충전하였다. 실온에서 5 시간 후, 혼합물을 8 부피의 빙수에 부었다. 수성상을 200 mL의 AcOEt로 3회 추출하고, 유기 추출물을 합하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, RP 하에 농축시켰다. 이로써 520 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (오렌지색 고체)을 수득하였다.

단계 8: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 50 ml 둥근 바닥 플라스크를 14 mL의 1,4-디옥산 중 520 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린으로 충전하였다. 아르곤을 10 분 동안 버블링시킨 후, 225 mg의 1-메탄술포닐피페리딘-4-일아민, 780 mg의 탄산세슘, 92 mg의 9,9-디메틸-4,5-비스(디페닐포스피노)크산텐 및 40 mg의 팔라듐(II) 아세테이트를 첨가하였다. 혼합물을 환류 하에 5 시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM 및 AcOEt (95/05 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 94 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (황색 고체)을 수득하였다.

단계 9: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 격막을 구비한 둥근 바닥 플라스크를 10 mL의 DCM 중 95 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린으로 충전하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 0.173 mL의 TFA를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 이를 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 30 mL의 물 및 2 mL의 0.75M 수성 암모니아 용액에 녹였다. 생성물을 AcOEt로 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 이를 DCM 및 메탄올 (95/05 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 6 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (황색 고체)을 수득하였다.

실시예 7 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-7-에티닐-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린

단계 1: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 150 ml 둥근 바닥 플라스크를 24 mL의 DMF 중 실시예 6의 단계 1에서 제조된 1.2 g의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-7-요오도-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린, 3 mL의 디이소프로필에틸아민 및 0.92 mL의 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드로 충전하였다. 혼합물을 실온에서 24 시간 동안 교반한 다음, 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 이로써 1.52 g의 조 생성물을 수득하였고, 이를 DCM/메탄올 혼합물 (99.5/0.5 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (20-45 ㎛) 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여, 한편으로 832 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1-(2-트리메틸실라닐-에톡시메틸)-7-요오도-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린을 백색 고체의 형태로 수득하였고

, 다른 한편으로 526 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-(2-트리메틸실라닐-에톡시메틸)-7-요오도-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (황토색 오일)을 수득하였고

, 이를 하기 단계에 그대로 사용하였다.

단계 2: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 10 ml 둥근 바닥 플라스크를 1.5 mL의 DMF 중 263 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-(2-트리메틸실라닐에톡시메틸)-7-요오도-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린에 이어, 1.5 mL의 트리에틸아민으로 충전하였다. 혼합물을 통해 아르곤을 10 분 동안 버블링시킨 후, 30 mg의 비스(트리페닐포스펜)팔라듐(II) 디클로라이드, 8.7 mg의 구리(I) 요오다이드 및 118 ㎕의 에티닐트리메틸실란을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하고, 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM 및 메탄올 (99.5/0.5 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (40-63 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 140 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-(2-트리메틸실라닐에톡시메틸)-7-트리메틸실라닐에티닐-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (크림색 고체)을 수득하였다.

단계 3: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 30 ml 둥근 바닥 플라스크를 5 mL의 1,4-디옥산 중 79 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-(2-트리메틸실라닐에톡시메틸)-7-트리메틸실라닐에티닐-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린으로 충전하였다. 반응 혼합물을 통해 아르곤을 10 분 동안 버블링시킨 후, 81 mg의 1-메탄술포닐피페리딘-4-일아민, 282 mg의 탄산세슘, 16 mg의 9,9-디메틸-4,5-비스(디페닐포스피노)크산텐 및 5 mg의 팔라듐(II) 아세테이트를 첨가하였다. 혼합물을 환류 하에 5 시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/메탄올 혼합물 (95/05 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (40-63 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 54 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-7-트리메틸실라닐에티닐-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린을 황색 고체로서 수득하였다.

단계 4: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 30 ml 둥근 바닥 플라스크를 5 mL의 THF 중 74 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-7-트리메틸실라닐에티닐-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린으로 충전하고, 0.22 ㎤의 테트라부틸암모늄 플루오라이드를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반하였다. 이를 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM 및 AcOEt (85/15 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (40-63 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 47 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-7-에티닐-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (레몬 황색 고체)을 수득하였다.

단계 5: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 격막을 구비한 30 ml 둥근 바닥 플라스크를 4 mL의 DCM 중 47 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-7-에티닐-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린으로 충전하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 0.47 mL의 TFA를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 이를 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 25 mL의 물 및 0.75 mL의 0.75M 수성 암모니아 용액에 녹였다. 이를 AcOEt로 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM 및 메탄올 (92.5/7.5 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 이로써 6 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-7-에티닐-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (황색 고체)을 수득하였다.

실시예 8 메틸 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실레이트

단계 1: 자석 교반기 및 아르곤 흡입구를 구비한 250 ml 3구형 플라스크를 120 mL의 THF 및 3 mL의 DMF 중 실시예 1의 단계 6에서 제조된 4 g의 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-요오도-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린으로 충전하였다. 혼합물을 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 다음, 952 mg의 수소화나트륨 (60％)을 첨가하였다. 0℃에서 15 분 후, 1.3 mL의 디메틸술파모일 클로라이드를 첨가하였다. 실온에서 16 시간 후, 혼합물을 300 mL의 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 수득된 고체를 디이소프로필 에테르로 연화처리하였다. 불용물을 RP 하에 여과하고, 진공 하에 건조시켜, 2.94 g의 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-요오도-N,N-디메틸-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-1-술폰아미드 (베이지색 고체)를 수득하였다.

단계 2: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 250 ml 둥근 바닥 플라스크를 90 mL의 DMF 중 2.94 g의 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-요오도-N,N-디메틸-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-1-술폰아미드로 충전하였다. 아르곤을 10 분 동안 버블링시킨 후, 1.81 g의 트리부틸비닐스탄난 및 331 mg의 트리페닐포스핀 팔라듐(0)을 첨가하였다. 혼합물을 3 시간 동안 환류 하에 가열한 다음, 냉각시킨 후, 혼합물을 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, RP 하에 증발에 의해 건조시켰다. 이로써 2.36 g의 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-에테닐-N,N-디메틸-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-1-술폰아미드 (갈색 고체)를 수득하였다. 생성물을 그대로 사용하였다.

단계 3: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 250 ml 둥근 바닥 플라스크를 30 mL의 THF 중 2.36 g의 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-에테닐-N,N-디메틸-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-1-술폰아미드로 충전한 다음, 23 mL의 물, 30 mL의 tert-부탄올, 2.14 mL의 사산화오스뮴 용액 (2-메틸-2-프로판올 중 2.5％) 및 5.04 g의 과요오드산나트륨을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반한 다음, 100 mL의 물에 붓고, AcOEt로 추출하였다. 유기상을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 조 생성물을 DCM으로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여, 1.92 g의 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-포르밀-N,N-디메틸-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-1-술폰아미드 (베이지색 고체)를 수득하였다.

단계 4: 250 ml 둥근 바닥 플라스크를 124 mL의 아세톤 중 1.41 g의 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-포르밀-N,N-디메틸-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-1-술폰아미드로 충전하였다. 62 mL의 물 중의 용액으로서 1.07 g의 과망간산칼륨을 첨가하였다. 실온에서 1 시간 후, 아세톤을 증발시킨 다음, 혼합물을 5N 염산의 첨가에 의해 pH 1로 산성화시켰다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기상을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켜, 1.46 g의 5-(2,6-디플루오로페닐)-1-(디메틸술파모일)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실산 (황색 고체)을 수득하였다.

단계 5: 250 ml 둥근 바닥 플라스크를 100 mL의 DCM 중 1.46 g의 5-(2,6-디플루오로페닐)-1-(디메틸술파모일)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실산으로 충전한 다음, 20 mL의 TFA를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 이를 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 30 mL의 포화 NaHCO₃ 수용액에 녹이고, 30 mL의 AcOEt로 3회 추출하였다. 수성상을 37％ HCl의 첨가에 의해 pH 1로 산성화시키고, AcOEt로 추출하였다. 유기상을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켜, 927 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실산 (베이지색 고체)을 수득하였다.

단계 6: 100 ml 둥근 바닥 플라스크를 20 mL의 DMF 중 605 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실산으로 충전하였다. 334 mg의 수산화칼륨에 이어, 595 mg의 브롬을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 이를 100 mL의 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기상을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켜, 1.2 g의 오렌지색 오일을 수득하였고, 이를 DCM/메탄올 (80/20 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 562 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실산 (백색 고체)을 수득하였다.

단계 7: 자석 교반기 및 아르곤 흡입구를 구비한 25 ml 3구형 플라스크를 11 mL의 DMF 중 562 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실산, 1.38 mL의 디이소프로필에틸아민 및 740 ㎕의 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드로 충전하였다. 실온에서 2 시간 후, 반응 혼합물을 100 mL의 물에 부었다. 수성상을 100 mL의 AcOEt로 3회 추출하고, 유기 추출물을 합하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, RP 하에 농축시켰다. 조 생성물을 시클로헥산/DCM 혼합물 (50/50 부피비)에 이어, DCM으로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실산 및 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실산의 혼합물 502 mg (연황색 오일)을 수득하였다.

단계 8: 자석 교반기를 구비한 25 ml 둥근 바닥 플라스크를 10 mL의 메탄올 및 1 mL의 2N 수산화나트륨 용액 중 단계 7에서 수득한 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실산 및 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실산의 혼합물 500 mg로 충전하였다. 실온에서 5 분 후, 혼합물을 10 mL의 AcOEt 및 5 mL의 물에 부었다. 유기상을 포화 수성 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, RP 하에 농축시켜, 메틸 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실레이트 및 메틸 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실레이트의 혼합물 336 mg (베이지색 고체)을 수득하였다.

단계 9: 자석 교반기 및 아르곤 흡입구를 구비한 25 ml 3구형 플라스크를 3 mL의 1,4-디옥산 중 단계 8에서 수득한 메틸 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실레이트 및 메틸 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실레이트의 혼합물 113 mg으로 충전하였다. 혼합물을 통해 아르곤을 10 분 동안 버블링시킨 후, 37 mg의 1-메탄술포닐피페리딘-4-일아민, 255 mg의 탄산세슘, 18 mg의 9,9-디메틸-4,5-비스(디페닐포스피노)크산텐 및 5 mg의 팔라듐(II) 아세테이트를 첨가하였다. 혼합물을 110℃에서 4 시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하였다. 유기상을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM에 이어, DCM 및 AcOEt (80/20 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 메틸 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실레이트 및 메틸 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실레이트의 혼합물 46 mg (황색 고체)을 수득하였다.

단계 10: 자석 교반기를 구비한 25 ml 둥근 바닥 플라스크를 5 mL의 DCM 중 단계 9에서 수득한 메틸 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실레이트 및 메틸 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실레이트의 혼합물 46 mg으로 충전하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 0.5 mL의 TFA를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 이를 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 20 mL의 물에 녹이고, 20 mL의 AcOEt로 3회 추출하였다. 유기상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM에 이어, DCM/AcOEt (50/50 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 12 mg의 메틸 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실레이트 (황색 고체)를 수득하였다.

실시예 9 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보티오아미드

5 ml 용량의 마이크로웨이브 튜브를 실시예 12에서 제조된 45 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴, 및 2 mL의 메탄올 중 암모늄 술피드 20％ 수용액 0.2 mL로 충전하였다. 혼합물을 100℃에서 20 분 동안 마이크로웨이브 가열한 다음 (100 와트로 설정된 전력), 50 mL의 물에 붓고, AcOEt로 추출하였다. 유기상을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 수득된 고체를 디이소프로필 에테르로 연화처리하였다. 불용물을 RP 하에 여과하고, 진공 하에 건조시켜, 36 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보티오아미드 (황색 고체)를 수득하였다.

실시예 10 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린

단계 1: 자석 교반기를 구비한 250 ml 둥근 바닥 플라스크를 120 mL의 DMF 중 30 g의 2-클로로아세토페논 및 36.3 g의 칼륨 프탈이미드로 충전하였다. 실온에서 4 시간 후, 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 수득된 고체를 120 mL의 DCM 및 100 mL의 1N 수산화나트륨 용액에 녹였다. 유기상을 포화 수성 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 수득된 고체를 디이소프로필 에테르로 연화처리하였다. 불용물을 여과하고, 진공 하에 건조시켜, 42.6 g의 2-(2-옥소-2-페닐에틸)-1H-이소인돌-1,3(2H)-디온을 베이지색 고체의 형태로 수득하였고, 이를 하기 단계에 그대로 사용하였다.

단계 2: 자석 교반기를 구비한 100 ml 둥근 바닥 플라스크를 105 mL의 N,N-디메틸포름아미드 디에틸 아세탈 중 42.4 g의 2-(2-옥소-2-페닐에틸)-1H-이소인돌-1,3(2H)디온으로 충전하였다. 혼합물을 3 시간 동안 환류 하에 가열한 다음, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM에 이어, DCM 및 메탄올 (90/10 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 2-[1-(디메틸아미노)-3-옥소-3-페닐프로프-1-엔-2-일]-1H-이소인돌-1,3(2H)디온의 E 및 Z 이성질체의 혼합물 40.69 g을 크림색 고체의 형태로 수득하였다.

단계 3: 250 ml 둥근 바닥 플라스크를 실온에서 75 mL의 에탄올 중 2-[1-(디메틸아미노)-3-옥소-3-페닐프로프-1-엔-2-일]-1H-이소인돌-1,3(2H)디온의 E 및 Z 이성질체의 혼합물 20.5 g으로 충전하였다. 7.8 mL의 히드라진 수화물을 첨가하였다. 현탁액을 실온에서 1 시간 30 분 동안 교반한 다음, 환류시까지 가열하였다. 1 시간 30 분 동안 가열한 후, 혼합물의 증점화가 관찰될 수 있었고, 이는 황색을 나타내었다. 현탁액을 프릿 상에서 흡인에 의해 고온 여과하고, 침전물을 에탄올로 세척하였다. 여과물을 RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM 및 DCM/메탄올 혼합물 (95/5 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 9.45 g의 5-페닐-1H-피라졸-4-아민 (갈색 고체)을 수득하였다.

단계 4: 자석 교반기를 구비한 250 ml 둥근 바닥 플라스크를 45 mL의 DCM 및 45 mL의 피리딘 중 10 g의 5-페닐-1H-피라졸-4-일아민으로 충전하였다. 반응 혼합물을 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시키고, 17.4 mL의 2,6-디플루오로벤조산 클로라이드를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 용매를 RP 하에 증발시킨 후, 50 mL의 물을 조 반응 생성물에 첨가한 다음, 수성상을 50 mL의 AcOEt로 2회 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시켰다. 이어서, AcOEt를 진공 하에 증발시켜, 2,6-디플루오로-N-[5-페닐-1H-피라졸-4-일]벤즈아미드 및 N-[1-(2,6-디플루오로벤조일)-5-페닐-1H-피라졸-4-일]-2,6-디플루오로벤즈아미드의 혼합물을 갈색 오일의 형태로 수득하였다. 조 반응 생성물을 처리하여 목적 생성물을 수득하였는데: 250 ml 둥근 바닥 플라스크에서 2,6-디플루오로-N-[5-페닐-1H-피라졸-4-일]벤즈아미드 및 N-[1-(2,6-디플루오로벤조일)-5-페닐-1H-피라졸-4-일]-2,6-디플루오로벤즈아미드의 혼합물을 실온에서 및 아르곤 하에 20 mL의 메탄올 및 20 mL의 5N 수산화나트륨 수용액에 용해시켰다. 실온에서 30 분 후, 혼합물을 50 mL의 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 유기상을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 다음, RP 하에 농축시켰다. 이로써 조 생성물을 수득하였고, 이를 DCM에 현탁시키고, DCM의 환류 하에 15 분 동안 교반하였다. 빙조를 이용하여 냉각시킨 후, 침전물을 프릿 상에서 흡인에 의해 여과하고, 빙냉의 DCM으로 2회 세척하였다. 이로써 7.7 g의 2,6-디플루오로-N-(5-페닐-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드 (황토색 고체)를 수득하였다.

단계 5: 자석 교반기 및 아르곤 흡입구를 구비한 500 ml 3구형 플라스크를 12.5 g의 2,6-디플루오로-N-(5-페닐-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드, 218 mL의 옥시염화인 및 68.2 g의 P₂O₅로 충전하였다. 환류 하에 30 분 후, 혼합물을 고화시켰다. 20 mL의 옥시염화인을 첨가하였다. 5 시간 동안 환류한 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 온도를 40℃ 미만으로 유지하면서 2 ℓ의 빙수에 천천히 부었다. 탄산칼륨을 천천히 첨가하여 중화시키고, 500 mL의 AcOEt로 3회 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시킨 다음, RP 하에 농축시켰다. 수득된 고체를 DCM 및 DCM/AcOEt 혼합물 (80/20 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 이로써 6.4 g의 5-(2,6-디플루오로페닐)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (황색 발포체)을 수득하였다.

단계 6: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 50 ml 둥근 바닥 플라스크를 25 mL의 DMF 중 700 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린으로 충전하였다. 447 mg의 KOH에 이어, 0.26 mL의 브롬을 첨가하였다. 실온에서 1 시간 후, 혼합물을 100 mL의 빙수에 부었다. 수성상을 100 mL의 AcOEt로 3회 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, RP 하에 증발시켰다. 이로써 950 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (오렌지색 고체)을 수득하였다. 생성물은 하기 단계에서 그대로 사용될 것이다.

단계 7: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 50 ml 둥근 바닥 플라스크를 20 mL의 DMF 중 890 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린, 2.46 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민, 및 658 ㎕의 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드로 충전하였다. 실온에서 16 시간 후, 혼합물을 50 mL의 빙수에 부었다. 수성상을 50 mL의 AcOEt로 3회 추출하고, 유기 추출물을 합하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 시클로헥산 및 DCM (80/20 부피비에 이어 50/50 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 한편으로 498 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린을 백색 검의 형태로 수득하였고

, 다른 한편으로 200 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (백색 검)을 수득하였다

.

단계 8: 자석 교반기 및 아르곤 흡입구를 구비한 25 ml 3구형 플라스크를 6 mL의 1,4-디옥산 중 200 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린으로 충전하였다. 반응 혼합물을 통해 아르곤을 10 분 동안 버블링시킨 후, 73 mg의 1-메틸술포닐피페리딘-4-일아민, 505 mg의 탄산세슘, 36 mg의 9,9-디메틸-4,5-비스(디페닐포스피노)크산텐 및 10 mg의 팔라듐(II) 아세테이트를 첨가하였다. 혼합물을 120℃에서 2 시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하였다. 유기상을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 시클로헥산 및 AcOEt (50/50 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 71 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (황색 검)을 수득하였다.

단계 9: 10 ml 둥근 바닥 플라스크를 3 mL의 DCM 중 71 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린으로 충전하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 0.3 mL의 TFA를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 이를 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 20 mL의 물에 녹이고, 20 mL의 AcOEt로 3회 추출하였다. 유기상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM 및 DCM 및 메탄올 (95/5 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 9 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (베이지색 고체)을 수득하였다.

실시예 11 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(시클로프로필술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴

단계 1: 자석 교반기 및 아르곤 흡입구를 구비한 25 ml 3구형 플라스크를 4 mL의 1,4-디옥산 중 실시예 1의 단계 11에서 제조된 150 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴로 충전하였다. 혼합물을 통해 아르곤을 10 분 동안 버블링시킨 후, 60 mg의 1-시클로프로필술포닐피페리딘-4-일아민, 361 mg의 탄산세슘, 25 mg의 9,9-디메틸-4,5-비스(디페닐포스피노)크산텐 및 7 mg의 팔라듐(II) 아세테이트를 첨가하였다. 혼합물을 120℃에서 2 시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하였다. 유기상을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 시클로헥산 및 AcOEt (50/50 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 57 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(시클로프로필술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴 (황색 고체)을 수득하였다.

단계 2: 자석 교반기를 구비한 10 ml 둥근 바닥 플라스크를 5 mL의 DCM 중 57 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(시클로프로필술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴로 충전하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 0.3 mL의 TFA를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 이를 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 20 mL의 물에 녹이고, 20 mL의 AcOEt로 3회 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 시클로헥산 및 AcOEt (80/20 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 16 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(시클로프로필술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴 (황색 고체)을 수득하였다.

실시예 12 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴

단계 1: 자석 교반기 및 아르곤 흡입구를 구비한 25 ml 3구형 플라스크를 12 mL의 1,4-디옥산 중 실시예 1의 단계 11에서 제조된 525 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴로 충전하였다. 반응 혼합물을 통해 아르곤을 10 분 동안 버블링시킨 후, 294 mg의 1-메틸술포닐피페리딘-4-일아민, 1.26 g의 탄산세슘, 89 mg의 9,9-디메틸-4,5-비스(디페닐포스피노)크산텐 및 23 mg의 팔라듐(II) 아세테이트를 첨가하였다. 반응 혼합물을 120℃에서 2 시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하였다. 유기상을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 시클로헥산/AcOEt 혼합물 (80/20 부피비에 이어 50/50 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 470 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴 (황색 고체)을 수득하였다.

단계 2: 자석 교반기를 구비한 최대 용량 20 ml의 마이크로웨이브 튜브를 12 mL의 5N 염산 중 300 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴로 충전하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 5 분 동안 마이크로웨이브 가열한 다음, 20 mL의 물에 붓고, 9.3N 수산화나트륨 용액의 첨가에 의해 pH 7로 만들고, 20 mL의 AcOEt로 3회 추출하였다. 합한 유기상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM 및 AcOEt (50/50 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 180 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴 (황색 고체)을 수득하였다.

실시예 13 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴

단계 1: 자석 교반기 및 아르곤 흡입구를 구비한 25 ml 3구형 플라스크를 4 mL의 1,4-디옥산 중 실시예 1의 단계 11에서 제조된 150 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴로 충전하였다. 반응 혼합물을 통해 아르곤을 10 분 동안 버블링시킨 후, 56 mg의 1-에틸술포닐피페리딘-4-일아민, 361 mg의 탄산세슘, 25 mg의 9,9-디메틸-4,5-비스(디페닐포스피노)크산텐 및 7 mg의 팔라듐(II) 아세테이트를 첨가하였다. 혼합물을 120℃에서 2 시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하였다. 유기상을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 시클로헥산/AcOEt 혼합물 (80/20 부피비에 이어 50/50 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 60 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴 (황색 고체)을 수득하였다.

단계 2: 자석 교반기를 구비한 10 ml 둥근 바닥 플라스크를 5 mL의 DCM 중 50 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴로 충전하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 0.1 mL의 TFA를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 이를 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 20 mL의 물에 녹이고, 20 mL의 AcOEt로 3회 추출하였다. 합한 유기상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM 및 DCM 및 메탄올 (90/10 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 27 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴 (황색 고체)을 수득하였다.

실시예 14 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(시클로프로필술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복스아미드

10 ml 둥근 바닥 플라스크를 실시예 11에서 제조된 29.7 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(시클로프로필술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴, 1.3 mL의 에탄올 및 125 ㎕의 9.3N 수산화나트륨으로 충전하였다. 환류 하에 30 분 후, 혼합물을 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 10 mL의 물에 녹이고, 10 mL의 AcOEt로 3회 추출하였다. 합한 유기상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켜, 17 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(시클로프로필술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복스아미드 (황색 고체)를 수득하였다.

실시예 15 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드

10 ml 둥근 바닥 플라스크를 5 mL의 DCM 중 실시예 2의 단계 5에서 제조된 54 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드로 충전하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 0.3 mL의 TFA를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 이를 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 5 mL의 포화 NaHCO₃ 수용액에 녹였다. 이를 AcOEt로 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/AcOEt (50/50 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 이로써 9 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드 (황색 고체)를 수득하였다.

실시예 16 5-(2,6-디플루오로페닐)-N-히드록시-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복스이미드아미드

10 ml 둥근 바닥 플라스크를 실시예 12에서 제조된 30 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴, 1.3 mL의 메탄올, 0.8 mL의 THF 및 62 mg의 트리에틸아민으로 충전하였다. 히드로클로라이드로서 44 mg의 히드록실아민을 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 3 시간 동안 가열한 다음, RP 하에 증발시켰다. 수득된 고체를 10 mL의 물에 녹이고, AcOEt로 추출하였다. 유기상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 이를 DCM에 이어, DCM/메탄올 혼합물 (80/20 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 9.7 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-N-히드록시-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복스이미드아미드를 황색 고체의 형태로 수득하였다.

실시예 17 [5-(2,6-디플루오로페닐)-7-(플루오로메틸)-N-[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-아민

단계 1: 실시예 3의 단계 1에서 제조된 377 mg의 [5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-일]메탄올, 및 7 mL의 DCM으로 출발하였다. 혼합물을 드라이-아이스 조를 이용하여 -70℃로 냉각시키고, 88 ㎕의 디에틸아미노황 트리플루오라이드 (DAST)와 혼합하였다. 30 분 후, 혼합물을 포화 수성 중탄산나트륨 용액에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/AcOEt 혼합물 (85/15 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (40-63 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 90 mg의 [5-(2,6-디플루오로페닐)-7-(플루오로메틸)-N-[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-아민 (황색 고체)을 수득하였다.

단계 2: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 30 ml 둥근 바닥 플라스크를 7 mL의 DCM 중 87 mg의 [5-(2,6-디플루오로페닐)-7-(플루오로메틸)-N-[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-아민으로 충전하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 0.85 mL의 TFA를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 24 mL의 물 및 1.1 mL의 0.75M 수성 암모니아 용액에 녹였다. 이를 에틸 아세테이트로 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/MeOH 혼합물 (95/05 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 이로써 27 mg의 [5-(2,6-디플루오로페닐)-7-(플루오로메틸)-N-[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-아민 (황색 고체)을 수득하였다.

실시예 18 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복스아미드

단계 1: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 100 ml 둥근 바닥 플라스크를 15 mL의 1,4-디옥산 중 600 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴로 충전하였다. 반응 혼합물을 통해 아르곤을 10 분 동안 버블링시킨 후, 448 mg의 1-에탄술포닐피페리딘-4-일아민, 1.4 g의 탄산세슘, 80 mg의 9,9-디메틸-4,5-비스(디페닐포스피노)크산텐 및 26 mg의 팔라듐(II) 아세테이트를 첨가하였다. 혼합물을 환류 하에 4 시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM 및 AcOEt (95/05 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (40-63 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 436 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴 (황색 고체)을 수득하였다.

단계 2: 상부에 탑재된 아르곤 흡입구를 가지며 자석 교반기 및 격막을 구비한 100 ml 둥근 바닥 플라스크를 4 mL의 톨루엔 중 396 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴로 충전하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 0.64 mL의 95％ 황산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 15 시간 동안 교반하였다. 이를 0℃로 냉각시키고, 9 mL의 7.5M 수성 NH₃ 용액으로 중화시켰다. 생성물을 AcOEt로 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 이를 DCM 및 MeOH (95/05 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 이로써 174 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복스아미드 (황색 고체)를 수득하였다.

실시예 19 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드

단계 1: 자석 교반기 및 아르곤 흡입구를 구비한 50 ml 3구형 플라스크를 7.8 mL의 1,4-디옥산 중 실시예 2의 단계 5에서 제조된 350 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-(2-트리메틸실라닐에톡시메틸)-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드로 충전하였다. 195 mg의 1-에틸술포닐피페리딘-4-일아민, 880 mg의 탄산세슘, 59 mg의 9,9-디메틸-4,5-비스(디페닐포스피노)크산텐 및 15 mg의 팔라듐(II) 아세테이트를 첨가하였다. 혼합물을 2 시간 동안 환류 하에 가열하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하였다. 유기상을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 이를 시클로헥산 및 AcOEt (75/25 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 195 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드 (황색 발포체)를 수득하였다.

단계 2: 최대 용량 20 ml의 마이크로웨이브 튜브를 195 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드, 및 10 mL의 5N 수성 HCl 용액으로 충전하였다. 혼합물을 100℃에서 20 분 동안 마이크로웨이브 가열한 다음, 물에 붓고, AcOEt로 추출하였다. 유기상을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM 및 MeOH (95/5 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 이로써 90 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드를 황색 발포체의 형태로 수득하였다.

실시예 20 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드 옥심

25 ml 둥근 바닥 플라스크를 2 mL의 피리딘 중 실시예 19에서 제조된 30 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드로 충전하였다. 히드로클로라이드로서 7 mg의 히드록실아민을 첨가하였다. 실온에서 1 시간 후, 혼합물을 RP 하에 증발시켰다. 생성물을 DCM/메탄올 혼합물 (95/5 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 22 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드 옥심 (황색 고체)을 수득하였다.

실시예 21 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-일]메탄올

25 ml 둥근 바닥 플라스크를 2 mL의 메탄올 중 실시예 19에서 제조된 30 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드로 충전하였다. 혼합물을 5℃로 냉각시켰다. 12 mg의 수소화붕소나트륨을 첨가하였다. 5℃에서 30 분 후, 혼합물을 RP 하에 증발시켰다. 수득된 고체를 10 mL의 0.5M 수성 HCl 용액에 녹였다. 이를 AcOEt로 추출하고, 유기상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/메탄올 혼합물 (95/5 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 12 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-일]메탄올 (황색 고체)을 수득하였다.

실시예 22 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-[(1-술파모일피페리딘-4-일)아미노]-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복스아미드

단계 1: 707 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴을 17 mL의 1,4-디옥산에 도입하였다. 혼합물을 통해 아르곤을 10 분 동안 버블링시킨 후, 846 mg의 4-아미노피페리딘-1-술폰아미드, 2.15 g의 탄산세슘, 95 mg의 9,9-디메틸-4,5-비스(디페닐포스피노)크산텐 및 30 mg의 팔라듐(II) 아세테이트를 첨가하였다. 혼합물을 환류 하에 20 시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/EtOH/NH₃ (MeOH 중 7N 용액) 혼합물 (90/10/1 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (40-63 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 407 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-(피페리딘-4-일아미노)-2-[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴 (황색 오일)을 수득하였다.

단계 2: 375 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-(피페리딘-4-일아미노)-2-[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴, 2 mL의 DME 및 84 mg의 술파미드를 혼합하고, 150℃에서 1 시간 동안 마이크로웨이브 가열하였다. 용매를 증발시킨 후, 과량의 술파미드를 에틸 에테르의 첨가에 의해 침전시킨 후, 프릿 상에서 흡인 여과하고, 여과물을 RP 하에 농축시켰다. 이로써 439 mg의 4-{[7-시아노-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드 (황색 고체)를 수득하였다.

단계 3: 54 mg의 4-{[7-시아노-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드를 0.5 mL의 톨루엔에 도입하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 90 ㎕의 95％ 황산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. 이를 0℃로 냉각시키고, 9 mL의 7.5M 수성 암모니아 용액에 의해 중화시켰다. 이를 에틸 아세테이트로 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/메탄올 혼합물 (95/05 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 이로써 7 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-[(1-술파모일피페리딘-4-일)아미노]-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복스아미드 (황색 고체)를 수득하였다.

실시예 23 4-({5-(2,6-디플루오로페닐)-7-[(E/Z)-(히드록시이미노)메틸]-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일}아미노)피페리딘-1-술폰아미드

단계 1: 실시예 22의 단계 2에서 제조된 406 mg의 4-{[7-시아노-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드로부터 출발하여, 4 mL의 톨루엔, 3 mL의 DCM을 첨가하고, 혼합물을 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시켰다. 970 ㎕의 디이소부틸알루미늄 히드라이드를 적가하고, 혼합물을 0℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 이를 0.1M 수산화나트륨에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/메탄올 혼합물 (90/10 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (40-63 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 이로써 251 mg의 4-{[5-(2,6-디플루오로페닐)-7-포르밀-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드 (황색 오일)를 수득하였고, 이를 하기 단계에 그대로 사용하였다.

단계 2: 250 mg의 4-{[5-(2,6-디플루오로페닐)-7-포르밀-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드를 5 mL의 톨루엔에 도입하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 206 ㎕의 95％ 황산을 첨가하고, 0℃에서 1 시간 동안 계속 교반하였다. 혼합물을 10 mL의 7.5M 수성 암모니아 용액으로 중화시켰다. 이를 에틸 아세테이트로 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/에탄올 혼합물 (90/10 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 이로써 38 mg의 4-{[5-(2,6-디플루오로페닐)-7-포르밀-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드 (황색 고체)를 수득하였다.

단계 3: 38 mg의 4-{[5-(2,6-디플루오로페닐)-7-포르밀-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드를 2 mL의 피리딘에 도입한 다음, 9 mg의 히드록실아민 히드로클로라이드를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 48 시간 동안 교반하였다. 이를 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 AcOEt에 녹이고, 인산칼륨의 1M 수용액에 이어, 포화 수성 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/EtOH 혼합물 (80/20 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (20-45 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 19 mg의 4-({5-(2,6-디플루오로페닐)-7-[(E/Z)-(히드록시이미노)메틸]-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일}아미노)피페리딘-1-술폰아미드 (황색 고체)를 수득하였다.

실시예 24 5-(2,6-디플루오로페닐)-N-[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]-7-(1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-아민

단계 1: 342 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-(2-트리메틸실라닐에톡시메틸)-7-요오도-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린을 13 mL의 1,4-디옥산에 도입하였다. 74 mg의 4-피라졸보론산, 77 mg의 Pd(PPh₃)₄ 및 165 mg의 탄산나트륨을 첨가하였다. 혼합물을 환류 하에 4 시간 30 분 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/메탄올 혼합물 (95/05 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 136 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-7-(1H-피라졸-4-일)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (백색 발포체)을 수득하였고, 이를 하기 단계에 그대로 사용하였다.

단계 2: 115 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-7-(1H-피라졸-4-일)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린을 2 mL의 DMF, 0.26 mL의 디이소프로필에틸아민 및 77 ㎕의 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드에 도입하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반한 다음, 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM 및 메탄올 (98/02 부피비)의 혼합물로 용리시키는 실리카 겔 (20-45 ㎛) 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여, 116 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-7-(1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸-4-일)-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린 (황색 분말)을 수득하였다.

단계 3: 110 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-7-(1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸-4-일)-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린을 5 mL의 1,4-디옥산에 도입하였다. 혼합물을 통해 아르곤을 10 분 동안 버블링시킨 후, 57 mg의 1-메탄술포닐피페리딘-4-일아민, 199 mg의 탄산세슘, 16 mg의 9,9-디메틸-4,5-비스(디페닐포스피노)크산텐 및 5 mg의 팔라듐(II) 아세테이트를 첨가하였다. 혼합물을 2 시간 동안 환류 하에 가열하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/메탄올 혼합물 (97.5/2.5 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (40-63 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 77 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-N-[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-7-(1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸-4-일)-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-아민 (황색 발포체)을 수득하였다.

단계 4: 73 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-N-[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-7-(1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸-4-일)-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-아민을 5 mL의 DCM에 도입하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 0.58 mL의 TFA를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 5 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 23 mL의 물에 녹이고, 7.5M 수성 암모니아 용액으로 중화시켰다. 이를 에틸 아세테이트로 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM에 이어, DCM/메탄올 혼합물 (90/10 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 5 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-N-[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]-7-(1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-아민 (황색 고체)을 수득하였다.

실시예 25 5-(2,6-디플루오로페닐)-N-[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]-7-(2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-아민

단계 1: 실시예 7의 단계 4에서 제조된 239 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-7-에티닐-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린을 4 mL의 메탄올 및 4 mL의 DMF에 도입하고, 208 ㎕의 트리메틸실릴 아지드 및 15 mg의 구리(I) 요오다이드를 첨가하였다. 100℃에서 2 시간 동안 가열한 후, 104 ㎕의 트리메틸실릴 아지드 및 7 mg의 구리(I) 요오다이드를 첨가하고, 100℃에서 2 시간 동안 계속 가열하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/메탄올 혼합물 (95/05 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (40-63 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 121 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-N-[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]-7-(2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-아민 (황색 발포체)을 수득하였다.

단계 2: 116 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-N-[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]-7-(2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-아민을 10 mL의 DCM에 도입하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 1.1 mL의 TFA를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 5 시간 동안 교반하였다. 이를 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 60 mL의 물에 녹이고, 7.5M 수성 암모니아 용액으로 중화시켰다. 이를 에틸 아세테이트로 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/메탄올 혼합물 (92.5/7.5 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 10 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-N-[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]-7-(2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-아민 (황색 고체)을 수득하였다.

실시예 26 4-{[7-시아노-5-(2,6-디플루오로페닐)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드

306 mg의 4-{[7-시아노-5-(2,6-디플루오로페닐)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드를 20 mL의 DCM에 도입하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 1.5 mL의 TFA를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 이를 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 30 mL의 물에 녹이고, 2 mL의 7.5M 수성 암모니아 용액으로 중화시켰다. 이를 에틸 아세테이트로 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/메탄올/NH₄OH 혼합물 (92.5/7.5/0.75 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 이로써 8 mg의 4-{[7-시아노-5-(2,6-디플루오로페닐)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드를 수득하였다.

실시예 27 4-{[5-(2,6-디플루오로페닐)-7-(히드록시메틸)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드

단계 1: 실시예 23의 단계 1에서 제조된 449 mg의 4-{[5-(2,6-디플루오로페닐)-7-포르밀-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드를 20 mL의 메탄올에 도입하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 34 mg의 NaBH₄를 첨가하고, 혼합물을 1 시간 동안 교반하였다. 3 mL의 아세톤을 첨가한 다음, 혼합물을 포화 수성 중탄산나트륨 용액에 부었다. 이를 AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/메탄올/NH₄OH 혼합물 (95/5/0.5 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 이로써 197 mg의 4-{[5-(2,6-디플루오로페닐)-7-(히드록시메틸)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드 (황색 발포체)를 수득하였다.

단계 2: 194 mg의 4-{[5-(2,6-디플루오로페닐)-7-(히드록시메틸)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드를 25 mL의 DCM에 도입하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 1.9 mL의 TFA를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2 시간 30 분 동안 교반하였다. 이를 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 50 mL의 물에 녹이고, 2.5 mL의 7.5M 수성 암모니아 용액으로 중화시켰다. 이를 에틸 아세테이트로 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/메탄올/NH₄OH 혼합물 (90/10/1 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 이로써 28 mg의 4-{[5-(2,6-디플루오로페닐)-7-(히드록시메틸)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드를 수득하였다.

실시예 28 4-{[5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드

단계 1: 실시예 24의 단계 3의 절차를 이용하여, 310 mg의 3-브로모-5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린을 8 mL의 1,4-디옥산에 도입하였다. 혼합물을 통해 아르곤을 10 분 동안 버블링시킨 후, 244 mg의 2-메틸프로판-2-일 4-아미노피페리딘-1-카르복실레이트, 755 mg의 탄산세슘, 63 mg의 9,9-디메틸-4,5-비스(디페닐포스피노)크산텐 및 20 mg의 팔라듐(II) 아세테이트를 첨가하였다. 혼합물을 3 시간 동안 환류 하에 가열하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/메탄올 혼합물 (90/10 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 340 mg의 2-메틸프로판-2-일 4-{[5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-카르복실레이트 (황색 고체)를 수득하였다.

단계 2: 340 mg의 2-메틸프로판-2-일 4-{[5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-카르복실레이트를 16 mL의 메탄올 및 1.5 mL의 THF에 도입하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 2.7 mL의 디옥산 중 염산의 4N 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 5 시간 동안 교반하였다. 이를 200 mL의 포화 중탄산나트륨 용액에 부은 다음, 에틸 아세테이트로 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/메탄올/수성 암모니아 혼합물 (90/10/1 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 180 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-N-(피페리딘-4-일)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-아민 (황색 고체)을 수득하였다.

단계 3: 180 mg의 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-N-(피페리딘-4-일)-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-아민, 2 mL의 DME 및 41 mg의 술파미드를 혼합하고, 150℃에서 1 시간 동안 마이크로웨이브 가열하였다. 혼합물을 물에 붓고, AcOEt로 추출하고, 포화 NaCl 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/메탄올/수성 암모니아 혼합물 (95/05/0.5 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 183 mg의 4-{[5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드 (황색 고체)를 수득하였다.

단계 4: 183 mg의 4-{[5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-2-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드를 24 mL의 DCM에 도입하였다. 빙조를 이용하여 0℃로 냉각시킨 후, 1.9 mL의 TFA를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2 시간 30 분 동안 교반하였다. 이를 RP 하에 농축시키고, 수득된 고체를 50 mL의 물에 녹이고, 2.5 mL의 7.5M 수성 암모니아 용액으로 중화시켰다. 이를 에틸 아세테이트로 추출하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, RP 하에 농축시켰다. 생성물을 DCM/메탄올/수성 암모니아 혼합물 (90/10/1 부피비)로 용리시키는 실리카 겔 (15-40 ㎛) 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 이로써 28 mg의 4-{[5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드 (연황색 고체)를 수득하였다.

HeLa 세포 (ATCC CCL-2)에 대한 IC ₅₀ 의 측정

이 시험은 점착성 종양 세포주를 이용하여 수행하였다. 그들의 증식을 세포 내에 도입된 ¹⁴C-티미딘의 양을 통해 측정하였다. 이들 세포를 배양 배지를 가진 96-웰 사이토스타(Cytostar) 플레이트에 넣고, 37℃ - 5％ CO₂에서 4 시간 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 시험 중인 생성물을 첨가하고, 플레이트를 인큐베이터에서 교체하였다. 처리 72 시간 후, ¹⁴C-티미딘을 배지에 첨가한 다음, 세포를 24 시간 동안 인큐베이션하였다. ¹⁴C-티미딘의 도입은 이들 24 시간의 "펄스" 이후에 마이크로베타(MicroBeta) 판독기 (퍼킨 엘머(Perkin Elmer))를 이용하여 측정하였다. 세포를 시험 중인 생성물로 처리한 총 시간은 96 시간이었다.

각각의 검정의 경우, 플레이트를 사용된 세포 농도에서 제조하였다. 생성물을 이벌식으로 10가지 농도에서 시험하였다. 첫번째 농도는 보통 10 μM이지만, 희석 정도가 생성물의 활성 수준에 따라 달라질 수 있기 때문에, 상기 농도는 달라질 수 있다. 계열 희석을 순수한 DMSO 중에서 수행한 다음, 각각의 농도를 배양 배지로 희석하였다. 모든 생성물을 2가지 독립적인 검정으로 시험하였다.

사용된 물질

둘베코(Dulbecco) (깁코(Gibco) 11960-044)

불활성화된 소 태아 혈청 (FCS) (깁코 10500-056)

페니실린 - 스트렙토마이신 - 글루타민 (PSG) (깁코 10378-016)

96-웰 사이토스타 플레이트 (아머샴(Amersham) RPNQ0162)

DMSO (시그마(Sigma) D2650)

¹⁴C-티미딘 (NEN NEC-568)

<표 I>

Claims

염기 형태 또는 산 부가염 형태의 하기 화학식 I의 화합물.
<화학식 I>

상기 식에서,
ㆍ R₁은 1개 이상의 할로겐 원자에 의해 임의로 치환된 페닐 기를 나타내고;
ㆍ R₂는
- 수소 또는 할로겐 원자 또는 시아노 기;
- 기 -C(=O)Y (여기서, Y는 수소 원자 또는 기 -NH₂ 또는 -OR_a를 나타냄);
- 기 -C(=S)NH₂;
- 기 -C(=NH)NH-OH;
- 기 -CH₂OH 또는 -CH₂F;
- 기 -CH=N-OH;
- 기 -CH=CH₂ 또는 -C≡C-R_a;
- 기

를 나타내고;
여기서, R_a는 수소 원자 또는 (C₁-C₄)알킬 기를 나타내고;
ㆍ R₃은 수소 원자 또는 (C₁-C₄)알킬 기를 나타내고;
ㆍ R₄는 -NH₂, (C₁-C₄)알킬, (C₁-C₄)플루오로알킬 또는 (C₃-C₇)시클로알킬 기를 나타낸다.
제1항에 있어서, R₁이 2,6-디플루오로-페닐 기를 나타내고, R₃이 수소 원자를 나타내는 것을 특징으로 하는 화합물.
제1항에 있어서, R₂가 H, -C(=O)H, -C(=O)NH₂, -CH=N-OH, -CH₂OH, -CH=CH₂, -F, -C≡CH, -C(=O)OCH₃,-C(=S)NH₂, -CN, -C(=O)H,
로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제1항에 있어서, R₄가 -CH₃, -CH₂CH₃, -CF₃ 또는 시클로프로필 기로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복스아미드;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드 옥심;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-일]메탄올;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(트리플루오로메탄술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복스아미드;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-7-비닐-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-7-에티닐-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린;
ㆍ 메틸 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복실레이트;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보티오아미드;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(시클로프로필술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르보니트릴;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(시클로프로필술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복스아미드;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-N-히드록시-3-{[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복스이미드아미드;
ㆍ [5-(2,6-디플루오로페닐)-7-(플루오로메틸)-N-[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-아민;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복스아미드;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르브알데히드 옥심;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-{[1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일]아미노}-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-일]메탄올;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-3-[(1-술파모일피페리딘-4-일)아미노]-2H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-7-카르복스아미드;
ㆍ 4-({5-(2,6-디플루오로페닐)-7-[(E/Z)-(히드록시이미노)메틸]-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일}아미노)피페리딘-1-술폰아미드;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-N-[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]-7-(1H-피라졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-아민;
ㆍ 5-(2,6-디플루오로페닐)-N-[1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일]-7-(2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-아민;
ㆍ 4-{[7-시아노-5-(2,6-디플루오로페닐)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드;
ㆍ 4-{[5-(2,6-디플루오로페닐)-7-(히드록시메틸)-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드;
ㆍ 4-{[5-(2,6-디플루오로페닐)-7-플루오로-1H-피라졸로[4,3-c]이소퀴놀린-3-일]아미노}피페리딘-1-술폰아미드
로부터 선택된, 염기 형태 또는 산 부가염 형태의 화합물.
(i) 팔라듐 착체 및 임의로 염기의 존재 하에 하기 화합물 P₁ 및 P₂를 커플링시키고
<화학식 P₁>

<화학식 P₂>

(ii) 이전 단계 (i)로부터 수득된 생성물을 탈보호시키는 것을 포함하거나, 또는
(i') 하기 화학식 P'₄의 화합물을 R₄SO₂Cl과 반응시키고
<화학식 P'₄>

(상기 식들에서, PG는 [2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸 (SEM) 또는 SO₂NMe₂를 나타냄)
(ii') 이전 단계 (i')로부터 수득된 생성물을 탈보호시키는 것을 포함하는,
하기 화학식 I의 화합물의 제조 방법.
<화학식 I>

(상기 식에서, R₁, R₃ 및 R₄는 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같고, X는 수소 또는 불소 원자 또는 기 시아노, -C(=O)H, -CH=CH₂, -C≡C-SiMe₃, -COOR_a (여기서, R_a는 수소 원자 또는 (C₁-C₄)알킬 기를 나타냄), 또는 기
를 나타냄)
화학식
의 화합물 (상기 식에서, X는 기 -CN, -CHO, -CH₂OH, -C≡CH 또는 -C≡C-SiMe₃을 나타내고, A는 수소 원자, [2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸 (SEM) 또는 SO₂NMe₂를 나타냄)로부터,
(i) ㆍ 기 X = -CN을 기 R₂ = -C(=O)NH₂ 또는 -C(=O)OH로 가수분해시키고;
ㆍ 암모늄 술피드의 존재 하에 마이크로웨이브에 의해 기 X = -CN을 기 R₂ = -C(=S)NH₂로 전환시키고;
ㆍ 기 X = -CN을 기 R₂ = -C(=O)H로 환원시키고;
ㆍ NH₂OH의 존재 하에 기 X = -C(=O)H를 기 R₂ = -CH=N-OH로 전환시키고;
ㆍ 기 X = -C(=O)H를 기 R₂ = -CH₂OH로 환원시키고;
ㆍ 기 X = -C≡C-SiMe₃을 기 R₂ = -C≡CH로 전환시키고;
ㆍ 기 X = -CH₂OH를 기 R₂ = -CH₂F로 불소화시키고;
ㆍ 트리메틸실릴 아지드 N₃SiMe₃의 존재 하에 고리부가에 의해 기 X = -C≡CH를 기 R₂ =
로 전환시키고;
(ii) 적절한 경우, 이전 단계 (i)에서 수득된 생성물을 탈보호시키는 것을 포함하는, 하기 화학식 I의 화합물의 제조 방법.
<화학식 I>

(상기 식에서, R₁, R₃ 및 R₄는 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같고, R₂는 -C(=O)NH₂, -C(=S)NH₂, -C(=O)H, -CH=N-OH, -CH₂OH, -CH₂F, -C≡CH,
기 중 하나를 나타냄)
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 화합물을 포함하는 항암제.
하기 화학식의 화합물.

또는

상기 식에서,
ㆍ R₁, R₂, R₃ 및 R₄는 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같고;
ㆍ X는 수소 또는 불소 원자, 기 시아노, -C(=O)H, -CH=CH₂, -C≡C-SiMe₃, -C≡CH, -COOR_a (여기서, R_a는 수소 원자 또는 (C₁-C₄)알킬 기를 나타냄) 또는 기
를 나타내고;
ㆍ PG는 [2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸 (SEM) 또는 SO₂NMe₂를 나타내고;
ㆍ B는 수소 원자 또는 tert-부틸 카르바메이트 (BOC)를 나타낸다.
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