KR101670555B1 - 락토코커스 중앙젠시스를 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물 - Google Patents

락토코커스 중앙젠시스를 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR101670555B1
KR101670555B1 KR1020140181341A KR20140181341A KR101670555B1 KR 101670555 B1 KR101670555 B1 KR 101670555B1 KR 1020140181341 A KR1020140181341 A KR 1020140181341A KR 20140181341 A KR20140181341 A KR 20140181341A KR 101670555 B1 KR101670555 B1 KR 101670555B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
lactococcus
cheese
cream cheese
chungangensis
acetaldehyde
Prior art date
Application number
KR1020140181341A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20160073454A (ko
Inventor
김원용
최우진
콘컷 메이티야
조성림
Original Assignee
중앙대학교 산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 중앙대학교 산학협력단 filed Critical 중앙대학교 산학협력단
Priority to KR1020140181341A priority Critical patent/KR101670555B1/ko
Priority to EP15854493.2A priority patent/EP3222157B1/en
Priority to CN201580071117.1A priority patent/CN107105685B/zh
Priority to US15/522,779 priority patent/US10092605B2/en
Priority to PCT/KR2015/011483 priority patent/WO2016068612A1/ko
Publication of KR20160073454A publication Critical patent/KR20160073454A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101670555B1 publication Critical patent/KR101670555B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C19/00—Cheese; Cheese preparations; Making thereof
    • A23C19/06—Treating cheese curd after whey separation; Products obtained thereby
    • A23C19/068—Particular types of cheese
    • A23C19/076—Soft unripened cheese, e.g. cottage or cream cheese
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/742—Spore-forming bacteria, e.g. Bacillus coagulans, Bacillus subtilis, clostridium or Lactobacillus sporogenes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/853—Lactobacillus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Dairy Products (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

본 발명은 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물에 관한 것으로, 상세하게는 에탄올 및 아세트알데하이드 분해기능을 갖는 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)만을 사용하여 기능성 크림치즈를 제조하였고, 이 기능성 크림 치즈는 숙취해소용 기능성 건강 식품으로 사용됨이 바람직하며, 넓게는 에탄올 분해 산물인 아세트알데하이드를 분해함으로써 체내의 암을 유발할 가능성이 있는 아세트알데하이드의 축적을 최소화할 수 있다. 또한 시중의 크림 치즈에 비해 단가를 낮추기 위한 치즈 스타터로써 시중에 판매되는 크림 치즈와 차별화될 수 있다.

Description

락토코커스 중앙젠시스를 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물{Food composition for relieving hangover comprising Lactococcus chungangensis}
본 발명은 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물에 관한 것이다.
치즈는 수천 년 전부터 인간에게 알려진 발효식품이다. 현재 치즈의 종류는 1,400여 종 이상으로 알려져 있다. BC 6000년경 메소포타미아에 치즈와 비슷한 식품에 대한 기록이 있으므로 그 기원은 오래된 것으로 추측된다. 또한 BC 3000년경 스위스 코르테요 문화나 크레타섬의 미노아 문명 시대에 치즈 제조용인 목제기구의 출토가 있으므로 옛날부터 치즈가 이용된 것으로 생각된다. 1,400여 종류의 치즈가 있지만 서로 간에 비슷한 것들도 있고 아주 다른 것도 있는데 이는 형태, 크기, 숙성기간, 사용하는 원유, 첨가물, 포장법 그리고 제조지역에 따라 달라진다. 코덱스(Codex)에서는 계속해서 생산이 되는 치즈의 품질규격을 검토해 나가면서 개정해 나가고 있다. 일반적으로 치즈에는 단백질과 지방이 20~30%씩 들어 있으며, 카티지나 크림치즈는 단백질보다 지방함량이 더 많다. 숙성이 된 치즈는 그 성분이 유산균 등의 효소의 영향으로 소화나 흡수가 되기 쉬운 형태로 변해 있다. 그 밖에 칼슘, 인 황 등 무기질과 비타민 A, B 등의 함유량도 많아 미용에도 좋으며, 성장하는 어린이는 물론 소화기관이 약한 환자나 노인들의 영양식품으로 적극 추천할만한 발효 식품이다.
크림치즈는 이름 그대로 크림타입의 치즈로 텁텁한 맛과 냄새의 치즈 본연의 성질을 갖지 않는다. 흰색의 부드러운 크림 덩어리 형태로 요구르트가 발효되는 중간과정에서나 볼 수 있는 새콤한 맛과 고소한 맛을 지니며, 식감이 부드러운 것을 특징으로 한다. 크림치즈는 각종 유산균을 포함한 스타터와 응유효소를 가하여 생긴 커드를 가온 및 분리한 것으로 수분함량이 높기 때문에 저장조건이 까다롭고 이렇게 생산된 크림치즈는 고비용으로 판매되고 있는 실정이다.
한편, 음주 후 다음날 느끼는 숙취는 신체 건강은 물론 삶의 질까지 떨어뜨리는 원인이 된다. 술을 마시고 난 다음날이면 대부분의 사람들은 속 쓰림과 구토, 심한 두통에 시달리게 된다. 술마다 약간의 차이는 있지만 소주를 기준으로 에탄올 1g당 7.1kcal의 열량을 가지며, 다른 영양소는 거의 없다. 음주로 흡수된 에탄올은 2∼10%만이 신장이나 폐를 통해 소변이나 내쉬는 호흡으로 체외로 배출되고, 나머지 에탄올의 90% 이상은 빠른 속도로 간에서 대사된다. 간에서 분해되는 에탄올은 아세트알데히드를 생성하고 다시 아세트산으로 변화돼 물과 탄산가스로 분해된다. 이때 생기는 아세트알데히드가 얼굴을 붉게 하고 심장을 두근거리게 하며 두통과 위통을 유발시키는, 숙취의 원인이 된다. 잦은 음주는 알코올을 분해하는 간에 큰 무리를 주는 주요 원인이다.
이와 같이 음주 후 나타나는 숙취를 해소하기 위하여 예로부터 콩나물, 북어, 녹두 등이 음주 후의 숙취 해소용 음식으로 이용되어 왔다. 이외에도 숙취해소와 관련하여 많은 식품들이 알려져 있으나, 이는 민간 요법 또는 고전 한의서에 기술된 원료 및 효능을 바탕으로 의존하고 있어 과학적 접근이 부족한 실정이다.
한국공개특허공보 제10-2013-0100036호 (2013.09.09)
본 발명의 목적은 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물을 제공하는데 있다.
본 발명은 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 배양한 후, 우유와 혼합하여 숙취개선용 크림치즈를 제조하는 방법을 제공한다.
본 발명은 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물에 관한 것으로, 상세하게는 에탄올 및 아세트알데하이드 분해기능을 갖는 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)만을 사용하여 기능성 크림치즈를 제조하였고, 이 기능성 크림 치즈는 숙취해소용 기능성 건강 식품으로 사용됨이 바람직하며, 넓게는 에탄올 분해 산물인 아세트알데하이드를 분해함으로써 체내의 암을 유발할 가능성이 있는 아세트알데하이드의 축적을 최소화할 수 있다. 또한 시중의 크림 치즈에 비해 단가를 낮추기 위한 치즈 스타터로써 시중에 판매되는 크림 치즈와 차별화될 수 있다.
도 1은 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 이용하여 크림 치즈를 제조한 것이다.
도 2는 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈를 마우스 대식세포인 RAW 264.7 세포에 처리하여 세포 독성 평가를 확인한 것이다.
도 3은 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 포함하는 배양물을 In vitro 방법을 통하여 알코올 디하이드로게나아제(ADH) 활성을 측정한 것이다.
도 4는 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 포함하는 배양물을 In vitro 방법을 통하여 아세트알데하이드 디하이드로게나아제(ALDH) 활성을 측정한 것이다.
도 5는 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈를 In vitro 방법을 통하여 알코올 디하이드로게나아제(ADH) 활성을 측정한 것이다.
도 6은 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈를 In vitro 방법을 통하여 아세트알데하이드 디하이드로게나아제(ALDH) 활성을 측정한 것이다.
도 7은 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 이용하여 만든 크림 치즈를 마우스에 경구 투여하여 혈중 알코올의 농도를 측정한 것이다.
도 8은 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 이용하여 만든 크림 치즈를 마우스에 경구 투여하여 혈중 아세트알데하이드의 농도를 측정한 것이다.
본 발명에서는 에탄올 및 아세트알데하이드 분해기능을 갖는 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)만을 사용하여 기능성 크림치즈를 제조하였고, 이 기능성 크림 치즈는 숙취해소용 기능성 건강 식품으로 사용됨이 바람직하며, 넓게는 에탄올 분해 산물인 아세트알데하이드를 분해함으로써 체내의 암을 유발할 가능성이 있는 아세트알데하이드의 축적을 최소화할 수 있다. 또한 시중의 크림 치즈에 비해 단가를 낮추기 위한 치즈 스타터로써 시중에 판매되는 크림 치즈와 차별화될 수 있다.
본 발명은 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)(KCTC 12684BP) 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물을 제공한다. 바람직하게는, 상기 배양액은 25 내지 37℃에서 24시간 내지 48시간 동안 배양시킬 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상세하게는, 상기 식품조성물은 에탄올 분해 활성 또는 아세트알데히드 분해 활성을 가져 숙취를 개선할 수 있다.
본 발명의 조성물은 본 발명에 따른 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 생균, 건조균, 이의 배양액 또는 발효물을 유효성분으로 함유할 수 있으며, 상기 배양액 또는 발효물은 본 발명에 따른 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 적합한 액체 배지에서 배양한 배양액 자체, 상기 배양액을 여과 또는 원심분리하여 균주를 제거한 여액(여과액 또는 원심분리한 상등액) 등을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.
또한, 본 발명은 식품이나 발효제품으로 활용될 수 있으며, 상기 식품 또는 발효제품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료 및 비타민 복합제 등이 있고, 상기 발효제품은 햄 및 소시지와 같은 발효육제품, 발효생식제품, 발효유제품, 김치 등을 포함한다. 본 발명의 유산균을 이용한 발효제품은 당업계에 공지된 통상의 방법에 따라 제조될 수 있다. 바람직하게는 본 발명의 일 실시예로 상기 식품은 치즈, 특히 크림치즈일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서, "스타터(starter)"란 발효물을 제조하는 경우에 사용하는 미생물 배양액을 말한다. 따라서 스타터 미생물의 종류는 그 제품의 특성을 결정하게 되며 제품의 품질에 중요한 영향을 미친다. 미생물 중에서 스타터로 사용되고 있는 것은 박테리아, 곰팡이, 효모 등을 들 수 있으며, 이것을 단독 혹은 혼합하여 사용할 수 있다.
또한, 본 발명은 (1) 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)(KCTC 12684BP) 또는 이의 배양액을 우유에 접종하여 배양하는 단계; (2) 상기 (1) 단계에서 배양된 배양물을 저온 살균하는 단계; (3) 상기 저온 살균한 배양물을 우유와 혼합하여 가열하는 단계; 및 (4) 상기 가열하여 얻어진 치즈에서 수분을 제거하는 단계를 포함하는 숙취개선용 크림치즈 제조방법을 제공한다.
이하에서는, 본 발명을 한정하지 않는 실시예에 따라 본 발명을 상세히 설명한다. 본 발명의 하기 실시예는 본 발명을 구체화하기 위한 것일 뿐 본 발명의 권리범위를 제한하거나 한정하는것이 아님은 물론이다. 따라서, 본 발명의 상세한 설명 및 실시예로부터 본 발명이 속하는 기술분야의 전문가가 용이하게 유추할 수 있는 것은 본 발명의 권리범위에 속하는 것으로 해석된다.
< 실험예 >
하기의 실험예들은 본 발명에 따른 각각의 실시예에 공통적으로 적용되는 실험예를 제공하기 위한 것이다.
1. 락토코커스 중앙젠시스 ( Lactococcus chungangensis ) 배양
락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)는 본 실험실에서 분리한 균주로서, 활성화된 슬러지 거품에서 분리되었다. 상기 균주는 Korean Collection for Type Cultures(KCTC)에 기탁되었다.
락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 대두카제인 배지(TSB: Tryptic Soy Broth) 배양액에 접종하고, 30℃ shaking incubator에서 24시간 배양하였다. 각각의 세포밀도는 microplate reader(model Infinite®F200, Tecan, Mannedorf, Switzerland)를 이용하여 측정하였고, 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 균주는 4×108 세포의 농도를 이용하여 산성화된 우유에 접종하였다.
2. 락토코커스 중앙젠시스( Lactococcus chungangensis )를 이용한 크림 치즈 제조
크림치즈 스타터로 사용될 유산균 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 산성화된 우유에 접종하여 48시간 동안 배양하였다. 배양 후, 68℃에서 30분 동안 저온 살균하여 식힌 우유와 섞어 70℃에서 5분간 가열하였다. 가열 후 생긴 치즈의 수분을 제거하기 위해 천을 이용해 커드만을 얻었고, 0.5% 소금을 이용하여 수분을 제거하여 치즈를 완성하였다(도 1). 이렇게 완성된 치즈는 분말형태로 보관하기 위해 동결건조를 실시하여 추가 실험이 있기까지 4℃에서 보관하였다.
3. 락토코커스 가비에 ( Lactococcus garvieae ), 락토코커스 서브스페시스 홀디니애( Lactococcus lactis subsp . hordiniae ), 락토코커스 서브스페시스 트럭 태( Lactococcus lactis subsp . tructae ) 및 락토코커스 타이완엔시스 ( Lactococcus taiwanensis ) 배양
락토코커스 가비에(Lactococcus garvieae -KCTC3772T) 및 락토코커스 서브스페시스 홀디니애(Lactococcus lactis subsp. hordiniae -KCTC3768)는 KCTC(Korean Collection for Type Cultures)에서 분양받아 사용하였다. 락토코커스 서브스페시스 트럭태(Lactococcus lactis subsp. tructae -NBRC110453) 및 락토코커스 타이완엔시스(Lactococcus taiwanensis -NBRC109049)는 NBRC(National Biological Resource Center)에서 분양받아 사용하였다.
락토코커스 가비에(Lactococcus garvieae), 락토코커스 서브스페시스 홀디니애(Lactococcus lactis subsp. hordiniae), 락토코커스 서브스페시스 트럭태(Lactococcus lactis subsp. tructae) 및 락토코커스 타이완엔시스(Lactococcus taiwanensis)를 대두카제인 배지(TSB: Tryptic Soy Broth) 배양액에 접종하고, 30℃ shaking incubator에서 24시간 배양하였다. 각각의 세포밀도는 microplate reader(model Infinite F200, Tecan, Mannedorf, Switzerland)를 이용하여 측정하였고, 상기 균주들은 4×108 세포의 농도를 이용하여 산성화된 우유에 접종하였다.
4. 락토코커스 가비에 ( Lactococcus garvieae ), 락토코커스 서브스페시스 홀디니애( Lactococcus lactis subsp . hordiniae ), 락토코커스 서브스페시스 트럭태( Lactococcus lactis subsp . tructae ) 및 락토코커스 타이완엔시스( Lactococcus taiwanensis )를 이용한 크림 치즈 제조
크림치즈 스타터로 사용될 유산균 락토코커스 가비에(Lactococcus garvieae), 락토코커스 서브스페시스 홀디니애(Lactococcus lactis subsp. hordiniae), 락토코커스 서브스페시스 트럭태(Lactococcus lactis subsp. tructae) 및 락토코커스 타이완엔시스(Lactococcus taiwanensis)를 산성화된 우유에 접종하여 48시간 동안 배양하였다. 배양 후, 68℃에서 30분 동안 저온 살균하여 식힌 우유와 섞어 70℃에서 5분간 가열하였다. 하지만 상기 균주들로는 치즈를 만들기 위한 커드를 얻을 수 없었고, 크림 치즈 제조에 실패하였다.
5. 가스크로마토그래피( Gas chromatography )를 이용한 크림 치즈의 지방산 측정
상기 실험방법에 의거하여 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)로 만들어진 크림치즈로부터 휘발성 지방산을 검출하여 생산량을 비교하였다. 상기 크림 치즈를 동결건조 후 곱게 가루로 만들어 사용하였다. 메틸화 혼합물(Methylation mixture)(MeOH:Benzen:DMP:H2SO4=39:20:5:2)를 340㎕, 헵탄(heptane) 200㎕를 넣어 교반한 후 80℃에서 2시간 추출하였다. 유기산의 분석은 FID가 장착된 가스크로마토그래피에서 수행하였다. 컬럼(Column)은 DB-Wax(Agilent, 30mm*0.25mm*0.25um)를 이용하였으며, 분석조건은 오븐온도가 50℃에서 분당 25℃로 상승하여 230℃까지 올리며, 주입구 및 검출기의 온도는 250℃로 설정하였다.
6. 크림 치즈의 RAW 264.7 세포 독성 평가
상기에서 수득한 크림 치즈의 세포 독성 측정을 수행하였다. 마우스 대식세포인 RAW 264.7 세포를 세포 독성 측정 실험에 사용하였다. RAW 264.7 세포는 1주일에 3-4회 계대하였으며, 배지는 20/ml 젠타마이신 용액과 10% FBS(fetal bovine serum)를 함유한 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium) 배지를 이용하여 37℃, 5% CO2의 환경에서 배양하였다. 이렇게 배양된 세포를 이용하여 1×105 세포/well의 농도로 96-well plate에 분주하고, 24시간 동안 배양하였다. FBS가 함유되지 않은 새로운 DMEM 배지에 각각 크림 치즈의 최종 농도가 10mg/ml이 되도록 녹여 세포주에 처리한 후 24시간 동안 배양하였다. 세포주의 생존율을 측정하기 위해 MTT[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide] 시약을 사용하여 microplate reader로 590nm에서 흡광도를 측정하였다. 또한 세포의 손상을 측정하기 위해 LDH(lactate dehydrogenase)의 효소 측정을 수행하였다. 세포에서 방출되는 LDH의 양은 microplate reader로 430nm에서 흡광도를 측정하였다.
7. 락토코커스 중앙젠시스( Lactococcus chungangensis )를 포함하는 배양물의 알코올 디하이드로게나아제( ADH ) 및 아세트알데하이드 디하이드로게나아제 ( ALDH ) 활성 측정
상기에서 선발된 세포독성이 없는 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 포함하는 배양물에 대하여 다음의 방법으로 알코올 및 아세트알데하이드 분해능을 측정하였다. 유산균을 포함하는 배양물의 알코올 디하이드로게나아제(ADH) 활성 측정은 Lebsack과 Bostian의 방법을 변형하여 측정하였다. ADH 활성은 microplate reader를 이용하여 340nm에서 흡광도를 측정하여 대조군에 대한 상대적 활성을 비교하였다. 대조군은 ADH를 사용하여 비교 분석하였다. 반응액 조성은 1.0 M Tris/HCl buffer(pH 8.8), 20 mM NAD+, 0.2 M 에탄올, 증류수로 총 부피가 3 ml가 되게 첨가하고, 30 항온수조에서 5분간 반응시킨 뒤 상등액을 회수하여 340nm에서 흡광도를 측정하였다. 유산균을 포함하는 배양물의 아세트알데하이드 디하이드로게나아제(ALDH) 활성 측정은 Tottmar의 방법을 변형하여 측정하였다. ALDH 활성 또한 microplate reader를 이용하여 340nm에서 흡광도를 측정하여 대조군에 대한 상대적 활성을 비교하였다. 대조군은 ALDH를 사용하여 비교 분석하였다. 반응액 조성은 1.0 M Tris/HCl buffer(pH 8.0), 20 mM NAD+, 3.0 M KCl, 0.33 M 2-mercaptoehanol, 1.0 M 아세트알데하이드, 증류수로 총 부피가 3 ml가 되게 첨가하고, 30 항온수조에서 5분간 반응시킨 뒤 상등액을 회수하여 340nm에서 흡광도를 측정하였다.
8. 크림 치즈의 알코올 디하이드로게나아제 ( ADH ) 및 아세트알데하이드 디하이드로게나아제( ALDH ) 활성 측정
상기에서 선발된 세포독성이 없는 크림 치즈에 대해서도 상기 유산균을 포함한 배양물로 측정한 것과 같은 방법으로 알코올 및 아세트알데하이드 분해능을 측정하였다.
9. 락토코커스 중앙젠시스( Lactococcus chungangensis )를 이용하여 만든 크림 치즈를 마우스에 경구 투여하여 알코올 및 아세트알데하이드의 농도 측정
본 발명에서는 샘타코(경기도, 오산)로부터 구입한 생후 5주령 Imprinting Control Region(ICR) 마우스를 1주일간 고형배합사료와 물로 예비 사육시킨 후 실험을 수행하였다. 상기에서 선발된 알코올 및 아세트알데하이드 분해능이 가장 우수한 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)로 만든 크림 치즈에 대하여 알코올성 숙취에 미치는 영향을 알아보기 위해서 알코올 섭취 후 시간경과(1, 3, 5, 7 시간)에 따른 혈중 알코올 농도 및 아세트알데하이드 농도를 측정하였다. 동물실험은 증류수를 경구 투여한 정상군, 알코올을 경구 투여한 대조군, 알코올과 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)로 만든 크림 치즈를 경구 투여한 실험군으로 각 군당 10마리씩 나누어 수행하였다. 알코올은 22%(15ml/kg body wt.)경구 투여하고, 양성 대조군은 알코올과 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)로 만든 크림 치즈(100mg/kg body wt.)를 함께 경구 투여하였다. 투여 후, 1시간, 3시간, 5시간, 7시간 후에 혈액을 채취하여 실온에서 30분간 방치 후 4℃에서 10분간 방치하고 1,500 rpm에서 15분간 원심분리하여 상층액을 분리하였다. 0.3 M potassium phosphate buffer(pH 9.0)와 49 mM NAD+를 혼합한 후 혈액 샘플을 첨가하여 20℃에서 5분간 반응시킨 후 microplate reader를 이용하여 340nm에서 흡광도를 측정하였다 (A1). 또한 이상의 혼합액에 ADH 또는 ALDH 50를 첨가하여 20℃에서 5분간 반응시킨 후 340nm에서 흡광도를 측정하였다 (A2). 이를 바탕으로 혈중 알코올의 농도는 아래의 공식에 의해 정량하였다.
Concentration = 0.7259/3.6×△A
△A = sample(A2-A1)-blank(A2-A1)
또한, 혈중 아세트알데하이드의 농도는 아래의 공식에 의해 정량하였다.
Concentration = 0.7158/3.6×△A
△A = sample(A2-A1)-blank(A2-A1)
< 실시예 >
1. 가스크로마토그래피( Gas chromatography )를 이용한 락토코커스 중앙젠시스( Lactococcus chungangensis ) 크림 치즈의 지방산 분석
가스크로마토그래피를 이용하여 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈의 지방산 성분을 분석한 결과, Methyl palmitate 성분이 가장 많이 발견되었고, 그 다음으로 Oleic acid, Methyl pentadecanoate, Octadecanoic acid, Methyl myristate 순으로 차이를 보였다. 이러한 성분의 비중은 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈의 풍미를 결정지을 수 있다(표 1).
Flavor compounds 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈
(mg/g)
Octanoic acid 1.50
Methyl decanoate 3.96
Methyl laurate 6.82
Methyl myristate 19.93
Methyl myristoleate 1.30
Methyl pentadecanoate 30.03
Methyl palmitate 56.00
Methyl palmitoleate 2.22
Octadecanoic acid 26.88
Oleic acid 40.65
Linoleic acid 4.31
Linolenic acid 0.31
Methyl heneicosanoate 0.38
cis-8,11,14-Eicosatrieonic acid methyl ester 0.29
cis-11,14,17-Eicosatrienoic acid methyl ester 0.25
2. 락토코커스 중앙젠시스 ( Lactococcus chungangensis ) 크림 치즈를 처리한 RAW 264.7 세포의 독성 평가
락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈를 처리한 RAW 264.7 세포의 생존율은 감소하지 않았으며 LDH의 방출 양은 현저히 낮아 세포 손상이 없었음을 확인하였다. 따라서 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈는 세포 독성을 없음을 확인하였다(도 2).
3. 락토코커스 중앙젠시스( Lactococcus chungangensis )를 포함하는 배양물의 알코올 디하이드로게나아제( ADH ) 및 아세트알데하이드 디하이드로게나아제 ( ALDH ) 활성 측정
In vitro 연구는 알코올 대사 과정에 발생하는 중요한 두 가지 화학반응인 ADH와 ALDH 활성을 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 포함하는 배양물을 평가하였다. 도 3에 도시된 바와 같이 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 포함하는 배양물의 ADH 활성 결과, 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 포함하는 배양물이 대조군으로 사용한 ADH 보다 활성은 낮았지만, 66.6%로 높은 활성을 보였다. 또한 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 포함하는 배양물의 ALDH 활성을 확인한 결과, 도 4에 도시된 바와 같이 대조군으로 사용한 ALDH 활성보다 활성은 낮았지만, 62.8%로 높은 활성을 보였다. 이러한 결과는 더 넓게 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)가 숙취 해소 및 간의 기능을 돕는 기능성 식품으로 사용 가능함을 나타내는 것이다.
4. 락토코커스 중앙젠시스 ( Lactococcus chungangensis ) 크림 치즈의 알코올 디하이드로게나아제( ADH ) 및 아세트알데하이드 디하이드로게나아제 ( ALDH ) 활성 측정
In vitro 연구는 알코올 대사 과정에 발생하는 중요한 두 가지 화학반응인 ADH와 ALDH 활성을 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈를 평가하였다. 도 5에 도시된 바와 같이 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈의 ADH 활성 결과, 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)를 이용하여 만든 크림치즈가 대조군으로 사용한 ADH 보다 0.4% 더 높은 활성을 보였다. 또한 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈의 ALDH 활성을 확인한 결과, 도 6에 도시된 바와 같이 대조군으로 사용한 ALDH 활성보다 활성은 낮았지만, 82.1%로 높은 활성을 보였다. 이러한 결과는 더 넓게 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈가 숙취 해소 및 간의 기능을 돕는 기능성 식품으로 사용 가능함을 나타내는 것이다.
5. 락토코커스 중앙젠시스 ( Lactococcus chungangensis ) 크림 치즈를 마우스에 경구 투여하여 알코올 및 아세트알데하이드의 농도 측정
락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈의 숙취 개선 효능을 확인하기 위하여 흰쥐를 이용하여 혈중 알코올과 아세트알데하이드의 농도를 측정하였다. 도 7에 도시된 바와 같이 혈중 알코올 농도는 음주 후 3시간이 될 무렵 최고치에 도달하였으며, 음주 5시간 뒤 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)로 만든 크림 치즈와 함께 알코올 섭취한 군이 알코올 섭취군에 비하여 25% 혈중 알코올 농도가 감소한 것을 확인하였다. 또한 도 8에 도시된 바와 같이 혈중 아세트알데하이드의 농도는 음주 후 1시간이 될 무렵 최고치에 도달하였으며, 음주 5시간 뒤 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)로 만든 크림 치즈와 함께 알코올 섭취한 군이 알코올 섭취군에 비하여 18% 혈중 아세트알데하이드 농도가 감소한 것을 확인하였다. 이상의 결과를 볼 때 본 발명에서 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis) 크림 치즈는 숙취의 주요 원인으로 알려진 혈중 아세트알데하이드의 농도를 감소시킴으로써 알코올 섭취 후 신체에 나타나는 유해한 증상들을 감소시킬 수 있을 것으로 사료되며, 기능성 식품으로 사용 가능함을 보여 주었다.
한국생명공학연구원 KCTC12684BP 20140926

Claims (6)

  1. 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)(KCTC12684BP) 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 식품조성물은 에탄올 분해 활성을 가진 것을 특징으로 하는 숙취개선용 식품조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 식품조성물은 아세트알데히드 분해 활성을 가진 것을 특징으로 하는 숙취개선용 식품조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 식품은 치즈, 요거트, 버터, 크림, 아이스크림, 유산균 음료, 캐피어, 김치 또는 유제품인 것을 특징으로 하는 숙취개선용 식품조성물.
  5. 제4항에 있어서, 상기 치즈는 크림치즈인 것을 특징으로 하는 숙취개선용 식품조성물.
  6. (1) 락토코커스 중앙젠시스(Lactococcus chungangensis)(KCTC12684BP) 또는 이의 배양액을 우유에 접종하고 배양하는 단계;
    (2) 상기 (1) 단계에서 배양된 배양물을 저온 살균하는 단계;
    (3) 상기 저온 살균한 배양물을 우유와 혼합하여 가열하는 단계; 및
    (4) 상기 가열하여 얻어진 치즈에서 수분을 제거하는 단계를 포함하는 숙취개선용 크림치즈 제조방법.
KR1020140181341A 2014-10-29 2014-12-16 락토코커스 중앙젠시스를 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물 KR101670555B1 (ko)

Priority Applications (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020140181341A KR101670555B1 (ko) 2014-12-16 2014-12-16 락토코커스 중앙젠시스를 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물
EP15854493.2A EP3222157B1 (en) 2014-10-29 2015-10-29 Food composition, containing lactococcus strain as active ingredient, for alleviating hangover
CN201580071117.1A CN107105685B (zh) 2014-10-29 2015-10-29 用于缓解宿醉的含有乳球菌属菌株作为活性成分的食品组合物
US15/522,779 US10092605B2 (en) 2014-10-29 2015-10-29 Food composition, containing Lactococcus strain as active ingredient, for alleviating hangover
PCT/KR2015/011483 WO2016068612A1 (ko) 2014-10-29 2015-10-29 락토코커스 균주를 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020140181341A KR101670555B1 (ko) 2014-12-16 2014-12-16 락토코커스 중앙젠시스를 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20160073454A KR20160073454A (ko) 2016-06-27
KR101670555B1 true KR101670555B1 (ko) 2016-10-31

Family

ID=56344142

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020140181341A KR101670555B1 (ko) 2014-10-29 2014-12-16 락토코커스 중앙젠시스를 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR101670555B1 (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2021006623A1 (ko) * 2019-07-09 2021-01-14 중앙대학교 산학협력단 신규한 락토코커스 중앙젠시스 cau 1447 균주

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2010207129A (ja) * 2009-03-10 2010-09-24 Horonobecho 低温ナチュラルチーズおよびその製造方法
KR101371648B1 (ko) * 2012-02-10 2014-03-07 매일유업주식회사 알코올 분해능이 우수한 락토바실러스 브레비스 및 그를 함유하는 조성물

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101517871B1 (ko) 2012-02-28 2015-05-07 재단법인 임실치즈과학연구소 원유와 산양유가 혼합된 믹스유를 이용한 까망베르 치즈의 제조방법

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2010207129A (ja) * 2009-03-10 2010-09-24 Horonobecho 低温ナチュラルチーズおよびその製造方法
KR101371648B1 (ko) * 2012-02-10 2014-03-07 매일유업주식회사 알코올 분해능이 우수한 락토바실러스 브레비스 및 그를 함유하는 조성물

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2021006623A1 (ko) * 2019-07-09 2021-01-14 중앙대학교 산학협력단 신규한 락토코커스 중앙젠시스 cau 1447 균주

Also Published As

Publication number Publication date
KR20160073454A (ko) 2016-06-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10092605B2 (en) Food composition, containing Lactococcus strain as active ingredient, for alleviating hangover
Freire et al. Nondairy beverage produced by controlled fermentation with potential probiotic starter cultures of lactic acid bacteria and yeast
Lee et al. Fermentation of coconut water by probiotic strains Lactobacillus acidophilus L10 and Lactobacillus casei L26
JP2003259835A (ja) 発酵製品の製造とその利用
AU2011300738B2 (en) Lactococcus lactis strain with high vitamin K2 production
AU2011290850B2 (en) Lactococcus lactis strain with high vitamin K2 production
Lee et al. Assessing the ability of silage lactic acid bacteria to incorporate and transform inorganic selenium within laboratory scale silos
TW201119584A (en) Lactic acid bacterium proliferation promoter
WO2018003900A1 (ja) 栄養状態改善に使用するための組成物
KR101723959B1 (ko) 락토코커스 라피노락티스를 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물
KR101670555B1 (ko) 락토코커스 중앙젠시스를 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물
KR101639393B1 (ko) 락토코커스 락티스 아종 락티스를 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물
KR20120040504A (ko) 프로바이오틱 락토바실루스 존소니이 아이디씨씨 9203을 이용한 발효울금의 제조방법
KR101718590B1 (ko) 락토코커스 푸지엔시스를 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물
CN103653107A (zh) 一种益生菌发酵猕猴桃汁的制备方法
KR101693945B1 (ko) 락토코커스 락티스 아종 크레모리스를 유효성분으로 포함하는 숙취개선용 식품조성물
Aleid Industrial biotechnology: date palm fruit applications
KR102604295B1 (ko) 생물전환된 쌍별귀뚜라미 발효물을 포함하는 식품조성물 및 이의 제조방법
WO2018003898A1 (ja) 軟骨再生促進用組成物
JP2002058425A (ja) 共役脂肪酸含有発酵食品及びその製造法
WO2017141879A1 (ja) 膵リパーゼ阻害用組成物及び膵リパーゼ阻害用組成物の製造方法
JP5413819B2 (ja) 肝機能改善剤およびその製造用ツール、ならびにこれらの利用
EP2463376B1 (en) Food and beverages for treating metabolic osteopathy
JP5077157B2 (ja) 機能性飲食品
KR101660382B1 (ko) 발효 홍화씨 분말을 이용한 홍화 음료 제조방법

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20191001

Year of fee payment: 4