KR101654793B1 - 토양 개선 및 환경 정화용 질소 고정력을 갖는 바실러스 서브틸리스 bk418 균주 및 이의 배양 방법 - Google Patents

토양 개선 및 환경 정화용 질소 고정력을 갖는 바실러스 서브틸리스 bk418 균주 및 이의 배양 방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 토양 개선용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 질소 고정력, 섬유소 분해능 및 항균 활성을 갖는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) BK418(KACC91903P) 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 토양 개선용 조성물에 관한 것이다.
환경 또는 대기 중에 존재하는 질소를 암모니아성 질소로 전환하여 토양을 개선하거나 작물에 질소를 공급할 수 있는 동시에, 토양 또는 수질 내에 존재하는 섬유소와 같은 난분해성 물질을 유기물로 변환하고, 항균작용으로 병원성 미생물을 억제시켜 토양 개선 작용을 하는 것을 특징으로 하는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) BK418(KACC91903P) 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 토양 개선용 조성물이며, 생장 에너지원으로 당밀만을 이용하여 배양할 수 있는 장점이 있다.

Description

토양 개선 및 환경 정화용 질소 고정력을 갖는 바실러스 서브틸리스 BK418 균주 및 이의 배양 방법 {Bacillus subtilis BK418 with nitrogen fixation for soil and environmental improvement and cultivation methods thereof}
본 발명은 질소 고정력을 갖는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) BK418 균주 및 이의 배양 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 환경 또는 대기 중에 존재하는 질소를 암모니아성 질소로 전환하여 토양을 개선하거나 작물에 질소를 공급할 수 있는 바실러스 서브틸리스 BK418 균주이며, 생장 에너지원으로 당밀만을 이용하여 배양할 수 있는 방법에 관한 것이다.
토양은 물질 순환과 더불어 식량공급은 물론 생태계를 지속적으로 유지할 수 있게 해주는 중요한 기능을 보유하고 있다. 이러한 기능은 토양의 물리적 특성과 더불어 생물학적 특성 특히 미생물의 작용에 크게 의존한다. 환경 내에 존재하는 미생물들 가운데 토양에 존재하는 다양한 미생물은 작물의 생장촉진, 물질순환 및 환경 정화 등 많은 부분에서 이용되고 있다. 특히 작물의 뿌리에서 많이 존재하는 근권미생물들은 작물과 공생체를 이루면서 공기 중의 질소를 고정할 수 있는 능력을 지닌 질소 고정세균들이 많이 존재하고 있기 때문에 질소 고정 능력을 지닌 다양한 미생물에 대한 분리 및 동정에 대한 연구가 다양하게 이뤄지고 있다.
생물이 살아가기 위해서 꼭 필요한 것은 바로 유전물질인 DNA와 단백질이며 필수적인 두 물질을 만드는데 꼭 필요한 원소가 바로 질소이다. 질소는 질소분자의 형태로 공기 중에 약 80%이상을 차지하고 있기 때문에 상당히 풍부한 자원이지만 질소 분자의 형태로는 DNA나 단백질을 만드는 데 이용할 수 없다. 질소분자는 질소원소가 삼중결합으로 연결된 것으로 상당히 그 결합이 강하기 때문에 자연적으로 결합이 끊어지지 않는다. 따라서 생물체는 꼭 필요한 데도 불구하고 이 질소분자의 형태로 이용하진 못한다. 그러나 안정한 형태의 질소분자는 뿌리혹 박테리아 또는 질소 고정세균에 의해 암모니아성 질소로 변환이 되고 변환이 된 암모니아성 질소는 작물들이 생장에 필요한 영양분으로 이용하게 된다. 질소 고정세균은 바로 이런 뿌리혹 박테리아 즉 리조븀속(Rhizobium)의 산소성 세균들을 칭한다.
생명이 다한 유기체가 토양에 들어오면 당, 셀룰로오스, 리그닌 등이 여러 종류의 미생물에 의해 점진적으로 분해된다. 유기물 중 당과 같이 분해가 되기 쉬운 물질이 이용된 후 점차적으로 헤미셀룰로오스, 셀룰로오스 그리고 리그닌이 분해되는 과정을 거치게 된다. 또한 토양미생물은 토양 내에 존재하는 각종 화학물질과 같은 오염원을 무해한 물질로 전환하여 환경을 자정하는 중요한 기능을 가지고 있다. 이러한 미생물의 역할이 토양생태계를 건전하게 유지하는 중요한 요인이 된다.
더불어 항균 활성이 우수한 미생물은 유용미생물의 성장을 촉진하고 병원성 미생물을 억제하여 토양미생물을 개선하여 토양생태계의 개선을 가져온다.
한편, 바실러스 서브틸리스는 토양에서 서식하며 바실러스(Bacillus) 속에 속하는 균으로서 그람 양성(Gram positive)의 아포 형성 균이다. 호기성이며, 내열성이 있다. 포도당과 같은 다양한 당류, 전분 등을 에너지원으로 대사하여, 메주나 청국장과 같은 발효 식품 제조에 이용되기도 하는 유기물 분해 미생물이다.
종래의 기술로서, 특허문헌 1은 복합 소화 효소 생산능을 가지고, 병원성 세균에 대한 항균 활성이 우수한 바실러스 서브틸리스 BK418(KACC91903P) 균주를 제안하고 있으나, 난분해성 물질의 분해능 및 항균 활성이 우수한 동시에 미생물이 대기 중에 존재하는 질소에 대한 질소 고정 능력을 가져 토양 개선 작용을 하는 바실러스 서브틸리스를 제시하지 못하고 있다.
1. 국내특허출원 10-2014-0023497호
본 발명은 상기와 같은 필요성에 따라 안출된 것으로서, 토양 또는 수질 내에 존재하는 섬유소와 같은 난분해성 물질을 유기물로 변환하고, 항균작용으로 병원성 미생물을 억제시키되, 대기 또는 환경 내에 존재하는 질소에 대한 고정 능력을 지녀 토양 개선 및 환경 정화 작용을 하는 바실러스 서브틸리스 BK418 균주 및 이의 배양물을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명은 상기 바실러스 서브틸리스 BK418 균주에 대해 단일 영양원으로 당밀을 이용한 새로운 배양 방법을 제공하고자 한다.
또한, 본 발명은 상기 바실러스 서브틸리스 BK418 균주 및 이의 배양물과 이를 유효성분으로 함유하는 환경 정화용 조성물 및 토양 개선용 조성물을 제공하고자 한다.
상기의 해결하고자 하는 과제를 위한 본 발명에 따른 토양 개선용 조성물은 질소 고정력, 섬유소 분해능 및 항균 활성을 갖는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) BK418(KACC91903P) 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 실시예로서, 상기 바실러스 서브틸리스 BK418(KACC91903P) 균주는 공기나 환경 내에 존재하는 질소를 암모니아성 질소로 변환하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 실시예로서, 상기 바실러스 서브틸리스 BK418(KACC91903P) 균주는 섬유소에 대하여 소화 효소 생산능을 가져 토양 또는 수질 내에 존재하는 섬유소와 같은 난분해성 물질을 유기물로 변환하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 실시예로서, 상기 바실러스 서브틸리스 BK418(KACC91903P) 균주는 병원성 미생물에 대하여 항균 활성을 가지는 것을 특징으로 한다.
상기의 해결하고자 하는 과제를 위한 본 발명에 따른 바실러스 서브틸리스 BK418(KACC91903P) 균주의 배양 방법은 상기 바실러스 서브틸리스 BK418(KACC91903P) 균주를 121℃에서 15분간 멸균된 TSB 배지에 접종하여 30℃, 180rpm의 조건에서 18시간 동안 배양하여 종균을 제조하는 단계, 증류수에 당밀을 포함하여 배양 배지를 제조하는 단계 및 상기 배양 배지에 1%의 상기 종균을 접종하여 30℃, 180rpm의 조건에서 1주 동안 배양하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 균주는 대기 또는 토양 내에 존재하는 유리 질소(free nitrogen)를 질소 고정효소에 의해 암모니아성 질소로 전환시키는 질소 고정 능력을 지니고 있다.
또한, 상기 바실러스 서브틸리스 BK418 균주는 토양 또는 수질 내에 존재하는 섬유소와 같은 난분해성 물질을 유기물로 변환하고, 항균작용으로 병원성 미생물을 억제시킬 수 있다.
또한, 상기 바실러스 서브틸리스 BK418 균주에 대해 단일 영양원으로 당밀을 이용하여 쉽고 간편한 새로운 배양 방법으로 배양할 수 있다.
또한, 상기 바실러스 서브틸리스 BK418 균주 및 이의 배양물과 이를 유효성분으로 함유하는 환경 정화용 조성물 및 토양 개선용 조성물을 제공할 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 NFB 고체 배지에서의 생장한 바실러스 서브틸리스 BK418 균주를 나타낸 사진.
도 2는 본 발명에 따른 바실러스 서브틸리스 BK418 균주의 상등액에 대한 네슬러 시약을 반응한 결과를 나타낸 사진.
도 3은 본 발명에 따른 바실러스 서브틸리스 BK418 균주의 상등액을 통한 단백질분해효소(protease), 전분분해효소(amylase) 및 섬유소분해효소(cellulase)의 활성 결과를 측정한 사진.
도 4는 본 발명에 따른 바실러스 서브틸리스 BK418 균주의 상등액의 대장균(Escherichia coli)에 대한 항균 활성을 측정한 결과를 나타낸 사진.
도 5는 본 발명에 따른 바실러스 서브틸리스 BK418의 16s rRNA의 염기서열.
도 6은 본 발명에 따른 바실러스 서브틸리스 BK418의 16s rRNA의 염기서열을 기초로 한 다른 세균(bacteria)과의 계통발생론적 관계를 나타내는 계통도.
이하 본 발명의 실시를 위한 구체적인 실시예를 도면을 참고하여 설명한다. 예시된 도면은 발명의 명확성을 위하여 핵심적인 내용만 확대 도시하고 부수적인 것은 생략하였으므로 도면에 한정하여 해석하여서는 아니 된다.
본 발명은 질소 고정력, 섬유소 분해능 및 항균 활성을 갖는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) BK418(KACC91903P)(이하, 'BK418') 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 토양 개선용 조성물을 제공한다.
상기 바실러스 서브틸리스 BK418은 농업유전자원센터(KACC)에 기탁번호 KACC91903P로 기탁되었다. 상기 바실러스 서브틸리스 BK418은 형태학적으로 그람 양성 간균에 해당하며, 바실러스 서브틸리스와 99%의 상동성을 가지는 균주이다.
도 5는 본 발명에 따른 바실러스 서브틸리스 BK418의 16s rRNA의 염기서열이고, 도 6은 본 발명에 따른 바실러스 서브틸리스 BK418의 16s rRNA의 염기서열을 기초로 한 다른 세균(bacteria)과의 계통발생론적 관계를 나타내는 계통도이다.
상기 도 5 및 서열목록에 나타낸 바와 같이, 16s rRNA 염기서열을 분석한 결과 1,433개의 염기로 확인되었다. 상기 도 6에 나타낸 바와 같이, 16S rRNA 염기서열을 이용하여 계통발생론적으로 분석한 결과 Bacillus subtilis strain D13(accession No: KC441757) 16s rRNA 유전자와 99%(1430/1431)의 유사율을 나타냈으므로 분리 균주를 바실러스 서브틸리스 (Bacillus subtilis) BK418로 명명하였다.
상기 바실러스 서브틸리스 BK418 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 토양 개선용 조성물은 질소 고정 능력을 가지고, 공기나 환경 내에 존재하는 질소를 암모니아성 질소로 변환할 수 있다.
또한, 상기 토양 개선용 조성물은 토양 또는 수질 내에 존재하는 섬유소와 같은 난분해성 물질을 유기물로 변환할 수 있고, 항균작용으로 병원성 미생물을 억제시켜 토양 개선 및 환경 정화 작용을 할 수 있다.
본 발명은 상기 바실러스 서브틸리스 BK418 균주의 배양물을 제공한다. 상기 배양물이란 상기 BK418 균주를 배양한 배양 배지 또는 배양액 및 상기 배양 배지 또는 배양액에서 배양한 그 결과물을 포함하는 개념이며, 상기 배양물은 상기 BK418 균주를 포함하거나 포함하지 않을 수 있다. 상기 배양물은 그 제형이 특별히 한정되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 제형일 수 있다. 예를 들어 상기 배양물은 액체 또는 고체일 수 있으며, 배양물의 원형 상태이거나 그의 농축된 형태 또는 건조된 형태일 수 있다.
보다 구체적으로, 상기 바실러스 서브틸리스 BK418 균주의 배양 방법은 종균을 제조하는 단계, 배양 배지를 제조하는 단계 및 배양 배지에 종균을 접종하여 배양하는 단계를 포함하여 배양할 수 있다.
상기 바실러스 서브틸리스 BK418 균주를 121℃에서 15분간 멸균된 TSB 배지에 접종하여 30℃, 180rpm의 조건에서 18시간 동안 배양하여 종균을 제조하고, 증류수에 10 내지 50 g/L의 당밀 또는 설탕을 혼합하여 배양 배지를 제조하여, 상기 배양 배지에 1%의 상기 종균을 접종하여 30℃, 180rpm의 조건에서 1주 동안 배양할 수 있다.
상기 토양 개선용 조성물은 토양과 같은 환경에 유익한 효과를 나타내는 미생물 또는 그 성분을 의미하는 것으로서, 토양 또는 공기 중에 존재하는 질소를 암모니아성 질소로 변환하여 환경 정화 및 작물의 질소원으로서의 흡수 및 이용을 용이하게 할 수 있는 동시에, 토양 또는 수질 내에 존재하는 섬유소와 같은 등의 난분해성 물질을 유기물로 변환하고, 항균작용으로 병원성 미생물을 억제시켜 토양 개선 작용을 할 수 있다.
또한, 상기 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) BK418 균주에 대해 단일 영양원으로 당밀을 이용하여 쉽고 간편한 새로운 배양 방법으로 배양할 수 있어, 저렴한 배지 원료로 간편하게 토양 개선용 조성물 등의 다양한 산업에 적용할 수 있다.
이하, 실험예를 기술함으로써 본 발명을 보다 상세히 설명한다.
실험예 1
바실러스 서브틸리스( Bacillus subtilis ) BK418 균주의 질소 고정 능력 확인
(1) 균주의 배양 및 생균수 확인
바실러스 서브틸리스 BK418 균주를 121℃에서 15분간 멸균된 TSB(tryptic soy broth, BD, USA) 액체 배지에 접종하여 30℃, 180rpm의 조건에서 18시간 동안 배양하여 종균으로 사용한다.
증류수에 표 1과 같이 질소원이 배제된 Nitrogen Fixing Bacteria(NFB) 액체배지 및 2% 한천(agar)을 넣은 고체배지를 이용하여 바실러스 서브틸리스 BK418 균주의 생장을 확인하였다. 상기 배지는 121℃에서 15분간 멸균하여 사용하였다.
Figure 112014075194128-pat00001
NFB 고체배지에 바실러스 서브틸리스 BK418 균주를 도말하고 30℃에서 1주 동안 배양한 결과 도 1과 같이 질소원이 배제된 고체배지에서 생장하는 것을 확인하였다. 또한 NFB 액체배지에 1%의 종균을 접종하여 30℃, 180rpm의 조건에서 1주 동안 배양한 뒤 생균수 측정을 수행한 결과 103 cfu/㎖ 정도의 균체수가 나오는 것을 확인하였다. 이 결과를 통해 질소원이 배제된 환경에서도 바실러스 서브틸리스 BK418 균주가 질소 고정 능력을 통해 생장할 수 있음을 확인하였다.
(2) 질소 고정능 실험
바실러스 서브틸리스 BK418 균주의 질소 고정 능력 실험은 네슬러 시약을 통해 확인하였다. 네슬러 시약은 질소화합물의 확인을 위한 시약으로 암모니아 가스 또는 암모늄 이온에 대한 고감도의 검출 또는 정량용으로 그 한계 검출 농도는 약 0.2ppm이다. 요오드화제이수은(HgI2)을 요오드화칼륨의 수용액에 녹이고, 수산화칼륨의 수용액을 가하여 강알칼리성으로 만든 것으로 암모니아염과 반응하면 갈색의 침전을 일으키고, 암모니아염이 소량일 때는 과잉한 시약에 녹아 황갈색을 나타낸다. 특히 소량일 때는 비색 정량법이 이루어진다. NFB 액체배지에 1%의 종균을 접종하여 30℃, 180rpm의 조건에서 1주 동안 배양한 배양액을 8,000 x g에서 원심분리한 후에 얻은 상등액을 0.2 ㎛ membrane filter로 여과한 뒤 소량의 네슬러시약을 가하여 갈색의 침전 또는 황갈색으로의 변색을 확인을 통해 배양액 내에 암모니아성 질소의 생성을 확인할 수 있다. 도 2에서와 같이 배양액에 소량의 네슬러 시약을 반응한 결과 황갈색으로의 변색과 갈색의 침전이 형성된 것을 확인하여 바실러스 서브틸리스 BK418 균주가 공기 중에 포함되어 있는 질소를 암모니아성 질소로 변환하면서 생장하는 질소 고정 능력이 있음을 알 수 있었다.
실험예 2
바실러스 서브틸리스( Bacillus subtilis ) BK418 균주의 배양 방법
바실러스 서브틸리스 BK418 균주를 121℃에서 15분간 멸균된 TSB 액체 배지에 접종하여 30℃, 180rpm의 조건에서 18시간 동안 배양하여 종균으로 사용한다.
증류수에 당밀의 양을 10, 20, 30, 50 g/L와 같이 다양하게 넣어 당밀의 양에 따른 바실러스 서브틸리스 BK418 균주의 생장을 확인하였다. 상기 배지는 121℃에서 15분간 멸균하여 사용하였다.
당밀이 포함된 배지에 1%의 종균을 접종하여 30℃, 180rpm의 조건에서 총 1주 동안 배양하였다. 배양되는 동안의 생균수 측정은 10배 희석 실험 방법을 통해 희석하여 TSB 고체 배지에 100 ㎕를 도말하여 콜로니 수를 확인하였다.
그 결과 당밀 배지에서 배양된 바실러스 서브틸리스 BK418 균주의 생균수는 표 2와 같다.
Figure 112014075194128-pat00002
표 2에서 보듯이, 배지 제조 시에 당밀 10 g/L을 넣었을 때 107 cfu/㎖ 이상의 생균수를 관찰하였으며, 20 g/L을 넣었을 때 108 cfu/㎖ 이상의 생균수를 확인할 수 있었다. 본 결과를 통해 바실러스 서브틸리스 BK418 균주를 20 g/L 이상으로 당밀을 넣어 배양 시에 최적의 생장 조건을 만족하며 바실러스 서브틸리스 BK418 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 조성물의 제조에 사용될 수 있음을 확인할 수 있었다.
실험예 3
바실러스 서브틸리스 ( Bacillus subtilis ) BK418 균주의 분해능 확인
바실러스 서브틸리스 BK418 균주가 생성하는 효소를 확인하기 위한 배지로 sodium chloride 1%, yeast extract 0.5%, peptone 1%, skim milk 2%로 구성된 SM 배지와 SM 배지에서 skim milk 대신 soluble starch 2% 가 함유된 AM 배지 및 carboxy methyl cellulose 1%가 함유된 CMC 배지를 제조하였다. 각각의 고체 배지에 바실러스 서브틸리스 BK418 균주를 접종하고 30℃에서 48시간 배양한 후 생성된 투명환(clear zone)을 통해 단백질분해효소(protease), 전분분해효소(amylase) 그리고 섬유소분해효소(cellulase)의 활성을 조사하였다.
도 3은 본 발명에 따른 바실러스 서브틸리스 BK418 균주의 상등액을 통한 단백질분해효소(protease), 전분분해효소(amylase) 및 섬유분해효소(cellulase)의 활성 결과를 측정한 사진으로서, 배양된 고체 배지에 뚜렷한 투명환(clear zone)이 형성됨을 통해 단백질, 전분 그리고 섬유소의 분해능이 매우 뛰어난 것을 확인하였다.
실험예 4
바실러스 서브틸리스( Bacillus subtilis ) BK418 균주의 항균력 실험
본 실험에서 사용된 대장균(Escherichia coli)은 인간과 동물의 장에 존재하며 복통과 설사 및 장염을 일으키는 균으로 대표적인 그람 음성 병원균으로서 LB(Luria Bertani) 액체 배지에 접종하여 30℃, 180rpm의 조건으로 21시간 동안 배양하여 얻은 균체를 1 x 107 cfu/㎖로 맞춰서 LB 고체 배지에 100 ㎕를 도말하였다. 도말된 LB 고체 배지 위에 페이퍼 디스크(ADVANTEC, Japan)를 얹고 항균물질 50 ㎕를 흡착시키고 30℃에서 24시간 배양한 후 생육저해를 나타내는 투명환(clear zone)의 직경(mm)을 측정하는 페이퍼 디스크법으로 실험하였다. 항균물질은 바실러스 서브틸리스 BK418 균주를 TSB 액체 배지에 접종하여 30℃, 180rpm의 조건으로 18시간 동안 배양한 배양액을 8,000 x g에서 원심분리한 후에 얻은 상등액을 0.2 ㎛ membrane filter로 여과하여 항균활성 측정시료로 사용하였다.
도 4는 본 발명에 따른 바실러스 서브틸리스 BK418 균주의 상등액의 대장균(Escherichia coli)에 대한 항균활성을 측정한 결과를 나타낸 사진으로서, 대장균에 항균활성이 나타나면서 13 mm의 투명환(clear zone)이 생성되어 바실러스 서브틸리스 BK418 균주 또는 이의 배양물이 병원성 세균에 강한 항균력을 확인하였다.
본 발명에 따른 바실러스 서브틸리스 BK418 균주 또는 이의 배양물은 섬유소 또는 리그닌과 같은 난분해성 물질을 유기물로 변환하고, 항균작용으로 미생물을 억제시키는 동시에 질소 고정 능력을 가져 이를 유효성분으로 사용하여 토양 개선용 조성물로 활용할 수 있는 것이다.
이상에서는 실시 예를 참조하여 설명하였지만, 해당 기술 분야의 숙련된 당업자는 하기의 특허청구범위에 기재된 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.
<110> SEO, BUM-GU <120> Bacillus subtilis BK418 strain having complex digestive productivity and antifungal activity and uses thereof <130> 0001 <160> 1 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 1433 <212> DNA <213> Bacillus subtilis <400> 1 gctataatgc agtcgagcgg acagatggga gcttgctccc tgatgttagc ggcggacggg 60 tgagtaacac gtgggtaacc tgcctgtaag actgggataa ctccgggaaa ccggggctaa 120 taccggatgg ttgtttgaac cgcatggttc aaacataaaa ggtggcttcg gctaccactt 180 acagatggac ccgcggcgca ttagctagtt ggtgaggtaa yggctcacca aggcaacgat 240 gcgtagccga cctgagaggg tgatcggcca cactgggact gagacacggc ccagactcct 300 acgggaggca gcagtaggga atcttccgca atggacgaaa gtctgacgga gcaacgccgc 360 gtgagtgatg aaggttttcg gatcgtaaag ctctgttgtt agggaagaac aagtaccgtt 420 cgaatagggc ggtaccttga cggtacctaa ccagaaagcc acggctaact acgtgccagc 480 agccgcggta atacgtaggt ggcaagcgtt gtccggaatt attgggcgta aagggctcgc 540 aggcggtttc ttaagtctga tgtgaaagcc cccggctcaa ccggggaggg tcattggaaa 600 ctggggaact tgagtgcaga agaggagagt ggaattccac gtgtagcggt gaaatgcgta 660 gagatgtgga ggaacaccag tggcgaaggc gactctctgg tctgtaactg acgctgagga 720 gcgaaagcgt ggggagcgaa caggattaga taccctggta gtccacgccg taaacgatga 780 gtgctaagtg ttagggggtt tccgcccctt agtgctgcag ctaacgcatt aagcactccg 840 cctggggagt acggtcgcaa gactgaaact caaaggaatt gacgggggcc cgcacaagcg 900 gtggagcatg tggtttaatt cgaagcaacg cgaagaacct taccaggtct tgacatcctc 960 tgacaatcct agagatagga cgtccccttc gggggcagag tgacaggtgg tgcatggttg 1020 tcgtcagctc gtgtcgtgag atgttgggtt aagtcccgca acgagcgcaa cccttgatct 1080 tagttgccag cattcagttg ggcactctaa ggtgactgcc ggtgacaaac cggaggaagg 1140 tggggatgac gtcaaatcat catgcccctt atgacctggg ctacacacgt gctacaatgg 1200 acagaacaaa gggcagcgaa accgcgaggt taagccaatc ccacaaatct gttctcagtt 1260 cggatcgcag tctgcaactc gactgcgtga agctggaatc gctagtaatc gcggatcagc 1320 atgccgcggt gaatacgttc ccgggccttg tacacaccgc ccgtcacacc acgagagttt 1380 gtaacacccg aagtcggtga ggtaaccttt aggagccagc cgccgaagtg aca 1433

Claims (5)

  1. 단백질분해효소(protease), 전분분해효소(amylase) 및 섬유소분해효소(cellulase)의 분해 활성을 가지고, 대장균(Escherichia coli)에 대하여 항균 활성을 가지며, 질소 고정력을 갖는 토양 개선용 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) BK418(KACC91903P) 균주.
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