KR101648477B1 - 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물은 빌루리빈 합성제어와 헴(heme) 내 철과 효과적으로 결합되도록 최적화된 조성물에, 생약성분 및 한약성분으로부터 유래된 혼합성분의 복합추출물을 함유하고, 특히, 티로시나아제 활성 저해율을 보인 힐초근, 신이 및 감송향으로 이루어진 혼합추출물을 함유함으로써, 멜라닌 지수 측정결과 다크서클 개선효과와 임상에서 혈류량 개선 및 눈 밑 명도차 개선 효과를 구현하므로 다크서클 개선 및 예방용도에 유용하다.

Description

다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물{COMPOSITION FOR IMPROVEMENT AND PREVENTION OF DARK CIRCLE UNDER EYES}
본 발명은 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 빌루리빈 합성제어와 헴(heme) 내 철과 효과적으로 결합되도록 최적화된 조성물에, 생약성분 및 한약성분으로부터 유래된 혼합성분의 복합추출물을 함유하고, 특히, 티로시나아제 활성 저해율을 보인 힐초근, 신이 및 감송향으로 이루어진 혼합추출물을 함유함으로써, 멜라닌 지수 측정결과 다크서클 개선효과를 확인하고 임상에서 혈류량 개선 및 눈 밑 명도차 개선 효과를 구현하는 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물에 관한 것이다.
화장품 소비자들의 피부 고민 중에서 눈 밑의 다크서클(Dark circle, eye circle)이 큰 비중을 차지하고 있다. 이러한 다크서클은 아래 눈꺼풀 밑쪽으로 자루처럼 불룩 솟아오른 눈 밑 지방으로 인해 그늘져 보이는 현상으로, 눈 아래쪽 주머니 같은 근막에 지방이 고이거나, 피하의 울혈에 의해 형성된다. 이러한 다크서클은 특별한 병리학적 영향은 없으나, 나이가 들어 보이고 피곤해 보이는 등 미용상 문제점이 많다.
다크서클은 눈 밑이 어둡게 보이는 증상들의 통칭으로, 멜라닌이나 철에 의한 색소 침착, 주름, 눈 밑 지방, 미세혈관 확장 등이 원인이 될 수 있으며, 혈액 속의 적혈구가 파괴되어 헤모글로빈이 유출하는 용혈반응(hemolysis)도 다크서클의 원인으로 지적되고 있다.
용혈반응이 발생하면 적혈구가 파괴되어 헴(heme)과 글로빈(globin)으로 나누어지고, 헴은 다시 철과 빌리버딘(biliverdin)으로 파괴된다. 여기서 글로빈과 철은 혈색소 합성에 다시 사용되고, 빌리버딘(biliverdin)은 빌리루빈(bilirubin)으로 변한다. 이 빌리루빈(bilirubin)은 황갈색을 띄는 물질로서, 표피층, 진피층에 축적되어 다크서클을 발생시킬 수 있다.
다크서클을 치료하기 위한 대부분의 제품은 다크서클의 암색을 가리거나 상쇄시키면서 입사광을 반사시키기 위해 각종 색상의 안료로 채색된다. 이는 단순히 존재하는 다크서클을 가리는 것에 불과하다. 다른 접근법은 보다 암색의 혈액이 풍부한 피부를 밑으로 숨기기 위해 해당 부위의 피부를 두껍게 하기 위한 시도로서 레티노이드와 같은 세포 자극제를 함유하는 제품을 사용하는 것이다. 이러한 제품은 효과를 나타내기 위해 수주의 기간을 필요로 하며, 종종 눈 주변의 민감한 피부를 자극한다.
이에, 다크서클 발생을 완화시키기 위하여 한약성분 또는 생약성분으로부터 유래된 추출물을 함유하여 피부 혈류량을 촉진시키고, 피부노화, 자외선, 스트레스 등으로 인해 발생하는 눈밑 칙칙함과 다크 써클을 매우 효과적으로 완화해주는 화장료 조성물 개발이 활발하다.
이러한 다크서클 개선용 화장료 조성물의 일례로서, 대한민국 공개특허 제2012-11399호에는 오배자 추출물, 단삼 추출물 및 자초 추출물로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출물을 포함하고, 대한민국 공개특허 제2008-111798호에는 은행잎 추출물 및 N-아세틸글루코사민(N-acetyl-D-glucosamine)을 포함하는 조성물을 제공하며, 대한민국 공개특허 제2012-21868호에서는 흑양(黑楊; Populus nigra) 추출물을 포함하여 높은 항산화 효과 및 세포 증식 효과, 빌리루빈(bilirubin) 제거에 효과적인 UGT(UDP-glucuronosyltransferase) 발현 증가 효과와 더불어, 임상에서 혈류량 개선 및 눈 밑 명도차 개선 효과를 제시하고 있다.
또한, 대한민국 공개특허 제2011-67554호에서는 다크서클의 원인인 빌리루빈(bilirubin) 제거에 효과적인 UGT1A1 효소를 활성화시키며, 프로스타글란딘 E2 생성을 억제하여 눈가 다크 서클의 개선 및 예방하는 효과를 제공하기 위하여, 배암차즈기, 미국가막사리 및 한련초로 이루어진 혼합추출물을 개시하고 있다. 이때, 상기 GT1A1(UDP-glucuronosyltransferase)는 간에서 빌리루빈을 분해작용에 관여하는 효소로서, 피부의 각질형성세포(keratinocyte)와 섬유아세포(fibroblast) 등에 존재하며 용혈반응에 의해 생성된 빌리루빈을 분해한다.
이에, 본 발명자들은 다크서클 개선용 화장료 조성물에 적합한 식물군 소재를 탐색한 결과, UGT1A1 효소 합성을 촉진하여 빌리루빈 합성을 제어하고, 헴(heme) 내 철과 효과적으로 킬레이트되도록 설계된 조성물에, 눈에 좋은 성분으로 알려진 복합추출물을 함유함으로써, 멜라닌 지수 측정결과 다크서클 개선효과를 확인하고 임상에서 혈류량 개선 및 눈 밑 명도차 개선 효과를 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 빌루리빈 합성제어와 헴(heme) 내 철과 효과적으로 결합되도록 설계된 조성물에, 생약성분 및 한약성분으로부터 유래된 혼합성분의 복합추출물을 함유하고, 특히, 티로시나아제 활성 저해율을 보인 힐초근, 신이 및 감송향으로 이루어진 혼합추출물을 함유한 다크서클 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 테트라펩티드 및 트리펩티드 혼합물로 이루어진 조성물에, 브로콜리, 당근, 율피, 아사이베리, 율무 및 녹차로 이루어진 생약성분으로부터 선택된 2종이상의 성분이 혼합 조성된 제1추출물 0.5 내지 20중량% 및 힐초근, 신이 및 감송향으로 이루어진 군에서 선택된 2종이상의 성분이 혼합 조성된 제2추출물 0.01 내지 10중량%가 포함된 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물에서, 상기 제2추출물은 힐초근, 신이 및 감송향으로부터 유래된 혼합성분 0.01 내지 1중량%가 포함된 것이다.
본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물에서, 혼합물은 N-팔미토일(palmitoyl)-Gly-Gln-Pro-Arg(서열 ID NO: 3)의 테트라펩티드 및 N-팔미토일(palmitoyl)-Gly-His-Lys의 트리펩티드이고, 이때, 테트라펩티드 및 트리펩티드 10:1 내지 1:10의 중량비율로 이루어진 것을 특징으로 한다.
본 발명의 조성물은 크리신 0.001 내지 3중량%를 포함하여 빌리루빈 합성제어에 관여하고, 킬레이트제, N-하이드록시숙신이미드 0.0001 내지 및 5중량%를 포함하여 헴(heme)내 철과의 결합을 촉진한다.
본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물의 제형은 화장수, 에센스, 로션, 크림 또는 젤로 적용될 수 있다.
또한, 본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물은 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급알코올, 고급알코올, 증점제, 색소, 방부제 및 향료로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상의 첨가제를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 빌루리빈 합성제어와 헴(heme) 내 철과 효과적으로 결합되도록 최적화된 조성물에, 생약성분 및 한약성분으로부터 유래된 혼합성분의 복합추출물을 함유하고, 특히, 티로시나아제 활성 저해율을 보인 힐초근, 신이 및 감송향으로 이루어진 혼합추출물을 함유함으로써, 멜라닌 지수 측정결과 다크서클 개선효과를 보이고. 임상에서 혈류량 개선 및 눈 밑 명도차 개선 효과를 구현하므로 다크서클 개선 및 예방용으로 유용하다.
도 1은 본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물에 의한 UGT1A1 효소 합성 촉진에 대한 실험 결과이고,
도 2는 본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물에서의 철에 대한 반응시약을 사용한 실험 결과이고,
도 3는 본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물을 사용주기별 멜라닌 지수에 근거한 다크서클 측정에 대한 임상결과이고,
도 4는 도 3의 다크서클 측정결과를 근거하여 산출한 다크서클 개선율을 도시한 것이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 테트라펩티드 및 트리펩티드 혼합물로 이루어진 조성물에,
브로콜리, 당근, 율피, 아사이베리, 율무 및 녹차로 이루어진 생약성분으로부터 선택된 2종이상의 성분이 혼합 조성된 제1추출물 0.5 내지 20중량% 및
힐초근, 신이 및 감송향으로 이루어진 군에서 선택된 2종이상의 성분이 혼합 조성된 제2추출물 0.01 내지 10중량%가 포함된 것을 특징으로 하는 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물은 생약성분 및 한약성분으로 유래된 혼합성분의 복합추출물을 함유함으로써, 인체 무해하면서 눈에 유익한 성분으로 인한 눈가의 주름과 탄력을 개선한다.
구체적으로, 브로콜리, 당근, 율피, 아사이베리, 율무 및 녹차로 이루어진 생약성분으로부터 선택된 2종이상의 성분이 혼합 조성된 제1추출물 0.5 내지 20중량% 및 힐초근, 신이 및 감송향으로 이루어진 군에서 선택된 2종이상의 성분이 혼합 조성된 제2추출물 0.01 내지 10중량%를 포함하는 것이다.
특히, 상기 제2추출물에서 힐초근, 신이 및 감송향으로부터 유래된 혼합성분이 바람직하게는 0.01 내지 1중량%로 포함된 것을 특징으로 한다.
상기 브로콜리, 당근, 율피, 아사이베리, 율무 및 녹차로 이루어진 생약성분으로부터 선택된 2종이상의 성분이 혼합 조성된 제1추출물은 각 원료를 그대로 말려 건조분말로 얻은 후 사용하거나, 각 원료를 통상의 추출법에 의해 물, 유기용매 또는 이의 혼합용매를 사용하여 추출함으로써 얻을 수 있다. 이때, 이들 성분들을 모두 혼합하여 동시에 추출하거나 개개 성분들을 최적의 조건에서 추출한 후 혼합하여 사용할 수도 있다.
열수 추출하는 경우, 예를 들어 본 발명 조성물의 각 성분에 물을 가해 70℃ 이상, 바람직하게는 80℃ 이상, 보다 바람직하게는 90℃ 이상의 온도에서 2 시간 이상, 바람직하게는 3 시간 이상 가열한 후, 가열된 혼합물을 여과하여 제조할 수 있다.
높은 온도에서 가열하는 경우 시간은 줄어들지만 유효성분이 파괴되어 손실될 수 있고, 상기 온도보다 낮은 온도에서 가열하게 되면 혼합물의 유효성분이 완전 추출되지 않으므로, 추출 온도와 추출 시간을 적절히 조절하는 것이 중요하다. 추출액은 건조하여 사용하거나 추출 상태 그대로 사용할 수 있다. 유기용매를 사용하여 추출하는 경우에는, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 부탄올 등의 알코올, 아세톤, 헥산, 클로르포름, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 또는 이들의 혼합물을 이용하여 실온에서, 또는 가온하여 유기용매로 추출할 수 있다.
상기 혼합 조성된 제1추출물은 2종 이상 포함될 수 있으며, 본 발명의 실시예에서는 브로콜리, 당근, 율피, 아사이베리, 율무 및 녹차 성분이 모두 포함된 형태로 실시하고 있으나, 이에 한정되지는 아니할 것이다.
또한, 본 발명의 조성물에 성분간 상용성이 우수하고, 효능이 안정된 추출물로서 당귀 추출물 및 감초 추출물을 더 포함하여 제1추출물을 조성할 수 있다. 다만, 제1추출물의 함량은 0.5 내지 20중량%가 포함되도록 한다. 이때, 제1추출물의 함량이 0.5 중량% 미만이면, 추출물로 인한 효능발현이 미미하고, 20중량%를 초과하면, 추출물간의 상용성문제와 더불어 색취가 강해져 기호성이 저하된다.
또한, 본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물은 힐초근, 신이 및 감송향으로 이루어진 군에서 선택된 2종이상의 성분이 혼합 조성된 제2추출물 0.01 내지 10중량%를 포함한다.
더욱 바람직하게는, 본 발명의 실시에에서 상기 제2추출물에 대하여, 힐초근, 신이 및 감송향으로부터 유래된 혼합성분 0.01 내지 1중량%가 포함된 형태로 실시한다.
상기 제2추출물에서, 힐초근(Valeriana faurie)은 스트레스를 완화하고, 마음을 진정시켜 불면증 또는 각종 신경증 등에 대한 효능이 알려져 있다. 상기 힐초근은 쥐오줌풀의 뿌리를 말린 것을 사용하며, 통상의 추출방법에 의해 얻을 수 있다. 이에, 종래 힐초근은 스트레스로 인한 불면증 등의 신경성 질환 또는 공항장애에 대한 예방 및 치료용도에 관한 보고는 있었으나, 다크서클 개선용도에 적용된 바는 없다.
본 발명의 제2추출물의 일조성으로 사용된 신이(Magnolia denudata Desrousseaux)는 낙엽성 관목으로 중국 남방 각지의 정원에서 재배하며 야생은 적다. 목련과(Magnoliaceae)에 속하며 봄철 꽃봉오리가 벌어지기 전에 따서 햇볕에 말려 이용한다. 기원식물은 Magnolia denudata로 이것 외에도 한국 생약 규격집에는 magnolia kobus, Magnolia salicifolia Maxim.이 있으며 중국약전에는 Magnolia biondii, Magnolia sprengeri, Magnolia liliflora, Magnolia faragesii로 규정되어 있다. 신이는 전통적으로 풍으로 속골이 아픈 것을 낫게 하며 얼굴의 주근깨를 없애고 코가 메는 것, 콧물이 흐르는 것 등을 낫게 하며 눈을 밝게 하며 수염과 머리털을 나게 한다고 알려져 있다(본초강목). 또한 신이와 관련되어 피부 미백효과 및 항염 효과를 가지는 화장료 조성물(일본 특개평 5-320034), 피부병치료제(일본 특개평 5-246874), 소취제(일본 특개평 5-212099) 등의 연구가 보고되어 있으나, 다크서클 개선용도로서 보고된 적은 없다. 기존의 신이 성분 동정 연구에 의하면 마그놀롤(Magnolol), 시린긴(Syringin), 호노키올(Honokiol), 유게놀(Eugenol), 티라민(Thyramine) 등의 물질이 보고되어 있다.
또한, 감송향(Nardostachys chinensis Batal)은 다년생 초본으로 고산의 초지나 초원의 도랑가에서 자라며, 봄과 가을에 채취하여 지하경이나 뿌리를 이용한다. 감송향은 전통적으로 완복창통, 구토, 식욕부진, 치통 등의 각종 한방약재로 사용되어 왔다(참조: 본초강목). 또한 감송향과 관련되어서 피부 건조개선 및 아름다운 피부유지를 위한 화장료 조성물(일본 특개평 8-259423), 피부병 치료제(일본 특개평 5-246874) 등의 연구가 보고되어 있으나, 다크서클 개선용도에 적용된 바는 없다. 기존의 감송향 성분 동정연구에 의하면 에틸-β-D-글루코피라노사이드, 나르도스타친(Nardostachin),칸숀(Kanshone), 나르도퓨란(Nardofuran) 등의 화합물이 보고되어 있다.
이상의 힐초근, 신이 및 감송향으로부터 유래된 혼합성분은 시험관 내에서 농도의존적으로 타이로시나제 효소의 활성 저해율을 보였으며, 피부에서의 색소침착을 방지하고, 또한 도파 환원물질을 개발하여 멜라닌 합성 경로의 중간 대사물질인 도파(DOPA)의 산화방지를 구현할 수 있다. 이에, 멜라닌 합성의 주효소인 티로시나아제(tyrosinase) 활성을 억제하는 성분이나 티로시나아제의 기질에 대한 길항물질(antagonist)로서 작용함을 확인할 수 있다.
이에, 이상의 힐초근, 신이 및 감송향으로부터 유래된 혼합성분은 0.01 내지 1중량%가 포함되는 것이 바람직하며, 이때, 0.001중량% 미만이면, 다크서클 개선에 대한 상승효과가 미흡하고, 1중량%를 초과하면, 첨가량에 비해 효능의 상승정도가 향상되나, 한약제 고유의 풍미로 인해 기호성이 낮아진다.
본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물은 이상의 생약성분 및 한약성분으로 유래된 혼합성분의 복합추출물을 함유함으로써, 피부에 대한 부작용없이 안전하게 사용할 수 있으며, 타이로시나제 효소의 활성 저해율과 임상에서 혈류량 개선 및 눈 밑 명도차 개선 효과를 구현한다.
본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물은 하기 화학식 1로 표시되는 N-팔미토일(palmitoyl)-Gly-Gln-Pro-Arg(서열 ID NO: 3)의 테트라펩티드 및 화학식 2로 표시되는 N-팔미토일(palmitoyl)-Gly-His-Lys의 트리펩티드 혼합물을 포함하는 조성물에 기반한다.
화학식 1
Figure 112014028573420-pat00001
화학식 2
Figure 112014028573420-pat00002
상기 테트라펩티드 및 트리펩티드 혼합물이 10:1 내지 1:10의 중량비율로 이루어진 조성을 포함하며, 이들로부터 눈주위 탄력을 부여하고 피부 톤을 강화시켜 줌으로써 잔주름, 주름 및 피부 건조증 개선에 의하여 다크 서클 및 스트레치 마크를 포함하여 피부 상태를 예방적 또는 치료적으로 조절할 수 있다[대한민국특허 제1045658호].
또한, 본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물은 상기 기반 조성물에 빌리루빈(bilirubine) 제거를 촉진하는 하기 화학식 3으로 표시되는 크리신(chrysine)을 포함하되, 그 함량이 0.001 내지 3중량%가 바람직하고, 더욱 바람직하게는 0.004 내지 0.01중량%를 포함하는 것이다.
화학식 3
Figure 112014028573420-pat00003
이때, 도 1은 본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물 농도별 UGT1A1 효소 합성 촉진에 대한 실험 결과로서, 배지중의 세포를 크리신(chrysin)에서 3일간 배양한 후 UGT1A1 의 유전자 발현을 RT-PCR에서 측정한 결과이다. 이때, 크리신을 포함하는 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물을 농도별로 관찰한 결과, 농도가 높을수록 유전자 발현이 증폭된 결과를 확인할 수 있다. 이에, 크리신(chrysine) 성분에 의해 빌리루빈(bilirubine) 제거에 관련된 효소유전자 (UGT1A1) 발현을 촉진함을 확인할 수 있다.
나아가, 본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물은 상기 기반 조성물에 킬레이트제로서 하기 화학식 4로 표시되는 N-하이드록시숙신이미드 0.0001 내지 5중량%를 포함하는 것을 특징으로 한다.
화학식 4
Figure 112014028573420-pat00004
도 2는 본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물에서의 철에 대한 발색시약을 사용한 실험 결과로서, N-하이드록시숙신이미드가 헴(heme)내 철과 착물화(chelation)되어, 초기 색이 사라지는 결과를 확인할 수 있다. 따라서, 본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물에서 킬레이트제인 N-하이드록시숙신이미드 함유에 의해 헴(heme)내 철과 결합을 효율적으로 유도함으로써, 다크서클 발생원인을 해소할 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다.
이는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 다크서클 개선용 화장료 조성물 제조
단계 1: 제1추출물 제조
브로콜리, 당근, 율피, 아사이베리, 율무 및 녹차를 준비하고, 상기 식물원료에 80% 에탄올을 첨가한 후, 실온에서 7일간 추출하여 자연 여과한 후, 다시 80% 에탄올을 첨가하여 동일한 과정을 반복하여 각 식물원료의 80% 에탄올 추출액을 얻었다. 이후 상기 추출액을 로터리 증발기를 이용하여 감압 농축하여 각 추출물의 고형분을 얻었다.
이후, 상기 얻어진 브로콜리 추출물(Brassica Oleracea Italica ( Broccoli) Extract) 0.15중량%, 당근 추출물(Daucus Carota Sativa ( Carrot ) Root Extract) 0.15중량%, 율피추출물(Citrus Unshiu Peel Extract) 0.10중량%, 아사이베리추출물(Euterpe Oleracea Pulp Powder) 0.15중량%, 율무추출물(Coix Lacryma - Jobi Ma -Yuen Seed Extract) 0.15중량% 및 녹차추출물(Camellia Sinensis Leaf Extract) 0.15중량%가 혼합된 제1추출물을 준비하였다.
단계 2: 제2추출물의 제조
힐초근(Valeriana faurie), 신이(Magnolia denudata Desrousseaux) 및 감송향(Nardostachys chinensis Batal)을 준비하고, 상기 식물원료에 80% 에탄올을 첨가한 후, 실온에서 7일간 추출하여 자연 여과한 후, 다시 80% 에탄올을 첨가하여 동일한 과정을 반복하여 상기 혼합추출물 1중량%가 함유된 80% 에탄올 추출액을 얻었다. 이후 상기 추출액을 로터리 증발기를 이용하여 감압 농축하여 각 추출물의 고형분을 얻었다.
단계 3: 다크서클 개선용 화장료 조성물 제조
상기 단계 1 및 단계 2에서 얻어진 제1추출물과 제2추출물을 포함하고 하기 표 1에 제시된 조성에 따라 화장료 조성물을 제조하였다.
<실시예 2> 다크서클 개선용 화장료 조성물 제조
상기 실시예 1의 단계 2에서 제조된 제2추출물의 혼합추출물의 농도가 0.1중량%로 제조된 것을 제외하고는, 상기 실시예 1과 동일하게 수행하였다.
<실시예 3> 다크서클 개선용 화장료 조성물 제조
상기 실시예 1의 단계 2에서 제조된 제2추출물의 혼합추출물의 농도가 0.01중량%로 제조된 것을 제외하고는, 상기 실시예 1과 동일하게 수행하였다.
<실시예 4> 다크서클 개선용 화장료 조성물 제조
상기 실시예 1의 단계 1에서 제조된 제1추출물에, 당귀추출물(Angelica Gigas Root Extract) 0.15중량%, 감초추출물(Glycyrrhiza Glabra ( Licorice ) Root Extract) 0.10중량%를 더 포함하는 것을 제외하고는, 상기 실시예1과 동일하게 수행하였다.
Figure 112014028573420-pat00005
<실험예 1>
상기 실시예 1에서 제조된 화장료 조성물에서 함유된 제2추출물에 의한 티로시나아제 활성 저해율을 측정하였다.
타이로시나제는 인체 내의 멜라닌 생합성 경로에서 가장 중요한 초기 속도결정단계에 관여하는 효소로서, 대부분의 미백성분이 타이로시나제 효소를 억제하는 작용기전을 가지고 있다.
시험방법은 시험관 내에서 타이로시나제 효소의 활성을 저해하는 정도를 평가하는 방법이며, 시료를 에탄올에 1mg/ml로 녹여 시료액으로 준비하였다.
시험관에 0.1 M 인산염완충액(pH 6.5) 880 ㎕와 시료액 120 ㎕ 및 머쉬룸 타이로시나제(2000U/㎖)액 80 ㎕를 순서대로 넣고 37℃에서 6분 동안 반응시켰다. 상기 반응용액에 1.5 mM 타이로신 액 160 ㎕를 넣고 37℃에서 15분 동안 반응시킨 후, 자외선 분광기를 이용하여 490nm에서 흡광도를 측정하였다. 공시료액으로는 시료액 대신에, 0.1 M인산염완충액(pH 6.5)을 넣고, 양성대조군으로는 알부틴을 사용하였다.
이에, 티로시나아제 활성 저해율은 하기 수학식 1에 의해 산출되었다.
수학식 1
타이로시나제 활성 저해율(%)= 100 - [(b-b'/a-a') × 100]
a: 공시료액의 반응 후의 흡광도, b: 시료액의 반응 후의 흡광도
a', b' : 타이로시나제 효소대신 완충액으로 대체하여 측정한 흡광도
Figure 112014028573420-pat00006
상기 결과로부터, 실시예 1의 혼합조성의 제2추출물은 농도의존적으로 티로시나아제 활성 저해율을 보였으며, 알부틴과 대등한 억제효과로 확인되었다.
<실험예 2>
상기 실시예 1에서 제조된 화장료 조성물의 조성인 크리신 성분에 대한 성능을 시험하기 위하여, 상기 화장료 조성물의 농도를 1중량%, 2중량% 및 3중량%로 농도별로 3일간 배양하고, 그 결과를 GADPH 국제기준에 의하여 표준화하고, 이후 기준대비 퍼센트 비율로 산출하였다.
도 1은 본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물에 의한 UGT1A1 효소 합성 촉진에 대한 실험 결과로서, 이때, 화장료 조성물(크리신)의 농도가 증가할수록 빌리루빈(bilirubine) 제거에 관련된 효소유전자 (UGT1A1) 발현을 촉진함을 확인하였다.
<실험예 3>
상기 실시예 1에서 제조된 화장료 조성물의 조성인 N-하이드록시숙신이미드에 대한 성능을 시험하기 위하여, Cell Nr1은 N-하이드록시숙신이미드만을 함유한 블랭크이고, Cell Nr2는 철성분 함유용액에 의한 대조군이고, Cell Nr3 및 Cell Nr4는 철성분 함유용액에 N-하이드록시숙신이미드 0.0002중량% 및 0.1중량%가 함유된 경우에 대하여 실험하였다.
도 2는 본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물에서의 철에 대한 반응시약을 사용한 실험 결과로서, 본 발명의 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물 중 N-하이드록시숙신이미드를 함유로 인하여, 철성분으로 인한 색상(violet)이 사라짐으로써, 헴(heme)내의 철성분과의 효과적으로 착물화가 이루어짐을 확인하였다.
<실험예 4> 효능평가
1. 기기적 평가
20∼60세의 성인 여성 12명을 대상으로 세안제로 세안한 후 실시예 1에서 제조된 화장료 조성물을 하루 아침 저녁의 두 차례를 지정된 시험부위에 사용법에 따라 사용하고 시험시작 전 0주, 시료사용 3주 경과 후, 8주 경과 후 및 10주 경과 후 동안의 변화를 관찰하였다.
시험자들은 시험시작 전 0주, 시료사용 3주 경과 후, 8주 경과 후 및 10주 경과 후 시험부위의 다크서클 정도는 측정부위에서 기기(Mexameter MX18, Courage and Khazaha, Germany)를 이용하여 측정하였다.
이때, 기기(Mexameter)는 흡광원리에 기초하여 특수한 탐침이 정해진 세 가지 파장의 빛을 방출하고 피부에서 반사된 빛을 측정함으로써, 멜라닌의 양을 측정한다. 이에 멜라닌 인덱스(M.I)로 다크서클 정도를 측정하였다. 그 결과를 하기 표 3에 기재하였다.
Figure 112014028573420-pat00007
상기 결과로부터, 본 발명의 실시예 1에서 제조된 화장료 조성물은 사용 8 주 후 개선율 9.9%, 10주 후에는 개선율 18.3%의 다크서클 개선효과를 확인하였다[도 3 및 도 4].
1. 관능평가
시료사용 3주, 8주 및 10주 경과 후에 피험자를 대상으로 사용에 따른 피부 이상반응을 면밀히 관찰하고, 이상반응이 나타날 시 심한 정도에 따라 0∼3으로 등급표기하였다.
이상반응에 대한 평가는 홍반(erythema), 부종(edema), 인설(scaling), 가려움(itching), 자통(stinging), 작열감(burning), 뻣뻣함(tightness), 따끔거림(prickling)의 유무를 판정하고 기록하였다. 그 결과를 하기 표 4에 기재하였다.
Figure 112014028573420-pat00008
이상의 결과로부터, 본 발명의 실시예 1에서 제조된 화장료 조성물은 시험기간 동안 특별한 피부 이상반응이 관찰되지 않아 안전한 시료로 확인되었다.
<실험예 5> 피부 명도차 개선 효과
실시예 1에서 제조한 제품을 이용하여 눈가 피부의 명도차 개선 효과를 측정하기 위한 실험을 실시하였다.
22명의 피험자를 10분 동안 충분히 안정시킨 다음, 실시예 1의 화장료 조성물을 이용하여 눈 밑 색소가 침착된 부위의 L*(명도), a*(적색-그린색), b*(황색-청색)값 변화를 측정하였다.
제품 도포 전(0 주), 제품 도포 56일 경과 후로 기간을 설정하였으며, 좌측은 비교예의 제품을 사용하고, 우측은 실시예의 제품을 사용하여 눈 밑 다크서클 개선결과를 표 5에 나타내었다. 링 부분은 눈 밑 다크서클 생성부위의 고리형태의 영역이고, 스킨 부분은 눈 꼬리부분의 피부 톤으로 정의하고 측정하였다.
Figure 112014028573420-pat00009
상기 결과, L*(명도) 및 b*(황색-청색)값은 증가하였고, a*(적색-그린색)값은 감소한 결과를 보였다.
상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명은 빌루리빈 합성제어와 헴(heme) 내 철과 효과적으로 결합되도록 최적화된 조성물에, 생약성분 및 한약성분으로부터 유래된 혼합성분의 복합추출물을 함유하고, 특히, 티로시나아제 활성 저해율을 보인 힐초근, 신이 및 감송향으로 이루어진 혼합추출물을 함유함으로써, 멜라닌 지수 측정결과 다크서클 개선효과를 보이고. 임상에서 혈류량 개선 및 눈 밑 명도차 개선 효과를 구현하므로 다크서클 개선 및 예방용으로 유용하다.
이상에서 본 발명은 기재된 구체예에 대해서만 상세히 설명되었지만 본 발명의 기술사상 범위 내에서 다양한 변형 및 수정이 가능함은 당업자에게 있어서 명백한 것이며, 이러한 변형 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속함은 당연한 것이다.

Claims (6)

  1. N-팔미토일(palmitoyl)-Gly-Gln-Pro-Arg(서열 ID NO: 3)의 테트라펩티드 및 N-팔미토일(palmitoyl)-Gly-His-Lys의 트리펩티드 혼합물에,
    빌리루빈 제거 효소유전자(UGT1A1) 발현을 유도하는 크리신 0.001 내지 3중량% 및
    킬레이트제로서 N-하이드록시숙신이미드 0.0001 내지 및 0.1중량%가 포함되어 헴 내 철과 킬레이트되도록 설계된 조성물에,
    브로콜리, 당근, 율피, 아사이베리, 율무 및 녹차로 이루어진 생약성분으로부터 선택된 2종 이상의 성분이 혼합 조성된 제1추출물 0.5 내지 20중량% 및
    힐초근, 신이 및 감송향으로부터 유래된 혼합성분으로 이루어진 제2추출물 0.01 내지 10중량%가 포함된 것을 특징으로 하는 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물.
  2. 삭제
  3. 제1항에 있어서, 상기 혼합물이 N-팔미토일(palmitoyl)-Gly-Gln-Pro-Arg(서열 ID NO: 3)의 테트라펩티드 및 N-팔미토일(palmitoyl)-Gly-His-Lys의 트리펩티드가 10:1 내지 1:10의 중량비율로 이루어진 것을 특징으로 하는 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물.
  4. 삭제
  5. 삭제
  6. 제1항에 있어서, 상기 조성물의 제형이 화장수, 에센스, 로션, 크림 또는 젤인 것을 특징으로 하는 다크서클 개선 및 예방용 화장료 조성물.
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