KR101576587B1

KR101576587B1 - 신규한 페노피브레이트 함유 젤라틴 나노입자

Info

Publication number: KR101576587B1
Application number: KR1020140013087A
Authority: KR
Inventors: 최한곤; 김동욱; 박종혁; 아비드유사프; 용철순; 김종오
Original assignee: 한양대학교 에리카산학협력단
Priority date: 2014-02-05
Filing date: 2014-02-05
Publication date: 2015-12-10
Also published as: KR20150092565A; WO2015119358A1

Abstract

본 발명은 페노피브레이트 외부에 젤라틴 함유 피막층이 형성되어 있는 나노입자에 관한 것으로, 상기 나노입자 내부는 에탄올을 포함하지 않거나 0.2중량% 이하로 포함하는 것인 나노입자에 관한 것이다.

Description

신규한 페노피브레이트 함유 젤라틴 나노입자{Novel composite of gelatin nanoparticle containing fenofibrate}

페노피브레이트의 화학명은 이소프로필 2-[4-(4-클로로벤조일)페녹시]-2-메텔프로파노에이트로 알려져 있으며, 주로 고지혈증 치료제로 사용된다.

그러나 페노피브레이트는 물에 매우 난용성인 약물이기 때문에 수용성 매질에 녹이기 어렵고, 만족스럽지 못한 용출 프로파일을 나타낸다. 따라서, 경구 복용 이후에 생체내에 흡수가 저조하여 생체이용률이 낮은 문제가 있다. 또한, 페노피브레이트는 그 자체가 음식물 영향으로 인해 생체 내 흡수가 균일하지 않고 개체차가 심한 것으로 알려져 있다.

따라서 이러한 페노피브레이트의 수난용성을 해결하고 생체이용률을 증가시키기 위하여, 유럽특허 제0330532호는 라우릴 황산나트륨과 같은 계면활성제와 페노피브레이트의 15 ㎛ 이하의 미분화된 혼합물(co-micronized mixture)을 개시한 바 있으며, 식이영향(food effect)을 받지 않는 정제 형태의 제제로서 현재 리피딜슈프라™정으로 시판되고 있다. 또한, 국제출원공개 제WO99/29300호는 페노피브레이트에 대한 음식물 영향을 감소시키기 위해, 자체-유화 예비농축물 형태의 제형을 개시한 바 있다. 또한, 대한민국 특허등록 제 352,089호는 생체이용율이 개선된 페노피브레이트 함유 경구용 마이크로에멀젼 조성물을 개시하고 있다. 그러나, 상기 선행기술들은 생체이용율 개선효과가 아직 만족스럽지 못하거나 또는 에탄올과 같은 히드록시 알칸의 사용으로 인한 문제, 예를 들어 히드록시 알칸이 젤라틴 피막을 통해 휘산하여 조성비나, 성상에 변화를 줄 수 있는 문제가 있다. 또한, 마이크로에멀젼 제제는 얻어지는 고형 제제 즉젤라틴 캡슐제의 부피가 너무 커서 환자의 복용 순응도가 떨어질 수 있다.

또한, 대한민국 특허등록 제 770,420호는 이부프로펜 및 디곡신 등 난용성 약물의 생체내이용율을 증가시키기 위하여 덱스트린 및 젤라틴 등을 피막물질로 사용하여 난용성 약물을 피막물질이 녹아 있는 에탄올-메칠렌클로라이드 수용액에 용해시킨 후 이 용액을 분무건조기를 이용하여 순간적으로 건조시켜 물만 증발시키고 페노피브레이트-에탄올용액은 피막물질에 둘러싸여진 고형엘릭실제를 개시하고 있다. 이 고형엘릭실제는 이부프로펜 및 디곡신 등 난용성 약물의 용해도, 용출 및 생체내이용율을 증가시켰으나 강도가 약한 고분자인 덱스트린 및 젤라틴 등으로 제조하였기 때문에 실제품으로 응용하기에는 이 제품이 강도가 매우 약하고 유동성에 문제를 가지고 있다.

또한 대한민국 특허등록 제 694,235 호는 상기와 같은 문제점을 해결하고 이부프로펜 및 이트라코나졸 등 난용성을 해결한 젤라틴 초미세미립구를 개발하였다. 이 상기 미립구는 젤라틴 및 메칠셀룰로오스로 제조하여 강도는 해결하였으나 미립구 내에 에탄올이 함유가 되어 있어 경시변화시 만족할만한 안정성을 가지지 못하는 문제점이 있었다.

이에, 고지혈증 치료제인 페노피브레이트의 생체 이용율을 증가시킨 새로운 페노피브레이트 함유 나노입자의 개발이 절실히 요구되고 있는 실정이다.

본 발명의 목적은 페노피브레이트 외부에 젤라틴 함유 피막층이 형성되어 있는 나노입자로서, 상기 나노입자는 나노입자 총 중량에 대하여 젤라틴 50 내지 88중량% 및 페노피브레이트 12 내지 50중량%를 포함하고, 상기 나노입자 내부는 에탄올을 포함하지 않거나 0.2중량% 이하로 포함하는 것인 나노입자를 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 일구현예는, 페노피브레이트 외부에 젤라틴 함유 피막층이 형성되어 있는 나노입자로서, 상기 나노입자는 나노입자 총 중량에 대하여 젤라틴 50 내지 88중량% 및 페노피브레이트 12 내지 50중량%를 포함하고, 상기 나노입자 내부는 에탄올을 포함하지 않거나 0.2중량% 이하로 포함하는 것인 나노입자에 관한 것이다.

에탄올은 물에 비해 상대적으로 낮은 비점을 가지므로 단순히 증발시키면 물보다 먼저 날아가지만, 물에는 친화성이 있으나 에탄올은 녹지 않는 젤라틴을 첨가하여 순간적으로 건조시키면 초기 증발에 의해 표면에 젤라틴의 농도가 증가하게 되어 일종의 막을 형성하게 된다. 이 막은 선택막으로 작용하여 물은 확산에 의해 통과되어 증발될 수 있으나 에탄올은 이 막을 통과할 수 없으므로 내부에 잔류하게 된다. 그래서 물은 증발되고 에탄올은 이 막으로 둘러싸인 젤라틴 나노입자를 얻게 된다. 이 같은 현상은 순간건조방식에서 효율적으로 일어나므로 분무건조기의 이용이 필수적이다. 에탄올과 물의 혼합용액에 에탄올에 용해성이 높은 페노피브레이트와 물에는 용해가 잘되나 에탄올에는 녹지 않는 젤라틴을 넣고 50℃에서 가온하여 생성된 용액을 분무건조기에서 분무하면 젤라틴 나노입자를 얻을 수 있다. 그러나 이 조성물은 에탄올을 함유하기 때문에 젤라틴 나노입자가 끈적이고 서로 달라붙은 현상을 나타내어 안정성이 문제가 된다.

따라서 본 발명자들은 분무건조기에서 내부 온도를 110℃ 이상으로 하여, 페노피브레이트를 녹인 에탄올이 젤라틴막을 통과하여 물과 함께 증발되도록 함으로써 젤라틴막 안에 페노피브레이트가 에탄올 없이 단독으로 있거나, 에탄올이 0.2% 미만으로 존재하는 나노입자를 생성하였다. 바람직하게, 상기 나노입자 내부는 에탄올을 포함하지 않거나 0.1중량% 이하로 포함하는 것인 나노입자일 수 있다.

본 발명에서 피막물질인 젤라틴은 에탄올에 잘 녹지않고 물에 잘 녹는 성질을 가진다. 본 발명의 나노입자에 있어서, 피막물질인 젤라틴을 나노입자 조성물 중 50 내지 88중량%로 포함하는 것이 바람직하다. 젤라틴이 50중량% 미만으로 포함되는 경우, 나노입자가 형성되지 않고 유동성이 탁월하지 못하여 제품화하기 어려운 문제가 생길 수 있고, 88 중량% 초과로 포함되는 경우, 페노피브레이트의 함량이 감소하고, 페노피브레이트의 용해도가 저하되어 페노피브레이트의 생체 이용율 증가가 크게 나타나지 못하는 문제가 생길 수 있다.

본 발명에 따른 페노피브레이트 함유 젤라틴 나노입자 제조시, 용매는 에탄올을 사용하는 것이 바람직하다. 상업적으로 사용할 수 있는 에탄올로서, 주정 또는 절대에탄올 중에서 선택하여 사용할 수 있다.

본 발명의 나노입자 제조시, 40% 에탄올과 물의 혼합액을 사용하여 젤라틴 및 페노피브레이트를 용해시킨 다음 분무건조방식으로 본 발명의 나노입자 조성물을 제조할 수 있다. 구체적으로, 페노피브레이트 및 젤라틴을 40% 에탄올-물 혼액에 녹이고 분무건조하면 물은 분무건조시 젤라틴을 피막형성시키고 증발되고, 페노피브레이트를 용해시킨 에탄올은 젤라틴 피막물질에 의해 순간적으로 봉입되었다가 페노피브레이트만 젤라틴 피막물질속에 놓아두고 에탄올은 증발되어 페노피브레이트 함유 젤라틴 나노입자가 형성된다.

이 때, 에탄올 함량은 분무건조시의 흡기온도 조건으로 조절할 수 있다. 분무건조시 흡기온도는 110℃ 이상인 것이 바람직하며, 보다 바람직하게 110℃ 내지 120℃ 일 수 있다. 분무건조시 흡기온도가 110℃ 미만인 경우, 젤라틴 나노입자 조성물 중의 에탄올의 함량이 2 중량% 이상이 되어, 나노입자가 서로 달라붙는 현상을 가지기 때문에 유동성이 탁월하지 못하고 경시변화시 안정성이 확보되지 못하여 제품화하기 어려울 수 있다.

상기와 같은 제조방법을 통해 제조된 본 발명의 페노피브레이트 함유 젤라틴 나노입자의 에탄올 함량을 실험예 1에서 평가한 결과, 흡기온도 조건이 110 ~ 120℃인 경우에는 거의 에탄올이 함유되지 않은 것을 확인할 수 있었다(표 2).

또한, 실험예 2를 통하여 본 발명 나노입자의수성 용해도를 평가한 결과 나노입자의 조성물 중 젤라틴의 비율이 50 내지88 중량% 일 경우에는　 용해도가 10 μg/ml 이상을 나타내어, 난용성인 페노피브레이트 용해도가 약 30배 이상 증가함을 확인하였다(표 3). 이에 따라, 본 발명의 일구현예는 실온에서 물에 대한 용해도가 10 μg/ml 이상인 나노입자일 수 있다.

또한, 실험예 3을 통하여 본 발명 나노입자의 유동성을 평가한 결과, 젤라틴이 나노입자의 조성물 중에 50 내지 88 중량% 함유한 조성물에서는 안식각이 35°이하로 탁월한 유동성을 나타내는 것을 확인하였다(표 4). 이에 따라, 본 발명의 일구현예는 실온에서 안식각이 35°이하인 나노입자일 수 있다.

또한, 실험예 4를 통하여 본 발명 나노입자의 용출시험을 수행한 결과, 실시예 1의 조성물이 초기 용출속도가 매우 높은 것을 확인하였으며, 새로운 페노피브레이트 함유 젤라틴 나노입자의 조성물은 페노피브레이트의 용출율을 큰 것을 확인하였다(도 2). 이에 따라, 본 발명의 일구현예는 대한약전 용출시험법 제2법 패들(paddle) 법에 따라 용출율 측정시, 1 시간 이내 페노피브레이트의 용출율이 80 중량% 이상인 나노입자일 수 있다.

또 다른 본 발명의 일구현예는, 상기 페노피브레이트를 포함하는 나노입자를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명의 약학 조성물은 상술한 나노입자 외에도, 1종 이상의 약학적으로 허용 가능한 부형제를 포함할 수 있다. 이 때, 부형제라함은 상기 약학 조성물에 포함되는 약학적으로 허용 가능한 임의의 불활성 성분을 의미한다. 상기 고분자 외에, 상기 약학 조성물에 포함될 수 있는 적당한 부형제로는, 1) 락토스, 유당, 만니톨, 셀룰로오스, 소르비톨 등 또는 이들의 임의의 조합의 희석제, 2) 콜로이드성 이산화규소, 탈크 등 또는 이들의 임의의 조합의 활택제, 3) 스테아린산 마그네슘, 스테아린산, 경화유, 나트륨 스테아릴 푸마레이트 등 또는 이들의 임의의 조합의 윤활제, 4)착색제 또는 방부제 등이 있다. 상기 약학 조성물에 포함될 수 있는 부형제의 종류에는 상기 나열된 것들에 한정되지는 않으며, 이외에도 다양한 부형제들이 제한없이 포함될 수 있다.

또한, 본 발명의 나노입자는 그대로 단위 포장하여 투여할 수도 있으며, 단위 투여량만큼씩 캅셀에 충진하여 사용할 수도 있다.

본 발명의 나노입자는 젤라틴이 피막물질로 되어 있어서 미립구의 유동성이 우수하고 기존의 약물이 에탄올과 함께 피막물질에 둘러싸여 있어 빈약한 유동성을 가지고 있으며, 페노피브레이트의 용해도 및 생체이용율이 향상된 효과가 있다.

도 1은 페노피브레이트 함유 젤라틴 나노입자의 조성물의 SEM 사진을 나타낸 것이다.
도 2는 페노피브레이트 함유 젤라틴 나노입자의 조성물 및 페노피브레이트분말과의 용출율을 비교하여 나타낸 것이다.
도 3은 페노피브레이트 함유 젤라틴 나노입자의 조성물 및 페노피브레이트분말과의 체내동태를 비교하여 나타낸 것이다.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

실시예 1 내지 5, 및 비교예 1 내지 8의 제조

하기 표 1에 나타낸 바와 같은 조성으로 실온에서 페노피브레이트는 에탄올 에 녹이고 젤라틴은 물에 용해시킨 다음 혼합하여 분무건조 (Buchi Mini-spray dryer, Buchi, German)하여 실시예 1 내지 5 및 비교예 1 내지 8 을 제조하였다. 이 때 분무건조 조건은 용액속도 7 ml/min 및 흡기온도 110 ~ 120℃이었다.예외적으로, 비교예 7 및 8의 흡기온도는 각각 70 ~ 80℃, 90 ~ 100℃이었다. 도 1은 제조된 실시예 1의 SEM 사진이다. 그러나, 비교예 5 및 6의 조성은 SEM 사진으로 판단한 결과 젤라틴 나노입자를 제조하지 못하는 것으로 판단되었다.

구　　　 분	실시예					비교예
구　　　 분	1	2	3	4	5	1	2	3	4	5	6	7	8
페노피브레이트(mg)	12	20	33	40	50	3	6	7	10	52	55	12	12
젤라틴(mg)	88	80	66	60	50	97	94	93	90	48	45	88	88
정제수^*1	120	120	120	120	120	120	120	120	120	120	120	120	120
에탄올^*1	80	80	80	80	80	80	80	80	80	80	80	80	80
합　 계(mg)	100	100	100	100	100	100	100	100	100	100	100	100	100
흡기온도(℃)	110~120℃											70 ~ 80℃	90 ~ 100℃

*1) 제조시 첨가한 량 (ml)이며 페노피브레이트 함유 젤라틴 나노입자의 조성물에는 함유되지 않음.

실험예 1. 페노피브레이트 함유 젤라틴 나노입자 조성물내의 에탄올 함유 평가

상기에서 제조한 실시예 1 내지 5 및 비교예 1 내지 8 약 250 mg을 각각 아세토니트릴-정제수 (1.5 ml/ml) 10 ml에 녹이고 밀리포아여과기로 여과한 다음 조성물내의 에탄올 함량을 가스액체크로마토그래피 (GC)로 측정하였다. 포라팍 Q 크로모소브 101 컬럼 (porapak Q, Chromosorb 101 column)을 이용하였으며, 운반가스로 질소가스를 사용하였다. 컬럼, 검출기 및 주입기의 온도는 각각 80, 160 및 130 ℃이었다.

실시예 1 내지 5 및 비교예 1 내지 8 에서의 에탄올 함량 결과는 하기 표 2와 같으며 실시예 1 내지 5 및 비교예 1 내지 6 은 조성물의 조성에 상관없이 흡기온도 조건이 110 ~ 120℃인 경우에는 거의 에탄올이 함유되지 않았다. 반면 비교예 7 및 8은 실시예 1과 동일한 조성이나 흡기온도 조건 (70 ~ 80 ℃ 및 90 ~ 100℃)만 변경하여 제조한 것으로서, 이 경우 에탄올의 함량이 2 중량% 이상으로 높은 함량을 나타내었다.

구　　　 분	실시예					비교예
구　　　 분	1	2	3	4	5	1	2	3	4	5	6	7	8
에탄올 함유(%)	0.1 ±0.1	0.1 ±0.1	0.1 ±0.1	0.1 ±0.1	0.1 ±0.1	0.1 ±0.1	0.1 ±0.1	0.1 ±0.1	0.1 ±0.1	0.1 ±0.1	0.1 ±0.1	3.4 ±0.3	2.2 ±0.4

실험예 2. 페노피브레이트 함유 젤라틴 나노입자 조성물의 수성 용해도 평가

상기에서 제조한 실시예 1 내지 5, 비교예 1 내지 4, 7, 8 및 페노피브레이트 분말을 각각 정제수 1 ml에 첨가하고 에펜도르프 튜브 (eppendorf tube)에 넣은 후 실온에서 7일간 교반하였다. 이 액을 밀리포아여과기로 여과한 다음 페노피브레이트의 용해도를 고성능액체크로마토그래피 (HPLC)로 측정하였으며 이 때 HPLC 조건은 C18 컬럼 (25 cm × 0.46 cm I.D., 입자크기 5.0 ㎛), 혈류속도는 2 ml/min, 주입량은 100 uL, UV 파장은 285 nm, 컬럼온도는 30℃ 및 이동상은 아세토니트릴/물 (인산 0,1% 첨가) (54/46)이었다.

실시예 1 내지 5, 비교예 1 내지 4, 7, 8　 및 페노피브레이트 분말에서의 페노피브레이트 용해도의 결과는 하기 표 3과 같다.

페노피브레이트 분말의 용해도는 0.35±0.05 μg/ml으로서 물에 거의 녹지 않았으며, 비교예 1 내지 4 에서 나노입자의 조성물 중 젤라틴의 비율이 88 중량% 를 초과하는 경우에는 약간의 용해도 증가가 나타났으나, 5 μg/ml 이하로서 페노피브레이트 용해도가 크게 증가하지는 않는 것으로 나타내었다. 그러나, 실시예 1 내지 5에서 나노입자의 조성물 중 젤라틴의 비율이 50 내지88 중량% 일 경우에는　용해도가 10 ~ 20 μg/ml 로서 난용성인 페노피브레이트 용해도가 약 30배 이상 증가함을 나타내었다. 반면, 비교예 5 및 6에서 젤라틴의 비율이 50 중량% 미만일 경우에는 SEM 사진으로 판단한 결과 젤라틴 나노입자를 제조하지 못하는 것으로 판단되어서 용해도 평가를 하지 않았다. 또한, 비교예 7 및 8은 실시예 1과 동일한 조성이나 흡기온도 조건 (70 ~ 80 ℃ 및 90 ~ 100℃)만 변경하여 제조한 젤라틴 나노입자로서, 상기 실험예 2에서 에탄올 약 2 중량% 이상　함유되어 있는 것으로 평가되었으나, 실시예 1과 용해도를 비교한 경우 약물의 용해도에서는 유의할만한 차이를 나타내지 않았다 .

구　　　 분

실시예　

비교예

분말

1

2

3

4

5

1

2

3

4

7

8

용해도
(μg/ml)

17.25
±1.65

15.31
±2.38

14.93
±2.22

13.08
±3.96

11.31
±1.41

2.30 ±0.53

3.14 ±0.96

2.89 ±0.45

4.24 ±0.22

17.83
±1.45

18.14
±1.87

0.35 ±0.05

실험예 3. 페노피브레이트 함유 젤라틴 나노입자 조성물의 유동성 평가

상기에서 제조한 실시예 1 내지 5 및 비교예 1 내지 8을 가지고 다음과 같이 안식각을 측정하여 유동성을 평가하였다. 분체특성 측정기 (powder tester, Hosokawa Micron, Japan)의 하단에 원판을 설치하고 이 원판 하단 밑에서 위로 10 cm 떨어진 곳에 아래로부터 차례대로 분체특성 측정기 구조물인 깔대기, 24 mesh 체 및 상하가 뚫린 원통을 장치하였다. 분체특성 측정기를 일정한 진동 (180 sec/60 cycle supply)을 주면서 실시예 1 내지 5 및 비교예 1 내지 8의 조성물 10 g을 낙하시킨 다음 원판에 떨어져 형성된 시료의 각도를 분체특성 측정기 구조물인 각도기로 측정하였다. 일반적으로 안식각이 35°이하일 경우에는 탁월한 유동성을 나타내며, 하기 표 4와 같이 실시예 1 내지 5 와 같이 젤라틴이 나노입자의 조성물 중에 50 내지 88 중량% 함유한 조성물에서는 탁월한 유동성을 나타내었다. 또한 비교예 1 내지 4에서 보는 바와 같이 마찬가지로 젤라틴이 나노입자의 조성물 중에 88 중량% 초과로 함유한 조성물에서도 안식각이 35°이하로 탁월한 유동성을 나타내었다. 그러나 비교예 5 및 6에서 보는 바와 같이 젤라틴을 나노입자의 조성물 중 50 중량% 미만으로 함유한 조성물에서는 젤라틴 나노입자가 형성되지 않기 때문에 안식각이 45-47°로 유동성이 저하되었으며, 젤라틴이 나노입자의 조성물 중에 50 중량% 이상 함유한 조성물에서 유동성이 탁월한 것을 알 수 있었다. 또한, 비교예 7은 실시예 1과 동일한 조성이나 흡기온도 조건 (70-80℃)만 변경하여 제조한 젤라틴 나노입자는 에탄올이 약 3중량% 함유되었기 때문에 서로 달라붙는 현상을 가지므로 유동성이 저하되는 것으로 보아 나노입자의 조성으로는 적당하지 않다고 판단되었다. 비교예 8의 경우에도 에탄올이 약 2중량% 이상 함유되어 서로 달라붙는 현상을 가지므로 유동성이 저하되는 것으로 보아 나노입자의 조성으로는 적당하지 않다고 판단되었다.

구　　　 분	실시예					비교예
구　　　 분	1	2	3	4	5	1	2	3	4	5	6	7	8
유동성 (°)	29	27	26	22	23	19	20	22	19	45	47	63	57

실험예 4. 페노피브레이트 함유 젤라틴 나노입자 조성물의 용출 평가

상기에서 제조한 실시예 1 의 조성물 (페노피브레이트 20 mg 해당량) 및 페노피브레이트 분말 (페노피브레이트 20 mg 해당량)을 경질캅셀에 충전한 다음 트윈 대한약전 제 2법 패들법으로 트윈 80 2% (w/v) 수용액 900 ml에서 36.5℃에서 용출시험을 수행하였다. 주어진 시간에 시료를 채취하고 밀리포아여과기로 여과한 다음 실험예 2와 동일한 조건으로 고성능액체크로마토그래피(HPLC)로 정량하였다.

그 결과, 도 2에 나타낸 바와 같이 실시예 1 의 조성물 (페노피브레이트 20 mg/kg 해당량 투여)은 페노피브레이트 분말과 용출율을 비교하면 초기 용출속도가 매우 유의하게 높은 것을 알 수 있었다. 특히 30분에서는 용출률이 약 4배나 페노피브레이트 분말보다 높았다. 따라서 이 실험 결과 새로운 페노피브레이트 함유 젤라틴 나노입자의 조성물은 페노피브레이트의 용출율을 큰 것을 확인하였다.

실험예 5. 페노피브레이트 함유 젤라틴 나노입자 조성물의 체내동태시험

상기에서 제조한 실시예 1 의 조성물 (페노피브레이트 20 mg/kg 해당량 투여) 및 페노피브레이트 분말 (페노피브레이트 20 mg/kg 해당량 투여)을 미세 캅셀에 충전한 다음 물 0.1 ml와 함께 쥐 (Male Sprague-Dawley rats, 250-300 g) 6마리에 각각 경구투여하였다. 대퇴동맥에서 혈액을 채취한 다음 내부표준액 (클로피브릭산)을 함유한 아세토니트릴을 첨가하여 재단백하였다. 원심분리후 상등액을 질소가스로 휘발시키고 이동상을 첨가한 후 고성능액체크로마토그래피(HPLC)로 실험예 2와 동일한 조건으로 정량하였다.　

그 결과, 도 3에 나타낸 바와 같이 실시예 1 의 조성물 (페노피브레이트 20 mg/kg 해당량 투여)은 페노피브레이트 분말과 혈중 농도를 비교하면 혈중농도가 매우 유의하게 높음을 나타내었다. 또한, 하기 표 5에 나타난 바와 같이 실시예 1 의 조성물은 AUC 및 Cmax 가 유의성 있게 증가함을 보였으며, 특히 AUC의 경우에는 약 5배나 분말보다 높음을 나타내었다. 따라서 이 실험 결과 새로운 페노피브레이트 함유 젤라틴 나노입자의 조성물은 페노피브레이트의 생체내 이용율을 크게 향상시키는 것으로 나타났으며, 이러한 향상은 페노피브레이트 함유 젤라틴 나노입자에 의한 용해도 증가에 이은 용출율 증가에 기인한 것으로 보였다.

파라메타	페노피브레이트 분말	실시예 1
AUC (h·μg/ml)	17.72 ± 1.52	88.80 ± 25.42*
C_max (μg/ml)	2.36 ± 0.34	9.14 ± 2.47*
T_max(h)	1.58 ± 0.20	1.75 ± 0.27
t₁ _/2(h)	6.08 ± 0.92	6.17 ± 0.58
K_el(h^-1)	0.12 ± 0.02	0.11 ± 0.01
MRT (h)	7.41 ± 0.50	7.91 ± 0.21

* P<0.05 compared with fenofibrate powder

** Each value represents the mean+S.E. (n=6).

실험예 6. 　실온에서의 페노피브레이트 함유 젤라틴 나노입자 조성물의 안정성 평가

상기에서 제조한 실시예 1 의 조성물을 25 ℃에서 12개월간 보관하면서 페노피브레이트의 함량을 측정하였다. 실시예 1 의 조성물 약 1 g을 에탄올 10 ㎖를 넣어 교반한 다음 밀리포아여과기로 여과한 후 고성능액체크로마토그래피 (HPLC)로 실험예 2와 동일한 조건으로 정량하였다.

그 결과, 하기 표 6에 나타낸 바와 같이 실시예 1 의 조성물에서의 페노피브레이트 함량 및 성상은 12개월 동안 유의한 차이가 없었으며, 특히 분말이 서로 달라붙지 않아 응집 현상을 일으키지 않고 25 ℃에서 98 %이상을 유지하였다. 이로부터 이 제제는 25 ℃에서 적어도 1년간 안정하다고 판단할 수 있었다.

기간	성상 및 함량	실시예 1
0개월	성　　 상	흰색의 분말
0개월	함량 (mg/g, 중량%)	12.34 (100)
2개월	성　　 상	무변화 (무응집)
2개월	함량 (mg/g, 중량%)	12.30 (99.68)
4개월	성　　 상	무변화 (무응집)
4개월	함량 (mg/g, 중량%)	12.48 (101.13)
6개월	성　　 상	무변화 (무응집)
6개월	함량 (mg/g, 중량%)	12.21 (98.87)
12개월	성　　 상	무변화 (무응집)
12개월	함량 (mg/g, 중량%)	12.24 (99.19)

Claims

페노피브레이트 외부에 젤라틴 함유 피막층이 형성되어 있는 나노입자로서,
상기 나노입자는 나노입자 총 중량에 대하여 젤라틴 50 내지 88중량% 및 페노피브레이트 12 내지 50중량%를 포함하고,
상기 나노입자 내부는 에탄올을 포함하지 않거나 0.2중량% 이하로 포함하는 것인 나노입자.
제1항에 있어서, 상기 나노입자 내부는 에탄올을 포함하지 않거나 0.1중량% 이하로 포함하는 것인 나노입자.
삭제
제1항에 있어서, 상기 나노입자는 실온에서 안식각이 35°이하인 나노입자.
제1항에 있어서, 상기 나노입자는 대한약전 용출시험법 제2법 패들(paddle) 법에 따라 용출율 측정시, 1 시간 이내 페노피브레이트의 용출율이 80 중량% 이상인 나노입자.