KR101504908B1 - Compositions for enhancing skin barrier comprising extract of Boehmeria nivea - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 피부장벽강화용 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 모시풀(Boehmeria nivea) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부장벽강화용 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a composition for enhancing skin barrier, and more particularly to a composition for enhancing skin barrier containing an extract of Boehmeria nivea as an active ingredient.
사람의 피부는 25세를 전후해서 피부노화가 촉진된다. 피부노화를 설명하는 이론들은 주로 프리 라디칼 반응에 초점을 두고 있다. 세포대사 과정 중에 생성된 프리 라디칼은 각종 반응 기구를 통해 노화에 관여한다. DNA에 손상을 입혀 돌연변이를 유발하며 막지질을 산화시켜 세포내 소기관들을 파괴한다. 이러한 일련의 과정들은 세포가 정상적으로 분열, 성장하는데 큰 위협이 되며 이것들이 축적되어 노화가 일어나기 시작한다. 또한 피부가 자외선에 노출되었을 때 섬유아세포에서 프리 라디칼의 한 종류인 활성산소종이 생성되어 콜라게네이즈(collagenase, 이하 MMP-1)의 발현이 유도된다(Yoshiharu Kawaguchi et al. ,1996). MMP-1은 세포외 기질인 콜라겐을 분해하는 효소로서 기질 금속단백질분해효소 (matrixmetalloproteinase, 이하 'MMP'라 칭함)의 한 종류이다. MMP-1은 콜라겐 타입 I을 분해한다. 따라서 MMP-1의 발현이 유도되면 콜라겐의 합성이 감소하여 피부에 주름이 발생하게 된다(Laure Rittie et al., 2002). 따라서 피부 노화와 주름을 예방하기 위해서는 생체내에서 생성되는 프리라디칼의 발생을 억제하고 MMP-1의 작용을 저해하는 물질의 개발이 필요하다. 지금까지 연구보고된 주름완화 및 피부노화 예방 물질로는 레티놀, 아데노신, AHA 등이 개발되어 있으나 안정성이 떨어지며 피부자극을 유발하고 뚜렷한 가시적인 효과가 미흡하다는 문제점을 안고 있다. 따라서 앞선 문제점들을 보완할 수 있는 주름개선 및 피부노화예방 소재 연구가 필요한 상황이다.Skin aging around the age of 25 is promoted for human skin. Theories describing skin aging focus primarily on free radical reactions. Free radicals produced during cell metabolism are involved in aging through various reaction mechanisms. It damages DNA, causing mutations, and oxidizing membrane lipids to destroy intracellular organelles. These processes are a major threat to the normal division and growth of cells, which accumulate and begin to age. In addition, when skin is exposed to ultraviolet light, reactive oxygen species, a type of free radical in fibroblasts, is generated and induces collagenase (MMP-1) expression (Yoshiharu Kawaguchi et al., 1996). MMP-1 is an enzyme that degrades extracellular matrix collagen and is a kind of matrix metalloproteinase (MMP). MMP-1 degrades collagen type I. Therefore, when MMP-1 expression is induced, collagen synthesis is reduced and wrinkles occur on the skin (Laure Rittie et al., 2002). Therefore, in order to prevent skin aging and wrinkles, it is necessary to develop a substance that inhibits the generation of free radicals generated in vivo and inhibits the action of MMP-1. Although retinol, adenosine, AHA, etc. have been developed as anti-wrinkle and skin aging prevention materials reported so far, they have a problem of low stability, inducing skin irritation and lacking clear visual effects. Therefore, it is necessary to study wrinkle improvement and skin aging prevention materials that can solve the above problems.
일산화질소(nitric oxide, NO)는 높은 반응성을 가진 생체 생성분자로써, NO synthase(NOS)에 의해 L-arginine으로부터 생성된다. NO는 신경전달, 혈관의 이완 및 세포 매개성 면역반응에 관여하는데, 생체가 아토피 피부염과 같이 염증상태에 빠지게 되면 inducible NOS (iNOS)가 발현되어 많은 양의 NO를 생산한다(Choi, B.M, Pae, H.O., Jang, S.I., Kim, Y.M., Chung, H.T. Nitric oxide as a pro-apoptotic as well as anti-apoptotic modulator. J Biochem Mol Biol. 35: 116-126, 2002). 더불어 cyclooxygenase(COX)는 arachidonic acid를 아토피 피부염 prostanoid로 전환 시키는 효소로 알려졌는데, COX-1과 COX-2에 의해 합성된 적은양의 prostanoid는 생체의 항상성 유지에 필요하지만, 과량의 prostanoid는 NO와 비슷하게 활성화된 대식세포에서 COX-2의 발현이 촉진되어 많은 양의 prostaglandin E2(PGE2)를 생산하게 된다(2. Veale, D., Rogers, S., Fitzgerald, O. Immunolocalization of adhesion molecules in psoriatic arthritis, psoriatic andnormal skin. Br. J. Dermatol., 132: 32-38, 1995.). 이렇게 생성된 NO와 PGE2와 같은 염증촉진 매개물은 아토피 피부염을 더욱 악화시키는 것으로 알려져 있다(Bruch-Gerharz, D., Fehsel, K., Suschek, C., Michel, G., Ruzicka, T., Kolb-Bachofen, V. A proinflammatory activityof interleukin 8 in human skin: expression of the inducible nitric oxide synthase in psoriatic lesions and culturedkeratinocytes. J. Exp. Med. 184: 2007-2012, 1996, Bruch-Gerharz, D., Ruzicka, T., Kolb-Bachofen, V. Nitric oxide and its implications in skin homeostasis and disease- a review. J. Invest. Dermatol. 110: 1-7, 199) Nitric oxide (NO) is a biologically active molecule with high reactivity and is produced from L-arginine by NO synthase (NOS). NO is involved in neurotransmission, vascular relaxation, and cell mediated immune response. When the organism is in an inflammatory state such as atopic dermatitis, inducible NOS (iNOS) is expressed and produces a large amount of NO (Choi, BM, Pae , JH, Jang, SI, Kim, YM, Chung, HT, Nitric oxide as a pro-apoptotic as well as anti-apoptotic modulator. J Biochem Mol Biol., 35: 116-126, 2002). In addition, cyclooxygenase (COX) is known to be an enzyme that converts arachidonic acid into atopic dermatitis prostanoid. Small amounts of prostanoids synthesized by COX-1 and COX-2 are necessary for the maintenance of biological homeostasis. Excess prostanoids, however, Similarly, the expression of COX-2 in the activated macrophages is promoted to produce large amounts of prostaglandin E2 (PGE2) (2. Veale, D., Rogers, S., Fitzgerald, O. Immunolocalization of adhesion molecules in psoriatic arthritis , psoriatic and normal skin, Br. J. Dermatol., 132: 32-38, 1995.). The resulting inflammatory mediators such as NO and PGE2 are known to exacerbate atopic dermatitis (Bruch-Gerharz, D., Fehsel, K., Suschek, C., Michel, G., Ruzicka, -Bachofen, V. A proinflammatory activity of interleukin 8 in human skin: expression of the inducible nitric oxide synthase in psoriatic lesions and culturedkeratinocytes. J. Exp. Med. 184: 2007-2012, 1996, Bruch-Gerharz, D., Ruzicka, T., Kolb-Bachofen, V. Nitric oxide and its implications in skin homeostasis and disease-review, J. Invest. Dermatol. 110: 1-7, 199)
피부 중에서 최외각에 위치한 표피(epidermis)의 가장 중요한 기능은, 외부로부터의 다양한 자극(화학물질, 대기오염물질, 건조한 환경, 자외선 등의 물리 및 화학적 자극인자)에 대한 방어와 피부를 통한 체내 수분의 과도한 발산을 막는 보호기능이며, 이러한 보호기능은 각질형성세포로 구성된 각질층이 정상적으로 형성되어 있을 때만 그 기능을 유지할 수 있다. 표피 중에서도 가장 바깥에 존재하는 각질층(stratum corneum, horney layer)은 각질형성세포로부터 형성되며, 분화가 완결된 각질 세포와 그를 둘러싼 지질층으로 구성되어 있다(J.Invest. Dermatol. 1983; 80: 44~49).The most important function of the epidermis located on the outermost part of the skin is to protect against various external stimuli (physical and chemical stimulants such as chemicals, air pollutants, dry environment, ultraviolet rays) , And this protective function can maintain its function only when the stratum corneum composed of keratinocytes is normally formed. The stratum corneum (horney layer), which is the outermost part of the epidermis, is formed from keratinocytes and consists of keratinocytes with complete differentiation and a surrounding lipid layer (J. Invest. Dermatol. 1983; 80: 49).
각질세포는 표피 최하층에서 지속적으로 증식(proliferation)하는 기저세포(basal cell)가 단계적으로 형태 및 기능상의 변화를 거치며, 피부 표면까지 상승한 특징적인 세포이며, 일정 기간이 경과 하면 오래된 각질세포는 피부에서 탈락 되고 새로운 각질세포가 그 기능을 대신하게 되는데, 이러한 반복적인 일련의 변화 과정을 “표피세포의 분화” 또는 “각화(keratinization)”라고 부른다. 또한, 각화과정 중에 각질형성세포는 천연보습인자(Natural moisturizing factor; NMF)와 세포간지방질(세라마이드, 콜레스테롤, 지방산)을 생성하면서 각질층을 형성하여 각질층이 견고함과 유연성을 가지게 하여 피부 장벽(skin barrier)으로서의 기능을 보유하게 한다. 이러한 각질층은 과도한 세안이나, 목욕 등의 생활 습관적 요소나, 건조한 대기 오염 물질 등의 환경적인 요인 및 아토피성 피부나 노인성 피부 같은 내인성 질환 등으로 인해 쉽게 그 기능이 손실될 수 있으며, 실제로 현대에 들어서 더욱 늘어난 다양한 요인들로 인해 최근에는 건조피부증상 및 이로 인한 제반 장해를 호소하는 부분들이 점점 증가하고 있는 추세이다. 따라서, 적절한 피부 수분을 유지하기 위하여 외부로부터 수분을 공급하거나, 체내로부터의 수분 손실을 방지하기 위한 연구가 다양하게 진행되어 왔으며, 실제로 수분 보유 능력이 있는 다양한 보습제(moisturizer)가 개발되어 있다. 피부 보습제로는 세라마이드 등의 지질성분과 필수지방산 및 지질복합체 등 각질층에서의 수분보유를 증가시킬 수 있는 물질을 사용하는 것이 일반적이다(Rawlings A. V. et al, J. Invest. Dermatol., 5,p 731-741, 1994). 그러나, 최근 피부에 대한 위해 요인이 점점 증가 되고 있고, 식생활 양상의 변화로 각질층의 생성, 탈락 속도가 늦어지며, 각질형성세포의 기능 저하로 각질층의 보습 인자와 지질의 양이 감소 되어 각질층이 정상적인 피부 장벽 기능을 발휘하지 못하는 피부를 가진 사람들이 증가하고 있는 추세이다. 이런 피부 장벽 기능의 와해는 피부건조증, 아토피 피부염, 접촉성 피부염, 건선 등의 다양한 피부 질환을 유발하게 된다. 이와 같은 질환들은 기존의 통상적인 수분보유기능을 갖는 보습제만으로도 증상 완화는 기대할 수 있지만 근본적인 치유는 어려운 실정이다.The keratinocyte is a characteristic cell in which basal cells continuously proliferating in the lowest epidermis undergo a stepwise change in morphology and function and are elevated to the surface of the skin. After a certain period of time, And the new keratinocyte replaces its function. This repetitive sequence of changes is called "epidermal cell differentiation" or "keratinization". In addition, during keratinization, keratinocytes form natural moisturizing factors (NMF) and intercellular lipids (ceramides, cholesterol, fatty acids) and form stratum corneum, which gives firmness and flexibility to the stratum corneum, barrier function. Such stratum corneum can easily lose its function due to environmental factors such as excessive washing, bathing and other lifestyle factors, dry air pollutants, and endogenous diseases such as atopic skin and senile skin. In fact, Due to the increasing number of factors, there has been an increasing trend in recent years to appeal to dry skin symptoms and various disabilities. Therefore, in order to maintain proper skin moisture, various studies have been made to supply water from the outside or to prevent water loss from the body, and various moisturizers having moisture retention ability have been developed. As a skin moisturizing agent, it is common to use a substance capable of increasing water retention in the stratum corneum such as ceramide and essential fatty acid and lipid complex (Rawlings AV et al., J. Invest. Dermatol., 5, p 731 -741, 1994). However, recently, the risk factors for skin are increasing, and changes in dietary patterns slow down the generation and decline of the stratum corneum, and the function of the keratinocyte is reduced, so that the amount of moisturizing factor and lipid in the stratum corneum is decreased, There is an increasing trend in people with skin that can not function as a skin barrier. Such breakdown of the skin barrier function causes various skin diseases such as dry skin, atopic dermatitis, contact dermatitis and psoriasis. Such diseases can be expected to be alleviated by moisturizing agents having a conventional moisture retention function but it is difficult to achieve fundamental healing.
모시풀은(Boehmeria nivea ( Linne ) Gaudich .) 쐐기풀과의 여러해살이풀로서 잎은 호생하고 난상 원형이며 길이 10-15cm, 폭 6-12cm로서 끝이 꼬리처럼 약간 길고 밑부분은 둔저 또는 원저이며 가장자리에 규칙적인 톱니가 있고 표면은 짙은 녹색으로서 털이 약간 있으나 뒷면은 솜털이 밀생하여 흰빛이 돌며 맥 위에 퍼진 털이 있다. 엽병은 잎과 길이가 같거나 약간 짧고 퍼진 잔털이 있다. 꽃은 7-8월에 피고 암수한그루로서 원추화서로 엽액에 달리고, 화서가 엽병보다 짧다. 수꽃 화서는 줄기 밑부분에, 암꽃 화서는 줄기 윗부분에 달리며 화서는 길이 5-10cm이다. 수꽃은 황백색으로 화피 4장, 수술 4개로 되어 있다. 암꽃은 연녹색으로 통모양의 화피에 싸이고, 여러 개의 꽃이 모여 둥글게 되며 암술 1개로 구성되어 있다. 열매는 수과로 타원형이며 길이 1mm정도로서 여러 개가 함께 붙어 있다. 원줄기는 높이 1-2m이고 둥글며 약간 가지가 갈라지기도 하고 녹색으로서 엽병과 더불어 퍼진 잔털이 많다. 뿌리는 목질로 땅속에서 옆으로 뻗는다. 한방에서는 뿌리를 저마근이라 하여 약으로 쓰는데 지혈, 이뇨, 항균 작용이 있으며 주요성분으로는 chlorogenic acid, triterpene 화합물이 함유되어 있다(안덕균, 원색한국본초도감, 7판, p527, 2006).The moth ( Boehmeria nivea ( Linne ) Gaudich . ) It is a perennial plant with a nettle. The leaf is round, oval-shaped, 10-15cm long and 6-12cm wide. Its tip is slightly long like a tail, its bottom is dull or circular, has regular sawtooth on the edge, There are some hairs but the back side is white with dewy hair and there are hairs spread on the veins. Petiole is the same length as the leaf or slightly shorter and has spread fine hairs. Flowers bloom in July-August, and one male and one female run on each leaf, and the inflorescence is shorter than the petiole. The female flower is on the lower part of the stem, the female flower is on the upper part of the stem, and the inflorescence is 5-10cm long. The male flower is yellowish white, with 4 horns and 4 stamens. The female flower is a pale green colored tubular envelope, with several flowers rounded and composed of one pistil. Fruits are oval, oval, and have a length of about 1mm and are attached together. The main stem is 1-2 m high, round, slightly branched, and green, with lots of fine hairs spread with petiole. The roots extend from the ground to the side in wood. In the oriental medicine, the root is used as low-grade persimmon, and it has hemostatic, diuretic, antimicrobial action and chlorogenic acid and triterpene compound are contained as main components (Ahn, Duk-Gyun, primary color primary picture book, 7th edition, p527, 2006).
모시풀의 효과에 대해서 모시풀 속 식물 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병, 암 또는 신경퇴행성질환의 예방 및 치료 용도에 대한 특허(한국등록특허공보 제 10-1052191), 모시풀을 이용한 탈모방지용 한방추출물 및 이를 이용한 탈모방지 샴푸에 관한 특허(한국등록특허공보 제 10-1090593) 등이 있으나 모시풀 추출물의 항산화, 항염, 주름방지, 보습, 피부장벽 강화 효과에 대해서는 보고된 바 없다. The present invention relates to a method for the prevention and treatment of diabetes, cancer or neurodegenerative diseases, which comprises plant extracts of the genus Porphyra as an active ingredient (Korean Patent Registration No. 10-1052191) (Korean Patent Registration No. 10-1090593). However, the effects of antioxidant, anti-inflammation, anti-wrinkle, moisturizing and skin barrier strengthening effects of the extract of Momordicae Radix have not been reported.
이에, 본 발명자들은 상기 종래기술들의 문제점들을 극복하기 위하여 예의 연구노력한 결과, 모시풀 추출물을 함유하는 조성물의 경우, 피부장벽을 강화할 뿐만 아니라, 노화방지, 항산화, 항염, 주름개선 및 보습효과를 나타내는 것을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
The inventors of the present invention have made extensive efforts to overcome the problems of the prior arts. As a result, the present inventors have found that the composition containing the extract of Momordicae mucilagus not only strengthens the skin barrier but also exhibits antioxidant, antiinflammatory, And the present invention was completed.
따라서, 본 발명의 주된 목적은 피부장벽을 강화할 뿐만 아니라, 노화방지, 항산화, 항염, 주름개선 및 보습효과를 갖는 모시풀 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부장벽강화용 조성물을 제공하는 데 있다.Accordingly, it is a main object of the present invention to provide a composition for enhancing skin barrier comprising not only a skin barrier but also an extract of mossy mildew having antioxidant, antioxidant, anti-inflammation, wrinkle improvement and moisturizing effect as an active ingredient.
본 발명의 다른 목적은 상기 모시풀 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부장벽강화용 조성물을 이용한 피부외용제 조성물을 제공하는데 있다.It is another object of the present invention to provide a composition for external application for skin using the composition for enhancing skin barrier containing the extract of Momordica bean as an active ingredient.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 모시풀 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부장벽강화용 조성물을 이용한 화장료 조성물을 화장료 조성물을 제공하는데 있다.
It is still another object of the present invention to provide a cosmetic composition using the composition for enhancing skin barrier containing the extract of Momordica bean as an active ingredient.
본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 모시풀(Boehmeria nivea) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부장벽강화용 조성물을 제공한다.According to one aspect of the invention there is provided ramie (Boehmeria nivea ) extract as an active ingredient.
본 발명에 있어서 피부장벽강화란, 피부의 가장 외각에 위치하는 각질층의 장벽기능을 강화하는 것을 의미한다. 피부가 수행하는 가장 중요한 기능 중 하나는 피부 내외의 각종 물질의 자유로운 이동을 막는 장벽으로의 기능이다. 피부 장벽은 과립층에서 각질층으로 급격히 이행되면서 케라틴 중간 미세 섬유들이 엉겨 붙어 섬유다발을 형성하고 각질유리과립에 있던 단백질 성분들 및 다른 세포질 내 단백질과 교차 결합하면서 세포막의 안쪽을 둘러싸는 각질 단백막을 형성하면서 세포막이 대체된다. 각질 단백막과 각질 지질막을 합쳐서 각질세포의 경계를 이루는 각질비후막(cornified envelope)을 형성하게 되며 완전한 피부 장벽 구조를 완성한다. 트렌스글루타미네이즈 1(Transglutaminase 1: TGase-1)은 각질비후막 형성에 필요한 다양한 단백질들을 크로스링크(cross-linking) 시키며 긴사슬(long chain)의 하이드록시세라마이드(hydroxyceramide)를 단백질과 연계하여 각질 지질막 형성에 기여함으로서 피부장벽을 강화한다. In the present invention, strengthening the skin barrier means strengthening the barrier function of the stratum corneum at the outermost part of the skin. One of the most important functions performed by the skin is its function as a barrier against the free movement of various substances inside and outside the skin. The skin barrier is rapidly transferred from the granule to the stratum corneum, keratin intermediate fine fibers are clumped to form a fiber bundle, cross-linked with protein components in the keratinous granules and other cytoplasmic proteins, forming a keratinous protein membrane surrounding the inside of the cell membrane Cell membranes are replaced. The keratinous protein membrane and the keratinous lipid membrane are combined to form a cornified envelope that forms the boundary of the keratinocytes and complete a complete skin barrier structure. Transglutaminase 1 (TGase-1) cross-links a variety of proteins required for keratin-free thick-film formation, and links long-chain hydroxyceramides with proteins to form keratinocytes It strengthens skin barrier by contributing to lipid membrane formation.
또한, 피부는 외부환경으로부터 개체를 보호하는 일차 장벽으로 작용한다. 피부의 표피를 주로 구성하고 있는 각질형성세포는 분열과 분화를 거치면서 피부장벽을 만드는 역할을 한다. 피부장벽이 정상적으로 만들어지지 않거나 비정상적으로 각질형성세포가 분화하게 되면 피부질환이 발생한다. 이러한 경우 각질형성세포가 정상적으로 분화하도록 하여 피부장벽을 형성함으로써 피부장벽강화를 유도할 수 있다. 각질형성세포의 분화는 조절을 받는 유전자들의 발현 변화의 결과로 세포주기가 멈추거나 세포모양이 변하게 된다. 이때 분화와 관련되어서 발현이 증가하게 되는 유전자로 Transglutaminase-1이 있다. 각질형성세포가 분화하게 되면 세포막 안쪽에 있는 구조단백질들을 Transglutaminase-1이 결합시켜 단단한 구조물인 각질세포막(Cornified cell envelope)을 형성하게 되어 피부장벽이 강화되게 된다. In addition, the skin acts as a primary barrier to protect the individual from the external environment. The keratinocytes, which are composed mainly of the epidermis of the skin, play a role in making skin barrier through cleavage and differentiation. A skin disorder occurs when the skin barrier is not normally formed or abnormally differentiated keratinocytes. In this case, keratinocytes are normally differentiated to form a skin barrier, thereby enhancing the skin barrier. Differentiation of keratinocyte cells causes the cell cycle to stop or the cell shape to change as a result of changes in the expression of regulated genes. Transglutaminase-1 is the gene whose expression is related to differentiation. When the keratinocyte is differentiated, transglutaminase-1 binds the structural proteins inside the cell membrane to form a hardened structure, corned cell envelope, which strengthens the skin barrier.
따라서, 이러한 측면에서 본 발명의 모시풀 추출물은 각질형성세포 분화와 관련된 인자인 Transglutaminase-1의 발현을 증가시켜 피부장벽을 형성하게 함으로써 피부장벽기능을 강화시킨다. Therefore, in this respect, the extract of the present invention enhances the skin barrier function by increasing the expression of transglutaminase-1, a factor involved in keratinocyte differentiation, to form a skin barrier.
모시풀은(Boehmeria nivea ( Linne ) Gaudich .) 쐐기풀과의 여러해살이풀로서 한방에서는 뿌리를 약으로 쓰는데 지혈, 이뇨, 항균 작용이 있으며 주요성분으로는 chlorogenic acid, triterpene 화합물이 함유되어 있다(안덕균, 원색한국본초도감, 7판, p527, 2006).The moth ( Boehmeria nivea ( Linne ) Gaudich . ) It is a perennial herbaceous plant with a nettle, and its root is used as a medicine. It has hemostatic, diuretic, antibacterial action and its main ingredient is chlorogenic acid, triterpene compound (Ahn, ).
본 발명에 있어서, 상기 추출물은 노화방지, 항산화, 항염, 주름개선 및 보습 효과를 더 나타내는 것을 특징으로 한다. In the present invention, the extract is characterized by further exhibiting anti-aging, antioxidant, anti-inflammatory, wrinkle-improving and moisturizing effects.
본 발명의 실시예에 따르면, DPPH 테스트 및 ROS 테스트를 통해 항산화효과를 확인하였으며, 이는 본 발명의 모시풀 추출물이 프리 라디컬 또는 활성산소를 효과적으로 소거하여 항산화효과를 나타냄으로써 피부노화를 방지할 수 있음을 의미한다.According to the embodiment of the present invention, the antioxidative effect was confirmed by the DPPH test and the ROS test, and it is possible to prevent the skin aging by effectively removing the free radical or active oxygen and thereby exhibiting the antioxidative effect .
본 발명의 실시예에 따르면, NO assay를 통해 항염효과를 확인하였으며, 이는 본 발명의 모시풀 추출물이 염증 반응을 유도하는 NO 생성량을 낮추어 항염효과를 나타냄으로써 피부염증반응을 저하 시킬 수 있음을 의미한다.According to the embodiment of the present invention, the anti-inflammatory effect is confirmed by the NO assay, which means that the extract of Momipulipule of the present invention lowers the amount of NO inducing the inflammatory reaction and exhibits anti-inflammatory effect, .
본 발명의 실시예에 따르면, 엘라스타아제 활성저해 테스트, 콜라게나아제(MMP-1) 활성저해 테스트 및 콜라겐 합성 테스트를 통해 주름개선효과를 확인하였으며, 이는 본 발명의 모시풀 추출물이 결합조직에 존재하는 탄력성이 큰 단백질 섬유인 엘라스틴을 분해하는 엘라스티나아제의 활성의 저해, 콜라겐 합성 촉진 및 콜라겐 합성을 감소시키는 콜라게나아제(MMP-1) 활성을 저해함으로써 주름개선효과를 나타낼 수 있다는 것을 의미한다. According to the examples of the present invention, the wrinkle-reducing effect was confirmed through the test for the inhibition of the activity of the elastase activity, the inhibition of collagenase activity (MMP-1) and the collagen synthesis test, (MMP-1) activity which promotes collagen synthesis and collagen synthesis by inhibiting the activity of elastin degrading elastin, which is a protein fiber having a high elasticity, and can exhibit a wrinkle-reducing effect do.
또한, 본 발명의 실시예에 따르면, 본 발명의 모시풀 추출물을 함유하는 크림으로 보습효과를 확인하였는데, 본 발명의 모시풀 추출물을 함유하는 크림을 도포한 경우, 수분이 증가하는 효과를 확인하였으며, 이는 본 발명의 모시풀 추출물이 피부의 수분율을 증가시켜 보습효과를 나타낼 수 있다는 것을 의미한다. In addition, according to the present invention, the moisturizing effect was confirmed by the cream containing the extract of Momordicae extract of the present invention. However, when the cream containing the Momordia extract of the present invention was applied, the effect of increasing moisture was confirmed, It means that the extract of Momordicae extract of the present invention can increase the moisture content of the skin to exhibit a moisturizing effect.
본 발명에 있어서, 상기 추출물은 종래 알려진 어떠한 추출용매로도 추출될 수 있으며, 예컨대, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 에테르, 에틸아세테이트, 클로로포름 또는 이들 유기용매와 물의 혼합용매로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 용매로 추출할 수 있으며 바람직하게는 물, 에탄올 또는 부틸렌 글리콜인 것을 특징으로 한다.In the present invention, the extract may be extracted with any extraction solvent known in the art, and may be extracted with a solvent selected from the group consisting of ethanol, methanol, butanol, ether, ethyl acetate, chloroform or a mixed solvent of these organic solvents and water , And is preferably water, ethanol or butylene glycol.
상기 용매의 추출 온도는 물의 경우 18 ~ 80℃가 바람직하며, 70% 에탄올과 부틸렌 글리콜의 경우는 18 ~ 40℃가 바람직하며, 추출 시간은 6 ~ 168시간이 바람직하다. 상기 추출 온도 및 추출 시간을 벗어나면 추출 효율이 떨어지거나 성분의 변화가 생길 수 있다. 상기에서 용매를 이용하여 추출물을 얻은 이후 당업계에 알려진 통상적인 방법으로 상온에서 냉침, 가열 및 여과하여 액상물을 얻을 수 있으며, 또는 추가로 용매를 증발, 분무 건조 또는 동결 건조할 수 있다.The extraction temperature of the solvent is preferably 18 to 80 ° C for water, 18 to 40 ° C for 70% ethanol and butylene glycol, and the extraction time is preferably 6 to 168 hours. If the extraction temperature and the extraction time are exceeded, the extraction efficiency may be deteriorated or the component may be changed. After obtaining the extract using a solvent, the extract can be obtained by cooling, heating and filtering at room temperature by a conventional method known in the art, or the solvent can be further evaporated, spray dried or freeze-dried.
본 발명에 있어서, 상기 추출물은 종래에 알려진 어떠한 추출방법으로도 추출될 수 있으며, 바람직하게는 건조된 모시풀을 용매에 넣어 환류 추출하여 침적시킨 후, 침적물을 여과하여 얻은 여액을 감압 농축하여 추출하는 것을 특징으로 한다. In the present invention, the extract may be extracted by any extraction method known in the art. Preferably, the dried mother liquor is put into a solvent and refluxed and extracted. After filtration of the deposit, the filtrate is concentrated under reduced pressure to extract .
본 발명에 사용된 모시풀 추출물은 모시풀로부터 침출, 전출하여 얻은 침출액 뿐 아니라 침출액을 다시 일부 또는 전부 농축하여 얻은 농축물 또는 상기의 농축물을 다시 건조시켜 제조한 침체, 전제, 정기, 유동엑기스 및 모시풀 중에 함유되어 주 효과를 발휘하는 화학 물질은 물론 식물 그 자체를 모두 포함한다. 또한 본 발명에서는 껍질, 줄기, 뿌리, 잎, 꽃, 열매 등 모시풀의 모든 부분으로부터의 추출물을 사용할 수 있으며, 어느 특정부분의 추출물로 한정되지 않는다.The mash extract used in the present invention is not only an extract obtained by leaching and transferring from a mother liquor but also a concentrate obtained by partially or entirely concentrating the leach solution or a dough prepared by re-drying the concentrate, As well as the chemical itself that is contained in the plant and exhibits the main effect. In the present invention, the extracts from all parts of the mother liquor, such as shells, stems, roots, leaves, flowers, and fruits, can be used.
본 발명에서 사용되는 모시풀 추출물의 제조방법으로는 공지의 방법을 사용하는 것이 가능하다. 예를 들면, 발명의 모시풀을 세절하고 건조한 후 물 또는 유기용매를 넣고, 환류 추출하여 침적시킨 후 여과포 여과와 원심분리를 통해 잔사와 여액을 분리하고, 분리된 여액을 감압 농축하여 추출물을 얻을 수 있다.A known method can be used as a method for producing the extract of Momotamycetes used in the present invention. For example, after the fungus of the invention is cut and dried, water or an organic solvent is added, and the mixture is subjected to reflux extraction, followed by filtration, filtration and centrifugation to separate the residue and filtrate, and the separated filtrate is concentrated under reduced pressure to obtain an extract have.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 모시풀(Boehmeria nivea)추출물을 유효성분 함유하는 피부장벽강화용 피부 외용제 조성물을 제공한다.According to another aspect of the invention there is provided ramie (Boehmeria nivea ) extract as an effective ingredient for skin barrier enhancement.
본 발명에 있어서, 상기 모시풀 추출물은 조성물 총 중량 대비 0.001 ~ 50 중량% 함유하는 것을 특징으로 한다.In the present invention, the extract of Momordica isoform is contained in an amount of 0.001 to 50% by weight based on the total weight of the composition.
상기 모시풀 추출물의 함량이 0.001 중량% 미만이면 상기 추출물에 의한 효능, 효과가 미약하고, 50 중량%를 초과하면 피부 안전성 또는 제형상의 문제가 있기 때문이다.If the content of the extract is less than 0.001% by weight, the efficacy and efficacy of the extract are insufficient. If the content is more than 50% by weight, skin safety or shape problems may occur.
본 발명의 조성물은 항노화용 피부 외용제 조성물로서 사용될 수 있으며, 이는 피부 탄력을 증진시키고 주름을 방지 및 주름개선 효과가 뛰어나다. 본 발명의 조성물은 보습용 피부 외용제 조성물로서 사용될 수 있으며, 이는 피부 장벽 기능을 강화시키고 피부각질형성세포의 분화를 유도시킬 수 있다. 따라서 표피 분화의 불완전함으로 생기는 피부건조증, 아토피피부염, 접촉성 피부염 또는 건선 등을 예방 또는 개선하는 피부 외용제 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.The composition of the present invention can be used as a composition for external application for skin for anti-aging, which enhances skin elasticity, prevents wrinkles and improves wrinkles. The composition of the present invention can be used as a composition for external application for moisturizing skin, which can enhance the skin barrier function and induce differentiation of dermal keratinocytes. Therefore, it can be effectively used as a composition for external application for skin, which prevents or improves skin dryness, atopic dermatitis, contact dermatitis, psoriasis or the like caused by incompleteness of epidermal differentiation.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 모시풀(Boehmeria nivea )추출물을 유효성분 함유하는 피부장벽강화용 화장료 조성물을 제공한다. According to another aspect of the invention, ramie (Boehmeria nivea ) extract as an active ingredient.
본 발명에 있어서, 상기 모시풀 추출물은 조성물 총 중량 대비 0.001 ~ 50 중량% 함유하는 것을 특징으로 한다. In the present invention, the extract of Momordica isoform is contained in an amount of 0.001 to 50% by weight based on the total weight of the composition.
상기 모시풀 추출물의 함량이 0.001 중량% 미만이면 상기 추출물에 의한 효능, 효과가 미약하고, 50 중량%를 초과하면 피부 안전성 또는 제형상의 문제가 있기 때문이다.If the content of the extract is less than 0.001% by weight, the efficacy and efficacy of the extract are insufficient. If the content is more than 50% by weight, skin safety or shape problems may occur.
본 발명에 있어서, 상기 화장료 조성물은 화장수(스킨로션), 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양 로션, 마사지 크림, 영양 크림, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양 에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클렌저 제형의 제형으로 구성된 군에서 선택된 제형을 갖는 것을 특징으로 한다. In the present invention, the cosmetic composition according to the present invention may be used as a skin lotion, a skin softener, a skin toner, an astringent, a lotion, a milk lotion, a moisturizing lotion, a nutrition lotion, a massage cream, A nutritional essence, a pack, a soap, a cleansing foam, a cleansing lotion, a cleansing cream, a body lotion and a body cleanser formulation.
본 발명에 따른 조성물은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화 될 수 있다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로서, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀) 및 비이온형의소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한 거품(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다. 또한 본 발명에 의한 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다. 또한, 본 발명의 조성물은 피부 개선 효과를 증가시키기 위하여 피부 흡수 촉진 물질을 함유할 수 있다.The composition according to the invention may be formulated containing a cosmetically or dermatologically acceptable medium or base. These are all formulations suitable for topical application, for example as a solution, a gel, a solid, a paste anhydrous product, an emulsion obtained by dispersing an oil phase in water, a suspension, a microemulsion, a microcapsule, a microgranule or an ionic form (liposome) In the form of ionic fibrin dispersions, or in the form of creams, skins, lotions, powders, ointments, sprays or conical sticks. It can also be used in the form of a foam or in the form of an aerosol composition further containing a compressed propellant. These compositions may be prepared according to conventional methods in the art. In addition, the composition according to the present invention may further comprise at least one selected from the group consisting of fatty substances, organic solvents, solubilizers, thickening agents, gelling agents, softening agents, antioxidants, suspending agents, stabilizing agents, Such as fillers, emulsifiers, emulsifiers, fillers, sequestering agents, chelating agents, preservatives, vitamins, blockers, moisturizers, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, lipid vesicles or any other ingredient commonly used in cosmetics May contain adjuvants commonly used in the field of cosmetics or dermatology. Such adjuvants are introduced in amounts commonly used in the cosmetics or dermatological fields. In addition, the composition of the present invention may contain a skin absorption promoting substance to increase the skin improving effect.
본 발명의 제 5항 및 제 7항에 있어서, 상기 모시풀 추출물은 항산화, 항염, 주름개선 및 보습 효과를 더 나타내는 것을 특징으로 한다.[7] The method according to claim 5 or 7, wherein the extract is further characterized by antioxidative, anti-inflammatory, wrinkle-improving and moisturizing effects.
본 발명의 실시예에 따르면, DPPH 테스트 및 ROS 테스트를 통해 항산화효과를 확인하였으며, 이는 본 발명의 모시풀 추출물이 프리 라디컬 또는 활성산소를 효과적으로 소거하여 항산화효과를 나타냄으로써 피부노화를 방지할 수 있음을 의미한다.According to the embodiment of the present invention, the antioxidative effect was confirmed by the DPPH test and the ROS test, and it is possible to prevent the skin aging by effectively removing the free radical or active oxygen and thereby exhibiting the antioxidative effect .
본 발명의 실시예에 따르면, NO assay를 통해 항염효과를 확인하였으며, 이는 본 발명의 모시풀 추출물이 염증 반응을 유도하는 NO 생성량을 낮추어 항염효과를 나타냄으로써 피부염증반응을 저하시킬 수 있음을 의미한다.According to the embodiment of the present invention, the anti-inflammatory effect is confirmed by the NO assay, which means that the extract of Momipulipule of the present invention lowers the amount of NO inducing the inflammatory reaction and exhibits anti-inflammatory effect, .
본 발명의 실시예에 따르면, 엘라스타아제 활성저해 테스트, 콜라게나아제(MMP-1) 활성저해 테스트 및 콜라겐 합성 테스트를 통해 주름개선효과를 확인하였으며, 이는 본 발명의 모시풀 추출물이 결합조직에 존재하는 탄력성이 큰 단백질 섬유인 엘라스틴을 분해하는 엘라스티나아제의 활성의 저해, 콜라겐 합성 촉진 및 콜라겐 합성을 감소시키는 콜라게나아제(MMP-1) 활성을 저해하여 주름개선효과를 나타낼 수 있다는 것을 의미한다. According to the examples of the present invention, the wrinkle-reducing effect was confirmed through the test for the inhibition of the activity of the elastase activity, the inhibition of collagenase activity (MMP-1) and the collagen synthesis test, (MMP-1) activity, which promotes collagen synthesis and collagen synthesis, and thus exhibits a wrinkle-reducing effect, as compared with the case of the elastin-degrading elastin. do.
또한, 본 발명의 실시예에 따르면, 본 발명의 모시풀 추출물을 함유하는 크림으로 보습효과를 확인하였는데, 본 발명의 모시풀 추출물을 함유하는 크림을 도포한 경우, 수분이 증가하는 효과를 확인하였으며, 이는 본 발명의 모시풀 추출물이 피부의 수분율을 증가시켜 보습효과를 나타낼 수 있다는 것을 의미한다.
In addition, according to the present invention, the moisturizing effect was confirmed by the cream containing the extract of Momordicae extract of the present invention. However, when the cream containing the Momordia extract of the present invention was applied, the effect of increasing moisture was confirmed, It means that the extract of Momordicae extract of the present invention can increase the moisture content of the skin to exhibit a moisturizing effect.
이상 설명한 바와 같이, 본 발명의 모시풀 추출물은 피부장벽강화효과, 노화 방지, 항산화 효과, 항염, 주름방지 및 개선효과, 및 보습효과를 나타냄으로, 피부장벽강화 및 주름개선효과를 위한 피부 외용제 또는 화장료 조성물로의 상용화에 유용하다.
INDUSTRIAL APPLICABILITY As described above, the Momordicae extract of the present invention exhibits skin barrier strengthening effect, anti-aging effect, antioxidative effect, anti-inflammation, wrinkle prevention and improvement effect and moisturizing effect, And is useful for commercialization as a composition.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. These embodiments are only for illustrating the present invention, and thus the scope of the present invention is not construed as being limited by these embodiments.
실시예Example 1 : 모시풀 추출물의 제조 1: Preparation of Momordicae Extract
제주도에서 채집한 모시풀을 음지에서 건조하여 잎 100g을 분쇄기를 이용하여 분말로 제조 후, 70% 에탄올 2L에 상온에서 초음파를 이용하여 4시간 동안 2회 반복 추출한 다음 어드반택 NO.4(제조판매원: Toyo Roshi Kaisha Ltd.) 여과지로 여과하였다. 여액을 감압회전농축기를 이용하여 건조중량 15.2g을 얻었다.
After drying 100% of the leaves collected from Jeju Island in the shade, 100 g of the leaves were ground into powder using a pulverizer, and then repeatedly extracted twice with 70% ethanol at room temperature for 4 hours using ultrasonic waves. Toyo Roshi Kaisha Ltd.). The filtrate was dried to a weight of 15.2 g using a rotary evaporator under reduced pressure.
실험예Experimental Example 1 : 피부장벽강화 효능 평가( 1: Assessment of skin barrier enhancement efficacy TGaseTGase -1 -One assayassay ))
상기 실시예 1에서 제조된 모시풀 추출물의 피부장벽강화 효과를 측정하기 위해서 사람 유래의 각질 형성 세포(HaCaT cell)을 배양접시의 바닥에 접종한 후, 페니실린(100U/㎖), 스트렙토마이신(100㎍/㎖), 10% FBS(Fetal bovine serum)를 함유하는 DMEM(Dulbecco’s modified Eagle’smedium) 배지를 넣고 37℃, 5% 이산화탄소를 포함하는 배양기 내에서 배양한다. HaCaT cell을 96well plate에 5X104cells/ml의 농도로 희석하여 100㎕씩 접종한 후 24 시간 배양한다. 배양 후, 배지를 모두 제거하고, 혈청이 포함되지 않은 배지를 이용하여 시료를 적당한 농도로 희석하여 각 시료를 well 당 100㎕씩, 3반복 처리한 후, 48시간 추가 배양한다. 이때 사용하는 배지는 Calcium-free media (hyclone,SH.30319. 01)에 CaCl2를 넣어 저 칼슘(0.03 mM) 처리군과 고 칼슘(1.2 mM)처리 군으로 각각 음성/양성대조군을 설정하고, 시료는 저 칼슘 배지로 희석하여 사용한다. 배지 제거 후 freeze-thawing을 3회 반복한다(-20℃에서 얼린 후 녹이기, -70℃도 가능). -20℃에 보관한 아세톤:에탄올(1:1, v/v)을 처리한 후, 4℃에서 30분간 fixation 후, 유기용매가 증발될 때까지 상온에서 방치한다. 1% BSA(in PBS)를 well당 200㎕로 분주한 후 상온에서 1시간 Blocking한다. BSA 제거 후, PBS로 washing 한다. Transglutaminase1(E-6) antibody (SC-166467)를 1% BSA용액(in PBS)에 희석하여 well당 100㎕ 처리 한 후(1% BSA in PBS), 1시간 상온에서 Incubation 한다. 1X PBS-T(0.05% Tween-20 in PBS)로 3번 washing 한다. 2’Antibody를 1% BSA용액(in PBS)에 희석하여 well당 100㎕ 처리한 후, 1시간 상온에서 Incubation 한다. 1X PBS-T(0.05% Tween-20 in PBS)로 3번 washing 한다. 각 well의 수분을 건조한 후, OPD(o-phenylenediamine)을 well당 200㎕씩 처리 후, 30분간 incubation한다(R/T in dark room). 이를 490nm에서 흡광을 측정한다.
In order to measure the skin barrier strengthening effect of the moxaulinae extract prepared in Example 1, human-derived keratinocytes (HaCaT cells) were inoculated on the bottom of a culture dish, and penicillin (100 U / ml), streptomycin / Ml), and DMEM (Dulbecco's modified Eagle's medium) medium containing 10% FBS (Fetal bovine serum) was added thereto, followed by incubation at 37 ° C in an incubator containing 5% carbon dioxide. HaCaT cells are diluted to a concentration of 5 × 10 4 cells / ml in a 96-well plate, and 100 μl of each is inoculated and cultured for 24 hours. After culturing, remove all medium, dilute the sample to an appropriate concentration using serum-free medium, and repeat each sample for 3 times with 100 μl per well, followed by further incubation for 48 hours. The medium used was CaCl 2 in calcium-free media (hyclone, SH.30319.01), and negative / positive control groups were set as low calcium (0.03 mM) and high calcium (1.2 mM) Samples should be diluted with low calcium medium. After removing the medium, repeat freeze-thawing three times (melting at -20 ℃ and melting at -70 ℃). After treatment with acetone: ethanol (1: 1, v / v) stored at -20 ° C, fixation is carried out at 4 ° C for 30 minutes and then allowed to stand at room temperature until the organic solvent evaporates. 1% BSA (in PBS) is divided into 200 μl per well and blocked at room temperature for 1 hour. After BSA removal, wash with PBS. Dilute 100 μL of transglutaminase 1 (E-6) antibody (SC166467) in 1% BSA solution (in PBS) and incubate for 1 hour at room temperature. Wash three times with 1X PBS-T (0.05% Tween-20 in PBS). 2'-Antibody is diluted in 1% BSA solution (in PBS), treated with 100 μl per well, and incubated at room temperature for 1 hour. Wash three times with 1X PBS-T (0.05% Tween-20 in PBS). After drying each well, OPD (o-phenylenediamine) is treated with 200 μl per well and incubated for 30 minutes (R / T in dark room). The absorbance is measured at 490 nm.
(음성 대조군)Low calcium (0.03 mM) solution
(Negative control)
(양성 대조군)High calcium (1.2 mM) solution
(Positive control group)
상기 표 1에 나타난 바와 같이 모시풀 추출물에 대해 농도 의존적으로 TGase-1 발현율이 증가하는 것을 확인할 수 있으며, 200㎍/㎖ 에서 193% 까지 증가시켜 본 발명의 모시풀 추출물이 우수한 피부장벽강화 효능을 가지고 있음을 알 수 있다.
As shown in Table 1, the expression of TGase-1 was increased in a concentration-dependent manner for the extract of Momordicae japonica and increased to 193% at 200 μg / ml, indicating that the Momordicae extract of the present invention has an excellent skin barrier-enhancing effect .
실험예Experimental Example 2 : 항산화 효과 평가 2: Evaluation of antioxidant effect
1)One) DPPHDPPH (1,1-(1,1- diphenyl피덴 -2--2- picrydrazylpicrydrazyl ) 테스트) Test
상기 실시예 1에서 제조된 모시풀 추출물의 항산화 효과를 평가하기 위해서 DPPH 라디칼 소거활성을 측정하여 항산화력을 확인하였다. 추출물들의 항산화능력을 기존의 항산화제인 vitamin C와 비교 측정하였다. The DPPH radical scavenging activity was measured to evaluate the antioxidant activity of the mushroom extract prepared in Example 1 above. The antioxidant capacity of the extracts was compared with vitamin C, a conventional antioxidant.
에탄올을 이용하여 시료를 농도 별로 희석하여 준비하고 에탄올로 용해시킨 0.1mM DPPH 용액을 준비한다. 24-well plate 에 준비한 시료를 500㎕씩 넣어주고, 0.1mM DPPH 용액을 1㎖씩 넣어준 후, tape 으로 plate 가장자리를 잘 감싼 후, 은박지로 덮어 빛을 차단시켜 실온에서 10 분간 반응시킨다. 10 분 후, ELISA reader 로 517nm 에서 흡광값을 측정한다. 모시풀 추출물 각 농도별의 DPPH 평가 결과는 하기 표 2에 나타내었으며, SC50은 첨가한 시료에 의해 흡광도가 50％ 감소했을 때의 시료 농도를 의미한다.
Prepare a 0.1 mM DPPH solution prepared by diluting the sample with ethanol using ethanol and dissolving in ethanol. Add 500 μl of the sample to a 24-well plate, add 1 ml of 0.1 mM DPPH solution, wrap the plate well with tape, cover with silver foil, and allow to react at room temperature for 10 minutes. After 10 minutes, the absorbance value is measured at 517 nm with an ELISA reader. The results of the DPPH evaluation of each concentration of the extract of Momordicae japonica are shown in Table 2, and SC 50 means the sample concentration when the absorbance was reduced by 50% by the added sample.
(㎍/㎖)SC 50
(占 퐂 / ml)
표 2에서 나타난 바와 같이 50㎍/㎖ 라는 저농도부터 90% 이상의 소거능을 나타내어 본 발명의 모시풀 추출물이 항산화효과가 뛰어남을 알 수 있다.
As shown in Table 2, the extract showed a scavenging ability of 90% or more from a low concentration of 50 占 퐂 / ml, indicating that the extract of the present invention has excellent antioxidative effect.
2)2) ROSROS 측정 Measure
상기 실시예 1에서 제조된 모시풀 추출물의 항산화 효과를 평가하기 위해 ROS 생성율을 측정하여 항산화력을 확인하였다. ROS의 생성은 DCF를 이용한 형광물질 발생의 강도를 가지고 측정하며, reduced 또는 acetylated된 형태의 2‘,7’- dichlorofluorescein (DCF)은 세포내에 있는 esterase와 세포 내에 생성되는 ROS들의 산화작용에 의해 아세테이트 그룹이 제거되면 형광물질(FITC)을 방출하는 원리를 이용하여 항산화력을 측정하였다. 먼저 각질형성세포 (HaCaT cell)를 DMEM(Dulbecco’s modified Eagle’smedium) 배지(10% FBS, 1% Antibiotics)를 이용하여 96-well plate에 1×105 cell/ml의 농도로 희석하여 100㎕씩 접종한 후 37℃, 5% CO2 incubator에서 24시간 배양한다. 배양 후 Cell을 배양한 DMEM 배지를 모두 제거하고 혈청이 포함되지 않은 DMEM 배지를 사용하여 모시풀추출물의 경우에는 10 ~ 200㎍/㎖로 희석하여 사용하였으며, ROS 생성 저해능 평가 시 사용하는 양성대조군인 Quercetin은 50mM의 농도로 증류수에 희석한 후 혈청이 포함되지 않은 DMEM 배지를 이용하여 10uM, 20uM, 50uM 의 농도로 희석하여 사용하였다. 혈청이 포함되지 않은 DMEM 배지로 희석된 모시풀추출물과 Quercetin을 각각 well 당 100ul씩 처리하여 준 후 24 시간 배양한다. 24시간 후 배지만 제거하고 DPBS 200㎕를 넣은 후 washing한다. 이 과정을 2 ~ 3회 반복하여 수행한다. DMSO에 녹아 있는 DCFH-DA 를 20uM(in PBS)로 희석하여 well에 100㎕ 넣은 후 37℃, 5% CO2 incubator 에서 20분간 배양한다. In order to evaluate the antioxidant effect of the extract of Momordicae extract prepared in Example 1, the antioxidant activity was confirmed by measuring the ROS production rate. The production of ROS is measured by the intensity of fluorescence generated by DCF. Reduced or acetylated forms of 2 ', 7'-dichlorofluorescein (DCF) are produced by oxidation of esterase and ROS When the group was removed, antioxidant activity was measured using the principle of releasing fluorescent substance (FITC). First, keratinocytes (HaCaT cells) were diluted to a concentration of 1 × 10 5 cells / ml on a 96-well plate using DMEM (Dulbecco's modified Eagle's medium) medium (10% FBS, 1% Antibiotics) After inoculation, incubate in a 5% CO 2 incubator at 37 ° C for 24 hours. After cultivation, the cells were cultured in DMEM medium. DMEM medium containing no serum was used to dilute 10 ~ 200 ㎍ / ㎖ in the case of Momordicae extract. The positive control group Quercetin Was diluted with distilled water to a concentration of 50 mM and diluted to a concentration of 10 uM, 20 uM, and 50 uM using DMEM medium without serum. Serum extract and quercetin diluted in serum-free DMEM medium were treated with 100 ul per well and incubated for 24 hours. After 24 hours, remove the aliquot, add 200 μl of DPBS and wash. This process is repeated two or three times. Dilute DCFH-DA dissolved in DMSO with 20 μM (in PBS), add 100 μL to wells, and incubate for 20 min at 37 ° C in a 5% CO 2 incubator.
*DCFH-DA 는 deep freezer 에 100mM 로 보관(2회 이상 사용 금지). * Store DCFH-DA in deep freezer at 100mM (do not use more than 2 times).
*DCFH-DA 처리 시, 빛을 대부분 차단시킨 상태(clean bench light-off) 에서 수행하여야 하며, 신속하게 처리해야 함. (Molecular probe) DCFH-DA를 제거한 후 DPBS 200 ~ 300㎕를 넣어 washing한다. 이 과정을 3회 반복하여 수행한다. 100uM H2O2를(in PBS) 희석하여 각 well에 100㎕를 넣은 후 incubator에서 배양한 후, 형광현미경을 이용하여 이미지 촬영 및 ELISA reader를 이용하여 형광을 측정한다(485nm/535nm). * In DCFH-DA treatment, it should be done in clean bench light-off, and should be processed quickly. (Molecular probe) Remove DCFH-DA and wash with 200 ~ 300 μl of DPBS. This process is repeated three times. Dilute 100 μM H 2 O 2 (in PBS), add 100 μL of each well, incubate in an incubator, measure fluorescence using a fluorescence microscope and measure the fluorescence using an ELISA reader (485 nm / 535 nm).
모시풀 추출물 각 농도별의 ROS 평가 결과는 하기 표 3에 나타내었으며, SC50은 첨가한 시료에 의해 형광이 50％ 감소했을 때의 시료 농도를 의미한다.
The results of the ROS evaluation for each concentration of Momordica sp. Extract are shown in Table 3, and SC 50 means the sample concentration when fluorescence was reduced by 50% by the added sample.
상기 표 3에서 나타난 바와 같이 본 발명의 모시풀 추출물은 농도 의존적으로 ROS 생성을 감소시키며 200㎍/㎖ 에서 35% 까지 감소시켜 본 발명의 모시풀 추출물이 항산화효과가 우수함을 알 수 있다.
As shown in Table 3, the extract of Momordicae extract of the present invention reduces ROS production in a concentration-dependent manner and is reduced to 35% from 200 μg / ml, indicating that the Momordicae extract of the present invention has an excellent antioxidative effect.
실험예Experimental Example 3 : 항염 효과 평가 ( 3: Evaluation of anti-inflammatory effect NONO assayassay ))
상기 실시예 1에서 제조된 모시풀 추출물의 항염효과를 확인하기 위해 NO assay를 실시하였다. Reactive nitric species(RNS)인 nitric oxide(NO)의 과도한 생성은 염증반응을 유도하며, 이에 대한 효능 측정을 위하여 세포를 LPS (lipopolysaccharide)로 자극하여 NO의 생성을 유도한 후, 시료에 의한 NO 생성저해효과를 Griessreagent법으로 측정하는 원리를 이용해 모시풀 추출물의 항염효과를 측정하였다. Raw 264.7세포(Mouse macrophage)를 24-well plate에 1×105cells/ml의 농도로 접종하고 37℃, 5% CO2 incubator 에서 24시간 배양한다. 최종농도 10 ~ 200μg/ml의 농도가 되도록 혈청이 포함되지 않은 배지 (LPS100ng/㎖ 포함)를 이용하여 희석한 시료를 500㎕씩 세포에 처리하여 준다. 24시간 배양한 후, 배지를 회수하여 4℃, 12,000rpm에서 10분간 원심분리를 시킨 후, 상층액만 회수한다. 상층액 50㎕를 취하여 96-well plate에 넣고 동량의 Griessreagent와 10분 동안 반응시킨 후, ELISA reader를 이용하여 540nm에서 흡광값을 측정한다. 모시풀 추출물 각 농도별의 NO 생성율 평가 결과는 하기 표 4에 나타내었다.
The NO assay was carried out to confirm the anti-inflammatory effect of the extract of Momordicae extract prepared in Example 1 above. Excessive production of nitric oxide (NO), which is a reactive nitric species (RNS), induces an inflammatory response. To determine the efficacy of nitric oxide (NO), the cells were stimulated with LPS (lipopolysaccharide) The antimicrobial effect of the extracts of Momordica spp. Was measured using the principle of measuring the inhibitory effect by the Griessreagent method. Raw 264.7 cells (Mouse macrophage) the 24-well plate to 1 × 10 5 cells / ml inoculum in the concentration of the 37 ℃, 5% CO 2 Incubate for 24 hours. The cells were treated with 500 μl of the sample diluted with serum-free medium (including LPS 100 ng / ml) to a final concentration of 10-200 μg / ml. After culturing for 24 hours, the culture medium is recovered, centrifuged at 4 ° C and 12,000 rpm for 10 minutes, and only the supernatant is recovered. 50 μl of the supernatant is added to a 96-well plate, reacted with the same amount of Griessreagent for 10 minutes, and the absorbance is measured at 540 nm using an ELISA reader. The results of evaluation of the NO production rate of each concentration of the extract of Momordicae japonica are shown in Table 4 below.
상기 표 4에서 나타낸 바와 같이 무처리군의 NO 생성량을 100%로 보았을 때 모시풀 추출물의 농도별 NO 생성율은 상기 표 3과 같으며 모든 농도에서 NO 생성율을 30% 까지 낮춰 모시풀 추출물이 우수한 항염효능이 있음을 확인하였다.
As shown in Table 4, when the NO production amount of the untreated group was taken as 100%, the NO production rate by concentration of the extract of Momordica japonica was as shown in Table 3, and the NO production rate was reduced to 30% at all concentrations. Respectively.
실험예Experimental Example 4 : 엘라스타아제( 4: Elastase ( elastaseelastase )의 활성저해측정 실험) Activity inhibition assay
상기 실시예 1에서 제조된 모시풀 추출물의 엘라스타아제 활성 저해 효과를 관찰하기 위해 수행하였다. 먼저 트리스 완충액(0.2M Tris buffer, pH8.00) 140㎕와 농도별 시료 20㎕, 그리고 5mM N-Succinyl-Ala-Ala-Ala p-nitroanilide(Sigma, S4760) 20㎕씩 기질용액을 첨가한 다음, 10㎕/㎖의 elastase(Sigma, E7885) 20㎕와 잘 혼합하여 상온(25℃)에서 15분간 반응 시킨 후 410nm에서 생성된 p-nitroaniline의 양을 측정하였다. 양성 대조군으로서는 빈랑자 추출물(대한민국 특허 출원 : 1997-78817)을 사용하였다. 각 시료의 엘라스타아제 활성 저해효과는 효소활성을 50% 소거하는 농도인 IC50으로 표시하였다. 이때 음성대조군으로는 시료를 처리하지 않은 실험액의 흡광도 값으로 하였다.The effect of inhibiting elastase activity of the mash extract prepared in Example 1 was investigated. Substrate solution was added with 140 μl of Tris buffer (0.2 M Tris buffer, pH 8.00), 20 μl of sample per concentration and 20 μl of 5 mM N-Succinyl-Ala-Ala-Ala p-nitroanilide (Sigma, S4760) And 20 μl of 10 μl / ml of elastase (Sigma, E7885). After reacting at room temperature (25 ° C) for 15 minutes, the amount of p-nitroaniline produced at 410 nm was measured. As a positive control, bingo extract (Korea patent application: 1997-78817) was used. The inhibitory effect of each sample on the elastase activity was expressed as IC 50, which is a concentration for eliminating the enzyme activity by 50%. As a negative control, the absorbance of the untreated sample was used.
(㎍/㎖)IC 50
(占 퐂 / ml)
상기 표 5에서 나타난 바와 같이 모시풀 추출물은 우수한 엘라스타제 활성 저해 효과를 보여 주었다.
As shown in the above Table 5, the extract of Momordicae extract showed excellent inhibitory effect on elastase activity.
실험예Experimental Example 5 : 5: 콜라게나제(MMP-1)의Of collagenase (MMP-1) 활성 저해 측정 실험 Activity inhibition assay
상기 실시예 1에서 제조된 모시풀 추출물의 콜라게나제(MMP-1)의 활성 저해효과를 관찰하기 위해 수행하였으며, 정제된 콜라게나제와 플루오레세인에 접합된 콜라겐의 이용을 기초로 한다. 먼저, 반응 완층액(0.05M Tri-HCl, 0.15M NaCl, 5mM CaCl2, 0.02mM NaN3, pH7.3) 100㎕에 0.25㎎/㎖의 DQTM 콜라겐 용해액(Molecular probes, USA) 20㎕와 농도별 시료를 40㎕씩 첨가한 다음, 5Unit의 콜라게나제(GIBCO, USA) 40㎕와 잘 혼합하여 암소, 상온에서 20분간 반응하였다. 그 후 형광분광광도계를 이용하여 흡수파장 495nm, 방출파장 515nm에서 형광값을 측정하였다. 양성 대조군으로서는 녹차추출물(S. Pillai, C. Oresajo, and J. Hayward, Int. J.Cosmet. Sci., 27, 17-34, 2005)을 사용하였다. 녹차 추출물에 대한 콜라게네이즈 효소생성억제 작용은 대한민국 특허 특1999-0056976에 개시되어 있다. 각 시료의 콜라게나제의 활성 저해효과는 효소활성을 50% 소거하는 농도인 IC50으로 표시하였다. 이때 음성 대조군으로는 시료를 처리하지 않은 실험액의 형광값으로 하였다.
To examine the inhibitory effect of collagenase (MMP-1) on the extract of Momordicae extract prepared in Example 1, it was based on the use of purified collagenase and collagen conjugated to fluorescein. First, 20 μl of 0.25 mg / ml DQTM collagen lysate (Molecular Probes, USA) was added to 100 μl of the reaction complete layer solution (0.05 M Tri-HCl, 0.15 M NaCl, 5 mM CaCl 2 and 0.02 mM NaN 3 , pH 7.3) 40 μl of each sample was added to each well, and the mixture was mixed well with 40 μl of 5 units of collagenase (GIBCO, USA) and reacted at room temperature for 20 minutes. Thereafter, fluorescence values were measured at an absorption wavelength of 495 nm and an emission wavelength of 515 nm using a fluorescence spectrophotometer. Green tea extract (S. Pillai, C. Oresajo, and J. Hayward, Int. J. Cosmet. Sci., 27, 17-34, 2005) was used as a positive control. The inhibitory action of collagenase enzyme production on green tea extract is disclosed in Korean Patent Publication No. 1999-0056976. The inhibitory effect of collagenase on the activity of each sample was expressed by IC 50, which is a concentration for eliminating the enzyme activity by 50%. As a negative control, the fluorescence value of the untreated test solution was used.
(㎍/㎖)IC 50
(占 퐂 / ml)
상기 표 6에서 나타난 바와 같이 모시풀 추출물은 우수한 콜라게나제 활성 저해 효과를 보여 주었다.
As shown in the above Table 6, the extract of Momordica sativa showed excellent collagenase activity inhibitory effect.
실험예Experimental Example 6 : 콜라겐 합성 촉진 효과 측정 실험 6: Experiment to measure collagen synthesis promotion effect
상기 실시예 1에서 제조된 모시풀 추출물의 콜라겐의 합성 촉진효과를 측정하기 위해서 상업적으로 구입한 인간의 섬유아세포에 시료를 처리하여 실험을 실시하였다. 96-well plate에 5% 우태아혈청이 함유된 IMD(Iscove's Modified Dulbesco's Media) 배지와 함께 ATCC(Americal Type Culture Collection)에서 구입한 인간의 정상섬유아세포(CCD-985sk)를 5000세포/well 농도로 분주하고 24시간 동안 37℃, 10% CO2 조건에서 배양하였다. 24시간 후 시료를 우태아혈청이 포함되지 않은 IMDM 배지에 농도별로 희석하여 2일 동안 처리하고 세포배양액을 채취하였다. 채취한 세포배양액을 콜라겐 단백질 측정기구(Procollagen Type I-C-peptide EIA Kit(MK101), Takara. Kyoto, Japan)를 이용하여 프로콜라겐(Procollagen) 타입 IC-펩타이드(Type IC-peptide : PICP) 합성양을 측정하였다. 측정방법은 우선 콜라겐 항체가 균일하게 도포 되어 있는 96-well plate에 POD(peroxidase) 효소가 결합된 항체용액 100㎕와 채취된 세포배양액 20㎕를 넣고 37℃에서 3시간 동안 반응시켰다. 3시간 후 상등액을 모두 제거하고 각 well을 400㎕의 PBS(phosphate buffered saline)로 4회 세척하였다. 세척 후 각 well에 POD와 반응하는 기질용액(TMBZ, 3,3′,5,5′- Tetramethylbenzidine) 100㎕를 넣고 상온에서 15분간 방치하였다. 반응을 정지시키기 위해 1N 황산용액 100㎕를 첨가하여 혼합한 다음 450nm에서 흡광도를 측정하였다. PICP양은 콜라겐 측정 키트에 포함되어 있는 표준용액을 희석하여 작성된 표준농도곡선에 샘플의 흡광도를 대입하여 계산하였다. 또한 시료를 처리하지 않은 세포 배양액의 반응 흡광도를 대조군으로 하였다.
In order to measure the promoting effect of the collagen synthesis of the extract of Momordicae extract prepared in Example 1, a commercially available human fibroblast was treated with a sample. The human normal fibroblast (CCD-985sk) purchased from the American Type Culture Collection (ATCC) with an IMD (Iscove's Modified Dulbesco's Media) medium containing 5% fetal bovine serum was added to a 96-well plate at a concentration of 5000 cells / well And cultured at 37 ° C and 10% CO 2 for 24 hours. After 24 hours, the samples were diluted with IMDM medium containing no fetal bovine serum for 2 days, and cell culture medium was collected. The amount of pro-collagen type IC-peptide (Type IC-peptide: PICP) synthesized by using the collagen protein assay system (Procollagen Type IC-peptide EIA Kit (MK101) Respectively. For the measurement, 100 μl of the antibody solution in which POD (peroxidase) was conjugated and 20 μl of the collected cell culture were added to a 96-well plate uniformly coated with collagen antibody and reacted at 37 ° C. for 3 hours. After 3 hours, the supernatant was removed and each well was washed 4 times with 400 μl of PBS (phosphate buffered saline). After washing, 100 μl of a substrate solution (TMBZ, 3,3 ', 5,5'-Tetramethylbenzidine) reacting with POD was added to each well and left at room temperature for 15 minutes. To stop the reaction, 100 1 of 1 N sulfuric acid solution was added and mixed, and the absorbance at 450 nm was measured. The PICP amount was calculated by substituting the absorbance of the sample into the standard concentration curve prepared by diluting the standard solution contained in the collagen measurement kit. The reaction absorbance of the cell culture without sample treatment was used as a control.
표 7에 나타난 바와 같이 모시풀 추출물에서 대조군에 비교하여 콜라겐 합성율이 증가함을 확인하였다. 이러한 결과로 모시풀 추출물의 MMP-1 저해활성 효과를 재검증할 수 있었다.
As shown in Table 7, it was confirmed that the collagen synthesis ratio was increased in the extract of Momordica mori than in the control group. As a result, the MMP-1 inhibitory activity of Mackerel extract was re-verified.
실험예Experimental Example 7 : 피부 7: Skin 보습력Moisture power 증가 효과 측정 Increase effect measurement
상기 실시예 1의 모시풀 추출물의 피부 보습력 증가에 미치는 효과를 측정하기 위하여, 실시예 1에서 얻은 모시풀 추출물을 활용하여 하기 표 8의 조성비에 따라 외용제를 영양크림의 제형으로 하여 제형예 1와 비교 제형 예 1를 제조하였다. 하기 배합성분의 함량비의 단위는 중량%이다.
In order to measure the effect of the extract of Momordicae extract of Example 1 on the increase in skin moisturizing power, the extract of Momordicae extract obtained in Example 1 was used and the external preparation was formulated as a nutritional cream according to the composition ratio shown in Table 8 below. Example 1 was prepared. The unit of the content ratio of the following ingredients is% by weight.
상기 표 8의 제형예 1 및 비교피제형예 1의 피부 보습 개선 효과를 확인하기 위하여 다음과 같이 평가하였다. 건조부로 분류된 30 ~ 40대 성인 남녀 40명을 각각 제형예 1 및 비교제형예 1의 2개 군에 대해 20명씩 2조로 나누어 영양크림을 매일 2회씩 4주간 안면에 도포하게 하였다. 도포 개시 전과, 도포 후 1주, 2주, 4주 경과한 시점 그리고 도포를 중지한 2주 경과(총 6주 경과) 후에 항온, 항습 조건(24℃, 상대습도 40%)에서 피부수분량측정기(Corneometer CM825, C+K Electronic Co., 독일)로 피부수분량을 측정하였다. 그 결과는 하기 표 9에 나타내었다. 표 9의 결과는 시험개시 직전에 측정한 피부 수분량 측정기 값을 기준으로 하여 일정기간 처치한 후의 측정값의 증가분을 백분율로 표시한 것이다.
In order to confirm the skin moisturizing effect of Formulation Example 1 and Comparative Example 1 of Table 8, the following evaluation was made. 40 men and women aged between 30 and 40 were divided into two groups of 20 men for Formulation Example 1 and 2 men for Comparative Formulation Example 1 to apply the nutritional cream twice daily for 4 weeks to the face. (24 ° C, relative humidity 40%) after 1 week, 2 weeks, and 4 weeks after application, and after 2 weeks (total 6 weeks) Corneometer CM825, C + K Electronic Co., Germany). The results are shown in Table 9 below. The results in Table 9 are based on the skin moisture meter measured immediately before the start of the test and expressed as a percentage of the increase in the measured value after treatment for a certain period of time.
상기 표 9의 결과를 보면, 비교 제형 예 1을 도포한 경우에는 도포가 이루어진 4주까지는 약 30% 정도의 수분 증가율을 보이지만, 도포를 중지한 후에는 피부 수분량이 감소하는 반면, 모시풀 추출물을 함유한 제형 예 1를 도포한 경우에는 도포를 중지한 후에도 30% 이상의 피부수분 증가율을 보임을 확인할 수 있다. 이를 통해 모시풀 추출물을 함유한 본 발명의 조성물은 피부 보습력 효과가 우수함을 알 수 있다.The results of the above Table 9 show that when Comparative Formulation Example 1 is applied, the water increase rate is about 30% until 4 weeks of application, but after the application is stopped, the amount of skin moisture decreases, When one Formulation Example 1 is applied, it can be confirmed that the skin moisture increase rate is 30% or more even after the application is stopped. Thus, it can be seen that the composition of the present invention containing the extract of Momordicae is excellent in skin moisturizing effect.
이상의 결과로부터, 상기 모시풀 추출물은 노화 방지, 항염, 주름 개선, 피부 장벽회복 및 피부 보습력 증가에 있어서 그 효과가 매우 우수한 것을 확인할 수 있었다. From the above results, it was confirmed that the above extract of Momordicae extract has excellent effects in preventing aging, anti-inflammation, improving wrinkles, restoring skin barrier and increasing skin moisturizing power.
Claims (10)
Boehmeria nivea ) extract as an active ingredient.
The composition for enhancing skin barrier according to claim 1, wherein the extract further exhibits anti-aging, antioxidant, anti-inflammatory, wrinkle-improving and moisturizing effects.
The skin barrier strengthening composition according to claim 1, wherein the extract is extracted with water, an alcohol, or a mixed solvent thereof.
[Claim 2] The composition for skin barrier enhancement according to claim 1, wherein the extract is prepared by refluxing and drying the dried mother liquor in a solvent, filtering the precipitate, and concentrating the filtrate under reduced pressure.
Boehmeria nivea ) extract as an active ingredient.
[7] The cosmetic composition for skin barrier strengthening according to claim 7, wherein the extract of Angelica ke ... contains 0.001 ~ 50 wt% of the total composition.
The cosmetic composition according to claim 8, wherein the cosmetic composition is at least one selected from the group consisting of a lotion (skin lotion), a skin softener, a skin toner, an astringent, a lotion, a milk lotion, a moisturizing lotion, a nutrition lotion, Wherein the composition has a formulation selected from the group consisting of a nutritional essence, a pack, a soap, a cleansing foam, a cleansing lotion, a cleansing cream, a body lotion and a body cleanser formulation.
The cosmetic composition for skin barrier strengthening according to claim 7, which further exhibits antioxidant, anti-inflammatory, wrinkle-improving and moisturizing effects.
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