KR102063686B1 - Skin external composition containing extract of soybean root - Google Patents

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Abstract

본 발명은 콩의 생육 단계 중 특정 단계의 콩 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 조성물은, 항산화능이 우수하고, 항노화능이 우수할 뿐 아니라, 피부 보습 효과 및 피부 미백 효과를 가지면서, 천연 유래의 성분을 함유하여 피부 자극감이 없어서 유용하다.The present invention relates to an external composition for skin containing soybean extract of a specific stage of the growth stage of soybean. The composition according to the present invention is not only excellent in anti-oxidant ability, excellent in anti-aging ability, but also has a skin moisturizing effect and a skin whitening effect, and is useful because it contains components derived from nature and has no skin irritation.

Description

콩뿌리 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물{SKIN EXTERNAL COMPOSITION CONTAINING EXTRACT OF SOYBEAN ROOT}Skin external composition containing soybean root extract {SKIN EXTERNAL COMPOSITION CONTAINING EXTRACT OF SOYBEAN ROOT}

본 발명은 콩의 생육 단계 중 특정 단계의 콩 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to an external composition for skin containing soybean extract of a specific stage of the growth stage of soybean.

인간의 피부는 나이가 들어감에 따라 여러 가지 내적, 외적 요인에 의해 변화를 겪는다. 즉, 내적으로는 신진대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되어 생체에 필요한 면역 단백질 및 생체 구성 단백질들의 생합성이 줄어들게 되며, 외적으로는 오존층 파괴로 인하여 태양 광선 중 지표에 도달하는 자외선의 함량이 증가하게 되고 환경 오염이 더욱 심화됨에 따라 자유 라디칼 및 활성 유해 산소 등이 증가함으로써, 피부의 두께가 감소하고, 주름이 증가되며, 탄력이 감소될 뿐 아니라 피부 혈색도 칙칙하게 되고, 피부트러블이 자주 발생하며, 기미와 주근깨 및 검버섯 또한 증가하는 등 여러 가지 변화를 일으키게 된다.As human skin ages, it changes with a variety of internal and external factors. That is, internally, the secretion of various hormones that regulate metabolism is reduced, the function of immune cells and the activity of cells is reduced, thereby reducing the biosynthesis of immune proteins and constituent proteins necessary for living organisms. Due to the increase in the amount of ultraviolet rays that reach the surface of the sun's rays and further increase environmental pollution, free radicals and free radicals, such as free radicals, skin thickness is reduced, wrinkles are increased, elasticity is reduced only In addition, the color of the skin becomes dull, skin problems frequently occur, and various changes such as blemishes, freckles, and black mushrooms also increase.

노화가 진행될수록 피부를 구성하는 물질인 콜라겐, 엘라스틴, 히알루론산, 및 당단백질의 함유량 및 배열이 변하거나 감소하는 증상들이 나타나게 되고, 자유 라디칼 및 활성 유해 산소에 의한 산화적 스트레스를 받게 된다. 또한 노화가 진행되거나 자외선에 의해서, 피부를 구성하는 대부분의 세포에서는 염증을 일으킨다고 알려져 있는 전염증성 사이토카인(proinflammatory cytokine)을 생성하는 효소인 사이클로옥시게나제-2(Cox-2, cyclooxygenase)의 생합성이 증가하고, 이들 염증성 인자에 의해 피부조직을 분해하는 효소인 매트릭스 메탈로프로테아제(MMP, Matrix metalloproteinase)의 생합성이 증가하며, iNOS(inducible nitric oxide synthase)에 의한 NO(nitric oxide)생성이 증가하는 것으로 알려져 있다. 즉 자연적으로 진행되는 내인성 노화에 따른 세포 활성의 감소 및 미세염증에 의해 기질물질의 생합성이 감소되고, 여러 가지 유해 환경에 의한 스트레스의 증가 및 태양 광선에 의한 활성 산소 종의 증가와 같은 외적 요인에 의해 분해 및 변성이 가속화되어 피부기질이 파괴되고 얇아지면서 피부 노화의 제반 증상들이 나타나게 된다. 따라서, 이러한 노화의 현상들을 방지하고, 개선시킬 수 있는 활성성분에 대하여 많은 연구가 행해지고 있는 것이 현실이다.As aging progresses, symptoms of alteration or decrease in the content and arrangement of collagen, elastin, hyaluronic acid, and glycoproteins, which are constituting skin, appear, and are subject to oxidative stress caused by free radicals and active harmful oxygen. In addition, by aging or ultraviolet light, cyclooxygenase-2 (Cox-2, cyclooxygenase), an enzyme that produces proinflammatory cytokine, which is known to cause inflammation in most cells that make up the skin. Increased biosynthesis, increased biosynthesis of matrix metalloproteinase (MMP), an enzyme that breaks down skin tissues by these inflammatory factors, and increased nitric oxide (NO) production by inducible nitric oxide synthase (iNOS) It is known. In other words, the biosynthesis of the substrate material is reduced by the reduction of cellular activity and micro-inflammation due to naturally occurring endogenous aging, and by external factors such as the increase of stress caused by various harmful environments and the increase of free radical species caused by sunlight. As a result, decomposition and degeneration are accelerated, and the skin substrate is destroyed and thinned, and various symptoms of skin aging appear. Therefore, a lot of research is being conducted on the active ingredients that can prevent and improve the phenomenon of aging.

한편, 체내 효소계, 환원대사, 화학약품, 공해물질 및 광화학반응 등의 각종 물리적, 화학적 및 환경적 요인 등에 의하여 생성되는 활성산소는 세포구성 성분들인 지질, 단백질, 당 및 DNA 등에 대하여 비선택적, 비가역적인 파괴작용을 함으로써 세포노화 또는 암을 비롯한 각종 질병을 일으키는 것으로 알려져 있다. 또한 이들 활성산소에 의한 지질과산화의 결과로 생성되는 지질 과산화물을 비롯한 여러 가지 체내 과산화물도 세포에 대한 산화적 파괴를 일으켜 각종 기능장애를 야기함으로써 여러 가지 질병의 원인이 되기도 한다. 따라서, 이와 같은 자유 라디칼을 소거할 수 있는 화합물(free radical scavengers) 또는 과산화물 생성 억제물질과 같은 항산화제들이 이들 산화물들에 기인하는 노화 및 각종 질환의 억제 또는 치료제로서 기대되고 있다. On the other hand, free radicals generated by various physical, chemical and environmental factors such as enzymes, reducing metabolism, chemicals, pollutants and photochemical reactions in the body are non-selective and irreversible to cell components such as lipids, proteins, sugars and DNA. It has been known to cause various diseases including cell aging or cancer by performing a destructive action. In addition, various peroxides in the body, including lipid peroxides produced as a result of lipid peroxidation by these free radicals, can cause oxidative destruction of cells and cause various functional disorders. Accordingly, antioxidants such as free radical scavengers or peroxide production inhibitors are expected as agents for suppressing or treating aging and various diseases caused by these oxides.

이에 본 발명자들은 콩뿌리 추출물을 피부에 적용하였을 때, 피부의 항산화 및 항노화 기능 뿐만 아니라 미백 및 보습기능 역시 증진시킬 수 있는 것을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.
Accordingly, the present inventors have confirmed that when the soybean root extract is applied to the skin, it is possible to enhance not only the antioxidant and anti-aging functions of the skin but also the whitening and moisturizing functions, thereby completing the present invention.

대한민국 공개특허 특1998-077876호Republic of Korea Patent Publication No. 1998-077876

본 발명의 목적은 피부 건강을 증진시키는 천연 유래의 피부 외용제 조성물을 제공하는 데 있다.
It is an object of the present invention to provide a composition for external application of skin derived from nature that promotes skin health.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 콩뿌리 추출물을 포함하는 피부 외용제 조성물을 제공한다.
In order to achieve the above object, the present invention provides a skin external preparation composition comprising a soybean root extract.

본 발명에 따른 조성물은, 항산화능이 우수하고, 항노화능이 우수할 뿐 아니라, 피부 보습 효과 및 피부 미백 효과를 가지면서, 천연 유래의 성분을 함유하여 피부 자극감이 없어서 유용하다.
The composition according to the present invention is not only excellent in anti-oxidant ability, excellent in anti-aging ability, but also has a skin moisturizing effect and a skin whitening effect, and is useful because it contains components derived from nature and has no skin irritation.

도 1은 생장 시기에 따른 콩뿌리 추출물 내의 쿠메스트롤 함량을 나타낸 것이다.
도 2 는 유도 인자를 처리하여 재배한 V4 시기의 콩뿌리 추출물과 이를 처리하지 않고 재배한 V4 시기의 콩뿌리 추출물에 존재하는 쿠메스트롤의 함량을 비교한 것이다.
Figure 1 shows the cumestrol content in soybean root extract according to the growth time.
Figure 2 is a comparison of the content of cumestrol present in the soybean root extract of V4 season grown by treatment with an induction factor and the soybean root extract of V4 grown without treatment.

본 발명은 일 관점에서 콩뿌리 추출물을 포함하는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다. 본 명세서의 콩뿌리 추출물의 추출과정에 있어서 예를 들면, 세척하고 건조된 세말화된 콩뿌리 가루를 물 또는 유기용매에 넣고 추출하여 침적시킨 후 여과포 여과와 원심분리를 통해 잔사와 여액을 분리하고, 분리된 여액을 감압 농축하여 콩뿌리 추출물을 얻을 수 있다. 본 발명에 사용 가능한 유기용매는 에탄올, 메탄올, 부탄올, 에테르, 에틸아세테이트, 클로로포름 또는 이들 유기용매와 물의 혼합용매에서 선택될 수 있으며, 원료의 안전성을 고려할 때 바람직하게는 물 또는 30~70% 농도의 에탄올을 사용한다. 상기에서 용매를 이용하여 추출물을 얻은 이후 당업계에 알려진 통상적인 방법으로 상온에서 냉침, 가열 및 여과하여 액상물을 얻을 수 있으며, 또는 추가로 용매를 증발, 분무 건조 또는 동결 건조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며, 당업계에서 일반적으로 사용되는 방법이라면 제한없이 사용하여 얻어질 수 있다.The present invention relates to a topical skin composition comprising soybean root extract in one aspect. In the extraction process of the soybean root extract of the present specification, for example, washed and dried fine powdered soybean root powder in water or an organic solvent, extracted and deposited, and then separating the residue and the filtrate through filter cloth filtration and centrifugation. The concentrated filtrate was concentrated under reduced pressure to obtain a soybean root extract. The organic solvent usable in the present invention may be selected from ethanol, methanol, butanol, ether, ethyl acetate, chloroform or a mixed solvent of these organic solvents and water, and considering the safety of the raw material, preferably water or 30 to 70% concentration. Ethanol is used. After obtaining the extract using the solvent in the above, it is possible to obtain a liquid by cooling, heating and filtration at room temperature in a conventional manner known in the art, or may further evaporate the solvent, spray drying or freeze drying, but The present invention is not limited thereto, and any method generally used in the art may be obtained without any limitation.

본 발명의 일 관점인 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기 콩뿌리 추출물은 콩의 생육단계 중 V3 내지 V4 단계의 콩으로부터 추출될 수 있다. In the external preparation composition for skin, which is an aspect of the present invention, the soybean root extract may be extracted from the soybeans of V3 to V4 during the soybean growth stage.

본 명세서에서, 콩의 생육 단계는 다음과 같다. In this specification, the growth stage of the beans is as follows.

VE 시기: 종자를 심은 후 1~2주 후 상태, 토양으로 부터 떡잎이 올라옴VE period: 1-2 weeks after planting seeds, with cotyledons from soil

VC 시기: 떡잎이 활짝 피며, 그 위로 한마디가 자라나고 외엽이 생성됨VC season: Cotyledon blooms wide, a word grows over it, and leaves are formed.

V1 시기: 첫번째 외엽으로 부터 한마디가 생성 되어 3개의 잎이 생성됨Period V1: A word is produced from the first outer leaf, resulting in three leaves.

V2 시기: V1 Stage에서 한마디가 더 생성되어 3개의 잎이 생성됨 V2 phase: One more word on the V1 Stage, resulting in 3 leaves

V3 시기: V2 Stage에서 한다미가 더 생성되어 3개의 잎이 생성됨V3 phase: Three more leaves are created in the V2 Stage.

V4 시기: V3 Stage에서 한다미가 더 생성되어 3개의 잎이 생성됨V4 season: 3 more leaves are created in V3 Stage.

R2 시기: 콩꽃이 활짝 핀 상태R2 season: Beanstalk in full bloom

R4 시기: 콩깍지 생성이 완료된 상태R4 season: Soybean pod creation complete

R5 시기: 콩깍지 안에 콩이 생성되어 지는 상태R5 season: Soybeans in the pod

R6 시기: 콩깍지 안에 녹색의 콩이 생성 완료된 상태R6 Season: Green Soybeans Completed

R7 시기: 콩깍지와 콩이 노란색으로 변해 가는 상태R7 season: Soybean pods and beans turning yellow

R8 시기: 잎 떨어지면서 콩깍지와 콩이 완전히 노란색으로 변한 상태R8 season: Soybean pods and soybeans completely yellow as leaves fall

본 발명의 일 관점인 조성물에 있어서, 상기 콩은 상기와 같은 콩의 생육 단계에 있어서, 유도인자를 처리한 콩을 포함한다. 유도인자를 처리한 콩은 쿠메스트롤 함량이 증가하게 되어 본 발명이 목적하는 효과 즉, 항산화능, 항노화능, 피부 보습 효과 및 피부 미백 효과에 있어서 더 우수한 효과를 보일 수 있다. In the composition of one aspect of the present invention, the soybean comprises soybean treated with the inducer in the growth stage of the soybean. Soybean treated with the inducer is increased in the amount of cumestrol may have a better effect in the desired effect of the present invention, that is, antioxidant capacity, anti-aging, skin moisturizing effect and skin whitening effect.

본 명세서에서 상기 유도인자는 콩의 생육 과정 중에 처리되어 콩뿌리의 쿠메스트롤의 함량을 증진할 수 있는 인자를 의미한다. 구체적으로, 누룩균 (Aspergillus oryzae) 또는 키토산을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 유도인자는 콩이 자라는 토양에 처리하거나, 콩뿌리에 직접 처리하거나 또는 주사 등에 의해 투입할 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니며, 유도인자가 콩에 흡수되어 콩뿌리의 쿠메스트롤의 함량을 증진시킬 수 있는 경로라면 제한없이 적용가능하다.In the present specification, the inducer means a factor that can be processed during the growth process of soybean to enhance the content of cumetrol of soybean root. Specifically, the yeast may include Aspergillus oryzae or chitosan, but is not limited thereto. The inducer may be treated in the soil in which the soybean grows, may be directly processed into the soybean root, or injected by injection, but is not limited thereto. The inducer may be absorbed by the soybean to enhance the content of the cumetrol of the soybean root. Any path can be used without limitation.

본 발명의 일 관점인 조성물에 있어서, 상기 콩뿌리 추출물은 쿠메스트롤 (coumestrol)을 추출물 전체 중량에 대하여 0.2 중량%이상 포함할 수 있다. 본 명세서의 콩뿌리 추출물은 유도인자를 처리한 콩을 추출한 물질이어서, 쿠메스트롤을 상기 범위로 포함할 수 있다. 구체적으로, 상기 콩뿌리 추출물은 쿠메스트롤을 0.24중량% 이상, 0.28중량% 이상, 0.32중량% 이상, 0.36중량% 이상, 0.4중량% 이상, 0.44중량% 이상 또는 0.48중량% 이상으로 함유할 수 있다.In the composition of one aspect of the present invention, the soybean root extract is at least 0.2% by weight based on the total weight of the extract of cumestrol (coumestrol) It may include. Soybean root extract of the present specification is a material extracted from the soybean treated the inducer, it may include the cumestrol in the above range. Specifically, the soybean root extract may contain at least 0.24% by weight, at least 0.28% by weight, at least 0.32% by weight, at least 0.36% by weight, at least 0.4% by weight, at least 0.44% by weight, or at least 0.48% by weight. have.

본 발명의 일 관점에 있어서, 상기 콩은 콩의 생육 단계 중 V4 단계까지 유도인자를 처리한 콩을 포함한다. VE 시기부터 V4시기까지 정기적으로 유도인자를 투입하면 쿠메스트롤의 함량을 현저하게 증가시킬 수 있다. In one aspect of the present invention, the soybean includes soybean treated with the inducer until the V4 stage of the soybean growth stage. Regular induction of inducers from VE to V4 can significantly increase the amount of cumestrol.

본 발명의 일 관점인 조성물에 있어서, 상기 유도인자는 누룩균 (Aspergillus oryzae) 및 키토산으로 구성된 군에서 선택되는 하나 이상일 수 있다. In one aspect of the present invention, the inducer may be at least one selected from the group consisting of Nuruk bacteria ( Aspergillus oryzae ) and chitosan.

본 발명의 일 관점인 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기 콩뿌리 추출물은 쿠메스트롤 (coumestrol)을 추출물 전체 중량에 대하여 0.12중량% 이상 함유할 수 있다. 본 명세서의 콩뿌리 추출물은 V3 내지 V4 단계의 콩을 추출한 물질이어서, 쿠메스트롤을 상기 범위로 포함할 수 있다. 구체적으로, 상기 콩뿌리 추출물은 쿠메스트롤을 0.13중량% 이상, 0.14중량% 이상, 0.15중량% 이상, 0.16중량% 이상, 0.17중량% 이상, 0.18중량% 이상 또는 0.19중량% 이상으로 함유할 수 있다.In a topical skin composition according to one aspect of the present invention, the soybean root extract may contain at least 0.12% by weight of coumestrol with respect to the total weight of the extract. Soybean root extract of the present specification is a material from which the soybean extract of V3 to V4 stage, it may include the cumestrol in the above range. Specifically, the soybean root extract may contain at least 0.13% by weight, at least 0.14% by weight, at least 0.15% by weight, at least 0.16% by weight, at least 0.17% by weight, at least 0.18% by weight, or at least 0.19% by weight. have.

본 발명의 일 관점인 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기 콩뿌리 추출물은 쿠메스트롤 (coumestrol)을 추출물 전체 중량에 대하여 0.12 내지 0.2중량%로 함유할 수 있다. 쿠메스트롤 (coumestrol)이 0.12중량% 미만으로 함유되면, 본 발명의 효능이 충분히 발휘되지 않으며, 0.2중량%를 초과하여 함유되는 경우, 다른 유효성분의 함량비가 지나치게 줄어드는 것으로 확인되었다. 상기와 같은 관점에 있어서, 본 발명의 일 관점인 피부 외용제 조성물은 0.125 내지 0.195중량%, 0.13 내지 0.19중량%, 0.135 내지 0.185중량%, 0.14 내지 0.18중량% 또는 0.145 내지 0.175중량%의 콩뿌리 추출물을 포함할 수 있다.In an external composition for external application of the present invention, the soybean root extract may contain coumestrol in an amount of 0.12 to 0.2% by weight based on the total weight of the extract. If the cumestrol (coumestrol) is contained less than 0.12% by weight, the effect of the present invention is not fully exhibited, and when contained in excess of 0.2% by weight, it was confirmed that the content ratio of other active ingredients is excessively reduced. In the above-described aspect, the external composition for skin preparations in one aspect of the present invention is 0.125 to 0.195% by weight, 0.13 to 0.19% by weight, 0.135 to 0.185% by weight, 0.14 to 0.18% by weight or 0.145 to 0.175% by weight of soybean root extract It may include.

본 발명의 일 관점인 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기 콩은 서리태 (Seoritae, Glycin max MERR), 서목태 (Seomoktae, Rhynchosia Nolubilis), 흑태 (Black soybean, Glycine max(L.) Merr.), 청태 (blue bean, Glycime max MERR ), 황태 (yellow bean, Glycime max MERR), 울타리콩 (field bean, Vicia faba), 강낭콩 (kidney bean, Phaseolus vulgaris), 얼룩강낭콩 (pinto bean, Phaseolus vulgaris L.), 적두 (small red bean, Vigna angularis), 거두 (small black bean, Phaseolus angularis W.F. WIGHT. ), 콩나물콩 (sprouting bean, Glycine max (L.) Merr.) 및 대두 (soybean, Glycine max)로 구성된 군으로쿠터 선택되는 하나 이상의 콩을 포함할 수 있고, 상기 콩은 구체적으로 대두 (Glycine max)일 수 있다.In an external preparation composition for skin, which is an aspect of the present invention, the soybean is Seoritae (Glycin ) max MERR), Seomokktae, Rhynchosia Nolubilis ), Black soybean, Glycine max (L.) Merr.), Cheongtae (blue bean, Glycime) max MERR), yellow bean, Glycime max MERR, field bean, Vicia faba ), Kidney bean, Phaseolus vulgaris ), pinto bean, Phaseolus vulgaris L., small red bean, Vigna angularis ), Soybeans (small black bean, Phaseolus angularis WF WIGHT.), Sprouting bean, Glycine max (L.) Merr.) and soybean (Soybean, Glycine max ) may comprise one or more beans selected from the group consisting of cousins, and the beans specifically include soybeans ( Glycine max ).

본 발명의 일 관점인 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기 조성물은 조성물 총 중랑에 대하여 0.001~10중량%의 콩뿌리 추출물을 포함할 수 있다. 이는 추출물의 함량이 0.001중량% 미만이면 항산화, 항노화, 미백 및 보습 효과가 미미하고, 10중량%를 초과하면 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효과의 증가가 나타나지 않기 때문이다. 상기와 같은 관점에 있어서, 본 발명의 조성물은 조성물 총 중량에 대하여, 0.005~9.5중량%, 0.01~9중량%, 0.03~8.5중량%, 0.05~8중량%, 0.07~7.5중량%, 0.09~7중량%, 0.1~6.5중량%, 0.3~6중량%, 0.5~5.5중량% 또는 0.7~5중량%의 콩뿌리 추출물을 포함할 수 있다.In an external preparation composition for skin, which is an aspect of the present invention, the composition may include 0.001 to 10% by weight of soybean root extract based on the total weight of the composition. This is because if the content of the extract is less than 0.001% by weight, the antioxidant, anti-aging, whitening, and moisturizing effects are insignificant. In view of the above, the composition of the present invention is 0.005 to 9.5% by weight, 0.01 to 9% by weight, 0.03 to 8.5% by weight, 0.05 to 8% by weight, 0.07 to 7.5% by weight, 0.09 to the total weight of the composition. It may include 7% by weight, 0.1-6.5% by weight, 0.3-6% by weight, 0.5-5.5% by weight or 0.7-5% by weight of the bean root extract.

본 발명의 일 관점인 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기 조성물은 DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl)의 산화를 억제시키는 항산화용인 피부 외용제 조성물일 수 있다. In the external preparation composition for skin, which is an aspect of the present invention, the composition may be an external preparation composition for antioxidant that inhibits oxidation of DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl).

본 발명의 일 관점인 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기 조성물은 콜라게나제의 발현을 억제하는 항노화용인 피부 외용제 조성물일 수 있다.In the external preparation composition for skin, which is an aspect of the present invention, the composition may be an external preparation composition for anti-aging that inhibits the expression of collagenase.

본 발명의 일 관점인 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기 조성물은 멜라닌의 생성을 억제하는 미백용인 피부 외용제 조성물일 수 있다.In the external preparation composition for skin, which is an aspect of the present invention, the composition may be a skin preparation composition for whitening which inhibits the production of melanin.

본 발명의 일 관점인 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기 조성물은 피부장벽기능 강화 또는 각질형성세포의 분화를 유도하는 보습용인 피부 외용제 조성물일 수 있다.In the external preparation composition for skin, which is an aspect of the present invention, the composition may be an external preparation composition for moisturizing for enhancing skin barrier function or inducing differentiation of keratinocytes.

본 발명의 일 관점인 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기 조성물은 화장료 조성물을 포함한다. In a topical skin composition according to one aspect of the present invention, the composition includes a cosmetic composition.

본 발명에 따른 피부 외용제 조성물을 화장료의 형태로 제형화할 경우, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 아이 크림, 영양 크림, 마사지 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 파우더, 에센스 또는 팩 등의 형태로 제형화될 수 있으며, 그 제형이 특별히 한정되는 것은 아니다. 또한, 본 발명에 의한 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다. 또한, 본 발명의 조성물은 피부 개선 효과를 증가시키기 위하여 피부 흡수 촉진 물질을 함유할 수 있다.When formulating the external composition for skin according to the present invention in the form of cosmetics, such as softening cosmetics, astringent cosmetics, nourishing cosmetics, eye cream, nutrition cream, massage cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, powder, essence or pack It may be formulated in a form, the formulation is not particularly limited. In addition, the composition according to the present invention is a fatty substance, an organic solvent, a dissolving agent, a thickening agent, a gelling agent, a softening agent, an antioxidant, a suspending agent, a stabilizer, a foaming agent, a fragrance, a surfactant, water, an ionic type or a ratio. With ionic emulsifiers, fillers, metal ion sequestrants, chelating agents, preservatives, vitamins, blockers, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic actives, lipid vesicles or any other ingredients commonly used in cosmetics It may contain adjuvants commonly used in the same cosmetic or dermatology field. Such adjuvants are introduced in amounts generally used in the cosmetic or dermatological fields. In addition, the composition of the present invention may contain a skin absorption promoting substance to increase the skin improving effect.

본 발명의 일 관점인 피부 외용제 조성물에 있어서, 상기 조성물은 피부 외용제 약학적 조성물일 수 있다. In the external preparation composition for skin, which is an aspect of the present invention, the composition may be an external preparation pharmaceutical composition for skin.

본 발명에 따른 약학 조성물의 제형은 용액제, 현탁제, 유액제, 겔, 점적제, 좌제(坐劑), 패취 또는 분무제일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 제형은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 용이하게 제조될 수 있으며, 부형제, 수화제, 유화 촉진제, 현탁제, 삼투압 조절을 위한 염 또는 완충제, 착색제, 향신료, 안정화제, 방부제, 보존제 또는 기타 상용하는 보조제를 적당히 사용할 수 있다.The formulation of the pharmaceutical composition according to the present invention may be, but is not limited to, solutions, suspensions, emulsions, gels, drops, suppositories, patches or sprays. The formulations can be readily prepared according to conventional methods in the art, and include excipients, hydrating agents, emulsifiers, suspending agents, salts or buffers for controlling osmotic pressure, colorants, spices, stabilizers, preservatives, preservatives or other compatible agents. Adjuvants may be used as appropriate.

본 발명의 약학 조성물의 유효 성분은 투여 받을 대상의 연령, 성별, 체중, 병리 상태 및 그 심각도, 투여 경로 또는 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 적용량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 이의 1일 투여 용량은 예를 들어 0.1mg/kg/일 내지 100mg/kg/일, 보다 구체적으로는 5 mg/kg/일 내지 50 mg/kg/일이 될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The active ingredient of the pharmaceutical composition of the present invention will vary depending on the age, sex, weight, pathology and severity of the subject to be administered, the route of administration or the judgment of the prescriber. Dosage determination based on these factors is within the level of one of skill in the art, and its daily dosage may be, for example, 0.1 mg / kg / day to 100 mg / kg / day, more specifically 5 mg / kg / day to 50 mg / kg. May be, but is not limited to.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. These examples are only for illustrating the present invention, it will be apparent to those skilled in the art that the scope of the present invention is not to be construed as limited by these examples.

콩뿌리 추출물의 제조Preparation of Soybean Root Extract

생장 시기별 (VE~R8 시기, 총 12시기)로 채취한 각각의 콩뿌리를 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 세말화하였다. 상기 콩뿌리 가루 100g을 70% 에탄올 수용액 1리터에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 12시간 끓여서 추출한 후, 300 메쉬 여과포로 여과하였다. 그 후, 상기 여과액을 4-15 ℃도에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후 와트만 2번 여과지로 여과시켰다. 상기 추출액을 3 리터 분액 깔때기에 넣고 에칠아세테이트 1리터를 가한 후, 흔들어서 섞어준 다음 두 층으로 완전히 분리되면 상층(에틸아세테이트 층)을 취한다. 하층(물층)을 다시 분액 깔대기로 두 번 더 추출한다. 각각의 분리된 상층을 모두 합한 뒤 냉각 콘덴서가 달린 증류 장치를 이용하여 50℃로 감압 농축하고 건조하였다.The soybean roots collected at each growth period (VE ~ R8, 12 total) were washed with purified water, dried, and then granulated. 100 g of the soybean root powder was put in 1 liter of an aqueous 70% ethanol solution, extracted by boiling for 12 hours in an extractor equipped with a cooling condenser, and filtered through a 300 mesh filter cloth. Thereafter, the filtrate was poured into 4-15 After aging at 7 ° C. for 7 days, the filter was filtered using Whatman No. 2 filter paper. The extract was added to a 3-liter separatory funnel, 1 liter of ethyl acetate was added, shaken and mixed, and when the two layers were completely separated, the upper layer (ethyl acetate layer) was taken. The lower layer (water layer) is again extracted twice with a separatory funnel. Each separated upper layer was combined and concentrated under reduced pressure to 50 ° C. using a distillation apparatus equipped with a cooling condenser and dried.

생장 시기별 콩뿌리 추출물 내의 Within the Root Extracts by Growth Period 쿠메스트롤Kumestrol 함량 분석 Content analysis

상기 실시예 1에서 얻어진 각각의 생장 시기별 콩뿌리 추출물에서 쿠메스트롤 (coumestrol) 함량의 정량 분석을 위하여 HPLC를 이용하였다. 쿠메스트롤은 하기 화학식 1의 구조를 가지며, 본 실시예에서는 Indofine Chemical 사에서 구매한 쿠메스트롤 을 사용하였다. HPLC was used for the quantitative analysis of the coumestrol content in the soybean root extract for each growth period obtained in Example 1 above. Cumestrol has a structure represented by the following Chemical Formula 1, and in this embodiment, cumestrol purchased from Indofine Chemical Company was used.

Figure 112012106862910-pat00001
Figure 112012106862910-pat00001

생장 시기에 따른 콩뿌리 추출물 내의 쿠메스트롤 함량은 도 1과 같다. Kumestrol content in the soybean root extract according to the growth time is shown in FIG.

콩의 생육 기간 중 유도 인자 처리를 통해 얻은 콩뿌리 추출물 내의 In soybean root extract obtained by induction factor treatment during soybean growth 쿠메스트롤Kumestrol 함량 분석 Content analysis

콩의 생육 기간 중 V4 시기까지 누룩균 (Aspergillus oryzae) 을 토양 및 콩에 처리하여 재배 하였다. 누룩균 (Aspergillus oryzae) 건조균체는 ㈜메디오젠에서 구입하였다. 콩에 처리하기 하루 전에, 설탕 10g을 1L의 물에 녹인 후, 누룩균 (Aspergillus oryzae) 건조균체 10g을 잘 섞었다. 그 후, 진탕항온기에서 30도의 온도로 12시간동안 배양하였다. 배양 후, 물조루를 이용하여 콩대 및 콩대 주변 토양에 잘 스며들도록 뿌려주었다. 이 때, 대조군은 동량의 정제수를 뿌려주었다. 누룩균 (Aspergillus oryzae)의 처리는 5일 간격으로 하였다. V4 시기에 채취한 콩뿌리를 실시예1과 같은 방법으로 추출하여 콩뿌리 추출물을 얻었고, 실시예 2의 방법으로 콩뿌리 추출물 내의 쿠메스트롤 함량을 분석한 결과는 도 2와 같았다. 도 2에서 확인할 수 있는 바와 같이 유도 인자를 처리함으로써 콩뿌리 추출물내의 쿠메스트롤 함량을 약 1.6배 가량 증가 시킬 수 있었다.Yeast ( Aspergillus) until V4 during Soybean Growth oryzae ) was grown on soil and soybeans. Yeast Bacteria ( Aspergillus oryzae ) dry cells were purchased from Mediogen. One day before processing in soybeans, 10 g of sugar was dissolved in 1 L of water, and 10 g of the dried cells of Aspergillus oryzae were mixed well. Thereafter, the mixture was incubated at a temperature of 30 degrees in a shaking thermostat for 12 hours. After incubation, water solubility was applied to soybeans and the soil around the soybeans. At this time, the control group was sprayed with the same amount of purified water. Yeast Bacteria ( Aspergillus oryzae ) was treated every 5 days. Bean roots collected at the time of V4 was extracted in the same manner as in Example 1 to obtain a soybean root extract, the results of analyzing the cumestrol content in the soybean root extract by the method of Example 2 was as shown in FIG. As can be seen in Figure 2 by treating the induction factor was able to increase the amount of cumestrol in the soybean root extract about 1.6 times.

항산화능Antioxidant activity 시험 exam

상기 실시예 1에서 제조한 VE/V2/V4/R4/R8 단계 각각의 콩뿌리 추출물의 항산화 효과를 알아보기 위하여, 유기 라디칼인 DPPH(1,1-디페닐-2-피크릴하이드라질; 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl)의 환원에 의해 발생하는 흡광도의 변화를 통해 DPPH 산화 억제 효능을 비교하였다. In order to determine the antioxidant effect of the soybean root extract of each of the VE / V2 / V4 / R4 / R8 step prepared in Example 1, the organic radical DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl; 1 The effect of DPPH oxidation inhibition was compared through the change of absorbance caused by the reduction of, 1-diphenyl-2-picryl hydrazyl).

100μM(in 에탄올) DPPH 용액 190㎕와 상기에서 수득한 실시예 1의 VE/V2/V4/R4/R8 시기의 콩뿌리 추출물 및 합성 항산화제인 트롤록스 (양성대조군)를 각각 10㎕씩 넣어 반응액을 만들고 37℃에서 30분간 반응시킨 후 540nm에서 흡광도를 측정하였다. 분석 결과는 하기 표 1에 나타내었으며, IC50은 첨가한 시료에 의해 흡광도가 50% 감소했을 때의 시료 농도를 의미한다.190 μl of 100 μM (in ethanol) DPPH solution and 10 μl of the Root Root Extract (positive control), which is a synthetic root antioxidant and the root extract of VE / V2 / V4 / R4 / R8, were obtained. After making the reaction for 30 minutes at 37 ℃ absorbance was measured at 540nm. The analysis results are shown in Table 1 below, and IC 50 means the sample concentration when the absorbance was reduced by 50% by the added sample.

시험물질Test substance IC50(ppm)IC 50 (ppm) V4 시기 콩뿌리 추출물과 유사 효능을 나타내기 위한 농도 비Concentration ratio to show similar efficacy with soybean root extract of V4 season 트롤록스(양성대조군)Trolox (positive control) 4646 VE 시기 콩뿌리 추출물VE Season Bean Root Extract 9595 5.2배5.2x V2 시기 콩뿌리 추출물V2 Season Bean Root Extract 7272 3.4배3.4x V4 시기 콩뿌리 추출물V4 Season Bean Root Extract 4949 1배1x R4 시기 콩뿌리 추출물R4 Season Bean Root Extract 7777 2.5배2.5x R8 시기 콩뿌리 추출물R8 Sigi Bean Root Extract 9191 3.9배3.9 times

상기 표 1에서 확인할 수 있는 바와 같이, VE/V2/V4/R4/R8 각각의 단계에서 얻어진 콩뿌리 추출물 중에서 V4 단계의 콩뿌리 추출물에서 가장 우수한 항산화능을 나타냄을 알 수 있었다. 아울러, V4 단계의 콩뿌리 추출물은 트롤록스와 유사한 효능 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다.As can be seen in Table 1, it can be seen that among the soybean root extract obtained in each step of VE / V2 / V4 / R4 / R8 showed the best antioxidant activity in the soybean root extract of the V4 step. In addition, it was confirmed that the soybean root extract of V4 shows a similar efficacy effect as trolox.

항노화능Anti-aging 시험 exam

상기 실시예 1에서 제조한 VE/V2/V4/R4/R8 단계 각각의 콩뿌리 추출물의 콜라게나제 (collagenase) 생성 억제능을 토코페롤(비교예 1) 및 EGCG(비교예 2)와 비교하여 측정하였다. 토코페롤 및 EGCG는 피부의 표피 세포를 재생시켜 피부의 노화를 방지하는 기능이 있는 것으로 알려진 물질이다. Inhibition of collagenase production of the soybean root extract of each step VE / V2 / V4 / R4 / R8 prepared in Example 1 was measured in comparison with tocopherol (Comparative Example 1) and EGCG (Comparative Example 2) . Tocopherols and EGCG are known to have the function of regenerating the epidermal cells of the skin to prevent aging of the skin.

2.5%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Media) 배지가 들어 있는 96공 평판배양기(96-well microtiter plate)에 인간의 섬유아세포를 5,000 세포/웰(well)이 되도록 넣고, 90% 정도 자랄 때까지 배양하였다. 그 후 무혈청 DMEM 배지에서 24시간 배양한 다음, 무혈청 DMEM 배지에 녹여진 상기 실시예 1의 VE/V2/V4/R4/R8 시기의 콩뿌리 추출물 100㎍/ml농도, 토코페롤 및 EGCG 각각을 10-4 몰농도로 24시간 동안 처리한 후, 세포배양액을 채취하였다. Human fibroblasts were placed at 5,000 cells / well in a 96-well microtiter plate containing Dulbecco's Modified Eagle's Media (DMEM) medium containing 2.5% fetal bovine serum, and 90% Incubate until growth. After culturing in serum-free DMEM medium for 24 hours, 100 μg / ml concentration of soybean root extract of Example 1, VE / V2 / V4 / R4 / R8, dissolved in serum-free DMEM medium, tocopherol and EGCG, respectively After 24 hours of treatment at 10 -4 molarity, the cell culture was collected.

콜라게나제 측정기구 (미국 아머샴파마샤 사)를 이용하여 채취한 세포배양액의 콜라게나제 생성 정도를 측정하였다. 먼저 1차 콜라게나제 항체가 균일하게 도포된 96-공 평판(96-well plate)에 채취된 세포 배양액을 넣고 3시간 동안 항원-항체 반응을 항온조에서 실시하였다. The degree of collagenase production of the cell cultures collected using a collagenase measuring instrument (Amersham Pharma Co., Ltd.) was measured. First, the collected cell culture solution was put into a 96-well plate uniformly coated with primary collagenase antibody, and the antigen-antibody reaction was performed in a thermostat for 3 hours.

3시간 후 발색단이 결합된 2차 콜라겐 항체를 96-웰 플레이트 (96-well plate)에 넣고 다시 15분간 반응시켰다. 15분 후, 발색 유발물질을 넣어 실온에서 15분간 발색시키고, 다시 1M 황산을 넣어 반응 (발색)을 중지시키면 반응액의 색깔은 노란색을 띠게 되는데, 반응의 진행 정도에 따라 노란색의 정도가 다르게 나타남을 확인하였다.After 3 hours, the chromophore-conjugated secondary collagen antibody was placed in a 96-well plate and reacted again for 15 minutes. After 15 minutes, the coloring agent is added and color is developed at room temperature for 15 minutes, and 1M sulfuric acid is added to stop the reaction (color development). The color of the reaction solution becomes yellow, and the degree of yellow color varies depending on the progress of the reaction. It was confirmed.

노란색을 띠는 96-웰 플레이트 (96-well plate)의 흡광도를 흡광계를 이용하여 405nm에서 측정하였고, 하기 수학식 1에 의해 콜라게나제의 합성 정도를 계산하였다. 이때 조성물을 처리하지 않은 군의 채취된 세포배양액의 반응 흡광도를 대조군으로 하였다. 즉, 비처리군에서의 콜라게나제의 발현 정도를 100으로 하고, 이에 대비하여 시험물질을 처리한 군에서의 콜라게나제의 발현 정도를 구하였으며, 그 결과는 하기 표 2에 나타내었다. The absorbance of the yellow 96-well plate (96-well plate) was measured at 405nm using an absorbance meter, the degree of synthesis of collagenase was calculated by the following equation (1). At this time, the reaction absorbance of the collected cell culture medium of the group not treated with the composition was used as a control. That is, the expression level of collagenase in the untreated group was set to 100, and the collagenase expression level in the group treated with the test substance was calculated. The results are shown in Table 2 below.

Figure 112012106862910-pat00002
Figure 112012106862910-pat00002

시험물질Test substance 콜라게나제 발현 정도(%)Collagenase expression level (%) V4시기 콩뿌리추출물과
유사효능을 나타내기 위한
농도 비
V4 season bean root extract and
To show similar efficacy
Concentration ratio
비처리군Untreated group 100100 -- 토코페롤(비교예 1)Tocopherol (Comparative Example 1) 7676 -- EGCG(비교예 2)EGCG (Comparative Example 2) 5959 -- VE 시기 콩뿌리 추출물VE Season Bean Root Extract 8484 4.9배4.9 times V2 시기 콩뿌리 추출물V2 Season Bean Root Extract 7777 3.2배3.2 times V4 시기 콩뿌리 추출물V4 Season Bean Root Extract 5555 1배1x R4 시기 콩뿌리 추출물R4 Season Bean Root Extract 7272 2.7배2.7 times R8 시기 콩뿌리 추출물R8 Sigi Bean Root Extract 8181 4.1배4.1x

상기 표 2에서 알 수 있는 바와 같이, V4 시기 콩뿌리 추출물은 시험관내(in vitro)에서 콜라게나제의 발현을 효과적으로 억제하였으며, 항산화 물질로 알려져 있는 토코페롤보다도 콜라게나제의 발현 억제능이 우수함을 확인할 수 있었다. As can be seen in Table 2, V4 season soybean root extract effectively inhibited the expression of collagenase in vitro ( in vitro ), it was confirmed that the ability to inhibit the expression of collagenase better than tocopherol known as antioxidants Could.

미백 효능 시험Whitening efficacy test

상기 실시예 1에서 제조한 VE/V2/V4/R4/R8 시기의 콩뿌리 추출물의 멜라닌 생성 억제능을 하이드로퀴논 (양성 대조군)과 비교하여 측정하였다.The melanin production inhibitory activity of the soybean root extract of the VE / V2 / V4 / R4 / R8 phase prepared in Example 1 was measured in comparison with hydroquinone (positive control).

C57BL/6 마우스 유래의 쥐의 색소세포(Mel-Ab cell)(Dooley, T.P. et al, Skin pharmacol, 7, pp 188-200)를 DMEM에 10% 우태반 혈청, 100nM 12-O-테트라데카노일포르볼(tetradecanoylphorbol)-13-아세테이트, 1nM 콜레라 독소(cholera toxin)를 첨가한 배지에서 37℃, 5% CO2의 조건에서 배양하였다. 배양된 Mel-Ab 세포를 0.25% 트립신-EDTA로 떼어내고, 24-웰 플레이트에 105 세포/웰(cells/well)의 농도로 세포를 배양한 다음, 이틀째부터 3일 연속으로 각 시기의 콩뿌리 추출물 및 하이드로퀴논을 10ppm씩 가하여 배양하였다. 그 후, 배양액을 제거하고, PBS (phosphate buffered saline)로 세척한 후, 1N 수산화나트륨으로 세포를 녹여 400nm에서 흡광도를 측정한 다음, 하기 수학식 2에 따라 멜라닌 생성 억제율을 계산하여 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다(Dooley의 방법).Mel-Ab cells derived from C57BL / 6 mice (Dooley, TP et al, Skin pharmacol, 7, pp 188-200) in DMEM with 10% fetal placental serum, 100nM 12-O-tetradecanoyl Incubated at 37 ° C. and 5% CO 2 in a medium to which phorbol (tetradecanoylphorbol) -13-acetate and 1 nM cholera toxin were added. The cultured Mel-Ab cells were detached with 0.25% trypsin-EDTA, the cells were incubated at a concentration of 10 5 cells / well in 24-well plates, and then soybeans of each period for 3 consecutive days from the second day. Root extract and hydroquinone were added by 10ppm and incubated. Thereafter, the culture solution was removed, washed with PBS (phosphate buffered saline), the cells were dissolved with 1N sodium hydroxide, the absorbance was measured at 400 nm, and then the melanin production inhibition rate was calculated according to Equation 2 below. Table 3 (Dooley's method).

Figure 112012106862910-pat00003
Figure 112012106862910-pat00003

시험물질Test substance 멜라닌 생성 억제율 (%)Melanin production inhibition rate (%) V4 시기 콩뿌리 추출물과 유사 효능을 나타내기 위한 농도 비Concentration ratio to show similar efficacy with soybean root extract of V4 season 비처리군Untreated group 100100 하이드로퀴논(양성 대조군)Hydroquinone (positive control) 48.548.5 VE 시기 콩뿌리 추출물VE Season Bean Root Extract 82.382.3 5.6배5.6 times V2 시기 콩뿌리 추출물V2 Season Bean Root Extract 64.864.8 2.7배2.7 times V4 시기 콩뿌리 추출물V4 Season Bean Root Extract 47.847.8 1배1x R4 시기 콩뿌리 추출물R4 Season Bean Root Extract 62.162.1 2.4배2.4x R8 시기 콩뿌리 추출물R8 Sigi Bean Root Extract 81.381.3 5.2배5.2x

상기 표 3에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 실시예 1의 VE/V2/V4/R4/R8 시기의 콩뿌리 추출물 중에서 쿠메스트롤 함량이 가장 우수한 V4 시기 콩뿌리 추출물은 공지된 미백 물질인 하이드로퀴논과 유사한 정도의 멜라닌 생성 억제율을 보이는 것을 확인할 수 있었다.As shown in Table 3, among the soybean root extracts of the VE / V2 / V4 / R4 / R8 season of Example 1 of the present invention, the V4 seasoned soybean root extract having the highest cumestrol content is hydroquid, a known whitening substance. It was confirmed that the melanin production inhibition rate similar to the rice paddy.

피부 보습 시험Skin moisturizing test

일차 배양한 인간의 각질형성세포를 배양용 플라스크에 넣어 바닥에 부착시킨 후, VE/V2/V4/R4/R8 시기의 콩뿌리 추출물 각각을 10 mg/ml 농도로 배양액에 첨가하여, 세포가 바닥 면적의 80~90% 정도 자랄 때까지 5일간 배양하였다. 이 세포를 수확하여 PBS (phosphate buffered saline)로 세척한 뒤, 2% SDS (Sodium Dodecyl Sulfate)와 20mM 농도의 DTT (Dithiothreitol)를 함유한 10mM 농도의 트리스-염산 완충액 (Tris-HCl, pH 7.4) 1㎖를 가하여 3분간 소니케이션 (sonication)하고 난 후, 10분간 끓였다. 그 후, 이를 1200rpm으로 30분간 원심 분리하고 침전물을 분리하여 PBS 1㎖에 현탁시킨 후, 340nm에서 흡광도를 측정하였다.Human keratinocytes in primary culture were placed in a culture flask and attached to the bottom, and then, each of the root extracts of the VE / V2 / V4 / R4 / R8 phase was added to the culture at a concentration of 10 mg / ml, and the cells were bottomed. It was incubated for 5 days until it grew about 80-90% of the area. The cells were harvested and washed with PBS (phosphate buffered saline) and then 10 mM Tris-HCl (Tris-HCl, pH 7.4) containing 2% Sodium Dodecyl Sulfate (SDS) and 20 mM Dithiothreitol (DTT). 1 ml was added and sonicated for 3 minutes, and then boiled for 10 minutes. Thereafter, the mixture was centrifuged at 1200 rpm for 30 minutes, the precipitate was separated, suspended in 1 ml of PBS, and the absorbance was measured at 340 nm.

이와 별도로 상기 소니케이션 후의 용액 일부를 취하여 단백질 함량을 측정하여, 세포 분화 정도의 평가시 기준으로 삼았다. 저칼슘(0.03mM) 처리군과 고칼슘(1.2mM) 처리군을 각각 음성/양성 대조군으로 하고, 저칼슘 농도에 시험물질을 첨가하여 실시한 시험 결과를 하기 표 4에 나타내었다.Separately, a portion of the solution after the sonication was taken to measure the protein content, which was used as a reference for evaluating the degree of cell differentiation. Low calcium (0.03mM) treated group and high calcium (1.2mM) treated group as a negative / positive control, respectively, the test results performed by adding the test substance to the low calcium concentration is shown in Table 4 below.

시험물질Test substance 사용농도Concentration 각질형성세포에서의
분화능 (%)
In keratinocytes
Differentiation capacity (%)
V4시기 콩뿌리 추출물과 유사 효능을 나타내기 위한 농도비Concentration ratio to show similar efficacy with V4 soybean root extract
대조군Control Low Ca2+(0.03 mM)Low Ca 2+ (0.03 mM) 100100 대조군Control High Ca2+(1.2 mM)High Ca 2+ (1.2 mM) 206206 VE 시기 콩뿌리 추출물VE Season Bean Root Extract 10 mg/ml10 mg / ml 118118 5.8배5.8 times V2 시기 콩뿌리 추출물V2 Season Bean Root Extract 10 mg/ml10 mg / ml 134134 3.9배3.9 times V4 시기 콩뿌리 추출물V4 Season Bean Root Extract 10 mg/ml10 mg / ml 182182 1배1x R4 시기 콩뿌리 추출물R4 Season Bean Root Extract 10 mg/ml10 mg / ml 156156 3.1배3.1x R8 시기 콩뿌리 추출물R8 Sigi Bean Root Extract 10 mg/ml10 mg / ml 129129 4.7배4.7x

상기 표 4에 나타난 바와 같이, 각질형성세포 분화 시 생성되는 CE (Cornified Envelop)의 양을 측정하여 세포분화 촉진효과를 비교한 결과, 본 발명에 의한 VE/V2/V4/R4/R8 시기의 콩뿌리 추출물 중에서 쿠메스트롤 함량이 가장 우수한 V4 시기 콩뿌리 추출물은 각질형성세포에서 분화를 촉진하는 것을 알 수 있었다. As shown in Table 4, as a result of measuring the amount of CE (Cornified Envelop) produced when keratinocyte differentiation was compared to compare the effect of promoting cell differentiation, Among the root extracts of the VE / V2 / V4 / R4 / R8 phase according to the present invention, the V4 season root extract having the highest cumestrol content was found to promote differentiation in keratinocytes.

자극감Irritation 시험 exam

공지된 미백 물질인 코직산과 본 발명에서 유효성분으로 사용되는 콩뿌리추출물의 사용성을 비교하기 위하여, 따가움, 화끈거림 등의 자극감에 민감한 패널 15명을 대상으로 따가움, 화끈거림 등 자극감의 정도를 실험하였다.In order to compare the usability of kojic acid, a known whitening substance, and the soybean root extract used as an active ingredient in the present invention, the degree of irritation such as stinging, burning, etc. was tested in 15 panels sensitive to irritation such as stinging, burning, etc. It was.

피험자에게 코직산(kojic acid, YM chemical 통해 구입)과 상기 실시예 1에서 얻은 V4 시기 콩뿌리 추출물을 각각 0.5㎖씩 좌우를 무작위로 바꾸어 적용하여 문지르고 0.1점 단위로 하여 0~3.0 사이의 점수를 매기도록 하였다. 그 결과는 하기 표 5에 나타내었다.Subject subjects rubbed kojic acid (obtained from YM chemical) and V4 seasoned soybean root extract obtained in Example 1 by applying randomly changing the left and right sides, respectively, and scoring a score between 0 and 3.0 in units of 0.1 points. It was made. The results are shown in Table 5 below.

<평가기준><Evaluation Criteria>

0 ~ 0.4: 자극 없음0 to 0.4: no stimulation

0.5 ~ 1.0: 약간 자극이 있음0.5 to 1.0: slightly irritating

1.1 ~ 2.0: 보통 정도의 자극이 있음1.1 to 2.0: moderate stimulation

2.1 ~ 3.0: 자극이 심함2.1 to 3.0: severe irritation

구분division 코직산Kojic acid V4 시기 콩뿌리 추출물V4 Season Bean Root Extract 따가움Stinging 0.810.81 0.240.24 화끈거림Burning 0.390.39 0.220.22 평균Average 0.600.60 0.230.23

상기 표 5에서 알 수 있는 바와 같이, 코직산의 경우는 따가움, 화끈거림이 어느 정도 있어 보통 약간 느낄 수 있는 정도의 자극감이 있는 것으로 나타났다. 반면, 본 발명에서 사용되는 V4 시기 콩뿌리 추출물은 화끈거림과 따가움 모두 거의 느낄 수 없을 정도여서 대체로 자극이 없는 것으로 나타냈다.As can be seen in Table 5, in the case of kojic acid, there was some degree of tingling, burning, there was a sense of irritation that can usually be felt slightly. On the other hand, the soybean root extract of the V4 season used in the present invention was almost irritable because it can hardly feel both hot and stinging.

이하, 상기 피부 외용제 조성물의 제형예를 설명하나, 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.Hereinafter, the formulation example of the external preparation composition for skin, but not intended to limit the present invention is intended to be described in detail only.

제형예 1 로션Formulation Example 1 Lotion 배합성분Ingredient 중량%weight% 콩뿌리 추출물Soybean Root Extract 3.003.00 L-아스코르빈산-2-인산마그네슘염 L-ascorbic acid-2-phosphate magnesium salt 1.001.00 수용성 콜라겐 (1% 수용액) Water-soluble collagen (1% aqueous solution) 1.001.00 시트르산나트륨Sodium citrate 0.100.10 시트르산 Citric acid 0.050.05 백굴채 엑기스 Baekgulchae Extract 0.200.20 1,3-부틸렌글리콜 1,3-butylene glycol 3.003.00 정제수 Purified water to 100to 100

제형예 2 크림Formulation Example 2 Cream 배합성분Ingredient 중량%weight% 콩뿌리 추출물Soybean Root Extract 1.001.00 폴리에틸렌글리콜모노스테아레이트Polyethylene Glycol Monostearate 2.002.00 자기유화형 모노스테아르산글리세린 Self-emulsifying glycerin monostearate 5.005.00 세틸알코올Cetyl alcohol 4.004.00 스쿠알렌Squalene 6.006.00 트리2-에틸헥산글리세릴 Tri2-ethylhexaneglyceryl 6.006.00 스핑고당지질Sphingolipid 1.001.00 1,3-부틸렌글리콜 1,3-butylene glycol 7.007.00 정제수Purified water to 100to 100

제형예 3 팩Formulation Example 3 Pack 배합성분Ingredient 중량%weight% 콩뿌리 추출물Soybean Root Extract 5.005.00 폴리비닐알코올Polyvinyl alcohol 13.0013.00 L-아스코르빈산-2-인산마그네슘염 L-ascorbic acid-2-phosphate magnesium salt 1.001.00 라우로일히드록시프롤린Lauroylhydroxyproline 1.001.00 수용성 콜라겐 (1% 수용액) Water-soluble collagen (1% aqueous solution) 2.002.00 1,3-부틸렌글리콜 1,3-butylene glycol 3.003.00 에탄올ethanol 5.005.00 정제수Purified water to 100to 100

제형예 4 미용액Formulation Example 4 Serum 배합성분Ingredient 중량%weight% 콩뿌리 추출물Soybean Root Extract 2.002.00 히드록시에틸렌셀룰로오스 (2% 수용액) Hydroxyethylene cellulose (2% aqueous solution) 12.0012.00 크산탄검 (2% 수용액) Xanthan gum (2% aqueous solution) 2.002.00 1,3-부틸렌글리콜 1,3-butylene glycol 6.006.00 진한 글리세린 Dark glycerin 4.004.00 히알루론산나트륨 (1% 수용액) Sodium Hyaluronate (1% aqueous solution) 5.00 5.00 정제수Purified water to 100to 100

제형예 5 연고Formulation Example 5 Ointment 배합 성분Compounding ingredients 함량(중량%)Content (% by weight) 콩뿌리 추출물Soybean Root Extract 0.10.1 글리세린glycerin 8.08.0 부틸렌글리콜Butylene glycol 4.04.0 유동파라핀Liquid paraffin 15.015.0 베타글루칸Beta Glucan 7.07.0 카보머Carbomer 0.10.1 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드Caprylic / Capric Triglycerides 3.03.0 스쿠알란Squalane 1.01.0 세테아릴 글루코사이드Cetearyl Glucoside 1.51.5 소르비탄 스테아레이트Sorbitan stearate 0.40.4 세테아릴 알코올Cetearyl Alcohol 1.01.0 밀납Beeswax 4.04.0 방부제, 색소, 향료Preservative, coloring, flavoring 적량Appropriate 정제수Purified water 잔량Remaining amount

이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.As described above in detail specific parts of the present invention, it is apparent to those skilled in the art that these specific descriptions are merely preferred embodiments, and thus the scope of the present invention is not limited thereto. something to do. Thus, the substantial scope of the present invention will be defined by the appended claims and their equivalents.

Claims (18)

콩뿌리 추출물을 포함하고,
상기 콩은 콩의 생육단계 중 V3 내지 V4 단계의 콩이며,
상기 콩뿌리 추출물은 쿠메스트롤(coumestrol)을 추출물 전체 중량에 대하여 0.12 내지 0.2 중량%로 포함하는 화장료 조성물.
Contains soybean root extract,
The beans are beans of the V3 to V4 stage of the soybean growth stage,
The soybean root extract is a cosmetic composition comprising the cumestrol (coumestrol) in an amount of 0.12 to 0.2% by weight based on the total weight of the extract.
삭제delete 삭제delete 삭제delete 제 1항에 있어서,
상기 콩은 콩의 생육 단계 중 유도인자를 처리한 것이고,
상기 유도인자는 누룩균(Aspergillus oryzae) 및 키토산으로 구성된 군에서 선택되는 하나 이상을 포함하는 것인, 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The soybean is treated with an inducer during the soybean growth stage,
The inducer is to include one or more selected from the group consisting of Nuruk ( Aspergillus oryzae ) and chitosan, cosmetic composition.
제1항에 있어서,
상기 콩은 콩의 생육 단계 중 V4 단계까지 유도인자를 처리한 것이고,
상기 유도인자는 누룩균(Aspergillus oryzae) 및 키토산으로 구성된 군에서 선택되는 하나 이상을 포함하는 것인, 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The soybean is treated with an inducer until the V4 stage of the soybean growth stage,
The inducer is to include one or more selected from the group consisting of Nuruk ( Aspergillus oryzae ) and chitosan, cosmetic composition.
삭제delete 제1항에 있어서,
상기 콩은 대두인, 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The bean is soybean, cosmetic composition.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 화장료 조성물 총 중랑에 대하여 0.001~10중량%의 콩뿌리 추출물을 포함하는, 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The cosmetic composition comprises a 0.001 to 10% by weight of the soybean root extract with respect to the total composition of the cosmetic composition, cosmetic composition.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 항산화용인, 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The cosmetic composition is for antioxidant, cosmetic composition.
제9항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl)의 산화를 억제하는, 화장료 조성물.
The method of claim 9,
The cosmetic composition is a cosmetic composition for inhibiting the oxidation of DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl).
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 피부 세포 재생용인, 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The cosmetic composition is a cosmetic composition for skin cell regeneration.
제12항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 콜라게나제 (collagenase)의 발현을 억제하는, 화장료 조성물.
The method of claim 12,
The cosmetic composition inhibits the expression of collagenase (collagenase), cosmetic composition.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 미백용인, 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The cosmetic composition is a cosmetic composition for whitening.
제14항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 멜라닌의 생성을 억제하는, 화장료 조성물.
The method of claim 14,
The cosmetic composition is a cosmetic composition that inhibits the production of melanin.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 보습용인, 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The cosmetic composition is a cosmetic composition for moisturizing.
제16항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 피부장벽기능의 강화 또는 각질형성세포의 분화를 유도하는, 화장료 조성물.
The method of claim 16,
The cosmetic composition is to enhance the skin barrier function or induce differentiation of keratinocytes, cosmetic composition.
삭제delete
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WO2018012827A1 (en) * 2016-07-14 2018-01-18 (주)아모레퍼시픽 Culturing method for cultured leguminous roots having increased coumestrol content
KR20200040583A (en) * 2018-10-10 2020-04-20 (주)아모레퍼시픽 Composition for cortisone reductase inhibition
KR102249711B1 (en) * 2018-10-23 2021-05-10 (주)아모레퍼시픽 Composition for enhancing skin elasticity or improving skin wrinkels comprising enzyme treated extract of leguminous plants cultured root

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR19980077876A (en) 1997-04-23 1998-11-16 서영필 Cosmetic composition containing honey extract or soy extract
EP1809751B1 (en) * 2004-09-29 2010-09-01 CollPlant Ltd. Collagen producing plants and methods of generating and using same
KR100806226B1 (en) * 2006-04-07 2008-02-22 한국생명공학연구원 A composition for the prevention and treatment of cardiovascular disease containing extract of Glycine max Roots or polypenol compounds isolated thereof
CN105362151A (en) * 2010-03-31 2016-03-02 株式会社爱茉莉太平洋 Cosmetic composition comprising coumestrol or a bean extract containing coumestrol for skin care
KR101776071B1 (en) * 2010-04-21 2017-09-07 (주)아모레퍼시픽 Composition containing red sword bean extract for anti-aging and whitening

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