KR101492470B1 - 효소 및 저온 가공기법을 이용한 유자씨 기름의 제조방법 및 이로부터 제조된 유자씨 기름을 함유하는 항동맥경화용 조성물 - Google Patents

효소 및 저온 가공기법을 이용한 유자씨 기름의 제조방법 및 이로부터 제조된 유자씨 기름을 함유하는 항동맥경화용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 유자씨를 조분쇄한 후, 비스코자임(viscozyme) 및 펙티넥스(pectinex)로 처리하는 단계 (A); 상기 효소처리 후, 30~45℃의 저온에서 습식분쇄하는 단계 (B); 및 상기 습식분쇄 후, 원심분리하여 상등액을 수득하는 단계 (C);를 포함하는 것을 특징으로 하는 유자씨 기름의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명의 유자씨 기름의 제조방법은 유자씨의 기능성분을 증대시킬 수 있고, 기능성분이 증대된 유자씨로부터 기능성분을 최대한 파괴하지 않고 추출할 수 있다. 또한, 본 발명의 유자씨 기름의 제조방법에 따라 수득된 유자씨 기름은 우수한 항동맥경화 효능을 발휘한다.

Description

효소 및 저온 가공기법을 이용한 유자씨 기름의 제조방법 및 이로부터 제조된 유자씨 기름을 함유하는 항동맥경화용 조성물 {Method for production of citron seed oil with enzyme and cold process and composition with citron seed oil therefrom}
본 발명은 효소 및 저온 가공기법을 이용한 유자씨 기름의 제조방법 및 이로부터 제조된 유자씨 기름을 함유하는 항동맥경화용 조성물에 관한 것이다.
최근 한국인의 식생활 양상이 서구화됨에 따라 각종 동물성 식품의 섭취량이 증가하고 있다. 특히, 동물성 지방의 과다 섭취로 인하여 동맥경화, 심근경색, 고혈압 등과 같은 순환기계 질환의 발생이 급증하고 있고, 한국인 사망의 주원인이 되고 있다. 이러한 순환기계 질환은 여러가지 복합적인 인자에 의해 유발되며, 환경적인 요인 및 식생활의 변화와 밀접한 관련이 있다. 과잉의 지방 섭취는 지질대사의 이상을 초래하며, 식이지방 중의 콜레스테롤 및 포화 지방산은 혈장 콜레스테롤과 중성 지질의 농도를 상승시킴으로써 동맥경화증을 유발한다고 보고되었다(Grundy et al ., AM. J. Clin. Nutr . 30:985, 1977).
한편, 동맥경화증(arteriosclerosis)은 죽상경화증이라고도 하며, 동맥벽에 지방분이 침착되어 딱딱해지고, 점점 동맥내경이 좁아져 혈류의 장애를 초래하는 질환이다. 이러한 증상은 빠르게는 20대에 시작되어 나이가 많아짐에 따라 점점 진행하게 된다. 초기에는 동맥 내벽에 지방질이 침착하여 작은 지방분을 형성하고 점점 지방분의 침착이 많아지면, 동맥벽을 구성하고 있는 평활근 세포의 증식이 일어나 동맥 내경이 좁아지고 혈류의 장애가 생기게 되며, 말초조직에 혈액 공급이 원활하지 않게 된다. 시간이 경과함에 따라 혈관벽은 딱딱하게 섬유화가 되며 칼슘이 침착하여 석회화 되기도 한다. 이러한 변화는 전신의 동맥 어디에나 생길 수 있다. 심장에 혈액을 공급해 주는 관상 동맥에 동맥경화증이 유발되면 심근경색증이 되어 생명을 잃기도 하고, 가슴에 심한 통증이 생기는 협심증이 되기도 한다. 또한, 뇌혈관에 동맥경화증이 유발되면 뇌경색증이 되어 신체의 일부가 마비되기도 하며, 신장으로 가는 혈관이 막히면 신장에 혈액 공급이 되지 않아 신혈관성 고혈압이라는 병이 생기기도 한다.
한편, 혈관의 건강을 위해서는 혈압을 조절하고 혈관 내 이물질의 침착을 막는 것이 가장 중요하다. 혈압은 심장의 박동과 함께 혈관 내피세포와 근육세포의 수축과 이완이 유기적으로 조절되면서 유지된다. 혈관에 압력이 가해지거나 혈류량이 증가할 때 혈관이 적절하게 이완하지 못하면 혈압이 상승하고 그로인해 고혈압, 부정맥, 심장마비 및 동맥경화가 발생하게 된다. 대표적인 혈관 이완인자로는 혈관내피세포의 갑상선결정성과증식증(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)에 의해 발생하는 일산화질소(nitric oxide, NO)가 잘 알려져 있으며 이는 항아테로제닉(anti-atherogenic) 효과를 유도하는 것으로도 알려져 있다. 내피세포에서 생산된 NO는 혈관평활근으로 이동하여 세포내 구아닐산고리화효소(guanylate cyclase, GC)와 결합하게 되고 활성화된 GC는 구아노신 3인산(guanosine triphosphate, GTP)을 환식 구아노신 모노포스페이트(cyclic guanosine monophosphate, cGMP)로 전환하고 고리형 GMP의존성 단백질인산화효소(cGMP-dependent protein kinase G, PKG)를 활성화하여 Ca2+-activated K+ channel이나 미오신 라이트 체인 인산분해효소(myosin light-chain phosphatase)의 활성증가를 통한 혈관이완을 유도하게 된다. 이와 같은 혈관이완을 통한 혈압의 조절뿐만 아니라 앞에서 언급한 항아테로제닉(anti-atherogenic) 효과를 포함한 혈관의 항상성 유지에 다양한 방법으로 작용하는 것이 보고되어 있다.
혈관건강을 유지하기 위한 또 다른 방법은 혈관 내 이물질의 축적을 막는 것이다. 특히, 혈관 내 죽종(atheroma) 생성과 유도에 영향을 미치는 다양한 세포부착분자(cell adhesion molecule, CAM) 중 세포접합분자(intercellular adhesion molecule, ICAM)-1 및 혈관세포접합분자(vascular cell adhesion molecule, VCAM)-1의 발현을 억제는 것은 혈관 건강유지를 위한 중요한 요소이다. 또한 인간혈관내피세포(HUVEC)에서 TNF-α에 의해 증가된 ICAM-1과 VCAM-1의 발현을 저해하는 것이 죽상동맥경화의 개선에 도움이 될 수 있음을 보고되었으며, TNF-α에 의해 증가된 HUVEC의 증식(proliferation)은 혈관신생에 영향을 주어 암세포의 성장을 도울 수 있고 건선 등의 혈관생성에 의한 질병을 유발할 수 있으므로 이를 저해시키는 것은 항암과 함께 혈관신생에 의해 발생할 수 있는 질병예방의 효과를 기대할 수 있다.
한편, 유자(Citrus junos Sieb. ex TANAKA)는 특유의 향미로 인해 전통적으로 차류 등의 기호식품으로 널리 애용되어왔으며, 비타민 C 함유량이 풍부하고 다양한 종류의 플라보노이드를 함유하고 있어 민간에서는 감기치료제로 이용되어 왔다. 최근 연구에 의하면 과피 추출물에서 에이엠피-활성화 단백질 인산화 효소(AMP-activated protein kinase, AMPK)와 퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체(peroxisome proliferator-activated receptor, PPAR)를 통한 항비만효과가 확인되었으며, 과피로부터 추출한 오일(oil)에서 지방분해활성(lipolytic activity)이 확인되었다. 또한, 유자 과피의 정유로부터 분리된 리모넨(limonene)은 항염증효과를 나타내는 것으로 보고되었다.
그러나 우수한 기능성 천연소재인 유자의 제품화과정에서 총 중량의 약 15%에 이르는 유자씨를 대부분 폐기하는 실정이며 그 활용을 위한 연구는 아직 활발히 이루어지지 못하고 있는 실정이다. 유자씨의 활용방안을 모색하기위해 일반성분을 분석한 결과 지방의 함량이 약 35%로 가장 높았고 조단백질 16%, 수분 7.2%, 회분 3%의 함량이 각각 확인되었다.
또한, 유자씨 기름(citron seed oil)에는 리놀레산(linoleic acid), 올레산(oleic acid), 팔미트산(palmitic acid), 스테아르산(stearic acid) 등이 함유되어 있는데, 대부분 불포화 지방산인 올레산과 리놀레산으로 이루어져 있다. 올레산(oleic acid)은 상처치료, 면역 및 염증 질환과 암에 효과가 있는 것으로 알려져 있으며, 리놀레산은 항염증작용이 있다고 알려져 있다.
한편, 2007년 국내유자 생산량은 11,205 톤이며 이중 종자(씨앗)의 중량비율이 13%로 가정할 경우 유자 종자량은 1,400여톤에 달한다. 유자씨 기름 생상시 30% 착유 수율을 고려했을 때 버려지는 유자종자로부터 추출가능한 잠재적인 오일 생산량은 약 420여톤에 이름에도 불구하고, 아직까지 유자씨 기름의 활용도가 매우 부진한 실정이다.
한편, 현재 국내에서 시판되는 식용유지는 대부분 고온·고압 또는 용매에 의해 생산되고 있다. 고온·고압을 이용하여 제조된 기름은 기능성 성분이 대부분 파괴가 된다는 문제점이 있다. 또한, 용매를 이용하여 제조된 기름은 용매 제거단계를 추가적으로 더 수행해야하며, 불순물을 많이 포함하고 있다는 문제점이 있다.
이에, 본 발명의 발명자들은 유자씨로부터 유자씨 기름을 제조하는 방법에 대하여 예의연구한 결과 본 발명에 이르렀다.
대한민국 등록특허 제10-0854403호 (등록일자: 2008.08.20)에는, 분쇄된 유자씨를 에탄올추출하고, 이를 건조시켜 수득한 건조분말인 유자씨 추출물 분말과, 세절된 상엽을 에탄올 추출하고, 이를 건조시켜 수득한 건조분말인 상엽 추출물 분말이 3:7 내지 6:4(w/w)로 구성된 조성물을 포함하는, 비만억제 효과를 나타내는 식품에 대한 기술이 기재되어 있다. 다만, 본 발명은 유자씨를 조분쇄한 후 효소처리하고, 30~45℃저온에서 습식분쇄한 후 원심분리하여 유자씨 기름을 제조함에 특징이 있는데, 등록특허 제10-0854403호에는 이에 대한 언급이 없다. 대한민국 등록특허 제10-1109771호 (등록일자: 2012.01.18)에는, 유기용매 또는 물을 용매로 하여 추출된 유자 추출물을 유효성분으로 함유하는 심근경색 증상의 완화용 건강식품에 대한 기술이 기재되어 있다. 다만, 본 발명은 유자씨를 조분쇄한 후 효소처리하고, 30~45℃저온에서 습식분쇄한 후 원심분리하여 유자씨 기름을 제조함에 특징이 있는데, 등록특허 제10-1109771호에는 이에 대한 언급이 없다.
본 발명은 화학적 처리에 의하지 않고, 유자씨 기름을 추출할 수 있는 방법을 개발하여 제공하고자 한다.
또한, 본 발명은 유자씨의 기능성분이 증대되어 우수한 항동맥경화능을 발휘하는 유자씨 기름의 제조방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 본 발명의 방법에 의해 수득된 유자씨 기름을 함유하는 항동맥경화용 식품 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 유자씨 기름의 제조방법은 유자씨를 조분쇄한 후, 비스코자임(viscozyme) 및 펙티넥스(pectinex)로 처리하는 단계 (A); 상기 효소처리 후, 30~45℃의 저온에서 습식분쇄하는 단계 (B); 및 상기 습식분쇄 후, 원심분리하여 상등액을 수득하는 단계 (C);를 포함하는 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명은 유자씨를 조분쇄한 후, 비스코자임(viscozyme) 및 펙티넥스(pectinex)로 효소처리한 후, 30~45℃의 저온에서 습식분쇄하고, 원심분리하여 상등액을 수득하여 얻어진 유자씨 기름을 함유하는 항동맥경화용 식품 조성물을 제공하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 유자씨 기름의 제조방법은 유자를 조분쇄하고 효소처리함으로써 유자씨의 기능성분을 더욱 증대시키고, 저온 습식분쇄와 원심분리기법을 이용하여 유자씨의 기능성분의 파괴를 최소화할 수 있다. 상기와 같이 제조된 유자씨 기름은 항동맥경화 효과가 우수하여 다양한 식품에 적용될 수 있다.
<단계 (A): 유자씨를 조분쇄한 후, 비스코자임(viscozyme) 및 펙티넥스(pectinex)로 처리하는 단계>
본 단계는 유자씨를 조분쇄한 후, 비스코자임(viscozyme) 및 펙티넥스(pectinex)로 처리하는 단계이다. 바람직하게는 유자씨를 조분쇄한 후, 80~120 FBG/g (FBG: Fungal Beta-Glucanase Units)의 비스코자임 0.05~0.15중량% 및 25,500~26,500 PG/㎖의 펙티넥스 0.05~0.15중량%를 첨가한 뒤, 35~45℃에서 10~20시간 동안 효소분해시키는 것이다. 분쇄된 유자씨에 다당류 분해효소인 비스코자임 및 펙티넥스를 처리하여 효소분해를 하면 유자씨의 기능성분을 더욱 증대시킬 수 있다.
한편, 본 단계에서 유자씨는 효소처리 전 조분쇄하는 것이 좋은데, 효소처리 후, 효소분해 시간을 단축시킬 수 있고, 효소분해 수율을 향상 시킬 수 있기 때문이다.
한편, 상기 비스코자임(Viscozyme)은 상용효소로서, 아스퍼질러스 아큘레아투스(Aspergillus aculeatus) 유래 아라바나아제(Arabanase), 셀룰라아제(Cellulase), 베타-글루코나아제(Beta-glucanase), 헤미셀룰라아제(Hemicellulase), 자일라나아제(Xylanase)를 포함하는 복합 효소(Beta-Glucanase)인데, 바람직하게는 비스코자임 L(Viscozyme L) 제품을 사용하는 것이 좋다.
또한, 상기 펙티넥스(Pectinex)는 상용효소로서, 펙티나아제(pectinase) 및 헤미셀룰라아제(hemicellulase)의 활성을 가지는 효소인데, 바람직하게는 펙티넥스 울트라 SP-L(Pectinex Ultra SP-L) 제품을 사용하는 것이 좋다.
<단계 (B): 상기 효소처리 후, 30~45℃의 저온에서 습식분쇄하는 단계>
본 단계는 상기 효소처리 후, 30~45℃의 저온에서 습식분쇄하는 단계이다. 본 단계의 습식분쇄를 사용하여 분쇄하게 되면, 제피과정이나 고온의 볶음과정(180~220℃)을 거치지 않고서도 유자씨로부터 유지성분을 최대한 용출해낼 수 있다.
한편, 본 단계는 바람직하게 상기 효소처리 후, 30~37℃에서 1차 분쇄하고, 37~45℃에서 2차 분쇄하는 것이 좋다. 더욱 바람직하게는 상기 효소처리 후, 수분의 혼입없이 30~37℃에서 1차 분쇄하고, 37~45℃에서 2차 분쇄하는 것이다. 이와 같이 저온 습식분쇄를 하면 유자씨의 불포화도가 높은 지방산이 산화되는 것을 현저하게 방지할 수 있어, 유자씨의 기능성분이 다량 함유된 유자씨 기름을 수득할 수 있다.
<단계 (C): 상기 습식분쇄 후, 원심분리하여 상등액을 수득하는 단계>
본 단계는 상기 습식분쇄 후, 원심분리하여 상등액을 수득하는 단계이다. 바람직하게는 상기 단계 (B)에서 얻어진 유자씨 분쇄물(paste)을 20~35℃에서 원심분리기의 노즐 3~8 mm, 원심분리기에 투입해주는 펌프 튜브의 내경 사이즈 5~10 mm, 펌프 RPM 100~300 rpm의 조건으로 원심분리하여 유지성분과 박성분으로 분리시키는 것이다.
유자씨 분쇄물은 유지성분과 수용성분이 콜로이드 형태로 존재하기 때문에 자연방치 방식이나 여과방식으로는 분리가 이루어지지 않는다. 자연방치 상태에서는 수개월의 시간이 필요하며 분리되는 유지의 함량도 10% 이하이고, 여과방식의 경우에는 초미립자에 의한 필터 막힘 형상으로 분리가 불가능하게 된다.
그런데, 본 발명은 상기 단계 (B)에서 얻은 유자씨 분쇄물을 20~35℃에서 원심분리하여 유지성분과 박(슬러지) 성분으로 분리할 수 있는 것이다.
한편, 본 발명은 유자씨를 조분쇄한 후, 비스코자임(viscozyme) 및 펙티넥스(pectinex)로 효소처리한 후, 30~45℃의 저온에서 습식분쇄하고, 원심분리하여 상등액을 수득하여 얻어진 유자씨 기름을 함유하는 식품 조성물을 제공하는 것을 특징으로 한다. 이때, 상기 식품 조성물은, 바람직하게 항동맥경화용일 수 있다.
한편, 본 발명의 식품 조성물은 바람직하게 육류, 곡류, 카페인 음료, 일반음료, 초콜렛, 빵류, 스넥류, 과자류, 피자, 젤리, 면류, 껌류, 아이스크림류, 알코올성 음료, 술, 비타민 복합제 및 그 밖의 건강보조식품류 중 선택되는 어느 하나인 것인 것이 좋으나, 반드시 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명은 유자씨를 효소처리함으로써 기능성분을 증대시킨 후, 저온에서 습식분쇄하고 원심분리하여 유자씨 기름을 제조하는 방법을 제공하는데, 본 발명은 유자씨의 기능성 성분을 최대한 파괴하지 않으면서도, 유자로부터 기름을 고수율로 수득할 수 있는 장점이 있다.
또한, 본 발명의 방법에 의해 수득된 유자씨 기름은 우수한 항동맥경화능을 갖는 것으로 확인되어, 조미성분으로 이를 여러 식품에 첨가하여 적용할 수 있고, 항동맥경화용 식품 조성물에 첨가하여 사용할 수도 있다.
도 1은 본 발명의 유자씨 기름의 제조방법을 나타낸 모식도이다.
도 2는 본 발명의 유자씨 기름의 GC 분석 결과이다.
도 3은 고지방식이와 본 발명의 유자씨 기름을 공급한 SD-rat의 혈중 총콜레스테롤의 변화량을 확인한 결과 그래프이다. 'normal'은 일반식이군, 'HFHC'는 고지방/고콜레스테롤군, 'HFHC+Simvastatin'은 고지방/고콜레스테롤+심바스타틴 정 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 7%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 7% 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 15%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 15% 투여군을 의미한다.
도 4는 고지방식이와 본 발명의 유자씨 기름을 공급한 SD-rat의 혈중 중성지방의 변화량을 확인한 결과 그래프이다. 'normal'은 일반식이군, 'HFHC'는 고지방/고콜레스테롤군, 'HFHC+Simvastatin'은 고지방/고콜레스테롤+심바스타틴 정 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 7%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 7% 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 15%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 15% 투여군을 의미한다.
도 5는 고지방식이와 본 발명의 유자씨 기름을 공급한 SD-rat의 혈중 HDL-콜레스테롤의 변화량을 확인한 결과 그래프이다. 'normal'은 일반식이군, 'HFHC'는 고지방/고콜레스테롤군, 'HFHC+Simvastatin'은 고지방/고콜레스테롤+심바스타틴 정 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 7%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 7% 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 15%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 15% 투여군을 의미한다.
도 6은 고지방식이와 본 발명의 유자씨 기름을 공급한 SD-rat의 혈중 LDL-콜레스테롤의 변화량을 확인한 결과 그래프이다. 'normal'은 일반식이군, 'HFHC'는 고지방/고콜레스테롤군, 'HFHC+Simvastatin'은 고지방/고콜레스테롤+심바스타틴 정 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 7%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 7% 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 15%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 15% 투여군을 의미한다.
도 7은 고지방식이와 본 발명의 유자씨 기름을 공급한 SD-rat의 항아테로제닉 지수 변화량을 확인한 결과 그래프이다. 'normal'은 일반식이군, 'HFHC'는 고지방/고콜레스테롤군, 'HFHC+Simvastatin'은 고지방/고콜레스테롤+심바스타틴 정 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 7%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 7% 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 15%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 15% 투여군을 의미한다.
도 8은 HUVEC 세포를 이용하여 NO 분비량을 측정한 결과이다. 'Control'은 HUVEC군, 'TNF-α'는 HUVEC에 TNF-α를 처리한 군, 'TNF-α+CSO'는 HUVEC에 유자씨 기름을 처리한 군을 의미한다.
이하, 본 발명의 내용을 하기 실시예를 들어 더욱 상세히 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니고, 그와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.
[실시예 1: 유자씨 기름 제조]
깨끗이 세척된 유자씨를 조분쇄한 후, 조분쇄된 유자씨 99.8 g에, 100 FBS/g의 비스코자임 L (Viscozyme L; Aspergillus aculeatus 유래 Arabanase, Cellulase, Beta-glucanase, Hemicellulase, Xylanase의 복합 효소(Beta-Glucanase)) 0.1 g, 26,000 PG/㎖의 펙티네스 울트라 SP-L (Pectinex Ultra SP-L; pectinase, hemicellulase) 0.1 g을 첨가한 후, 40℃에서 15시간 동안 처리하였다.
그 후, 습식 콜로이드밀(colloid mill)을 이용하여 수분의 첨가 없이 35℃에서 1차 분쇄하고, 41℃에서 2차 분쇄하였다. 그 후, 실온에서 상기 유자씨 분쇄물을 원심분리기의 노즐 5 mm, 펌프 튜브의 내경 사이즈 8 mm, 펌프 100 rpm의 조건으로 조작된 원심분리기에 투입한 후, 원심분리하였다. 그 후, 가장 먼저 원심분리되어 나오는 유자씨 기름을 채취하여 본 발명의 유자씨 기름을 추출하였다 (도 1 참조). 도 1은 본 발명의 유자씨 기름의 제조방법을 나타낸 모식도이다.
[실험예 1: 유자씨 기름의 지방산 성분 및 함량 분석]
본 실험예에서는 상기 실시예 1에서 제조된 유자씨 기름의 지방산 성분 및 함량을 분석하였다.
유자씨 기름은 먼저 식약청 트랜스/포화지방 분석법(식약청 고시 제2010-78호)에 준하여 전처리하였다. 약 25㎎의 유자씨 기름을 유리튜브에 정밀히 취한 후, 메탄올성 수산화나트륨 용액(0.5N) 1.5㎖를 가하고 뚜껑을 덮고 혼합하고 진탕하였다. 그 후, 히팅 블럭(Heating block)에서 100℃로 5분간 가온한 후, 30~40℃로 냉각하였다. 그 후, 14% BF3 용액 2㎖를 가한 후 즉시 뚜껑을 덮고 혼합하였다. 그 후, 100℃에서 30분간 가온한 후 30~40℃로 냉각하였다. 그 후, 이소옥탄 1㎖를 가한 후, 30초간 격렬히 진탕하였다. 그 후, 포화 NaCl용액 5㎖를 가하고 뚜껑을 덮고 30초간 격렬히 진탕하엿다. 진탕 후, 수층으로부터 분리된 이소옥탄층을 무수황산나트륨으로 탈수하여 분석하였다.
분석기기는 가스 크로마토그래피(Gas Chromatography, GC) 및 가스 크로마토그래피 질량분석기(Gas Chromatography Mass Spectrometer, GC-MSD)를 이용하였다 (표준시약: SUPELCO F.A.M.E. Mix C4-c24 18919-1AMP, Cayman Fatty Acid Screening Library 96well CN 10504). GC 분석 조건은 하기와 같았으며, 그 결과하는 하기 표 1 내지 2에 나타내었다.
o Instrument : Agilent 6890N GC / FID
o Split ratio = 100:1
o Column : Supelco SP-2560 100 m x 0.25 mm(I.D) x 0. 2㎛ (Film)
o Oven Temp. : 100℃ (3min)-> 3℃/min-> 240℃ (20min)
o Injection Volume : 1 ㎕
o Flow rate(He) : 0.8 ㎖/min
o Injection Temp. : 225℃
o detection Temp. : 285℃
<GC-MSD 분석 조건>
o Instrument : Agilent 5975C
o Split ratio = 10:1
o Column : Supelco SP-2560 100 m x 0.25 mm(I.D) x 0.2 ㎛ (Film)
o Oven Temp. : 100℃-> 3℃/min-> 240℃ (15min)
o Injection Volume : 0.2 ㎕
o Flow rate(He) : 0.75 ㎖/min
o Injection Temp. : 240℃
o Mass quad Temp : 150℃
o Mass Source Temp : 230℃
o Mass mode : scan mode (range 30-350)
Peak
 RetTime
#		 Width
[min]		 Area
[pA*s]		 Area
%		 NO.
1 26.018 2.61E-03 1.96286 0.21035
2 47.128 0.0781 191.51271 20.52311 1
3 48.9 0.0615 4.81863 0.51638
4 51.574 0.0762 39.52299 4.23541
5 53.208 0.0858 306.21362 32.81482 2
6 53.386 0.0751 37.97734 4.06977
7 55.489 0.0826 333.83051 35.77434 3
8 58.07 0.0755 17.3177 1.85582
Totals : 933.15636 100
No. Peak Name RetTime
#		 Area
%
1 1 palmitic acid methyl ester 47.128 20.52
2 2 oleic acid methyl ester 53.208 32.81
3 3 linoleic acid methyl ester 55.489 35.77
ETC. 10.89
Totals : 100
분석결과, 상기 실시예 1의 유자씨 기름은, 팔미트산 메틸 에스테르(palmitic acid methyl ester), 올레산 메틸 에스테르(oleic acid methyl ester), 리놀레산 메틸 에스테르(linoleic acid methyl ester)를 가장 많이 함유하고 있음을 확인할 수 있었다 (도 2). 도 2는 본 발명의 유자씨 기름의 GC 분석 결과이다.
[실험예 2: 추출방법에 따른 유자씨 기름의 지방산 함량 변화 확인]
본 실험예에서는 본 발명의 제조방법에 따라 수득된 상기 실시예 1의 유자씨 기름과 속슬렛법(soxhlet method)으로 추출된 유자씨 기름의 지방산 함량을 비교하기 위하여 GC 분석을 수행하였다.
시료의 전처리 및 GC/GC-MSD 기기의 분석 조건은 상기 실험예 1과 같았으며 그 결과는 하기 표 3에 나타내었다.
Number Name 속슬렛법으로
추출된 유자씨 기름
Area (%)		 실시예 1의
유자씨 기름
Area (%)		 증감(▲/▽)
1 linoleic acid methyl ester 35.14 35.77 ▲
2 oleic acid methyl ester 33.09 32.81 ▽
3 palmitic acid methyl ester 19.80 20.52 ▲
4 Etc 11.97 10.90 ▽
Total 100 100
실험결과, 본 발명의 제조방법으로 수득된 유자씨 기름은 속슬렛법으로 추출된 유자씨 기름에 비하여 리놀레산 메틸 에스테르 및 팔미트산 메틸 에스테르가 증가함을 확인할 수 있었다. 다만, 올레산 메틸 에스테르가 감소하였다. 그런데, 총합을 비교하였을 때, 본 발명의 유자씨 기름이 기능성분을 더욱 함유하고 있음을 확인할 수 있었다.
상기와 같은 결과는, 본 발명의 유자씨 기름 제조방법을 통해, 유자씨로부터 기능성분을 최대한 파괴시키지 않으면서도, 유자씨 내 기능성 성분의 추출 수율이 증대된 유자씨 기름을 수득할 수 있음을 의미한다.
[실험예 3: 유자씨 기름의 식이에 따른 혈액 내 지질의 생화학적 분석]
본 실험예에서는 상기 실시예 1에서 제조된 유자씨 기름의 식이에 따른 혈액 내 총콜레스테롤(total cholesterol, TC) 함량, 중성지방(triglyceride, TG) 함량, 고밀도 지단백질 콜레스테롤(high density lipoprotein cholesterol, HDL-C) 함량, 저밀도 지단백질 콜레스테롤(low density lipoprotein cholesterol) 함량 및 동맥경화지수(atherogenic index)를 측정하고자 하였다.
10주령의 SD rat(sprague dawley rat)을 이용하여 20±5℃, 습도 55~60%, 12hr light-dark cycle의 조건에서 표준식이와 물을 충분히 공급하여 1주일간 환경적응을 위해 사육하였다. 적응이 완료된 SD rat을 난괴법을 이용하여 하기 표 4와 같이 일반식이군 (normal), 고지방/고콜레스테롤군 (high fat/high cholesterol; HFHC), 고지방/고콜레스테롤/심바스타틴(simvastatin) 정 0.02 g/kg diet 식이군 (high fat/high cholesterol+simvastatin; HFHC+simvastatin), 고지방/고콜레스테롤/유자씨 기름 7, 15% 식이군 (high fat/high cholesterol+citron; HFHC+oil)으로 나누었다. 그 후, 각 군에 일반, 고지방/고콜레스테롤 식이, 고지방/고콜레스테롤+심바스타틴 정 혼합식이, 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 혼합식이를 4주간 투여함으로써 SD rat을 준비하였다.
상기 SD-rat의 꼬리에서 혈액을 채취한 후 3,000rpm에서 15분간 원심분리하여 혈청을 얻은 후, 혈액 내 총콜레스테롤(total cholesterol, TC) 함량, 중성지방(triglyceride, TG) 함량, 고밀도 지단백질 콜레스테롤(high density lipoprotein cholesterol, HDL-C) 함량, 저밀도 지단백질 콜레스테롤(low density lipoprotein cholesterol, LDL-C) 함량을 측정하였다. 또한, 측정된 값을 이용하여 동맥경화지수(atherogenic index)를 측정하였다.
혈장 내 총콜레스테롤 측정은 아산세트 총콜레스테롤 측정용시액 (AM 202-K, ASAN, Korea)을 이용하여 측정하였다. 효소시약을 완충용액에 희석시킨 후 혈청과 표준액 (콜레스테롤 300 mg/dL) 각각 0.02 ㎖에 효소시액 3 ㎖를 넣고 잘 혼합하여 37℃에서 5분간 반응시킨 뒤 스펙트러포토미터(spectrophotometer)를 이용하여 500 nm에서 흡광도를 측정한 후, 하기 수학식 1을 이용하여 계산하였다.
또한, 혈장 내 중성지방 측정은 아산세트 총콜레스테롤 측정용시액 (AM 157S-K, ASAN, Korea)을 이용하여 측정하였다. 효소시약을 완충용액에 희석시킨 후 혈청과 표준액 (트리글리세라이드 300 mg/dL) 각각 0.02 ㎖에 효소시액 3 ㎖를 넣고 잘 혼합하여 37℃에서 10분간 반응시킨 뒤 스펙트러포토미터(spectrophotometer)를 이용하여 550 nm에서 흡광도를 측정한 후, 하기 수학식 2를 이용하여 계산하였다.
또한, 혈장 내 HDL-콜레스테롤 측정은 아산세트 HDL-Cholestase (AM 203, ASAN, Korea)를 이용하여 측정하였다. 혈청 0.2 ㎖에 분리시약 0.2 ㎖를 넣고 잘 혼합하여 10분간 실온에서 방치 후, 3000 rpm에서 10분간 원심분리하여 상층액을 사용하였다. 그 후, 효소시약을 완충용액에 희석시킨 후 혈청과 표준액 (콜레스테롤 50 mg/dL) 각각 0.1 ㎖에 효소시액 3 ㎖를 넣고 잘 혼합하여 37℃에서 5분간 반응시킨 뒤 스펙트러포토미터(spectrophotometer)를 이용하여 500 nm에서 흡광도를 측정한 후, 하기 수학식 3을 이용하여 계산하였다.
또한, 혈장 내 LDL-콜레스테롤 함량은 Friedewald(1979)에 따라 하기 수학식 4를 이용하여 계산하였다.
또한, 동맥경화에 대한 위험성 척도를 알려주는 동맥경화지수(Atherogenic index)는 하기 수학식 5를 이용하여 계산하였다.
Normal HFHC HFHC
+
Simvastatin		 HFHC
+
oil 7%		 HFHC
+
oil 15%
Casein 200 200 200 200 200
Corn Starch 223 223 223 223 223
Sucrose 250 250 250 250 250
Cellulose 50 50 50 50 50
citron seed oil - - - 70 150
Soybean Oil 70 150 150 80 -
Lard - 70 70 70 70
Mineral Mix 35 48 48 48 48
Vitamin Min 10 21 21 21 21
Cholesterol - 12.5 12.5 12.5 12.5
Cholic acid - 5 5 5 5
Drug - - 0.02 - -
Figure 112014072996170-pat00001
Figure 112014072996170-pat00002
Figure 112014072996170-pat00003
Figure 112014072996170-pat00004
Figure 112014072996170-pat00005
실험결과, 총콜레스테롤량 측정 결과, 유자씨 기름의 식이군은 고지방/고콜레스테롤 군에 비하여 총콜레스테롤량이 감소하였음을 확인할 수 있었다 (도 3).
중성지방량 측정 결과, 유자씨 기름 식이군 고지방/고콜레스테롤 군에 비하여 중성지방량이 감소하였음을 확인할 수 있었다. 특히, 유자씨 기름 7, 15% 식이 모든 군이 심바스타틴 정 식이군보다 우수한 중성지방량 감소 효과를 나타내었다 (도 4).
HDL-콜레스테롤량 측정 결과, 유자씨 기름 식이군은 고지방/고콜레스테롤 군에 비하여 HDL-콜레스테롤량이 증가하였음을 확인할 수 있었다 (도 5).
LDL-콜레스테롤량 측정 결과, 유자씨 기름 식이군은 고지방/고콜레스테롤 군에 비하여 LDL-콜레스테롤량이 감소하였음을 확인할 수 있었다 (도 6).
동맥경화지수 측정 결과, 유자씨 기름 식이군은 고지방/고콜레스테롤 군에 비하여 현저하게 낮은 수치를 나타냄을 확인할 수 있었다 (도 7).
도 3은 고지방식이와 본 발명의 유자씨 기름을 공급한 SD-rat의 혈중 총콜레스테롤의 변화량을 확인한 결과 그래프이다. 'normal'은 일반식이군, 'HFHC'는 고지방/고콜레스테롤군, 'HFHC+Simvastatin'은 고지방/고콜레스테롤+심바스타틴 정 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 7%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 7% 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 15%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 15% 투여군을 의미한다.
도 4는 고지방식이와 본 발명의 유자씨 기름을 공급한 SD-rat의 혈중 중성지방의 변화량을 확인한 결과 그래프이다. 'normal'은 일반식이군, 'HFHC'는 고지방/고콜레스테롤군, 'HFHC+Simvastatin'은 고지방/고콜레스테롤+심바스타틴 정 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 7%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 7% 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 15%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 15% 투여군을 의미한다.
도 5는 고지방식이와 본 발명의 유자씨 기름을 공급한 SD-rat의 혈중 HDL-콜레스테롤의 변화량을 확인한 결과 그래프이다. 'normal'은 일반식이군, 'HFHC'는 고지방/고콜레스테롤군, 'HFHC+Simvastatin'은 고지방/고콜레스테롤+심바스타틴 정 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 7%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 7% 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 15%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 15% 투여군을 의미한다.
도 6은 고지방식이와 본 발명의 유자씨 기름을 공급한 SD-rat의 혈중 LDL-콜레스테롤의 변화량을 확인한 결과 그래프이다. 'normal'은 일반식이군, 'HFHC'는 고지방/고콜레스테롤군, 'HFHC+Simvastatin'은 고지방/고콜레스테롤+심바스타틴 정 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 7%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 7% 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 15%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 15% 투여군을 의미한다.
도 7은 고지방식이와 본 발명의 유자씨 기름을 공급한 SD-rat의 항아테로제닉 지수 변화량을 확인한 결과 그래프이다. 'normal'은 일반식이군, 'HFHC'는 고지방/고콜레스테롤군, 'HFHC+Simvastatin'은 고지방/고콜레스테롤+심바스타틴 정 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 7%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 7% 투여군, 'HFHC+유자씨 기름 15%'는 고지방/고콜레스테롤+유자씨 기름 15% 투여군을 의미한다.
[실험예 4: 유자씨 기름의 항동맥경화 효능 확인]
본 실험예에서는 상기 실시예 1에서 제조된 유자씨 기름의 항동맥경화 효능을 확인하고자 산화 질소 분비량을 확인하였다.
강원대학교 혈관연구센터에서 분양받은 인간 제대혈 유래 혈관 내피세포 (Human umbilical vein endothelial cell, HUVEC)는 DMEM (dulbecco's modified eaglemedium)에 10% 우태아 혈청 (fetal bovine serum) 과 1% 항생제 (Penicillin and streptomycin)를 첨가하여 37℃, 5% CO2 인큐베이터에 적응시킨 후 배양하였다. 충분한 세포를 얻기 위하여 T75 플라스크에서 세포를 배양하였고, T75 플라스크 바닥에 60%가량 세포가 배양되면 트립신-EDTA(trypsin-EDTA; ethylene diamine tetraacetic acid) 용액(1x)을 사용하여 부착된 세포를 떼어 낸 후 계대배양을 실시하였다.
유자씨 기름(citron seed oil; CSO)의 NO 분비량은 그리스 시약(Griess Reagent)를 이용하여 Zhang 등의 방법(Zhang X, Scicli GA, Xu X, Nasjletti A, Hintze TH. Role of endothelial kinins in control of coronary nitric oxide production. Hypertension 1997; 30(5): 1105-1111)에 따라 확인하였다. 상기 배양된 HUVEC를 96-웰 티슈 배양 배지(96-well tissue culture plate)에 1 cells/well로 100 L씩 분주하고 24시간 동안 배양한 후 FBS가 첨가되지 않은 배지에 농도별로 제조한 CSO (0.01, 0.05, 0.1 ㎎/㎖)와 종양 괴사 인자 알파(tumor necrosis factor alpha; TNF-α) (100 ng/㎖)를 세포에 처리한 후 24시간 동안 37℃에서 배양 하였다. 24시간 후, 배양중인 배지 100 L에 동량의 그리스(Griess) 시약을 넣어 10분간 반응시킨 후 ELISA 마이크로플레이트 리더 (ELISA microplate reader, EL808; BioTek, Winooski, USA)를 이용하여 540nm에서 흡광도를 측정하였다.
실험결과, 유자씨 기름의 투여량이 증가할 수록 NO 생성량이 증가함을 확인할 수 있었다 (도 8).
한편, 내피세포에서 분비되는 endothelial nitric oxide (eNOS)는 TNF-α를 처리하였을 때 감소된다고 알려져있다 (참고문헌 Downregulates Endothelial Nitric Oxide Synthase mRNA Stability via Translation Elongation Factor 1-alpha 1. Circ Res. 2008 September 12; 103(6): 591597, Nitric Oxide Synthase Activation by Tumor Necrosis Factor Through Neutral Sphingomyelinase 2, Sphingosine Kinase 1, and Sphingosine 1 Phosphate Receptors A Novel Pathway Relevant to the Pathophysiology of Endothelium. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2006;26:99-105), 즉, TNF-α 투여하면 NO량이 감소하게 된다. NO는 대표적인 혈관 이완인자로서 항아테로제닉(anti-atherogenic) 효과를 유도하는 것으로 알려져 있다.
상기와 같은 결과로부터, 본 발명의 유자씨 기름은 항동맥경화능이 우수함을 알 수 있었다.
도 8은 HUVEC 세포를 이용하여 NO 분비량을 측정한 결과이다. 'Control'은 HUVEC군, 'TNF-α'는 HUVEC에 TNF-α를 처리한 군, 'TNF-α+CSO'는 HUVEC에 유자씨 기름을 처리한 군을 의미한다.

Claims (6)

  1. 유자씨를 조분쇄한 후, 비스코자임(viscozyme) 및 펙티넥스(pectinex)를 첨가하여 35~45℃에서 10~20시간 동안 효소처리하는 단계 (A);
    상기 효소처리 후, 30~37℃에서 1차 습식분쇄하고, 37~45℃에서 2차 습식분쇄하는 단계 (B); 및
    상기 습식분쇄 후, 원심분리하여 상등액을 수득하는 단계 (C);를 포함하고,
    상기 비스코자임(viscozyme)은 아스퍼질러스 아큘레아투스(Aspergillus aculeatus) 유래 아라바나아제(Arabanase), 셀룰라아제(Cellulase), 베타-글루카나아제(Beta-glucanase), 헤미셀룰라아제(Hemicellulase) 및 자일라나아제(Xylanase)를 포함하는 복합 효소이며,
    상기 펙티넥스(pectinex)는 펙티나아제(pectinase) 및 헤미셀룰라아제(hemicellulase)의 활성을 가지는 효소인 것을 특징으로 하는 항동맥경화능이 증진된 유자씨 기름의 제조방법.
  2. 제1항에 있어서,
    유자씨 조분쇄물, 비스코자임 및 펙티넥스의 혼합물 전체에 대하여, 80~120 FBG/g의 비스코자임(viscozyme) 0.05~0.15 중량% 및 25,500~26,500 PG/㎖의 펙티넥스(pectinex) 0.05~0.15 중량%를 첨가하는 것을 특징으로 하는 항동맥경화능이 증진된 유자씨 기름의 제조방법.
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 유자씨 조분쇄물에 비스코자임(viscozyme) 및 펙티넥스(pectinex)를 첨가하여 35~45℃에서 10~20시간 동안 효소처리한 후, 30~37℃에서 1차 습식분쇄하고, 37~45℃에서 2차 습식분쇄하고, 원심분리하여 상등액을 수득함으로써 얻어진 유자씨 기름을 함유하며,
    상기 비스코자임(viscozyme)은 아스퍼질러스 아큘레아투스(Aspergillus aculeatus) 유래 아라바나아제(Arabanase), 셀룰라아제(Cellulase), 베타-글루카나아제(Beta-glucanase), 헤미셀룰라아제(Hemicellulase) 및 자일라나아제(Xylanase)를 포함하는 복합 효소이며,
    상기 펙티넥스(pectinex)는 펙티나아제(pectinase) 및 헤미셀룰라아제(hemicellulase)의 활성을 가지는 효소인 것을 특징으로 하는 항동맥경화용 식품 조성물.
  6. 삭제
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Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101663898B1 (ko) * 2015-04-24 2016-10-07 고려대학교 산학협력단 효소를 이용한 유자 정유 추출방법
KR101682497B1 (ko) * 2015-07-28 2016-12-05 주식회사 한빛향료 지방함량이 적은 종자의 오일 추출방법
KR20200011657A (ko) 2018-07-25 2020-02-04 농업회사법인 주노서바이오텍 주식회사 천연 치자꽃 또는 감초 추출물을 이용한 유자씨 오일의 효율적 냄새 제거 방법
KR102146717B1 (ko) * 2019-12-18 2020-08-21 장도현 프레스 공법을 이용한 석류 오일 제조방법
KR20220103495A (ko) 2021-01-15 2022-07-22 농업회사법인 주노서바이오텍 주식회사 수득율이 향상된 유자 에센셜오일의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 손 소독제 조성물

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005503816A (ja) 2001-10-04 2005-02-10 バイオヴェロップ インターナショナル ベー．ヴェー． 油料種子プレスケーキおよびミールの分別方法
KR100854403B1 (ko) 2007-05-08 2008-08-26 한국식품연구원 유자씨 추출물을 포함하는 비만억제 식품
JP5124810B2 (ja) 2006-10-10 2013-01-23 独立行政法人産業技術総合研究所 エンドセリン−１産生抑制剤
KR101252578B1 (ko) 2011-02-25 2013-04-09 홍천군 원심분리를 이용한 잣 기름의 제조방법

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005503816A (ja) 2001-10-04 2005-02-10 バイオヴェロップ インターナショナル ベー．ヴェー． 油料種子プレスケーキおよびミールの分別方法
JP5124810B2 (ja) 2006-10-10 2013-01-23 独立行政法人産業技術総合研究所 エンドセリン−１産生抑制剤
KR100854403B1 (ko) 2007-05-08 2008-08-26 한국식품연구원 유자씨 추출물을 포함하는 비만억제 식품
KR101252578B1 (ko) 2011-02-25 2013-04-09 홍천군 원심분리를 이용한 잣 기름의 제조방법

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101663898B1 (ko) * 2015-04-24 2016-10-07 고려대학교 산학협력단 효소를 이용한 유자 정유 추출방법
KR101682497B1 (ko) * 2015-07-28 2016-12-05 주식회사 한빛향료 지방함량이 적은 종자의 오일 추출방법
KR20200011657A (ko) 2018-07-25 2020-02-04 농업회사법인 주노서바이오텍 주식회사 천연 치자꽃 또는 감초 추출물을 이용한 유자씨 오일의 효율적 냄새 제거 방법
KR102146717B1 (ko) * 2019-12-18 2020-08-21 장도현 프레스 공법을 이용한 석류 오일 제조방법
KR20220103495A (ko) 2021-01-15 2022-07-22 농업회사법인 주노서바이오텍 주식회사 수득율이 향상된 유자 에센셜오일의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 손 소독제 조성물

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