KR101425727B1 - 맥아 효소액을 이용한 생약 추출물의 제조방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 맥아 효소액을 이용한 생약 추출물 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 더 자세하게는 맥아 효소액 및 생약을 반응시키는 단계; 및 상기 반응된 맥아 효소액 및 생약을 추출하는 단계로 제조된 식욕 증진 및 면역 증진 효과를 갖는 생약 추출물의 제조방법에 관한 것이다. 이에 따른, 맥아 효소액을 이용한 생약 추출방법은 생약의 탄수화물 및 단백질 성분을 가수분해하여 저분자화함으로써 생체흡수율을 높이는 효과가 있다.
Description
본 발명은 맥아 효소액을 이용한 생약 추출물의 제조방법에 관한 것으로, 더 자세하게는 맥아 효소액 및 생약을 반응시키는 단계; 및 상기 반응된 맥아 효소액 및 생약을 추출하는 단계로 제조된 식욕 증진 및 면역 증진 효과를 갖는 생약 추출물의 제조방법에 관한 것이다.
최근 들어 사스(SARS), 조류독감(AI), 신종플루 등 신규 유행성 질환의 빈번한 발생은 전 세계적으로 심각한 경제적 손실과 국민 건강의 위해 요인이 되고 있다. 특히, 인플루엔자의 경우 세계적으로 매년 약 10억의 인구가 감염되고 30~50만 명이 이로 인해 사망한다고 추정되고 있다. 계절 독감과 신종플루 등 바이러스 질환의 경우 백신접종과 타미플루 같은 항바이러스제의 복용이 최선의 예방과 치료방법으로 알려져 있으나, 일부 신경성 부작용 문제, 수급의 어려움 및 오남용으로 인한 내성바이러스의 출현 등이 문제시되며 또한 항바이러스에 내성을 가진 신종 인플루엔자의 발견 등으로 예방과 치료에 한계를 나타내고 있는 실정이다.
또한, 산업화와 환경의 변화로 인하여 다양한 원인에 의한 면역력 저하로 인해 각종 질병에 노출되어 있으며, 이러한 질병 치료를 위해 막대한 비용을 소모하고 있다. 특히, 최근 오염된 공기 및 식생활 변화, 즉 인스턴트 식품, 탄산음료 등의 과잉섭취 등으로 인해 면역체계에 이상이 발생하여 알러지성 질환들이 지속적으로 증가되고 있는 추세이다.
이에, 알러지성 질환을 포함하는 면역질환을 예방 및 치료하기 위해, 여러 가지 약제가 개발되고 있으나, 대부분의 약제들이 화학약품들로 부작용이 있으며, 지속적인 치료효과를 내지 못하는 한계가 있다.
따라서, 외부 세균이나 바이러스로부터 신체를 보호할 수 있는 면역력 증진 건강식품에 대한 소비자의 관심이 높아지고 있다. 이에, 마늘, 인삼 등 면역력 증진 및 개선 효과가 있는 건강기능식품 시장이 높은 성장세를 나타내고 있으나, 면역력 증진 효능과 관련하여 동물모델이나 임상연구를 통한 과학적인 효능 입증이나 신규 면역증진 건강기능 소재의 발굴 및 상품화 등 관련연구는 아직 부족한 실정이다.
한편, 노화, 만성 질환 환자 및 급성 상태나 질병을 앓는 환자는 질병의 상태나 치료에 기인한 식욕부진이 발생하는데, 식욕부진은 체중 유지 곤란, 특히 몸무게 감소로 특징지어지는 영양 및 대사 감퇴를 수반하게 된다. 이에, 많은 식욕 부진을 겪는 사람들이 식사장애 또는 영양장애를 앓게 된다. 예를 들어, 암 화학요법을 받는 환자, AIDS 등에 기인한 면역타협환자, 또는 기관 이식 등에 기인한 면역억제 환자 등이 공통적으로 식욕 감퇴를 경험하며, 수술 후의 환자도 식욕 감퇴를 경험할 수 있다.
신경성 무식욕증(또는 신경성 식욕결핍, 거식)은 척루(emaciation)에 대한 특징적 열망 및 비정상적인 식사 거동 등의 정신병성 증상뿐 아니라 표준 체중의 20% 이상의 체중 감량 및 무월경(여성의 경우) 등의 신체 증상을 보이는 질병으로, 이는 종종 젊은 여성에게 발생하며 심각하고 때로는 치명적인 질병이다.
따라서, 식욕이 부진하거나 소화력이 약화된 경우 흔히 다양한 식욕촉진과 소화촉진을 위한 제제들이 사용되고 있다. 대표적으로는 소화효소를 다량함유한 발효제제가 보급되고 있으며, 그 중심재료는 아밀라제, 펩티다제 등과 같은 소화효소를 다량함유한 효모를 배양하여 건조 후 타블렛화 한 것이다. 이외에, 각종 비타민과 미네랄을 다양하게 배합하여 조성한 비타민제제, 각종 소화효소제제 또는 가장 직접적으로는 식욕중추를 자극하는 제제가 사용되고 있다. 그러나, 이와 같은 약제들은 투여에 따라 직접적인 효과를 이루기는 하지만, 단순히 소화 혹은 식욕의 자극만으로 다른 장기의 활성화가 이루어지지 않은 채 식욕이 당기는 대로 섭취하게 하는 것은 오히려 질병을 악화시키는 문제점을 야기하고 있다.
상기와 같은 배경 하에, 본 발명자들은 효과적인 식욕 증진 또는 면역 증진 활성을 갖는 천연물을 연구하던 중, 맥아 효소액과 생약을 반응시켜 추출한 맥아 효소액 생약 추출물을 식욕억제 또는 면역억제 동물모델에 투여한 결과 장기 독성을 완화시킴과 동시에 식욕 증진 또는 면역 증진 효과를 나타내는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 맥아 효소액을 이용하여 생체흡수율이 개선된 식욕 증진 또는 면역 증진 효과를 갖는 생약 추출물의 제조방법을 제공하는 것이다.
상기의 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 맥아 효소액 및 생약을 반응시키는 단계(단계 1); 및 상기 반응된 맥아 효소액 및 생약을 추출하는 단계(단계 2)를 포함하는 생약 추출물의 제조방법을 제공한다.
상기 단계 1은, 상기 생약의 탄수화물 및 단백질 성분을 가수분해함으로써 저분자화하기 위하여, 맥아 효소액과 생약을 반응시키는 단계이다. 상기 맥아 효소액과 생약의 혼합비율은 50-99.9 중량%:0.1-50 중량%인 것이 바람직하다. 만약, 생약의 혼합비율이 50 중량%를 초과하는 경우, 혼합이 용이하지 않는 문제점이 발생할 수 있다. 상기 혼합은 30℃ 내지 70℃의 온도범위를 유지하면서 1시간 내지 12시간 동안 교반하여 혼합하는 것이 바람직하다.
본 발명에서 사용하는 용어 "맥아 효소액"은, 대맥이라 불리는 겉보리의 싹을 띄어 말린 맥아로부터 효소를 추출한 액체를 의미한다. 본 발명의 맥아 효소액은 맥아를 물에 0.1 중량% 내지 99 중량%로 첨가한 후 0.5시간 내지 24시간 혼합한 후 여과하여 제조되는 것이 바람직하다. 이때, 반응온도는 20℃ 내지 50℃가 바람직하고, 보다 바람직하게는 20℃ 내지 40℃가 바람직하다. 만약, 50℃보다 높은 온도범위에서 반응을 진행할 경우, 맥아 효소액의 효소활성이 현저히 감소하는 문제가 발생할 수 있으며, 20℃보다 낮은 온도범위에서는 맥아 효소액의 추출 수율이 떨어지는 문제가 발생할 수 있다. 이와 같은 문제점을 고려할 때, 반응온도는 실온(약 24℃)이 가장 바람직하다.
상기 단계 2는, 상기 혼합된 맥아 효소액 및 생약을 추출하여 생약 추출물을 수득하기 위한 단계이다. 상기 생약은 산두근 또는 진피인 것이 바람직하다. 상기 산두근은 Menispermum dauricum DC의 학명을 가지며, 북두근이라는 일반명을 가지는 것일 수 있다.
본 발명에서 사용하는 용어 "추출물"은, 혼합된 맥아 효소액 및 생약으로부터 액체의 용매를 사용하여 추출된 특정 성분을 의미한다. 상기 용매로는 물, C1 -4 알코올 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있다. 유효성분을 효율적으로 추출하기 위하여 에탄올로 추출하는 것이 바람직하다. 에탄올의 농도는 10% 내지 95%가 바람직하나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 추출은 1시간 내지 24시간 동안 수행할 수 있으며, 바람직하게는 1시간 내지 5시간 동안 수행한다. 또한, 상기 추출은 환류 냉각 추출, 냉침 추출, 열수 추출 및 초음파 추출로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 방법을 사용할 수 있으며, 유효성분을 효율적으로 추출하기 위하여 환류 냉각 추출법을 이용하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 추출물은 필요에 따라 20℃ 내지 100℃의 온도범위에서 감압농축 또는 감압 건조함으로써, 액상 또는 분말 형태로 수득할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 맥아 효소액을 이용한 생약 추출방법은 생약의 탄수화물 및 단백질 성분을 가수분해하여 저분자화함으로써 생체흡수율을 높이는 효과가 있다.
도 1은, 본 발명의 일 실시예에 따른 cisplatin으로 유도된 급성 식욕부진 동물모델에서의 맥아 효소액 산두근 추출물 및 산두근 추출물의 식욕촉진 효능 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는, 본 발명의 일 실시예에 따른 cisplatin으로 유도된 급성 식욕부진 동물모델에서의 진피 추출물, 맥아 효소액 진피 추출물 및 megestrol acetate(대조약물)의 식욕촉진 효능 비교 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는, 본 발명의 일 실시예에 따른 cisplatin으로 유도된 급성 식욕부진 동물모델에서의 진피 추출물, 맥아 효소액 진피 추출물 및 megestrol acetate(대조약물)의 식욕촉진 효능 비교 결과를 나타낸 그래프이다.
이하, 하기 제조예 및 실시예에 의하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 단, 하기 제조예 및 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 본 발명의 범위가 이들만으로 한정되는 것은 아니다.
실시예
1: 맥아
효소액을
이용한
산두근
추출물의 제조
물 1 ℓ에 맥아 100 g을 넣고 1시간 동안 실온(약 24℃)에서 교반기를 이용하여 맥아 효소를 추출해낸 후, 여과하여 맥아 효소액을 수득하였다. 수득한 맥아 효소액 1 ℓ에 산두근 100 g을 분쇄하여 넣고 4시간 동안 50℃를 유지하면서 교반기를 이용하여 산두근을 맥아 효소액과 반응시켰다. 그 후, 상기 맥아 효소액 및 산두근 혼합물에 에탄올 3 ℓ를 첨가하여 75%의 에탄올을 만든 후 79℃에서 3시간 환류 냉각 추출 후 여과하여 여액을 수득하였다. 수득한 여액을 감압 농축한 후 동결건조하여 약 22 g의 산두근 추출물을 수득하였다.
실시예
2: 맥아
효소액을
이용한 진피 추출물의 제조
물 1 ℓ에 맥아 100 g을 넣고 1시간 동안 실온(약 24℃)에서 교반기를 이용하여 맥아 효소를 추출해낸 후, 여과하여 맥아 효소액을 수득하였다. 수득한 맥아 효소액 1 ℓ에 진피 100 g을 분쇄하여 넣고 4시간 동안 50℃를 유지하면서 교반기를 이용하여 진피를 맥아 효소액과 반응시켰다. 그 후, 상기 맥아 효소액 및 진피 혼합물에 에탄올 3 ℓ를 첨가하여 75%의 에탄올을 만든 후 79℃에서 3시간 환류 냉각 추출 후 여과하여 여액을 수득하였다. 수득한 여액을 감압 농축한 후 동결건조하여 약 30 g의 진피 추출물을 수득하였다.
비교예
1:
산두근
추출물의 제조
산두근 100 g을 분쇄하여 75% 에탄올 1 ℓ에 침지한 후 79℃에서 3시간 동안 환류 냉각 추출한 후 여과하여 여액을 수득하였다. 수득한 여액을 감압 농축한 후 동결건조하여 약 20 g의 산두근 추출물을 수득하였다.
비교예
2: 진피 추출물의 제조
진피 100 g을 분쇄하여 75% 에탄올 1 ℓ에 침지한 후 79℃에서 3시간 동안 환류 냉각 추출한 후 여과하여 여액을 수득하였다. 수득한 여액을 감압 농축한 후 동결건조하여 약 20 g의 진피 추출물을 수득하였다.
실험예
1: 식욕 증진 효과 분석
상기 실시예 1, 2 및 비교예 1, 2의 생약 추출물의 식욕 부진 개선 효과 확인에 앞서 비교약물인 megestrol의 식욕촉진 최고 약효 농도를 산정한 후 대조구로 사용하였다.
급성 식욕저하 동물모델은 7주령의 수컷 랫트를 구입하여 1주일 간 순화기간을 거친 후 사용하였다(8주령 수컷 랫트, 250 g 내지 270 g). 각 그룹당 7마리씩 총 8그룹(정상군, cisplatin 단독 투여군, mesgentral 투여군 6)으로 분리하였고, 물을 자유로이 섭취할 수 있는 상태에서 24시간 동안 절식하였다. 세 군은 절식 18시간 후와 절식 23.5시간 후에 두 차례(bid:하루에 두번) megestrol acetate를 0.5% methylcellulose(MC)에 희석하여 랫트에 각각 25 mg/kg, 35 mg/kg 및 45 mg/kg의 용량으로 현탁하여 경구투여하였고, 또 다른 세 군은 절식 23.5시간 후에 한 차례(qd: 하루에 한번) megestrol acetate를 0.5% methylcellulose(MC)에 희석하여 랫트에 각각 50 mg/kg, 70 mg/kg 및 90 mg/kg의 용량으로 현탁하여 경구투여하였다. 절식 24시간 경과 후에 cisplatin을 랫트 몸무게 kg 당 2 mg 씩 주사용수 5 ㎖에 녹여 랫트의 복강 내 주사하였다. cisplatin 투여 직후, 한 케이지에 랫트 한 마리씩 넣고 물은 자유로이 섭취할 수 있는 상태에서 먹이를 약 50 g씩 공급해주고 기록하였다. 24시간 경과 후, 남은 먹이량을 측정하여 랫트의 먹이 섭취량을 계산하여, 각 그룹과의 먹이 섭취량 차이를 비교하였다. 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.
| 구분 | 투여량 | 먹이 섭취량(g/24hr)(mean SD) | 먹이 섭취 증가율(%) |
| 정상군 | - | 25.1±3.09 | 100% |
| cisplatin 단독 투여군 | 2 mg/kg cisplatin only | 15.3±2.69 | 0% |
| megestrol 투여군 1 | 25 mg/kg(bid) megestrol acetate+2 mg/kg cisplatin | 18.2±2.10 | 29.3% |
| megestrol 투여군 2 | 35 mg/kg(bid) megestrol acetate+2 mg/kg cisplatin | 19.7±2.40 | 44.4% |
| megestrol 투여군 3 | 45 mg/kg(bid) megestrol acetate+2 mg/kg cisplatin | 19.8±2.49 | 45.7% |
| megestrol 투여군 4 | 50 mg/kg(qd) megestrol acetate+2 mg/kg cisplatin | 19.5±2.92 | 43.0% |
| megestrol 투여군 5 | 70 mg/kg(qd) megestrol acetate+2 mg/kg cisplatin | 20.6±2.91 | 53.6% |
| megestrol 투여군 6 | 70 mg/kg(qd) megestrol acetate+2 mg/kg cisplatin | 18.4±1.46 | 31.8% |
상기 표 1에 나타난 바와 같이, 가장 효과가 좋은 하루에 한번 megestrol acetate 70 mg/kg을 경구투여하여 생약 추출물들과의 비교시험에 사용하였다.
1) 산두근 추출물의 식욕 증진 효과
추출방법에 따른 식욕 증진 효과를 확인하기 위하여, 상기 실시예 1에서 제조한 맥아 효소액을 이용한 산두근 추출물과 상기 비교예 1에서 제조한 산두근 추출물을 cisplatin으로 유도된 급성 식욕 저하 동물모델에 사용하여 비교실험 하였다.
급성 식욕저하 동물은 7주령의 수컷 랫트를 구입하여 1주일 간 순화기간을 거친 250 g 내지 270 g의 8주령의 수컷 랫트를 사용하였다. 각 그룹당 7마리씩 4그룹(정상군, cisplatin 단독 투여군, 맥아 효소액 산두근 추출물 투여군, 산두근 추출물 투여군)으로 나누었다. 각 그룹은 물을 자유로이 섭취할 수 있는 상태에서 24시간 동안 절식시키고, 생약 추출물 투여군은 절식 19시간 후와 절식 23.5시간 후에 각각의 추출물을 0.5% methylcellulose(MC)에 희석하여 두 차례(bid: 하루에 두번) 100 mg/kg 비교예 1의 산두근 추출물과 100 mg/kg 실시예 1의 맥아 효소액 산두근 추출물을 각각 랫트에 경구투여하였다. 절식 24시간 경과 후에 cisplatin을 랫트 몸무게 kg 당 2 mg씩 주사용수 5 ㎖에 녹여 랫트의 복강내 주사하였다. cisplatin 투여 직후, 한 케이지에 랫트 한 마리씩 넣고 물은 자유로이 섭취할 수 있는 상태에서 먹이를 약 50 g씩 공급하고 기록하였다. 24시간 경과 후, 남은 먹이량을 측정하여 랫트의 먹이 섭취량을 계산하여, cisplatin만 단독으로 투여한 군과 각 추출물을 투여한 군의 먹이 섭취량을 비교하였다. 그 결과를 하기 표 2 및 도 1에 나타내었다.
| 구분 | 약물 투여량 | 먹이 섭취량(g/24hr)(mean SD) | 먹이 섭취 증가율(%) |
| 정상군 | -(비투여) | 28.3±2.6 | 100% |
| cisplatin 단독 투여군 | 2 mg/kg cisplatin only | 7.7±2.6 Ŧ | 0% |
| 비교예 1 투여군 | 100 mg/kg(bid) 비교예 1 추출물+2 mg/kg cisplatin | 14.6±2.2 * | 33.4% |
| 실시예 1 투여군 | 100 mg/kg(bid) 실시예 1 추출물+2 mg/kg cisplatin | 16.3±3.1 * | 41.7% |
| Ŧvs 정상군(p<0.05) * vs cisplatin 단독 투여군(p<0.05) |
|||
상기의 표 2 및 도 1에 나타난 바와 같이, 맥아 효소액을 이용하여 추출한 실시예 1의 산두근 추출물이 식욕 증진 효능이 향상되는 것을 확인하였다.
2) 진피 추출물의 식욕 증진 효과
추출방법에 따른 식욕 증진 효과를 확인하기 위하여, 상기 실시예 2에서 제조한 맥아 효소액을 이용한 진피 추출물과 상기 비교예 2에서 제조한 진피 추출물을 cisplatin으로 유도된 급성 식욕 저하 동물모델에 사용하여 비교실험하였다.
급성 식욕저하 동물은 7주령의 수컷 랫트를 구입하여 1주일 간 순화기간을 거친 후 250 g 내지 270 g의 8주령의 수컷 랫트를 사용하였다. 각 그룹당 7마리씩 5그룹(정상군, cisplatin 단독 투여군, megestrol acetate 투여군, 맥아 효소액 진피 추출물 투여군, 진피 추출물 투여군)으로 나누었다. 각 그룹은 물을 자유로이 섭취할 수 있는 상태에서 24시간 동안 절식시키고, 생약 추출물 투여군은 절식 19시간 후와 절식 23.5시간 후에 각각의 추출물을 0.5% methylcellulose(MC)에 희석하여 두 차례(bid: 하루에 두번) 600 mg/kg 비교예 2의 진피 추출물과 600 mg/kg 실시예 2의 맥아 효소액 진피 추출물을 각각 랫트에 경구투여하였다. megestrol acetate 투여군은 앞서 측정한 것에 따라, 절식 23.5시간 후에만 한차례(qd: 하루에 한번) 0.5 % methylcellulose(MC)에 희석하여 70 mg/kg 용량으로 경구투여하였다. 절식 24시간 경과 후에 cisplatin을 랫트 몸무게 kg 당 2 mg씩 주사용수 5 ㎖에 녹여 랫트의 복강내 주사하였다. cisplatin 투여 직후, 한 케이지에 랫트 한 마리씩 넣고 물은 자유로이 섭취할 수 있는 상태에서 먹이를 약 50 g씩 공급하고 기록하였다. 24시간 경과 후, 남은 먹이량을 측정하여 랫트의 먹이 섭취량을 계산하여, cisplatin만 단독으로 투여한 군과 각 추출물을 투여한 군의 먹이 섭취량을 비교하였다. 그 결과를 하기 표 3 및 도 2에 나타내었다.
| 구분 | 약물 투여량 | 먹이 섭취량(g/24hr)(mean SD) | 먹이 섭취 증가율(%) |
| 정상군 | -(비투여) | 28.3±2.5 | 100% |
| cisplatin 단독 투여군 | 2 mg/kg cisplatin only | 13.1±2.7 Ŧ | 0% |
| megestrol acetate 투여군 | 70 mg/kg(qd) megestrol acetate+2 mg/kg cisplatin | 18.7±2.6 * | 35.5% |
| 비교예 2 투여군 | 600 mg/kg(bid) 비교예 2 추출물+2 mg/kg cisplatin | 15.3±3.2 | 14.7% |
| 실시예 2 투여군 | 600 mg/kg(bid) 실시예 2 추출물+2 mg/kg cisplatin | 20.0±2.7 * | 46.3% |
| Ŧvs 정상군(p<0.05) * vs cisplatin 단독 투여군(p<0.05) |
|||
상기 표 3 및 도 2에 나타난 바와 같이, cisplatin 단독 투여군에서는 정상군에 비해 유의한 먹이 섭취량 감소를 보였으며, 600 mg/kg의 비교예 2의 진피 추출물을 투여한 군은 14.7%의 식욕촉진 효과를 보였다. 반면, 600 mg/kg의 실시예 2의 맥아 효소액 진피 추출물을 투여한 군은 46.3%로 31.6%의 식욕촉진 향상 효과를 확인할 수 있었다. 또한, 현재 식욕촉진제로 시판중인 대조 약물인 megestrol acetate와 동등이상의 식욕촉진 효과를 나타내는 것을 확인하였다.
실험예
2: 내분비계 부작용 완화 효과 분석
본 발명의 맥아 효소액을 이용한 생약 추출법의 내분비계 부작용 완화 효과를 확인하기 위하여, 상기 실시예 1에서 제조한 맥아 효소액 산두근 추출물을 이용하여 cisplatin으로 유도된 만성 식욕부진 동물모델의 내분비계 부작용 완화 효과를 분석하였다.
만성 식욕부진 동물모델은 7주령의 수컷 랫트를 구입하여 1주일 간 순화기간을 거친 250 g 내지 270 g의 8주령의 수컷 랫트를 하용하였다. 각 그룹당 7마리씩 4그룹(정상군, cisplatin 단독 투여군, 실시예 1의 맥아 효소액 산두군 추출물 투여군 및 대조약물인 megestrol acetate 투여군)으로 나누었으며, 7일간 실험을 진행하였다. 실험 1일차부터 7일차까지 실시예 1의 맥아 효소액 산두근 추출물은 150 mg/kg 용량으로 오전 10시와 오후 5시 두 차례(bid: 하루에 두번) 0.5% methylcellulose(MC)에 희석하여 랫트에 경구투여하였고, 대조약물인 megestrol acetate는 오후 5시에만 한차례(qd: 하루에 한번) 70 mg/kg 용량으로 0.5% methylcellulose(MC)에 희석하여 경구투여하였다. 그 외 나머지 군들은 0.5% methylcellulose(MC)를 5 ㎖/kg의 용량으로 경구투여하였다. 내분비계 부작용 유도를 위하여 실험 1일차와 2일차에 두번 cisplatin을 랫트 몸무게 kg 당 2 mg씩 주사용수 5 ㎖에 녹여 랫트의 복강내 주사하였다. 실험 1일차부터, 한 케이지에 랫트 한마리씩 넣고 물은 자유로이 섭취할 수 있는 상태에서 먹이를 일정량씩 공급해주고 기록하였다. 매일 남은 먹이량과 랫트의 몸무게를 측정하고, 실험 8일차에 부검을 통해 부신(adrenal gland), 고환(testis), 신장(kidney), 간(liver), 지라(spleen)를 적출하여 cisplatin만 단독으로 투여한 그룹과 약물 투여군을 비교하였다. 결과를 하기 표 4 및 표 5에 나타내었다.
| 구분 |
투여량 |
무게(g) |
|||||
| 체중 | 간 | 지라 | 신장 | 고환 | 부신 | ||
| 정상군 | - | 330.7 | 15.5 | 0.65 | 2.77 | 2.89 | 0.05 |
| cisplatin 단독 투여군 | 2 mg/kg cisplatin only | 250.6 Ŧ | 11.1 Ŧ | 0.60 | 3.27 Ŧ | 2.61 Ŧ | 0.04 |
| 실시예 1 투여군 | 150 mg/kg 실시예 1 추출물+2 mg/kg cisplatin | 287.4 * | 13.0 | 0.63 | 3.13 | 2.70 * | 0.04 |
| 대조약물 투여군 | 70 mg/kg megestrol acetate+2 mg/kg cisplatin | 275.9 | 13.0 | 0.65 | 3.07 Ŧ | 2.70 * | 0.03 * |
| Ŧ vs 정상군(p<0.05) * vs cisplatin 단독 투여군(p<0.05) |
|||||||
| 구분 | 투여량 | 먹이 섭취량(g/24hr)(mean SD) | 먹이 섭취 증가율(%) |
| 정상군 | - | 23.3±3.0 | 100% |
| cisplatin 단독 투여군 | 2 mg/kg cisplatin only | 7.4±4.6 Ŧ | 0% |
| 실시예 1 투여군 | 150 mg/kg 실시예 1 추출물+2 mg/kg cisplatin | 14.8±3.6 * | 46.8% |
| 대조약물 투여군 | 70 mg/kg megestrol acetate+2 mg/kg cisplatin | 14.8±5.6 * | 46.6% |
| Ŧ vs 정상군(p<0.05) * vs cisplatin 단독 투여군(p<0.05) |
|||
상기 표 4 및 표 5에 나타난 바와 같이, cisplatin 2회 단독 투여한 cisplatin 단독 투여군에서는 정상군 대비 몸무게, 먹이 섭취량에서 유의한 감소를 보였으며, 장기무게에서는 간, 신장, 고환에서 유의한 변화를 보이는 것을 확인하였다. 이는 cisplatin 투여가 단순한 식욕부진으로 인한 먹이 섭취량 감소와 그로 인한 몸무게 저하를 초래하는 것 뿐 만아니라, 내분비계 관련 장기들에도 직ㆍ간접적으로 부작용을 초래하는 결과로 볼 수 있다. 반면, 실시예 1의 맥아 효소액 산두근 추출물 150 mg/kg을 투여한 군은 cisplatin 단독 투여군보다 먹이 섭취량이 유의하게 증진되었으며, 이에 따른 몸무게의 저하도 완화될 수 있음을 확인하였다. 또한, cisplatin 투여에 의한 간의 무게 감소 부작용도 완화되었고, 간과 고환도 마찬가지로 cisplatin 투여에 의한 부작용을 완화해주는 것을 확인할 수 있었다. 상기의 결과에 나타난 바와 같이, 맥아 효소액을 이용하여 추출한 산두근 추출물은 식욕촉진 효능 뿐만 아니라, 내분비계 관련 장기들의 부작용도 완화시킬 수 있음을 확인하였다. 또한, 현재 시판중인 대조약물인 megestrol acetate와 비교하였을 경우에도 동등이상의 식욕 촉진 효과는 물론 내분비계 장기들의 부작용 완화효과도 있음을 확인하였다.
실험예
3: 면역억제 완화 효과 분석
상기 실시예 1에서 제조한 맥아 효소액을 이용한 산두근 추출물의 면역억제 완화 효과를 확인하기 위하여, cyclophosphamide로 유도된 면역억제 동물모델 사용하여 분석하였다.
면역억제 동물모델은 7주령의 수컷 랫트를 구입하여 1주일 간의 순화기간을 거친 250 g 내지 270 g의 8주령의 수컷 랫트를 사용하였다. 랫트는 각 7마리씩 4그룹(정상군, cyclophosphanide 단독 투여군, 실시예 1의 맥아 효소액 산두근 추출물 투여군 및 대조약물 megestrol acetate 투여군)으로 분리하고 6일간 실험을 진행하였다. 실험 1일차부터 6일차까지 실시예 1의 맥아 효소액 산두근 추출물 투여군은 오전 10시와 오후 5시에 실시에 1의 맥아 효소액 산두근 추출물을 150 mg/kg씩 두 차례(bid: 하루에 두번) 0.5% methylcellulose(MC)에 희석하여 경구투여하였으며, 대조약물 megestrol 투여군은 하루에 한번 오후 5시에 0.5% methylcellulose(MC)에 희석하여 70 mg/kg megestrol acetate 용량으로 경구투여 하였다. 그 외 나머지 군은 0.5% methylcellulose(MC)를 5 ㎖/kg으로 경구투여하였다. 면역억제 유도를 위해 실험 4일차에 한번 cyclophosphamide를 랫트 몸무게 kg 당 25 mg씩 주사용수 5 ㎖에 녹인 후 복강내 주사하였다. 실험 1일차부터, 한 케이지에 랫트 한마리씩 넣고 물과 먹이는 자유로이 섭취할 수 있도록 한 상태에서 매일 몸무게를 측정하였으며, 실험 7일차에 부검을 통해 지라(spleen)와 흉선(thymus)을 적출하여 cyclophosphamide 단독으로 투여한 군과 비교하였다. 결과를 하기 표 6에 나타내었다.
| 구분 | 투여량 | 무게(g) | 체중대비 % | |
| 체중 | 지라 | 흉선 | ||
| 정상군 | - | 279.7 | 0.58±0.04 | 0.55±0.04 |
| cyclophosphamide 단독 투여군 | 25 mg/kg cyclophosphamide | 277.0 | 0.40±0.04 Ŧ | 0.25±0.04 Ŧ |
| 실시예 1 투여군 | 150 mg/kg 실시예1 추출물+25 mg/kg cyclophosphamide | 281.6 | 0.47±0.14 | 0.30±0.06 |
| 대조약물 투여군 | 70 mg/kg megestrol acatate+25 mg/kg cyclophosphamide | 276.3 | 0.42±0.06 | 0.20±0.05 |
| Ŧ vs 정상군(p>0.05) | ||||
상기 표 6에 나타난 바와 같이, cyclophosphamide 단독 투여군의 경우 정상군과 비교하여 몸무게의 변화는 없었으나, 면역세포 관련 장기인 지라와 흉선 무게에서는 유의한 감소를 나타내었다. 이는 cyclophosphamide 투여로 인해 면역이 억제되었음을 나타내는 것이다. 반면, 실시예 1의 추출물 투여군에서는 cyclophosphamide 단독 투여군과 비교하여 몸무게 변화는 나타내지 않았으나, 지라와 흉선 모두에서 cyclophosphamide로 유도된 면역장기의 무게감소를 완화하는 효능을 나타내었다.
Claims (7)
- (a) 맥아 효소액, 및 생약인 산두근(Menispermum dauricum DC) 또는 진피를 반응시키는 단계; 및
(b) 상기 혼합된 맥아 효소액 및 생약을 추출하는 단계를 순차적으로 포함하는 생약 추출물의 제조방법.
- 제1항에 있어서, 상기 맥아 효소액, 및 산두근 또는 진피는 1시간 내지 12시간 동안 혼합하여 반응시키는 것을 특징으로 하는 제조방법.
- 제1항에 있어서, 상기 맥아 효소액은 물 및 맥아를 0.5시간 내지 24시간 혼합한 후 여과하여 제조되는 것을 특징으로 하는 제조방법.
- 제1항에 있어서, 상기 맥아 효소액, 및 산두근 또는 진피 혼합은 30℃ 내지 70℃ 온도범위에서 수행하는 것을 특징을 하는 제조방법.
- 제1항에 있어서, 상기 맥아 효소액, 및 산두근 또는 진피의 혼합비율은 50-99.9 중량%:0.1-50 중량%인 것을 특징으로 하는 제조방법.
- 제1항에 있어서, 상기 추출용매는 물, C1 -4 알코올 또는 이들의 혼합용매인 것을 특징으로 하는 제조방법.
- 삭제
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|---|---|---|---|---|
| KR20030029587A (ko) * | 2003-03-22 | 2003-04-14 | 정일수 | 발효식물 및 발효 약용식물의 유효성분 흡수 향상 |
| JP4090827B2 (ja) * | 2002-09-09 | 2008-05-28 | 独立行政法人科学技術振興機構 | ｄ１０ｓ２およびｄ０電子状態の金属イオンを含む複合酸化物を用いた光触媒 |
-
2012
- 2012-11-13 KR KR1020120128389A patent/KR101425727B1/ko not_active IP Right Cessation
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