KR101372384B1 - 캡슐화된 간세포 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 간세포 자극량의 에리스로포이에틴과 물리적으로 접촉시킨, 치료 유효량의 간세포 현탁물을 캡슐화하는 캡슐 쉘을 포함하는 마이크로 캡슐을 제공한다.

Description

캡슐화된 간세포 조성물{ENCAPSULATED LIVER CELL COMPOSITION}
본 발명은 간세포와 에리스로포이에틴을 포함하는 마이크로 캡슐, 마이크로 캡슐의 제조 방법 및 환자에게 마이크로 캡슐을 적용하는 것을 포함하는 환자의 치료 방법에 관한 것이다.
건강한 대상의 간이 손상되거나 병든 조직을 수리하거나 대체함으로써 자기 스스로를 재생시킬 수 있더라도, 불행하게도 한번 일정량의 간세포가 질병이나 부상으로 죽거나 심각한 손상을 받으면, 전체 기관이 작동하지 않을 수 있다. 급성 또는 만성 부전이 될 수 있는 이러한 부전(failure)은 질병 및 사망을 야기할 수 있다. 간 질환의 치료는 약물 투여와 같은 종래의 방법을 모두 포함한다. 그러나, 또한 간 또는 이들의 일부를 이식하는 최신 기술이 존재한다. 더욱이, 예컨대 WO 2004/009766 A2호에서 설명된 바와 같이, 간세포군을 환자에게 이식하는 것이 널리 알려져 있다. 그러나 표적 조직에 이식된 간세포의 생존능력(viabiltiy), 접목(engraftment), 증식(proliferation) 및 분화(differentiation)라는 관점에서 최적화된 치료방법을 필요로 하는 환자에게 간세포를 전달하는 것은 급성 또는 만성 간질환의 다양한 치료법을 고안하는데 있어서 여전히 중대한 도전이다.
헤이그(Haque) 등(Biotechnology letter 27(5)(2005), 317-322))은 간 부전을 치료용 간세포 이식체에 대한 대안으로서 알긴산-키토산 마이크로 캡슐의 시험관 내에서(in vitro)의 연구를 설명한다. 찬드라세카란(Chandrasekaran) 등(Tissue Engineering 12(7),(2006))은 정전기적으로 생산된 비드에 함침된 간 전구세포(progenitor cell)를 개시한다.
간세포를 환자의 표적 조직으로 효율적으로 전달하는 치료 시스템을 개발하기 위한 노력에도 불구하고, 더 신뢰할 수 있는 간 질환 치료방법, 특히 표적 신체에서 간세포의 높은 생존능력 및 생리활성을 제공하는 방법을 제공할 필요성이 여전히 남아있다.
본 발명의 교시는 간세포 자극량의 에리스로포이에틴을 물리적으로 접촉시킨 치료 유효량의 간세포 현탁물을 캡슐화하는 캡슐 쉘, 바람직하게는 생체적합성 캡슐 쉘을 포함하는 마이크로 캡슐을 제공함으로써 상기 문제를 해결한다. 바람직한 구현예에서, 본 발명은 캡슐 쉘 및 코어를 포함하는 마이크로 캡슐을 제공하고, 상기 캡슐 쉘은 코어에서 치료 유효량의 간세포 현탁물 및 간세포 자극량의 에리스로포이에틴을 캡슐화하고, 특히 상기 에리스로포이에틴(하기에서 용어 EPO) 및 간세포는 간세포에 EPO 자극 효과를 제공하기 위해서 물리적으로 서로 접촉한다.
또한, 바람직한 구현예에서, 본 발명은 바람직하게는 생체적합성 캡슐 쉘 물질로 제조된 캡슐 쉘 및 상기 캡슐 쉘로 둘러싼 코어를 포함하는 마이크로 캡슐을 제공하는 방법을 제시한다. 본 발명의 바람직한 하나의 구현예에서, 코어는 간세포 자극량의 에리스로포이에틴을 물리적 접촉시킨 치료 유효량의 간세포 현탁물을 포함한다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 코어는 바람직하게는 생체적합성 매트릭스 물질로 제조된 매트릭스를 포함하고, 상기 치료 유효량의 간세포 현탁물을 간세포 자극량의 에리스로포이에틴을 물리적으로 접촉시킨 상기 매트릭스에 함침시킨다. 바람직하게는, 매트릭스 물질은 캡슐 쉘 물질과 동일하다. 또 다른 구현예에서, 생체적합성 매트릭스 물질은 캡슐 쉘 물질과는 또 다른 물질이 될 수 있다.
또한, 본 발명은 생체적합성 캡슐 쉘에서 에리스로포이에틴 및 간세포를 모두 함께 캡술화시키기 위한 교시를 제공한다. 에리스로포이에틴은 최소 하나의 간세포에 대한, 특히 간세포를 자극하는데 있어서 그의 생물학적 기능을 발휘하기 위해서 간세포와 물리적으로 접촉시킨다.
본 발명의 이점 중 하나는 간세포가 캡슐 쉘에서 캡슐화되어, 바람직하게는 마이크로캡슐이 이식된 환자에게 반작용, 특히 알러지 또는 면역 반응을 전혀 나타내지 않는다는 것이다. 더욱이, 간세포와 에리스로포이에틴의 밀접한 접촉은 환자에게 간의 생체 기능을 제공하기 위해 상기 간세포가 생체 기능을 수행하도록 자극한다. 특히 바람직한 구현예에서, 간세포는 에리스로포이에틴에 의해 자극되는 경우 서로에게 훨씬 더 확연한 효과를 제공할 수 있는, 물리적 접촉이 가능한 농도로 마이크로캡슐에 포함된다. 또한, 본 발명은 특히 바람직한 구현예에서, 마이크로 캡슐에 포함된 간세포가 서로와 물리적으로 접촉하고 에리스로포이에틴과 물리적으로 접촉한다는 것을 제시한다.
본 원에서, 표현 "간세포가 에리스로포이에틴과 물리적으로 접촉한다(liver cells are in physical contact to erythropoietin)"는 에리스로포이에틴이 간세포에 대해 최소 하나의 그 생물학적 기능을 발휘할 수 있으며, 특히 간세포 상에 존재하는 에리스로포이에틴 수용체에 도달할 수 있고 이 수용체에 의해 가역적으로 또는 비가역적으로 결합하는 것을 의미한다.
본 원에서, 표현 "간세포가 서로와 물리적으로 접촉한다(liver cells being in physical contact to each other)"는 간세포가 본 발명 마이크로캡슐 내에 서로 밀접한 부근에 존재하여 세포가 서로 접촉하고, 간의 자연적 생리 환경과 매우 유사한 안정한 환경을 제공한다는 것을 의미한다.
본 원에서, 용어 "간세포를 자극하는 것(stimulating the liver cells)"은 에리스로포이에틴은 간세포, 바람직하게는 마이크로캡슐이 이식된 환자의 간세포의 생체 기능성을 증가시키고, 간세포의 생존능력을 증가시키고, 저장 안정성을 증가시키며/거나 한번 대상에 이식되면 그 생체 기능을 성공적으로 수행하는 잠재력을 증가시킨다는 것을 의미한다.
본 원에서, "생체적합성(biocompatibility)"은 물질, 특히 캡슐 쉘 물질 및/또는 매트릭스 물질이 통합된 간세포를 독자 생존 가능하도록 유지할 수 있고 에리스로포이에틴 및 간세포 간의 상호작용을 가능하게 할 수 있다는 것을 의미한다. 특히 바람직한 구현예에서, 용어 "생체적합성의(biocompatible)"는 물질이 바람직하게는 장기간 동안, 환자에게 이식을 가능하게 하는 반면에, 여전히 대상에 바람직하지 않은 국소 또는 시스템적 효과, 특히 알러지 및 면역 반응을 전혀 나타내지 않으면서 함침된 간세포의 기능을 유지한다는 것을 의미한다. 특히 바람직한 구현예에서, 용어 "생체적합성의"는 물질이 간세포 및 EPO 간의 분자적이고 기계적인 유사 시스템의 유도를 포함하는, 바람직하게는 세포 및 대상에 바람직하지 않은 효과를 전혀 나타내지 않으면서 간 재생을 최적화하기 위한 간세포 활성을 지지하는 물질로서 수행할 수 있다는 것을 의미한다.
본 원에서, 용어 "에리스로포이에틴"은 적혈구 생성 또는 적혈구 생산을 조절하는 당단백질 호르몬, 바람직하게는 적량 투여시, 적아세포나 적혈구를 통한 줄기세포의 성장, 분화 및 성숙을 조절하는 물질을 나타낸다. 에리스로포이에틴은 166개의 아미노산, 3개의 글라이코실화반응 위치 및 약 34,000 Da의 분자량을 갖는 당단백질이다. 적혈구 전구세포의 EPO-유도 분화 동안, 글로빈 합성이 유도되고, 헴 복합체의 합성이 증가되며 페리틴(ferritin) 수용체의 수가 증가된다. 이로써 세포는 더 많은 철을 흡수할 수 있고 기능성 헤모글로빈을 합성할 수 있다. 성숙한 적혈구에서, 헤모글로빈은 산소에 결합한다. 또한 포함된 적혈구 및 헤모글로빈은 여기서 유기체에 산소를 공급하는데 핵심적 역할을 한다. 이러한 과정이 적혈구 전구세포의 세포 표면 상의 적절한 수용체와 EPO의 상호작용을 통해 개시된다(Graber and Krantz, Ann. Rev. Med. 29(1978), 51-56).
본 원에서, 용어 "에리스로포이에틴"은 야생형 에리스로포이에틴, 특히 인간 에리스로포이에틴 및 유도체를 모두 총체적으로 포함한다. 본 원에서, 에리스로포이에틴의 유도체는 최소 하나의 아미노산 변형, 특히 야생형 EPO와 비교하여 하나 이상의 아미노산의 제거, 첨가 또는 치환으로 특징지어지는 재조합 에리스로포이에틴 단백질 및/또는 야생형 에리스로포이에틴과 비교하여 서로 다른 글라이코실화반응 패턴을 갖는 에리스로포이에틴 단백질이다. 특히 바람직한 구현예에서, 에리스로포이에틴 유도체는 또한 융합 단백질 또는 야생형 에리스로포이에틴의 끝이 잘린 단백질 또는 그의 유도체이다. 특히 바람직한 구현예에서, 에리스로포이에틴의 유도체는 또한 야생형 글라이코실화반응 패턴과 비교해서 서로 다른 글라이코실화반응 패턴을 갖는 야생형 에리스로포이에틴이다.
본 원에서 사용된 용어 "에리스로포이에틴"은 모든 유래의 EPO, 특히 인간 또는 동물 EPO를 포함한다. 본 원에서 사용된 이 용어는 또한 그것들이 야생형 에리스로포이에틴의 생체 효과를 나타내는 한, 자연 발생하는, 다시 말해 야생형 형태의 EPO뿐만 아니라 그의 유도체, 즉 변형물(modification), 뮤테인(mutein) 또는 돌연변이체(mutant)의 용어로도 사용되는 것 모두를 포함한다.
본 발명과 관련되어, 기본적인 에리스로포이에틴 구조를 보유하는 반면에 하나 이상의 원자 또는 분자적 그룹 또는 잔기의 치환에 의해, 특히 에틸렌 글라이콜 등의 당 사슬의 치환에 의해 수득되고/되거나 아미노산 서열이 자연 발생하는 인간 또는 동물 에리스로포이에틴 단백질의 서열과 최소 하나의 위치에서 다른지만 본질적으로 아미노산 수준 및 비교 생체 활성에서 고도의 상동성을 갖는 "유도체", 또한 에리스로포이에틴의 유도체로 이해될 것이다. 본 발명에서 이용될 수 있는 에리스로포이에틴 유도체는 예컨대, WO 94/25055호, EP 0148605 B1호 또는 WO 95/05465호이다.
"상동성"은 특히 최소 80%, 바람직하게는 최소 85% 및 특히 바람직하게는 최소 90%, 95%, 97% 및 99% 이상의 서열 동일성을 의미한다. 당업자에게 알려진 용어 "상동성"은 또한 두 개 이상의 폴리펩타이드 분자 간의 상관도(degree of relation)를 나타낸다. 이것은 서열 간의 일치에 의해 결정된다. 이러한 일치는 동일한 일치 또는 아미노산의 보존적 치환을 의미할 수 있다.
본 발명에 따라, 용어 "유도체"는 또한 또 다른 단백질의 기능성 도메인이 N-말단 부분 또는 C-말단 부분에 존재하는 융합 단백질을 포함한다. 본 발명의 하나의 구현예에서, 이러한 다른 단백질들은 예컨대, GM-CSF, VEGF, PIGF, 스테이틴(statin) 또는 내피 전구세포에 대한 자극 효과를 갖는 또 다른 인자가 될 수 있다. 본 발명의 추가 구현예에서, 기타 단백질은 또한 간세포에 대한 자극 효과를 갖는 요소일 수 있다.
에리스로포이에틴 유도체 및 태생적이거나 야생형 에리스로포이에틴 간의 차이는 예컨대, 에리스로포이에틴 아미노산 서열을 코딩하는 뉴클레오타이드 서열의 제거, 치환, 삽입, 첨가, 염기 치환 및/또는 재조합 등의 뮤테이션(mutation)을 통해 발생할 수 있다. 명백하게, 이러한 차이는 또한 또 다른 유기체로부터의 서열 또는 자연히 뮤테이션된 서열 등의 자연 발생하는 서열 변이(sequence variation) 또는 화학작용제 및/또는 물리작용제 등의 당업계에 알려진 통상의 방법을 사용한 에리스로포이에틴을 코딩하는 핵산 서열로부터 선택적으로 도입된 뮤테이션이다. 본 발명과 관련되어, 용어 "유도체" 또한 뮤테이션된 에리스로포이에틴 분자, 다시 말해 에리스로포이에틴 뮤테인을 포함한다.
본 발명에 따라, 에리스로포이에틴의 펩타이드 또는 단백질 유사체가 또한 사용될 수 있다. 본 발명과 관련되어, 용어 "유사체"는 에리스로포이에틴 아미노산 서열과 동일한 아미노산 서열을 전혀 포함하지 않지만, 에리스로포이에틴의 구조와 크게 유사한 3 차원 구조를 가지므로 유사한 생체 활성을 갖는 화합물을 포함한다. 에리스로포이에틴 유사체는 예컨대, 적절한 입체구조(conformation)에서 에리스로포이에틴을 그의 수용체에 결합시는 책임이 있는 아미노산 잔기를 포함하므로 에리스로포이에틴 결합 부위의 본질적인 표면 특성을 자극할 수 있는 화합물을 포함할 수 있다. 이러한 종류의 화합물은 예컨대, [Wrightonet al., Science, 273(1996), 458]에서 설명된다.
본 발명에 따라 사용된 EPO는 다양한 방법, 예컨대 인간 소변 또는 재생불량성 빈혈을 겪는 환자의 소변 또는 혈장(혈청을 포함)에서 분리하여 생산될 수 있다(Miyakeet al., J.B.C. 252(1977), 5558). 일례로, 인간 EPO는 또한 인간 신장암 세포의 조직 배양(JA Unexamined Application 55790/1979)으로부터, 인간 EPO를 생산할 능력을 가진 인간 림프아구(lymphoblast) 세포(JA Unexamined Application 40411/1982)으로부터 및 인간 세포주의 세포 융합에 의해 수득된 혼성세포(hybridoma) 배양으로부터 수득될 수 있다. EPO는 또한 필요한 단백질을 유전 공학적 방법으로 생산하기 위해, 예컨대 박테리아에서, 효모에서 또는 식물, 동물 또는 인간 세포주에서 EPO의 적절한 아미노산 서열을 코딩하는 적절한 DNA 또는 RNA를 사용하여 유전공학의 방법으로 생산될 수 있다. 이러한 방법은 예컨대, EP 0148605 B2호 또는 EP 0205564 B2호 및 EP 0411678 B1호에서 설명된다.
본 원에서, 바람직한 구현예에서 에리스로포이에틴의 유도체는 바람직하게는 프로크리트(Procrit)으로도 불리는 에포에틴(Epoetin), 에포젠(Epogen), 에프렉스(Eprex) 또는 네오레코르몬(NeoRecormon), 디네포(Dynepo)로도 불리는 에포에틴 델타(Epoetin delta), 아라네스프(Aranesp)로도 불리는 다베포에틴(Darbepoetin), 피디포에틴(PDpoetin), 세라(CERA)(지속성 에리스로포이에틴 수용체 반작용제(continuous erythropoietin receptor antagonist)) 및 미세라(Mircera)로도 불리는 메톡시 폴리에틸렌 글라이콜-에포에틴 베타로부터 구성되는 그룹으로부터 선택된 프로크릿(Procrit)으로도 불리는 에포에틴(Epoetin), 에포젠(Epogen), 에프렉스(Eprex) 또는 네오레코르몬(Neorecormon), 디네포(Dynepo)로도 불리는 에포에틴 델타, 아라네스프(Aranesp)로도 불리는 다베포에틴(Darbepoetin), 피디포에틴(PDpoetin), 세라(CERA)(지속성 에리스로포이에틴 수용체 반작용제(continuous erythropoietin receptor antagonist)) 및 미세라(Mircera)로도 불리는 메톡시 폴리에틸렌 글라이콜-에포에틴 베타로부터 구성되는 그룹으로부터 선택된, 기능적으로 및 임상적으로 입증된 EPO 유도체이다.
본 발명의 바람직한 구현예에서, 마이크로캡슐은 간세포 자극량의 에리스로포이에틴과 물리적으로 접촉시킨, 치료 유효량의 함침된 간세포를 포함하는 생체적합성 캡슐 쉘 물질로부터 제조된, 바람직하게는 구형의, 비드이다. 본 원에서, 마이크로캡슐는 바람직하게는 구, 바람직하게는 직경 10μm 내지 10mm, 바람직하게는 140μm 내지 10mm, 바람직하게는 50μm 내지 1mm, 바람직하게는 60μm 내지 800μm, 바람직하게는 100μm 내지 700μm를 갖는다. 본 발명의 바람직한 구현예에서, 본 발명의 마이크로 캡슐은 간세포, 에리스로포이에틴 및 생체적합성 캡슐 쉘 물질로 구성되어 있다. 바람직하게는 상기 3 가지 요소뿐만 아니라 마이크로캡슐의 코팅 및/또는 마이크로캡슐의 코어에서의 생체적합성 매트릭스가 제시된다.
또한, 특히 바람직한 구현예에서, 본 발명은 생체적합성 매트릭스 물질에서 간세포 자극량의 에리스로포이에틴과 물리적으로 접촉시킨, 캡슐화된 치료 유효량의 간세포를 포함하는 마이크로 캡슐에 관한 것이다.
특히 바람직한 구현예에서, 간세포는 현탁물의 형태로, 바람직하게는 세포 배양 현탁물의 형태로 캡슐 쉘에 함침되어 있다. 간세포 현탁물은 바람직하게는 세포 배양 배지 또는 생리학적으로 허용되는 수용액에 포함된 간세포의 형태로 존재한다. 간세포 현탁물은 바람직하게는 세포 배양 배지에서 간세포의 현탁물이다.
특히 바람직한 구현예에서, 간세포는 현탁물의 형태로, 바람직하게는 세포 배양 현탁물에, 바람직하게는 세포 배양 배지 또는 생리학적으로 허용되는 수용액에 포함된 간세포의 형태로 쉘에 포함된 매트릭스에 함침되어 있다.
특히 바람직한 구현예에서, 본 발명은 간세포가 간의 전구체 세포, 간의 줄기 세포, 간모세포 및 간세포로 구성되어 있는 그룹으로부터 선택되는 마이크로 캡슐에 관한 것이다.
특히 바람직한 구현예에서, 본 발명은 간세포가 간의 전구체 세포, 간의 줄기 세포, 간모세포, 간세포 및 내피 세포로 구성되어 있는 그룹으로부터 선택되는 마이크로 캡슐에 관한 것이다.
더 바람직한 구현예에서, 본 발명은 성인 간, 배아 간, 태아 간, 신생아 간 또는 간세포 배양물로부터 수득된 마이크로 캡슐에 관한 것이다. 바람직하게는, 간세포는 살아있는 간세포이다. 바람직한 구현예에서, 간세포는 살아있거나 죽은, 특히 최근에는 수가 감소한 기증자로부터 수득될 수 있다.
더 바람직한 구현예에서, 본 발명은 간세포가 인간 간세포, 비인간 영장류 간세포, 돼지 간세포, 개 간세포, 고양이 간세포, 토끼 간세포, 마우스(mouse) 간세포 또는 래트(rat) 간세포인 마이크로 캡슐에 관한 것이다.
특히 바람직한 구현예에서, 본 발명은 100 내지 700μm, 바람직하게는 200, 300, 400, 500, 600 또는 650 내지 700μm의 평균 직경을 갖는 마이크로 캡슐에 관한 것이다.
특히 바람직한 구현예에서, 본 발명은 치료 유효량의 간세포가 현탁물 1ml 당 104 내지 108, 바람직하게는 105 내지 107 간세포인 마이크로 캡슐에 관한 것이다.
특히 바람직한 구현예에서, 본 발명은 간세포가 8 내지 14μm, 바람직하게는 9 내지 12μm의 평균 직경을 갖는 마이크로 캡슐에 관한 것이다.
더 바람직한 구현예에서, 본 발명은 간세포 자극량의 에리스로포이에틴은 현탁물 1ml 당 10-7 내지 10-2, 바람직하게는 10-7 내지 10-3, 바람직하게는 10-7 내지 10-5이고 바람직하게는 10-6 내지 10-5 Units인 마이크로 캡슐에 관한 것이다.
더 바람직한 구현예에서, 본 발명은 EPO가 야생형 에리스로포이에틴 또는 재조합 에리스로포이에틴인 마이크로 캡슐에 관한 것이다.
더 바람직한 구현예에서, 본 발명은 캡슐 쉘 물질이 알기네이트, 알긴산-키토산(AC), 알긴산-폴리-L-라이신(APA), 열젤화-폴리머(thermogelation-polymer) 및 PEG-하이드로젤로 구성되어 있는 그룹으로부터 선택되는 마이크로 캡슐에 관한 것이다.
더 바람직한 구현예에서, 본 발명은 매트릭스 물질이 알기네이트, 알긴산-키토산(AC), 알기네이트-폴리-L-라이신(APA), 열젤화-폴리머 및 PEG-하이드로젤로 구성되어 있는 그룹으로부터 선택되는 마이크로 캡슐에 관한 것이다.
더 바람직한 구현예에서, 본 발명은 간세포 외에 최소 하나의 추가 세포 종류가 마이크로캡슐에 존재하는 마이크로 캡슐에 관한 것이다.
특히 바람직한 구현예에서, 마이크로 캡슐에 존재하는 최소 하나의 추가 세포 종류는 간 성상 세포, 담즙성 세포, 조혈모세포, 단핵구, 마크로파지 혈통 세포(macrophage lineage), 림프구 및 내피 세포로 구성되어 있는 그룹으로부터 선택된다.
본 발명의 더 바람직한 구현예에서, 마이크로캡슐이 간세포와 EPO뿐만 아니라 바람직하게는 HGH(인간 성장인자(human growth factor)), VEGF(혈관내피 성장인자(vascular endothelial growth factor)), CSF(콜로니 자극인자(colony stimulating factor)), 트롬보포이에틴(thrombopoietin), SCF 복합체((Skpcollien, F-box containing complex), SDF(기질 세포-유래 인자-1(stromal cell-derived factor-1)), NGF(신경 성장인자(nerve growth factor)), PIGF(포스파티틸 이노시톨 글라이칸 앵커 생합성, 클래스 F(phosphatidyl inositol glycan anchor biosynthesis, class F)), HMG 코리덕테이즈 억제제(coreductase inhibitor), ACE(앤지오텐신 전환 효소(angiotensin converting enzyme)) 억제제, AT-1-억제제 및 NO 공여체(donor)로 구성되어 있는 그룹으로부터 선택되는 최소 하나의 추가 성장인자를 포함한다는 것을 제시한다.
특히 바람직한 구현예에서, 본 발명은 코팅된 마이크로 캡슐에 관한 것이다.
본 발명의 특히 바람직한 구현예에서, 코팅은 폴리머 코팅, 당 코팅, 당 알콜 코팅 및/또는 지방 또는 왁스 코팅이다.
더 바람직한 구현예에서, 본 발명은
a) 치료 유효량의 간세포 및 간세포 자극량의 에리스로포이에틴의 현탁물을 공급하는 단계,
b) 간세포 및 에리스로포이에틴의 현탁물을 혼합시켜 물리적으로 서로 접촉시키는 단계 및
c) 마이크로 캡슐을 형성하기 위해, 생체적합성 캡슐 쉘 물질에 간세포 및 에리스로포이에틴의 현탁물을 캡슐화시키는 단계:
를 포함하는 상기에 따른 마이크로 캡슐의 제조방법에 관한 것이다.
더 바람직한 구현예에서, 본 발명은 c) 단계에서 수득된 마이크로 캡슐이 냉동보존되는 방법에 관한 것이다.
더 바람직한 구현예에서, 본 발명은 본 발명에 따른 마이크로 캡슐을 이를 필요로 하는 대상에 투여하는 것을 포함하는, 이를 필요로 하는 대상의 간 질환의 예방 치료 또는 치료를 위한 방법에 관한 것이다.
특히 바람직한 구현예에서, 본 발명은 간 질환이 간염, 간경변증, 선청성 대사이상, 급성 간 부전, 급성 간 감염증, 급성 화학물질 독성, 만성 간 부전, 세담관염(cholangiocitis), 담즙성 간경변증, 알라질 증후군, 알파-1-항트립신 결핍증, 자가면역성 간염, 담즙성 폐쇄증, 간암, 간의 낭포병, 지방 간, 갈락토오스혈증, 담석증, 길버트 증후군(Gilbert’s syndrome), 혈색소증, A형 간염, B형 간염, C형 간염 및 기타 간염 바이러스성 감염증, 포르피리아(poryphyria), 원발성 경화성 담관염, 라이 증후군(Reye’s syndrome), 유육종증, 타이로신혈증, 제 1형 글리코겐 축적병 또는 윌슨병(Wilson’s disease)인 방법에 관한 것이다.
더 바람직한 구현예에서, 본 발명은 투여가 간 캡슐 하에서 마이크로 캡슐이 비장, 간, 간 펄프 또는 비장 동맥 또는 문맥으로 도입으로 수행되는 방법에 관한 것이다,
더 바람직한 구현예에서, 본 발명은 본 발명에 따른 마이크로 캡슐을 대상에 투여하는 것을 포함하는, 대상에 간세포를 도입시키는 방법에 관한 것이다.
본 발명의 특히 바람직한 구현예에서, 약물투여는 이를 필요로 하는 대상을 도입시키는 것에 기인하고, 여기서 약물투여는 국소, 경장(enteral) 또는 비경구 약물투여이다. 바람직한 구현예에서, 국소 약물투여는 피부, 흡입, 질 또는 비골간(internasal) 약물투여이다. 바람직한 구현예에서, 경장 약물투여는 입에 의하거나, 위영양관에 의해 또는 직장으로 수행된다. 바람직한 구현예에서, 비경구 약물투여는 주사 또는 투입, 바람직하게는 정맥간, 동맥내, 근육내, 심장내, 피하, 골내(intraosseous), 진피내, 낭포내, 복막내 또는 방광내 약물투여에 의해서 수행된다. 더 바람직한 구현예에서, 비경구 약물투여는 경피, 점막관통 또는 흡입에 의해서 수행된다.
더 바람직한 구현예에서, 본 발명은 적절한 배양 배지에서 및 간세포의 생존능력을 유지하거나 증가시키는데 적절한 조건 하에서 본 발명에 따른 마이크로 캡슐을 배양하는 것을 포함하는, 배양 배지에서, 바람직하게는 시험관 내에서(in vitro) 간세포를 배양하는 방법에 관한 것이다.
특히 바람직한 구현예에서, 본 발명은 적절한 배양 배지에서 및 간세포의 생존능력을 유지하거나 증가시키는데 적절한 조건 하에서 본 발명에 따른 마이크로 캡슐을 배양하는 것을 포함하는, 배양 배지에서, 바람직하게는 시험관 내에서(in vitro) 간세포의 에너지 상태를 유지하거나 배양하는 방법에 관한 것이다.
본 발명의 더 바람직한 구현예는 종속항의 대상 물질이다.
도면은 배양 후 EPO의 존재 여하에 따른, 세포 에너지 상태의 측정값으로서의 캡슐화된 간세포의 ATP/ADP 비율을 나타낸다.
실시예 1
EPO(5 x 10-3 units/ml)의 존재 하에서, 104 내지 108 세포/ml의 농도의 알기네이트로 100 내지 700μm의 평균 직경을 갖는 비드에 캡슐화된 간세포는 EPO가 없는 경우를 제외하고는 동일하게 캡슐화된 간세포보다 더 성공적일 것이다. ATP/ADP 비율은 세포 에너지 상태의 측정값으로 사용된다. ATP/ADP 비율은 실험 과정 동안 더 빠른 속도로 증가되거나 무처리 세포보다 더 높은 비율을 유지한다면 이러한 증거는 가설을 입증하게 된다.
간세포의 캡슐화
냉동보존된 인간 간세포의 단일 스탁으로부터 간세포의 세포 캡슐화를 정전기식 비드 발생 기구를 사용하여 수행했다. 간세포를 통상의 배양 배지에 현탁하여 2% 알긴산 나트륨 용액을 1:1 비율로 혼합시켰다. 4 백만 세포/ml 농도의 간세포를 포함하는 결과상의 1% 알기네이트 용액을 24-게이지 혈관 카테터를 장착한 1-cc 주사기로 뽑아냈다. 혈관 카테터를 정전기식 주조법에서 양극으로 작용하는 23-게이지 주사바늘을 사용하여 허브에서 관통시켰다.
주사기를 주사기 펌프(Braintree Scientific BS-8000, Braintree, MA) 상에 로딩하고 배열하여 혈관 카테터로부터 배출된 소적은 250ml 유리 비커에서 125mm 염화칼슘(CaCl2) 용액(5 x 10-3 및 5 x 10-6U/ml의 EPO를 포함하거나 EPO를 포함하지 않는, 1% 인간 알부민을 포함하는 종래의 또는 취토넷(Cytonet) 버퍼 4)의 표면 상에 수직으로 떨어질 것이다. 혈관 카테터 팁에서 CaCl2 표면까지의 거리는 약 2.5cm로 고정되었다. 펌프 유량을 0.75 내지 1.5ml/분의 범위 내로 설정했다. 접지 상태의 전극을 CaCl2 수득 조에 담궜다. 3.8 내지 6 kV의 범위의 고전압 DC 공급원(Spellman model RHR30PF30, Hauppauge, NY)을 사용하여 정전기 전위를 혈관 카테터 팁 및 CaCl2 조에 발생시켰다. 비드 크기(500μm)를 적용된 전위를 조정함으로써 제어했다. 주사기 펌프를 높은 정전기 전위에서 가동했을 때, 짜낸 알긴산 나트륨 용액을 CaCl2 용액과 즉시 접촉한 고체 알긴산칼슘으로 폴리머화한 소적으로 방출시켰다.
캡슐화 후, 간세포 알기네이트 비드를 10% 혈청, 244 unit/ml 페니실린, 0.244 mg/ml, 5.5mm 글루타민, 0.195 units/ml 인슐린, 0.017 ug/ml 글루카곤, 0.73 ug/ml 프레드니솔론, 0.54 ug/ml 덱사메타손을 포함한 윌리엄 E(William E) 용액에서 유지시키고 2 시간 동안 배양했다.
비드를 100mm 시트레이트(citrate)에 놓음으로써 탈캡슐화를 수행했다. 알기네이트를 용해시키고, 세포를 PBS로 두 번 세척하고 1분 동안 200 x G로 펠렛을 형성시켰다. 4% 과염소산을 세포 상에 놓고 수작업용 마이크로 균질기를 사용하여 20초 동안 균질화함으로써 대사물질을 추출했다. 이후 샘플을 14,000 xG에서 3분 동안 원심분리하고 대사물질을 갖는 상등액을 제거했다. 과염소산을 KOH 및 불용성 과염소산칼륨으로 중화시키고 과염소산 칼륨을 원심분리로 제거했다. 이후 샘플을 "포유동물 세포에서의 ATP 측정방법"(Manfrediet al. Methods 2002(4), 317-326)에서 설명된 ATP, ADP 분석을 위해 HPLC 방법으로 분석했다. ATP/ADP 수준을 측정하기 위해 3 개의 병행 플레이트를 사용했다.
실험결과
ATP/ADP 비율은 세포 에너지의 측정값이고, 세포의 물질대사 상태에 대한 모든 생화학적 경로의 효과를 나타낸다. EPO로 캡슐화된 간세포에서 나타낸 ATP/ADP 비율(도면 참조)의 유지는 세포가 세포의 모든 기능을 필요로 하는 에너지 발생 경로를 유지할 수 있다는 것을 명백히 보여준다. 본 실험에서, ATP/ADP의 비율은 EPO-처리 그룹에서 유지되지만 무처리 대조군에서는 그렇지 않다. EPO-처리 그룹이 ATP/ADP 비율을 유지할 수 있는 반면에, 대조군의 ATP/ADP 비율은 0.5 미만으로 떨어졌다. 이것은 EPO가 세포에 영양 자극을 제공할 수 있는 비-EPO 수용체 경로를 통해 신호전달을 할 수 있다는 것을 나타낸다.

Claims (21)

  1. 간세포 자극량의 에리스로포이에틴과 물리적으로 접촉시킨 치료 유효량의 간세포를 포함하는 현탁물을 캡슐화한 캡슐 쉘을 포함하는 마이크로 캡슐에 있어서,
    치료 유효량의 간세포가 현탁물 1 mL 당 104 내지 108 간세포이고, 간세포 자극량의 에리스로포이에틴이 현탁물 1 mL 당 10-7 내지 10-2 U인 마이크로 캡슐.
  2. 제 1항에 있어서, 간세포가 간의 전구체 세포, 간의 줄기 세포, 간모세포, 내피 세포 및 간세포로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 마이크로 캡슐.
  3. 제 1항 또는 2항에 있어서, 간세포가 성인 간, 배아 간, 태아 간, 신생아 간 또는 간세포 배양물로부터 수득된 것인 마이크로 캡슐.
  4. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 간세포가 인간 간세포, 비인간 영장류 간세포, 돼지 간세포, 개 간세포, 고양이 간세포, 토끼 간세포, 마우스 간세포 또는 래트 간세포인 마이크로 캡슐.
  5. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 100μm 내지 700μm의 평균 직경을 갖는 마이크로 캡슐.
  6. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 간세포가 8μm 내지 14μm의 평균 직경을 갖는 마이크로 캡슐.
  7. 삭제
  8. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 간세포 자극량의 에리스로포이에틴이 현탁물 1 mL 당 10-7 내지 10-3 U인 마이크로 캡슐.
  9. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 에리스로포이에틴이 야생형 에리스로포이에틴 또는 재조합 에리스로포이에틴인 마이크로 캡슐.
  10. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 캡슐 쉘이 알기네이트, 알기네이트-키토산(AC), 알기네이트-폴리-L-라이신(APA), 열젤화-폴리머 및 PEG-하이드로젤로 구성되는 그룹으로부터 선택된 생체적합성 물질로부터 제조되는 마이크로 캡슐.
  11. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 간세포 외에, 간 성상 세포, 담즙성 세포, 조혈모세포, 단핵구, 마크로파지 혈통 세포(macrophage lineage), 림프구 및 내피 세포로 구성되어 있는 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 추가 세포 종류가 마이크로 캡슐에 존재하는 마이크로 캡슐.
  12. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 코팅된 마이크로 캡슐.
  13. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 간세포 및 에리스로포이에틴을 함침된 생체적합성 매트릭스를 포함하는 마이크로 캡슐.
  14. a) 치료 유효량의 간세포 및 간세포 자극량의 에리스로포이에틴의 현탁물을 공급하는 단계,
    b) 간세포 및 에리스로포이에틴의 현탁물을 혼합하여 물리적으로 서로 접촉시키는 단계 및
    c) 마이크로 캡슐을 형성하기 위해, 생체적합성 캡슐 쉘 물질에 간세포 및 에리스로포이에틴의 현탁물을 캡슐화하는 단계
    를 포함하는, 제 1 항에 따른 마이크로 캡슐의 제조방법.
  15. 제 14항에 있어서, c) 단계에서 수득된 마이크로 캡슐이 냉동보존되는 방법.
  16. 제 1 항에 있어서, 필요로 하는 대상에서 간 질환을 예방 또는 치료하기 위한 마이크로 캡슐.
  17. 제 16 항에 있어서, 간 질환이 간염, 간경변증, 선천성 대사이상, 급성 간 부전, 급성 간 감염증, 급성 화학물질 독성, 만성 간 부전, 세담관염, 담즙성 간경변증, 알라질 증후군, 알파-1-항트립신 결핍증, 자가면역성 간염, 담즙성 폐쇄증, 간암, 간의 낭포병, 지방 간, 갈락토오스혈증, 담석증, 길버트 증후군, 혈색소증, A형 간염, B형 간염, C형 간염 및 기타 간염 바이러스성 감염증, 포르피리아, 원발성 경화성 담관염, 라이 증후군, 유육종증, 타이로신혈증, 제 1형 글리코겐 축적병 또는 윌슨병인 마이크로 캡슐.
  18. 제 16 항 또는 제 17 항에 있어서, 비장, 간, 간 펄프 또는 비장 동맥 또는 문맥으로 도입하기 위한 마이크로 캡슐.
  19. 제 1 항에 있어서, 대상에게 간세포를 도입하기 위한 마이크로 캡슐.
  20. 제 1 항에 따른 마이크로 캡슐을 적절한 배양 배지에서 배양하는 것을 포함하는, 배양 배지에서 간세포 배양 방법.
  21. 제 16 항 또는 제 17 항에 있어서, 복막내 투여하기 위한 마이크로 캡슐.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018093069A1 (ko) * 2016-11-15 2018-05-24 광주과학기술원 세포 3d 배양 방법

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106134070B (zh) * 2014-07-25 2018-05-22 积水化学工业株式会社 一种包括二次电池的发电装置
WO2016183231A1 (en) 2015-05-12 2016-11-17 Baker Group, LLP Method and system for a bioartificial organ
RU2618989C1 (ru) * 2016-03-09 2017-05-11 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (МГУ) Способ лечения печеночной недостаточности
CN108138134B (zh) * 2016-09-14 2019-05-10 四川蓝光英诺生物科技股份有限公司 人工组织前体及制备其的方法
US11439731B2 (en) 2016-09-14 2022-09-13 Revotek Co., Ltd. Artificial tissue progenitor and method for preparing the same
CN113573746A (zh) * 2019-03-20 2021-10-29 公立大学法人横滨市立大学 包覆固定剂

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4956128A (en) * 1984-05-25 1990-09-11 Connaught Laboratories Limited Droplet generation
JP2007517001A (ja) * 2003-12-30 2007-06-28 ビオネトス・ホールディング・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング 組織再生法

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5455790A (en) 1977-10-05 1979-05-04 Tomoyuki Tajima Production of erythropoetin
JPS6045849B2 (ja) 1980-08-25 1985-10-12 林原 健 ヒトエリトロポエチンの製造方法
NZ210501A (en) 1983-12-13 1991-08-27 Kirin Amgen Inc Erythropoietin produced by procaryotic or eucaryotic expression of an exogenous dna sequence
IL77081A (en) 1984-12-04 1999-10-28 Genetics Inst AND sequence encoding human erythropoietin, a process for its preparation and a pharmacological preparation of human erythropoietin
US5084350A (en) * 1990-02-16 1992-01-28 The Royal Institution For The Advance Of Learning (Mcgill University) Method for encapsulating biologically active material including cells
HUT73876A (en) 1993-04-29 1996-10-28 Abbott Lab Erythropoietin analog compositions and methods
IL110669A (en) 1993-08-17 2008-11-26 Kirin Amgen Inc Erythropoietin analogs
RU94030310A (ru) * 1994-08-16 1996-08-10 Молдавский научно-исследовательский институт профилактической и клинической медицины МЗ Республики Молдова (MD) Способ культивирования клеток человека и животных
US6281015B1 (en) * 1994-12-16 2001-08-28 Children's Medical Center Corp. Localized delivery of factors enhancing survival of transplanted cells
JP2006506971A (ja) 2002-07-19 2006-03-02 ヴェスタ セラピューティクス，インコーポレーテッド 肝性幹／前駆細胞を含む生存能のあるヒト肝臓細胞を得る方法
CA2561725A1 (en) * 2004-03-30 2005-10-13 Fac8Cell Pty Limited Culture and use of cells that secrete liver secretory factors
RU2429864C2 (ru) 2005-10-21 2011-09-27 Ливинг Селл Продактс Пти Лимитед Система инкапсуляции

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4956128A (en) * 1984-05-25 1990-09-11 Connaught Laboratories Limited Droplet generation
JP2007517001A (ja) * 2003-12-30 2007-06-28 ビオネトス・ホールディング・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング 組織再生法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018093069A1 (ko) * 2016-11-15 2018-05-24 광주과학기술원 세포 3d 배양 방법

Also Published As

Publication number Publication date
US9517247B2 (en) 2016-12-13
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HRP20130963T1 (hr) 2013-11-22
CN102413820A (zh) 2012-04-11
IL215887A (en) 2016-05-31
UA99686C2 (ru) 2012-09-10
RU2013143436A (ru) 2015-03-27
EP2424510A2 (en) 2012-03-07
HK1165278A1 (en) 2012-10-05

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