KR101266528B1 - Moisturizing and/or whitening cosmetic composition comprising polysaccharide extracted from Lentinus edodes mycelium culture product - Google Patents

Moisturizing and/or whitening cosmetic composition comprising polysaccharide extracted from Lentinus edodes mycelium culture product Download PDF

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Abstract

본 발명은 표고버섯 균사체 배양물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 다른 표고버섯 균사체 배양물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 보습효과가 매우 우수하고, 또한, 종래 미백 화장료 조성물에 사용 알부틴보다 미백효과가 우수하여 미용건강에 유용하게 사용될 수 있다.The present invention relates to a cosmetic composition containing shiitake mushroom mycelium culture as an active ingredient. The cosmetic composition containing the shiitake mushroom mycelium culture according to the present invention as an active ingredient is very excellent in moisturizing effect, and also excellent in whitening effect than the arbutin used in the conventional whitening cosmetic composition, and thus may be useful for beauty health.

Description

표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체를 유효성분으로 함유하는 보습 및/또는 미백용 화장료 조성물{Moisturizing and/or whitening cosmetic composition comprising polysaccharide extracted from Lentinus edodes mycelium culture product}Moisturizing and / or whitening cosmetic composition comprising polysaccharide extracted from Lentinus edodes mycelium culture product} which contains a polysaccharide extracted from shiitake mycelium culture as an active ingredient

본 발명은 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체를 유효성분으로 함유하는 보습 및/또는 미백용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
The present invention provides a cosmetic composition for moisturizing and / or whitening containing a polysaccharide extracted from shiitake mycelium culture as an active ingredient.

피부노화는 크게 두 종류로 나눌 수 있다. 그 한 가지는 내인성노화(intrinsic aging)로서 세월이 흘러감에 따라 피할 수 없는 노화 현상을 말한다. 두번째는 광노화 (photoaging)로서 오랫동안 햇빛에 노출된 얼굴, 손등, 목뒤 등의 피부에서 관찰되는 노화현상을 말하는 것으로 내인성노화 현상과 자외선에 의한 영향이 합쳐진 결과로 발생한다. 광 노화 현상은 자외선의 노출을 피하면 예방할 수 있는 피부노화 현상이다. 내인성 노화는 햇빛에 노출되지 않은 피부에서 주로 관찰된다. Skin aging can be divided into two types. One is intrinsic aging, which is an unavoidable aging phenomenon as the years go by. The second is photoaging, which refers to the aging observed in the skin of the face, back of the hand, back of the neck, etc., which has been exposed to sunlight for a long time. Light aging is a skin aging phenomenon that can be prevented by avoiding exposure to ultraviolet light. Endogenous aging is mainly observed in skin that is not exposed to sunlight.

임상적 특징은 비교적 경미하며, 잔주름, 피부건조증, 탄력감소 등을 들수있다. 그러나 광 노화의 임상적 특징은 내인성 노화에 비하여 심하고, 일찍부터 관찰된다. 내인성 노화에 비하여 굵고 깊은 주름이 발생하며, 잔주름도 많이 발생한다. Clinical features are relatively mild and include fine lines, dry skin, and reduced elasticity. However, the clinical characteristics of light aging are severe compared to endogenous aging and are observed early. Compared with endogenous aging, thick and deep wrinkles occur, and fine wrinkles also occur a lot.

햇빛에 노출된 피부에 불규칙한 색소 침착이 발생하며 일광 흑자(solar lentigo) 등의 색소질환이 증가한다. 피부가 매우 거칠고, 건조해지며, 탄력성이 감소하여 심한 경우 피부가 처지게 된다.
Irregular pigmentation occurs in the skin exposed to sunlight and pigment diseases such as solar lentigo increase. The skin is very rough, dry and less elastic, which in the worst case sags the skin.

주름은 얼굴에 존재하는 근육의 분포와 근육의 움직임에 따라 주름이 발생하게 된다. 항상 얼굴에 짜증이 섞여 있는 표정을 짓는 경우에는 이마에 내천(川)자의 굵은 주름이 생기며, 항상 웃고 있는 얼굴에는 눈 주위에 잔주름이 많은 경향이 있다. Wrinkles are caused by the distribution of muscles and the movement of muscles on the face. If you always look with a mixture of irritation on the face, the thick wrinkles of the inner neck (gawa) occurs on the forehead, and the face that is always smiling tends to have a lot of fine lines around the eyes.

또한, 유전적 소인이 얼굴의 주름살에 영향을 주고 있다. 인종에 따라 주름살 양상에 많은 차이를 보인다. 서양인에서의 주름살과 한국인에서의 주름살은 많은 차이를 보이는 경향이다. 한국인에는 서양인에 비하여 굵은 주름살이 생기는 경향이 있으며, 주로 이마, 눈 주위, 입 주위에 굵은 주름살이 두드러진다. 반면에 백인에서는 굵은 주름살보다는 이마와 뺨에 잔주름이 많이 발생한다. 한국인에서도 같은 나이 또래에 비하여 주름살이 많아 더 늙게 보이는 사람이 있다. 또한 노인이 되어도 주름살이 별로 없는 사람이 있다. 아직까지 피부주름살과 연관된 유전자가 있는지 알 수 없으나 유전적 영향을 받는 것은 분명하다.Genetic predisposition also affects wrinkles on the face. There are many differences in the appearance of wrinkles by race. Wrinkles in western people and wrinkles in Koreans tend to show a lot of difference. Koreans tend to have thicker wrinkles than Westerners, with thicker wrinkles around the forehead, eyes, and mouth. Whites, on the other hand, tend to have fine lines on their foreheads and cheeks rather than thick wrinkles. In Korea, there are people who look older because they have more wrinkles than their age. There are also people who do not have many wrinkles even when they are old people. It is not known if there are any genes associated with wrinkles, but it is clearly genetically affected.

나아가, 태양광선에 포함된 자외선이 피부의 주름살을 유발시킨다. 얼굴과 같이 자외선에 오랫동안 노출된 피부에는 주름살이 더 굵게, 더 많이 발생하는 것으로 보고된 바 있다. Furthermore, ultraviolet rays contained in sunlight cause wrinkles on the skin. Skin that has been exposed to ultraviolet light for a long time, such as the face, has been reported to produce thicker and more wrinkles.

또한, 여성의 경우 폐경 이후에는 주름살이 더욱 많이 발생하며 폐경 이후 에스트로겐을 복용하는 여성에서는 복용하지 않는 경우에 비하여 주름살의 발생이 감소한다. 이와 같은 결과로 폐경이후의 에스트로겐 감소가 피부의 주름살을 악화시킴을 알수 있으며, 에스트로겐 이외의 다른 호르몬도 중요한 역할을 하고 있는 것으로 보고된바 있다(보건산업기술동향, 29~30, 2003).
In addition, in women, wrinkles occur more frequently after menopause and incidence of wrinkles is reduced in women taking estrogen after menopause than in women who do not take it. As a result, it has been reported that the reduction of estrogen after menopause worsens wrinkles of skin, and other hormones besides estrogen have also been reported to play an important role (Health Industrial Technology Trends, 29 ~ 30, 2003).

최근, 주름살 등의 피부노화증상을 치료하기 위하여 레티노익 산(retinoic acid, vitamin A), 알파-하이드록산(alpha-hydroxy acids), 항산화제, 색소조절제 등을 국소적으로 피부에 도포하여 이용하고 있다. 수술적으로는 레이저를 이용한 박피술, 트리클로로아세트 산(trichloroacetic acid), 페놀(phenol) 등을 이용한 화학박피술, 보트리움 독소 주사법 등을 사용하고 있다. 국내에서 화장품법에서 지정하고 있는 기능성 주름 개선 원료는 레티놀, 레티닐팔미테이트, 아데노신, 폴리에톡실테이드레틴아마이드가 있다.Recently, to treat skin aging such as wrinkles, retinoic acid (vitamin A), alpha-hydroxy acids (alpha-hydroxy acids), antioxidants, and colorants are applied to the skin topically. have. Surgical methods include laser dermabrasion, trichloroacetic acid, chemical dermabrasion using phenol, and botium toxin injection. Functional wrinkle improvement raw materials specified by the Cosmetics Act in Korea include retinol, retinyl palmitate, adenosine and polyethoxysyltedinamide.

그러나, 상기 물질들은 합성된 화합물로, 웰빙을 추구하는 현대인들의 요구조건을 만족시키기 위하여 최근 화장품 분야에는 천연물의 사용이 두드러지고 있으며, 보습력과 노화 개선 기능, 항산화 효과가 우수하고, 특히 피부 노화 개선 효과 면에서 우수하다고 보고된 천연물을 이용한 화장료 조성물에 대해서도 많은 연구가 이루어지고 있다.
However, the above-mentioned materials are synthetic compounds, and in order to satisfy the requirements of modern people seeking well-being, the use of natural products has been prominent in the cosmetic field in recent years, and it has excellent moisturizing ability, aging improvement function, and antioxidant effect, and especially skin aging improvement. Many studies have been made on cosmetic compositions using natural products that are reported to be excellent in terms of effects.

표고버섯(Lentinus edodes)은 봄, 여름, 가을에 걸쳐 참나무류(상수리나무, 신갈나무, 굴참나무, 졸참나무 등), 서어나무, 밤나무 등 활엽수의 죽은 나무나 죽은 가지에서 기생하는 담자균류로써 그루터기 위에서 단생 또는 군생하는 목재 백색 부후성 버섯으로 예로부터 맛이 뛰어나 우리나라의 3대 주요 식용 버섯으로 취급되어 왔다.Shiitake mushroom (Lentinus edodes) is a fungus that grows from dead or dead branches of hardwoods such as oaks (auburn tree, oak tree, oyster oak, prunus oak), seobo, chestnut tree, etc. As a white or white woody mushroom that grows or grows in the stomach, it has been treated as one of the three major edible mushrooms in Korea.

표고버섯은 콜레스테롤(HDL)은 높이고 나쁜 콜레스테롤(LDL)은 낮추는 10대 음식 중 1순위로 2007년 1월 미국심장학회(American Heart Association)에서 발표된 바 있고, 표고버섯에는 항암, 항종양 다당체 물질인 렌티난(Lentinan)이 함유되어 있어 현재 면역력 증가 및 암세포의 증식을 억제하는 의약품으로 개발되었다. Shiitake mushrooms were ranked first among the top 10 foods that raise cholesterol (HDL) and lower bad cholesterol (LDL), and were published by the American Heart Association in January 2007. Shiitake mushrooms contain anti-cancer and anti-tumor polysaccharides. Contains lentinan (Lentinan) has been developed as a drug that currently suppresses the increase of immunity and proliferation of cancer cells.

또한, 표고버섯에는 에리타데닌(Eritadenine)이라는 성분이 있어 혈액 중의 콜레스테롤을 제거하고 혈압을 낮추는 작용을 하므로 고혈압 예방효과가 있고, 표고의 포자에는 인터페론 유도물질 함유성분으로 인플루엔자 바이러스(독감)의 감염을 예방하는 효과가 있는 것이 보고된 바 있으며, 가용성 리그닌 당단백질복합체는 에이즈바이러스(HIV)에 유효하다고 보고된바 있다.In addition, shiitake mushroom has an ingredient called ritadenine (Eritadenine), which removes cholesterol from the blood and lowers blood pressure, thereby preventing hypertension, and the spores of shiitake are infected with influenza virus (flu) as an interferon-inducing substance. It has been reported to be effective in preventing and soluble lignin glycoprotein complexes have been reported to be effective against HIV (HIV).

그 외에 강장, 이뇨, 고혈압, 신장염, 신경쇠약, 불면증, 천식, 위궤양 등의 치료에 효능이 있다고 알려져 있고, 대한민국 공개특허 제1995-0016763호에서는 표고버섯 균류를 사용하여 제조된 표고버섯 균사체 추출물을 유효성분으로 함유하는 HIV 활성 저해제를 개시하였고, 또한, 대한민국 공개특허 제2001-0089497호에서는 표고버섯 균사체 추출물이 γδT 세포 활성을 증강하는 작용을 갖는 것을 이용한 종양의 치료, 세균 감염증 또는 바이러스 감염증 치료제를 개시하고 있다.
In addition, it is known to be effective in the treatment of tonic, diuretic, hypertension, nephritis, nervous breakdown, insomnia, asthma, gastric ulcer, etc. In Korea Patent Publication No. 195-0016763 Shiitake mushroom mycelium extract prepared using shiitake fungus An HIV activity inhibitor containing an active ingredient has been disclosed, and Korean Patent Laid-Open Publication No. 2001-0089497 discloses a therapeutic agent for treating tumors, bacterial infections or viral infections using shiitake mushroom mycelium extract having an effect of enhancing γδ T cell activity. It is starting.

이에 본 발명자들은 부작용이 없고, 보습력 및/또는 미백 효과가 우수한 천연물을 이용한 화장료 조성물을 개발하기 위하여 연구하던 중, 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체가 피부 개선에 효과가 있는 것을 확인하고, 보습 및/또는 미백용 화장료 조성물으로 유용하게 사용될 수 있음을 밝힘으로써 본 발명을 완성하였다.
Accordingly, the present inventors while studying to develop a cosmetic composition using a natural product having no side effects and excellent moisturizing power and / or whitening effect, confirming that the polysaccharide extracted from shiitake mushroom mycelium culture is effective for skin improvement, and moisturizing And / or the present invention was completed by revealing that it can be usefully used as a cosmetic composition for whitening.

본 발명의 목적은 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체를 유효성분으로 함유하는 보습용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.An object of the present invention is to provide a moisturizing cosmetic composition containing a polysaccharide extracted from shiitake mushroom mycelium culture as an active ingredient.

본 발명의 다른 목적은 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체를 유효성분으로 함유하는 미백용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
Another object of the present invention is to provide a cosmetic composition for whitening containing a polysaccharide extracted from shiitake mycelium culture as an active ingredient.

상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체를 유효성분으로 함유하는 보습용 화장료 조성물을 제공을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a moisturizing cosmetic composition containing a polysaccharide extracted from shiitake mycelium culture as an active ingredient.

또한, 본 발명은 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체를 유효성분으로 함유하는 미백용 화장료 조성물을 제공한다.
The present invention also provides a cosmetic composition for whitening containing the polysaccharide extracted from shiitake mycelium culture as an active ingredient.

본 발명에 다른 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 보습효과가 매우 우수하고, 또한, 종래 미백 화장품에 사용되는 알부틴보다 미백효과가 우수하여 미용건강에 유용하게 사용될 수 있다.
The cosmetic composition containing the polysaccharide extracted from shiitake mushroom mycelium culture according to the present invention as an active ingredient is very excellent in moisturizing effect, and also excellent in whitening effect than arbutin used in conventional whitening cosmetics, which is useful for beauty health. Can be.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체를 유효성분으로 함유하는 보습용 화장료 조성물을 제공한다.
The present invention provides a moisturizing cosmetic composition containing a polysaccharide extracted from shiitake mycelium culture as an active ingredient.

또한, 본 발명에 따른 상기 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체는 표고버섯 균주를 배양한 후, 배양 여액과 균사체를 분리하고, 배양 여액을 농축한 후, 알코올을 이용하여 다당체를 추출하고, 상기 다당체를 물에 용해시켜 불용물을 제거하여 순수한 다당체를 얻을 수 있다.
In addition, the polysaccharide extracted from the shiitake mushroom mycelium culture according to the present invention, after culturing shiitake mushroom strains, the culture filtrate and mycelium are separated, the culture filtrate is concentrated, and then the polysaccharide is extracted using alcohol, Pure polysaccharides can be obtained by dissolving polysaccharides in water to remove insolubles.

구체적으로, 표고버섯 종균을 한천 배지에 접종하여 배양하고, 배양된 균주 조각을 떼어내어 액체 배지가 들어있는 플라스크에 접종하고, 배양 한 뒤, 동일 배지에서 교반속도 및 용존산소량을 균사체의 증식 속도에 따라 증가시켜 48 ~ 96시간 동안 퍼멘터 배양한다. 또한, 배양 완료 후, 여액에 알코올을 이용하여 다당체를 회수하고, 상기 다당체를 물에 용해시켜 불용물을 제거하여 불순물이 제거된 표고버섯 다당체를 얻을 수 있다.
Specifically, inoculated with shiitake mushroom seedlings in agar medium, incubated in a flask containing a liquid medium by removing the cultured strain pieces, and incubated, the stirring speed and dissolved oxygen amount in the same medium to the growth rate of the mycelia. Increase and incubate permanter for 48-96 hours. In addition, after completion of the culture, the polysaccharide is recovered by using an alcohol in the filtrate, the polysaccharide is dissolved in water to remove the insolubles to obtain the shiitake mushroom polysaccharide from which impurities are removed.

나아가, 본 발명에 따른 상기 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체는 15~30 중량부로 첨가될 수 있고, 바람직하게는 20~25 중량부로 첨가되어 사용할 수 있으나, 이에 한정하지 않는다.
Furthermore, the polysaccharide extracted from the shiitake mycelium culture according to the present invention may be added in an amount of 15 to 30 parts by weight, preferably 20 to 25 parts by weight, but is not limited thereto.

본 발명에 따른 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체를 이용하여 제조된 크림을 성인 여자 50명을 대상으로 평가한 결과, 68%의 시험자가 피부상태가 매우 좋아졌다고 응답하였고, 20%의 시험자가 피부상태가 좋아졌다고 응답한바, 피부상태 개선 및 보습효과가 우수한 것으로 확인되었다(표 2 참조).
As a result of evaluating the cream prepared from the polysaccharide extracted from shiitake mycelium culture according to the present invention in 50 adult females, 68% of the testers responded that the skin condition was very good, and 20% of the testers When the skin condition was improved, it was confirmed that the skin condition was improved and the moisturizing effect was excellent (see Table 2).

또한, 본 발명은 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체를 유효성분으로 함유하는 미백용 화장료 조성물을 제공한다.The present invention also provides a cosmetic composition for whitening containing the polysaccharide extracted from shiitake mycelium culture as an active ingredient.

나아가, 상기 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체는 30 ~ 50 중량부로 첨가될 수 있고, 바람직하게는 40 ~ 50 중량부로 첨가되어 사용할 수 있으나, 이에 한정하지 않는다.
Further, the polysaccharide extracted from the shiitake mycelium culture may be added in an amount of 30 to 50 parts by weight, preferably 40 to 50 parts by weight, but is not limited thereto.

본 발명에 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체는 종래의 미백용 화장료 조성물 및 천연물 중, 항산화 활성이 우수하다고 알려진 상백피 추출물보다 티로시나제를 저해하는 효과가 우수한 것으로 나타났고(표 4 참조), 이에, 표고버섯 균사체 배양물을 이용하여 제조된 크림을 성인 여자 50명을 대상으로 평가한 결과, 미백효과가 우수한 것으로 확인되었다(표 5 참조).
Polysaccharide extracted from shiitake mushroom mycelium culture according to the present invention was shown to have a superior effect of inhibiting tyrosinase than the lettuce extract known to have excellent antioxidant activity among the conventional cosmetic compositions for whitening and natural products (see Table 4). As a result of evaluating 50 adult female creams prepared using shiitake mycelium cultures, it was confirmed that the whitening effect was excellent (see Table 5).

상기 화장료 조성물은 로션, 연고, 겔, 크림, 패치 또는 분무제 등이 있으나 여기에 국한되는 것은 아니다. 본 발명의 상기 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체를 함유하는 보습 및/또는 미백용 화장료 조성물을 제조함에 있어서, 통상적으로 함유되는 피부 외용제 조성물에 본 발명의 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체가 3 내지 30 중량부, 바람직하게는 5 또는 20 중량부로 첨가할 수 있다. The cosmetic composition may include, but is not limited to, lotions, ointments, gels, creams, patches or sprays. In preparing the moisturizing and / or whitening cosmetic composition containing the polysaccharide extracted from the shiitake mushroom mycelium culture of the present invention, the polysaccharide extracted from the shiitake mushroom mycelium culture of the present invention is included in the composition for external application for skin. It may be added in 3 to 30 parts by weight, preferably 5 or 20 parts by weight.

본 발명의 화장료 조성물에는 본 발명의 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장료 조성물에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. In the cosmetic composition of the present invention, in addition to the polysaccharide extracted from the shiitake mycelium culture of the present invention, fatty substances, organic solvents, solubilizers, thickening agents and gelling agents, softeners, antioxidants, suspending agents, stabilizers, foaming agents (foaming agents) ), Fragrances, surfactants, water, ionic or nonionic emulsifiers, fillers, metal ion sequestrants and chelating agents, preservatives, vitamins, blockers, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, lipids It may contain adjuvants commonly used in the field of dermatology, such as vesicles or any other ingredients conventionally used in cosmetic compositions.

또한 상기 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.
The ingredients may also be introduced in amounts generally used in the field of dermatology.

이하, 본 발명을 제조예 및 실시예에 의해 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described by production examples and examples.

단, 하기 제조예 및 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 제조예 및 실시예에 한정되는 것은 아니다.
However, the following Preparation Examples and Examples are merely to illustrate the present invention, and the content of the present invention is not limited to the following Preparation Examples and Examples.

<< 제조예Manufacturing example 1> 표고버섯 균주의 배양 1> Culture of Shiitake Strains

표고버섯 균주(HKSY00025)는 대전 도마시장에서 구입한 자실체에서 조직을 분리하여 사용하였다.Shiitake mushroom strain (HKSY00025) was used to separate the tissue from the fruiting body purchased in Daejeon Doma market.

균주를 액체 배양하기 위하여 종균을 PDA(MERK 社) 한천 배지에 접종하여 20~30 ℃에서 10~20일간 배양하였다. In order to liquid culture the strains, the seed was inoculated in PDA (MERK Co., Ltd.) agar medium and incubated for 10-20 days at 20-30 ℃.

균주의 지름이 약 50~60 mm로 배양되었을 때, PDA 플레이트에서 조직을 콜크보러를 이용하여 지름이 5 mm씩 10조각을 떼어내어 글루코스 4 g, 효모액기스 4 g, 맥아 추출물 10 g/ℓ)로 구성된 YMG 액체 배지가 들어있는 플라스크에 접종하고, 25~30 ℃에서 5~10일간 진탕배양 하였다.When the diameter of the strain was incubated to about 50-60 mm, the tissue was separated from the PDA plate by using Corkborough to remove 10 pieces of 5 mm in diameter, 4 g of glucose, 4 g of yeast extract, and 10 g / l of malt extract). Inoculated into a flask containing the YMG liquid medium consisting of, and incubated for 5-10 days at 25-30 ℃.

상기 액체 배지에서 배양된 종균을 상기 액체 배지와 동일한 YMG 배지를 사용하고, 25 ℃에서 3~10일간 교반속도는 150 rpm, 초기 산소량은 0.5 vvm의 조건으로 배양을 시작하여, 교반속도 및 용존산소량을 균사체의 증식 속도에 따라 증가시켜 48 ~ 96시간 동안 퍼멘터 배양하였다.The seed culture incubated in the liquid medium using the same YMG medium as the liquid medium, and incubation at 25 ℃ for 3 to 10 days at a stirring speed of 150 rpm, the initial amount of oxygen 0.5 vvm, the stirring speed and dissolved oxygen amount Was increased according to the growth rate of the mycelium and cultured for permanter for 48 to 96 hours.

배양 완료 후, 배양물의 점도가 높아 세포분리에 어려움이 있으므로 메쉬 크기가 큰 여과지부터 메쉬 크기가 작은 여과지(10 ~ 35 메쉬)를 사용하여 여과한 후, 여액을 수거하였다. 이때, 여과지는 whatmann-113을 사용하였다.After completion of the culture, since the viscosity of the culture was difficult to separate the cells, the filter paper was collected from the filter paper with a large mesh size using a filter paper with a small mesh size (10 to 35 mesh), and then the filtrate was collected. At this time, whatmann-113 was used as a filter paper.

상기 수거된 여액을 에탄올을 이용하여 다당체를 회수한 후, 상기 다당체를 물에 용해시켜 불용물을 제거하여 불순물이 제거된 표고버섯 다당체를 얻었다.
The collected filtrate was recovered from polysaccharides using ethanol, and then the polysaccharide was dissolved in water to remove insolubles, thereby obtaining shiitake mushroom polysaccharides from which impurities were removed.

<< 실시예Example 1> 표고버섯 균사체 배양물을 이용한 피부 보습용  1> Moisturizing skin using shiitake mycelium culture 화장료Cosmetics 조성물의 제조 Preparation of the composition

상기 제조예 1에서 제조된 표고버섯 배양액을 하기 표 1의 화장료 조성물 원료들과 혼합하여 피부개선 및 보습효과를 나타내는 화장료 조성물을 제조하였다.
Shiitake mushroom culture solution prepared in Preparation Example 1 was mixed with the cosmetic composition raw materials of Table 1 to prepare a cosmetic composition exhibiting skin improvement and moisturizing effect.

원료명Raw material name 무게(mg)Weight (mg) 표고버섯 균사체 배양물Shiitake mycelium culture 2020 밀납Wax 4.54.5 폴리솔베이트-60Polysorbate-60 2.02.0 솔비탄세스퀴놀레이트Sorbitan sesquinolate 0.50.5 유동파라핀Liquid paraffin 7.07.0 스쿠알렌Squalene 10.010.0 솔비탄 스테아레이트Sorbitan stearate 1.51.5 PEG-400 스테아레이트PEG-400 Stearate 1.51.5 친유성 모노스테아린산 글리세린Lipophilic monostearic acid glycerin 0.50.5 스테아린산Stearic acid 1.51.5 BG(부틸렌글리콜)BG (butylene glycol) 3.03.0 PG(프로필렌글리콜)PG (propylene glycol) 3.03.0 TEA(트리에탄올아민)TEA (triethanolamine) 0.20.2 보존제Preservative 미량a very small amount 색소Pigment 미량a very small amount 향료Spices 미량a very small amount 정제수Purified water 잔량Balance

<< 비교예Comparative example 1> 피부개선 및 보습효과 측정 1> Skin improvement and moisturizing effect measurement

상기 실시예 1에서 표고버섯 균사체 배양물을 사용하지 않는 것을 제외하고는 원료를 동일한 양을 사용하여 표고버섯 균사체 배양물이 포함되지 않은 크림을 제조하고, 건성, 정상, 복합성 피부를 가진 20~50대 여성을 대상으로 얼굴을 반으로 나누어 세안 후, 1일 1회 20일 동안 한쪽 면에는 실시예 1의 크림을 도포하고, 다른 한쪽 면에는 비교예 1의 크림을 도포하여 피부상태를 확인하였다. 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
Except not using shiitake mycelium culture in Example 1 to prepare a cream containing shiitake mushroom mycelium culture using the same amount of raw materials, 20 ~ 50 having dry, normal, complex skin After washing the face in half for women, the skin of Example 1 was coated on one side and the cream of Comparative Example 1 was applied on the other side for 20 days. The results are shown in Table 2 below.

구 분division 피부상태개선Skin condition improvement 조사항목Survey item 인원수Number of people %%
실시예 1

Example 1
매우 좋다very good 3434 6868
좋다good 1010 2020 보통이다is average 44 88 그저 그렇다so so 22 44
비교예 1

Comparative Example 1
매우 좋다very good 00 00
좋다good 1010 2020 보통이다is average 1818 3636 그저 그렇다so so 2222 4444

표 2에 나타낸 바와 같이, 비교예 1의 표고버섯 균사체 배양물이 첨가되지 않은 크림을 도포한 경우, 피부상태가 좋아졌다고 느낀 시험자는 20%로 나타난 반면에 본 발명에 따른 표고버섯 균사체 배양물을 이용하여 제조된 크림을 도포한 경우, 68%의 시험자가 피부상태가 매우 좋아졌다고 응답하였고, 20%의 시험자가 피부상태가 좋아졌다고 응답하였다.As shown in Table 2, when the cream without the shiitake mycelium culture of Comparative Example 1 was applied, 20% of the test subjects felt that the skin condition was improved, while the shiitake mycelium culture according to the present invention was applied. When applying the cream prepared using, 68% of the testers responded that the skin condition was very good, and 20% of the testers responded that the skin condition improved.

따라서, 본 발명의 표고버섯 균사체 배양물은 피부상태 개선 및 보습효과가 우수한 것으로 확인되므로 화장료 조성물으로 유용하게 사용될 수 있다.
Therefore, shiitake mushroom mycelium culture of the present invention can be usefully used as a cosmetic composition because it is confirmed that the skin condition improvement and moisturizing effect is excellent.

<< 실험예Experimental Example 1>  1> 티로시나제Tyrosinase 억제효과 측정 Measurement of inhibitory effect

상기 제조예 1에서 제조된 표고버섯 균사체 배양물의 미백 활성과 관련된 효소인 티로시나제 활성 억제효과를 측정하기 위하여 머쉬룸 티로시나제를 이용하여 측정하였다. 대조군으로는 상백피 추출물과 종래의 미백 화장료 조성물의 주원료인 알부틴을 사용하였고, 하기 실험을 수행하였다.In order to measure the inhibitory effect of tyrosinase activity, an enzyme related to the whitening activity of shiitake mushroom mycelium culture prepared in Preparation Example 1, it was measured using mushroom tyrosinase. As a control, Arbutin, the main ingredient of the extract of Morus alba and the conventional whitening cosmetic composition, was used.

표고버섯 균사체 배양물, 상백피 추출물 및 알부틴을 96웰 플레이트에 각각 15 ㎕씩 넣은 후, 50 mM 인산완충용액(pH 6.5)을 150 ㎕ 및 1.5 mM L-티로신 용액을 25 ㎕씩 첨가하였다. 상기 혼합물에 머쉬룸 티로시나제(시그마알드리치 사(社))를 10 ㎕ 첨가하여 37 ℃에서 20분간 반응시킨 후, 마이크로플레이트 리더(Microplate reader; VERSA max/Molecular Devices 사(社)/미국)를 사용하여 490 nm에서 흡광도를 측정하였다.15 µl of shiitake mushroom mycelium culture, lettuce extract and arbutin were put into 96 well plates, respectively, and 150 µl of 50 mM phosphate buffer solution (pH 6.5) and 25 µl of 1.5 mM L-tyrosine solution were added. 10 μl of mushroom tyrosinase (Sigma-Aldrich Co., Ltd.) was added to the mixture and reacted at 37 ° C. for 20 minutes, followed by 490 using a microplate reader (VERSA max / Molecular Devices, USA). Absorbance was measured at nm.

티로시나제에 대한 저해율은 하기 수학식 1에 의해 계산되며, IC50값은 티로시나제 효소활성을 50% 저해하는 농도를 나타내고, 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다.
The inhibition rate for tyrosinase is calculated by Equation 1 below, and the IC 50 value represents a concentration that inhibits tyrosinase enzyme activity by 50%, and the results are shown in Table 3 below.

Figure 112010088103072-pat00001
Figure 112010088103072-pat00001

상기 수학식 1에 있어서,In Equation 1,

A: 시료를 넣은 웰의 반응 전 흡광도A: Absorbance before reaction of the well into which the sample was placed

B: 시료를 넣은 웰의 반응 후 흡광도B: Absorbance after the reaction of the well into which the sample was placed

C: 시료를 넣지 않은 웰의 반응 전 흡광도C: Absorbance before reaction of the well without sample

D: 시료를 넣지 않은 웰의 반응 후 흡광도
D: Absorbance after reaction of the well without sample

시료sample 머쉬룸 티로시나제 저해효과(IC50)Inhibitory effect of mushroom tyrosinase (IC 50 ) 알부틴Arbutin 0.35 mg/㎖0.35 mg / ml 상백피 추출물Eucalyptus extract 1.0 mg/㎖1.0 mg / ml 제조예 1
(표고버섯 균주 배양물)
Production Example 1
Shiitake mushroom strain culture
0.18 mg/㎖0.18 mg / ml

상기 표 3에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 표고버섯 균사체 배양물은 종래의 미백용 화장료 조성물에 많이 사용되는 알부틴(IC50=0.35 mg/㎖)보다 IC50값이 0.18 mg/㎖로 티로시나제 저해효과가 2배 이상 우수한 것으로 나타냈고, 또한, 티로시나제 저해효과가 천연물인 상백피 추출물(IC50=1.0 mg/㎖)보다 IC50값이 0.18 mg/㎖로 약 6 배 우수한 것으로 확인되었다.As shown in Table 3, the shiitake mushroom mycelium culture according to the present invention has an IC 50 value of 0.18 mg / ml than that of arbutin (IC 50 = 0.35 mg / ml), which is much used in conventional cosmetic compositions for whitening. The effect was shown to be two times better, and the tyrosinase inhibitory effect was found to be about 6 times better at IC 50 value of 0.18 mg / ml than the extract of natural extract, IC 50 = 1.0 mg / ml.

따라서, 본 발명에 표고버섯 균사체 배양물은 종래의 미백용 화장료 조성물 및 천연물 중, 항산화 활성이 우수하다고 알려진 상백피 추출물보다 티로시나제를 저해하는 효과가 우수한 것으로 나타나 미백용 화장료 조성물에 유용하게 사용될 수 있다.
Therefore, the shiitake mushroom mycelium culture according to the present invention has a superior effect of inhibiting tyrosinase in the conventional whitening cosmetic composition and natural products, which is known to have excellent antioxidant activity, and thus can be usefully used in the cosmetic composition for whitening.

<< 실시예Example 2> 표고버섯 균사체 배양물을 이용한 피부 미백용  2> Skin whitening using shiitake mycelium culture 화장료Cosmetics 조성물의 제조 Preparation of the composition

상기 제조예 1에서 제조된 표고버섯 배양액을 하기 표 4의 화장료 조성물 원료들과 혼합하여 피부개선 및 보습효과를 나타내는 화장료 조성물을 제조하였다.
Shiitake mushroom culture solution prepared in Preparation Example 1 was mixed with the cosmetic composition raw materials of Table 4 to prepare a cosmetic composition exhibiting skin improvement and moisturizing effect.

원료명Raw material name 무게(mg)Weight (mg) 표고버섯 균사체 배양물Shiitake mycelium culture 40.040.0 스테아릴알콜Stearyl alcohol 7.07.0 스테아린산Stearic acid 2.02.0 스테아린산콜레스테롤Stearic Acid Cholesterol 2.52.5 스쿠알렌Squalene 4.54.5 2-옥틸도데실알콜2-octyldodecyl alcohol 6.06.0 폴리옥시에틸렌(25몰)
-옥틸도데실알콜
Polyoxyethylene (25 mol)
Octyldodecyl alcohol
2.52.5
글리세릴
모노스테아린산에스테르
Glyceryl
Monostearic acid ester
2.02.0
PG(프로필레늘리콜)PG (Propylene Recall) 4.04.0 정제수Purified water 적당량Proper amount

<< 비교예Comparative example 2> 피부 미백 효과 측정 2> skin whitening effect measurement

상기 실시예 2에서 표고버섯 균사체 배양물을 사용하지 않는 것을 제외하고는 원료를 동일한 양을 사용하여 표고버섯 균사체 배양물이 포함되지 않은 크림을 제조하고, 건성, 정상, 복합성 피부를 가진 20~50대 여성을 대상으로 얼굴을 반으로 나누어 세안 후, 1일 1회 20일 동안 한쪽 면에는 실시예 2의 크림을 도포하고, 다른 한쪽 면에는 비교예 2의 크림을 도포하여 피부상태를 확인하였다. 그 결과를 하기 표 5에 나타내었다.
Except not using shiitake mycelium culture in Example 2 to prepare a cream containing shiitake mushroom mycelium culture using the same amount of raw material, 20 ~ 50 having dry, normal, complex skin After washing the face in half for women, the skin of Example 2 was applied to one side and the cream of Comparative Example 2 was applied to the other side for 20 days once a day. The results are shown in Table 5 below.

구 분division 피부상태개선Skin condition improvement 조사항목Survey item 인원수Number of people %%
실시예 2

Example 2
매우 좋다very good 3636 7272
좋다good 88 1616 보통이다is average 55 1010 그저 그렇다so so 1One 55
비교예 2

Comparative Example 2
매우 좋다very good 00 00
좋다good 1515 3030 보통이다is average 1717 3434 그저 그렇다so so 1818 3636

표 5에 나타낸 바와 같이, 비교예 2의 표고버섯 균사체 배양물이 첨가되지 않은 크림을 도포한 경우, 미백 효과가 좋다고 응답한 시험자는 30%로 나타난 반면에 본 발명에 따른 표고버섯 균사체 배양물을 이용하여 제조된 크림을 도포한 경우, 72%의 시험자가 미백 효과가 매우 좋다고 응답하였고, 16%의 시험자가 미백 효과가 좋다고 응답하였다.As shown in Table 5, when the cream without the shiitake mycelium culture of Comparative Example 2 was applied, 30% of the testers responded that the whitening effect was good, whereas the shiitake mycelium culture according to the present invention was used. When applying the cream prepared using, 72% of the testers answered that the whitening effect was very good, and 16% of the testers answered that the whitening effect was good.

따라서, 본 발명의 표고버섯 균사체 배양물은 피부상태 개선 및 보습효과뿐만 아니라 미백효과가 우수한 것으로 확인되므로 화장료 조성물으로 유용하게 사용될 수 있다.
Therefore, the shiitake mushroom mycelium culture of the present invention can be usefully used as a cosmetic composition because it is confirmed that the skin condition improvement and moisturizing effect as well as the whitening effect is excellent.

<< 제제예Formulation example 1>  1> 화장료Cosmetics 조성물의 제조 Preparation of the composition

본 발명자들은 상기 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 하기와 같이 제조하였다.
The present inventors prepared a cosmetic composition containing the polysaccharide extracted from the shiitake mushroom mycelium culture as an active ingredient as follows.

1. 크림의 제조1. Preparation of Cream

세토스테아릴알코올 2.8 중량부Cetostearyl alcohol 2.8 parts by weight

밀납 2.6 중량부2.6 parts by weight of beeswax

스테아린산 1.4 중량부Stearic acid 1.4 parts by weight

친유형모노스테아린산글리세린 2 중량부2 parts by weight of glycerol phosphate monostearate

피이지-100 스테아레이트 1 중량부Fiji-100 Stearate 1 part by weight

세스퀴올레인산소르비탈 1.4 중량부Sesquioleate sorbitan 1.4 parts by weight

호호바오일 4 중량부4 parts by weight of jojoba oil

스쿠알란 3.8 중량부Squalane 3.8 parts by weight

폴리소르베이트 60 1.1 중량부Polysorbate 60 1.1 parts by weight

마카다이아오일 2 중량부2 parts by weight of macadamia oil

초산토코페롤 0.2 중량부Tocopherol acetate 0.2 parts by weight

메칠폴리실록산 0.4 중량부0.4 parts by weight of methylpolysiloxane

에칠파라벤 0.1 중량부0.1 parts by weight of ethyl paraben

프로필파라벤 0.1 중량부0.1 parts by weight of propylparaben

Euxyl K-400 0.1 중량부Euxyl K-400 0.1 part by weight

1,3-부칠렌글리콜 7 중량부1,3-butylene glycol 7 parts by weight

메칠파라벤 0.05 중량부Methyl paraben 0.05 parts by weight

글리세린 6 중량부Glycerin 6 parts by weight

d-판데놀 0.2 중량부0.2 parts by weight of d-pandenol

표고버섯 균사체 배양물 다당체 4.6 중량부Shiitake mushroom mycelium culture polysaccharide 4.6 parts by weight

트리에탄올아민 0.2 중량부0.2 parts by weight of triethanolamine

pt 41891 0.2 중량부pt 41891 0.2 parts by weight

p-H2O 46.05 중량부
p-H2O 46.05 parts by weight

2. 로션의 제조 2. Preparation of Lotion

세토스테아릴알코올 1.6 중량부Cetostearyl alcohol 1.6 parts by weight

스테아린산 1.4 중량부Stearic acid 1.4 parts by weight

친유형모노스테아린산글리세린 1.8 중량부Lipophilic monostearic acid 1.8 parts by weight

피이지-100 스테아레이트 2.6 중량부Fiji-100 Stearate 2.6 parts by weight

세스퀴올레인산소르비탈 0.6 중량부0.6 parts by weight of sesquioleate sorbate

스쿠알렌 4.8 중량부4.8 parts by weight of squalene

마카다이아오일 2 중량부2 parts by weight of macadamia oil

호호바오일 2 중량부 2 parts by weight of jojoba oil

초산토코페롤 0.4 중량부Tocopherol Acetate 0.4 parts by weight

메칠폴리실록산 0.2 중량부0.2 parts by weight of methylpolysiloxane

에칠파라벤 0.1 중량부0.1 parts by weight of ethyl paraben

프로필파라벤 0.1 중량부0.1 parts by weight of propylparaben

1,3-부칠렌글리콜 4 중량부1,3-butylene glycol 4 parts by weight

메칠파라벤 0.1 중량부0.1 parts by weight of methyl paraben

산탄검 0.1 중량부Xanthan Gum 0.1 parts by weight

글리세린 4 중량부Glycerin 4 parts by weight

d-판데놀 0.15 중량부0.15 parts by weight of d-pandenol

알란토인 0.1 중량부Allantoin 0.1 part by weight

표고버섯 균사체 배양물 다당체 3.5 중량부Shiitake mushroom mycelium culture polysaccharide 3.5 parts by weight

카르보내(2% aq. Sol) 4 중량부4 parts by weight of carbone (2% aq.Sol)

트리에탄올아민 0.15 중량부 0.15 parts by weight of triethanolamine

에탄올 3 중량부3 parts by weight of ethanol

pt 41891 0.1 중량부pt 41891 0.1 parts by weight

p-H20 48.3 중량부
p-H20 48.3 parts by weight

Claims (8)

삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체를 유효성분으로 함유하는 미백용 화장료 조성물.
A whitening cosmetic composition containing the polysaccharide extracted from shiitake mycelium culture as an active ingredient.
제 5항에 있어서, 상기 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체는 표고버섯 균주를 배양한 후, 배양 여액과 균사체를 분리하고, 배양 여액을 농축한 후, 알코올을 이용하여 다당체를 추출하고, 상기 다당체를 물에 용해시켜 불용물을 제거하여 얻는 것을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물.
The method according to claim 5, wherein the polysaccharide extracted from the shiitake mycelium culture, after culturing shiitake mushroom strains, the culture filtrate and mycelium are separated, the culture filtrate is concentrated, and then the polysaccharide is extracted using alcohol, A whitening cosmetic composition, characterized in that the polysaccharide is dissolved in water to obtain an insoluble matter.
제 5항에 있어서, 상기 표고버섯 균사체 배양물은 30 ~ 60 중량부로 첨가되는 것을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물.
The cosmetic composition for whitening according to claim 5, wherein the shiitake mushroom mycelium culture is added in an amount of 30 to 60 parts by weight.
제 7항에 있어서, 상기 표고버섯 균사체 배양물은 40 ~ 50 중량부로 첨가되는 것을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물.The whitening cosmetic composition according to claim 7, wherein the shiitake mycelium culture is added in an amount of 40 to 50 parts by weight.
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