KR101197541B1 - Ｎ-말단이 치환된 그렐린 유사체 - Google Patents

Ｎ-말단이 치환된 그렐린 유사체 Download PDF

Info

Publication number
KR101197541B1
KR101197541B1 KR1020097008570A KR20097008570A KR101197541B1 KR 101197541 B1 KR101197541 B1 KR 101197541B1 KR 1020097008570 A KR1020097008570 A KR 1020097008570A KR 20097008570 A KR20097008570 A KR 20097008570A KR 101197541 B1 KR101197541 B1 KR 101197541B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
delete delete
aib
ghrelin
seq
inp
Prior art date
Application number
KR1020097008570A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20090075838A (ko
Inventor
젱 신 동
Original Assignee
입센 파마 에스.에이.에스
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 입센 파마 에스.에이.에스 filed Critical 입센 파마 에스.에이.에스
Publication of KR20090075838A publication Critical patent/KR20090075838A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101197541B1 publication Critical patent/KR101197541B1/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/60—Growth-hormone releasing factors (GH-RF) (Somatoliberin)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2/00—Peptides of undefined number of amino acids; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/06—Anti-spasmodics, e.g. drugs for colics, esophagic dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/08—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for nausea, cinetosis or vertigo; Antiemetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/10—Laxatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/12—Antidiarrhoeals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/08—Bronchodilators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/10—Drugs for disorders of the endocrine system of the posterior pituitary hormones, e.g. oxytocin, ADH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/10—Drugs for disorders of the endocrine system of the posterior pituitary hormones, e.g. oxytocin, ADH
    • A61P5/12—Drugs for disorders of the endocrine system of the posterior pituitary hormones, e.g. oxytocin, ADH for decreasing, blocking or antagonising the activity of the posterior pituitary hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Abstract

본 발명은 GHS 수용체에서 활성을 나타내며, 하기 식으로 표시되는, 안정성이 우수한 그렐린의 펩타이드 유사체, 그의 약학적으로 허용가능한 염, 및 유효량의 상기 화합물을 포함하는 약학적 조성물과 이의 치료적 및 치료 이외의 용도를 포함하며, 하기 식에서 A1 내지 A28, R1 및 R2는 명세서에 정의되어 있으며, 단 N-말단 아미노산은 Inp, 1-Apc 및 4-Apc로 이루어진 군으로부터 선택되어야 한다:
(R2)-A1-A2-A3-A4-A5-A6-A7-A8-A9-A10-A11-A12-A13-A14-A15-A16-A17-A18-A19-A20-A21-A22-A23-A24-A25-A26-A27-A28-R1

Description

Ｎ-말단이 치환된 그렐린 유사체{ANALOGS OF GHRELIN SUBSTITUTED AT THE N-TERMINAL}
본 발명은 그렐린의 펩디틸 유사체 및 이의 치료 용도에 관한 것이다.
그렐린은 최근 발견된 식욕유발 호르몬으로, 단백질분해 처리되어 하기 서열의 펩타이드로 제조되는, 프리프로호르몬으로서 생산된다: H-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-Ser-Pro-Glu-His-Gln-Arg-Val-Gln-Gln-Arg-Lys-Glu-Ser-Lys-Lys-Pro-Pro-Ala-Lys-Leu-Gln-Pro-Arg-NH2(Kojima, M. et al ., Nature, (1999), 402(6762):656-60; 서열번호 1). 그렐린은 위의 기저부 내부에 정렬되어 있는 상피 세포에 의해 생산되며, 식욕을 자극하는 기능을 하며, 그 수준은 식전에 증가하고, 식후에 감소한다.
수종의 포유류와 비-포유류 종 유래의 그렐린의 천연 구조가 공지되어 있다(Kaiya, H. et al ., J. Biol . Chem ., (2001), 276(44):40441-8; 및 국제 특허 출원 PCT/JP00/04907 [WO 01/07475]). 그렐린에 존재하는 코어 영역은, 3번째 위치의 세린이 n-옥탄산으로 정상적으로 변형된 4개의 N-말단 아미노산을 포함하며, GHS 수용체에서 관찰되는 활성을 담당하고 있다. n-옥탄산에 의한 아실화 외에도, 천연 그렐린은 또한 n-데칸산으로 아실화될 수 있다(Kaiya, H. et al ., J. Biol . Chem., (2001), 276(44):40441-8).
비만 개체의 혈장내 그렐린 수준은 좀더 마른 체형의 개체 보다 낮으며, 마른 개체에서의 그렐린 수준은 하루 중 자정부터 새벽까지 증가하는데, 이는 비만 개체의 순환계 결함을 의미한다(Yildiz, B. O. et al., Proc . Natl . Acad . Sci . USA, (2004), 101(28):10434-9). 식이 장애인 식욕 감퇴를 앓고 있는 개체와 암 유발성 악액질을 앓고 있는 환자들에서 혈장내 그렐린 수치가 높은 것으로 알려져 있다(Garcia, J. M. et al., J. Clin . Endocrin . Metab ., (2005), 90(5):2920-6).
그렐린은, 동물과 인간 둘다에서, 뇌하수체 전엽, 주로 시상하부 수준에서 GH 분비촉진성(GHS) 수용체(GHS-R)와의 상호작용을 통해 성장 호르몬(GH) 분비를 강하게 자극한다(Ukkola, O. et al ., Ann . Med ., (2002), 34(2):102-8; 및 Kojima, M. et al ., Nature, (1999), 402(6762):656-60). 그렐린의 GH-분비 활성은 뇌하수체, 주로 시상하부 수준에서 GHS 수용체의 활성화에 의해 매개된다(Kojima, M. et al., Nature, (1999), 402(6762):656-60).
그렐린이 GHS 수용체에 대한 천연 리간드라는 사실이 밝혀지기 전까지는, 뇌하수체 소마토트롭에서의 박동성 GH 방출(pulsatile release)이 2가지 시상하부 뉴로펩타이드인 GH-방출성 호르몬(GHRH)과 소마토스타틴에 의해 조절되는 것으로 알려져 있었다. GHRH는 GH의 분비를 촉진시키는 반면, 소마토스타틴은 GH의 분비를 저해한다(Frohman, L. A. et al ., Endocr . Rev ., (1986), 7(3):223-53; 및 Strobl, J. S. et al., Pharmacology Review (1994) 46:1-34). 그렐린은 기능성 소마토스타틴 길항제로서도 동시에 작용하면서 GHRH-분비성 뉴런의 활성을 강화하는 것으로 보인다(Ghigo, E. et al., Eur . J Endocri ., (1997), 136(5):445-60).
또한, 뇌하수체 소마토트롭에서의 GH 분비는 GH-분비성 펩타이드(GHRP)에 의해 조절될 수 있다. 헥사펩타이드인 His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-아미드(GHRP-6; 서열번호 27)는 사람 등의 여러 종들에서 농도 의존적인 방식으로 소마토트롭에서 GH를 방출시키는 것으로 밝혀졌다(Bowers, C. Y. et al ., Endocrinology , (1984), 114(5):1537-45). 이후의 GHRP-6에 대한 화학적 연구를 통해, GHRP-1, GHRP-2 및 헥사렐린 등의 다른 강력한 합성 GH 분비촉진 물질들이 동정되었다(Cheng, K. et al., Endocrinology , (1989), 124(6):2791-8; Bowers, C. Y., Novel GH - Releasing Peptides, Molecular and Clinical Advances in Pituitary Disorders, Ed: Melmed, S., Endocrine Research and Education, Inc., Los Angeles, CA, USA, (1993), 153-7; 및 Deghenghi, R. et al., Life Sci., (1994), 54(18):1321-8). 이들 3가지 화합물의 구조는 다음과 같다:
GHRP-1 Ala-His-D-(2')-Nal-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2)
GHRP-2 D-Ala-D-(2')-Nal-Ala-Trp-D-Nal-Lys-NH2) 및
헥사렐린 His-D-2-MeTrp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2).
GHS는 GHRH의 기전과는 다른 기전에 의해 GH의 분비를 자극할 수 있다(Bowers, C. Y. et al ., Endocrinology, (1984), 114(5):1537-45; Cheng, K. et al., Endocrinology, (1989), 124(6):2791-8; Bowers, C. Y., Novel GH-Releasing Peptides, Molecular and Clinical Advances in Pituitary Disorders, Ed: Melmed, S., Endocrine Research and Education, Inc., Los Angeles, CA, USA, (1993), 153-7; 및 Deghenghi, R. et al., Life Sci., (1994), 54(18):1321-8).
펩티드 GHS의 낮은 경구 생체이용성(<1%)으로 인해 뇌하수체에서 GHRP-6의 작용을 모방하는 비-펩티드 화합물에 대한 연구를 고무시켰다. 수종의 벤조락탐 및 스피로인단이 인간을 포함하여 다양한 동물 종에서의 GH 방출을 자극하는 것으로 보고되었다(Smith, R. G. et al., Science, (1993), 260(5114):1640-3; Patchett, A. A. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, (1995), 92(15):7001-5; Chen, M.-H. et al., Bioorg. Mod. Chem. Letts., (1996), 6(18):2163-8). 작은 스피로인단의 예는 MK-0677이다(Patchett, A. A. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, (1995), 92(15):7001-5):
Figure 112009025324177-pct00001
GHS(펩타이드 및 비-펩타이드 둘다)의 작용은 특이적인 GHS 수용체에 의해 매개되는 것으로 보인다(GHSR; Howard, A. D. et al ., Science, (1996), 273(5277):974-7; 및 Pong, S. S. et al., Mol. Endocri., (1996), 10(1):57-61). GHS 수용체는 다양한 포유류 종의 뇌하수체와 시상하부(GHSR1a)에 존재하며, GH-분비성 호르몬 수용체와는 구분된다. 또한, GHS 수용체는 중추 신경계의 다른 영역과 말초 조직, 예컨대, 부신, 갑상선, 심장, 폐, 신장 및 근육에서도 검출되었 다(Chen, M.-H. et al ., Bioorg . Med . Chem . Letts ., (1996), 6(18):2163-9; Howard, A. D. et al., Science, (1996), 273(5277):974-7; Pong, S. S. et al., Mol. Endocri., (1996), 10(1):57-61; Guan, X.-M. et al., Mol. Brain Res., (1997), 48(1):23-9; 및 McKee, K. K. et al ., Genomics, (1997), 46(3):426-34). GHSR1a의 절단된 형태(truncated version)도 보고되고 있다(Howard, A. D. et al ., Science, (1996), 273(5277):974-7).
GHS 수용체는 G-단백질과 커플링을 이룬 수용체이다. GHS 수용체의 활성화의 결과로는, 포타슘 채널의 탈분극 및 저해, 이노시톨 트리포스페이트(IP3)의 세포간 농도 증가 및 세포내 칼슘 농도의 일시적 증가를 포함한다(Pong, S. S. et al., Mol. Endocri., (1996), 10(1):57-61; Guan, X.-M. et al., Mol. Brain Res., (1997), 48(1):23-9; 및 McKee, K. K. et al., Genomics, (1997), 46(3):426-34).
그렐린 및 이의 유사체 등의 GHS 분자들은 다양한 여러가지 치료학적 용도(미국 특허 6,566,337; Inui, A., FASEB J., (2004), 18(3):439-56; Muller, E. E. et al., Neurobiol. Aging, (2002), 23(5):907-19; Casanueva, F. F. et al., Trends Endocrinol. Metab., (1999), 10(1):30-8; 및 Ankerson, M. et al., Drug Discovery Today , (1999), 4:497-506) 및 진단학적 용도를 가지고 있다. GHS 수용체에서 작용제(agonist) 작용을 보이는 화합물은, GH-결핍 상태의 개선(미국 특허 6,861,409 및 6,967,237; 및 Casanueva, F. F. et al., Trends Endocrinol . Metab, (1999), 10(1):30-8), 근육량 및/또는 체력 증진(미국 특허 6,861,409 및 6,967,237)(Ankerson, M. et al ., Drug Discovery Today , (1999), 4:497-506), 골 밀도 향상(미국 특허 6,861,409, 6,967,237 및 6,251,902; 및 Sibilia, V. et al., Growth Horm . IGF Res., (1999), 9(4):219-27), 골다공증 치료(국제 특허 출원번호 PCT/IB96/01353 [WO 97/24369] 및 PCT/IB98/00873 [WO 98/58947]; 및 Casanueva, F. F. et al., Trends Endocrinol . Metab ., (1999), 10(1):30-8), 성기능부전 극복(미국 특허 6,967,237; 및 Casanueva, F. F. et al., Trends Endocrinol . Metab., (1999) 10(1):30-8), 심혈관 질환 치료(국제 특허 출원번호 PCT/IB96/01353 [WO 97/24369] 및 PCT/IB98/00873 [WO 98/58947]; 미국 특허 6,251,902; De Gennaro Colonna, V. et al., Eur . J. Pharmacol., (1997), 334(2-3):201-7; 및 Casanueva, F. F. et al., Trends Endocrinol . Metab ., (1999), 10(1):30-8), 관절염 통증 경감(Granado, M., Am . J. Endo. Metab., (2005), 288:486-92), 알츠하이머 질환의 개시 예방 또는 완화(미국 특허 6,686,359 및 6,566,337) 및/또는 전신 홍반성 루푸스나 염증성 장 질환, 예, 크론 질환 또는 궤양성 직장염 치료(미국 특허 공개번호 2002/0013320)용으로 알려져 있다.
그렐린의 작용제 유사체는 체중 증가를 촉진시키므로(미국 특허 6,967,237; Tschop, M. et al ., Nature, (2000), 407(6806):908-13; 및 Tschop, M. et al., Endocrinology, (2002), 143(2):558-68), 이후에 이를 이용하여 원하는 체중을 유지하거나(미국 특허 6,861,409 및 6,967,237) 및/또는 신체 기능을 회복시킬 수 있다(미국 특허 6,967,237 및 6,251,902; 및 국제 특허 출원번호 PCT/IB96/01353 [WO 97/24369]).
또한, 그렐린은 식욕을 증진시킨다(미국 특허 6,967,237; 및 Okada, K. et al., Endocrinology, (1996), 137(11):5155-8). 이처럼, 그렐린은 흔히 어떤 질환이나 장애를 앓고 있는 환자를 치료하거나 또는 전통적으로 식욕 부진(미국 특허 6,967,237; 및 Tschop, M. et al., Endocrinology, (2002), 143(2):558-68), 다식증(미국 특허 6,967,237), 악액질(미국 특허 6,967,237 및 6,251,902), 특히 암-유발성 악액질(미국 특허 6,967,237; 국제 특허 출원번호 PCT/DK2004/000529 [WO 05/014032]; 및 Tschop, M. et al., Endocrinology, (2002), 143:558-68), AIDS (미국 특허 6,861,409 및 6,967,237; 및 Tschop, M. et al., Endocrinology, (2002), 143(2):558-68), 허약자 및/또는 노약자에서의 소모성 증후군(미국 특허 6,861,409 및 6,967,237; 국제 특허 출원번호 PCT/IB96/01353 [WO 97/24369]; 및 Ankerson, M. et al ., Drug Discovery Today , (1999) 4:497-506) 및 만성 신부전(Casanueva, F. F. et al., Trends Endocri . Metab ., (1999), 10(1):30-8)과 같은, 부적절한 체중 감소를 수반하는 약물 요법을 수행중인 환자를 치료하는데 사용되고 있다. 전통적으로 체중 감소를 수반하는 약물 치료로는 화학요법, 방사선 요법, 일시적 또는 영구적인 부동화(immobilization) 및/또는 투석을 포함한다(미국 특허 6,967,237 및 6,251,902).
비만은 주된 위험 인자이며 인슐린-비의존성 당뇨병(또는 "NIDDM"이라 함) 환자의 대부분은 비만이다. 두가지 병태에서는 순환성 인슐린 수치 증가 및 GH 수치 억제가 특징적이다. GH-결핍 성인(Jorgensen, J. O. et al., Lancet, (1989), 1(8649):1221-5), 비만 여성(Richelsen, B. et al., Am . J. Physiol ., (1994), 266(2 Pt 1):E211-6) 및 남성 노인(Rudman, D. et al ., Horm . Res ., (1991), 36 (Suppl 1):73-81)에 대한 GH 치료는, 지방량을 감소시키면서, 제지방량, 간 무게 및 근육량을 증가시키는 것으로 확인되었다. 따라서, 그렐린 작용제의 투여는 GH의 당뇨 유발 효과를 제외하고는, 비만에 대한 괜찮은 치료법이다(미국 특허 6,251,902; Ankerson, M. et al ., Drug Discovery Today , (1999) 4:497-506; 및 Casanueva, F. F. et al., Trends Endocri . Metab ., (1999), 10(1):30-8). 망막증과 같은 당뇨병 합병증 및/또는 심혈관 장애를 치료하는데 있어서도(미국 특허 6,967,237; 및 미국 출원 공개번호 2003/0211967), 그렐린으로 간접적으로 치료할 수 있다.
GHRP-1, GHRP-2 및 그렐린 등의 성장 호르몬(GH)의 분비에 영향을 미치는 펩타이드는 또한 위 운동촉진 효과 또는 운동촉진 효과를 나타내는 것으로 생각된다(미국 특허 6,548,501; Peeters, T. L., J Physiol . Pharmacol ., (2003), 54 (supp 4):95-103 및 원용된 참조문헌; Trudel, L. et al , J. Physiol . Gastrointest . Liver Physiol., (2002), 282:G948-52). 이처럼, GH 분비촉진제 유사체는 또한 특히 수술 후 장 폐색증 또는 당뇨병 또는 만성 당뇨 상태의 발병에 부수적으로 따르는 위부전마비로 인한 위장 운동성 감소로 고통받고 있는 환자들에게, 위장 운동을 촉진시키기 위해 사용되고 있다(미국 특허 6,548,501).
위장(GI) 운동은 소화계를 통해 영양분을 수송하는 동조성 신경근(coordinated neuromuscular) 프로세스이며(Scarpignato, C., Dig . Dis ., (1997), 15:112), 이의 손상으로 위식도 역류 질환(GERD), 위부전마비(예, 당뇨병 성 및 수술 후), 과민성 장 증후군(IBS), 변비(예, IBS의 저운동 상태와 관련됨), 구토(예, 암의 화학요법제에 의해 초래됨), 장 폐색증 및 가성 대장 폐쇄(미국 특허 6,548,501; 미국 특허 출원번호 20040266989) 등의 다양한 병이 발생할 수 있다. 이러한 다양한 GI 운동성 차단의 합병증은 산업화된 국가의 보건 부담에 상당한 부분을 차지한다(미국 특허 6,548,501; Feighner, S. D. et al ., Science, (1999), 284:2184-8).
"장 폐색증"은 장(bowel) 또는 내장(gut), 특히 결장의 폐색을 의미한다(예, Dorland's Illustrated Medical Dictionary, p. 816, 27th ed. (W.B. Saunders Company, Philadelphia 1988) 참조). 일반적으로, 결과적으로 염증 매개체의 분비를 발생시켜 저해성 신경 반사(inhibitory neural reflexe)의 활성화를 유도하게 되는 장의 어떠한 외상이, 장 폐색증을 발생시키게 될 것이다. 장 폐색증은 내장의 정상적인 동조적인 운동을 교란시켜, 장 내용물의 이동(propulsion)이 이루어지지 않는 현상으로 진단될 수 있다(Resnick, J., Am . J. of Gastroentero., (1997), 92:751; Resnick, J., Am . J. of Gastroentero ., (1997), 92:934). 장 폐색증은, 배변이 거의 이루어지지 않거나 어려운 상태를 의미하는, 변비와는 구분되어야 하다(예, Dorland's Illustrated Medical Dictionary, p.375, 27th ed. (W.B. Saunders Company, Philadelphia 1988) 참조).
장 폐색증은, 출산; 장 허혈증; 후복막 혈종; 복막내 패혈증; 복막내 감염, 예컨대 급성 충수염, 담낭염, 췌장염; 척추 골절; 요관 산통; 흉부 병변; 기저 폐렴(basal pneumonia); 늑골 골절; 심근 경색; 및 대사성 장애(metabolic disturbance) 등의 다양한 요인에 의해 발생될 수 있다. 분만 후 장 폐색증은 출산기의 여성에서 흔한 문제이며, 출산 스트레스의 결과로서 천연 오우피오이드(opioid) 수치 변동에 의해 초래되는 것으로 생각된다. 복부 농양 또는 소장 이식(SITx)을 위한 개복 수술, 폐, 골반 또는 정형외과 수술 등의 복부 대수술과 같은 수술을 받은 환자는 종종 수술 후(post-surgical or post-operative) 장 폐색증(이하 POI라 함)이라고 하는 장 기능의 일시적 손상기를 겪는다.
POI는 통상 수술 후 24 - 72시간 동안에 발생한다. 일부 경우에서, 장의 기능부전은 매우 심각하게 되어 1주일 이상 지속될 수 있으며 한 부위 이상의 GI관에 침범할 수 있다(Livingston, E. H. et al ., Digest . Dis . and Sci ., (1990), 35:121). POI와 연관된 위장 운동 부전은 일반적으로 결장에서 가장 심각하다. POI는 복부 구토(abdominal nausea), 팽창, 구역질, 변비, 식사 불능 및 경련이 특징이다. POI는 수술 후 정상적인 음식물 섭취 재개를 지연시키고 입원 기간을 연장시킬 뿐만 아니라 수술 후 합병증, 특히 흡인성 폐렴을 촉진시킨다.
수술 후 환자에게 오우피오이드 진통제를 투여하는 것은 장의 기능 부전을 초래하거나 및/또는 기존 장의 기능 부전을 악화시킬 수 있으며, 그에 따라 정상적인 장의 기능 회복이 지연될 수 있다. 실질적으로 모든 환자들이 수술, 특히 대수술 후 통증 완화를 위해 모르핀이나 그외 마취제 등의 오우피오이드 진통제를 투여받기 때문에, 현재의 수술 후 통증 치료는 실제 정상적인 장 기능의 회복을 느리게 할 수 있으며, 그 결과 퇴원을 지연시키고 의료 비용을 증가시킬 수 있다.
위장 운동에 영향을 미치는 작용을 하는 제제는 또한 구토로 고통받고 있는 환자들에게 이로운 효과를 부여할 수도 있다. 구토(Emesis 또는 vomiting)에 앞서 흔히 구역질이 나타나며, 헛구역질(dry heaves)을 동반할 수도 있다. 구토는 장 폐색증, 소화불량 또는 위벽의 염증과 같은 소화관의 불균형이나, 또는 멀미, 편두통 또는 종양과 같은 감각 시스템이나 뇌의 불균형에 의해 초래될 수 있다. 구토는 식욕부진 또는 다식증에서와 같이 자가-유도될 수 있으며, 또는 심각한 통증, 정서적 반응(예, 불쾌한 시야 및 냄새) 또는 임신에 대한 반응으로 발생할 수도 있다. 구토는 많은 약물, 특히 화학요법과 같은 항암 치료제의 투여 후 수반되는 일반적인 합병증이다. 장기간의 발병 또는 반복적인 구토는 유기체에서의 탈수 및 전해질 불균형 등의 다양한 손상으로 인한 것일 수 있다(Quigley, E. M. et al ., Gastroentero., (2001), 120:263-86).
위장 운동에 영향을 미치는 작용을 하는 제제는 또한 위부전마비를 앓고 있는 환자에게 이로운 효과를 부여할 수도 있다. 위부전마비는 또한 지연성 위장 배출성(delayed gastric emptying)이라고도 하며, 위장 신경이 손상되거나 작동이 중단된 장애이며, 위장 속 내용물을 비우는데 오래 걸린다. 예컨대, 소화관을 통한 음식물 이동을 조절하는 신경인 미주 신경이 손상되면, 위장 및 장의 근육이 정상적으로 작동하지 않게 되어, 음식물의 이동은 느려지거나 중단된다. 고혈당은 신경에 화학적 변화를 초래하고, 산소와 영양분을 신경에 운반하는 혈관에 손상을 입힌다. 혈당 수치가 당뇨병 경우의 경우에 흔히 나타나는 바와 같이 장기간 높게 유지된다면, 미주 신경은 손상을 받을 수 있으며, 위부전마비는 1형 당뇨병이나 2형 당뇨병 환자들에서 흔히 발생한다(Murray, C. D. et al ., Gut , (2005), 54:1693-8).
장 폐색증, 위부전마비 및 구토 등의 손상된 GI 운동성에 대한 전통적인 치료법은 효과가 없는 것으로 생각된다. 장 폐색증을 치료하기 위한 현재의 치료법으로는, 장관의 기능적 자극, 변 연화제, 둘코락스？와 같은 완하제, 윤활제, 정맥내 수분 공급, 코위(nasogastroc) 흡인법, 운동촉진제, 조기 장관 공급(early enteral feeding) 및 코위 감압을 포함한다. 위 압력을 감소시키기 위한 비위관 삽입 역시 장 폐색증을 치료하기 위해 전통적으로 사용되고 있다.
장 폐색증과 같은 GI 운동성 손상을 치료하기 위해 사용되는 전통적인 약제로는, Leu13-모틸린 및 프로스타글란딘 F2 알파와 같은 장 운동성을 증가시키는 작용을 하는 약물을 포함하며, Cisapride？ 모노하이드레이트를 포함하는, Cisapride？ PROPULSID？ 등의 운동 촉진제는, 위식도 역류 질환으로 인해 야간의 가슴쓰림을 앓고 있는 성인 환자의 대증 요법(symptomatic treatment)으로 처방되는, 경구 위장제이다(미국 특허 4,962,115). 그외 운동 촉진제로는, 예컨대 메토클로프라마이드(metoclopramide), 돔페리돈(domperidone), 온단세트론(ondansetron), 트로피세트론(tropisetron), 모사프리드(mosapride) 및 이토프리드(itopride)를 포함한다. 그외 치료로는, 아데노신-길항성 피라졸로피리딘 화합물(미국 특허 6,214,843)의 투여; 뇌하수체 아데닐레이트 사이클라제 활성화성 펩타이드(PACAP) 수용체 길항제와 혈관작용성 장 펩타이드(VIP) 수용체 길항제의 조합 투여(미국 특허 6,911,430); 페도토진(미국 특허 5,362,756); 뉴로펩타이드(미국 특허 5,929,035); 및 프로테나제-활성화성 수용체-2 길항제(미국 특허 5,929,035) 투여가 있다. 드문 경우지만, 장 폐색증은 장 차단을 제거하기 위해 외과적 개입으로도 치료된다.
그러나, 이러한 치료 요법들에는 여러가지 문제들이 있다. 예를 들어, PROPULSID？는 심장 부정맥을 유도할 수 있는 가능성 때문에 최근에 시장에서 퇴출되었다(미국 특허 6,548,501). 아돌로르 주식회사에서는 현재 Alvimopan (Entereg？)을 이용하여 수술 후 장 폐색증을 치료하기 위한 치료제의 III상 임상 단계를 진행중에 있다. 아돌로르 사의 치료제는 그러나 장 폐색증 병태를 실질적으로 완화시키기 보다는, 아편성 진통제의 부작용을 주로 차단하는 오우피오이드 수용체 길항제를 이용한다. III상에서는, 장 폐색증 특히 수술 후 장 폐색증의 치료에 있어 한계 효능 및 최소 적응성을 입증한다.
더욱이, GI 운동성 손상 치료에 대한 이러한 종래 방법들은 여러가지 타입의 손상, 예컨대 수술 후 장 폐색증 또는 산후 장 폐색증에 대한 특이성에 있어서는 부족한 편이다. 또한, 이러한 종래 방법들은 장 폐색증, 위부전마비 및 구토에서와 같이, GI 운동성 손상에 대한 예방 수단을 제공하진 않는다. 장 폐색증, 위부전마비 및 구토에서와 같이 GI 운동성 손상을 예방하거나 또한 보다 효과적으로 치료할 수 있다면, 입원, 회복 기간 및 의료 비용을 현저하게 줄일 수 있을 것이며, 환자의 불편함을 최소화하는 부가적인 이점이 있을 수 있을 것이다.
수술 후 장 폐색증에 의해 초래되는 위장 기능부전을 교정하기 위해 장 운동성을 선택적으로 표적화하는 약물이, 수술 후 및 산후 장 폐색증을 예방 및/또는 치료하기 위한 이상적인 후보 물질일 것이다. 이러한 약물은 또한, 위부전마비 및/또는 구토, 특히 화학요법이나 다른 약물 유발성 위장 기능부전과 연관된 구토를 치료하기 위한 우수한 후보물질일 것이다. 물론, 오우피오이드 진통제의 효능을 간섭하지 않는 약물은 통증 처치용 약물과 동시에 제한된 부작용으로 투여할 수 있는 특별한 이점을 가질 것이다.
많은 최근 연구들을 통해, 그렐린, GHRP-6 등과 같은 GHS의 장관에서의 운동 활동을 자극하고 장 폐색증 및 구토 등의 병태를 치료하는 잠재적인 용도가 입증되었다. 예를 들어, 그렐린 및 GHRP-6는 랫과 마우스에서 위 배출성을 가속화시키는 것으로 확인되었다(Peeters, T. L., J Physiol. Pharmacol., (2003), 54 (supp 4):95-103). 랫에서, 그렐린은 수술 후 장 폐색증 모델에서 위 배출성 지연을 회복시키는 것으로 나타났으며(Peeters, T. L., J Physiol . Pharmacol ., (2003), 54 (supp 4):95-103; Trudel, L. et al ., J. Physiol . Gastrointest . Liver Physiol., (2002), 282(6):G948-52), 복벽 절개된 개에서는, 그렐린은 처리한 동물에서 POI를 개선시키는 것으로 나타났다(Trudel, L. et al , Peptides, (2003), 24:531-4). 패혈병 마우스에서, 그렐린과 GHRP-6은 소장에서의 이동을 증가시키는데에는 거의 효과가 없지만 위 배출성은 가속화하였다(De Winter, B. Y. et al ., Neurogastroenterol. Motil., (2004), 16:439-46).
POI를 앓고 있는 인간 환자에서 입원 병태를 모방하도록 고안한 실험에서, 복벽을 절개한 랫을 아편 뿐만 아니라 그렐린 유사체 RC-1139에 노출시켰다(Poitras, P. et al ., Peptides, (2005), 26:1598-601). 위 배출성을 측정하는 분석에서, RC-1139가 대조군 및 복벽 절개한 랫에서 모르핀 존재시에 POI를 회복시키는 것으로 입증되었다. 따라서, 그렐린이 아편 작용을 방해하지 않으면서도 위 운동 촉진 효과를 나타내는 것으로 생각된다.
세포독성 항암제 시스플라틴에 노출된 흰담비에서는, 그렐린의 뇌실내 투여 후 구역질 및 구토 발생이 현저하게 감소되었으며(Rudd, J. A. et al ., Neurosci . Lett., (2006), 392:79-83), 따라서 위장 기능을 조절하는 역할과 일치되는 방식으로 구토를 감소시키는 그렐린의 능력이 검증되었다. 위 운동성을 조절하는 그렐린의 역할은 GH-분비 활성화와는 독립적이며, 미주-콜린성(vagal-cholinergic) 무스카린 경로에 의해 매개될 수 있다(미국 특허 출원번호 20060025566).
또한, 그렐린은 당뇨병성 위부전마비를 앓고 있는 환자에서 위 배출성을 증가시키는 것으로 확인되었다(Murray, C. D. et al ., Gut , (2005), 54:1693-8).
전술한 연구들에서, 그렐린 또는 그렐린 유사체가 복막내(ip), 정맥재(iv) 또는 뇌실내(icv) 주입으로 투여된 것에 흥미롭게 주목해 볼 수 있다. 그외 문헌들(미국 특허 6,548,501; 미국 특허 출원번호 20020042419; 미국 특허 출원번호 20050187237; 미국 특허 출원번호 20060025566)에서는, 위장 운동 손상을 치료하기 위한 수단으로서 GHS의 경구 투여를 보고하였다.
GI 운동성 손상을 치료하는데 유용한 것으로 매우 소수의 화합물이 당업계에 공지되어 있으며, 위장 운동성에 영향을 주는 작용을 하는, 예컨대 운동성을 자극하는 화합물들이 매우 바람직할 것이다. 위장 운동에 영향을 주는 작용을 하는 화합물들은 장 폐색증 및 구토와 같은 정상적인 GI 기능 중단에 치료제로 이용가능하 다.
역설적으로, 그렐린 길항제는 또한 환자에게서 이로운 효과를 달성하는데 사용될 수 있다(미국 특허 공개번호 2002/187938, 2003/0211967 및 2004/0157227; 및 미국 특허 6,967,237). 예컨대, GHS 수용체에 GH 분비 억제를 촉매하는 길항제 효과를 나타내는 화합물, 예컨대 길항제 유사체는, 과도한 GH 분비를 회복시키거나(미국 특허 출원 공개번호 2002/0187938), 비만이 아닌 개체에서 체중 감소를 촉진시키거나(미국 특허 6,967,237), 이상적인 체중을 유지시키거나 및/또는 식욕을 감소시키는(미국 특허 6,967,237) 것으로 나타나 있다. 또한, 그렐린 길항제는 NIDDM 발병으로 인해 비만이 발생되지 않은 비만 개체에서 체중 감소를 촉진시키는데 사용할 수 있다(미국 특허 6,967,237; 및 미국 특허 출원 공개번호 2003/0211967).
과체중은 고혈압, 지질대사이상(dyslipidemia) 및 심혈관 질병과 같은 수많은 질병 또는 병태(미국 특허 출원 공개번호 2003/0211967; 및 미국 특허 6,967,237) 뿐만 아니라 담증, 골관절염(미국 특허 6,967,237), 특정 암(미국 특허 출원 공개번호 2003/0211967 및 2004/0157227; 및 미국 특허 6,967,237) 및 프레더-윌리 증후군(미국 특허 6,950,707; 국제 특허 출원번호 PCT/US2004/008385 [WO 04/084943]; Haqq, A. M. et al., J. Clin . Endocri . Metab., (2003), 88(1):174-8; 및 Cummings, D. E. et al., Nat . Med., (2002), 8(7):643-4)의 기여 인자이다. 체중 감소를 촉진시키는 그렐린 길항제는 따라서 이러한 질환이나 병태 가능성을 감소시키거나 및/또는 이러한 질환이나 병태 치료의 일정 부분 이상을 차지하고 한 다. 또한, GHS의 길항제는 발암성 조직에 대한 결합성을 보여, 표적 조직에서의 발암성 세포의 수, 예컨대 폐, 유선, 갑상선 또는 췌장에서의 종양의 수를 감소시키는 것으로 기술되어 있다(국제 특허 출원번호 PCT/EP99/08662 [WO 00/29011]).
그러나, 천연 그렐린은 비교적 반감기가 짧아, 이용가능한 투여 경로와 음식물 섭취 및/또는 체중 감소에 대한 관찰가능한 효과를 나타내는데 필요한 용량이 제한적이다. 랫에서 외생적인(exogenous) 그렐린의 겉보기(apparent) 시 반감기는 10분인 것으로 보고되었으며(Tolle, V. et al., Endocrin., (2002), 143:1353-61), 인간의 경우에는 10분에 불과하다(Nagaya, N. et al., Am . J. Physiol . Regul . Integr . Comp . Physiol., (2001), 280:R1483-R1487). GHS가 제공해야하는 매우 다양한 이로운 효과를 생각하면, 효과적이며 생물학적으로 안정적인 그렐린 유사체 분자가 당업계에 필요한 실정이다.
발명의 개요
본원에 기술된 그렐린 유사체는 GHS 수용체에서 활성을 나타낸다. 상기 GHS 유사체는 수용체에 결합하여 GHS 수용체의 활성을 자극 또는 저해할 수 있다. 그렐린 유사체는 비제한적으로 연구 툴로서 또는 치료제로서 사용되고 있는 등의 여러가지 다양한 용도를 가지고 있다.
N 말단에 합성 아미노산 이소니펙코트산(Inp: isonipecotic acid) 또는
Figure 112009025324177-pct00002
(1-Apc 또는 4-Apc)으로 치환된 그렐린 유사체들이, 천연 그렐린에 비해 단백질 분해에 대한 내성이 우수할 뿐만 아니라 GHS 수용체에 대해 증가된 활성을 보이는 것으로 확인되었다.
본 발명의 일 측면은, A1 - A28에 대한 정의에 나열된 첫번째 아미노산이 천연 그렐린, 즉, H-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-Ser-Pro-Glu-His-Gln-Arg-Val-Gln-Gln-Arg-Lys-Glu-Ser-Lys-Lys-Pro-Pro-Ala-Lys-Leu-Gln-Pro-Arg-NH2(서열번호 1)의 서열에서의 해당 위치에서 발견되는 아미노산이고, 서열에서 첫번째 아미노산, 즉 N-말단 잔기는 제외된, 식 (I)을 갖는, 그렐린 유사체, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염을 나타낸다:
(R2)-A1-A2-A3-A4-A5-A6-A7-A8-A9-A10-A11-A12-A13-A14-A15-A16-A17-A18-A19-A20-A21-A22-A23-A24-A25-A26-A27-A28-R1
(I)
상기 식 (I)에서,
A1은 Inp, 1-Apc 또는 4-Apc이고;
A2는 Ser, Abu, Acc, Act, Aib, Ala, Ava, Thr 또는 Val이고;
A3은 Ser, Asp(NH-R3), Asp(O-R4), Cys(S-R5), Dab(S(O)2-R6), Dap(S(O)2-R7), Glu(NH-R8), Glu(O-R9), Ser(C(O)-R10), Thr(C(O)-R11) 또는 HN-CH((CH2)n-N(R12R13))-C(O)이고;
A4는 Phe, Acc, Aic, Cha, 2-Fua, 1-Nal, 2-Nal, 2-Pal, 3-Pal, 4-Pal, hPhe, (X1,X2,X3,X4,X5)Phe, Taz, 2-Thi, 3-Thi, Trp 또는 Tyr 이고;
A5는 Leu, Abu, Acc, Aib, Ala, Cha, Ile, hLeu, Nle, Nva, Phe, Tle 또는 Val이고;
A6은 Ser, Abu, Acc, Act, Aib, Ala, Gly, Thr 또는 Val이고;
A7은 Pro, Dhp, Dmt, 3-Hyp, 4-Hyp, Inc, Ktp, Oic, Pip, Thz 또는 Tic이고;
A8은 Glu, Acc, Aib, Arg, Asn, Asp, Dab, Dap, Gln, Lys, Orn 또는 HN-CH((CH2)n-N(R12R13))-C(O)이고;
A9는 His, Acc, Apc, Aib, 2-Fua, 2-Pal, 3-Pal, 4-Pal, (X1,X2,X3,X4,X5-)Phe, Taz, 2-Thi 또는 3-Thi이고;
A10은 Gln, Acc, Aib, Asn, Asp 또는 Glu이고;
A11은 Arg, Apc, hArg, Dab, Dap, Lys, Orn 또는 HN-CH((CH2)n-N(R12R13))-C(O)이고;
A12는 Val, Abu, Acc, Aib, Ala, Cha, Gly, Ile, Leu, Nle, Nva 또는 Tle이고;
A13은 Gln, Acc, Aib, Asn, Asp 또는 Glu이고;
A14는 Gln, Acc, Aib, Asn, Asp 또는 Glu이고;
A15는 Arg, Acc, Aib, Apc, hArg, Dab, Dap, Lys 또는 Orn이고;
A16는 Lys, Acc, Aib, Apc, Arg, hArg, Dab, Dap, Orn 또는 결실되고;
A17은 Glu, Arg, Asn, Asp, Dab, Dap, Gln, Lys, Orn, Asp(NH-R3), Asp(O-R4), Cys(S-R5), Dab(S(O)2-R6), Dap(S(O)2-R7), Glu(NH-R8), Glu(O-R9), Ser(C(O)-R10), Thr(C(O)-R11), HN-CH((CH2)n-N(R12R13))-C(O) 또는 결실되고;
A18는 Ser, Abu, Acc, Act, Aib, Ala, Thr, Val 또는 결실되고;
A19는 Lys, Acc, Aib, Apc, Arg, hArg, Dab, Dap, Orn 또는 결실되고;
A20은 Lys, Acc, Aib, Apc, Arg, hArg, Dab, Dap, Orn 또는 결실되고;
A21은 Pro, Dhp, Dmt, 3-Hyp, 4-Hyp, Inc, Ktp, Oic, Pip, Thz, Tic 또는 결실되고;
A22는 Pro, Dhp, Dmt, 3-Hyp, 4-Hyp, Inc, Ktp, Oic, Pip, Thz, Tic 또는 결실되고;
A23은 Ala, Abu, Acc, Act, Aib, Apc, Gly, Nva, Val 또는 결실되고;
A24는 Lys, Acc, Aib, Apc, Arg, hArg, Dab, Dap, Orn, HN-CH((CH2)n-N(R12R13))-C(O) 또는 결실되고;
A25는 Leu, Abu, Acc, Aib, Ala, Cha, Ile, hLeu, Nle, Nva, Phe, Tle, Val 또는 결실되고;
A26은 Gln, Aib, Asn, Asp, Glu 또는 결실되고;
A27은 Pro, Dhp, Dmt, 3-Hyp, 4-Hyp, Inc, Ktp, Oic, Pip, Thz, Tic 또는 결실되고;
A28은 Arg, Acc, Aib, Apc, hArg, Dab, Dap, Lys, Orn, HN-CH((CH2)n-N(R12R13))-C(O) 또는 결실되고;
R1은 -OH, -NH2, -(C1-C30)알콕시 또는 NH-X6-CH2-Z0 이고, 상기 X6은 (C1-C12)알킬 또는 (C2-C12)알케닐 이고 Z0은 -H, -OH, -CO2H 또는 -C(O)-NH2이고;
R2는, H, (C1-C30)알킬, (C1-C30)헤테로알킬, (C1-C30)아실, (C2-C30)알케닐, (C2-C30)알키닐, 아릴(C1-C30)알킬, 아릴(C1-C30)아실, 치환된 (C1-C30)알킬, 치환된 (C1-C30)헤테로알킬, 치환된 (C2-C30)아실, 치환된 (C2-C30)알케닐, 치환된 아릴(C1-C30)알킬, 치환된 (C2-C30)알키닐 또는 치환된 아릴(C1-C30)아실이고;
각각의 R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10 및 R11은, 독립적으로, (C1-C40)알킬, (C2-C40)알케닐, 치환된 (C1-C40) 알킬, 치환된 (C2-C40) 알케닐, 알킬아릴, 치환된 알킬아릴, 아릴 및 치환된 아릴로 이루어진 군으로부터 선택되고;
각각의 R12 및 R13은, 독립적으로, H, (C1-C40)알킬, (C1-C40)헤테로알킬, (C1-C40)아실, (C2-C40)알케닐, (C2-C40)알키닐, 아릴(C1-C40)알킬, 아릴(C1-C40)아실, 치환된 (C1-C40)알킬, 치환된 (C1-C40)헤테로알킬, 치환된 (C1-C40)아실, 치환된 (C2-C40)알케닐, 치환된 (C2-C40)알키닐, 치환된 아릴(C1-C40)알킬, 치환된 아릴(C1-C40)아실, (C1-C40)알킬설포닐 또는 -C(NH)-NH2로 이루어진 군으로부터 선택되고;
n은 독립적으로, 1, 2, 3, 4 또는 5이고;
각각의 X1, X2, X3, X4, 및 X5는, 독립적으로, H, F, Cl, Br, I, (C1 -10)알킬, 치환된 (C1 -10)알킬, 아릴, 치환된 아릴, OH, NH2, NO2 및 CN으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
단,
R12가 (C1-C40)아실, 아릴(C1-C40)아실, 치환된 (C1-C40)아실, 치환된 아릴(C1-C40)아실, (C1-C40)알킬설포닐, 또는 -C(NH)-NH2이면, R13은 H 또는 (C1-C40)알킬, (C1-C40)헤테로알킬, (C2-C40)알케닐, (C2-C40)알키닐, 아릴(C1-C40)알킬, 치환된 (C1-C40)알킬, 치환된 (C1-C40)헤테로알킬, 치환된 (C2-C40)알케닐, 치환된 (C2-C40)알키닐, 또는 치환된 아릴(C1-C40)알킬이다.
상기 식 (I)에 따른 화합물의 바람직한 그룹, 그룹 1 화합물은 하기한 기를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염이다:
A2는 Ser 또는 Aib이고;
A3은 Ser 또는 Glu(NH-R8)이고;
A4는 Phe이고;
A5는 Leu이고;
A6은 Ser이고;
A7은 Pro이고;
A8은 Glu 또는 Aib이고;
A9는 His이고;
A10은 Gln 또는 Aib이고;
A11은 Arg이고;
A12는 Val이고;
A13은 Gln이고;
A14는 Gln이고;
A15는 Arg이고;
A16은 Lys이고;
A17은 Glu 또는 Ser(C(O)-R10)이고;
A18은 Ser이고;
A19는 Lys이고;
A20은 Lys이고;
A21은 Pro이고;
A22는 Pro이고;
A23은 Ala이고;
A24는 Lys이고;
A25는 Leu이고;
A26은 Gln이고;
A27은 Pro이고; 및
A28는 Arg이다.
상기 식의 화합물 중에서 다른 바람직한 그룹, 즉 그룹 2 화합물은 하기 기를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염이다:
R1은 NH2이고;
R2는 H 또는 아실이고;
R8은 헥실이고; 및
R10은 옥타닐이다.
화합물의 바로 앞에 기술한 그룹의 화합물 중에서 더욱 바람직한 그룹, 즉 그룹 3 화합물은 하기 기를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염이다:
A2는 Aib이고;
A3은 Glu(NH-헥실)이고;
A8은 Aib이고;
A10은 Aib이고; 및
A17은 Ser(n-옥타노일)이다.
전술한 식 (I)에 따른 화합물들 중 바람직한 다른 그룹, 즉 그룹 4 화합물은 하기 식에 따른 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염으로 구성된다:
(Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 5);
(Inp1, Aib2)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 6);
(Inp1, Aib2, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 7);
(Inp1, Aib2 ,10)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 8);
(Inp1, Aib2 ,8)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 9);
(Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 10);
(Inp1, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 11);
(Inp1, Aib2,8, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 12);
[Inp1,Ser3]hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 13);
[Inp1,Aib2,Ser3]hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 14);
[Inp1,Aib2,Ser3,Ser(n-옥타노일)17]hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 15);
[Inp1,Aib2,10,Ser3]hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 16).
일 측면에 있어서, 전술한 화합물들 중에서 바람직한 화합물은 (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 5) 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염이다. 다른 측면에 있어서, 전술한 화합물들 중에서 바람직한 화합물은 (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 10) 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염이다.
일 측면에 있어서, 본 발명은, 유효량의, 전술한 식의 화합물, 더 바람직하기로는 전술한 바와 같이 정의된, 그룹 1, 그룹 2, 그룹 3, 그룹 4, (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 5) 및/또는 (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 10), 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염과, 약학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.
연구 툴 적용은 일반적으로 그렐린 유사체의 사용과 GHS 수용체 또는 이의 단편의 존재를 포함한다. GHS 수용체는 포유류 개체, 전체 세포 또는 막 단편 등과 같은 여러가지 환경에 놓일 수 있다. 연구 툴 적용의 예로는, GHS 수용체에 작용하는 화합물의 스크리닝, 샘플 또는 조제물에서의 GHS 수용체의 존재 결정 및 그렐린의 역할 또는 효과 검사를 비제한적으로 포함한다.
그렐린 유사체를 사용하여 그렐린 작용제와 그렐린 길항제 둘다를 스크리닝할 수 있다. 그렐린 작용제에 대한 스크리닝은, 예컨대 그렐린 유사체를 시험 화합물과 경쟁적 실험으로 수행할 수 있다. 그렐린 길항제에 대한 스크리닝은, 예컨대, 그렐린 유사체를 GHS 수용체에 작용하도록 사용한 다음 화합물의 GHS 수용체 활성을 변이시키는 능력을 측정함으로써, 수행할 수 있다.
본 발명의 다른 측면은, GHS 수용체에 결합가능한 화합물의 스크리닝 방법에 관한 것이다. 상기 방법은, 상기 수용체, 그렐린 결합 부위를 포함하는 수용체의 단편, 상기 단편을 포함하는 폴리펩타이드 또는 상기 폴리펩타이드의 유도체에 대한 그렐린 유사체의 결합에 영향을 미치는 화합물의 능력을 측정하는 단계를 포함한다. 스크리닝에 유용한 화합물은 전술한 식의 화합물, 더 바람직하기로는, 전술한 바와 같이 정의된, 그룹 1, 그룹 2, 그룹 3, 그룹 4, (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 5) 및/또는 (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 10) 중 1종 이상에 따른 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염과, 약학적으로 허용가능한 담체나 희석제를 포함한다.
다른 측면에 있어서, 본 발명은, 전술한 바와 같이 정의된, 그룹 1, 그룹 2, 그룹 3, 그룹 4, (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 5) 및/또는 (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 10)에 따른 그렐린 유사체 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 본원에 기술된 조성물을, 치료학적 유효량으로 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 필요한 개체에서 그렐린 수용체로부터 반응을 도출하는 방법을 제공한다.
본 발명의 다른 측면은, 전술한 식의 화합물, 더 바람직하기로는, 전술한 바와 같이 정의된, 그룹 1, 그룹 2, 그룹 3, 그룹 4, (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 5) 및/또는 (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 10) 중 1종 이상, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 본원에 기술된 조성물을, 유효량으로 개체에 투여하는 단계를 포함하며, 상기 유효량은 질병이나 장애를 치료(치유 또는 중증도를 감소)하거나, 또는 예방(발병 가능성 또는 중증 가능성을 감소)하는 것을 돕는데 유익한 효과 형성에 유효한 것을 특징으로 하는, 개체에서 유익한 효과를 달성하는 방법에 관한 것이다.
그렐린은 1차 배양 뇌하수체 세포로부터 용량 의존적인 방식으로 GH 분비를 유도하며, 다른 뇌하수체 호르몬의 분비는 자극하지 않는다. 마취한 랫에 정맥내 주입하면, 그렐린은 GH의 맥동성 분비(pulsatile release)를 자극하므로(Kojima, M. et al ., Nature, (1999), 402(6762):656-60), 본 발명의 다른 측면은, 식 (I)에 따른 작용제 화합물, 더 바람직하기로는, 전술한 바와 같이 정의된, 그룹 1, 그룹 2, 그룹 3, 그룹 4, (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 5) 및/또는 (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 10)에 따른 작용제 화합물 중 1종 이상, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 본원에 기술된 조성물을 유효량으로 투여하는 단계를 포함하며, 상기 유효량은 적어도 GH 분비의 검출가능한 수준의 증가를 발생시키는데 충분한 양이며, 바람직하기로는 환자에서 유익한 효과를 달성하기에 충분한 양인, 개체에서 GH 분비를 자극하는 방법에 관한 것이다.
전술한 방법의 바람직한 예에서, 상기 GH 분비 자극은 GH 결핍 상태의 치료, 근육량 및/또는 골 밀도 증가, 성 기능부전 회복, 체중 증가 및/또는 이상적인 체중 유지, 신체 기능 유지 및/또는 회복(regaining) 및/또는 식욕 증진에 대해 처방된다.
바로 위에 기술한 방법 중에서 바람직한 방법은, 상기 체중 증가 또는 유지, 또는 식욕 증가는 체중 감소를 수반하는 질환이나 장애를 가진 환자나 또는 체중 감소를 수반하는 치료를 받고 있는 환자에게 처방된다.
바로 위에 기술한 방법 중에서 바람직한 방법은, 체중 감소를 수반하는 상기 질환이 악액질과 관련있으며, 식욕 부진, 다식증, 암, AIDS 및 만성 폐색성 폐 질환(COPD) 등을 비제한적으로 포함하는 것을 특징으로 한다. 전술한 방법의 다른 측면에서, 상기 체중 감소는 특히 허약자 또는 노약자에서의 소모성 증후군 발병으로 인한 것이다. 전술한 방법 중에서 보다 바람직한 방법은, 건강한 노인 환자에서 원인 불명의 체중 감소 이후에 체중 증가를 촉진시키거나, 알츠하이머 질환의 발병을 예방, 치료 또는 완화시키고자 한다. 이러한 전술한 방법 중 또다른 바람직한 방법에서, 상기 체중 감소를 수반하는 치료는 화학요법, 방사선치료, 일시적인 부동화, 영구적인 부동화 및 투석을 포함한다.
전술한 방법 중 다른 바람직한 방법에서, 상기 체중 증가 또는 유지 및/또는 식욕 증가는 특정 질환이나 장애를 앓고 있지 않거나 전술한 치료들 중 어느 한가지를 받고 있지 않은 건강한 환자에게 처방된다.
다른 측면에서, 본 발명은 식 (I)에 따른 화합물, 더 바람직하기로는, 전술한 바와 같이 정의된, 그룹 1, 그룹 2, 그룹 3, 그룹 4, (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 5) 및/또는 (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 10)에 따른 화합물 중 1종 이상, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 본원에 기술된 조성물을 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는, 필요한 개체에서 만성 폐색성 폐 질환을 치료하는 방법에 관한 것이다.
본 발명은 환자(예, 인간 등의 포유류)에게서 위장 운동성을 자극하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은, 상기 식에 따른 1종 이상의 화합물, 더 바람직하기로는, 전술한 바와 같이 정의된, 그룹 1, 그룹 2, 그룹 3, 그룹 4, (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 5) 및/또는 (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 10) 중 1종 이상에 따른 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 본원에 기술된 조성물을, 치료학적 유효량으로, 위장 운동부전(gastrointestinal dysmotility)을 앓고 있거나 위험성이 있는 환자에게 투여하는 단계를 포함한다.
일 측면에 있어서, 본 발명은, 유사체 또는 프로드럭이 상기 식에 따른 1종 이상의 화합물, 더 바람직하기로는, 전술한 바와 같이 정의된, 그룹 1, 그룹 2, 그룹 3, 그룹 4, (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 5) 및/또는 (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 10) 중 1종 이상에 따른 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 본원에 기술된 조성물을 포함하는 것을 특징으로 하는, 위장 운동부전 병태를 경감시키기에 적합한 그렐린의 펩타이드 유사체 또는 그의 프로드럭을 치료학적 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는, 위장 운동부전 병태를 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명의 방법은 환자(예, 인간 등의 포유류)에서 위 운동성 및 위장 운동성을 촉진시키는데 유용하며, 그로 인해, 위식도 역류 질환(GERD), 과민성 장 증후군(IBS), 변비, 장 폐색증, 구토, 위부전마비, 가성 대장 폐쇄증 등의 위 및 위장의 운동성 개선이 유익한 병태의 치료에 유용하다.
다른 측면에 있어서, 본 발명은, 상기 식에 따른 1종 이상의 화합물, 더 바람직하기로는, 전술한 바와 같이 정의된, 그룹 1, 그룹 2, 그룹 3, 그룹 4, (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 5) 및/또는 (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 10) 중 1종 이상에 따른 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 본원에 기술된 조성물을, 치료학적 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는, 환자(예, 인간 등의 포유류)에서 위 및 위장 운동성을 촉진시키는데 유용한 방법을 제공하며, 상기 위장 운동부전 또는 장 폐색증은 비제한적으로 모르핀 등의 아편 투여와 관련있다.
다른 측면에 있어서, 본 발명은, 장 폐색증, 구토 또는 위부전마비 경감에 적합한, 상기 식에 따른 1종 이상의 화합물, 더 바람직하기로는, 전술한 바와 같이 정의된, 그룹 1, 그룹 2, 그룹 3, 그룹 4, (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 5) 및/또는 (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 10) 중 1종 이상에 따른 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 본원에 기술된 조성물을, 치료학적 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는, 장 폐색증, 위부전마비 또는 구토를 치료하는 방법을 제공한다. 또다른 측면에 있어서, 본 발명의 방법에 의해 치료되는 병태는 수술 후 장 폐색증과 같은 장 폐색증이며, 수술은 복부 수술 등의 위장 수술일 수 있다. 수술 후 장 폐색증은 장관, 예컨대 위, 소장 또는 대장의 임의 부분에서 발생할 수 있다. 수술 후 장 폐색증은 모르핀의 존재에 의해 수반될 수 있다. 다른 측면에 있어서, 장 폐색증은 위장 수술 이외의 다른 인자에 의해 초래되며, 장관, 예컨대, 위, 소장 또는 대장의 임의 부분에서 발생할 수 있다. 본 발명의 또다른 측면에 있어서, 본 발명의 방법에 의해 치료되는 병태는, 항암 화학치료제, 임신, 다식증 또는 식욕 부진의 투여와 조합되거나 이의 투여에 의해 발생되는 구토 등의 구토이다. 또다른 측면에 있어서, 본 발명의 방법에 의해 치료되는 병태는 당뇨병성 위부전마비 등의 위부전마비이다. 당뇨병은 1형 또는 2형 당뇨병일 수 있다.
다른 측면에 있어서, 본 발명은, 상기 식에 따른 1종 이상의 화합물, 더 바람직하기로는, 전술한 바와 같이 정의된, 그룹 1, 그룹 2, 그룹 3, 그룹 4, (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 5) 및/또는 (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 10) 중 1종 이상에 따른 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 본원에 기술된 조성물을, 치료학적 유효량으로 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 환자에서 수술을 수행하는 방법을 제공한다. 이에 대한 일 예에서, 수술을 수행하기 위한 방법은 상기 수술이 필요한 환자를 식별하는 더 단계를 포함한다.
수술을 수행하는 방법의 일 예에서, 수술은 위장관을 직접 또는 간접적으로 조작한다. 본 발명의 방법이 이로울 수 있는 수술의 유형으로는, 개복 수술, 이식 수술, 비뇨생식계 수술, 림프계 수술, 호흡계 수술 및 복부내 임의 장기나 조직의 암을 치료하기 위한 수술을 포함하나, 이것으로 한정되는 것은 아니다. 전술한 바와 같이 정의된, 그룹 1, 그룹 2, 그룹 3, 그룹 4, (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 5) 및/또는 (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 10) 중 1종 이상에 따른 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 본원에 기술된 조성물 중 1종 이상에 있어, 수술을 수행하는 방법을 수행하는데 유용한 화합물은, 수술 전, 수술 중, 수술 후, 또는 이의 임의 조합시기에 투여될 수 있다.
다른 측면에 있어서, 본 발명은, 상기 식에 따른 1종 이상의 화합물, 더 바람직하기로는, 전술한 바와 같이 정의된, 그룹 1, 그룹 2, 그룹 3, 그룹 4, (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 5) 및/또는 (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 10) 중 1종 이상에 따른 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 본원에 기술된 조성물을, 치료학적 유효량으로, 환자에게 수술 전, 수술 중, 수술 후, 또는 이의 임의 조합시기에 투여하는 단계를 포함하는, 필요한 환자에게서 수술 후 장 폐색증을 예방하는 방법을 제공한다.
다른 측면에 있어서, 본 발명은, 상기 식에 따른 1종 이상의 화합물, 더 바람직하기로는, 전술한 바와 같이 정의된, 그룹 1, 그룹 2, 그룹 3, 그룹 4, (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 5) 및/또는 (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 10) 중 1종 이상에 따른 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 본원에 기술된 조성물을, 치료학적 유효량으로 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 필요한 환자에게서 역류 질환, 구토, 위부전마비, 과민성 장 증후군, 변비 또는 가성 대장 폐쇄증을 예방하는 방법을 제공한다. 구토는 항암 화학치료제 처리, 임신, 다식증 또는 식욕 부진과 조합될 수 있다. 위부전마비는 당뇨병과 조합될 수 있으며, 당뇨병은 1형 또는 2형 당뇨병일 수 있다.
상기 식 (I)에 따른 화합물 중 가장 바람직한 제2의 그룹, 즉 그룹 5 화합물은 하기 식에 따른 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염으로 구성된다:
(Inp1, Aib2 ,10, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2; (서열번호 17)
(1-Apc1, Aib2 ,10, Glu(NH-헥실)3)-hGhrelin(1-28)-NH2; (서열번호 18)
(Ac-Inp1, Aib2 ,10, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2; (서열번호 19) 및
(Ac-1-Apc1, Aib2 ,10, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2; (서열번호 20).
일 측면에 있어서, 바람직한 화합물은 Inp1, Aib2 ,10, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 17) 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염이다. 다른 측면에 있어서, 바람직한 화합물은 (1-Apc1, Aib2 ,10, Glu(NH-헥실)3)-hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 18) 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염이다. 다른 측면에 있어서, 바람직한 화합물은 (Ac-Inp1, Aib2 ,10, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 19) 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염이다. 다른 측면에 있어서, 바람직한 화합물은 (Ac-1-Apc1, Aib2 ,10, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2 (서열번호 20) 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염이다.
다른 측면에 있어서, 본 발명은, 유효량의, 상기 식의 화합물, 더 바람직하기로는 전술한 바와 같이 정의된 그룹 5에 따른 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염과, 약학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.
일 측면에 있어서, 본 발명은 GHS 수용체, 수용체의 단편, 수용체의 단편을 포함하는 폴리펩타이드, 또는 폴리펩타이드의 유도체에 대한 전술한 바와 같이 정의된 그룹 5에 따른 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염의 결합에 영향을 미치는 화합물의 능력을 측정하는 단계를 포함하는, GHS 수용체에 결합가능한 화합물의 스크리닝 방법을 제공한다.
다른 측면에 있어서, 본 발명은, 전술한 바와 같이 정의된 그룹 5에 따른 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 본원에 기술된 조성물을, 치료학적 유효량으로 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 필요한 개체에서 그렐린 수용체로부터의 반응을 도출하는 방법을 제공한다.
다른 측면에 있어서, 본 발명은, 전술한 바와 같이 정의된 그룹 5에 따른 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 본원에 기술된 조성물을, 유효량으로 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 개체에서 유익한 효과를 달성하는 방법을 제공하며, 상기 유효량은 질병이나 장애를 치유 또는 중증도를 경감시키거나, 또는 발병 또는 중증도의 가능성을 감소시키는 것을 돕는데 유익한 효과를 발생시킨다.
GH의 과다 분비는 임상적으로 수많은 질환 및/또는 병태에 기인한다. 본 발명의 다른 측면은, 전술한 바와 같이 정의된 그룹 5에 따른 1종 이상의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 본원에 기술된 조성물을, 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는, 필요한 개체에서 GH 분비를 억제하는 방법에 관한 것으로, 상기 유효량은 GH 분비를 검출가능하도록 감소시키는데 충분한 양 이상이며, 바람직하기로는 환자에게서 유익한 효과를 달성하기에 충분한 양이다.
전술한 바와 같이 정의된 그룹 5에 따른 그렐린 길항제 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 본원에 기술된 조성물을 이용하여, 환자에게서 유익한 효과를 달성할 수 있다. 전술한 방법 중 바람직한 방법은, 상기 GH 분비 억제는 체중 감소 및/또는 식욕 감소를 촉진시키고, 이상적인 체중을 유지하고, 비만을 회복하고, 당뇨병과 망막증 등의 이의 합병증을 치료하고 및/또는 심혈관 장애를 개선시키는 것으로 처방된 방법이다. 과체중은, 고혈압, 당뇨병, 지질대사이상, 심혈관 질병, 담석 형성, 골관절염, 프레더-윌리 증후군 및/또는 특정 형태의 암을 비제한적으로 포함하는, 여러가지 질환에 대한 기여 인자이다. 체중 감소는 이러한 질병에 대해 처방된 조치의 일정 부분 이상을 차지할 때, 이러한 질환 가능성을 감소시키는 것으로 입증되었다.
다른 측면에 있어서, 본 발명은, 전술한 바와 같이 정의된 그룹 5에 따른 그렐린 유사체 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 본원에 기술된 조성물을, 유효량으로 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 억제가 필요한 개체에서 성장 호르몬 분비를 억제하는 방법을 제공하며, 상기 유효량은 적어도 성장 호르몬 분비의 검출가능한 수준의 감소를 발생시키는데 충분한 양이다.
전술한 측면의 일 측면에 있어서, 성장 호르몬 분비의 억제는 성장 호르몬 과다 분비가 특징적인 질병이나 병태의 치료, 과체중의 감소 촉진, 식욕 감소의 촉진, 체중 유지의 촉진, 비만 치료, 당뇨병 치료, 망막증 등의 당뇨병 합병증 치료, 또는 심혈관 장애의 치료를 의미한다. 다른 측면에 있어서, 과체중은 고혈압, 당뇨병, 지질대사이상, 심혈관 질환, 담석, 골관절염 및 암 등의 질병이나 병태의 기여 인자이다. 체중 감소의 촉진은 이러한 질병이나 병태의 가능성을 감소시킬 것으로 생각된다. 다른 측면에서, 체중 감소의 촉진은 이러한 질병이나 병태에 대한 일정 부분이상의 치료를 포함한다. 다른 측면에서, 과체중은 프레더-윌리 증후군으로 인한 것이다. 또다른 측면에서, 비만이 치료된다.
본 발명의 임의 측면을 실시에 따르며 이에 사용하기 적합한, 1종 이상의 그렐린 유사체 화합물 및 그의 조성물은, 비제한적으로 정맥내, 피하 또는 경구 방법이나 또는 서방형 제형의 이식 등의 허용가능한 모든 의학적 수단에 의해 필요한 개체에게 투여될 수 있다.
본 발명의 다른 특징들과 이점은 여러가지 실시예를 포함하여, 본원에 제공되는 추가적인 설명으로부터 명확해진다. 제공되는 실시예들은 본 발명을 실시하는데 사용가능한 여러가지 구성과 방법을 예시한다. 실시예들은 청구된 본 발명을 제한하지 않는다. 본 발명의 내용을 기초로, 당업자는 본 발명을 실시하는데 유용한 다른 구성성분들과 방법들을 인지하고 이를 채택할 수 있다.
발명의 상세한 설명
본 발명은 단백질분해에 내성이며, GHS 수용체에서 그렐린 활성을 촉진시키거나, 즉 작용제인, 또는 억제시키는, 즉 길항제인, 그렐린 유사체에 관한 것이다. 상기에서 상세히 기술한 바와 같이, 본 발명의 유사체는 개체에서 매우 다양한 질병을 치료하는데 이용가능하다.
본원에서, "개체(subject)"란, 예컨대 비제한적으로, 인간, 랫, 마우스, 또는 사육 동물 등의 포유류 또는 포유류 이외의 동물을 일컫는다. 개체에 대한 언급이 질병 또는 장애의 존재를 필수적으로 표시하는 것은 아니다. "개체"란 용어는, 예컨대, 실험의 일부로서 그렐린 유사체가 투여되는 포유류 또는 포유류 이외의 동물, 질병 또는 장애의 완화를 돕기 위하여 치료되는 포유류 또는 포유류 이외의 동물, 및 질병 또는 장애의 발병을 지연시키거나 예방하기 위하여 예방적으로 치료되는 포유류 또는 포유류 이외의 동물을 포함한다.
본 발명의 화합물 또는 조성물의 "치료학적인 허용량"은 투여 제형이나 경로와는 무관하게, 개체에서 원하는 생물학적 반응을 도출시키는 양이다. 치료학적인 양의 생물학적 효과는 유기체에서 다수의 수준에서 발생하며, 이를 측정할 수 있다. 예컨대, 치료학적인 양의 생물학적 효과는 그렐린 및/또는 그렐린 유사체에 결합하는 수용체에서 반응을 측정함으로써 세포 수준에서 나타나며 이를 측정할 수 있거나, 또는 치료학적인 양의 생물학적 효과는 순환성 성장 호르몬의 수준 증가/감소에 작용하는 것과 같이 전신 수준에서 나타나며 이를 측정할 수 있다. 치료학적인 양의 생물학적 효과는 개체에서 질병이나 병태의 증상(들) 또는 진행 완화와 같이 유기체 수준에서 나타나며 이를 측정할 수 있다. 본 발명의 화합물 또는 조성물의 치료학적인 허용량은 투여 제형이나 경로와는 무관하게 개체에서 한가지 이상의 생물학적인 반응을 발생시킬 수 있다. 본 발명의 화합물 또는 조성물을 시험관내 시스템으로 테스트하는 경우, 화합물 또는 조성물의 치료학적인 허용량은 선택한 시험관내 시스템에서 측정가능한 반응을 제공하는 양으로서 간주될 수 있다.
그룹 1, 2, 3, 4 및/또는 5와 같은, 본원에 기술된 그렐린 작용제 및 길항제는, 필요한 개체에서 체중을 증가, 감소 및/또는 유지하는데 유용하다. 체중은 흔히 측정하고 이를 이용하여 체질량 지수(Body Mass Index; "BMI")를 결정한다. BMI는 킬로그램 단위의 체중을 신장의 제곱 미터로 나누어 산출한다. BMI "정상" 범위는 일반적으로 19-22인 것으로 여겨진다. 체질량 지수가 "정상" 범위 보다 낮은 개체는 질병에 걸리기 더 쉬우며, 화학요법과 같은 임의의 이로운 의학적 치료는 정상 보다 BMI가 낮은 개체들에서 덜 효과적이다.
본원에서, 비만 개체나 포유류는 개체의 정상 체중에 약 20% 이상, 약 25% 이상 또는 약 30% 이상의 체중을 갖는 개체로 특정된다. 정상 체중은 그렐린 수준이 정상적일 때 등과 같은 시기 전에 개체의 체중과 비교함으로써, 또는 개체의 그렐린 수치를 비슷한 나이 및/또는 상태의 다른 개체의 평균과 비교함으로써, 결정할 수 있다.
본원에서, 과체중 개체나 포유류는 상기 개체의 정상 체중에 약 5% 이상 내지 약 20% 이상의 체중을 가진 것으로 특정화된다. 정상 체중은 그렐린 수준이 정상적일 때 등과 같은 시기 전에 개체의 체중과 비교함으로써, 또는 개체의 그렐린 수치를 비슷한 나이 및/또는 상태의 다른 개체의 평균과 비교함으로써, 결정할 수 있다.
본원에서, 정상 개체나 포유류는 상기 개체의 정상 체중에 약 5% 이상 내지 약 5% 이하의 체중을 갖는 것으로 특정화된다. 정상 체중은 그렐린 수준이 정상적일 때 등과 같은 시기 전에 개체의 체중과 비교함으로써, 또는 개체의 그렐린 수치를 비슷한 나이 및/또는 상태의 다른 개체의 평균과 비교함으로써, 결정할 수 있다. 정상 체중인 개체는 약 19-22의 BMI를 가질 수 있다.
본원에서, 마른 개체 또는 포유류는 개체의 정상 체중에 약 5% 내지 30%, 또는 심지어 50% 이하의 체중을 갖는 것으로 특정화된다. 정상 체중은 그렐린 수준이 정상적일 때 등과 같은 시기 전에 개체의 체중과 비교함으로써, 또는 개체의 그렐린 수치를 비슷한 나이 및/또는 상태의 다른 개체의 평균과 비교함으로써, 결정할 수 있다.
본원에서, 용어 "치료하다", "치료하는" 및 "치료"는 완화적, 치유적 및 예방적 치료를 포함한다.
본원에서, "측정가능한"은 생물학적 효과가 재현가능하며 동시에 분석의 베이스라인 가변성과는 현저하게 상이함을 의미한다.
"단백질분해"는 본원에서, 프로테아제라 하는 단백질 분해성 세포성 효소에 의한 펩타이드 결합의 가수분해에 의한, 단백질의 유도된 분해, 즉 절단을 일컫는다.
별도로 언급되어 있지 않은 한, 본원에 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자가 통상적으로 이해하는 바와 동일한 의미를 갖는다. 또한, 본원에 언급된 모든 공개문헌, 특허 출원, 특허 및 그외 인용문헌들은 원용에 의해 본 명세서에 포함된다.
본 발명의 화합물에 존재하는 모든 아미노산들은 하기와 같이 표시될 수 있으며, 하기와 같다:
명칭 및 약어
기호 의미
Abu: α-아미노부티르산
Acc: 1-아미노-1-사이클로(C3-C9)알킬 카르복시산
A3c: 1-아미노-1-사이클로프로판카르복시산
A4c: 1-아미노-1-사이클로부탄카르복시산
A5c: 1-아미노-1-사이클로펜탄카르복시산
A6c: 1-아미노-1-사이클로헥산카르복시산
Act: 구조식
Figure 112009025324177-pct00003
으로 표시됨
Aib: α-아미노이소부티르산
Aic: 2-아미노인단-2-카르복시산
Ala 또는 A: 알라닌
β-Ala: 베타-알라닌
Apc: 구조식
Figure 112009025324177-pct00004
으로 표시됨
Arg 또는 R: 아르기닌
hArg: 호모아르기닌
Asn 또는 N: 아스파라긴
Asp 또는 D: 아스파르트산
Ava: 5-아미노-n-발레르산
Cha: β-사이클로헥실알라닌
Cys 또는 C: 시스테인
hCys: L-호모시스테인
Dab: 2,4-디아미노부티르산
Dap: 2,3-디아미노프로판산
Dhp: 3,4-데하이드로프롤린
Dmt: 5,5-디메틸티아졸리딘-4-카르복시산
2Fua: β-(2-퓨릴)-알라닌
Gln 또는 Q: 글루타민
Glu 또는 E: 글루탐산
Gly 또는 G: 글리신
His 또는 H: 히스티딘
3Hyp: 트랜스-3-하이드록시-L-프롤린,
즉, (2S, 3S)-3-하이드록시피롤리딘-2- 카르복시산
4Hyp: 4-하이드록시프롤린,
즉, (2S, 4R)-4-하이드록시피롤리딘-2- 카르복시산
Ile 또는 I: 이소루신
Inc: 인돌린-2-카르복시산
Inp: 이소니페코트산(isonipecotic acid)
Ktp: 4-케토프롤린
Leu 또는 L: 루신
hLeu: 호모루신
Lys 또는 K: 라이신
Met 또는 M: 메티오닌
1-Nal: β-(1-나프틸)-L-알라닌
2-Nal: β-(2-나프틸)-L-알라닌
Nle: 노르루신
Nva: 노르발린
Oic: 옥타하이드로인돌-2-카르복시산
Orn: 오르니틴
2Pal: β-(2-피리딜)-알라닌
3Pal: β-(3-피리딜)-알라닌
4Pal: β-(4-피리딜)-알라닌
Phe 또는 F: 페닐알라닌
hPhe: 호모페닐알라닌
Pip: 피페콜산
Pro 또는 P: 프롤린
Ser 또는 S: 세린
Taz: β-(4-티아졸릴)알라닌, 즉,
Figure 112009025324177-pct00005
2-Thi: β-(2-티에닐)알라닌
3-Thi: β-(3-티에닐)알라닌
Thp: 4-아미노-4-카르복시테트라하이드로피란
Thr 또는 T: 트레오닌
Thz: 티아졸리딘-4-카르복시산
Tic: 1,2,3,4-테트라하이드로이소퀴놀린-3-카르복시산
Tle: tert-루신
Trp 또는 W: 트립토판
Tyr 또는 Y: 티로신
Val 또는 V: 발린
아미노산이 이성질체 형태인 경우, 명확하게 언급되어 있지 않은 한, L형의 아미노산을 나타낸다.
펩타이드를 정의하는데 사용되는 명칭은 당업계에 전형적으로 사용되며, 여기에서 N-말단의 아미노기는 좌측이고 C-말단의 카르복시기가 우측인, 즉 -NH-CI(R')-CO- 구조이며, R 및 R'은 각각 독립적으로 수소 또는 아미노산의 측쇄이거나(예, Ala인 경우 R = CH3 및 R' = H), 또는 R과 R'이 연결되어 고리 시스템을 형성할 수 있다. N-말단 아미노산에서, 약어는 구조:
Figure 112009025324177-pct00006
이거나, N-말단 아미노산이 이소니펙코트산(Inp)인 경우, 약어는 구조:
Figure 112009025324177-pct00007
이다.
본 발명의 펩타이드는 본원에서 또 다른 포맷(format)으로도 표시되며, 예컨대, (Aib2)h그렐린(1-28)-NH2는 첫 번째 괄호 안에 위치하는 천연 서열이 치환된 아미산(들)을 갖는다(예컨대, h그렐린 내의 Ser2가 Aib2로 치환됨). 두 번째 괄호 안의 숫자는 펩타이드 내에 존재하는 아미노산의 번호를 나타낸다(예컨대, h그렐린(1-18)은 인간 그렐린의 펩타이드 서열의 1번에서 18번까지의 아미노산을 의미함). 예를 들어, (Aib2)h그렐린(1-28)-NH2에 표시된 "NH2"은, 펩타이드의 C-말단이 아미드화되어 있음을 나타낸다. (Aib2)h그렐린(1-28), 또는 대안적으로 (Aib2)h그렐린(1-28)-OH는, C-말단이 유리산임을 나타낸다. 소스나 기원을 표시하기 위해 소문자가 "그렐린" 앞에 삽입되는데, 즉, "h"은 그렐린이 호모사피엔스에서 발견되는 그렐린 형태의 상동체임을 의미한다.
언급되어 있지 않은 한, 키랄 센터를 가지고 있는 아미노산은 L-거울상이성질체로 제공된다. "그의 유도체"라는 언급은 대응되는 D-아미노산, N-알킬-아미노산, 베타-아미노산 또는 표지된 아미노산 등의 변형된 아미노산을 일컫는다.
본원에서, Acc는 1-아미노산-1-사이클로프로판카르복시산(A3c); 1-아미노-1-사이클로부탄카르복시산(A4c); 1-아미노-1-사이클로펜탄카르복시산(A5c); 1-아미노-1-사이클로헥산카르복시산(A6c); 1-아미노-1-사이클로헵탄카르복시산(A7c); 1-아미노-1-사이클로옥탄카르복시산(A8c); 및 1-아미노-1-사이클로노난카르복시산(A9c)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 아미노산을 포함한다.
"아실"은 R"이 H, 알킬, 치환된 알킬, 헤테로알킬, 치환된 헤테로알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 아릴, 알킬아릴 또는 치환된 알킬아릴인, R"-C(O)-이다.
"알킬"은 하나 이상의 탄소 원자를 함유하는 탄화수소기를 일컬으며, 여기서 복수의 탄소 원자가 존재하는 경우, 단일 결합으로 연결된다. 알킬 탄화수소기는 직쇄일 수도 있고, 하나 이상의 분지(branch) 또는 환형 기를 함유할 수도 있다.
"치환된 알킬"이란, 탄화수소기의 하나 이상의 수소 원자가, 할로겐 (즉, 불소, 염소, 브롬, 및 요오드), -OH, -CN, -SH, -NH2, -NHCH3, -NO2, 1개 내지 6개의 할로겐으로 치환된 -C1 -20 알킬, -CF3, -OCH3, -OCF3, 및 -(CH2)0-20-COOH로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된 알킬이다. 다른 예에 있어서, 1개, 2개, 3개, 또는 4개의 치환기가 존재한다. -(CH2)0-20-COOH의 존재는 알킬산을 생성시킨다. -(CH2)0-20-COOH를 함유하거나, 또는 -(CH2)0-20-COOH로 구성되는 알킬산의 예로는, 2-노르보란 아세트산, tert-부티르산, 및 3-사이클로펜틸 프로피온산이 있으나, 이들로 한정되는 것은 아니다.
"헤테로알킬"이란, 탄화수소기의 하나 이상의 탄소 원자가, 아미노, 아미도, -O-, -S- 또는 카르보닐 중 하나 이상의 기로 치환된 알킬이다. 다른 예에 있어서, 1개 또는 2개의 이종 원자가 존재한다.
"치환된 헤테로알킬"이란, 탄화수소기의 하나 이상의 수소 원자가, 할로겐 (즉, 불소, 염소, 브롬, 및 요오드), -OH, -CN, -SH, -NH2, -NHCH3, -NO2, 1 - 6개의 할로겐으로 치환된 -C1 -20 알킬, -CF3, -OCH3, -OCF3, 및 -(CH2)0-20-COOH로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 기로 치환된 헤테로알킬을 일컫는다. 다른 예에 있어서, 1개, 2개, 3개, 또는 4개의 치환기가 존재한다.
"알케닐"이란, 하나 이상의 탄소-탄소 이중 결합이 존재하는 2개 이상의 탄소 원자로 이루어진 탄화수소기를 일컫는다. 알케닐 탄화수소기는 직쇄일 수도 있고, 하나 이상의 분지 또는 환형 기를 함유할 수도 있다.
"치환된 알케닐"이란, 하나 이상의 수소가, 할로겐 (즉, 불소, 염소, 브롬, 및 요오드), -OH, -CN, -SH, -NH2, -NHCH3, -NO2, 1 - 6개의 할로겐으로 치환된 -C1 -20 알킬, -CF3, -OCH3, -OCF3, 및 -(CH2)0-20-COOH로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된 알케닐을 일컫는다. 다른 예에 있어서, 1개, 2개, 3개, 또는 4개의 치환기가 존재한다.
"아릴"이란, 최대 2개의 공액된(conjugated) 또는 융합된(fused) 고리 시스템을 포함하며, 공액된 파이-전자 시스템(pi-electron system)을 가지고 있는 하나 이상의 고리를 가진 선택적으로 치환된 방향족 기를 일컫는다. 아릴은 카르보사이클릭 아릴, 헤테로사이클릭 아릴, 및 바이아릴 기를 포함한다. 바람직하게는, 상기 아릴은 5원 또는 6원 고리이다. 헤테로사이클릭 아릴에 대한 바람직한 원자는 하나 이상의 황, 산소, 및/또는 질소이다. 아릴의 예로는, 페닐, 1-나프틸, 2-나프틸, 인돌, 퀴놀린, 2-이미다졸, 및 9-안트라센이 있으나, 이들로 한정되는 것은 아니다. 아릴 치환기는 -C1 -20 알킬, -C1 -20 알콕시, 할로겐 (즉, 불소, 염소, 브롬, 및 요오드), -OH, -CN, -SH, -NH2, -NO2, 1 - 5개의 할로겐으로 치환된 -C1 -20 알킬, -CF3, -OCF3, 및 -(CH2)0-20-COOH로 이루어지는 군으로부터 선택된다. 다른 예에 있어서, 아릴은 1개, 2개, 3개, 또는 4개의 치환기를 포함한다.
용어 "할로"는 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 포함한다.
용어 "(C1-C12)탄화수소 모이어티"는 알킬, 알케닐 및 알키닐을 포함하며, 알케닐 및 알키닐의 경우, C2-C12가 있다.
"알킬아릴"은 "아릴"에 결합된 "알킬"을 일컫는다.
Glu(NH-헥실)은
Figure 112009025324177-pct00008
이다.
Ser(n-옥타노일) 또는 Ser(C(O)-헵틸)은
Figure 112009025324177-pct00009
이다.
N-말단 아미노산 Inp 및 Apc는 하기 구조를 갖는다:
Inp:
Figure 112009025324177-pct00010
1-Apc:
Figure 112009025324177-pct00011
4-Apc:
Figure 112009025324177-pct00012
본 발명은 부분입체 이성질체 뿐만 아니라, 그것의 라세미체와 해리된 거울상 이성질체의 순수한 형태를 포함한다. 그렐린 유사체는 D-아미노산, L-아미노산 또는 그들의 조합을 포함할 수 있다. 바람직하게는, 그렐린 유사체 내에 존재하는 아미노산은 L-거울상 이성질체이다.
본 발명의 유사체의 바람직한 유도체는 D-아미노산, N-알킬-아미노산, β-아미노산, 및/또는 하나 이상의 표지된 아미노산(D-아미노산, N-알킬-아미노산, 또는 β-아미노산의 표지된 형태를 포함함)을 포함한다. 표지된 유도체는, 검출 가능한 표지물질(label)을 이용한 아미노산 또는 아미노산 유도체의 변형을 의미한다. 검출 가능한 표지물질의 예로는 발광성(luminescent), 효소적, 및 방사선(radioactive) 표지물질을 포함한다. 표지물질의 유형과 표지 위치는 둘다 유사체 활성에 영향을 줄 수 있다. 표지물질은 GHS 수용체에 대한 그렐린 유사체의 활성을 실질적으로 변화시키지 않도록 선택되고 배치되어야 한다. 그렐린 활성에 대한 특정 라벨의 효과 및 위치는 그렐린 활성 및/또는 결합을 측정하는 분석을 통해 측정할 수 있다.
C-말단 카르복시기에 공유 결합된 보호기는 생체내 조건 하에서 카르복시 말단의 반응성을 감소시킨다. 상기 카르복시 말단 보호기는 바람직하게는 가장 마지막에 위치하는 아미노산의 α-카르보닐기에 부착된다. 바람직한 카르복시 말단 보호기로는, 아미드, 메틸아미드 및 에틸아미드가 포함된다.
본원에 사용되는 그외 임의의 약어는 다음과 같이 정의된다:
명명 및 약어
기호 의미
Boc: tert-부틸옥시카르보닐
BSA: 소 혈청 알부민
Bzl: 벤질
DCM: 디클로로메탄
DIC: N,N-디이소프로필카르보디이미드
DIEA: 디이소프로필에틸아민
Dmab: 4-{N-(1-(4,4-디메틸-2,6-디옥소사이클로헥실리덴)-3-메틸부틸)-아미노}벤질
DMAP: 4-(디메틸아미노)피리딘
DMF: 디메틸포름아미드
DNP: 2,4-디니트로페닐
EDTA: 에틸렌디아민테트라아세트산
Fmoc: 플루오레닐메틸옥시카르보닐
HBTU: 2-(1H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트
cHex: 사이클로헥실
HOAT: O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸유로늄 헥사플루오로포스페이트
HOBt: 1-하이드록시-벤조트리아졸
HPLC: 고성능 액체 크로마토그래피
MBHA: 4-메틸벤즈하이드릴아민
Mmt: 4-메톡시트리틸
NMP: N-메틸피롤리돈
Pbf: 2,2,4,6,7-펜타메틸디하이드로벤조퓨란-5-설포닐
PhiPr: γ-2-페닐이소프로필 에스테르
PyAOP: 7-아자벤조트리아졸-1-일옥시트리스(피롤리디노)포스포늄-헥사플루오로포스페이트
tBu: tert-부틸
TIS: 트리이소프로필실란
TOS: 토실
trt: 트리틸
TFA: 트리플루오로아세트산
TFFH: 테트라메틸플루오로포르아미디늄 헥사플루오로포스페이트
Z: 벤질옥시카르보닐
합성 방법
본 발명의 화합물은 본 실시예에 기술된 기법과 당업계에 잘 알려져 있는 기법들을 이용하여 제조할 수 있다. 예컨대, GHS 유사체의 폴리펩타이드 부분은 화학적으로 또는 생화학적으로 합성 및 변형할 수 있다. 세포내에 핵산 도입과 핵산의 발현을 포함하는, 생화학적 합성 기법들은 예컨대, Ausubel, Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley, 1987-1998, 및 Sambrook et al ., in Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 2nd Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989에 개시되어 있다. 폴리펩타이드의 화학적 합성 기법 역시 당업계에 잘 알려져 있다(Vincent in Peptide and Protein Drug Delivery, New York, N.Y., Dekker, 1990). 예를 들어, 본 발명의 펩타이드는 표준적인 고상 펩타이드 합성에 의하여 제조할 수 있다(Stewart, J.M. et al., Solid Phase Synthesis, Pierce Chemical Co., 2d ed. 1984).
상기 일반식의 치환기 R2은 당업계에 공지된 표준 방법에 의해 N-말단 아미노산의 유리 아민에 부착시킬 수 있다. 예를 들면, 알킬기, 예컨대, (C1-C30)알킬은 환원성 알킬화에 의해 부착할 수 있다. 또한, 하이드록시알킬기, 예를 들어, (C1-C30)하이드록시알킬 역시 환원성 알킬화를 이용하여 부착할 수 있으며, 이때 유리 하이드록시기는 t-부틸 에스테르로 보호된다. 완성된 잔기를 메틸렌 클로라이드 중에서 3몰 당량의 유리산 및 디이소프로필카르보디이미드와 1시간 동안 혼합함으로써, 유리산, 예를 들어, E1COOH를 N-말단 아미노산의 유리 아민과 커플링시켜, 아실기, 예컨대, COE1을 부착할 수 있다. 상기 유리산이 유리 하이드록시기, 예를 들면, p-하이드록시페닐프로피온산을 포함하고 있는 경우, 커플링은 추가적인 3몰 당량의 HOBT를 이용하여 실시하여야 한다.
R1이 NH-X2-CH2-CONH2(즉, Z0 = CONH2)인 경우, 펩타이드의 합성은, Rink Amide-MBHA 수지에 커플링된 Fmoc-HN-X2-CH2-COOH(아미드-4-메틸벤질하이드릴 아민, Novabiochem？ San Diego, CA)를 이용하여 개시한다. R1이 NH-X2-CH2-COOH(즉, Z0 = COOH)인 경우, 펩타이드의 합성은, Wang 수지에 커플링된 Fmoc-HN-X2-CH2-COOH를 이용하여 개시한다.
A5c, A6c 및/또는 Aib를 포함하는 본 발명의 그렐린 유사체의 합성에서, 이들 잔기와 다음 차례 잔기들의 커플링 시간은 2시간이다.
본 발명의 여러가지 특징을 추가적으로 설명하기 위해 하기에 실시예들을 나타낸다. 또한, 실시예들은 본 발명을 실시하기 위한 유용한 방법을 예시한다. 이들 실시예들은 청구된 본 발명을 제한하진 않는다.
실시예 2: ( Ac -1- Apc 1 , Aib 2 ,10 , Glu ( NH - 헥실 ) 3 ) hGhrelin (1-28)- NH 2 (서열번호 20)
측쇄 보호된 Fmoc-(Aib2 ,10,Glu3) hGhrelin(2-28)-Rink amide-MBHA 수지는, 플루오레닐메틸옥시카르보닐(Fmoc) 화합물을 이용하여 433A 펩타이드 합성기(Applied Biosystems？ Foster City, CA, U.S.A.)에서 합성하였다. 치환율 0.64 mmol/g의 Rink Amide-4-메틸벤질하이드릴아민(MBHA) 수지(Novabiochem？ San Diego, CA, U.S.A.)를 사용하였다. 사용한 Fmoc 아미노산(AnaSpec？ San Jose, CA, U.S.A.)은 Fmoc-Ala-OH, Fmoc-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-Aib-OH, Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-Glu(tBu)- OH, Fmoc-His(Trt)-OH, Fmoc-Leu-OH, Fmoc-Lys(Boc)-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Ser(tBu)-OH, 및 Fmoc-Val-OH였다. 또한, Fmoc-Glu(O-2-PhiPr)-OH (Novabiochem？ San Diego, CA, U.S.A.)를 A3에서 사용하였다. 합성은 0.1 mmol 스케일로 수행하였다. N-메틸피롤리돈(NMP) 중의 20% 피페리딘으로 30분간 처리하여, Fmoc 기를 제거하였다. 각 커플링 단계에서, Fmoc 아미노산(3 eq, 0.3 mmol)을 먼저 NMP 중의 0.45M 2-(1-H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,2,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트/1-하이드록시-벤조트리아졸(HBTU/HOBT) 용액 2 ml에서 전-활성화시켰다. 활성화된 아미노산 에스테르에, 1 mL의 디이소프로필에틸아민(DIEA)과 1 mL의 NMP를 첨가하였다. ABI 433A 펩타이드 합성기를 하기와 같이 실시하도록 프로그래밍하였다:
(1) NMP로 세척;
(2) 30분간 NMP 중의 20% 피페리딘으로 Fmoc 보호기 제거;
(3) NMP로 세척; 및
(4) 1 - 3시간 동안 전-활성화된 Fmoc 아미노산과 커플링.
표제 펩타이드의 서열에 따라 수지를 연속하여 커플링하였다. 펩타이드 체인을 조립한 후, 수지는, N,N-디메틸포름아미드(DMF) 및 디클로로메탄(DCM)을 이용하여 완전하게 세척하였다.
433A에서 펩타이드 체인 조합을 종료한 시점에, 펩타이드-수지를 교반기 상의 반응 용기로 이동시켜, 25% Pip/DMF를 이용하여 30분간 Fmoc를 제거하였다. 수 지를 DMF로 세정하였다. Fmoc-Apc-OH(0.4 mmole)를, TFFH (테트라메틸플루오로포름아미디늄 헥사플루오로포스페이트)(Perceptive Biosystems？ Warrington, U.K)(0.4 mmole), HOAt(0.4 mmol), DMAP(디메틸아미노피리딘)(0.1 g) 및 DIEA(1.2 mmole)를 이용하여, 4시간 주기로 한번, 그런 후 다시 하룻밤 동안 커플링하였다.
상기와 같이 Fmoc 기를 제거하고, DMF 중에 Ac2O(아세트 무수화물)(5 mmole) 및 DIEA(5 mmole)를 30분간 이용하여 펩타이드를 캡핑하였다. DCM 중의 2 x 3% TFA를 이용하여 10분 주기 동안 Glu3로부터 PhiPr 기를 제거하였다. Lys의 측쇄로부터 부분적으로 제거된 Boc를 하룻밤동안 DCM 중의 Boc2O(0.8 mmole) 및 DIEA(0.8 mmole)를 이용하여 치환하였다. 그런 후, 수지에 PyAOP(7-아자벤조트리아졸-1-일옥시트리스(피롤리디노)포스포늄-헥사플루오로포스페이트)(Applied Biosystems？ Foster City, CA, U.S.A.)(0.6 mmole), HOAt(0.6 mmole), DMAP(0.1 g) 및 DIEA(1.8 mmole)를 10분 주기로 처리하고, 헥실-NH2, 즉, 헥실아민(Sigma-Aldrich Chemicals？ St. Louis, MO, U.S.A.)(2.0 mmole)을 첨가한 다음, 수득되는 수지를 하룻밤동안 연속 교반하였다.
표제 화합물을 잘라내기 위해, 수지에, TFA, H2O 및 트리이소프로필실란(TIS)(9.5 mL / 0.85 mL /0.8 mL) 혼합물을 4시간 동안 처리하였다. 그런 후, 수지는 여과 제거하고, 여과물은 200 mL의 에테르에 부었다. 침전물을 원심분리로 수득하였다. 이 조산물을 아세토니트릴 및 물 혼합물에 용해하고, C18 DYNAMAX-100 A0 (Varian？ Walnut Creek, CA, U.S.A.) 컬럼(4 x 43 cm)이 장착된 역상 제조용 HPLC 시스템에서 정제하였다. 컬럼에서, A가 수 중의 0.1% TFA이고 B가 아세토니트릴 중의 0.1% TFA인, 선형 농도 구배 92% A:8% B -> 72% A:28% B로 약 1시간 동안 용출시켰다. 분획을 분석용 HPLC로 체크하고, 순수한 산물이 포함된 분획을 모아 동결건조하여, 1.5 mg (0.5%) 수율의 백색 고형물로 수득하였다. HPLC로 순도를 분석하였고, 약 97.5%로 확인되었다. 전자-분무 이온화 질량 분광분석(ESI-MS)에서, 분자량은 3435.1이었다(계산한 분자량 3434.5와 일치됨).
실시예 4: (1- Apc 1 , Aib 2 ,10 , Glu ( NH - 헥실 ) 3 )- hGhrelin (1-28)- NH 2 (서열번호 18)
측쇄 보호된 Fmoc-(Aib2 ,10, Glu3) hGhrelin(2-28)-Rink amide-MBHA 수지는, 플루오레닐메틸옥시카르보닐(Fmoc) 화합물을 이용하여 433A 펩타이드 합성기(Applied Biosystems？ Foster City, CA, U.S.A.)에서 합성하였다. 치환율 0.64 mmol/g의 Rink Amide-4-메틸벤질하이드릴아민(MBHA) 수지(Novabiochem？ San Diego, CA, U.S.A.)를 사용하였다. 사용한 Fmoc 아미노산(AnaSpec？ San Jose, CA, U.S.A.)은 Fmoc-Ala-OH, Fmoc-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-Aib-OH, Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-Glu(tBu)-OH, Fmoc-His(Trt)-OH, Fmoc-Leu-OH, Fmoc-Lys(Boc)-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Ser(tBu)-OH 및 Fmoc-Val-OH였다. 또한, Fmoc-Glu(O-2-PhiPr)- OH(Novabiochem？ San Diego, CA)를 A3에 사용하였다. 합성은 0.1 mmol 스케일로 수행하였다. N-메틸피롤리돈(NMP) 중의 20% 피페리딘으로 30분간 처리하여, Fmoc 기를 제거하였다. 각 커플링 단계에서, Fmoc 아미노산(3 eq, 0.3 mmol)을 먼저 NMP 중의 0.45M 2-(1-H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,2,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트/1-하이드록시-벤조트리아졸(HBTU/HOBT) 용액 2 ml에서 전-활성화시켰다. 활성화된 아미노산 에스테르에, 1 mL의 디이소프로필에틸아민(DIEA)과 1 mL의 NMP를 수지에 첨가하였다. ABI 433A 펩타이드 합성기를 하기와 같이 실시하도록 프로그래밍하였다:
(1) NMP로 세척;
(2) 30분간 NMP 중의 20% 피페리딘으로 Fmoc 보호기 제거;
(3) NMP로 세척; 및
(4) 1 - 4시간 동안 전-활성화된 Fmoc 아미노산과 커플링.
표제 펩타이드의 서열에 따라 수지를 연속하여 커플링하였다. 펩타이드 체인을 조립한 후, 수지는, N,N-디메틸포름아미드(DMF) 및 디클로로메탄(DCM)을 이용하여 완전하게 세척하였다.
433A에서 펩타이드 체인 조합을 종료한 시점에, 펩타이드-수지를 교반기상의 반응 용기로 이동시켜, 25% Pip/DMF를 이용하여 약 30분간 Fmoc를 제거하였다. 수지를 DMF로 세정하였다. Fmoc-Apc-OH(0.4 mmole)를, TFFH (테트라메틸플루오로포름아미디늄 헥사플루오로포스페이트)(Perceptive Biosystems？ Warrington, U.K)(0.4 mmole), HOAt(0.4 mmol), DMAP(디메틸아미노피리딘)(0.1 g) 및 DIEA(1.2 mmole)를 이용하여, 4시간 주기로 한번, 그런 후 다시 하룻밤 동안 커플링하였다.
상기와 같이 Fmoc 기를 제거하였다. 주기 1회당 10분 간격으로 DCM 중의 3% TFA를 2회 주기로 이용하여, Glu3으로부터 PhiPr 기를 제거하였다. 프로세스 중에, Lys의 측쇄로부터 부분적으로 제거된 Boc를 하룻밤동안 DCM 중의 Boc2O(0.8 mmole) 및 DIEA(0.8 mmole)를 이용하여 치환하였다. 그런 후, 수지에 PyAOP(7-아자벤조트리아졸-1-일옥시트리스(피롤리디노)포스포늄-헥사플루오로포스페이트)(Applied Biosystems？ Foster City, CA, U.S.A.)(0.6 mmole), HOAt(0.6 mmole), DMAP(0.1 g) 및 DIEA(1.8 mmole)를 10분간 처리하고, 헥실-NH2, 즉, 헥실아민(Sigma-Aldrich Chemicals？ St. Louis, MO, U.S.A.)(2.0 mmole)을 첨가한 다음, 수득되는 수지를 하룻밤동안 연속 교반하였다.
TFA, H2O 및 트리이소프로필실란(TIS)(9.5 mL / 0.85 mL /0.8 mL) 혼합물을 약 4시간 처리하여, 수지에서 표제 화합물을 잘라내었다. 그런 후, 수지는 여과 제거하고, 여과물은 200 mL의 에테르에 부었다. 침전물을 원심분리로 수득하였다. 이 조산물을 아세토니트릴 및 물 혼합물에 용해하고, C18 DYNAMAX-100 A0 (Varian？ Walnut Creek, CA, U.S.A.) 컬럼(4 x 43 cm)이 장착된 역상 제조용 HPLC 시스템에서 정제하였다. 컬럼에서, A가 수 중의 0.1% TFA이고 B가 아세토니트릴 중의 0.1% TFA인, 선형 농도 구배 92% A:8% B -> 72% A:28% B로 약 1시간 동안 용출시켰다. 분획을 분석용 HPLC로 체크하고, 순수한 산물이 포함된 분획을 모아 동결건조하여, 4.6mg (1.4%) 수율의 백색 고형물로 수득하였다. HPLC로 순도를 분석하였고, 약 99.8%로 확인되었다. 전자-분무 이온화 질량 분광분석(ESI-MS)에서, 분자량은 3393.5이었다(계산한 분자량 3393.1와 일치됨).
실시예 11: ( Inp 1 , Ser (n- 옥타노일 ) 17 ) hGhrelin (1-28)- NH 2 (서열번호 11)
측쇄 보호된 Fmoc-(Ser17) hGhrelin(2-28)-Rink amide-MBHA 수지는, 플루오레닐메틸옥시카르보닐(Fmoc) 화합물을 이용하여 433A 펩타이드 합성기(Applied Biosystems？ Foster City, CA, U.S.A.)에서 합성하였다. 치환율 0.64 mmol/g의 Rink Amide-4-메틸벤질하이드릴아민(MBHA) 수지(Novabiochem？ San Diego, CA, U.S.A.)를 사용하였다. 사용한 Fmoc 아미노산(AnaSpec？ San Jose, CA, U.S.A.)은 Fmoc-Ala-OH, Fmoc-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-Aib-OH, Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-Glu(tBu)-OH, Fmoc-His(Trt)-OH, Fmoc-Leu-OH, Fmoc-Lys(Boc)-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Ser(tBu)-OH 및 Fmoc-Val-OH였다. 또한, Fmoc-Ser(Trt)-OH(AnaSpec？ San Jose, CA, U.S.A.)를 A3 및 A17에 사용하였다. 합성은 0.2 mmol 스케일로 수행하였다. N-메틸피롤리돈(NMP) 중의 20% 피페리딘으로 30분간 처리하여, Fmoc 기를 제거하였다. 각 커플링 단계에서, Fmoc 아미노산(3 eq, 0.3 mmol)을 먼저 NMP 중의 0.45M 2-(1-H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,2,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트/1-하이드록시-벤조트리아졸(HBTU/HOBT) 용액 2 ml에서 전-활성화시켰다. 활성화된 아미노산 에스테르에, 1 mL의 디이소프로필에틸아민(DIEA)과 1 mL의 NMP를 수지에 첨가하였다. ABI 433A 펩타이드 합성기를 하기와 같이 실시하도록 프로그래밍하였다:
(1) NMP로 세척;
(2) 30분간 NMP 중의 20% 피페리딘으로 Fmoc 보호기 제거;
(3) NMP로 세척; 및
(4) 1 또는 2시간 동안 전-활성화된 Fmoc 아미노산과 커플링.
표제 펩타이드의 서열에 따라 수지를 연속하여 커플링하였다. 펩타이드 체인을 조립한 후, 수지는, N,N-디메틸포름아미드(DMF) 및 디클로로메탄(DCM)을 이용하여 완전하게 세척하였다.
433A에서 펩타이드 체인 조합을 종료한 시점에, 펩타이드-수지를 교반기상의 반응 용기로 이동시켜, 25% Pip/DMF를 이용하여 약 30분간 Fmoc를 제거하였다. 수지를 DMF로 세정하였다. Fmoc-Inp-OH(1.0 mmole)를, TFFH (테트라메틸플루오로포름아미디늄 헥사플루오로포스페이트)(Perceptive Biosystems？ Warrington, U.K)(1.0 mmole), HOAt(1.0 mmol), DMAP(디메틸아미노피리딘)(0.1 g) 및 DIEA(3.0 mmole)를 이용하여, 하룻밤 동안 커플링하였다.
약 10분간 지속되는 각 주기에서 DCM 중의 3% TFA를 2회 주기로 이용하여, Ser3 및 Ser17로부터 Trt 기를 제거하였다. 전술한 바와 같이 Lys의 측쇄로부터 부분적으로 제거된 Boc를 하룻밤동안 DCM 중의 Boc2O(0.8 mmole) 및 DIEA(0.8 mmole)를 이용하여 치환하였다. 그런 후, 옥탄산(10 mmol)을, DCM 중에 하룻밤동안 DIC(5 mmole), DMAP(0.2 mg) 및 DIEA(5 mmole)를 이용하여 Ser3 및 Ser17 측쇄에 커플링하였다.
말단의 Fmoc는, 30분간 25% Pip/DMF에 침지함으로써 제거하였다. 그런 후, 수지를 DMF로 세척하였다. TFA, H2O 및 트리이소프로필실란(TIS)(9.5 mL / 0.85 mL /0.8 mL) 혼합물을 약 4시간 처리하여, 수지에서 표제 화합물을 잘라내었다. 그런 후, 수지는 여과 제거하고, 여과물은 200 mL의 에테르에 부었다. 침전물을 원심분리로 수득하였다. 이 조산물을 아세토니트릴 및 물 혼합물에 용해하고, C18 DYNAMAX-100 A0 (Varian？ Walnut Creek, CA, U.S.A.) 컬럼(4 x 43 cm)이 장착된 역상 제조용 HPLC 시스템에서 정제하였다. 컬럼에서, A가 수 중의 0.1% TFA이고 B가 아세토니트릴 중의 0.1% TFA인, 선형 농도 구배 85% A:15% B -> 55% A:45% B로 약 1시간 동안 용출시켰다. 분획을 분석용 HPLC로 체크하고, 순수한 산물이 포함된 분획을 모아 동결건조하여, 41.7mg (5.9%) 수율의 백색 고형물로 수득하였다. HPLC로 순도를 분석하였고, 약 96.6%로 확인되었다. 전자-분무 이온화 질량 분광분석(ESI-MS)에서, 분자량은 3507.4이었다(계산한 분자량 3508.16와 일치됨).
본 발명의 하기 펩타이드는 상기에 일반적으로 기술된 내용과 유사한 합성 공정을 이용하여 당업자라면 제조할 수 있다:
실시예 1: (Ac-Inp1, Aib2 ,10, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 19);
실시예 2: (Ac-1-Apc1, Aib2 ,10, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 20);
실시예 3: (Inp1, Aib2 ,10, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 17);
실시예 4: (1-Apc1, Aib2 ,10, Glu(NH-헥실)3)-hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 18);
실시예 5: (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 5);
실시예 6: (Inp1, Aib2)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 6);
실시예 7: (Inp1, Aib2, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 7);
실시예 8: (Inp1, Aib2 ,10)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 8);
실시예 9: (Inp1, Aib2 ,8)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 9);
실시예 10: (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 10);
실시예 11: (Inp1, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 11);
실시예 12: (Inp1, Aib2,8, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 12)
실시예 13: [Inp1,Ser3]hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 13);
실시예 14: [Inp1,Aib2,Ser3]hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 14);
실시예 15: [Inp1,Aib2,Ser3,Ser(n-옥타노일)17]hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 15);
실시예 16: [Inp1,Aib2,10,Ser3]hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 16)..
전술한 선택한 바람직한 구현예들은 전자-분무 이온화 질량 분광분석(ESI-MS)로 분석하여 분자량을 결정하였다. 표 1에 테스트하는 동안에 집계한 데이타 기록을 나타내었다. HPLC를 이용하여 분석한 선택한 화합물 각각의 순도도 나타내었다.
표 1 - 선택한 화합물의 분자 및 순도
실시예 화합물 분자량
(계산치)		 분자량
(MS-ES)		 순도
(%)
#1 (Ac-Inp1, Aib2,10, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 19)		 3420.0 3419.5 97.0%
#2 (Ac-1-Apc1, Aib2,10, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 20)		 3435.5 3434.5 97.5%
#3 (Inp1, Aib2,10, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 17)		 3378.0 3377.6 97.8%
#4 (1-Apc1, Aib2,10, Glu(NH-헥실)3)-hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 18)		 3393.1 3393.5 99.8%
#5 (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 5)		 3434.0 3423.8 96.2%
#6 (Inp1, Aib2)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 6)		 3422.3 3422.1 99.0%
#7 (Inp1, Aib2, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 7)		 3421.4 3421.3 99.0%
#8 (Inp1, Aib2,10)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 8)		 3379.0 3379.3 99.0%
#9 (Inp1, Aib2,8)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 9)		 3378.2 3377.4 98.0%
#10 (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 10)		 3506.2 3505.8 98.0%
#11 (Inp1, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 11)		 3508.2 3507.4 96.6%
#12 (Inp1, Aib2 ,8, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 12)		 3462.2 3462.3 99.0%
전술한 선택한 바람직한 구현예들을 분석하여, 당업계자들에게 공지된 기법으로 랫 모엘에서의 안정성, 즉 혈장내 반감기를 결정하였다. 표 2에 이러한 조사동안에 집계한 데이타 기록을 나타내었다.
표 2 - 선택한 화합물의 랫 혈장내 반감기
실시예 화합물 랫 혈장에서의 반감기(시간)
#1 (Ac-Inp1, Aib2 ,10, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 19)		 9.4
#3 (Inp1, Aib2 ,10, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 17)		 10.6
#4 (1-Apc1, Aib2 ,10, Glu(NH-헥실)3)-hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 18)		 10.0
#5 (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 5)		 6.2
#6 (Inp1, Aib2)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 6)		 1.4
#7 (Inp1, Aib2, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 7)		 6.7
#8 (Inp1, Aib2,10)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 8)		 1.2
#9 (Inp1, Aib2,8)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 9)		 1.2
#10 (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 10)		 0.6
#11 (Inp1, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 11)		 0.7
#12 (Inp1, Aib2 ,8, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 12)		 0.7
생화학적 활성 결정
본 발명의 화합물을 특정화할 수 있으며 특정화하기 위해 사용한 방법을 본원에 설명한다. 당업자는 상응하는 결과를 만들 수 있는 이러한 분석에 대한 변형을 인지하고 이해할 것이다. 또한, 당업자는 다른 분석법을 사용하여 결과를 수득할 수 있으며 본원에 기술된 특징을 인지할 수 있다는 것을 숙지하고 이해할 것이다.
GHS 수용체 결합성 결정 분석
GHS 수용체에 대한 본 발명의 화합물들의 활성은, 이하에 제시되는 실시예들에 설명된 바와 같은 기술을 이용하여 측정될 수 있으며, 그러한 기술들을 이용해 측정하였다. IC5와 관련하여, 이상(greater)이란 효능(potency)을 의미하며, 따라서 결합 저해를 달성하는 데에는 그보다 작은 양이 필요함으로 의미한다.
결합 분석은 상이한 환경에 존재하는 재조합 방식으로 생산된 GHS 수용체 폴리펩타이드를 이용하여 실시할 수 있다. 그러한 환경으로는, 예를 들면, 재조합 핵산 또는 천연 핵산으로부터 발현시킨 GHS 수용체 폴리펩타이드를 포함하는 세포 추출물 및 정제된 세포 추출물들이 포함되며, 또한, 예를 들면, 상이한 환경에 도입되는, 재조합 방식으로 생산된 정제된 GHS 수용체 폴리펩타이드 또는 천연 핵산으로부터 생성된 정제된 GHS 수용체 폴리펩타이드의 사용도 포함된다.
GHS 수용체 활성 화합물의 스크리닝
GHS 수용체 활성 화합물의 스크리닝은 재조합 방식으로 발현시킨 수용체를 이용함으로써 용이하게 실시된다. 재조합 방식으로 발현시킨 GHS 수용체를 이용하면, GHS 수용체에 대한 화합물의 반응이 다른 수용체에 대한 반응과 보다 용이하게 구별될 수 있도록 하는, 소정의 세포 시스템에서 상기 수용체를 발현시키는 능력과 같은 여러 가지 장점이 있다. 예를 들어, 상기 GHS 수용체는 수용체를 정상적으로 발현시키는 않는 HEK 293, COS 7, 및 CHO와 같은 세포주에서 발현 벡터에 의해 발현시킬 수 있으며, 이때 발현 벡터가 없는 동일한 세포주가 대조군으로서 사용할 수 있다.
GHS 수용체 활성을 감소시키는 화합물의 스크리닝은 분석에서 GHS 수용체 활성을 제공하는 그렐린 유사체를 사용하여 실시한다. 이러한 활성에 대한 테스트 화합물의 효과를 측정하여, 예를 들어, 알로스테릭 모듈레이터(allosteric modulator) 및 길항제를 동정할 수 있다.
GHS 수용체 활성은, GHS 수용체의 세포내 배위(conformation), G-단백질 커플링된 활성, 및/또는 세포내 메신저(intracellular messenger)에 있어서의 변화를 검출하는 기술 등의 여러가지 기술을 이용하여 측정할 수 있다. 바람직하게는, GHS 수용체 활성은 세포내 Ca2 +를 측정하는 기술 등의 기법으로 측정한다. Ca2 +를 측정하기 위해 이용할 수 있는 당업계에 잘 알려져 있는 기법으로는, 예컨대, Fura-2와 같은 염료의 사용, 및 에쿼린(aequorin)과 같은 Ca2 +-생발광(bioluminescent) 감수성 수용체 단백질의 사용이 있다. G-단백질 활성을 측정하기 위하여 에쿼린을 이용하는 세포주의 일 예로는 HEK293/aeq17이 있다(Button et al ., 1993. Cell Calcium 14, 663-671, 및 Feighner et al ., 1999, Science 284, 2184-2188).
또한, 여러가지 G-단백질에 기능적으로 커플링된 그렐린 결합 부위를 포함하는 키메라 수용체(chimeric receptor)를 이용하여 GHS 수용체 활성을 측정할 수 있다. 키메라 GHS 수용체는 N-말단 세포외 도메인; 막관통 영역(transmembrane region), 세포외 루프 영역(ixtracelluar loop region), 및 세포내 루프 영역으로 이루어진 막관통 도메인; 및 세포내 카르복시 말단을 포함하고 있다. 키메라 수용체의 생산 기술 및 G-단백질 커플링된 반응의 측정 기술은, 예를 들면, 국제 특허 출원번호 PCT/US96/12336 [WO 97/05252] 및 미국 특허 5,264,565에 개시되어 있으며, 이들 모두 본 명세서에 원용에 의해 포함된다.
GHS 수용체의 활성 자극
그렐린 유사체를 사용하여, 예를 들면, GHS 수용체 조절 효과를 연구하거나 및/또는 GH 분비 효과를 연구하여 그렐린 길항제를 동정하거나, 및/또는 GH-결핍 상태, 근육 무게 및/또는 골 밀도 감소, 성 기능부전, 건강하지 않은 체중, 운동 기능 및/또는 신체 기능 감소, 및/또는 정상적인 식욕 결핍 등의 질병이나 병태를 겪고 있는 개체에게 유익한 효과를 제공할 수 있는, GHS 수용체 활성을 자극할 수 있다.
체중 또는 식욕 증가는 허약자나 노약자 등의 체중이 감소되기 쉬운 개체에서 이상적이며 건강한 체중을 유지시키는데 중요하다. 정상 체중 이하인 개체에서의 체중 또는 식욕 감소는 심각한 건강 문제를 발생시킬 수 있다. 체중 감소 및/또는 정상적인 식욕 결핍을 유발하는 의학적 치료를 받고 있거나, 또는 질병에 걸린 환자들에서, 이러한 질병이나 병태의 치료 효과는 환자가 일정한 체중을 유지하는 능력에 의존된다.
역설적으로, 그렐린의 길항제는 체중 감소가 필요한 개체에서 체중 감소를 촉진시키는 치료에 유용하다.
생물학적 분석 - 실시예
1. 수용체 결합 분석
1A. 인간 재조합 GHS 수용체를 발현하는 CHO - K1 세포의 제조
인간 GH 분비촉진 수용체(hGHS-R 또는 그렐린 수용체)에 대한 cDNA는, 인간의 뇌 RNA를 주형(Clontech？ Palo Alto, CA, U.S.A.)으로 사용하고, hGHS-R의 전장 코딩 서열 옆에 위치한 유전자 특이적 프라이머(S: 5' - A T G T G G A A C G C G A C G C C C A G C G A A G A G - 3' (서열번호 25) 및 AS: 5' - T C A T G T A T T A A T A C T A G A T T C T G T C C A - 3' (서열번호 26)), 및 Advantage 2 PCR Kit？(Clontech？ Palo Alto, CA, U.S.A.)를 이용하여, 중합효소 연쇄 반응(PCR)으로 클로닝하였다. Original TA Cloning Kit？(Invitrogen？ Carlsbad, CA, U.S.A.)를 이용하여, PCR 산물을 pCR2.1 벡터에 클로닝하였다. 전장 인간 GHS-R을 포유류 발현 벡터인 pcDNA 3.1(Invitrogen？ Carlsbad, CA, U.S.A.)에 서브클로닝하였다. 이 플라스미드를, 칼슘 포스페이트 방법(Wigler, M. et al., Cell , (1977), 11(1):223-32)에 따라, 중국 햄스터 난소 세포주 CHO-K1(American Type Culture Collection？ Rockville, MD, U.S.A.)에 형질감염하였다. 0.8 mg/㎖의 G418(Gibco？ Grand Island, NY, U.S.A.)을 포함하는 10% 소 태아 혈청 및 1 mM 소듐 피루베이트가 보충된 RPMI 1640 배지에서 클로닝 고리로 배양된 형질감염된 세포를 선별함으로써, hGHS-R을 안정적으로 발현하는 단일 세포 클론을 수득하였다.
1B. GHS -R 결합 분석:
방사성 리간드 결합 연구용 막은, Brinkman Polytron？(Brinkman？ Westbury, NY, U.S.A.)에서 약 15초간 6으로 세팅하여, 약 20 ㎖의 차가운 50 mM 트리스-HCl 중에서 인간 재조합 GHS 수용체를 발현하는 전술한 CHO-K1 세포를 균질화함으로써 제조할 수 있으며, 그러한 방식으로 제조하였다. 상기 균질화물을 원심분리(39,000 g/10분)를 통해 2회 세척하고, 최종 펠릿을 2.5 mM MgCl2 및 0.1% 소 혈청 알부민(BSA)을 포함하는 50 mM 트리스-HCl에 재현탁하였다. 분석을 위해, 분액약 0.4 ㎖)을, 0.05 ㎖의 비표지한 경쟁적인 테스트 화합물의 존재 하 및 부재 하에, 0.05 nM (125I) 그렐린(~2000 Ci/mmol, Perkin Elmer Life Sciences？ Boston, MA, U.S.A)과 함께 배양하였다. 60분간 4℃에 둔 후, 0.5% 폴리에틸렌이민/0.1% BSA 내에 미리 침지시킨 GF/C 필터(Brandel？ Gaithersburg, MD, U.S.A.)를 통해 급속 여과시킴으로써, 결합된 (125I) 그렐린을 유리된 것들로부터 분리하였다. 이어서, 상기 필터를, 차가운 50 mM 트리스-HCl 및 0.1% BSA의 5 ㎖ 분획으로 3번 세척하였다. 이후, 감마 분광계측기(Wallace LKB？ Gaithersburg, MD, U.S.A.)로 필터 상에 포획된 결합된 방사성을 계측하였다. 특이적 결합은, 1000 nM 그렐린 (Bachem？ Torrence, CA, U.S.A.)의 존재 하에 결합된 (125I) 그렐린 결합을 총 (125I) 그렐린 결합에서 제하여, 정하였다.
선택한 바람직한 구현예를 전술한 수용체 결합 분석으로 테스트하였고, 화합 물들에 대한 결과는 하기 표 3에 나타내었다.
표 3 - 선택 화합물에 대한 수용체 결합 Ki 수치
실시예 화합물 Ki(nM) SEM
#1
 (Ac-Inp1, Aib2,10, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 19)		 370.00 18.18
#2 (Ac-1-Apc1, Aib2,10, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 20)		 39.99 10.92
#3 (Inp1, Aib2,10, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 17)		 0.10 0.04
#4 (1-Apc1, Aib2 ,10, Glu(NH-헥실)3)-hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 18)		 0.12 0.01
#5 (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 5)		 0.36 0.08
#6 (Inp1, Aib2)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 6)		 0.41 0.20
#7 (Inp1, Aib2, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 7)		 0.33 0.04
#8 (Inp1, Aib2,10)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 8)		 0.40 0.02
#9 (Inp1, Aib2,8)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 9)		 0.37 0.00
#10 (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 10)		 0.44 0.05
#11 (Inp1, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2
(서열번호 11)		 0.49 0.02
2. GHS -R 기능적인 활성 분석
2A. 시험관내 GSH 수용체 매개 세포내 iCa 2 + 유동성
인간 GSH 수용체를 발현하는 상기 CHO-K1 세포를 0.3% EDTA/포스페이트 완충 식염수 용액에서 25℃에서 배양하여 수득한 다음, 원심분리에 의하여 세포를 2회 세척하였다. 세척한 세포를, 형광 Ca2 + 지시제(indicator) Fura-2AM 적재(loading)용 행크 완충 식염수 용액(Hank's-buffered saline solution; HBSS)에 재현탁하였다. 약 106 세포/㎖의 세포 현탁액을 2 μM Fura-2AM과 함께 약 25℃에서 약 30분간 배양하였다. 적재되지 않은 Fura-2AM은, HBBS에서 2번 원심분리하여 제거하고, 최종 현탁액을 자석식 교반 메커니즘 및 온도-조절 큐벳 홀더가 구비된 분광 형광계(Hitachi F-2000？ Tokyo, Japan)로 이동시켰다. 37℃에서 평형화한 후, 세포내 Ca2 + 유동성을 측정하기 위해 그렐린 유사체를 첨가하였다. 여기(excitation) 및 방사(emission) 파장은 각각 340 및 510 nm이었다. 측정되는 Ca2 + 양 증가는 테스트 펩타이드의 작용제 활성을 의미하며, Ca2 + 측정치의 양적 감소(또는 결핍)은 테스트 펩타이드의 길항제 활성을 의미한다.
이러한 분석법을 이용하여, 실시예 1, 2, 3 및 4의 화합물이 그렐린 수용체에 대한 길항제 활성을 보인다는 것이 확인되었다.
2B. 생체내 GH 분비/억제
당업계에 잘 알려져 있는 바와 같이, 생체내에서 GH 분비를 억제 또는 자극하는 능력에 대해 화합물들을 테스트할 수 있다(Deghenghi, R. et al., Life Sciences, (1994), 54(18):1321-8; 및 국제 특허 출원번호 PCT/EP01/07929 [WO 02/08250]). 생체내에서 GH 분비를 자극하는 화합물의 능력을 평가하기 위해, 선 택한 화합물을 약 300 mg/kg으로 10일된 랫에 피하 주사하였다. 주사 후 약 15분 후에 순환성 GH를 측정하고, 용매 대조군을 주사한 랫의 GH 수치와 비교한다.
마찬가지로, 선택한 화합물들을 생체내에서 그렐린-유도성 GH 분비를 길항하는 능력에 대해 테스트할 수 있다. 본 발명의 화합물을, 300 mg/kg으로 그렐린과 함께, 10일된 랫에 주사한다. 주사 후 약 15분 후에 순환성 GH를 측정하고, 용매 대조군을 주사한 랫의 GH 수치와 비교한다.
2C. 위장 운동성에 대한 효과
그렐린은 위장 운동성을 증가시키고 위부전마비를 앓고 있는 개체에서 위 배출성을 향상시키는 것으로 확인되었다. 본 발명의 화합물을 조사하여, 후술한 분석으로 위장 배출성 및 장 통과에 있어 이들 화합물의 효과를 결정할 수 있다.
2C(i). 장 통과에 대한 그렐린의 생체내 연구
천연 그렐린과 본 발명에 따른 그렐린 유사체의 장 통과에 미치는 영향을 확인할 수 있다. 본 연구에서, 8마리의 랫으로 이루어진 그룹을 약 24시간 금식시키고, 물은 자유롭게 섭취할 수 있도록 한다. 천연 그렐린, 선택한 유사체 또는 아트로핀 등의 대조군을 마취한 시험 개체에게 투여한다. 그렐린, 선택한 유사체 또는 대조군을 일차 투여하고 약 5분 후에, 활성탄 식이(charcoal meal) 2 ml을 식도 위관을 통해 시험 개체에게 투여한다. 약 25분 후, 시험 개체를 경추 탈골로 희생시키고, 소장을 적출한다. 활성탄의 이동 거리를 유문에서부터 측정한다.
2C( ii ). 위장 배출성에 대한 생체내 그렐린 연구
본 발명의 화합물을 테스트하여 위 배출성에 대한 화합물의 효과를 결정할 수 있다. 본 연구에서, 8마리의 Sprague Dawley 랫(체중 200 - 250 mg)으로 이루어진 그룹을 약 24시간 금식시키고, 물은 자유롭게 섭취할 수 있도록 한다. 천연 그렐린, 선택한 유사체 또는 메토클로프라마이드 등의 대조군을 마취한 시험 개체에게 정맥내 투여한다. 그렐린, 선택한 유사체 또는 대조군을 일차 투여하고 약 5분 후에, 페놀 레드로 표지한 식이(전유 내 0.5 mg/ml 페놀 레드 및 1.5% 메틸 셀룰로스) 1.5 ml을 식도 위관을 통해 시험 개체에게 투여한다. 약 20분 후에, 경추 탈골에 의해 시험 개체를 희생시키고, 위를 적출하여 각각 파쇄한다. 시험 개체의 장에 있는 페놀 레드를 추출하여, 560 nm의 파장에서 분광광도측정으로 측정한다.
다른 실험으로, 8마리의 Sprague Dawley 랫(체중 200 - 250 mg)으로 이루어진 그룹을 약 24시간 금식시키고, 물은 자유롭게 섭취할 수 있도록 한다. 동물에게, 비히클이나 또는 다양한 투여량의 천연 그렐린이나 선택한 유사체를 피하 투여한다. 약 15분 후에, 페놀 레드로 표지한 식이(전유 내 0.5 mg/ml 페놀 레드 및 1.5% 메틸 셀룰로스) 1.5 ml을 랫에 경구 투여한다. 약 15분 후에, 경추 탈골에 의해 시험 개체를 희생시키고, 유문과 분문을 클램프로 잡은 후, 위를 적출하였다. 장에 있는 페놀 레드를 추출하여, 560 nm의 파장에서 분광광도측정으로 측정한다.
2C( iii ). 랫에서 POI 효과
이소플루란 마취하에, 3 cm를 복벽 절개하여 수컷 Sprague Dawley 랫(체중 200 - 250 gm)에 위 폐색을 유도한다. 복근과 피부를 봉합사로 봉합하고, 동물을 약 2시간 45분 동안 회복되도록 둔다. 그 후, 비히클 또는 선택한 그렐린 유사체를 복벽 절개한 동물에 피하 투여한다. 화합물 또는 비히클을 투여하고 약 15분 후에, 페놀 레드로 표지한 식이(상기 참조)를 동물에 도입한다. 다시 15분 후에, 경추 탈골로 개체를 희생시키고, 위 배출성을 전술한 바와 같이 측정한다.
2C( iv ). 모르핀의 존재시의 랫에서의 POI 효과
이소플루란 마취하에, 3 cm를 복벽 절개하여 수컷 Sprague Dawley 랫(체중 200 - 250 gm)에 위 폐색을 유도한다. 복근과 피부를 봉합사로 봉합하고, 동물에게 모르핀 4 mg/kg을 피하 투여하면서 약 2.5시간 동안 회복되도록 둔다. 모르핀을 투여한 지 약 15분 후에, 비히클 또는 선택한 그렐린 유사체를 복벽 절개한 동물에 피하 투여한다. 화합물 또는 비히클을 투여하고 약 15분 후에, 페놀 레드로 표지한 식이(상기 참조)를 동물에 도입한다. 다시 15분 후에, 경추 탈골로 개체를 희생시키고, 위 배출성을 전술한 바와 같이 측정한다.
2C(v). 모르핀 존재시의 랫에서의 위 운동성 효과
수컷 Sprague Dawley 랫(체중 200 - 250 gm)에 모르핀 4 mg/kg을 피하 투여한다. 모르핀을 투여한 지 약 15분 후에, 비히클 또는 선택한 그렐린 유사체를 동물에 피하 투여한다. 화합물 또는 비히클을 투여하고 약 15분 후에, 페놀 레드로 표지한 식이(상기 참조)를 동물에 도입한다. 다시 15분 후에, 경추 탈골로 개체를 희생시키고, 위 배출성을 전술한 바와 같이 측정한다.
2D. 체중에 대한 효과
본 발명의 멜라노코르틴 수용체에 대한 리간드는, 하기 과정에 따라 음식물 섭취 및 또는 체중에 대해 미치는 영향에 대하여 조사할 수 있다. 당업자는, 본원에 기술된 방법과 유사한 과정을 이용하여 음식물 섭취 및/또는 체중에 대한 본 발 명의 화합물의 효과를 분석할 수 있음을 숙지하고 있을 것이다.
2D(i). 단기 급식 실험(금식)
수컷 Sprague Dawley 랫(250g)을 각 케이지에 두고, 주:야 조건 12:12 시간으로 사육한다. 실험을 개시하기 전 18시간 동안 랫을 금식시키고, 물은 자유롭게 섭취할 수 있도록 한다. 0시간에, 랫에 선택한 화합물을 지정된 투여량, 예컨대 500 또는 100 nmole/kg으로, 또는 비히클을 피하(sc) 주입하고, 음식물을 제공한다. 개별 음식물 소비량을 주입 후 약 1, 2, 3, 4, 5 및 6시간 후에 측정한다.
2D( ii ). 단기 급식 실험(비-금식)
수컷 Sprague Dawley 랫(250g)을 각 케이지에 두고, 주:야 조건 12:12 시간으로 사육한다. 실험을 수행하는 동안 음식물과 물을 자유롭게 섭취할 수 있도록 한다. 0시간에, 랫에 화합물을 8 μmole/kg으로, 또는 비히클을 피하 주입한다. 개별 음식물 소비량을 주입 후 약 0.5, 1, 1.5, 2, 3 및 4시간 후에 측정한다.
2D( iii ). 장기 급식 실험
수컷 Sprague Dawley 랫(250g)을 각 케이지에 두고, 주:야 조건 12:12 시간으로 사육하며, 음식물과 물을 자유롭게 섭취할 수 있도록 한다. 랫에 화합물을 다양한 투여량으로, 또는 비히클을 약 7일간 하루에 3번(08:00, 12:00, 및 16:00h) 피하 주입한다. 개별 체중 및 음식물 소비량을 매일 측정한다.
투여
그렐린 유사체는 당업계에 잘 알려져 있는 기법과 본원에 기술된 설명을 이용하여 제형화하여 개체에 투여할 수 있다. 바람직한 투여 경로는 유효량의 화합 물들이 표적에 도달하도록 하는 경로이다. 일반적인 약학적 투여 지침은 예를 들면, Remington's Pharmaceutical Sciences 18 th Edition , Ed. Gennaro, Mack Publishing, 1990, and Modem Pharmaceutics 2nd Edition , Eds. Banker and Rhodes, Marcel Dekker, Inc., 1990에 개시되어 있으며, 이들 모두 본 명세서에 원용에 의해 포함된다.
그렐린 유사체들은 산성 또는 염기성 염으로서 제조될 수 있다. 약학적으로 허용가능한 염(수용성, 지용성, 수중 분산성 또는 유중 분산성 산물의 형태)은, 무기산 또는 유기산, 또는 무기 염기 또는 유기 염기로부터 형성되는 통상의 무독성 염 또는 4급 암모늄염을 포함한다. 그러한 염의 예로는, 아세테이트, 아디페이트(adipate), 알기네이트, 아스파르테이트, 벤조에이트, 벤젠설포네이트, 바이설페이트, 부티레이트, 시트레이트, 캄포레이트, 캄포르설포네이트, 사이클로펜탄프로피오네이트, 디글루코네이트, 도데실설페이트, 에탄설포네이트, 푸마레이트, 글루코헵타노에이트, 글리세로포스페이트, 헤미설페이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 하이드로클로라이드, 하이드로브로마이드, 하이드로요오다이드, 2-하이드록시에탄설포네이트, 락테이트, 말레에이트, 메탄설포네이트, 2-나프탈렌설포네이트, 니코티네이트, 옥살레이트, 파모에이트, 펙티네이트, 퍼설페이트, 3-페닐프로피오네이트, 피크레이트, 피루발레이트, 프로피오네이트, 숙시네이트, 타르타레이트, 티오시아네이트, 토실레이트, 및 운데카노에이트 등의 산 부가염; 및 암모늄염 등의 염기 염, 소듐 및 포타슘 염 등의 알칼리 금속 염, 칼슘 및 마그네슘 염 등의 알칼리 토금속 염, 디사이클로헥실아민 염, N-메틸-D-글루카민 등의 유기 염기와의 염, 및 아르기닌 및 라이신 등의 아미노산과의 염을 포함하나, 이들로 한정되는 것은 아니다.
그렐린 유사체들은 구강 또는 코를 통한 섭취 또는 경피 및 경점막 주입 등의 여러가지 경로를 통하여 투여할 수 있다. 현탁액으로서 경구를 통해 투여되는 활성 성분은 약학적 제형 분야에서 잘 알려져 있는 기술에 따라 제조할 수 있으며, 벌크(bulk)를 제공하기 위한 미세결정질 셀룰로오스, 현탁제로서 알긴산 또는 소듐 알기네이트, 증점제로서 메틸셀룰로오스, 및 감미제/향미제를 함유할 수 있다. 약학 제형은 속방형(immediate release) 정제로서, 미세결정질 셀룰로오스, 디칼슘 포스페이트, 전분, 마그네슘 스테아레이트, 및 락토오스, 및/또는 기타 부형제, 결합제, 증량제, 붕해제, 희석제 및 윤활제를 포함할 수 있다.
코 에어로졸 또는 흡입에 의해 투여되는 제형은, 예를 들면, 식염수 중의 용액으로서, 벤질 알코올 또는 기타 적합한 보존제, 생체 이용성을 증진시키기 위한 흡수 촉진제, 플루오로탄소, 및/또는 기타 가용화제나 분산제를 이용하여, 제조할 수 있다.
그렐린 유사체들은 또한 정맥내(볼루스(bolus) 및 주입(infusion)), 복막내, 피하, 국소적으로, 폐쇄(occlusion)하거나 폐쇄하지 않고, 또는 근육내로 투여할 수 있다. 주입 투여의 경우, 주입가능한 용액이나 현탁액을, 적합한 무독성의 비경구용으로 허용가능한 희석제 또는 용매, 예를 들면, 링거 용액 또는 등장성 소듐 클로라이드 용액, 또는 적합한 분산제 또는 습식제 또는 현탁제, 예를 들면, 멸균 된 블랜드 형태의, 합성 모노글리세라이드 또는 디글리세라이드를 포함하는 고정 오일(fixed oil), 및 올레산을 포함하는 지방산을 이용하여 제형화할 수 있다.
적합한 투약 요법(dosing regimen)은, 투약할 개체의 유형; 개체의 연령, 체중, 성별, 및 의학적 상태; 투여 경로; 개체의 신장 기능 및 간 기능; 원하는 효과; 및 사용되는 특정 화합물 등의 당업계에 잘 알려져 있는 인자들을 고려하여 결정하는 것이 바람직하다.
독성이 없으면서 효과를 나타내는 범위로 약물의 농도를 정함에 있어서 최적의 정확성은, 표적 부위에 대한 약물 생체이용성(availability)의 동력학을 기초로하는 요법을 필요로한다. 여기에는 약물의 배급(distribution), 평형(equilibrium), 및 제거(elimination)가 고려된다. 개체의 1일 투여량은 개체 당 1일 0.01 내지 1,000 mg 범위로 예상된다.
그렐린 유사체들은 키트에 포함된 형태로서 제공할 수 있다. 그러한 키트는 통상적으로 활성 화합물을 투여용 투약 형태로 포함한다. 투약 형태는, 하루에 1 - 6회와 같이 일정한 간격으로 1일 이상의 나날 동안 개체에 투여할 때, 원하는 효과를 수득할 수 있도록 하는, 충분한 함량의 활성 화합물을 포함한다. 바람직하게는, 키트에는, 원하는 효과를 달성하기 위한 투약 형태의 사용과 정해진 기간 동안 복용해야할 투약 형태의 용량이 기재된 설명서가 포함된다.
본 발명은 예시적인 방식으로 기술되며, 본원에 사용되는 용어들은 한정하고자 하기 보다는 기술한 용어의 성질의 범위 내임을 의도한 것으로 이해되어야 한다. 전술한 바에 비추어 본 발명에 대한 많은 수정과 변형을 가할 수 있음은 자명 한 일이다. 그러므로, 본 발명의 첨부된 청구 범위 내에서, 본 발명을 본 명세서에 구체적으로 개시된 바와 다르게 실시할 수 있는 것으로 이해되어야 한다.
본원에 인용된 특허 및 과학 문헌들은 당업자가 이용가능한 지식을 나타낸다. 본원에 언급된 모든 특허, 특허 공보, 및 기타 공개 문헌들은 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함된다.
SEQUENCE LISTING <110> BIOMEASURE, INC. Dong, Zheng Xin <120> ANALOGS OF GHRELIN SUBSTITUTED AT THE N-TERMINAL <130> 169P PCT2 Yankwich BIO-169 <140> PCT/US2007/020595 <141> 2007-09-27 <150> US 60/847423 <151> 2006-09-27 <160> 27 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 28 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> modified with n-octanoyl <220> <221> MOD_RES <222> (28)..(28) <223> AMIDATION <400> 1 Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 2 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Growth hormone secretagogue <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = D-?(2'-naphthyl)-L-alanine (D-(2')-Nal) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa = D-Phe <220> <221> MOD_RES <222> (7)..(7) <223> AMIDATION <400> 2 Ala His Xaa Ala Trp Xaa Lys 1 5 <210> 3 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Growth hormone secretagogue <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = D-Ala <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-?(2'-naphthyl)-L-alanine (D-(2')-Nal) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = D-naphthyl-alanine (D-Nal) <220> <221> MOD_RES <222> (6)..(6) <223> AMIDATION <400> 3 Xaa Xaa Ala Trp Xaa Lys 1 5 <210> 4 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Growth hormone secretagogue <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-2-methyl-tryptophan (D-Me-Trp) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = D-Phe <220> <221> MOD_RES <222> (6)..(6) <223> AMIDATION <400> 4 His Xaa Ala Trp Xaa Lys 1 5 <210> 5 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Peptidyl analog of ghrelin <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = isonipecotic acid (Inp) <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> modified with n-octanoyl <220> <221> MOD_RES <222> (28)..(28) <223> AMIDATION <400> 5 Xaa Ser Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 6 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Peptidyl analog of ghrelin <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = isonipecotic acid (Inp) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> modified with n-octanoyl <220> <221> MOD_RES <222> (28)..(28) <223> AMIDATION <400> 6 Xaa Xaa Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 7 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Peptidyl analog of ghrelin <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = isonipecotic acid (Inp) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> modified with NH-hexyl <220> <221> MOD_RES <222> (28)..(28) <223> AMIDATION <400> 7 Xaa Xaa Glu Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 8 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Peptidyl analog of ghrelin <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = isonipecotic acid (Inp) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> modified with n-octanoyl <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (28)..(28) <223> AMIDATION <400> 8 Xaa Xaa Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Xaa Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 9 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Peptidyl analog of ghrelin <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = isonipecotic acid (Inp) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> modified with n-octanoyl <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (28)..(28) <223> AMIDATION <400> 9 Xaa Xaa Ser Phe Leu Ser Pro Xaa His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 10 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Peptidyl analog of ghrelin <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = isonipecotic acid (Inp) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> modified with n-octanoyl <220> <221> MOD_RES <222> (17)..(17) <223> modified with n-octanoyl <220> <221> MOD_RES <222> (28)..(28) <223> AMIDATION <400> 10 Xaa Xaa Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Ser Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 11 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Peptidyl analog of ghrelin <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = isonipecotic acid (Inp) <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> modified with n-octanoyl <220> <221> MOD_RES <222> (17)..(17) <223> modified with n-octanoyl <220> <221> MOD_RES <222> (28)..(28) <223> AMIDATION <400> 11 Xaa Ser Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Ser Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 12 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Peptidyl analog of ghrelin <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = isonipecotic acid (Inp) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> modified with n-octanoyl <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (17)..(17) <223> modified with n-octanoyl <220> <221> MOD_RES <222> (28)..(28) <223> AMIDATION <400> 12 Xaa Xaa Ser Phe Leu Ser Pro Xaa His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Ser Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 13 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Peptidyl analog of ghrelin <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = isonipecotic acid (Inp) <220> <221> MOD_RES <222> (28)..(28) <223> AMIDATION <400> 13 Xaa Ser Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 14 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Peptidyl analog of ghrelin <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = isonipecotic acid (Inp) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (28)..(28) <223> AMIDATION <400> 14 Xaa Xaa Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 15 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Peptidyl analog of ghrelin <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = isonipecotic acid (Inp) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (17)..(17) <223> modified with n-octanoyl <220> <221> MOD_RES <222> (28)..(28) <223> AMIDATION <400> 15 Xaa Xaa Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Ser Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 16 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Peptidyl analog of ghrelin <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = isonipecotic acid (Inp) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (28)..(28) <223> AMIDATION <400> 16 Xaa Xaa Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Xaa Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 17 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Peptidyl ghrelin analog <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = isonipecotic acid (Inp) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> modified with NH-hexyl <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (28)..(28) <223> AMIDATION <400> 17 Xaa Xaa Glu Phe Leu Ser Pro Glu His Xaa Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 18 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Peptidyl ghrelin analog <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = 1-Apc <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> modified with NH-hexyl <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (28)..(28) <223> AMIDATION <400> 18 Xaa Xaa Glu Phe Leu Ser Pro Glu His Xaa Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 19 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Peptidyl analog of ghrelin <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = isonipecotic acid (Inp) modified with acyl (Ac) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> modified with NH-hexyl <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (28)..(28) <223> AMIDATION <400> 19 Xaa Xaa Glu Phe Leu Ser Pro Glu His Xaa Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 20 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Peptidyl analog of ghrelin <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = 1-Apc modified with acyl (Ac) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> modified with NH-hexyl <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (28)..(28) <223> AMIDATION <400> 20 Xaa Xaa Glu Phe Leu Ser Pro Glu His Xaa Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 21 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Peptidyl analog of ghrelin <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> modified with n-octanoyl <220> <221> MOD_RES <222> (28)..(28) <223> AMIDATION <400> 21 Gly Xaa Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 22 <211> 18 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> modified with n-octanoyl <220> <221> MOD_RES <222> (18)..(18) <223> AMIDATION <400> 22 Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Glu Ser <210> 23 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Peptidyl analog of ghrelin <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> modified with n-octanoyl <400> 23 Gly Xaa Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 24 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Peptidyl analog of ghrelin <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = alpha-aminoisobutyric acid (Aib) <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> modified with n-octanoyl <220> <221> MOD_RES <222> (28)..(28) <223> free acid OH group <400> 24 Gly Xaa Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys 1 5 10 15 Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg 20 25 <210> 25 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> primer <400> 25 atgtggaacg cgacgcccag cgaagag 27 <210> 26 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> primer <400> 26 tcatgtatta atactagatt ctgtcca 27 <210> 27 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Growth hormone releasing peptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = D-Trp <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = D-Phe <220> <221> MOD_RES <222> (6)..(6) <223> AMIDATION <400> 27 His Xaa Ala Trp Xaa Lys 1 5

Claims (178)

  1. 삭제
  2. 식 (I)로 표시되는 그렐린 유사체 화합물 또는 약학적으로 허용가능한 그의 염:
    (R2)-A1-A2-A3-A4-A5-A6-A7-A8-A9-A10-A11-A12-A13-A14-A15-A16-A17-A18-A19-A20-A21-A22-A23-A24-A25-A26-A27-A28-R1
    (I)
    상기 식 (I)에 있어서,
    A1은 Inp 또는 1-Apc이고;
    A2는 Ser 또는 Aib이고;
    A3은 Ser 또는 Glu(NH-R8)이고;
    A4는 Phe이고;
    A5는 Leu이고;
    A6은 Ser이고;
    A7은 Pro이고;
    A8은 Glu 또는 Aib이고;
    A9는 His이고;
    A10은 Gln 또는 Aib이고;
    A11은 Arg이고;
    A12는 Val이고;
    A13은 Gln이고;
    A14는 Gln이고;
    A15는 Arg이고;
    A16은 Lys이고;
    A17은 Glu 또는 Ser(C(O)-R10)이고;
    A18은 Ser이고;
    A19는 Lys이고;
    A20은 Lys이고;
    A21은 Pro이고;
    A22는 Pro이고;
    A23은 Ala이고;
    A24는 Lys이고;
    A25는 Leu이고;
    A26은 Gln이고;
    A27은 Pro이고;
    A28은 Arg이며,
    R1은 -OH, -NH2, -(C1-C30)알콕시 또는 NH-X6-CH2-Z0이고, 상기 X6은 (C1-C12)알킬 또는 (C2-C12)알케닐이고 Z0은 -H, -OH, -CO2H 또는 -C(O)-NH2이고;
    R2는 H, (C1-C30)알킬, (C1-C30)헤테로알킬, (C1-C30)아실, (C2-C30)알케닐, (C2-C30)알키닐, 아릴(C1-C30)알킬, 아릴(C1-C30)아실, 치환된 (C1-C30)알킬, 치환된 (C1-C30)헤테로알킬, 치환된 (C2-C30)아실, 치환된 (C2-C30)알케닐, 치환된 아릴(C1-C30)알킬, 치환된 (C2-C30)알키닐 또는 치환된 아릴(C1-C30)아실이고;
    R8 및 R10은, 독립적으로, (C1-C40)알킬, (C2-C40)알케닐, 치환된 (C1-C40) 알킬, 치환된 (C2-C40) 알케닐, 알킬아릴, 치환된 알킬아릴, 아릴 및 치환된 아릴로 이루어진 군으로부터 선택된다.
  3. 제2항에 있어서,
    R1은 NH2이고;
    R2는 H 또는 아실이고;
    R8은 헥실이고; 그리고
    R10은 옥타닐인 화합물 또는 약학적으로 허용가능한 그의 염.
  4. 제3항에 있어서,
    A2는 Aib이고;
    A3은 Glu(NH-헥실)이고;
    A8은 Aib이고;
    A10은 Aib이고; 그리고
    A17은 Ser(n-옥타노일)인 화합물 또는 약학적으로 허용가능한 그의 염.
  5. 제2항에 있어서, 상기 화합물이 하기 화합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물 또는 약학적으로 허용가능한 그의 염:
    (Inp1)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 5);
    (Inp1, Aib2)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 6);
    (Inp1, Aib2, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 7);
    (Inp1, Aib2,10)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 8);
    (Inp1, Aib2,8)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 9);
    (Inp1, Aib2, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 10);
    (Inp1, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 11); 및
    (Inp1, Aib2,8, Ser(n-옥타노일)17)hGhrelin(1-28)-NH2(서열번호 12).
  6. 삭제
  7. 삭제
  8. 유효량의, 제2항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 화합물, 또는 약학적으로 허용가능한 그의 염, 및 약학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함하는, 성장 호르몬 분비 자극이 필요한 개체에서 성장 호르몬 분비를 자극하는데 사용 가능하며, 상기 성장 호르몬 분비 자극은 성장 호르몬 결핍 상태의 치료, 근육량 증가, 골 밀도 증가, 여성 또는 남성의 성 기능부전 치료, 체중 증가 촉진, 체중 유지 촉진, 신체 기능 유지 촉진, 신체 기능 회복 촉진, 또는 식욕 증진 촉진을 지시하는 것인 약학 조성물.
  9. 제8항에 있어서, 질병 또는 장애를 앓고 있거나, 또는 체중 감소를 수반하는 치료를 받고 있는 개체에서, 체중 증가 촉진, 체중 유지 촉진, 또는 식욕 증가 촉진을 위해 사용가능한 것인 약학 조성물.
  10. 제8항에 있어서, 악액질로 인한 체중 감소가 있는 개체에서, 체중 증가 촉진, 체중 유지 촉진, 또는 식욕 증가 촉진을 위해 사용가능한 약학 조성물.
  11. 유효량의, 제2항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 화합물, 또는 약학적으로 허용가능한 그의 염, 및 약학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함하는, 필요한 개체에서, 만성 폐색성 폐 질환을 치료하기 위해 사용가능한 약학 조성물.
  12. 삭제
  13. 유효량의, 제2항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 화합물, 또는 약학적으로 허용가능한 그의 염, 및 약학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함하는, 위식도 역류 질환, 장 폐색증, 수술후 장 폐색증, 구토, 위부전마비, IBS, 변비, 또는 가성 대장 폐쇄증을 앓고 있는 개체에서, 위장 운동성을 자극하기 위해 사용가능한 약학 조성물.
  14. 제13항에 있어서, 아편 투여와 관련된 장 폐색증을 앓고 있는 개체에서 위장 운동성을 자극하기 위해 사용가능한 약학 조성물.
  15. 제13항에 있어서, 복부 수술 후의 수술후 장 폐색증을 앓고 있는 개체에서 위장 운동성을 자극하기 위해 사용가능한 약학 조성물.
  16. 제13항에 있어서, 위장, 소장, 또는 대장의 장 폐색증을 앓고 있는 개체에서 위장 운동성을 자극하기 위해 사용가능한 약학 조성물.
  17. 제13항에 있어서, 항암 화학 치료제, 임신, 다식증, 또는 식욕 부진의 치료와 관련된 구토 증상을 보이는 개체에서 위장 운동성을 자극하기 위해 사용가능한 약학 조성물.
  18. 제13항에 있어서, 당뇨병 관련 위부전마비를 앓고 있는 개체에서 위장 운동성을 자극하기 위해 사용가능한 약학 조성물.
  19. 제13항에 있어서, 필요한 개체에서 위장 운동성을 자극하기 위해 사용가능하며, 상기 조성물은 정맥내, 피하, 경구, 또는 서방형 제제의 이식에 의해 투여되는 약학 조성물.
  20. 제13항에 있어서, 개체에 대한 수술 수행시 사용가능하며, 상기 조성물이 수술 전, 수술 동안, 수술 후, 또는 이들의 임의 조합 시점에서 투여되는 약학 조성물.
  21. 제13항에 있어서, 개체에 대한 수술 수행 시에 사용가능하며, 상기 수술은 위장관 직접 수술, 위장관 간접 수술, 개복 수술, 이식 수술, 비뇨생식계 수술, 림프계 수술, 호흡계 수술, 및 복부내 임의의 장기 또는 조직의 암을 치료하기 위한 수술인 약학 조성물.
  22. 제13항에 있어서, 필요한 개체에서 수술후 장 폐색증을 예방하기 위해 사용가능하며, 상기 조성물이 수술 전, 수술 동안, 수술 후, 또는 이들의 임의 조합 시점에서 투여되는 약학 조성물.
  23. 제13항에 있어서, 위식도 역류 질환, 구토, 위부전마비, 과민성 장 증후군, 변비, 또는 가성 대장 폐쇄증을 예방하기 위해 사용가능한 약학 조성물.
  24. 제13항에 있어서, 필요한 개체에서 수술후 장 폐색증, 위식도 역류 질환, 구토, 위부전마비, IBS, 변비, 또는 가성 대장 폐쇄증을 예방하기 위해 사용가능하며, 상기 조성물이 정맥내, 피하, 경구, 또는 서방형 제형의 이식에 의해 투여되는 약학 조성물.
  25. 제2항에 있어서, 하기 화합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물 또는 약학적으로 허용가능한 그의 염:
    (Ac-Inp1, Aib2,10, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2; (서열번호 19)
    (Ac-1-Apc1, Aib2,10, Glu(NH-헥실)3)-hGhrelin(1-28)NH2; (서열번호 20)
    (Inp1, Aib2,10, Glu(NH-헥실)3)hGhrelin(1-28)-NH2; (서열번호 17) 및
    (1-Apc1, Aib2,10, Glu(NH-헥실)3)-hGhrelin(1-28)NH2; (서열번호 18).
  26. 삭제
  27. 삭제
  28. 유효량의, 제25항에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용가능한 그의 염, 및 약학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함하는, 성장 호르몬 분비 억제가 필요한 개체에서 성장 호르몬 분비를 억제하는데 사용가능하며, 상기 성장 호르몬 분비 억제는, 과도한 성장 호르몬 분비가 특징적인 질환이나 병태의 치료, 과체중 감소 촉진, 식욕 감소 촉진, 체중 유지 촉진, 비만 치료, 당뇨병 치료, 망막증을 포함하는 당뇨병 합병증의 치료, 또는 심혈관 장애 치료를 지시하는 약학 조성물.
  29. 삭제
  30. 삭제
  31. 삭제
  32. 삭제
  33. 삭제
  34. 삭제
  35. 삭제
  36. 삭제
  37. 삭제
  38. 삭제
  39. 삭제
  40. 삭제
  41. 삭제
  42. 삭제
  43. 삭제
  44. 삭제
  45. 삭제
  46. 삭제
  47. 삭제
  48. 삭제
  49. 삭제
  50. 삭제
  51. 삭제
  52. 삭제
  53. 삭제
  54. 삭제
  55. 삭제
  56. 삭제
  57. 삭제
  58. 삭제
  59. 삭제
  60. 삭제
  61. 삭제
  62. 삭제
  63. 삭제
  64. 삭제
  65. 삭제
  66. 삭제
  67. 삭제
  68. 삭제
  69. 삭제
  70. 삭제
  71. 삭제
  72. 삭제
  73. 삭제
  74. 삭제
  75. 삭제
  76. 삭제
  77. 삭제
  78. 삭제
  79. 삭제
  80. 삭제
  81. 삭제
  82. 삭제
  83. 삭제
  84. 삭제
  85. 삭제
  86. 삭제
  87. 삭제
  88. 삭제
  89. 삭제
  90. 삭제
  91. 삭제
  92. 삭제
  93. 삭제
  94. 삭제
  95. 삭제
  96. 삭제
  97. 삭제
  98. 삭제
  99. 삭제
  100. 삭제
  101. 삭제
  102. 삭제
  103. 삭제
  104. 삭제
  105. 삭제
  106. 삭제
  107. 삭제
  108. 삭제
  109. 삭제
  110. 삭제
  111. 삭제
  112. 삭제
  113. 삭제
  114. 삭제
  115. 삭제
  116. 삭제
  117. 삭제
  118. 삭제
  119. 삭제
  120. 삭제
  121. 삭제
  122. 삭제
  123. 삭제
  124. 삭제
  125. 삭제
  126. 삭제
  127. 삭제
  128. 삭제
  129. 삭제
  130. 삭제
  131. 삭제
  132. 삭제
  133. 삭제
  134. 삭제
  135. 삭제
  136. 삭제
  137. 삭제
  138. 삭제
  139. 삭제
  140. 삭제
  141. 삭제
  142. 삭제
  143. 삭제
  144. 삭제
  145. 삭제
  146. 삭제
  147. 삭제
  148. 삭제
  149. 삭제
  150. 삭제
  151. 삭제
  152. 삭제
  153. 삭제
  154. 삭제
  155. 삭제
  156. 삭제
  157. 삭제
  158. 삭제
  159. 삭제
  160. 삭제
  161. 삭제
  162. 삭제
  163. 삭제
  164. 삭제
  165. 삭제
  166. 삭제
  167. 삭제
  168. 삭제
  169. 삭제
  170. 삭제
  171. 삭제
  172. 삭제
  173. 삭제
  174. 삭제
  175. 삭제
  176. 삭제
  177. 삭제
  178. 삭제
KR1020097008570A 2006-09-27 2007-09-24 Ｎ-말단이 치환된 그렐린 유사체 KR101197541B1 (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US84742306P 2006-09-27 2006-09-27
US60/847,423 2006-09-27

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20090075838A KR20090075838A (ko) 2009-07-09
KR101197541B1 true KR101197541B1 (ko) 2013-01-02

Family

ID=39230783

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020097008570A KR101197541B1 (ko) 2006-09-27 2007-09-24 Ｎ-말단이 치환된 그렐린 유사체

Country Status (16)

Country Link
US (1) US8299022B2 (ko)
EP (1) EP2083842B1 (ko)
JP (1) JP5134627B2 (ko)
KR (1) KR101197541B1 (ko)
CN (1) CN101541341B (ko)
AR (1) AR061780A1 (ko)
AU (1) AU2007300526B2 (ko)
BR (1) BRPI0717169C1 (ko)
CA (1) CA2664558C (ko)
ES (1) ES2436419T3 (ko)
IL (1) IL197796A (ko)
MX (1) MX2009003246A (ko)
NZ (1) NZ576470A (ko)
RU (1) RU2459831C2 (ko)
TW (1) TWI370135B (ko)
WO (1) WO2008039415A2 (ko)

Families Citing this family (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2474643T3 (es) * 2005-09-28 2014-07-09 Ipsen Pharma Análogos de grelina
PT1937262T (pt) * 2005-09-29 2019-08-21 Ipsen Pharma Sas Composição para utilização no tratamento de dismotilidade gastrointestinal
BRPI0809366B8 (pt) 2007-03-28 2021-05-25 Harvard College polipeptídeo substancialmente alfa-helicoidal, método para fabricação do mesmo, aminoácido e composição farmacêutica
US9724381B2 (en) * 2009-05-12 2017-08-08 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Methods of inhibiting the ghrelin/growth hormone secretatogue receptor pathway and uses thereof
US10010439B2 (en) 2010-06-13 2018-07-03 Synerz Medical, Inc. Intragastric device for treating obesity
US10420665B2 (en) 2010-06-13 2019-09-24 W. L. Gore & Associates, Inc. Intragastric device for treating obesity
US8628554B2 (en) 2010-06-13 2014-01-14 Virender K. Sharma Intragastric device for treating obesity
US9526648B2 (en) 2010-06-13 2016-12-27 Synerz Medical, Inc. Intragastric device for treating obesity
US8859723B2 (en) 2010-08-13 2014-10-14 Aileron Therapeutics, Inc. Peptidomimetic macrocycles
CN108929375A (zh) 2011-10-18 2018-12-04 爱勒让治疗公司 拟肽大环化合物
JP2015510505A (ja) * 2012-02-03 2015-04-09 ジーランド ファーマ アクティーゼルスカブ グレリン類似体
US10039813B2 (en) 2012-02-07 2018-08-07 Massachusetts Institute Of Technology Use of antagonists of ghrelin or ghrelin receptor to prevent or treat stress-sensitive psychiatric illness
US8987414B2 (en) 2012-02-15 2015-03-24 Aileron Therapeutics, Inc. Triazole-crosslinked and thioether-crosslinked peptidomimetic macrocycles
US8927500B2 (en) 2012-02-15 2015-01-06 Aileron Therapeutics, Inc. Peptidomimetic macrocycles
ES2959427T3 (es) * 2012-09-27 2024-02-26 Elanco Animal Health Incorporated Composiciones farmacéuticas para el tratamiento de la inapetencia
JP6526563B2 (ja) 2012-11-01 2019-06-05 エイルロン セラピューティクス，インコーポレイテッド 二置換アミノ酸ならびにその調製および使用の方法
US9724396B2 (en) 2013-03-15 2017-08-08 Massachusetts Institute Of Technology Use of antagonists of growth hormone or growth hormone receptor to prevent or treat stress-sensitive psychiatric illness
JP6295247B2 (ja) * 2013-03-25 2018-03-14 ゼリア新薬工業株式会社 食後期の胃運動亢進剤
CA2978216A1 (en) * 2014-03-04 2015-09-11 Motus Therapeutics, Inc. Process for the liquid phase synthesis of h-inp-(d)bal-(d)trp-phe-apc-nh2, and pharmaceutically acceptable salts thereof
SG10201902594QA (en) 2014-09-24 2019-04-29 Aileron Therapeutics Inc Peptidomimetic macrocycles and uses thereof
RU2680410C1 (ru) 2015-01-28 2019-02-21 Аратана Терапьютикс, Инк. Композиции и способы длительного применения соединения для прироста массы тела
US10317418B2 (en) 2015-02-24 2019-06-11 Massachusetts Institute Of Technology Use of ghrelin or functional ghrelin receptor agonists to prevent and treat stress-sensitive psychiatric illness
MX2017011834A (es) 2015-03-20 2018-04-11 Aileron Therapeutics Inc Macrociclos peptidomimeticos y usos de los mismos.
US10779980B2 (en) 2016-04-27 2020-09-22 Synerz Medical, Inc. Intragastric device for treating obesity
WO2023161226A1 (en) * 2022-02-22 2023-08-31 Pephexia Therapeutics Aps Ghrelin agonists with improved potency
WO2024003381A1 (en) * 2022-07-01 2024-01-04 Pephexia Therapeutics Aps Hybrid polypeptides acting as dual ghsr and npy5r agonists

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030186844A1 (en) * 2000-05-30 2003-10-02 Bednarek Maria A. Gherlin analogs
US20050148515A1 (en) * 2002-08-09 2005-07-07 Dong Zheng X. Growth hormone releasing peptides
US20050272648A1 (en) * 2002-07-23 2005-12-08 Dong Zheng X Ghrelin analogs

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6124263A (en) 1998-11-16 2000-09-26 Asta Medica Ag Treatment of tumors by administration of growth hormone releasing compounds and their antagonists
ATE449174T1 (de) 1999-07-23 2009-12-15 Kenji Kangawa Neue peptide
IL162796A0 (en) * 2002-05-21 2005-11-20 Kenji Kangawa Medicinal compositions containing ghrelin
DE602004012207T2 (de) * 2003-10-16 2009-03-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Fluoreszent markierte Ghrelin-Peptide
ES2474643T3 (es) 2005-09-28 2014-07-09 Ipsen Pharma Análogos de grelina
EP2012809B1 (en) * 2006-03-10 2013-05-22 Ipsen Pharma Use of a ghrelin agonist to improve the catabolic effects of glucocorticoid treatment

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030186844A1 (en) * 2000-05-30 2003-10-02 Bednarek Maria A. Gherlin analogs
US20050272648A1 (en) * 2002-07-23 2005-12-08 Dong Zheng X Ghrelin analogs
US20050148515A1 (en) * 2002-08-09 2005-07-07 Dong Zheng X. Growth hormone releasing peptides

Also Published As

Publication number Publication date
AR061780A1 (es) 2008-09-24
AU2007300526B2 (en) 2011-07-21
BRPI0717169C1 (pt) 2012-12-04
WO2008039415A2 (en) 2008-04-03
KR20090075838A (ko) 2009-07-09
EP2083842A4 (en) 2011-03-16
CN101541341B (zh) 2013-06-05
EP2083842A2 (en) 2009-08-05
ES2436419T3 (es) 2014-01-02
MX2009003246A (es) 2009-07-29
WO2008039415A3 (en) 2008-11-13
CA2664558C (en) 2016-11-01
TWI370135B (en) 2012-08-11
RU2459831C2 (ru) 2012-08-27
JP5134627B2 (ja) 2013-01-30
EP2083842B1 (en) 2013-08-28
RU2009115711A (ru) 2010-11-10
US8299022B2 (en) 2012-10-30
IL197796A0 (en) 2011-08-01
NZ576470A (en) 2012-09-28
US20090275511A1 (en) 2009-11-05
CN101541341A (zh) 2009-09-23
CA2664558A1 (en) 2008-04-03
TW200821328A (en) 2008-05-16
JP2010504966A (ja) 2010-02-18
IL197796A (en) 2015-09-24
AU2007300526A1 (en) 2008-04-03
BRPI0717169A2 (pt) 2012-10-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101197541B1 (ko) Ｎ-말단이 치환된 그렐린 유사체
JP4896140B2 (ja) グレリンの類似体
KR100967572B1 (ko) 성장 호르몬 방출 펩타이드
JP5960563B2 (ja) 胃腸運動を刺激するための組成物及び方法
KR101065471B1 (ko) 그렐린 유사체
RU2427587C2 (ru) Аналоги грелина
KR101202242B1 (ko) 그렐린 유사체

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E90F Notification of reason for final refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20151002

Year of fee payment: 4

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20160929

Year of fee payment: 5

LAPS Lapse due to unpaid annual fee