KR101038248B1 - 백혈구 제거 방법, 백혈구 제거 필터 및 그의 용도 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 백혈구 제거 성능이 보다 높고, 블록킹을 일으키지 않으며 처리 시간이 짧은 백혈구 제거 방법을 제공하는 것을 과제로 한다. 평균 섬유 직경이 0.3 내지 3.0 ㎛인 부직포를 포함하는 백혈구 제거 필터에 백혈구 함유액을 통과시켜 백혈구 함유액으로부터 백혈구를 제거하여 백혈구가 제거된 액체를 얻는 방법에 있어서, 두께 0.3 mm 상당의 편성 지수 y가 50 이하인 부직포를 사용하는 것을 특징으로 하는 백혈구 제거 방법, 그를 위한 백혈구 제거 필터의 용도, 및 백혈구 제거 필터에 관한 것이다.
백혈구 제거 방법, 백혈구 제거 필터, 부직포, 혈액 체외 순환 장치

Description

백혈구 제거 방법, 백혈구 제거 필터 및 그의 용도{Method of Removing Leukocytes, Leukocyte-Removing Filter and Utilization Thereof}
본 발명은 전혈 제제, 적혈구 제제, 혈소판 제제 및 혈장 제제 등의 수혈용 혈액 제제, 및 이들을 제조하기 위한 중간체 등의 백혈구 함유액으로부터, 특정한 백혈구 제거 필터를 이용하여 백혈구를 제거함으로써 백혈구가 제거된 액체를 얻는 방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 체외 순환 요법에서 특정한 백혈구 제거 필터를 이용하여 백혈구를 제거함으로써 백혈구가 제거된 액체를 얻는 방법에 관한 것이기도 하다.
수혈 분야에서는, 공혈자로부터 채혈한 혈액에 항응고제를 첨가한 전혈 제제를 수혈하는, 다시 말해 전혈 수혈 이외에 수혈자가 필요로 하는 혈액 성분을 전혈 제제로부터 분리하여 그 혈액 성분을 수혈하는, 즉 성분 수혈이 일반적으로 행해지고 있다. 성분 수혈에는 수혈자가 필요로 하는 혈액 성분의 종류에 따라 적혈구 수혈, 혈소판 수혈, 혈장 수혈 등이 있으며, 이들 수혈에 사용되는 혈액 제제에는 적혈구 제제, 혈소판 제제, 혈장 제제 등이 있다.
또한, 최근에는 혈액 제제 중에 포함되어 있는 백혈구를 제거하고 나서 혈액 제제를 수혈하는, 즉 백혈구 제거 수혈이 보급되고 있다. 이것은 수혈에 따른 두 통, 구토, 오한, 비용혈성 발열 반응 등의 비교적 경미한 부작용이나, 수혈자에게 심각한 영향을 미치는 알로 항원 감작, 바이러스 감염, 수혈 후 GVHD 등의 중증 부작용이 주로 수혈에 사용된 혈액 제제 중에 혼입되어 있는 백혈구를 원인으로 하여 야기되는 것으로 밝혀졌기 때문이다.
두통, 구토, 오한, 발열 등의 비교적 경미한 부작용을 방지하기 위해서는, 혈액 제제 중의 백혈구를 잔존율이 10-1 내지 10-2 이하가 될 때까지 제거하는 것이 바람직하다고 여겨지고 있다. 또한, 중증 부작용인 알로 항원 감작이나 바이러스 감염을 방지하기 위해서는, 백혈구를 잔존율이 10-4 내지 10-6 이하가 될 때까지 제거할 필요가 있다고 여겨지고 있다.
또한, 최근에는 류마티스성 또는 궤양성 대장염 등의 질환 치료에 혈액의 체외 순환에 의한 백혈구 제거 요법이 행해지고 있으며, 높은 임상 효과를 얻고 있다.
현재, 혈액 제제로부터 백혈구를 제거하는 방법에는, 크게 나누어 혈액 성분의 비중차를 이용하여 원심 분리기로 백혈구를 분리 제거하는 원심 분리법과, 부직포 등의 섬유 집합체나 연속 기공을 갖는 다공 구조체 등을 포함하는 필터재를 이용하여 백혈구를 제거하는 필터법 2종이 있다. 백혈구를 점착 또는 흡착에 의해 제거하는 필터법은 조작이 간편하고, 비용이 저렴하다는 등의 이점을 갖기 때문에 현재 가장 많이 보급되고 있다.
상기한 부직포 등의 섬유 집합체나 연속 기공을 갖는 다공 구조체 등의 필터 재에 의한 백혈구 제거 메카니즘은, 주로 필터재 표면과 접촉된 백혈구가 필터재 표면에 점착 또는 흡착되는 것이다. 따라서, 종래의 필터재의 백혈구 제거 성능 향상 수단으로서 필터재와 백혈구의 접촉 빈도를 높이는 것, 즉 부직포의 섬유 직경이나 세공 직경을 작게 하거나, 부피 밀도를 높이는 것 등이 검토되고 있다(일본 특허 제1723513호 공보). 그러나, 백혈구 제거능이 향상됨에 따라 혈액 제제를 통과시킬 때의 압력 손실이 증대되어, 기대하는 혈액량을 완전히 처리하기 전에 처리 속도가 극단적으로 저하된다는 문제가 있었다.
한편, 연속 기공을 갖는 다공 구조체에 대해서는, 백혈구에 의한 블록킹 우려가 없는 백혈구 분리재로서 버블 포인트가 0.08 내지 0.3 kg/cm2인 다공질체가 개시되어 있다(일본 특허 공개 (평)1-224324호공보). 그러나, 본 발명자들이 검토한 결과, 상기 백혈구 분리재는 혈액 제제 중에 혼입되어 있는 백혈구를 10-2 내지 10-3으로 감소시키는 데 적합한 것이었으며, 본 발명에서 목적으로 하는 백혈구 잔존율 10-4를 달성하는 데 필요한, 비교적 작은 평균 공경을 갖는 다공질체를 사용하는 경우에는 다음과 같은 문제가 있었다. 즉, 가장 적당한 평균 공경을 갖는 다공질체를 사용하면, 부직포보다 몇분의 1로 얇은 두께에서 부직포와 동등한 백혈구 제거능을 나타내어 소형화를 달성하는 데 유력한 수단을 제공할 수 있지만, 이러한 높은 백혈구 제거능을 나타내는 다공질체는 동시에 백혈구의 블록킹에 따른 압력 손실이 높아지고, 섬유 직경이 가는 부직포를 사용하는 것과 마찬가지로 혈액의 처리 속도가 현저하게 저하된다는 문제를 갖고 있었다.
최근, 의료 현장에서는 백혈구 제거 필터에 대하여 새로운 요구가 제기되고 있다. 그 요구 중 하나는 백혈구 제거 성능을 향상시키는 것 뿐만 아니라, 유용 성분의 회수율을 향상시키는 것이다. 현재 유용 성분의 회수율을 높이기 위해 생리 식염수나 공기에 의해 필터 내 및 회로 내에 잔류하고 있는 유용 성분을 회수하는 조작을 시행하고 있지만, 이를 필요로 하지 않게 하여 작업을 생략시키는 것이 중요하다. 혈액 제제의 원료인 혈액은 선의에 의한 헌혈로 공급되고 있는 귀중한 혈액인 경우가 많지만, 백혈구 제거 필터 내에 잔류하여 회수 불능이 된 혈액은 그대로 필터와 함께 폐기되어 낭비된다는 문제점이 있다. 따라서, 현행 백혈구 제거 필터보다 유용 성분의 회수율을 향상시키는 것은 매우 의의가 깊다.
따라서, 상기한 의료 현장의 요구를 충족시키기 위해, 단위 부피당 백혈구 제거 성능이 높은 백혈구 제거 필터재를 사용하여, 이제까지보다 적은 양의 필터재를 충전시킨 백혈구 제거 필터 장치가 요구되고 있다. 이러한 장치의 사용에 의해 필터 내에 잔류하고 있는 유용 성분을 회수하는 조작을 행하지 않아도, 필터재의 충전량이 감소함에 따라 필터 내에 잔류하는 혈액량이 감소하여 종래의 필터 장치보다 유용 성분의 회수율을 향상시킬 수 있을 것으로 기대된다.
또한, 시장에서는 백혈구 제거 필터에 대한 별도의 요구로서, 단시간만에 원하는 양의 혈액을 처리하고자 하는 요구가 있다. 따라서, 백혈구 제거 필터 장치의 형상면에서 종래 장치의 단면적과 동등하거나 더 크고, 필터재의 두께가 얇은 형상의 백혈구 제거 필터 장치가 된다. 그러나, 백혈구 제거 성능을 유지하면서 필터재의 두께를 얇게 하기 위해서는, 단위 부피당 백혈구 제거 성능을 높일 필요 가 있다.
이들 요구를 충족시키기 위해, 필터재의 물성 요소의 균일성을 높임으로써 단위 부피당 백혈구 제거 성능을 향상시키려는 시도가 이루어져 왔다. 일반적인 필터재의 물성 요소를 균일하게 하는 것으로, 필터재로 사용된 부직포 공경을 균일하게 하고 굵기가 다른 섬유가 혼재되어 있는 공경 분포를 좁게 한 부직포의 필터재, 또는 섬유 직경이 균일하고 섬유가 겹쳐져 있지 않으며 기본 중량이 균일한 부직포 등이 있을 수 있다(일본 특허 공개 (소)63-175156호 공보, 일본 특허 공개 (평)9-155127호 공보 및 국제 공개 제96/03194호 공보).
특히, 백혈구 제거를 목적으로 하는 기술 분야에서 필터재 물성 요소를 균일하게 하는 것으로는, 공경 분포를 좁게 함으로써 백혈구 제거에 유용한 세공 부분의 용적을 증가시킨 백혈구 포착재나, 수평균 공경에 대한 양평균 공경의 비가 1.5 내지 2.5인 공경이 균일한 삼차원 메쉬상 연속 다공질체가 있다. 또한, 필터재가 부직포인 경우에는, 섬유 직경 분포를 좁게 하여 섬유 직경의 균일성을 향상시킨 부직포가 제안되어 있다(국제 공개 제93/03740호 공보, 일본 특허 공개 (평)7-124255호 공보, 일본 특허 공개 (소)63-175157호 공보 및 특허 제2811707호 공보).
이상과 같이, 필터재의 공경이나 섬유 직경을 균일하게 함으로써 단위 부피당 백혈구 제거 성능을 높이는 시도가 이루어지고 있지만, 필터재의 공경이나 섬유 직경을 균일하게 하는 것이 반드시 백혈구 제거 필터의 백혈구 제거 성능이나 여과시의 유동성을 향상시킨다고는 할 수 없다. 즉, 혈액은 필터재를 두께 방향으로 흐르기 때문에 공경이나 섬유 직경이 균일하더라도 필터재 두께 방향의 물성 요소 가 여과면 방향에 대하여 불균일하면 혈액은 필터재의 통액 저항이 낮은 부분으로 많이 흐르게 된다. 그 결과, 필터재가 전체적으로 균일하게 활용되지 않은 상태로 여과가 종료되기 때문에 백혈구 제거 성능을 충분히 얻을 수 없고, 실질적인 통액 면적이 감소하여 혈액이 많이 흐르는 부분은 블록킹이 발생하기 쉬워지므로 처리 시간이 저하된다. 따라서, 공경이나 섬유 직경을 균일하게 하는 것은, 미시적으로 보면 일정 부피당 백혈구 제거 성능을 높이지만, 거시적으로 보았을 경우에는 필터재인 부직포 내의 빈 구멍이 균등하게 배치되어 있지 않거나, 섬유 분산이 치우쳐져 있거나, 필터재의 기본 중량이 불균일할 경우에 혈액이 통액 저항이 낮은 부분을 많이 흐르기 때문에 충분한 필터 성능을 발휘할 수 없다. 상기한 바와 같이, 종래의 기술은 모두 섬유 직경이나 평균 공경으로 대표되는 각각의 단일 물성 요소의 균일화를 의도한 것에 지나지 않으며, 필터재 전체에 걸친 균일성의 중요성까지는 인식하지 못하였다.
상기 종래 기술의 문제점을 감안하여 의료 현장의 새로운 요구를 충족시키기 위해, 본 발명은 특정한 백혈구 제거 필터를 사용함으로써 백혈구 제거 성능이 보다 높고, 블록킹을 일으키지 않으며, 처리 시간이 짧은 백혈구 제거 방법을 제공하는 것을 과제로 한다.
본 발명자들은 특히 점도가 높아 블록킹이 발생하기 쉬운 백혈구 함유액을 백혈구 제거 필터로 처리하는 경우를 상정하고, 필터재인 부직포의 균일성이 중요하다는 점에 착안하여 예의 연구를 거듭하였다. 그 결과, 종래 알려져 있던 단일 물성 요소를 균일화시키는 대신에, 두께 방향, 즉 액체 유동 방향의 특정한 구조를 부직포의 여과면 전역에 걸쳐 균일화시킨 백혈구 제거 필터를 사용함으로써 백혈구 제거 성능이 높고, 블록킹을 일으키지 않으며, 처리 시간이 짧은 백혈구 제거 방법을 얻을 수 있다는 것을 발견하였다.
즉, 본 발명은 이하의 사항을 포함한다.
1. 평균 섬유 직경이 0.3 내지 3.0 ㎛인 부직포를 포함하는 백혈구 제거 필터에 백혈구 함유액을 통과시켜 백혈구 함유액으로부터 백혈구를 제거함으로써 백혈구가 제거된 액체를 얻는 방법에 있어서, 두께 0.3 mm 상당의 편성 지수 y가 50 이하인 부직포를 사용하는 것을 특징으로 하는 백혈구 제거 방법.
2. 상기 1에 있어서, 충전율이 0.05 내지 0.30인 부직포를 사용하는 백혈구 제거 방법.
3. 상기 1 또는 2에 있어서, 두께 0.3 mm 상당의 편성 지수 y가 50 이하이고, y가
y<-4×부직포의 평균 섬유 직경(㎛)+55
의 식을 충족하는 부직포를 사용하는 백혈구 제거 방법.
4. 상기 1 내지 3 중 어느 한 항에 있어서, 용융 분사법에 의해 얻어진 부직포를 사용하는 백혈구 제거 방법.
5. 상기 1 내지 4 중 어느 한 항에 있어서, 부직포의 상류측에 응집물 제거를 위한 필터를 포함하고(포함하거나), 하류측에 후-필터(post-filter)를 포함하는 백혈구 제거 필터를 사용하는 것을 특징으로 하는 백혈구 제거 방법.
6. 상기 1 내지 5 중 어느 한 항에 있어서, 백혈구 제거 필터가 액체의 입구와 출구를 갖는 편평상의 필터인 백혈구 제거 방법.
7. 상기 1 내지 5 중 어느 한 항에 있어서, 백혈구 제거 필터가 액체의 입구와 출구를 갖는 원통상의 필터인 백혈구 제거 방법.
8. 상기 6에 있어서, 백혈구 제거 필터의 용기가 가요성 수지로 형성되는 것을 특징으로 하는 백혈구 제거 방법.
9. 상기 1 내지 8 중 어느 한 항에 있어서, 전혈, 적혈구 농후액, 혈소판 농후액, 다혈소판 혈장, 핍(乏)혈소판 혈장 중 어느 하나로부터 선택되는 백혈구 함유액을 백혈구 제거 필터에 통과시키는 백혈구 제거 방법.
10. 상기 1 내지 9 중 어느 한 항에 있어서, 낙차에 의해 백혈구 제거 필터에 백혈구 함유액을 통과시키는 백혈구 제거 방법.
11. 상기 1 내지 9 중 어느 한 항에 있어서, 백혈구 제거 필터의 입구측을 가압하고(가압하거나), 출구측을 감압함으로써 백혈구 제거 필터에 백혈구 함유액을 통과시키는 백혈구 제거 방법.
12. 상기 1 내지 8 및 11 중 어느 한 항에 있어서, 환자의 체내로부터 연속적으로 전혈을 취출하여 백혈구 제거 필터에 통과시키고, 백혈구가 제거된 전혈을 다시 환자의 체내로 되돌림으로써 체외 순환을 행하는 백혈구 제거 방법.
13. 평균 섬유 직경이 0.3 내지 3.0 ㎛인 부직포를 포함하는 백혈구 제거 필터를 이용하여 백혈구 함유액으로부터 백혈구를 제거하는 백혈구 제거 방법에 있어서, 상기 방법을 위한 두께 0.3 mm 상당의 편성 지수 y가 50 이하인 백혈구 제거 필터의 용도.
14. 상기 13에 있어서, 충전율이 0.05 내지 0.30인 부직포를 사용하는 백혈구 제거 필터의 용도.
15. 상기 13 또는 14에 있어서, 두께 0.3 mm 상당의 편성 지수 y가 50 이하이고, y가
y<-4×부직포의 평균 섬유 직경(㎛)+55
의 식을 충족하는 부직포를 사용하는 백혈구 제거 필터의 용도.
16. 상기 13 내지 15 중 어느 한 항에 있어서, 용융 분사법에 의해 얻어진 부직포를 사용하는 백혈구 제거 필터의 용도.
17. 상기 13 내지 16 중 어느 한 항에 있어서, 부직포의 상류측에 응집물 제거를 위한 필터를 포함하고(포함하거나), 상기 부직포의 하류측에 후-필터를 포함하는 백혈구 제거 필터의 용도.
18. 상기 13 내지 17 중 어느 한 항에 있어서, 백혈구 제거 필터가 액체의 입구와 출구를 갖는 편평상인 백혈구 제거 필터의 용도.
19. 상기 13 내지 17 중 어느 한 항에 있어서, 백혈구 제거 필터가 액체의 입구와 출구를 갖는 원통상인 백혈구 제거 필터의 용도.
20. 상기 18에 있어서, 백혈구 제거 필터의 용기가 가요성 수지로 형성되는 백혈구 제거 필터의 용도.
21. 상기 13 내지 20 중 어느 한 항에 있어서, 전혈, 적혈구 농후액, 혈소판 농후액, 다혈소판 혈장, 핍혈소판 혈장 중 어느 하나로부터 선택되는 백혈구 함유액으로부터 백혈구를 제거하기 위한 백혈구 제거 필터의 용도.
22. 상기 13 내지 21 중 어느 한 항에 있어서, 낙차에 의해 백혈구 제거 필터에 백혈구 함유액을 통과시키기 위한 백혈구 제거 필터의 용도.
23. 상기 13 내지 21 중 어느 한 항에 있어서, 백혈구 제거 필터의 입구측을 가압하고(가압하거나), 출구측을 감압함으로써 백혈구 제거 필터에 백혈구 함유액을 통과시키기 위한 백혈구 제거 필터의 용도.
24. 상기 13 내지 20 및 23 중 어느 한 항에 있어서, 환자의 체내로부터 연속적으로 전혈을 취출하여 백혈구 제거 필터에 통과시키기 위한 백혈구 제거 필터의 용도.
25. 평균 섬유 직경이 0.3 내지 3.0 ㎛인 부직포를 포함하는 백혈구 제거 필터에 있어서, 두께 0.3 mm 상당의 편성 지수 y가 50 이하인 부직포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 백혈구 함유액으로부터 백혈구를 제거하는 백혈구 제거 방법에 사용하기 위한 백혈구 제거 필터.
26. 상기 25에 있어서, 충전율이 0.05 내지 0.30인 부직포를 사용하는 백혈구 제거 필터.
27. 상기 25 또는 26에 있어서, 두께 0.3 mm 상당의 편성 지수 y가 50 이하이고, y가
y<-4×부직포의 평균 섬유 직경(㎛)+55
의 식을 충족하는 부직포를 사용하는 백혈구 제거 필터.
28. 상기 25 내지 27 중 어느 한 항에 있어서, 용융 분사법에 의해 얻어진 부직포를 사용하는 백혈구 제거 필터.
29. 상기 25 내지 28 중 어느 한 항에 있어서, 부직포의 상류측에 응집물 제거를 위한 필터 및(또는) 하류측에 후-필터를 포함하는 백혈구 제거 필터.
30. 상기 25 내지 29 중 어느 한 항에 있어서, 액체의 입구와 출구를 갖는 편평상 필터인 백혈구 제거 필터.
31. 상기 25 내지 29 중 어느 한 항에 있어서, 액체의 입구와 출구를 갖는 원통상 필터인 백혈구 제거 필터.
32. 상기 30 또는 31에 있어서, 필터 용기가 가요성 수지로 형성되는 것을 특징으로 하는 백혈구 제거 필터.
33. 상기 25 내지 32 중 어느 한 항에 있어서, 전혈, 적혈구 농후액, 혈소판 농후액, 다혈소판 혈장, 핍혈소판 혈장 중 어느 하나로부터 선택되는 백혈구 함유액으로부터 백혈구를 제거하기 위해 사용하는 백혈구 제거 필터.
34. 상기 25 내지 33 중 어느 한 항에 기재된 백혈구 제거 필터를 적어도 갖는 혈액의 체외 순환 장치.
35. 상기 25 내지 33 중 어느 한 항에 기재된 백혈구 제거 필터, 환자의 체내로부터 취출한 전혈을 상기 백혈구 제거 필터에 도입하기 위한 입구, 및 백혈구가 제거된 전혈을 다시 환자의 체내로 되돌리기 위한 출구를 적어도 갖는 혈액의 체외 순환 장치.
도 1은 실시예 1 내지 4 및 비교예 1 내지 4의 백혈구 제거 필터의 편성 지수와 백혈구 잔존율과의 관계를 나타내는 그래프이다.
도 2는 실시예 1 내지 4 및 비교예 1 내지 4의 백혈구 제거 필터의 편성 지수와 혈액 처리압과의 관계를 나타내는 그래프이다.
도 3은 실시예 5 내지 8 및 비교예 5 내지 8의 백혈구 제거 필터에 대한 혈액 회수율과 일련의 조작에 필요한 시간을 나타내는 그래프이다.
도 4는 종래 백혈구 제거 필터의 균일성 개념을 나타내는 모식도이다. 화살표는 액체의 유동 방향을 나타내고, 그 폭은 유동의 용이성을 나타낸다. 폭이 클수록 유동하기 쉽다.
도 5는 본 발명의 백혈구 제거 필터의 균일성 개념을 나타내는 모식도이다.
<발명의 실시에서의 최선의 형태>
본 발명에 대하여, 이하 구체적으로 설명한다.
본 발명에서 말하는 백혈구 함유액이란, 백혈구를 포함하는 체액이나 합성 혈액을 총칭하는 것이며, 구체적으로는 전혈, 적혈구 농후액, 세정 적혈구 부유액, 해동 적혈구 농후액, 합성혈, 핍혈소판 혈장(PPP), 다혈소판 혈장(PRP), 혈장, 동결 혈장, 혈소판 농후액 및 버피 코트(buffy coat; BC) 등의 전혈 및 전혈로부터 제조하여 얻어지는 단일 또는 복수종의 혈액 성분을 포함하는 액체, 또는 이들 액체에 항응고제나 보존액 등이 첨가된 용액, 또는 전혈 제제, 적혈구 제제, 혈소판 제제, 혈장 제제 등을 말한다. 또한, 상기한 액체를 본 발명의 방법에 의해 처리하여 얻어지는 액체를 백혈구가 제거된 액체라고 한다.
본 발명에 있어서, 상기 백혈구 함유액을 특정한 부직포, 즉 유동 방향의 특 정한 구조가 여과면 전역에 걸쳐 균일화된, 고도로 균일한 부직포를 포함하는 백혈구 제거 필터에 통과시킴으로써 백혈구가 제거된 액체를 얻을 수 있다. 여기서 말하는 「고도로 균일한 부직포」란, 두께 방향의 구조가 그와 수직인 면 방향에서 변동되는 정도를 평가하는 지표인 편성 지수가 특정한 범위에 속하는 부직포를 말한다.
본 발명에서 말하는 편성 지수란, 부직포의 밑에서 광을 비추어 그 투과광을 전하 결합 소자 카메라(이하, CCD 카메라라고 함)로 검지하고, CCD 카메라의 각 화소가 검지한 다공질체 흡광도의 변동 계수(％)에 10을 곱한 값이다.
구체적인 산출 방법은 이하와 같다.
(1) CCD 카메라에 의해, 각 화소의 투과율,
투과율=(점등시의 광량-소등시의 광량)/(샘플이 없는 상태에서의 점등시의 광량-샘플이 없는 상태에서의 소등시의 광량)×100(％)를 구한다.
(2) 각 화소의 투과율을 이하의 식으로 흡광도로 변환한다.
흡광도=2-log(투과율)
(3) 흡광도의 평균치, 표준 편차를 구한다.
(4) 이하의 식에 의해 변동 계수를 구한다.
변동 계수=흡광도의 표준 편차/평균 흡광도×100(％)
(5) 변동 계수에 10을 곱하여 편성 지수로 한다.
편성 지수=변동 계수×10
상기 편성 지수의 산출식 1 내지 5가 나타내는 바와 같이, 편성 지수가 높을 수록 부직포의 광 투과가 불균일해지며, 부직포 두께 방향의 물성 요소가 여과면 방향(즉, 두께 방향에 수직인 면 방향) 전역에 걸쳐 불균일해진다고 간주할 수 있다. 여기서, 물성 요소란, 예를 들면 평균 섬유 직경, 평균 공경(섬유의 분산에 의해 형성되는 간극) 및 기본 중량 등이며, 편성 지수가 높으면 부직포 내의 빈 구멍이 균등하게 배치되어 있지 않거나, 섬유 분산이 치우쳐져 있거나 또는 필터재의 기본 중량 등이 변동되는 것을 의미한다. 이러한 경우에는 부직포 내에서 통액 저항이 높은 부분과 낮은 부분이 생기기 때문에, 백혈구 함유액(이하, 간단히 혈액 등이라고도 함)의 액체를 유동시키면 통액 저항이 낮은 부분으로 흐름이 집중된다. 그 결과, 통액 저항이 높고 혈액 등이 흐르기 어려운 부분의 필터재는 충분히 활용되지 않기 때문에 필터 전체적으로 보면 단위 부피당 백혈구 제거능이 저하되며, 혈액 등의 흐름이 집중됨으로써 실질적인 통액 면적의 감소나 블록킹이 발생하기 쉬워지기 때문에 처리 속도가 저하된다. 도 4는 이러한 상태를 모식적으로 나타낸 것이며, 어느 부분의 두께 방향의 구조가 다른 부분과는 상이하고, 여과면 전역에 걸친 균일성이 유지되어 있지 않다는 것을 알 수 있다.
반대로, 편성 지수가 낮을수록 광이 부직포를 균일하게 투과하며, 이 상태에서는 부직포 두께 방향의 구조가 여과면 전역에 걸쳐 균일하다고 할 수 있다. 즉, 편성 지수가 낮은 것은 부직포 내의 빈 구멍의 배치, 섬유의 분산, 필터재의 기본 중량 등이 종합적으로 보다 균일한 것을 의미하며, 개개의 물성 요소의 균일성을 반드시 한정하는 것은 아니다. 이러한 경우에는 부직포 내에서 통액 저항이 불균일해지지 않기 때문에, 혈액 등의 액체를 유동시키면 균일한 흐름을 달성할 수 있 다. 그 결과, 필터재가 남김없이 충분히 활용되어 필터 전체적으로 보면 단위 부피당 백혈구 제거능이 높아지고, 혈액 등의 흐름이 분산됨으로써 실질적인 통액 면적의 감소나 블록킹이 발생하지 않아 처리 시간을 단축시킬 수 있다. 도 5는 이러한 상태를 모식적으로 나타낸다.
본 발명에 있어서, 편성 지수는 포메이션 테스터 FMT-MIII(노무라 쇼지 가부시끼가이샤, 2002년 제조, S/N: 130)로 측정하였다. 테스터의 기본적인 설정은 공장 출하시로부터 변경하지 않았으며, CCD 카메라의 총 화소수는 약 3400에서 측정하였다. 본 발명에서의 편성 지수 측정은 총 화소수가 약 3400이 되도록 측정 크기를 7 cm×3 cm(1 화소 크기=0.78 mm×0.78 mm)로 조정하여 측정을 행했지만, 샘플의 형상에 맞추어 총 화소수가 동일해지도록 측정 크기를 변경할 수도 있다. 편성 지수는 두께에 의해 크게 좌우되기 때문에, 이하의 방법에 의해 두께 0.3 mm 상당의 편성 지수를 산출하였다. 우선, 실질적으로 동질이며 두께가 균일한 두께 0.3 mm 이하의 부직포를 3장 준비하여 각각의 편성 지수와 두께를 측정한다. 두께 측정은 두께 측정계(OZAKI MFG. CO., LTD., PEACOCK MODEL G)를 이용하여 4개의 점에서 측정하고, 그 평균을 부직포의 두께로 하였다. 이어서, 측정한 부직포 3장 중 2장을 두께가 0.3 mm 이상이 되도록 겹쳐 편성 지수와 두께를 측정한다. 전체 3종의 조합에 대하여 편성 지수의 측정을 종료한 후, 두께와 편성 지수의 회귀 직선식을 구하고, 그 식으로부터 두께 0.3 mm의 편성 지수를 구하였다. 부직포 2장의 두께가 0.3 mm에 도달하지 않은 경우에는 겹친 두께가 0.3 mm가 되도록 복수장의 부직포를 겹쳐 편성 지수를 측정하고, 이어서 겹친 두께가 0.3 mm 이하가 되도 록 부직포를 줄여 편성 지수를 측정한다. 겹친 두께가 0.3 mm 이하가 되는 모든 부직포의 조합에서 편성 지수를 측정하여 두께와 편성 지수의 회귀 직선식을 구하고, 그 식으로부터 두께 0.3 mm의 편성 지수를 구한다. 또한, 실질적으로 동질의 부직포란, 부직포의 물성(재질, 섬유 직경, 충전율 등)이 동일하다는 것을 나타낸다. 동일 필터 내에서 실질적으로 동질의 부직포를 측정에 필요한 수량만큼 얻을 수 없다면, 동일종 필터의 부직포를 조합하여 측정할 수도 있다.
본 발명의 백혈구 제거 방법에 있어서, 두께 0.3 mm 상당의 편성 지수 y가 50 이하인 부직포를 포함하는 백혈구 제거 필터를 사용할 필요가 있다. 편성 지수 y가 50보다 크면, 부직포 두께 방향의 구조가 여과면 방향에 대하여 불균일하고, 혈액이 부직포를 균등하게 흐르지 않기 때문에 백혈구 제거 성능을 충분히 얻을 수 없으며, 실질적인 통액 면적의 감소나 블록킹이 발생하기 쉬워져 처리 속도가 저하된다.
반대로, 편성 지수가 15보다 작으면 부직포를 제조하기가 곤란하고, 생산 효율면에서 만족할 수 없게 되므로 바람직한 편성 지수 y는 15 이상 50 이하이다. 보다 바람직한 편성 지수 y는 16 이상 48 이하, 더욱 바람직하게는 17 이상 45 이하, 특히 바람직하게는 17 이상 41 이하이다.
또한, 본 발명자들이 종래의 백혈구 제거용 필터재의 편성 지수 y를 측정한 결과, 50 이하인 것은 발견할 수 없었다.
또한, 단위 부피당 백혈구 제거 성능을 높이기 위해서 가는 섬유 직경의 편성 지수가 낮은 부직포를 포함하는 필터를 사용하는 것이 바람직하다. 단위 부피 당 백혈구 제거 성능이 높고, 혈액 손실이 적은 백혈구 제거 필터에 의한 백혈구 제거를 행한다는 점에서, 두께 0.3 mm 상당의 편성 지수 y가 50 이하인 것 뿐만 아니라 부직포의 편성 지수 y가 하기 수학식 2에서 얻어지는 값보다 낮은 것이 바람직하다.
y=a×부직포의 평균 섬유 직경(㎛)+55
식 중, a는 -4이다.
(2) 부직포의 편성 지수가 y치보다 낮은 경우는, 편성 지수와 평균 섬유 직경의 균형이 양호하기 때문에, 블록킹을 일으키지 않고 높은 백혈구 제거 성능을 얻을 수 있어 바람직하다. 수학식 2에 있어서, a는 -4.5인 것이 더욱 바람직하고, -5인 것이 특히 바람직하다.
본 발명의 백혈구 제거 방법에서 사용되는 백혈구 제거 필터는 상기 편성 지수를 나타내는 부직포를 포함하는데, 이러한 고도로 균일한 부직포는 습식법, 건식법 중 어느 것에 의해서도 제조할 수 있다. 극세 섬유가 얻어진다는 점에서 특히 용융 분사법이나 플래시 방사법 또는 초조법 등에 의해 제조되는 것이 바람직하다.
본 발명에서의 부직포의 제조 방법으로서 용융 분사법의 일례를 설명한다.
압출기 내에서 용융시킨 용융 중합체의 흐름은 적당한 필터에 의해 여과된 후, 용융 분사 다이(die)의 용융 중합체 도입부로 유도되고, 그 후 오리피스(orifice)상 노즐로부터 토출된다. 그와 동시에 가열 기체 도입부에 도입된 가열 기체를 용융 분사 다이 및 립(lip)에 의해 형성된 가열 기체 분출 슬릿으로 유도하고, 여기에서 분출시켜 상기 토출된 용융 중합체를 세화하여 극세 섬유를 형성하고, 이를 적층시킴으로써 부직포를 얻는다. 부직포 구조의 균일성을 높이고, 편성 지수를 원하는 범위로 조정하기 위해 검토해야 할 방사 인자로서 수지 점도, 용융 온도, 단일 구멍당 토출량, 가열 기체 온도, 가열 기체 압력, 방사구와 집적 네트 사이의 거리 등을 들 수 있다. 이들 방사 인자를 최적화시킴으로써, 즉 수지의 열화나 열분해가 발생하지 않는 범위의 용융 온도로 수지점도를 낮추고, 추가로 토출 중합체 흐름에 대하여 적절한 냉각 효과가 얻어지는 가열 기체 온도 범위로 설정하며, 또한 섬유끼리 조밀하게 되어 섬유들이 다발이 되지 않도록 방사구와 집적 네트 사이의 거리를 설정함으로써 본 발명의 편성 지수를 충족하는 부직포를 얻을 수 있다.
본 발명의 부직포 소재로서 폴리우레탄, 폴리(메트)아크릴레이트, 폴리아크릴로니트릴, 폴리비닐아세탈, 폴리에스테르, 폴리아미드, 폴리술폰, 폴리스티렌, 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 셀룰로오스, 셀룰로오스아세테이트, 유리 등 중 어느 것이나 적합하지만, 폴리에스테르, 폴리아미드, 폴리아크릴로니트릴, 폴리프로필렌등이 바람직하고, 특히 폴리에틸렌테레프탈레이트, 폴리부틸렌테레프탈레이트, 폴리프로필렌이 바람직하다.
본 발명의 부직포 섬유는 평균 섬유 직경이 0.3 ㎛ 이상 3.0 ㎛ 이하, 바람직하게는 0.3 ㎛ 이상 2.5 ㎛ 이하, 더욱 바람직하게는 0.5 ㎛ 이상 2.0 ㎛ 이하이다. 평균 섬유 직경이 3.0 ㎛보다 크면 비표면적이 작아짐에 따라 백혈구와의 접촉 회수가 감소하여 백혈구의 포착이 곤란해지는 경향이 있기 때문에 바람직하지 않고, 평균 섬유 직경이 0.3 ㎛ 미만에서는 혈구의 블록킹이 증가하는 경향이 있기 때문에 바람직하지 않다.
또한, 본 발명에서의 평균 섬유 직경이란, 이하의 순서에 따라 구해지는 값을 말한다. 즉, 필터재를 구성하는 1장 또는 실질적으로 동질인 복수장의 부직포로부터 실질적으로 균일하다고 여겨지는 필터재의 일부분을 여러 부분에서 샘플링하여 주사형 전자 현미경 등을 이용하여 사진을 찍는다. 사진에 찍힌 섬유의 합계 측정 가닥수가 100 가닥을 초과할 때까지 사진을 계속 찍고, 이와 같이 하여 얻은 사진에 대하여 찍힌 모든 섬유의 직경을 측정한다. 여기서, 직경이란 섬유축에 대하여 직각 방향의 섬유폭을 말한다. 측정한 모든 섬유의 직경의 합을 섬유의 수로 나눈 값을 평균 섬유 직경이라고 한다. 단, 복수의 섬유가 겹쳐 있어 다른 섬유에 가려져 그 폭을 측정할 수 없는 경우, 또한 복수의 섬유가 용융된 경우 등으로 인해 굵은 섬유가 된 경우, 직경이 더욱 현저하게 다른 섬유가 혼재되어 있는 경우, 사진의 촛점이 틀어져 섬유의 경계가 분명하지 않은 경우 등등의 경우에는 이들 데이타는 삭제한다. 또한, 상류측과 하류측의 평균 섬유 직경이 명확하게 다른 경우에는 더 이상 이것을 단일한 필터재라고 하지 않는다. 여기서 「명확하게 평균 섬유 직경이 다르다」라는 것은 통계적으로 유의차가 확인되는 경우를 말한다. 이 경우에는 상류측과 하류측을 다른 필터재로서 파악하고, 두가지의 경계면을 찾아낸 후 양자의 평균 섬유 직경을 개개로 다시 측정한다.
상기 부직포의 충전율도 백혈구 제거 성능에 관여한다. 본 발명에서 말하는 부직포의 충전율이란, 임의의 치수로 절단한 부직포의 면적과 두께, 중량 및 부직 포를 구성하는 재료의 비중을 측정하여, 이하의 수학식 1에 의해 산출되는 것이다.
충전율={부직포의 중량(g)÷(부직포의 면적(cm2)×부직포의 두께(cm))}÷부직포를 구성하는 재료의 비중(g/cm3)
충전율은 0.05 이상 0.30 이하인 것이 바람직하고, 0.07 이상 0.25 이하인 것이 보다 바람직하며, 0.07 이상 0.20이 특히 바람직하다. 충전율이 0.30보다 크면 부직포의 유동 저항이 증대되기 때문에 유동성면에서 바람직하지 않고, 반대로 0.05보다 작으면 백혈구가 부직포 섬유에 포착되지 않고 통과되기 때문에 백혈구 제거 성능이 낮아진다. 또한, 부직포의 기계적 강도도 저하되기 때문에 바람직하지 않다.
부직포를 미시적으로 보았을 경우, 부직포의 섬유 분산성이 양호해지면 섬유의 교락점이 증가하고 백혈구의 접촉점(흡착점)이 증가함으로써 백혈구 제거 성능이 향상되기 때문에, 섬유의 치우침이나 다발을 포함하지 않는 부직포가 바람직하다.
또한, 부직포를 미시적으로 보았을 경우, 부직포의 공경 분포가 좁고 일정한 평균 공경을 가지면 단위 부피당 백혈구 제거 성능이 향상되기 때문에 바람직하다.
본 발명의 백혈구 제거 방법에서 사용되는 부직포는 복수장 적층되어 백혈구 제거 필터재가 되고, 액체의 입구와 출구를 갖는 용기에 수용되어 백혈구 제거 필터를 구성한다. 본 발명의 백혈구 제거 방법에서 사용되는 부직포는 백혈구 제거 필터재 전부를 구성할 수도 있고, 필터재의 일부를 구성할 수도 있다. 예를 들면, 상류측에 편성 지수가 높은 부직포 및(또는) 스폰지상 구조물과 같은 3차원 메쉬상 연속 세공을 갖는 다공질체를 배치하고, 하류측에 편성 지수가 낮은 부직포를 배치할 수도 있다.
상기 백혈구 제거 필터재의 형상의 예로, 특별히 한정되지 않지만, 평판상으로 적층한 것 또는 이들을 더 원통상으로 성형한 것을 들 수 있다. 전자는 컴팩트하고 비교적 간편하게 성형할 수 있기 때문에 종래부터 수혈 필터 등에 범용되고 있으며, 후자는 다량의 액체 처리에 적합하기 때문에 체외 순환용 필터로서 바람직하게 사용할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 백혈구 제거 필터재는 단일 필터재로 구성될 수도 있고, 복수의 필터재로 구성될 수도 있다. 복수의 필터재를 포함하는 경우, 상류에 배치된 미소 응집물을 제거하는 제1 필터재와, 제1 필터재의 하류에 배치된 백혈구를 제거하기 위한 제2 필터재를 포함하는 것이 바람직하다. 예를 들면, 입구측에 섬유 직경이 몇 내지 몇십 ㎛인 부직포를 포함하는 필터재를 응집물 제거를 위해 제1 필터재로서 배치하고, 이어서 섬유 직경이 0.3 내지 3.0 ㎛인 부직포를 포함하는 필터재를 백혈구를 제거하기 위한 제2 필터재로서 배치하며, 추가로 필요에 따라 제2 필터재의 하류에 후-필터를 배치하여 사용할 수도 있다.
특히, 평판상이면서 가요성 용기를 포함하는 백혈구 제거 필터에 후-필터를 배치하는 것은, 여과시에 생기는 입구측의 양압에 의해 필터 요소가 출구측 용기에 압착되는 것과 출극측의 음압에 의해 출구측 용기가 필터 요소에 밀착되어 혈액의 흐름이 저해되는 것을 방지하며, 또한 가요성 용기와 필터재의 용착성을 높이기 때문에 바람직하다. 후-필터는 부직포나 직포, 메쉬 등의 섬유상 다공성 매체 및 3차원 메쉬상 연속 세공을 갖는 다공질체 등의 공지된 여과 매체를 사용할 수 있다. 이들의 소재로서 예를 들면 폴리프로필렌, 폴리에틸렌, 스티렌-이소부틸렌-스티렌 공중합체, 폴리우레탄, 폴리에스테르 등을 들 수 있다. 또한, 후-필터가 부직포인 경우에는 생산성이나 백혈구 제거 필터의 용착 강도면에서 바람직하며, 후-필터가 엠보싱 가공 등에 의해 복수의 돌기부를 갖고 있으면 혈액의 흐름이 더욱 균일해지기 때문에 특히 바람직하다.
제1, 제2 필터재는 각각 추가의 복수종 필터재로 구성될 수도 있고, 한쪽만이 복수종 필터재로 구성될 수도 있다. 예를 들면, 섬유 직경이 30 내지 40 ㎛인 부직포 및(또는) 섬유 직경이 10 내지 20 ㎛인 부직포를 포함하는 제1 필터재를 상류측에 배치하고, 제1 필터재의 하류측에 섬유 직경이 1.5 내지 2.5 ㎛인 부직포 및(또는) 섬유 직경이 0.5 내지 1.8 ㎛인 부직포를 포함하는 제2 필터재를 배치하여 사용할 수도 있다. 또한, 굵은 섬유 직경의 부직포와 가는 섬유 직경의 부직포가 교대로 배치될 수도 있으며, 굵은 섬유 직경의 부직포가 상류측에 배치되어 있는 것이 바람직하다.
또한, 이들 백혈구 제거 필터재는 혈구의 선택 분리성이나 표면의 친수성 등을 제어할 목적으로 코팅이나 약품 처리, 방사선 처리 등의 공지된 기술에 의해 그 표면을 개질시킬 수도 있다.
백혈구 제거 필터재를 수용하는 용기의 재질은 경질성 수지나 가용성 수지 중 어느 하나일 수 있으며, 경질성 수지의 경우에 소재의 예로 페놀 수지, 아크릴 수지, 에폭시 수지, 포름알데히드 수지, 요소 수지, 규소 수지, ABS 수지, 나일론, 폴리우레탄, 폴리카보네이트, 염화비닐, 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 폴리에스테르, 스티렌-부타디엔 공중합체 등을 들 수 있다. 가요성 수지의 경우, 가요성 합성 수지제의 시트상 또는 원통상 성형물로 형성되는 것이 바람직하다. 재질은 필터 요소와 열적, 전기적 성질이 유사한 것이 바람직하며, 예를 들면 연질 폴리염화비닐, 폴리우레탄, 에틸렌-아세트산 비닐 공중합체, 폴리에틸렌 및 폴리프로필렌과 같은 폴리올레핀, 스티렌-부타디엔-스티렌 공중합체의 수소 첨가물, 스티렌-이소프렌-스티렌 공중합체 또는 그의 수소 첨가물 등의 열가소성 엘라스토머, 및 열가소성 엘라스토머와 폴리올레핀, 에틸렌-에틸아크릴레이트 등의 연화제와의 혼합물 등이 바람직한 재료일 수 있다. 바람직하게는 연질 염화비닐, 폴리우레탄, 에틸렌-아세트산 비닐 공중합체, 폴리올레핀, 및 이들을 주성분으로 하는 열가소성 엘라스토머이며, 더욱 바람직하게는 연질 염화비닐, 폴리올레핀이다.
상기 용기의 형상은 백혈구 함유액의 입구와 백혈구가 제거된 액체의 출구를 갖는 형상이라면 특별히 한정되지 않으며, 백혈구 제거 필터재의 형상에 상응하는 형상인 것이 바람직하다. 예를 들면, 백혈구 제거 필터재가 평판상인 경우에는 사각형, 육각형 등의 다각형이나, 원형, 타원형 등의 곡선으로 이루어지는 편평 형상인 것이 바람직하다. 보다 상세하게 용기는 액체 입구를 갖는 입구측 용기와 액체 출구를 갖는 출구측 용기로 구성되며, 양자에 백혈구 제거 필터재를 직접 또는 지지체를 통해 끼움으로써 필터 내부를 2실로 나누어 편평상의 백혈구 제거 필터를 형성하는 형상인 것이 바람직하다. 또한, 별도의 예로 백혈구 제거 필터재가 원통상인 경우에는 용기도 마찬가지로 원통상인 것이 바람직하다. 보다 상세하게는 용기는 필터재를 수용하는 통 형태의 본체부와 액체 입구를 갖는 입구측 헤더(header) 및 액체 출구를 갖는 출구측 헤더로 구성되며, 포팅(potting) 가공에 의해 입구로부터 도입된 액체가 원통상 필터의 외주부로부터 내주부(또는 내주부로부터 외주부)로 흐르도록 용기 내부를 2실로 나누어 원통상의 백혈구 제거 필터를 형성하는 형상인 것이 바람직하다.
이어서, 본 발명의 백혈구 제거 방법에 대하여 설명한다. 우선, 처음에 백혈구가 제거된 각 혈액 제제를 제조하는 방법의 한 가지 형태에 대하여 설명하지만, 본 발명이 이것들로 한정되는 것은 아니다.
(백혈구 제거 전혈 제제의 제조)
채혈된 전혈에 CPD, CPDA-1, CP2D, ACD-A, ACD-B, 헤파린 등의 보존액, 항응고제를 첨가하고, 백혈구 제거 필터를 사용하여 전혈로부터 백혈구를 제거함으로써 백혈구 제거 전혈 제제를 얻는다.
백혈구 제거 전혈 제제의 제조에 있어서, 보존 전 백혈구를 제거하는 경우, 바람직하게는 실온하 또는 냉장하에서 보존된 전혈로부터 채혈 후 72 시간 이내, 더욱 바람직하게는 24 시간 이내, 특히 바람직하게는 12 시간 이내, 가장 바람직하게는 8 시간 이내에 실온하 또는 냉장하에서 백혈구 제거 필터를 이용하여 백혈구를 제거함으로써 백혈구 제거 전혈 제제를 얻는다. 보존 후 백혈구를 제거하는 경우, 실온하, 냉장하 또는 냉동하에서 보존된 전혈로부터 바람직하게는 사용 전 24 시간 이내에 백혈구 제거 필터를 이용하여 백혈구를 제거함으로써 백혈구 제거 전혈 제제를 얻는다.
(백혈구 제거 적혈구 제제의 제조)
채혈된 전혈에 CPD, CPDA-1, CP2D, ACD-A, ACD-B, 헤파린 등의 보존액, 항응고제를 첨가한다. 각 혈액 성분의 분리 방법은 전혈로부터 백혈구를 제거한 후에 원심 분리를 행하는 경우와, 전혈을 원심 분리한 후에 적혈구 또는 적혈구와 BC로부터 백혈구를 제거하는 경우를 포함한다.
전혈로부터 백혈구를 제거한 후에 원심 분리를 행하는 경우, 백혈구 제거 전혈을 원심 분리함으로써 백혈구 제거 적혈구 제제를 얻는다.
백혈구 제거 전에 전혈을 원심 분리하는 경우, 원심 분리 조건은 적혈구, PRP로 분리되는 약원심 분리 조건과, 적혈구, BC, PPP로 분리되는 강원심 분리 조건 2종이 있다. 필요에 따라 전혈로부터 분리된 적혈구, 또는 BC를 포함한 적혈구에 SAGM, AS-1, AS-3, AS-5, MAP 등의 보존액을 첨가한 후, 백혈구 제거 필터를 이용하여 적혈구로부터 백혈구를 제거함으로써 백혈구 제거 적혈구 제제를 얻는다.
백혈구 제거 적혈구 제제의 제조에 있어서, 바람직하게는 실온하 또는 냉장하에서 보존된 전혈을 채혈 후 72 시간 이내, 더욱 바람직하게는 48 시간 이내, 특히 바람직하게는 24 시간 이내, 가장 바람직하게는 12 시간 이내에 원심 분리한다. 또한, 보존 전 백혈구를 제거하는 경우, 바람직하게는 실온하 또는 냉장하에서 보존된 적혈구 제제로부터 채혈 후 120 시간 이내, 더욱 바람직하게는 72 시간 이내, 특히 바람직하게는 24 시간 이내, 가장 바람직하게는 12 시간 이내에 실온하 또는 냉장하에서 백혈구 제거 필터를 이용하여 백혈구를 제거함으로써 백혈구 제거 적혈구 제제를 얻는다. 보존 후 백혈구를 제거하는 경우, 바람직하게는 실온하, 냉장하 또는 냉동하에서 보존된 적혈구 제제로부터 사용 전 24 시간 이내에 백혈구 제거 필터를 이용하여 백혈구를 제거함으로써 백혈구 제거 적혈구 제제를 얻는다.
(백혈구 제거 혈소판 제제의 제조)
채혈된 전혈에 CPD, CPDA-1, CP2D, ACD-A, ACD-B, 헤파린 등의 보존액, 항응고제를 첨가한다.
각 혈액 성분의 분리 방법은 전혈로부터 백혈구를 제거한 후에 원심 분리를 행하는 경우와, 전혈을 원심 분리한 후에 PRP 또는 혈소판으로부터 백혈구를 제거하는 경우를 포함한다.
전혈로부터 백혈구를 제거한 후에 원심 분리를 행하는 경우, 백혈구 제거 전혈을 원심 분리함으로써 백혈구 제거 혈소판 제제를 얻는다.
백혈구 제거 전에 전혈을 원심 분리하는 경우, 원심 분리 조건은 적혈구, PRP로 분리되는 약원심 분리 조건과, 적혈구, BC, PPP로 분리되는 강원심 분리 조건 2종이 있다. 약원심 분리 조건의 경우, 전혈로부터 분리된 PRP로부터 백혈구 제거 필터로 백혈구를 제거한 후에 원심 분리에 의해 백혈구 제거 혈소판 제제를 얻거나, 또는 PRP를 원심 분리하여 혈소판과 PPP를 얻은 후에 백혈구 제거 필터로 백혈구를 제거하여 백혈구 제거 혈소판 제제를 얻는다. 강원심 분리 조건의 경우, 전혈로부터 분리된 BC 1 단위 또는 수 내지 수십 단위에 필요에 따라 보존액, 혈장 등을 첨가하여 원심 분리함으로써 혈소판을 얻고, 얻어진 혈소판으로부터 백혈구 제거 필터로 백혈구를 제거함으로써 백혈구 제거 혈소판 제제로 한다.
백혈구 제거 혈소판 제제의 제조에 있어서, 바람직하게는 실온하에서 보존된 전혈을 채혈한 후 24 시간 이내, 더욱 바람직하게는 12 시간 이내, 특히 바람직하게는 8 시간 이내에 원심 분리한다. 또한, 보존 전 백혈구를 제거하는 경우, 바람직하게는 실온하에서 보존된 혈소판 제제로부터 채혈 후 120 시간 이내, 더욱 바람직하게는 72 시간 이내, 특히 바람직하게는 24 시간 이내, 가장 바람직하게는 12 시간 이내에 실온하에서 백혈구 제거 필터를 이용하여 백혈구를 제거함으로써 백혈구 제거 혈소판 제제를 얻는다. 보존 후 백혈구를 제거하는 경우, 바람직하게는 실온하, 냉장하 또는 냉동하에서 보존된 혈소판 제제로부터 사용 전 24 시간 이내에 백혈구 제거 필터를 이용하여 백혈구를 제거함으로써 백혈구 제거 혈소판 제제를 얻는다.
(백혈구 제거 혈장 제제의 제조)
채혈된 전혈에 CPD, CPDA-1, CP2D, ACD-A, ACD-B, 헤파린 등의 보존액, 항응고제를 첨가한다.
각 혈액 성분의 분리 방법은 전혈로부터 백혈구를 제거한 후에 원심 분리를 행하는 경우와, 전혈을 원심 분리한 후에 PPP 또는 PRP로부터 백혈구를 제거하는 경우를 포함한다.
전혈을 백혈구 제거한 후에 원심 분리하는 경우, 백혈구 제거 전혈을 원심 분리함으로써 백혈구 제거 혈장 제제를 얻는다.
백혈구 제거 전에 전혈을 원심 분리하는 경우, 원심 분리 조건은 적혈구, PRP로 분리되는 약원심 분리 조건과, 적혈구, BC, PPP로 분리되는 강원심 분리 조건 2종이 있다. 약원심 분리 조건의 경우, PRP로부터 백혈구 제거 필터로 백혈구를 제거한 후에 원심 분리에 의해 백혈구 제거 혈장 제제를 얻거나, 또는 PRP로부터 PPP와 혈소판으로 원심 분리한 후에 백혈구 제거 필터로 백혈구를 제거함으로써 백혈구 제거 혈장 제제를 얻는다. 강원심 분리 조건의 경우, PPP로부터 백혈구 제거 필터로 백혈구를 제거함으로써 백혈구 제거 혈장 제제를 얻는다.
백혈구 제거 혈장 제제의 제조에 있어서, 바람직하게는 실온하 또는 냉장하에서 보존된 전혈을 채혈 후 72 시간 이내, 더욱 바람직하게는 48 시간 이내, 특히 바람직하게는 24 시간 이내, 가장 바람직하게는 12 시간 이내에 원심 분리한다. 또한, 바람직하게는 실온하 또는 냉장하에서 보존된 혈장 제제로부터 채혈 후 120 시간 이내, 더욱 바람직하게는 72 시간 이내, 특히 바람직하게는 24 시간 이내, 가장 바람직하게는 12 시간 이내에 실온하 또는 냉장하에서 백혈구 제거 필터를 이용하여 백혈구를 제거함으로써 백혈구 제거 혈장 제제를 얻는다. 보존 후 백혈구를 제거하는 경우, 바람직하게는 실온하 또는 냉장하 또는 냉동하에서 보존된 혈장 제제로부터 사용 전 24 시간 이내에 백혈구 제거 필터를 이용하여 백혈구를 제거함으로써 백혈구 제거 혈장 제제를 얻는다.
채혈로부터 백혈구 제거 혈액 제제를 제조하기까지의 형태로서, 전혈용 용기에 접속된 채혈침으로 채혈하고, 전혈 또는 원심 분리 후의 혈액 성분이 포함된 용기와 백혈구 제거 필터를 접속시켜 백혈구 제거를 행하는 형태, 또는 적어도 채혈침과 혈액 용기, 백혈구 제거 필터가 무균 상태로 접속된 회로에서 채혈하여 원심 분리 전 또는 원심 분리 후에 백혈구 제거를 행하는 형태, 또는 자동 채혈 장치에 의해 얻어진 혈액 성분이 포함된 용기에 백혈구 제거 필터를 접속시키거나 또는 미리 접속시킨 백혈구 제거 필터에 의해 백혈구 제거를 행하는 형태 등 어떠한 형태로 행해져도 좋지만, 본 발명이 이들 형태로 한정되는 것은 아니다. 또한, 자동 성분 채혈 장치로 전혈을 각 성분으로 원심 분리하고, 필요에 따라 보존액을 첨가한 후에 바로 백혈구 제거 필터를 이용하여 적혈구, BC를 포함한 적혈구, BC, 혈소판, PRP, PPP 중 어느 하나로부터 백혈구를 제거함으로써 백혈구 제거 적혈구 제제, 또는 백혈구 제거 혈소판 제제 또는 백혈구 제거 혈장 제제를 얻을 수도 있다.
본 발명은 상기 어느 혈액에서도 백혈구 제거 성능이 보다 높고, 블록킹을 일으키지 않으며 처리 시간을 단축시키는 효과를 나타내지만, 특히 혈액의 처리 시간이 연장되기 쉬운 적혈구 처리에 바람직하다.
이들 혈액 제제의 제조에 있어서, 백혈구 제거는 백혈구 제거 필터보다 높은 위치에 설치된 백혈구 함유액이 포함된 용기로부터, 낙차에 의해 백혈구 함유 혈액이 튜브를 경유하여 백혈구 제거 필터로 흐르게 함으로써 행해질 수도 있고, 펌프 등의 수단을 이용하여 백혈구 함유 혈액을 백혈구 제거 필터의 입구측으로부터 가압하고(하거나) 백혈구 제거 필터의 출구측으로부터 감압하여 흐르게 함으로써 행할 수도 있다.
이하, 체외 순환 요법에서의 백혈구 제거 필터를 이용한 백혈구 제거 방법에 대하여 기재한다.
생리 식염수 등으로 백혈구 제거 필터 내를 프라이밍시킨 후, 적어도 헤파 린, 메실산 나파모스타트, ACD-A, ACD-B 등의 항응고제를 포함하는 용액으로 대체시킨다. 체외로 유도된 혈액에 항응고제를 첨가하면서, 사람에게 접속된 회로로부터 백혈구 제거 필터의 입구로 혈액을 유량 10 내지 200 mL/분으로 유입시켜 백혈구 제거 필터로 백혈구를 제거한다. 백혈구 제거 개시기(처리량 0 내지 0.5 L)에는 10 내지 50 mL/분의 유량이 바람직하며, 20 내지 40 mL/분이 더욱 바람직하다. 백혈구 제거 개시기 이후(처리량 0.2 내지 12 L)에는 유량 30 내지 120 mL/분으로 처리하는 것이 바람직하고, 유량 40 내지 100 mL/분이 더욱 바람직하며, 유량 40 내지 60 mL/분이 특히 바람직하다. 백혈구 제거 후, 생리 식염수 등으로 백혈구 제거 필터 내를 대체시켜 반혈하면, 백혈구 제거 필터 내의 혈액이 쓸모없게 되지 않기 때문에 바람직하다.
이하, 본 발명을 실시예에 기초하여 설명하지만, 본 발명이 이들로 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1>
폴리에틸렌테레프탈레이트(이하, PET라고 함)를 포함하고, 기본 중량이 40 g/m2, 두께가 0.23 mm, 충전율이 0.14, 평균 섬유 직경이 1.3 ㎛, 편성 지수가 38.0인 부직포를 백혈구 제거 필터재로서 사용하였다. 편성 지수는 상기의 방법으로 측정하였다.
이어서, 백혈구 제거 성능을 평가하는 시험 방법을 기술한다. 혈액 평가에 사용하는 혈액은 전혈이며, 채혈 직후의 혈액 100 mL에 항응고제인 CPD 용액을 14 mL 첨가 혼화해서 2 시간 정치한 것이다(이하, 여과 전 혈액이라고 함). 부직포 8장을 유효 여과 면적이 1.3 cm2인 칼럼에 충전하고, 여과 전 혈액으로 충전된 실린지와 칼럼의 입구를 내경이 3 mm이며 외경이 4.2 mm인 염화비닐제 튜브를 통해 접속시킨 후, 실린지 펌프를 이용하여 혈액이 유속 1.2 mL/분으로 칼럼 내에 흐르게 하여 이 중 3 mL를 회수하였다(이하, 여과 후 혈액이라고 함). 백혈구 제거 성능은 백혈구 잔존율을 구함으로써 평가하였다. 백혈구 잔존율은 유세포 분석법[장치: 벡톤 디킨슨(BECTON DlCKINSON)사 제조 FACSCalibur]를 이용하여 백혈구수를 측정하고, 하기 수학식 3에 따라 계산하였다.
백혈구 잔존율=[백혈구 농도(개/μL)(여과 후 혈액)]÷[백혈구 농도(개/μL)(여과 전 혈액)]
또한, 백혈구수의 측정은 각 혈액 100 μL를 샘플링하고, 비드가 들어간 Leucocount 키트(닛본 벡톤ㆍ디킨슨사)를 사용하여 행하였다. 칼럼의 입구측에 접속된 튜브에 압력계를 접속시켜 혈액 여과 종료시에 칼럼 입구측에 걸리는 압력을 압력계로 측정하였다. 얻어진 값을 혈액 처리압으로 하였다.
그 결과, 백혈구 잔존율은 1.0×10-3, 혈액 처리압은 4.7 kPa이 되었다. 또한, 실시예 1 내지 실시예 4 및 비교예 1 내지 비교예 4의 혈액 평가 결과에 대해서 하기 표 1, 도 1, 도 2에 정리하여 기재하였다.
<실시예 2>
PET를 포함하고, 기본 중량이 40 g/m2, 두께가 0.23 mm, 충전율이 0.14, 평균 섬유 직경이 1.3 ㎛, 편성 지수가 40.9인 부직포를 백혈구 제거 필터재로서 사용하였다. 실시예 1과 동일한 방법으로 혈액 시험을 행한 결과, 백혈구 잔존율은 1.6×10-3, 혈액 처리압은 4.5 kPa이었다.
또한, 백혈구 잔존율이 10-4 이하가 되면 잔존 백혈구수가 측정 한계 부근이 되기 때문에, 상기한 실시예에서는 백혈구 잔존율이 10-4 이상이 되는 조건에서 필터를 제조하여 시험한 결과를 나타내었다. 실제로는 백혈구 제거 처리를 행하는 혈액 제제량에 적합한 필터를 설계함으로써, 중증 부작용을 방지하기 위해 필요한 백혈구 잔존율 10-4 내지 10-6 이하의 필터를 얻을 수 있다.
<실시예 3>
PET를 포함하고, 기본 중량이 40 g/m2, 두께가 0.23 mm, 충전율이 0.14, 평균 섬유 직경이 1.3 ㎛, 편성 지수가 47.5인 부직포를 백혈구 제거 필터재로서 사용하였다. 실시예 1과 동일한 방법으로 혈액 시험을 행한 결과, 백혈구 잔존율은 4.0×10-3, 혈액 처리압은 3.8 kPa이었다.
<실시예 4>
PET를 포함하고, 기본 중량이 40 g/m2, 두께가 0.22 mm, 충전율이 0.14, 평 균 섬유 직경이 1.6 ㎛, 편성 지수가 48.5인 부직포를 백혈구 제거 필터재로서 사용하였다. 실시예 1과 동일한 방법으로 혈액 시험을 행한 결과, 백혈구 잔존율은 7.2×10-3, 혈액 처리압은 4.2 kPa이었다.
<비교예 1>
PET를 포함하고, 기본 중량이 40 g/m2, 두께가 0.24 mm, 충전율이 0.14, 평균 섬유 직경이 1.2 ㎛, 편성 지수가 55.5인 부직포를 백혈구 제거 필터재로서 사용하였다. 실시예 1과 동일한 방법으로 혈액 시험을 행한 결과, 백혈구 잔존율은 3.2×10-3, 혈액 처리압은 4.0 kPa이었다.
<비교예 2>
PET를 포함하고, 기본 중량이 39 g/m2, 두께가 0.24 mm, 충전율이 0.13, 평균 섬유 직경이 1.3 ㎛, 편성 지수가 61.3인 부직포를 백혈구 제거 필터재로서 사용하였다. 실시예 1과 동일한 방법으로 혈액 시험을 행한 결과, 백혈구 잔존율은 28.5×10-3, 혈액 처리압은 2.9 kPa이었다.
<비교예 3>
PET를 포함하고, 기본 중량이 39 g/m2, 두께가 0.24 mm, 충전율이 0.13, 평균 섬유 직경이 1.3 ㎛, 편성 지수가 65.0인 부직포를 백혈구 제거 필터재로서 사용하였다. 실시예 1과 동일한 방법으로 혈액 시험을 행한 결과, 백혈구 잔존율은 48.4×10-3, 혈액 처리압은 3.3 kPa이었다.
<비교예 4>
PET를 포함하고, 기본 중량이 40 g/m2, 두께가 0.23 mm, 충전율이 0.13, 평균 섬유 직경이 0.9 ㎛, 편성 지수가 62.6인 부직포를 백혈구 제거 필터재로서 사용하였다. 실시예 1과 동일한 방법으로 혈액 시험을 행한 결과, 백혈구 잔존율은 2.1×10-3, 혈액 처리압은 6.3 kPa이었다.
실시예 1 내지 4와 비교예 1 내지 4의 결과로부터, 부직포의 편성 지수를 낮춤으로써 혈액 처리압이 대폭적으로 상승하지 않고, 높은 백혈구 제거 성능을 얻을 수 있다는 것을 알았다. 또한, 이들의 결과로부터 편성 지수가 높은 부직포의 섬유 직경을 가늘게 하면 백혈구 제거 성능은 높아지지만, 혈액 처리압도 크게 상승해 버리기 때문에 백혈구 제거 필터의 부직포로서는 적합하지 않다는 것도 알았다.
<실시예 5>
(1) 혈액 입구가 부착된 염화비닐 수지제 시트로 이루어지는 입구측 가요성 용기, (2) 기본 중량이 30 g/m2, 두께가 0.19 mm, 평균 섬유 직경이 12 ㎛인 PET 부직포 4장, (3) 기본 중량이 40 g/m2, 두께가 0.23 mm, 충전율이 0.14, 평균 섬유 직경이 1.3 ㎛, 편성 지수가 38.0인 PET 부직포 25장, (4) 기본 중량이 30 g/m2, 두께가 0.19 mm, 평균 섬유 직경이 12 ㎛인 PET 부직포 4장, (5) 혈액 출구가 부착된 염화비닐 수지제 시트로 이루어지는 출구측 가요성 용기를 이 순서대로 배치하고, (2) 내지 (4)의 필터재를 입구측 가요성 용기 (1)과 출구측 가요성 용기 (5) 사이에 끼운 상태로 그 주연부 근방이 전체 둘레에 걸쳐 가요성 용기와 일체화되도록 용착시켜, 여과부 치수가 7.5 cm×5.8 cm인 혈액 처리 필터를 제조하였다.
혈액 처리 필터의 유동성 시험 방법을 이하에 설명한다. 본 발명의 혈액 처리 필터를 저류 백(bag)과 회수 백 사이에 배치하고, 저류 백에 접속된 입구측 도관을 혈액 처리 필터의 혈액 입구로, 회수 백에 접속된 출구측 도관을 혈액 처리 필터의 혈액 출구로 각각 접속시켰다. 또한, 각각의 도관으로서 내경이 3 mm이며 외경이 4.2 mm인 염화비닐제 튜브를 사용하고, 길이는 50 cm로 하였다. 입구측 도관을 클램프로 폐쇄한 후, 소의 혈액 300 g을 저류 백에 넣었다. 소의 혈액은 이하의 방법으로 제조한 소 적혈구 농후액을 사용하였다.
소로부터 채혈한 후, 항응고제로서 CPD 123 mL를 CPD/1 L(소 혈액)의 비율로 첨가하여 20 ℃에서 하룻밤 보관하였다. 가제 등으로 이물질이나 응집물을 제거한 후, 원심 분리에 의해 전혈을 적혈구, BC, 혈장으로 분리한다. 원심 분리된 전혈로부터 혈장만을 제거하고, 적혈구 보존액으로서의 SAGM을 헤마토크릿(hematocrit)값이 60 ％가 되도록 첨가하여 소 적혈구 농후액을 제조하였다.
시스템 전체를 매달고 회수 백을 천칭 위에서 정치시킨 후, 입구측 도관을 폐쇄하고 있는 클램프를 개방하여 여과를 시작하였다. 소 적혈구 농후액이 회수 백에 도달하고 나서 저류 백의 소 적혈구 농후액이 없어질 때까지의 시간을 처리 시간으로 하였다. 저류 백을 비운 후, 1 분마다 회수 백을 얹은 천칭값을 읽어 1 분 동안의 천칭값 변동이 0.1 g 이하가 된 시점에서 회수를 종료하고, 회수 종료시 의 천칭값을 회수량으로 하였다. 또한, 혈액 회수율을 이하의 식으로부터 구하였다.
혈액 회수율(％)=100(％)×회수량(g)/300(g)
또한, 실시예 5 내지 실시예 8 및 비교예 5 내지 비교예 8의 혈액 평가 결과에 대해서 하기 표 2, 도 3에 정리하여 기재하였다.
<실시예 6>
(3)으로서 기본 중량이 40 g/m2, 두께가 0.23 mm, 충전율이 0.14, 평균 섬유 직경이 1.3 ㎛, 편성 지수가 40.9인 PET 부직포 25장을 사용한 것 이외에는, 실시예 5와 동일한 필터 구성, 평가 방법에 의해 프라이밍 시간, 처리 시간, 회수 시간, 혈액 회수율을 구하였다.
<실시예 7>
(3)으로서 기본 중량이 40 g/m2, 두께가 0.23 mm, 충전율이 0.14, 평균 섬유 직경이 1.3 ㎛, 편성 지수가 47.5인 PET 부직포 25장을 사용한 것 이외에는, 실시예 5와 동일한 필터 구성, 평가 방법에 의해 프라이밍 시간, 처리 시간, 회수 시간, 혈액 회수율을 구하였다.
<실시예 8>
(3)으로서 기본 중량이 40 g/m2, 두께가 0.22 mm, 충전율이 0.14, 평균 섬유 직경이 1.6 ㎛, 편성 지수가 48.5인 PET 부직포 25장을 사용한 것 이외에는, 실시예 5와 동일한 필터 구성, 평가 방법에 의해 프라이밍 시간, 처리 시간, 회수 시 간, 혈액 회수율을 구하였다.
<비교예 5>
(3)으로서 기본 중량이 40 g/m2, 두께가 0.24 mm, 충전율이 0.14, 평균 섬유 직경이 1.2 ㎛, 편성 지수가 55.5인 PET 부직포 25장을 사용한 것 이외에는, 실시예 5와 동일한 필터 구성, 평가 방법에 의해 프라이밍 시간, 처리 시간, 회수 시간, 혈액 회수율을 구하였다.
<비교예 6>
(3)으로서 기본 중량이 39 g/m2, 두께가 0.24 mm, 충전율이 0.13, 평균 섬유 직경이 1.3 ㎛, 편성 지수가 61.3인 PET 부직포 25장을 사용한 것 이외에는, 실시예 5와 동일한 필터 구성, 평가 방법에 의해 프라이밍 시간, 처리 시간, 회수 시간, 혈액 회수율을 구하였다.
<비교예 7>
(3)으로서 기본 중량이 39 g/m2, 두께가 0.24 mm, 충전율이 0.13, 평균 섬유 직경이 1.3 ㎛, 편성 지수가 65.0인 PET 부직포 25장을 사용한 것 이외에는, 실시예 5와 동일한 필터 구성, 평가 방법에 의해 프라이밍 시간, 처리 시간, 회수 시간, 혈액 회수율을 구하였다.
<비교예 8>
(3)으로서 기본 중량이 40 g/m2, 두께가 0.23 mm, 충전율이 0.13, 평균 섬유 직경이 0.9 ㎛, 편성 지수가 62.6인 PET 부직포 25장을 사용한 것 이외에는, 실시예 5와 동일한 필터 구성, 평가 방법에 의해 프라이밍 시간, 처리 시간, 회수 시간, 혈액 회수율을 구하였다.
실시예 5 내지 실시예 8 및 비교예 5 내지 비교예 8의 결과로부터, 편성 지수가 낮은 부직포로 구성된 백혈구 제거 필터는, 동등한 혈액 회수율을 유지하면서 처리 시간을 단축시킨다는 것을 알 수 있었다. 또한, 편성 지수가 높고 섬유 직경이 가는 부직포로 구성된 백혈구 제거 필터에서는 처리 시간이 연장되었다.
Figure 112005029157014-pct00001
Figure 112005029157014-pct00002
본 발명의 백혈구 제거 방법에서 두께 방향, 즉 액체의 유동 방향의 특정한 구조가 여과면 전역에 걸쳐 균일화된 백혈구 제거 필터를 사용함으로써, 종래의 방법과 비교하여 백혈구 제거 성능이 증가되고, 블록킹이 없어 처리 시간을 단축할 수 있다. 본 발명의 혈액에 혼입되어 있는 백혈구를 포착하기 위한 백혈구 제거 방법 및 백혈구 제거 필터를 사용하는 것은 매우 유효하다.

Claims (38)

  1. 평균 섬유 직경이 0.3 내지 3.0 ㎛인 부직포를 포함하는 백혈구 제거 필터에 백혈구 함유액을 통과시켜 백혈구 함유액으로부터 백혈구를 제거함으로써 백혈구가 제거된 액체를 얻는 방법에 있어서, 두께 0.3 mm 상당의 편성 지수(formation index) y가 50 이하인 부직포를 사용하는 것을 특징으로 하는 체외 순환 요법을 제외한 백혈구 제거 방법.
  2. 제1항에 있어서, 충전율이 0.05 내지 0.30인 부직포를 사용하는 백혈구 제거 방법.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 두께 0.3 mm 상당의 편성 지수 y가 50 이하이고, y가
    y<-4×부직포의 평균 섬유 직경(㎛)+55
    의 식을 충족하는 부직포를 사용하는 백혈구 제거 방법.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 용융 분사법에 의해 얻어진 부직포를 사용하는 백혈구 제거 방법.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 부직포의 상류측에 응집물 제거를 위한 필터를 포함하고(포함하거나), 하류측에 후-필터(post-filter)를 포함하는 백혈구 제거 필터를 사용하는 것을 특징으로 하는 백혈구 제거 방법.
  6. 제1항 또는 제2항에 있어서, 백혈구 제거 필터가 액체의 입구와 출구를 갖는 편평상의 필터인 백혈구 제거 방법.
  7. 제1항 또는 제2항에 있어서, 백혈구 제거 필터가 액체의 입구와 출구를 갖는 원통상의 필터인 백혈구 제거 방법.
  8. 제6항에 있어서, 백혈구 제거 필터의 용기가 가요성 수지로 형성되는 것을 특징으로 하는 백혈구 제거 방법.
  9. 제1항 또는 제2항에 있어서, 전혈, 적혈구 농후액, 혈소판 농후액, 다혈소판 혈장, 핍혈소판 혈장 중 어느 하나로부터 선택되는 백혈구 함유액을 백혈구 제거 필터에 통과시키는 백혈구 제거 방법.
  10. 제1항 또는 제2항에 있어서, 낙차에 의해 백혈구 제거 필터에 백혈구 함유액을 통과시키는 백혈구 제거 방법.
  11. 제1항 또는 제2항에 있어서, 백혈구 제거 필터의 입구측을 가압하고(가압하거나), 출구측을 감압함으로써 백혈구 제거 필터에 백혈구 함유액을 통과시키는 백혈구 제거 방법.
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  25. 평균 섬유 직경이 0.3 내지 3.0 ㎛인 부직포를 포함하는 백혈구 제거 필터에 있어서, 두께 0.3 mm 상당의 편성 지수 y가 50 이하인 부직포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 백혈구 함유액으로부터 백혈구를 제거하는 백혈구 제거 방법을 위한 백혈구 제거 필터.
  26. 제25항에 있어서, 충전율이 0.05 내지 0.30인 부직포를 사용하는 백혈구 제거 필터.
  27. 제25항 또는 제26항에 있어서, 두께 0.3 mm 상당의 편성 지수 y가 50 이하이고, y가
    y<-4×부직포의 평균 섬유 직경(㎛)+55
    의 식을 충족하는 부직포를 사용하는 백혈구 제거 필터.
  28. 제25항 또는 제26항에 있어서, 용융 분사법에 의해 얻어진 부직포를 사용하는 백혈구 제거 필터.
  29. 제25항 또는 제26항에 있어서, 부직포의 상류측에 응집물 제거를 위한 필터 및(또는) 하류측에 후-필터를 포함하는 백혈구 제거 필터.
  30. 제25항 또는 제26항에 있어서, 액체의 입구와 출구를 갖는 편평상 필터인 백혈구 제거 필터.
  31. 제25항 또는 제26항에 있어서, 액체의 입구와 출구를 갖는 원통상 필터인 백혈구 제거 필터.
  32. 제30항에 있어서, 필터 용기가 가요성 수지로 형성되는 것을 특징으로 하는 백혈구 제거 필터.
  33. 제25항 또는 제26항에 있어서, 전혈, 적혈구 농후액, 혈소판 농후액, 다혈소판 혈장, 핍혈소판 혈장 중 어느 하나로부터 선택되는 백혈구 함유액으로부터 백혈구를 제거하기 위해 사용하는 백혈구 제거 필터.
  34. 제25항 또는 제26항에 기재된 백혈구 제거 필터를 적어도 갖는 혈액의 체외 순환 장치.
  35. 제25항 또는 제26항에 기재된 백혈구 제거 필터, 환자의 체내로부터 취출한 전혈을 상기 백혈구 제거 필터에 도입하기 위한 입구, 및 백혈구가 제거된 전혈을 다시 환자의 체내로 되돌리기 위한 출구를 적어도 갖는 혈액의 체외 순환 장치.
  36. 제1항에 있어서, 용융 분사법에 의해 얻어지고, 충전율이 0.05 내지 0.30이고, 두께 0.3 mm 상당의 편성 지수 y가 50 이하이며, y가
    y<-4×부직포의 평균 섬유 직경(㎛)+55
    의 식을 충족하는 부직포를 사용하는 백혈구 제거 방법.
  37. 제1항에 있어서, 낙차를 이용하거나, 또는 백혈구 제거 필터의 입구측은 가압하고(가압하거나) 출구측은 감압함으로써 백혈구 제거 필터에 백혈구 함유액을 통과시키는 것을 포함하며, 용융 분사법에 의해 얻어지고, 충전율이 0.05 내지 0.30이고, 두께 0.3 mm 상당의 편성 지수 y가 50 이하이며, y가
    y<-4×부직포의 평균 섬유 직경(㎛)+55
    의 식을 충족하는 부직포를 사용하는 백혈구 제거 방법.
  38. 제25항에 있어서, 용융 분사법에 의해 얻어지고, 충전율이 0.05 내지 0.30이고, 두께 0.3 mm 상당의 편성 지수 y가 50 이하이며, y가
    y<-4×부직포의 평균 섬유 직경(㎛)+55
    의 식을 충족하는 부직포를 사용하는 백혈구 제거 필터.
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