KR100889606B1

KR100889606B1 - 항염증 화장료 조성물

Info

Publication number: KR100889606B1
Application number: KR1020070066233A
Authority: KR
Inventors: 김호정; 김형만; 김진준; 박선규; 최재환
Original assignee: 주식회사 엘지생활건강
Priority date: 2007-07-02
Filing date: 2007-07-02
Publication date: 2009-03-20
Also published as: KR20090002682A

Abstract

본 발명은 항염증 화장료 조성물에 관한 것으로서, 특히 천궁, 금은화, 지황, 형개 및 황기로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재의 버섯균 발효물을 효모, 유산균 또는 비피더스균으로 발효시켜 추출한 발효추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 항염증 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명에 따른 항염증 화장료 조성물은 피부 트러블 완화 효과인 항염효과가 뛰어나면서 피부에 안전하다.

화장료, 발효 추출물, 항염, 피부트러블, 버섯균, 천궁, 금은화, 지황, 형개, 황기

Description

항염증 화장료 조성물{Cosmetic composition for preventing of kin trouble}

본 발명은 항염증 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 피부 트러블 완화 효과인 항염효과가 뛰어나면서 피부에 안전한 항염증 화장료 조성물에 관한 것이다.

화장품은 피부를 보호하고 피부의 미화 및 청결을 위해 사용되는 제품이지만, 그 조성으로는 피부 보호 목적과는 상이한 성분들이 제품 형성을 위해 불가피하게 포함된다. 이러한 성분들로는 계면활성제, 방부제, 향료, 자외선 차단제, 색소뿐 아니라, 그 밖의 효능 및 효과를 부여하기 위한 여러 가지 성분들이 여기에 포함된다. 이들 성분은 일반적으로 피부에 염증이나 뾰루지, 부종 등 각종 트러블을 발생시키는 것으로 알려져 있다(Maibach. H. I., Contact Dermatitis, 6. 369-404, 1980). 또한, 체내로부터 배출되는 피지 및 땀, 화장품 성분 중의 지방산, 고급 알코올, 단백질 성분 등이 피부상에 존재하는 피부 상재균에 의해 독성이 강한 물질로 분해되어 이들에 의해 피부 염증이 유발될 수도 있으며, 태양으로부터 나오는 자외선에 의해서도 피부 염증이 유발된다는 것은 잘 알려진 사실이다.

염증 반응은 붉어짐(feeling of redness), 따끔거림(pricking feeling), 화끈거림(burning hotness), 팽윤(swelling), 조직의 변화와 같은 5가지 현상으로 나타나는데, 이는 해로운 주위 환경, 즉 세균과 같은 외부 물질의 침입과 기계적 손상으로부터 생체를 보호하려는 생리적인 반응이다. 이러한 염증현상은 여러 종류의 다핵형 백혈구(PMNs)와 면역 물질의 많은 증가를 초래하며, 이처럼 증가된 세포들은 염증성 세포 산물인 다양한 종류의 단백질 분해 효소와 사이토카인 등을 분비함으로써 치료 및 방어를 할 수 있게 해준다. 그러나, 이러한 작용은 인접해 있는 조직 세포와 비세포 성분들에 해로운 손상을 일으키기도 한다. 따라서, 적절한 조건 하에서는 염증 초기 상태가 지난 후 정상 기능을 되찾게 되지만, 염증을 자극하는 자극제가 없어지지 않거나 계속해서 만들어질 경우에는 결과적으로 만성 염증이 일어나게 되어 더욱더 심각한 조직의 손상을 가져온다.

염증에 관계되어진 피부 트러블의 형태인 아토피와 여드름에 대해서 설명하면 다음과 같다.

아토피는 심한 가려움증이 가증 특징적인데 피부에 자극을 하면 가려움증이 더욱 심해지고, 자꾸 더 긁다보면 상처가 나게 되고, 이로 인해 세균감염(황색포도상구균, 연쇄상구균 등)이 일어나게 되어 염증이 일어나게 된다. 아토피의 문제 중에 중요한 인자의 하나는 이때 일어나는 2차 감염 및 초항원 독소이다. 아토피 환자의 80∼90 %는 피부에 황색포도상구균(Staphilococcus Aureus)과 연쇄상구균(Streptococcus Pyogenes)의 감염이 있는데, 이때 Anit-Staphilococcus IgE가 만들어지며, 이에 의해 T-cell 반응을 자극하는 초항원 독소에 의해 유발되고 악화시 키기도 한다. 황색포도상구균의 초항원 독소는 랑게르한스 세포내 항원제시세포를 통하여 T 임파구를 선택적으로 자극하여 인터루킨-1과 TNF-alpha를 생산하게 하고, 이들에 의해 자극된 T-cell에서 여러 가지 세포내 사이토카인이라는 독소를 분비하여 염증을 일으키게 된다. 즉, 초항원 독소는 인터루킨-4와 인터루킨-5의 분비를 촉진하여 IFN-r의 분비는 저해하고, CLA의 수를 증가시켜 결국 IgE의 생성을 촉진시킨다.

두 번째로는 황색포도상구균에 감염된 환자들이 포도상구균 독소에 대한 IgE 항체에 의하여 호염구에서 히스타민이라는 물질을 분비하게 하고, 이로 인해 아토피 피부염이 악화된다.

따라서, 피부건조를 막기 위해 보습제의 사용이 자주 권장되는 것이고, 2차 감염 및 이로 인한 초항원 인자의 조절이 매우 중요한 것이다. 즉, 아토피는 유전적 결함을 기본적인 병인으로 보지만, 여러 가지 외부적인 후천적 요소들에 의해 유발을 촉진하게 되는 것이다.

아토피의 유발 악화인자로는 유전적 요인, 민감하고 건조한 피부, 대사적 요인, IgE의 과도한 생성, 자율신경계의 조절이상, 심리적인 요인, 자극적인 요인 등이 있다.

이렇듯 아토피는 결코 그 기전이 단순하지 않은 질환이다. 면역학적 관점에서도 하나의 면역학적 문제가 아닌 다양한 패턴의 문제점을 가지고 있는 것이다. 한 예로, IgE의 과도한 생성을 억제하는 감마인터페론의 문제도 그 생성이 평균치보다 떨어져서 생기기도 하지만, 반대작용을 하는 인터루킨-4보다 작어서 생기기도 하고, 생성과정이 문제가 있어서 불완전한 인터페론의 생성으로 생기기도 하고, 양이나 질적인 면에서 정상이라 하더라도 인터페론의 자극에 민감도가 떨어져 생기는 경우도 발생한다.

한편, 여드름은 증상에 따라 크게 염증성 여드름 병변과 비염증성(면포성) 여드름 병변으로 나눌 수 있다.

염증성 여드름 병변은 면포에서부터 피지 물질이 빠져나와 주위 피부 조직에 염증 반응을 일으킨 것으로 염증으로 인해 붉은 색을 띄게 된다. 여드름 부의를 짜거나 누르거나 하게 되면 면포가 터져 염증성 여드름 병변으로 변하기 쉽고, 이 경우 여드름 흉터를 남길 위험이 커진다.

기본적으로 염증성 여드름 병변에는 구진(papule), 농포(pustule), 결절(nodule)의 세가지가 있다.

구진성 여드름(뻘건 여드름)은 다음과 같다. 의학용어로 작게 튀어나온 것을 구진이라고 하는데, 구진은 작고 딱딱한 붉은색의 병변으로 때때로 비염증성 여드름 병변과 여드름 병변의 중간 형태로 나타날 수 있고, 경미한 염증을 동반하므로 색조는 붉게 보이나 안에 농은 잡히지 않은 상태이다. 그래서 벌겋게 튀어나온 여드름을 구진성 여드름이라고 부른다. 이것은 앞서 말한 것처럼 염증이 생긴 여드름으로 염증의 정도에 따라 크기나 단단한 정도, 그리고 벌건 정도가 다르게 된다. 염증이 심할수록 더 크고 더 벌겋게 보이고 더 오래가는 경향이 있다. 염증이 덜 심한 것들은 아주 일부에서(약 7%) 그냥 사그러들기도 하지만 대부분은 점차 더 염증이 심해지거나 고름집 여드름이 되기도 한다.

농포성 여드름(고름집 여드름)은 다음과 같다. 고름집(농포)이라고 하는 것은 치열한 전투가 벌어진 후의 전장과 같다. 즉, 약간의 균, 죽은 조직과 함께 균을 없애는 백혈구들이 너무 많이 모여 있어 누런 고름으로 눈에 보이는 것이다. 농포는 구진과 비슷한 크기로 작고 둥그런 모양이지만, 안에 농을 포함하고 있는 것이 구진과 다른 점이다. 농 안에는 박테리아 등의 세균이 있는 것이 아니며 피지 내에 있는 유리지방산(free fatty acid) 등의 성분에 의한 화학적 자극에 의해 염증반응이 일어난 결과이다. 고름집 여드름들 중 작고 주위에 덜 단단한 것들은 크고 주위가 단단한 것들보다 빠르게 없어진다.

그 다음, 결절성 여드름(덩어리 여드름)은 여드름의 가장 심한 형태로 크기가 크고 염증이 심하면서 다량의 농을 포함하고 있다. 결절은 면포 내의 내용물이 밖으로 빠져 나와 주변의 피부 조직에 면역 반응을 유도함으로써 농을 형성하게 된다. 결절성 여드름은 상대적으로 피부 깊숙이 위치하며 통증을 동반할 수 있고, 다른 여드름 병변에 비해 치유 과정 중에 여드름 흉터를 남길 확률이 매우 높다.

이러한 다양한 염증 생성 과정의 핵심 물질은 자극에 의해 활성화된 포스포리파아제 A2(Phospholipase A2, PLA2)라는 효소에 의해 세포막 지질로부터 전환된 아라키돈산(Arachidonic acid)으로, 아라키돈산은 다시 싸이클로옥시게나아제(Cyclooxygenase, 이하 'COX'로 약칭) 또는 리폭시게나아제(Lipoxygenase)의 2가지 경로를 거쳐 염증 매개체인 프로스타글란딘류(Prostaglandins), 류코트리엔류(Leukotrienes)로 대사되어 다양한 염증 반응을 매개한다(Thomas, R., Rev. Physiol. Biochem. Pharmacol., 100, 1984).

최근, 피부 자극 및 염증의 생성을 줄일 수 있는 방법에 관한 연구가 활발히 진행되고 있으며, 지금까지의 연구 결과로는 신경세포에서 분비되는 물질 P(Substance P) 등의 신경 펩타이드나 자극에 의해 조직이나 혈장에서 활성화되는 브라디키닌과 같은 키닌(Kinins) 등에 의해 또는 COX 경로에 의해 형성된 다양한 사이토카인, 프로스타글란딘 E2(Prostaglandin E2, 이하 "PGE2'로 약칭) 등이 부종 형성과 혈관 확장에 관여하여 염증과 통증의 원인이 된다는 것이 알려져 있다. 이에 따라, 항염제로서는 물질 P를 비롯한 신경 펩타이드 길항제, 브라드키닌 길항제, COX 억제제 등이 제시되어 왔으나, 지금까지 알려진 항염제는 피부에 대한 안전성 면에서나, 제품에 포함시킬 때의 안정성 면에서 대부분 문제점을 안고 있어 그 사용이 제한되고 있다.

한편, 미생물이 가지고 있는 효소를 이용하여 유기물을 분해시키는 과정을 발효라고 한다. 발효와 부패는 비슷한 과정에 의해 진행되지만 분해 결과 우리의 생활에 유용하게 사용되는 물질이 만들어지면 발효라 하고, 악취가 나거나 유해한 물질이 만들어지면 부패라고 한다. 따라서, 한약재를 미생물을 이용하여 발효시키면 한약재의 독성이 감소되거나, 저분자화되어 소화가 용이하거나, 피부에 도포시 경피흡수 등이 용이하게 되어 생체 이용률이 향상된다.

또한 한약재들은 그 자체로도 약리 작용을 나타낼 수 있지만 발효를 통해 약리효과가 더욱 강화되거나 미생물의 대사에 의해 해로운 성분들이 만들어져 발효전의 한약재에 없던 새로운 약리작용을 발휘할 수 있다.

따라서 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 피부 트러블 완화 효과인 항염효과가 뛰어나면서 피부에 안전한 항염증 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

상기 기술적 과제를 달성하기 위하여, 본 발명은 천궁, 금은화, 지황, 형개 및 황기로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재의 버섯균 발효물을 효모, 유산균 또는 비피더스균으로 발효시켜 추출한 발효추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 항염증 화장료 조성물을 제공한다.

이하 본 발명의 항염증 화장료 조성물에 대하여 상세히 설명한다.

본 발명의 항염증 화장료 조성물은 천궁, 금은화, 지황, 형개 및 황기로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재의 버섯균 발효물을 효모, 유산균 또는 비피더스균으로 발효시켜 추출한 발효추출물을 유효성분으로 포함한다.

상기 천궁(Ligusticum officinale)은 미나리아과의 다년생 초본이다. 예로부터, 온성정혈약, 보혈약, 강장약, 진정약으로 빈혈증, 냉증, 월경불순, 부인병에 흔히 당귀와 함께 쓰였다. 뿌리 뿐 아니라 전초도 같은 치료 효과가 있다고 한다. 특히 진통효과가 세므로 두통에는 반드시 천궁을 넣는다. 풍한두통에는 형개, 차 조기, 풍온두통에는 국화와 같이 사용한다. 상기 금은화(Lonicera japonica Thunberg)는 인동이라고도 불리우며, 처음에 피는 꽃은 흰색이지만 차차 노랗게 변해서 붙여진 이름이다. 금은화는 생김새는 작은 막대나 깔때기 모양을 한 꽃봉오리와 흔히 입술모양의 꽃이 섞여 있는 것으로 바깥면은 황백색 또는 녹백색이고 오래 저장한 것일수록 색은 진하다. 특이한 냄새가 있고, 맛은 달고 성질은 차기 때문에 열을 내리고, 가슴이 답답하고 갈증이 있을 때 사용한다. 상기 지황(Rehmannia glutinosa)은 현삼과의 다년생 초본으로 높이 15∼20 ㎝에 이르며 가을에 캐서 흙을 털고 물에 씻는다. 생것을 생지황이라 하고, 마른 것을 건지황이라 하며, 9번 쪄서 말린 것을 숙지황이라 한다. 지황은 보혈약, 강장약, 지혈제, 이뇨약으로 신장을 보호하고, 빈혈, 변후쇠약, 토혈, 자궁출혈, 결핵성 쇠약에 사용한다. 상기 형개(Schizonepeta tenuifolia var. japonica)는 꿀풀과의 초본이며, 감기로 열이 나고 두통이 생기거나 목이 아플 때 사용한다. 상기 황기(Astragalus membranaceus)는 콩과(Leguminosae)에 속하는 다년생 초본으로 지한, 이뇨, 소종, 강장 등에 쓰인다.

상기 약재는 통상의 방법에 따라 추출물로 제조할 수 있으며, 예를 들어 증류수, 탄소수 1∼4 개의 무수 또는 함수 저급알코올과 같은 유기용매로 추출한 후 감압 농축한 다음 건조하여 1차 추출물을 수득할 수 있다. 구체적으로, 생약재로 시판되는 천궁, 금은화, 지황, 형개 및 황기로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재를 구입하여 잘게 분쇄하고, 분쇄물 건조 중량에 대하여 5 내지 20 부피의 물이나, 탄소수 1∼4 개의 무수 또는 함수 저급알코올과 같은 유기용매로 환 류냉각기가 달린 추출기에서 50∼100 ℃로 1∼5 시간 동안 가열하여 약재들의 추출물을 추출한다. 그 다음 여과포로 여과한 후, 잔사를 같은 방법으로 1 회 이상씩 더 추출한 후, 추출액들을 합하여 감압농축하고, 동결건조나 분무건조하여 건조추출물을 얻는다.

상기와 같이 수득한 천궁, 금은화, 지황, 형개 및 황기로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재들은 버섯균을 통하여 1차 발효된다. 상기 버섯균은 차가버섯(Inonnotus-obliquus), 동충하초균류(Cordyceps sinensis, Paecilomyces japonica), 송이버섯(Tricholoma matsutake), 상황버섯(phellinus linteus), 영지버섯(Ganoderma lucidum) 등의 약용 버섯류의 버섯균을 사용할 수 있다.

바람직하기로는 상기 버섯균 발효는 천궁, 금은화, 지황, 형개 및 황기로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재 자체 또는 절편, 분말화한 분쇄물 각각에 버섯균을 1∼10 중량%로 접종하고, 18∼25 ℃, 습도 60∼70 %에서 60 일간 고체발효시킨 후 이를 추출하여 버섯균 발효물을 얻을 수 있다.

상기 버섯균 발효물의 추출시 추출은 발효물 건조 중량에 대하여 5 내지 20 부피의 물이나, 탄소수 1∼4 개의 무수 또는 함수 저급알코올과 같은 유기용매로 환류냉각기가 달린 추출기에서 50∼100 ℃로 1∼5 시간 동안 가열하여 약재들의 추출물을 추출한다. 그 다음 여과포로 여과한 후, 잔사를 같은 방법으로 1 회 이상씩 더 추출한 후, 추출액들을 합하여 감압농축하고, 동결건조나 분무건조하여 건조추출물을 얻을 수 있다.

상기 버섯균 발효물은 이후 효모, 유산균 또는 비피더스균에 의한 원활한 발효를 위하여 멸균과정을 거친다. 상기 버섯균 발효물은 각각 효모, 유산균 또는 비피더스균에 첨가 배양하고 추출물을 분리하여 각각의 발효추출물을 얻을 수 있다. 바람직하기로는 상기 버섯균 발효물은 효모, 유산균 또는 비피더스균의 배양을 위한 배지에 1 내지 20 중량%로 첨가되는 것이 바람직하다.

상기 효모는 Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces ellipsoids, Saccharomyces boulardii 등을 사용할 수 있다.

상기 유산균은 Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus confusus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus brevis 등을 사용할 수 있다.

상기 비피더스균은 Bifidobacterium breve, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium infantis 등을 사용할 수 있다.

바람직하기로는 미생물로 효모를 사용할 경우에는 천궁, 금은화, 지황, 형개 및 황기로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재의 버섯균 발효물이 각각 함유된 기본 배지(YM 배지)에 효모를 접종(바람직한 농도(약 10⁵∼10⁷ cells/mL)로 한 후, pH 5.5∼6.5, 온도 25∼35 ℃, 통기량 0.05∼0.5 VVM의 조건을 유지하면서 30∼120 시간 동안 배양한다. 그 뒤, 이 발효액을 원심분리하여 고분자 침전물과 효모균체를 제거하고, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60 ℃로 감압농축한 후 동 결건조하여 각각의 약재 발효 추출물을 수득할 수 있다.

미생물로 유산균을 사용할 경우에는 천궁, 금은화, 지황, 형개 및 황기로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재의 버섯균 발효물이 각각 함유된 기본 배지(MRS 배지)에 유산균을 접종(바람직한 농도(약 10⁵∼10⁷ cells/mL)한 후, pH 6.5∼7.5, 온도 35∼38 ℃, 통기량 1 VVM의 조건을 유지하면서 24∼120 시간 동안 배양한다. 그 뒤, 이 발효액을 원심분리하여 고분자 침전물과 유산균체를 제거하고, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60 ℃로 감압농축한 후 동결건조하여 각각의 약재 발효 추출물을 수득할 수 있다.

미생물로 비피더스균을 사용할 경우에는 천궁, 금은화, 지황, 형개 및 황기로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재의 버섯균 발효물이 각각 함유된 기본 배지(BL 배지)에 비피더스균을 접종(바람직한 농도(약 10⁵∼10⁷ cells/mL)한 후, pH 6.5∼7.5, 온도 35∼38 ℃, 혐기배양 조건을 유지하면서 24∼120 시간 동안 배양한다. 그 뒤, 이 발효액을 원심분리하여 고분자 침전물과 비피더스균체를 제거하고, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60 ℃로 감압농축한 후 동결건조하여 각각의 약재 발효 추출물을 수득할 수 있다.

또한 본 발명의 항염증 화장료 조성물에 상기 약재의 발효추출물의 합계 총량이 0.0001 내지 20 중량%로 포함되는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 0.01 내지 10 중량%로 포함되는 것이다. 그 함량이 0.0001 중량% 미만일 경우에는 뚜렷한 효과를 기대할 수 없다.

상기와 같은 본 발명의 항염증 화장료 조성물의 제형은 특별히 제한되지 않으며, 목적하는 바에 따라 적절히 선택할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화장료 조성물은 피부외용연고, 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 팩, 에멀젼, 오일젤 등의 제형으로 제조될 수 있다. 이때, 상기 피부외용연고는 본 발명의 약재 발효 추출물 이외에 바셀린 50∼97 중량% 및 폴리옥시에틸렌올레일-에테르 포스페이트 0.1∼5 중량%를 함유하도록 제조할 수 있으며, 유연화장수는 본 발명의 약재 발효 추출물 이외에 다가알콜류(프로필렌글리콜, 글리세린 등) 1∼10 중량% 및 계면활성제(폴리에틸렌올레일에테르, 폴리옥시에틸렌 경화피마자유 등) 0.05∼2 중량%를 함유하도록 제조할 수 있다. 또한, 영양화장수 및 영양크림은 본 발명의 약재 발효 추출물 이외에 오일류(스쿠알란, 바셀린, 옥틸도데칸올 등) 5∼20 중량% 및 왁스성분(세탄올, 스테아릴알콜, 밀납 등) 3∼15 중량%를 함유하도록 제조할 수 있으며, 에센스는 본 발명의 약재 발효 추출물 이외에 글리세린, 프로필렌글리콜 등의 다가알콜류 5∼30 중량%를 함유하여 제조할 수 있다. 마사지 크림은 본 발명의 약재 발효 추출물 이외에 유동파라핀, 바셀린, 이소노닐이소노나노에이트 등의 오일 30∼70 중량%를 함유하여 제조되며, 팩은 본 발명의 약재 발효 추출물 이외에 폴리비닐알콜 5∼20 중량%를 함유하는 필 오프(peel off) 팩 또는 일반유화형 화장료에 본 발명의 약재 발효 추출물 이외에 카올린, 탈크, 산화아연, 이산화티탄 등의 안료가 5∼30 중량% 함유된 워시오프(wash off) 팩으로 제조할 수 있다.

또한 본 발명의 항염증 화장료 조성물은 각각의 제형에 상기 기재한 성분들 이외에 일반 피부화장료에 배합되는 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 또는 향료 등을 필요에 따라 적절히 배합하여 사용할 수 있다.

본 발명의 항염증 화장료 조성물은 종래의 약재 추출물의 효모발효추출물 또는 유산균 발효추출물을 사용하는 경우에 비하여 현저히 우수한 피부트러블 완화효과 및 피부트러블 완화효과의 지속성을 갖으며, 인체에 무해하다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시하나, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.

[실시예]

실시예 1

시판되는 천궁, 금은화, 지황, 형개 및 황기를 구입하여 분쇄한 각각의 분쇄물 200 g을 정제수나 80 % 메탄올 3 L에 각각 넣고, 냉각콘덴서가 달린 환류추출기에서 3 시간 동안 끓여 추출하였다. 그 다음, 100 메쉬(mesh) 여과포로 여과한 후 잔사를 같은 방법으로 1 회 더 추출하였다. 각각의 추출물을 합하여 상온에서 와트만(Whatman) 2 번 여과지로 여과하여 불용성 물질을 제거하고, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60 ℃로 감압농축한 후 동결건조하여 하기 표 1과 같은 각각의 건조 중량을 얻었다. 하기 표 1은 추출용매에 따른 약재 100 g 당 추출물의 건조중량을 나타낸 것이다.

약재	80% 메탄올	정제수
천궁	8.2 g	7.9 g
금은화	7.5 g	6.1 g
지황	7.7 g	6.0 g
형개	7.9 g	6.1 g
황기	8.1 g	7.8 g

버섯균 발효물은 80 % 메탄올을 이용하여 얻어진 천궁, 금은화, 지황, 형개 및 황기에 버섯균을 5 중량%로 첨가하여 고체발효시켰다.

구체적으로, 천궁, 금은화, 지황, 형개 및 황기 200 g을 절편으로 하여 일정한 습도하에서 Paecilomyces japonica를 5 중량%로 각각 접종하고 18∼25 ℃, 습도 60∼70 %에서 60 일간 발효시키고 건조시킨 후, 분쇄하여 얻어진 분쇄물 100 g씩을 80% 메탄올 3L에 각각 넣고, 냉각콘덴서가 달린 환류추출기에서 3 시간 끓여 추출하였다. 그 다음, 100 메쉬 여과포로 여과한 후 잔사를 같은 방법으로 1회 더 추출하였다. 각각의 추출액을 합하여 상온에서 와트만(Whatman) 2번 여과지로 여과하여 불용성 물질을 제거한 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60 ℃로 감압농축한 후 동결건조하여 최종 버섯균 발효 건조물을 수득하였다. 약재 버섯균 발효 건조물의 건조중량은 하기 표 2에 나타내었다.

약재	버섯균발효의 건조중량 (g)
천궁	6.91
금은화	6.75
지황	6.78
형개	6.69
황기	6.74

상기 버섯균 발효된 발효물을 효모인 Saccharomyces cerevisiae에 대한 기본배지인 YM 배지에 5 중량%로 첨가하여 발효시켰다.

구체적으로, Saccharomyces cerevisiae를 약 10⁵∼10⁷ cells/mL의 농도로 5 중량%의 버섯균 발효물이 함유된 효모 기본 배지(YM 배지)에 접종한 후, pH 5.5∼6.5, 온도 25∼35 ℃, 통기량 0.05∼0.5 VVM의 조건을 유지하면서 48 시간 배양하였다. 그 뒤, 각각의 발효액 100 g을 원심분리하여 고분자 침전물과 효모균체를 제거한 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60 ℃로 감압농축한 후 동결건조하여 최종 약재 버섯균-효모 발효 건조물을 수득하였다. 약재 버섯균-효모 발효 건조물의 건조중량은 하기 표 3에 나타내었다.

약재	효모발효의 건조중량 (g)
천궁	5.79
금은화	5.71
지황	5.64
형개	5.62
황기	5.65

실시예 2

상기 실시예 1의 버섯균 발효물을 Lactobacillus acidophilus에 대한 기본배지인 MRS 배지에 5 중량%로 첨가하여 발효시켰다.

구체적으로, Lactobacillus acidophilus를 약 10⁵∼10⁷ cells/mL의 농도로 5 중량%의 상기 실시예 1의 버섯균 발효물이 함유된 유산균 기본 배지(MRS 배지)에 접종한 후, pH 6.5∼7.5, 온도 35∼38 ℃, 통기량 1 VVM의 조건을 유지하면서 48 시간 배양하였다. 그 뒤, 각각의 발효액 100 g을 원심분리하여 고분자 침전물과 유산균체를 제거한 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60 ℃로 감압농축한 후 동결건조하여 최종 약재 버섯균-유산균 발효 건조물을 수득하였다. 약재 버섯균-유산균 발효 건조물의 건조중량은 하기 표 4에 나타내었다.

약재	유산균발효의 건조중량 (g)
천궁	5.72
금은화	5.64
지황	5.66
형개	5.73
황기	5.89

실시예 3

상기 실시예 1의 버섯균 발효물을 비피더스균인 Bifidobacterium longum에 대한 기본배지인 BL 배지에 5 중량%로 첨가하여 발효시켰다.

구체적으로, Bifidobacterium longum를 약 10⁵∼10⁷ cells/mL의 농도로 5 중량%의 상기 실시예 1의 버섯균 발효물이 함유된 유산균 기본 배지(BL 배지)에 접종한 후, pH 6.5∼7.5, 온도 35∼38 ℃, 혐기배양 조건을 유지하면서 48 시간 배양하였다. 그 뒤, 각각의 발효액 100 g을 원심분리하여 고분자 침전물과 비피더스균체를 제거한 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60 ℃로 감압농축한 후 동결건조하여 최종 약재 버섯균-비피더스균 발효 건조물을 수득하였다. 약재 버섯균-비피더스균 발효 건조물의 건조중량은 하기 표 5에 나타내었다.

약재	비피더스균발효의 건조중량 (g)
천궁	5.65
금은화	5.71
지황	5.75
형개	5.68
황기	5.83

실시예 4-10

상기 실시예 1 내지 3에서 제조한 천궁, 금은화, 지황, 형개 및 황기의 버섯균-효모 발효추출물, 버섯균-유산균 발효추출물, 버섯균-비피더스 발효추출물을 하기 표 6과 같이 혼합하였다.(단위는 중량비이다)

		실시예1	실시예2	실시예3	실시예4	실시예5	실시예6	실시예7	실시예8	실시예 9	실시예 10
천궁	버섯균-효모	100									10
	버섯균-유산균		100						50	20	10
	버섯균-비피더스균			100
금은화	버섯균-효모										10
	버섯균-유산균				100					30
	버섯균-비피더스균										10
지황	버섯균-효모
	버섯균-유산균										10
	버섯균-비피더스균					100				20	10
형개	버섯균-효모								50		10
	버섯균-유산균						100			20	10
	버섯균-비피더스균
황기	버섯균-효모							100		10	10
	버섯균-유산균
	버섯균-비피더스균										10

실험예 1.PGE2 생성 억제 효과

천궁의 효모발효추출물과 황기의 유산균발효추출물 및 상기 실시예 1 내지 10의 항염 효과의 피부트러블 완화 기능을 확인하기 위해 PEG2 생성 억제 효과 시험을 실시하였다. 이는 COX-활성에 대한 영향을 알아보기 위한 실험이다(Jeffrey, k. h., Anglea, S. W., Zoe, S., and Rhia C. M. Intracellular Measurement of Prostaglandin E2: Effect of Antiinflammatory Drugs on Cyclooxygenase Activity and Prostanoid Expression, Analytical Biochemistry, 1999, 271, 18-28).

사람의 표피 조직에서 분리한 섬유아세포를 수 차례 계대 배양한 후, 96-웰 프레이트에 1×10⁵ 개씩 넣고 24 시간 배양하였다. FBS가 포함되지 않은 배지로 교체하여 2 시간 배양하여, 천궁의 효모발효추출물과 황기의 유산균발효추출물 및 상기 실시예 1 내지 10을 하기 표 7의 농도로 처리하고, 이때 인도메타신(indomethacin)도 비교균으로 함께 처리하여 1 시간 동안 배양한 후, 자극원으로 칼슘 이오노포머 A23187(Calcium Ionophore A23187)과 아라키돈산을 50 mM의 농도로 처리하여 37 ℃에서 5 분간 배양하였다. 도데실트리메틸암모늄 브로마이드(dodecyltrimethlammonium bromide)를 최종 농도 0.25 %로 10 분간 처리하여 세포를 용혈시키고, 상층액을 적당량 취하여 PGE2의 양을 효소면역분석법(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA)을 이용하여 정량함으로써 한약재 발효액의 프로스타글란딘 억제 효과를 판단하고, 그 결과를 하기 표 7에 나타내었다.

시료	억제율 (%)
대조군 (음성대조군)	-
아라키돈산 (양성대조군)	-
인도메타신 (양성대조군)	93.6
YM 배지	11.0
MRS 배지	16.4
BL 배지	13.2
천궁의 효모발효추출물	25.8
황기 유산균발효추출물	28.4
실시예 1	60.6
실시예 2	64.7
실시예 3	67.5
실시예 4	69.7
실시예 5	65.2
실시예 6	72.4
실시예 7	69.8
실시예 8	72.1
실시예 9	66.6
실시예 10	67.5

상기 표 7에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 실시예 1 내지 10은 천궁의 효모발효추출물이나 황기의 유산균발효추출물이나 기본배지보다 높은 프로스타글란딘(PGE2) 억제율을 나타내어 COX-2 효소의 유도 작용 또는 활성 억제를 통한 항염 효능이 매우 우수함을 알 수 있었다.

다음은 항염 및 항자극 효과가 우수하여 피부트러블 완화 기능이 뛰어나고 피부에 안전한 본 발명에 따른 상기 실시예들을 이용하여 화장료 조성물을 제조한 예들이다.

실시예 11 및 비교예 1

상기 실시예 1을 이용하여 하기 표 8의 처방으로 피부 외용연고를 제조하였다.(단위는 중량%이다)

구분	실시예 11	비교예 1
실시예 1의 성분	10	-
디에틸 세바케이트	8	8
경납	5	5
폴리옥시에틸렌올레일에테르 포스페이트	6	6
벤조산 나트륨	적량	적량
바셀린	To 100	To 100

실시예 12 및 비교예 2

상기 실시예 3을 이용하여 하기 표 9의 처방으로 크림을 제조하였다.(단위는 중량%이다)

구분	실시예 12	비교예 2
실시예 3의 성분	1.0	-
스테아린산	15.0	15.0
세탄올	1.0	1.0
수산화칼륨	0.7	0.7
글리세린	5.0	5.0
프로필렌글리콜	3.0	3.0
방부제	적량	적량
향	적량	적량
정제수	To 100	To 100

실시예 13 및 비교예 3

상기 실시예 6을 이용하여 하기 표 10의 처방으로 유연화장수를 제조하였다.(단위는 중량%이다)

구분	실시예 13	비교예 3
실시예 6의 성분	0.2	-
에탄올	10.0	10.0
폴리라우린산폴리옥시에틸렌소르비탄	1.0	1.0
파라옥시안식향산메틸	0.2	0.2
글리세린	5.0	5.0
1,3-부틸렌글리콜	6.0	6.0
향	적량	적량
색소	적량	적량
정제수	To 100	To 100

실시예 14 및 비교예 4

상기 실시예 8을 이용하여 하기 표 11의 처방으로 영양화장수를 제조하였다.(단위는 중량%이다)

구분	실시예 14	비교예 4
실시예 8의 성분	0.1	-
와셀린	2.0	2.0
세스퀴올레인산소르비탄	0.8	0.8
폴리옥시에틸렌올레일에틸	1.2	1.2
파라옥시안식향산메틸	적량	적량
프로필렌글리콜	5.0	5.0
에탄올	3.2	3.2
카르복시비닐폴리머	18.0	18.0
수산화칼륨	0.1	0.1
색소	적량	적량
향	적량	적량
정제수	To 100	To 100

실시예 15 및 비교예 5

상기 실시예 9를 이용하여 하기 표 12의 처방으로 팩을 제조하였다.(단위는 중량%이다)

구분	실시예 15	비교예 5
실시예 9의 성분	0.5	-
글리세린	5.0	5.0
프로필렌글리콜	4.0	4.0
폴리비닐알코올	15.0	15.0
에탄올	8.0	8.0
폴리옥시에틸렌올레일에틸	1.0	1.0
파라옥시안식향산메틸	0.2	0.2
향	적량	적량
색소	적량	적량
정제수	To 100	To 100

실시예 16 및 비교예 6

상기 실시예 10을 이용하여 하기 표 13의 처방으로 에센스를 제조하였다.(단위는 중량%이다)

구분	실시예 16	비교예 6
실시예 10의 성분	5.0	-
프로필렌글리콜	10.0	10.0
글리세린	10.0	10.0
하이루론산나트륨수용액 (1%)	5.0	5.0
에탄올	5.0	5.0
폴리옥시에틸렌경화피마자유	1.0	1.0
파라옥시안식향산메틸	0.1	0.1
향	적량	적량
정제수	To 100	To 100

실험예 2. 항염 효과

상기 실시예 11에서 만들어진 화장료의 항염 효과를 알아보기 위하여 아라키돈산(arachidonic acid)을 이용한 평가법(A. Crummey, G. P. Harper, E. A. Boyle and F. R. Mangan, Inhibitory of arachidonic acid-induced ear edema as a model for assessing topical anti-inflammatory compound. Agents and Actions, 1987, 20:69-76)을 이용하였다.

먼저, 마우스(Hairless mouse) 35 마리를 각 7 마리씩 나누고, 시료 적용 전 양쪽 귀를 에탄올로 깨끗이 세척한 후 마이크로미터를 이용하여 측정하고, 상기 실시예 11 및 비교예 1의 화장료, 인도메타신(indomethacin) 1.0 %를 처리하는 비교군 및 아라키돈산만을 처리하는 대조군으로 나누어 실험을 실시하여 마우스의 귀 두께 평균치를 측정하였다. 실시예 11의 화장료를 처리하는 시료군과 비교예 1의 화장료, 인도메타신 1.0 %를 처리하는 비교군은 시료 20 ㎕를, 대조군에는 에탄올 20 ㎕를 1일 1회씩 4일간 지속적으로 도포하였다. 마지막으로 도포하고 1 시간 경화 후, 좌측 귀에는 에탄올을 우측 귀에는 아라키돈산을 2 ㎎/ear씩 도포하고, 도포 1 시간 후 귀의 부종(edema) 정도를 마이크로미터를 이용하여 양쪽 귀에 대하여 3 회씩 반복 측정하였다. 처리군의 좌측 귀는 시료 자체에 의한 염증 유발 정도를 알아보기 위한 대조군으로 이용하였다. 항염효과는 아라키돈산만을 처리한 대조군을 기준으로 부종 억제 정도를 판정하였으며, 그 결과를 하기 표 14에 나타내었다.

억제율은 하기 수학식 1에 따라 측정하였다.

[수학식 1]

상기 수학식 1에서, A는 대조군 귀의 평균 두께 변화(아라키돈산 처리 구의 두께-아라키돈산 비처리 귀의 두께)이고, B는 시료 도포군 귀의 평균 두께 변화(시로 처리 귀의 두께-시료 비처리 귀의 두께)이다.

구분		농도 (%)	억제율 (%)
시료균	실시예 11	-	35.8
비교군1	비교예 1	-	12.9
비교군2	인도메타신	1.0	41.7
대조군	아라키돈산	2 ㎎/ear	-

상기 표 14에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 실시예 11의 화장료는 35.8 %의 염증 억제율을 나타내었으며, 이러한 수치는 의약품 성분으로서 항염 효과가 매우 우수한 물질인 인도메타신보다 낮은 항염 효과지만, 화장료로서 사용하기에는 충분한 정도임을 알 수 있었다.

본 발명에 따른 항염증 화장료 조성물은 피부에 안전하면서도, 발효를 통해 각 약재의 약리효과를 더욱 강화시켜 항염효과를 향사시켜 피부 트러블 완화 효과 및 그 효과의 지속성이 우수하다.

Claims

천궁, 금은화, 지황, 형개 및 황기로 이루어지는 군으로부터 1 종 이상 선택되는 약재의 버섯균 발효물을 효모, 유산균 또는 비피더스균으로 발효시켜 추출한 발효추출물을 유효성분으로 0.0001 내지 20 중량% 포함하는 것을 특징으로 하는 항염증 화장료 조성물.
삭제
제1항에 있어서,

상기 버섯균은 차가버섯(Inonnotus-obliquus), 상황버섯(phellinus linteus), 동충하초균류(Cordyceps sinensis, Paecilomyces japonica), 및 영지버섯(Ganoderma lucidum)로 이루어지는 군으로부터 1 종 이상 선택되는 것을 특징으로 하는 항염증 화장료 조성물.
제1항에 있어서,

상기 효모는 Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces ellipsoids 및 Saccharomyces boulardii로 이루어지는 군으로부터 1 종 이상 선택되는 것을 특징으로 하는 항염증 화장료 조성물.
제1항에 있어서,

상기 유산균은 Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus reuteri 및 Lactobacillus confusus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus brevis로 이루어지는 군으로부터 1 종 이상 선택되는 것을 특징으로 하는 항염증 화장료 조성물.
제1항에 있어서,

상기 비피더스균은 Bifidobacterium breve, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum 및 Bifidobacterium infantis로 이루어지는 군으로부터 1 종 이상 선택되는 것을 특징으로 하는 항염증 화장료 조성물.
제1항에 있어서,

상기 피부트러블 완화용 화장료 조성물은 피부외용연고, 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 팩, 에멀젼, 또는 오일젤의 제형인 것을 특징으로 하는 항염증 화장료 조성물.
제1항에 있어서,

상기 화장료 조성물이 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 및 향료로 이루어지는 군으로부터 1 종 이상 선택되는 첨가제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 항염증 화장료 조성물.
a) 천궁, 금은화, 지황, 형개 및 황기로 이루어지는 군으로부터 1종 이상 선택되는 약재를 버섯균 발효시켜 버섯균 발효물을 추출하는 단계;

b) 상기 a)단계의 버섯균 발효물을 효모, 유산균 또는 비피더스균으로 발효시키는 단계; 및

c) 상기 b)단계의 발효물로부터 발효추출물을 분리하는 단계

를 포함하는 것을 특징으로 하는 항염증 화장료 원료의 제조방법.
제9항에 있어서,

상기 a)단계의 버섯균 발효는 고체발효인 것을 특징으로 하는 항염증 화장료 원료의 제조방법.
제9항에 있어서,

상기 b)단계의 효모, 유산균 또는 비피더스균 발효는 액체발효인 것을 특징으로 하는 항염증 화장료 원료의 제조방법.