KR100859995B1

KR100859995B1 - 혈친화성 방식으로 표면을 코팅하기 위한 화합물 및 방법

Info

Publication number: KR100859995B1
Application number: KR1020047018023A
Authority: KR
Inventors: 롤란드 호레스; 마리타카타리나 린센; 미첼 호프만; 에리카 호프만; 도나테 디비아제; 볼커 파우스트
Original assignee: 헤모텍 아게
Priority date: 2002-05-09
Filing date: 2003-04-15
Publication date: 2008-09-25
Also published as: DE10261986B4; DE10221055B4; DE10221055A1; KR20050012237A; KR100854985B1; EA200401484A1; DE10261986A1; EA016285B1; KR20050012239A

Abstract

본 발명은 혈친화성 표면의 제조를 위하여 당 단위 N-아실글루코스아민 또는 N-아실갈락토사민을 함유하는 올리고사카라이드 및 폴리사카라이드 뿐만 아니라 이들 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드의 용도에 관한 것이고, 또한 헤파린, 헤파란 설페이트 및 키토산의 공통적인 생합성 전구체 물질로 모사되는 이들 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드로 상기 표면을 혈친화적으로 코팅하는 방법에 관한 것이다. 또한 본 발명은 상기 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드를 제조하는 방법에 관하여 기술되어 있고 혈친화성 코팅 표면의 사용을 위한 다양한 가능성을 개시하고 있다. 특히 본 발명은 스텐트상에 항증식성, 항염증성 및/또는 항혈전성 활성제를 함유하는 본 발명에 따른 하나 이상의 침착된 혈친화성 코팅을 갖는 상기 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드의 용도, 이들 스텐트의 제조 방법 뿐만 아니라 재협착증의 예방을 위한 상기 스텐트의 용도에 관한 것이다.

Description

혈친화성 방식으로 표면을 코팅하기 위한 화합물 및 방법{Compounds and method for coating surfaces in a hemocompatible manner}

본 발명은 혈친화성으로 코팅된 표면의 제조를 위한 당 구성 블록 N-아실글루코스아민 및/또는 N-갈락토스아민을 함유하는 올리고- 및/또는 폴리사카라이드의 용도, 상기 올리고- 및/또는 폴리사카라이드를 가지고 표면을 혈친화성으로 코팅하는 방법, 및 혈친화성으로 코팅된 표면의 용도에 관한 것이다.

인체에서, 혈액은 상처가 생긴 경우에만 자연 혈관의 내면 이외의 면과 접촉하게 된다. 결국, 혈액 응고 시스템(계)은 혈액이 외계면과 접촉하게 되면 출혈을 줄이고 생명을 위협하는 혈액의 손실을 방지하기 위하여 항상 활성화된다.

이식체(implant)도 역시 외계 면이기 때문에, 혈액과 영원히 접촉하고 있는 이식체를 이식받은 모든 환자들은 혈액 접촉 동안에, 약제로, 예를 들면 혈액 응고를 억제하는 소위 항응고제로 처치된다. 이 사실은 혈액투석 환자와 같이 체외순환을 받는 환자에게도 적용된다. 그러나, 이러한 응고 억제 약물처리는 탈모, 혈소판 감소증보다 심한 구토와 메스꺼움, 출혈성 피부 괴사 및 증가된 출혈성 소인(hemorrhagic diathesis) 내지 뇌출혈과 같은 치명적인 결과를 가지는 부작용에 이르기 까지 다양한 범위의 심각한 부작용을 수반한다.

그래서 혈액과 접촉할 때 응고 시스템을 활성화하지 않고 혈액의 응고를 유발하지 않는 보철, 조직 대체용부품(organ spareparts), 막, 캐뉼러(cannulae), 튜브, 혈액 용기, 스텐트 등과 같은 항혈전성(또는 비응혈성)이면서 혈친화성(hemocompatible) 재료에 대한 요구가 있다.

EP-B-0 333 730은 항혈전성 세포 표면 폴리사카라이드(즉, 다당체, HS-I)의 혼입, 접착 및/또는 변형 및 부착에 의해 혈친화성 기질의 제조 방법을 기재하고 있다. 생물학적 또는 인공적 표면에 이와 같은 특수한 내피세포 표면 프로테오헤파란 설페이트 HS I (proteoheparan sulphate HS I)를 고정화 시키는 것은, 이러한 코팅된 표면이 혈친화성이 되고 영구한 혈액 접촉에 대해 적당하게 한다. 그러나 상기의 HS I 생성 과정은 내피세포의 배양을 필요로 하는데, 내피 세포의 배양은 시간이 소요되고 상대적으로 많은 양의 배양된 내피세포는 단지 고비용에서만 얻을 수 있기 때문에, 상기 과정의 경제적인 유용성은 매우 제한적이다.

본 발명의 목적은 표면의 혈친화성 코팅을 위한 물질과, 표면의 혈친화성 코팅 방법, 및 부작용의 방지 또는 감소를 위한 표면에서의 이들의 용도를 제공하는 것이다.

특히, 본 발명의 목적은 의료 제품(또는 의료기)을 제공하는 것으로서, 한편으로는 선택된 활성제 및 활성제의 배합에 의하여 이식 후 첫 수일 및 수 주 동안 세포 반응의 억제에 의하여, 또 다른 한편으로 항혈전성 및/또는 비활성 또는 생체적합성 표면을 제공함으로써 의학 제품의 연속적 조절 내부 생장을 가능하게 하는데, 이것은 활성 성분 영향의 감소로 존재하는 외부 표면상에서 아무런 반응이 더 이상 일어나지 않고, 장기적으로는 합병증을 유발하지 않는 것을 보증한다.

본 발명의 목적은 독립항의 기술적 내용에 의하여 해결될 수 있다. 또한, 본 발명의 바람직한 양태는 종속항, 상세한 설명, 도면 및 실시예로부터 명확하게 알 수 있다.

본 발명은 하기 화학식 (Ia)의 폴리사카라이드 및 구조적으로 이와 매우 유사한 하기 화학식 (Ib)의 폴리사카라이드를 개시한다.

화학식(1a)에 따른 폴리사카라이드는 2kD 내지 400kD, 바람직하게는 5kD 내지 150kD, 더욱 바람직하게는 10kD 내지 100kD, 더욱더 바람직하게는 30kD 내지 80kD의 분자량을 가진다. 식(Ib)에 따른 폴리사카라이드는 2kD 내지 15kD, 바람직하게는 4kD 내지 13kD, 더욱 바람직하게는 6kD 내지 12kD, 더욱더 바람직하게는 8kD 내지 11kD의 분자량을 가진다. 변수 n은 4 내지 1050의 정수이다. 바람직하게는, n은 9 내지 400, 더욱 바람직하게는 14 내지 260, 더욱더 바람직하게는 19 내지 210의 정수이다.

화학식 (Ia) 및 (Ib)는 2당체(dicaccharide)를 나타내고, 이것은 본 발명에 따른 폴리사카라이드의 기본 단위로 보여주기 위한 것이고 상기 기본 단위를 n번 연결함으로써 다당체(또는 폴리사카라이드)를 형성한다. 2개의 당분자로 이루어진 상기 기본 단위는 화학식 (Ia) 및 (Ib)가 단지 짝수의 당분자를 가지는 폴리사카라이드와 관련된 것을 제안하는 것은 아니다. 물론, 화학식 (Ia) 및 (Ib)는 홀수개의 당 단위를 가지는 폴리사카라이드로도 구성될 수 있다. 히드록시기는 각각 올리고사카라이드 및 폴리사카라이드의 말단기로서 존재한다.

기 Y 및 Z는 서로 독립적으로 하기 화학적 아실 또는 카르복시알킬 기를 나타낸다: -CHO, -COCH₃, -COC₂H₅, -COC₃H₇, -COC ₄H₉, -COC₅H₁₁, -COCH(CH₃)₂, -COCH₂CH(CH₃)₂, -COCH(CH₃)C₂H₅, -COC(CH ₃)₃, -CH₂COO^-, -C₂H₄COO^-, -C₃H₆COO^-, - C₄H₈COO^-.

바람직한 아실기는 ―COCH₃, ―COC₂H₅, ―COC₃H₇ 이고 카르복시알킬기는 ―CH₂COO ^- , ―C₂H₄COO ^- , C₃H₆COO ^- . 더욱더 바람직하게는 아세틸 및 프로판오일기와 카르복시메틸기 및 카르복시에틸기이다. 특히 아세틸기 및 카르복시메틸기가 바람직하다.

또한, 기 Y는 아실기를 나타내고, 기 Z는 카르복시알킬기를 나타낸다. 만약 Y가 기 -COCH₃, -COC₂H₅ 또는 -COC₃H₇이고, 특히 -COCH₃이면 더욱 바람직하다. 더욱이, Z가 카르복시에틸 또는 카르복시메틸기가 바람직하고, 특히 카르복시메틸기이면 더 바람직하다.

화학식 (Ia)에서 나타낸 2당체 기본 단위는 각각 치환기 Y 및 기 Z를 포함한다. 이것은 본 발명의 폴리사카라이드가 2개의 상이한 기, 즉 Y 및 Z를 포함하고 있다는 것을 명확하게 한다. 여기서 화학식 (Ia)는 2당체 기본 단위를 연결하여, 엄격하게 교대하는 서열((alternating sequence, 즉, 번갈아 나타나는 서열)로 기 Y 및 Z를 함유하는 폴리사카라이드로 이루어질 뿐만 아니라, 아미노기에서 완전하게 랜덤 서열로 기 Y 및 Z를 수반하는 폴로사카라이드로 이루어진다는 점이 중요하다. 더욱이, 화학식 (Ia)는 상이한 수의 기 Y 및 Z를 함유하는 폴리사카라이드로 구성될 수 있다. Z기의 수에 대한 Y기의 수는 70% : 30% 사이, 바람직하게는 60% : 40% 사이, 더욱더 바람직하게는 45% : 55% 사이이다. 실질적으로 반(1/2)의 아미노기 상에 Y 잔기를 수반하고 나머지 반의 아미노기 상에 Z 잔기를 수반하는 화학식 (Ia)의 폴리사카라이드가 바람직하다. 상기 “거의 반 정도”는 대부분의 적 당한 경우에 정확하게 50%를 의미하지만, 45% 내지 55%, 특히 48% 내지 52%도 의미할 수 있다.

화학식 (Ia)의 화합물 중에 Y와 Z기는 하기의 의미를 가지는 것이 바람직하다:

Y = -CHO 및 Z = -C₂H₄COO^-

Y = -CHO 및 Z = -CH₂COO^-

Y = -COCH₃ 및 Z = -C₂H₄COO^-

Y = -COCH₃ 및 Z = -CH₂COO^-

Y = -COC₂H₅ 및 Z = -C₂H₄COO^-

Y = -COC₂H₅ 및 Z = -CH₂COO^-

특히, 화학식 (Ia)의 화합물 중에 Y와 Z기는 하기의 의미를 가지는 것이 바람직하다:

Y = -CHO 및 Z = -C₂H₄COO^-

Y = -COCH₃ 및 Z = -CH₂COO^-

특히, 화학식 (Ib)의 화합물 중에 Y는 하기의 의미를 가지는 것이 바람직하 다: -CHO, -COCH₃, -COC₂H₅ 또는 -COC₃H₇. 더욱더 바람직하게는 기 -CHO, -COCH₃, -COC₂H₅, 더욱더 바람직하게는 기 -COCH₃이다.

화학식 (Ib)의 화합물은 단지 소량의 자유 아미노기를 함유한다. 닌히드린 테스트(ninhydrine test)로 자유 아미노기가 더 이상 검출될 수 없을 때는, 이 테스트의 민감도 때문에, 2% 미만, 바람직하게는1% 미만, 더욱더 바람직하게는 0.5% 미만의 총 -NH-Y 기가 자유 아미노기로 존재한다. 즉 이러한 매우 낮은 퍼센트의 -NH-Y(Y는 수소를 나타낸다)로 존재하고 있다고 결론내릴 수 있다.

화학식 (Ia) 및 (Ib)의 폴리사카라이드는 카르복실레이트기와 아미노기를 함유하기 때문에, 화학식 (Ia) 및 (Ib)는 또한 각각의 폴리사카라이드의 알칼리 및 알칼리 토금속염을 함유한다. 그래서, 나트륨염, 칼륨염, 리튬염과 같은 알칼리 금속염, 또는 마그네슘염 또는 칼슘염과 같은 알칼리 토금속염이 언급될 수 있다.

또한, 암모니아, 1차, 2차, 3차 및 4차 아민, 피리딘 및 피리딘 유도체를 가지고, 암노늄염, 바람직하게는 알킬 암모늄염 및 피리디늄염을 형성할 수 있다. 폴리사카라이드와 염을 형성하는 염기는 NaOH, KOH, LiOH, CaCO₃, Fe(OH)₃, NH₄OH, 테트라알킬 암모늄 히드록사이드 및 유사 화합물과 같은 무기 및 유기 염기를 포함한다.

헤파란 설페이트 (heparan sulphates)는 포유류의 세포 표면에 어디에나 존재한다. 그들은 세포 타입에 따라서 분자량, 아세틸화(acetylation) 정도 및 설페이트화(sulfation) 정도가 매우 상이하다. 간의 헤파란 설페이트는 예를 들면 대략 50%의 아세틸화 정도를 가짐에 대하여 내피세포의 글리코칼릭스로부터의 헤파란 설페이트는 90% 이상에 이르는 아세틸화 정도를 나타낼 수 있다. 헤파린은 단지 5% 정도의 매우 낮은 아세틸화를 나타낸다. 간의 헤파란 설페이트 및 헤파린의 설페이트화 정도는 2당체 단위당 2 이하이고, 내피세포의 헤파란 설페이트의 설페이트화 정도는 거의 0이고, 다른 타입의 세포로부터의 헤파란 설페이트의 설페이트화 정도는 2당체 단위당 0 내지 2이다.

하기 그림은 헤파린에 대해 전형적인 2당체 단위당 2개의 설페이트화 정도이면서 설페이트기의 랜덤 분포를 가지는 헤파란 설페이트 또는 헤파린의 4당체 단위를 나타내고 있다.

모든 헤파란 설페이트는 헤파린과 공통의 생합성 과정을 가진다. 이 경우에, 먼저 크실로스-함유 결합 영역을 가지는 핵심(코어) 단백질이 만들어진다. 이것은 크실로스와 거기에 결합된 2개의 갈락토스 잔기로 이루어진다. 2개의 갈락토스 잔기의 마지막 하나에 대해, 글루쿠론산 및 갈락토스아민이 각각의 사슬길이가 달성될 때까지 교대하면서 서로 결합된다. 마지막으로, 설포트란스퍼라제 및 에피머라제(sulfotransferases and epimerases)에 의해 모든 헤파란 설페이트 및 헤파린의 공통 전구체 폴리사카라이드의 다단계 효소적 변형이 수행되고, 이것은 다양한 완결 반응에 의하여, 넓은 스펙트럼의 다양한 헤파란 설페이트 에서 헤파린까지를 생성한다.

헤파린은 D-글루코스아민 및 D-글루쿠론산 또는 L-이두론산으로부터 교대적으로 구성되는데, D-글루코스아민과 D-글루쿠론산은 베타-1,4-글리코시드 방식으로 2당체에 결합되어(또는 L-이두론산은 알파-1,4-글리코시드 방식), 헤파린 하부단위를 형성한다. 이들 하부단위는 번갈아 서로 베타-1,4-글리코시드 방식으로 결합되어 헤파린을 만든다. 설포닐기의 위치는 변할 수 있다. 4당체 단위는 평균 4 내지 5개의 황산기를 함유한다. 설페이트 헤파리틴으로도 언급되는 헤파란 설페이트는 간의 헤파란 설페이트를 제외하고는 헤파린 보다는 더 적은 N- 및 O-결합된 설포닐기와 더 많은 N-아세틸기를 함유한다.

도 3에서 명확한 바와 같이, 화학식 (Ia)의 화합물(예로서 도 3c) 및 화학식 (Ib)의 화합물(예로서 도 3b)은 내피세포의 천연 헤파란 설페이트와 구조적으로 매우 유사하지만, 내피세포의 헤파란 설페이트를 사용할 경우 발생하는 초기에 기재된 단점을 방지한다.

항혈전 활성에 대해서는 특별한 5당체 단위가 그 원인이고, 이것은 상업적인 헤파린 조제에서 약 매 3번째 분자에서 발견될 수 있다. 상이한 항혈전 활성의 헤파린 조제는 특별한 분리 기술에 의하여 생산될 수 있다. 예를 들면, 항혈전-III-친화크로마토그래피(antithrombin-III-affinitychromatography)에 의하여 획득된 고친화성 헤파린(High-affinity"-heparin)에서 이 활성 서열은 매 헤파린 분자에서 발견됨에 반하여 비친화성 조제(no-affinity"-preparations)에서는 어떠한 특징적인 5당체 서열이 보이지 않고, 그래서 응혈의 활성 억제도 검출될 수 없다. 이 5당체와의 상호작용을 통하여, 응혈 핵심 인자인 트롬빈의 억제자인 항트롬빈 III의 활성은 반드시 기하급수적으로 증가한다(결합친화성은 factor 2x10³로 증가한다) [Stiekema J.C.J.; Clin Nephrology 26, Suppl. No. 1, S3-S8, (1986)].

헤파린의 아미노기는 대부분 N-설페이트화 또는 N-아세틸화되어 있다. 가장 중요한 O-설페이트화 위치는 이두론산에서 C2 위치이고 글루코스아민에서 C6 및 C3 위치이다. 혈장성 응혈을 위한 5당체의 활성에 대해서는 기본적으로 C6 상의 설페이트기는 중요하고 다른 관능기도 다소 중요하다.

헤파린이나 헤파란 설페이트로 코팅된 의학적 이식체는 코팅에 의하여 단지 조건적으로만 혈친화성이 된다. 인공적 표면상에 첨가되는 헤파린이나 헤파란 설페이트는, 상기의 5당체 단위의 입체 장해 때문에 항트롬빈 III과 제한된 상호작용과 관련된 자신의 항혈전 활성을 상당히 급격한 수치로 불완전하게 상실한다.

이들 다가 음이온 물질의 고정화 때문에, 헤파린화된 표면상에 혈장 단백질의 강한 흡수는 모든 경우에서 관찰되며, 이것은 한편으로는 헤파린 또는 헤파린 설페이트의 응집 억제 효과를 제거하고, 다른 한편으로는 접착성이어서 그 결과 3차 구조 변화 혈장 단백질(예를 들면 알부민, 피브리노겐, 트롬빈) 및 그 위에 접착성인 혈소판에 의하여 특이적인 응혈 과정을 개시한다.

그래서 한편으로는 고정화에 의하여 항트롬빈 III과 5당체 단위의 제한된 상 호작용 사이에 상관성이 존재하고, 다른 한편으로는 의학적 이식체상의 헤파린과 헤파란 설페이트 층에 혈장 단백질의 침착이 발생하며, 이는 코팅의 항혈전 특성의 상실을 초래하고 그 반대로 변하기도 하는데, 그 이유는 수초 동안 발생하는 혈장 단백질 흡착이 항응혈 표면의 손실을 초래하고 흡착성 혈장 단백질이 그들의 3차 구조를 변경하여 응혈성 표면이 생기기 때문이다. 놀랍게도 화학식 (Ia) 및 (Ib)의 화합물은 헤파린 또는 헤파란 설페이트와의 구조적 차이에도 불구하고 헤파린의 혈친화성 특성을 여전히 보여주는 것으로 검출될 수 있었고, 화학식 (Ia) 및 (Ib)의 화합물의 고정화 동안 응혈 과정의 활성화에서 초기 단계를 나타내는 혈장 단백질의 주목할만한 침착은 관찰될 수 없었다. 본 발명에 따른 화합물의 혈친화성 특성은 인공적 표면상에 그들의 고정화 후에도 여전히 존재한다.

또한, 헤파린과 헤파란 설페이트의 설페이트기는 항트롬빈 III과 상호작용에 필요하고 그것에 의해 헤파린과 헤파란 설페이트 에 항응혈 효과를 부여한다고 판단된다. 화학식 (Ia)에 따른 본 발명의 화합물과 화학식 (Ib)에 따른 본 발명의 화합물은, 화학식 (Ib)의 화합물의 설페이트기가 2당체 단위당 0.2 설페이트기 이하의 낮은 양까지 제거되는 거의 완전한 탈설페이트화 때문에 활성적인 응혈 억제, 즉 항응혈적이지는 않다.

화학식 (Ib)에 따른 본 발명의 화합물은 처음에 폴리사카라이드를 실질적으로 완전하게 탈설페이트화하고 이어서 실질적으로 완전하게 N-아실레이트화함으로써 헤파린 또는 헤파란 설페이트로부터 제조될 수 있다. 용어 “실질적으로 완전히 탈설페이트화”라는 것은 90%이상, 바람직하게는 95% 이상, 더욱 바람직하게는 98% 이상의 탈설페이트화 정도를 의미한다. 설페이트화 정도는 소위 닌히드린 테스트에 따라 결정될 수 있고, 이 테스트는 자유 아미노기를 검출한다. 탈설페이트화는 색소 반응이 DMMB(디메틸메틸렌 블루)로 더 이상 이루어지지지 않을 정도로 수행된다. 이 색소 테스트는 설페이트화 폴리사카라이드를 검출하는데 적당하지만; 그 검출 한계는 종래 기술문헌에 알려져 있지 않다. 탈설페이트화는 예를 들면 용매 혼합물에서 피리디늄 염을 가열함으로써 수행될 수 있다. 특히, DMSO, 1,4-디옥산 및 메탄올 혼합물이 적당하고고 증명되어 있다.

헤파린 뿐만 아니라 헤파란 설페이트는 전체 가수분해 및 이어서 재아실레이트화(또는 재아실화; reacylated)를 통하여 탈설페이트화된다. 이어서 2당체 단위당 설페이트기의 수(S/D)는 13C-NMR에 의하여 결정된다. 하기 표 1은 헤파린 및 탈설페이트화, 재아실레이트화된 헤파린(Ac-heparin)의 예에 관한 이들의 결과를 나타낸다.

(표 1)

2-S, 3-S, 6-S: 각각 2, 3, 6 위치에서 설페이트기

NS: 아미노기상의 설페이트기

N-Ac: 아미노기상의 아세틸기

NH₂: 자유 아미노기

S/D: 2당체 단위당 설페이트기

헤파린의 경우에 약 2.5 설페이트기/2당체 단위와 비교하여 Ac 헤파린의 경우 0.03 설페이트기/2당체 단위(S/D)의 설페이트 함량이 반복적으로 얻어졌다.

상기에 기재된 바와 같이, 헤파린 또는 헤파란 설페이트 및 일반식의 화합물의 설페이트 함량에서의 차이는 이들 화합물의 항트롬빈 III에 대한 활성 및 응혈 효과에 상당한 영향을 가진다.

화학식 (Ia) 및 (Ib)의 화합물은 0.2 미만, 바람직하게는 0.07 미만, 더 바람직하게는 0.05 미만, 더욱더 바람직하게는 0.03 미만의 2당체 단위당 설페이트기 함량을 가진다.

활성적인 응혈 억제 작용 기작의 원인이 되는 헤파린의 설페이트기의 제거에 의하여, 한편으로는 응혈과정에서 어떤 적극적 역할도 하지 않고 다른 한편으로는 외부 표면으로서 응혈 기작에 의하여 감지되지 않는 적당한 혈친화성이며 응혈 비활성인 올리고- 또는 폴리사카라이드로 표면 정화를 받을 수 있다. 이 코팅은 혈액의 응혈 활성 성분에 대하여 자연적으로 주어진 높은 기준의 혈친화성과 수동성(passivity, 또는 반응이 일어나자 않는다는 부동태화성)을 성공적으로 모방한다.

실시예 5 및 6에 의하면, 화학식 (Ia) 및/또는 (Ib)에 따른 본 발명의 화합물로 코팅된, 특히 공유결합으로 코팅된 표면은 부동태화성, 항혈전성, 혈친화성, 항증식성 및/또는 항염증성 코팅를 야기한다는 것이 분명하다. 이것은 Ac-헤파린의 예에 의하여 명백히 증명된다.

용어 “실질적으로 완전하게 N-아실레이트화”는 94% 이상, 바람직하게는 97% 이상, 더욱 바람직하게는 98% 이상 N-아실레이트화 정도를 의미한다. 아실레이트화는 자유 아미노기의 닌히드린 검출이 더 이상 어떠한 색소 반응을 보이지 않을 정도로 완전한 방식으로 수행된다. 아실레이트화제로서, 카르복시산 클로라이드, 브로마이드 또는 무수물이 바람직하다. 예를 들면, 아세트산 무수물, 프로피온산 클로라이드 또는 부티르산 무수물, 아세트산 클로라이드, 프로피온산 클라라이드 또는 부티르산 클로라이드가 본 발명에 따른 화합물의 제조에 적당하다. 카르복시산 무수물은 아실레이트화제로서 특히 적당하다.

용매로서, 특히 카르복시산 무수물에 대해, 탈이온수가 바람직하게는 10 내지 30 부피 퍼센트로 사용되는 공용매(cosolvent)와 함께 사용된다. 공용매로서 메탄올, 에탄올, DMSO, DMF, 아세톤, 디옥산, THF, 아세트산 에틸에스테르 및 다른 극성 용매가 적당하다. 만약 카르복시산 할라이드가 사용되면, DMSO 또는 DMF와 같이 극성의 물이 없는 용매가 적당하다.

용매로서 탈이온수는 10 내지 30 부피 퍼센트로 첨가되는 공용매와 함께 사용하는 것이 바람직하다. 공용매로서는 에탄올, 에탄올, DMSO, DMF, 아세톤, 디옥산, THF, 아세트산 에틸에스테르 및 다른 극성 용매가 적당하다.

화학식 (Ia)에 따른 본 발명의 화합물은 반의 당 분자 상에 카르복시산기를 가지고 다른 반 상에는 N-아실기를 가진다.

그러한 화합물은 폴리사카라이드 히알루론산, 데르마탄 설페이트, 콘드로이틴 설페이트로부터 역시 제조될 수 있다. 헤파린과 헤파란 설페이트 의 차이는 단당류의 결합으로부터 유래하고, 이들은 1,4-글루코시드가 아니라 1,3-글루코시드 결합으로 존재한다. 2당체는 다시 서로 1,4-글리토시드로 연결된다. 혈액 응고의 경우에도 역시, 항혈전적으로 활성인 데르마탄 설페이트[Biochem. J 289, 313-330 (1993)]과 콘드로이틴 설페이트는 N-아세틸글루코스아민으로 치환되고, 이것은 C-원자 4에서 히드록시기의 입체 위치에서 상이하다.

그들의 관련된 구조 때문에, 폴리사카라이드는 현재의 차이에 따라 하기와 같이 분류된다:

타입 1) 우론산-갈락토스아민 타입(HexA-GalN)n:

콘드로이틴 설페이트 및 데르마탄 설페이트가 여기에 분류된다. 이 그룹에 전형적인 것은 갈락토스아민에 대한 우론산의 베타-1,3-글리코시드 결합이다. 갈락토사아민은 그 다음 우론산에 베타1,4-글리코시드로 결합된다. 데르마탄 설페이트는 콘드로이틴 설페이트와 비교하여 헤파린과 설페이트 헤파린의 또 다른 경우처럼, 발생하는 우론산, L-이두론산의 높은 양에 의해서 상이하다. 콘드로이틴 설페이트의 설페이트화 정도는 2당체당 0.1 내지 1.3 설페이트기이다. 데르마탄 설페이트는 콘드로이틴 설페이트 보다 평균적으로 더 높은 설페이트화 정도로서 1.0 내지 3.0의 2당체 당 설페이트기를 가지며 이로 인해 헤파린과 유사한 값을 가진다. 아미노기는 N-아세틸화되어 있다.

이들도 탈설페이트화 및 N-재아세틸레이트화는 헤파린 및 헤파란 설페이트 의 경우에서와 같이 진행되고, 이들도 역시 항혈전성 코팅에 적용된다.

타입 2) 우론산 글루코스아민 타입(HexA-GlcN)n:

여기에는 헤파린, 설페이트 헤파린 및 히알루로난(hyaluronan)이 분류된다. 헤파린과 헤파란 설페이트는 오로지 베타-1,4-결합인 반면, 히알루로난에서는 단당류 D-글루쿠론산 및 D-글루코스아민이 베타-1,3-결합 단당류이다. 이 폴리사카라이드는 단지 폴리사카라이드로서 설페이트기가 없고 N-아세틸화되어 있다. 분자량은 헤파린 및 헤파란 설페이트와 비교하여 최대치 8000 kD에 이른다. 사슬 길이의 감소 및 아세틸기의 유지 또는 N-재아세틸레이트화는 식(Ib)와 비교하여 단당류의 베타-1,3-글루코시드 결합에서만 구별될 수 있는 구조를 만든다.

다른 화합물은 키틴 또는 키토산으로부터 역시 제조될 수 있다.

키틴은 질소-함유 폴리사카라이드이고, 그 모노머 단위는 N-아세틸-D-글루코스아민으로 이루어지며, 이것은 베타-1,4-글리코시드 방식으로 연결되어 있다. 이것은 약 2,000개의 당 단위로 구성되고 약 400,000 g/mol의 분자량을 가지는 선형 폴리머로 된다. 키틴은 용해도가 매우 낮고 물, 유기용매 및 희석 산 또는 희석 염기에 거의 불용성이다. 강산과의 혼합은 가수분해를 초래하고, 거기서 D-글루코스아민 및 아세트산이 생성된다. 그러나, 강산으로의 처리는 키토산과 아세트산염을 만든다.

키토산은 키틴의 비누화에 의하여 쉽게 생성될 수 있다. 키토산은 베타-1,4-글리코시드 결합된 글루코스아민(2-아미노-2-데옥시-D-글루코스)로 이루어진다. 키토산은 필름 형성 특성이 알려져 있고, 체중 감소제나 혈청에서 콜레스테롤 감소제 및 이온교환기용 기재로 사용될 수 있다.

화학식 (Ia)의 본 발명의 물질은 강염기에 의해서 키틴을 불완전하게 탈아세틸레이트화하고 이어서 자유 아미노기를 모노카르복시알킬화함으로써 키틴으로부터 제조될 수 있다(도 1 참조). 탈아세틸레이트화 정도, 즉 탈마스크화된 1차 아미노기의 양은는 부피적으로 측정될 수 있다. 자유 아미노기의 정량적인 측정은 닌히드린 반응에 의하여 수행된다. 실험이 수행되는 방법에 따라서, 20 내지 80% 정도의 탈아세틸레이트화가 획득될 수 있다. 20 내지 60%의 탈아세틸레이트화가 바람직하고, 25 내지 55%가 더욱 바람직하다.

이러한 합성방식에 의하여, 폴리사카라이드는 그 당 단위가 단지 램덤하게 분포된 N-아세틸기 또는 N-카르복시알킬기 중 하나를 포함하는 것이 획득된다.

키토산은 키틴의 N-아세틸기의 염기 가수분해에 의하여 쉽게 접근가능한데(도 1 참고), 식(Ia)에 따른 폴리사카라이드의 합성을 위한 출발물질로서 동등하게 사용할 수 있다.

키토산은 매우 적은 N-아세틸기만 가진다. 그래서, 본 발명에 따른 화합물은 한편으로는 첫 단계에서 자유 아미노기의 실질적으로 반을 카르복시알킬화하고 이어서 잔존 자유 아미노기를 아실레이트화하거나, 또는 처음에 아실레이트화한 후 잔존 자유 아미노기를 적당한 카르복시알킬화제와 반응시킴으로써 획득될 수 있다. 아미노기의 실질적으로 반이 아실레이트화되고 나머지 반이 카르복시알킬화되는 것이 바람직하다.

“불완전하게 N-아실레이트화 키토산”은 30 - 70%, 바람직하게는 40 - 60%, 더욱 바람직하게는 45 - 55%의 N-아실레이트화를 의미한다. 특히 바람직한 것은 실질적으로 반의 아미노기 상에 Y 잔기를, 그리고 나머지 반의 아미노기 상에 Z 잔기를 단순한 랜덤 분포로 수반하는 키토산 유도체가 바람직하다. 용어 “실질적으로 반”은 대부분의 경우에 정확하게 50%를 의미하지만 45% 내지 55%의 범위도 포함한다. 카르복시알킬화 및 아실레이트화 정도는 예를 들면 13C-NMR (deviation tolerance ±3%)로 측정될 수 있다.

첫 반응 단계에서 소정의 수의 자유 아미노기가 아실레이트화 또는 아세틸화된다는 사실 때문에 이것은 불가피하게 화학식 (Ia)의 폴리사카라이드에서 아실기와 카르복시알킬기는 완전하게 랜덤한 분포를 가지게 된다. 그래서 식(Ia)는 단지 본 발명에 따른 폴리사카라이드의 2당체 단위를 나타내기 위한 것이며 아실기와 카르복시알킬기의 교대하는 서열을 결정하는 것은 아니다.

다음 그림은 N-카르복시메틸화, N-아세틸화 키토산의 전형적인 4당체 단위를 나타내고 있다:

본 발명은 코팅 특히 천연 및/또는 인공 표면의 혈친화성 코팅을 위한, 화학식 (Ia) 및/또는 (Ib)의 화합물 및 이들 화합물의 염의 용도를 기재한다. “혈친화 성”(Hemocompatible; 또는 혈액 융화성)은 본 발명에 따른 화합물의 특성을 의미하는 것으로서 혈액 응고 계나 혈액 혈소판과 상호 작용하지 않고 혈액 응고 다단계를 시작하지 않는 것을 의미한다.

또한, 본 발명은 표면의 혈친화성 코팅을 위한 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드를 개시한다. 상기에 언급한 분자량 범위내의 폴리사카라이드가 바람직하다. 사용되는 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드의 중요한 특징 중의 하나는 그들이 많은 양의 당 단위 N-아실글르코스아민 또는 N-아실갈락토스아민을 함유한다는 것이다. 이것은 40 - 60%, 바람직하게는 45 - 55%, 더욱 바람직하게는 48 - 52%의 당 단위가 N-아실글루코스아민 또는 N-아실갈락토스아민이고, 실질적으로 나머지 당 단위는 각각 카르복실기를 가지는 것을 의미한다. 그래서, 일반적으로 95% 이상, 바람직하게는 98% 이상의 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드가 하나는 카르복실기를 수반하고 다른 하나는 N-아실기를 수반하는 단지 2개의 당 단위로 구성된다.

올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드의 하나의 당 단위는 N-아실글로코스아민과 N-아실갈락토스아민, 바람직하게는 N-아세틸글르코스아민과 N-아세틸갈락토스아민이고, 나머지 하나는 우론산, 바람직하게는 글루쿠론산 및 이두론산이다.

바람직게는 실질적으로 당 글루코스아민과 갈락토스아민으로 이루어지고, 실질적으로 당 단위의 반이 N-아실기 바람직하게는 N-아세틸기를 수반하고 나머지 반은 글루코스아민 단위는 아미노기를 통하여 직접 결합되거나 하나 이상의 메틸레닐기를 통하여 결합된 카르복실기를 수반하는 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라 이드이다. 아미노기에 결합된 이들 카르복시산기는 바람직하게는 카브복시메틸 또는 카르복시에틸기이다. 또한, 실질적으로 반, 즉 48 - 52%, 바람직하게는 49 - 51%, 더욱 바람직하게는 49.5 - 50.5%가 N-아실 글루코스아민과 N-아실 갈락토스아민, 바람직하게는 N-아세틸 글루코스아민 또는 N-아세틸 갈락토스아민으로 이루어지고, 실질적으로 나머지 반은 우론산, 바람직하게는 글루쿠론산 및 이두론산으로 이루어지는 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드가 바람직하다. 특히, 2개의 당 단위의 실질적으로 교대하는 서열(교대하는 연결의 경우에 통계적인 편차에도 불구하고)을 나타내는 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드가 바람직하다. 일탈된 연결의 비율은 1% 이하, 바람직하게는 0.1%이하가 되어야만 한다.

놀랍게도, 본 발명에 따른 용도에 대해, 특히 실질적으로 탈설페이트화되고 실질적으로 N-아실레이트화된 헤파린 뿐만 아니라 불완전하게 N-카르복시알킬화되고 N-아실레이트화된 키토산 뿐만아니라 탈설페이트화되고 실질적으로 N-아실레이트화된 데르마탄 설페이트, 콘드로이틴 설페이트 및 역시 사슬 길이가 감소된 히알루론산이 특히 적당하다. 특히, N-아세틸화 헤파린과 불완전하게 N-카르복시메틸화되고 N-아세틸화된 키토산이 혈친화성 코팅으로 적합하다.

“실질적으로”에 의해서 정의된 탈설페이트화 및 아실레이트화 정도는 이미 상기에서 정의되었다. 용어 “실질적으로”는 통계적 편차가 고려되어야 한다는 것을 명확하게 하기 위한 것이다. 당 단위의 실질적으로 교대하는 서열은 규칙으로서 2개의 동등한 당 단위가 서로 결합되어 있지 않지만, 완전하게 그러한 잘못된 결합을 배제하지는 않는다는 것을 의미한다. 대응되게, “실질적으로 반”은 거의 50% 를 의미하지만, 생물학적으로 생성된 고분자에 있어서 효소는 완벽하게는 작용하지 않고 촉매작용은 일반적으로 다소간의 실수가 있기 때문에 가장 적당한 경우가 결코 이루어질 수는 없고, 다소간의 편차는 고려되어야 하기 때문에, 다소간의 일탈은 허용된다. 그러나 천연 헤파린의 경우, N-아세틸 글루코스아민 및 우론산 단위(글루쿠론산 대신에)가 엄격하게 교대하는 서열이 있다.

더욱이, 표면의 혈친화성 코팅 방법이 개시되고, 이들은 혈액과 직접 접촉을 위한 것이다. 상기 방법에서 천연 및/또는 인공 표면이 제공되고 상기에서 기재된 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드가 상기 표면에 고정화된다.

이들 표면상에 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드의 고정화는 소수성 상호작용, 반데르발스 힘, 정전기적 상호작용, 수소결합, 이온성 상호작용, 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드의 교차결합을 통해서, 및/또는 표면상에 공유결합을 통해서 이루어질 수 있다. 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드의 공유결합(side-on bonding)이 바람직하며, 단일점 공유결합(side-on bonding)이 더 바람직하고, 말단점 공유결합(end-on bonding)이 더욱더 바람직하다.

어떤 천연 및/또는 인공적인 의학 제품(또는 의료기)의 표면도 본 발명에서 인공보철, 기관, 혈관, 동맥, 심장밸브(cardiac valves), 튜브, 기관 대치용부품, 이식체, 섬유체, 공동(hollow) 섬유체, 스텐트, 피하 주사기, 주사기, 막, 당체(conserves), 혈액 용기, 적정계측판, 맥박조정기, 흡착기 매질(adsorber media), 크로마토그래피 매질, 크로마토그래피 칼럼, 투석기, 연결 부품, 센서, 벤틸(ventiles), 원심분리 챔버, 복열기, 내시경, 필터, 펌프 챔버와 같은 표면으로서 및 혈친화성 특성을 가져야 하는 다른 표면과 같이 사용될 수 있다. 의료기라는 용어는 넓게 이해되어야 하며, 특히 혈액과 짧게(예컨대 내시경) 또는 영구적으로(예를 들면 스텐트) 접촉하게 되는 표면의 기구를 의미한다.

본 발명에 따른 코팅 방법은 하기에 개시된다. 생물학적 및/또는 인공적인 의료기의 표면은 하기 방법에 의하여 혈친화성 코팅으로 제공될 수 있다:

a) 의료기의 표면을 제공하고

b) 식(Ia) 또는 (Ib)에 따른 하나 이상의 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드 및/또는

40% 내지 60%의 당 단위 N-아실 글루코스아민 또는 N-아실 갈락토스아민을 함유하고 나머지 당 단위는 실질적으로 당 단위당 하나의 카르복실기를 함유하는, 하나 이상의 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드를 침착시킨다.

“침착(deposition)”은 대응하는 화합물로 표면을 적어도 일부 코팅하는 것을 의미하고, 여기서 그 화합물은 토대를 이루는(또는 하부의) 표면 위(上 ) 및/또는 안(內)에 침착 및/또는 도입 및/또는 고정화 또는 어떤 방식으로든 고정되는 것을 의미한다.

“실질적으로 나머지 당 구성 단위” 는 당 구성 단위의 나머지 60% - 40%인 나머지 당 구성 단위의 93% , 바람직하게는 96%, 더욱 바람직하게는 95%가 카르복실기를 가지는 것으로 이해되어야 한다.

비코팅된 및/또는 비혈친화성 표면이 바람직하게 제공된다. “비혈친화성” 표면은 혈액 응고계를 활성화하여 다소간 응혈성이 되는 것을 의미한다.

다른 양태는 하기 단계로 구성된다:

a) 의료기를 제공하고

b') 의료기의 표면상으로 생체안정성 층을 침착시키거나, 또는

a) 의료기를 제공하고

40% 내지 60%의 당 단위 N-아실 글루코스아민 또는 N-아실 갈락토스아민을 함유하고 나머지 당 단위는 실질적으로 당 단위당 하나의 카르복실기를 함유하는, 하나 이상의 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드를 침착시키고,

b') 의료기의 표면상으로 생체안정성 층을 침착시키고,

d') 식(Ia) 또는 (Ib)에 따른 하나 이상의 본 발명의 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드 및/또는

40% 내지 60%의 당 단위 N-아실 글루코스아민 또는 N-아실 갈락토스아민을 함유하고 나머지 당 단위는 실질적으로 당 단위당 하나의 카르복실기를 함유하는, 하나 이상의 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드의 혈친화성 층을 더 침착시킨다.

마지막에 언급한 양태는 이식 동안에 부적절한 복잡한 조건이나 부적절한 이송 등으로 폴리머 층 및 외부의 혈친화성 층과 함께 기계적으로 손상을 받은 경우 조차에서도 표면 코팅이 그 혈친화성 특성을 잃지 않도록 보장하는 것이다.

“생물학적 및 인공적인” 표면은, 예를 들면 인공적인 심장 밸브를 가진 돼 지 심장과 같이 인공적인 의료기와 인공적인 부품의 배합으로 이해되어야 한다.

단일층은 바람직하게는 디핑 또는 스프레이 방법에 의하여 침착되는 반면, 하나의 층의 침착과 동시에 하나 이상의 활성제를 의료기 표면에 침착할 수 있고 이어서 공유적으로 및/또는 접착적으로 결합된 각각의 층으로 이행된다. 이러한 방법으로 하나 이상의 활성제는 의료기상에 혈친화성 층의 침착과 동시에 침착된다.

활성제와 생체 안정성 또는 생체 분해성 층으로 사용될 수 있는 물질은 하기에 더 열거된다.

이 첫 번째 생체 안정성 또는 혈친화성 층 위로, 추가로 필수적인 단계는 아니지만 c) 하나 이상의 활성제의 활성제 층을 침착하는 것도 가능하다, 바람직한 양태에서, 활성제(들)는 그 아래(하부) 층상에 공유적으로 결합될 수 있다. 또한 활성제는 바람직하게는 디핑(또는 침적; dipping) 또는 스프레이 방법에 의하여 침착되는 것이 바람직하다.

단계 b) 또는 단계 c) 다음에, 혈친화성 층 또는 활성제층 상으로 하나 이상의 생체 분해성 층 및/또는 하나 이상의 생체 안정성층의 침착으로 이루어진 추가적인 단계 d)를 수행할 수 있다.

상기 다른 양태에 따라, 단계 b') 또는 단계 c) 다음에, 혈친화성 층으로서 식(Ia) 또는 (Ib)에 따른 하나 이상의 본 발명의 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드, 및/또는 40% 내지 60%의 당 단위 N-아실 글루코스아민 또는 N-아실 갈락토스아민을 함유하고 나머지 당 단위는 실질적으로 당 단위당 하나의 카르복실기를 함유하는, 하나 이상의 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드의 혈친화성 층의 침착 또는 고정화로 이루어진 단계 d‘)를 수행할 수 있다. 바람직하게는 단계 b') 다음에 단계 d')를 수행한다.

단계 d) 또는 단계 d') 다음에, 하나 이상의 활성제의 또 다른 활성제 층의 침착은 아래의 생체 분해성 층 및/또는 생체 안정성 층 또는 혈친화성 층 내로 또는 위로 일어날 수 있다.

침착된 활성제 층에 추가적으로, 생체 안정성, 생체 분해성 및/또는 혈친화성 층은 생체 안정성 및/또는 생체 분해성 물질 또는 혈친화성 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드와 함께 의료기 상에 침착될 수 있고 각각의 층에 함유될 수 있는 활성제를 더 함유할 수 있다.

바람직한 양태에 따르면, 생체 안정성 층은 공유적으로 및/또는 접착적으로 의료기의 표면상에 결합되고, 바람직하게는 공유적으로 생체 안정성 층에 결합된 혈친화성 층으로 완전하게 또는 불완전하게 덮여진다.

바람직하게는 혈친화성 층은, 항혈전 활성을 책임지는 5당체의 분자량에서, 즉 구입가능한 13 kD의 표준분자량까지, 상이한 설페이트화 계수(설페이트화 정도) 및 상이한 아실레이트화 계수(아실레이트화 정도)의 부위 선택적으로 합성된 유도체의 천연 헤파린, 헤파란 설페이트 및 그 유도체, 적혈구 글리코칼릭스의 올리고- 및 폴리사카라이드, 탈설페이트화 및 N-재아세틸레이트화 헤파란, N-카르복시메틸화 및/또는 불완전하게 N-아세틸화된 키토산, 이들의 혼합물을 포함한다.

본 발명의 대상은 또한 여기에서 언급된 방법 중의 하나에 따라 혈친화적으로 코팅된 의료기이다.

본 발명의 또 다른 대상은 의료기에서 그 표면이 직접 또는 하나 이상의 중간에 삽입되는 생체 안정성 및/또는 생체 분해성 층 및/또는 활성제 층을 통하여 생체 융화성 층으로 덮여지는데, 상기 혈친화성 층은 40% 내지 60%의 당 단위 N-아실 글루코스아민 또는 N-아실 갈락토스아민을 함유하고 및 나머지 당 단위는 실질적으로 당 단위당 하나의 카르복실기를 함유하는, 하나 이상의 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드로 이루어진다.

바람직한 양태에 따르면, 상기 언급한 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드의 혈친화성 층의 아래에 하나 이상의 생체 안정성 층이 존재하고, 추가적으로 그 층은 의료기의 표면에 공유적으로 결합되는 것이 바람직하다.

혈친화성 층 상에 하나 이상의 생체 안정성 및/또는 생체분해성 층이 존재하고 그것은 생체 융화성 층을 완전하게 또는 불완전하게 덮는 것이 바람직하다. 특히, 생체 분해성 층은 혈친화성 층을 덮는 것이 바람직하다.

또한 바람직한 양태는 생체 안정성의 더 낮은 층과 아래의 혈친화성 층 사이에, 혈친화성 층에 공유적으로 및/또는 접착적으로 결합된 하나 이상의 항증식성, 항염증성 및/또는 항혈전성 활성제의 활성제 층을 함유한다. 활성제 층에 양자 택일적으로 또는 활성제 층에 추가적으로, 더 낮은 생체 안정성 및/또는 더 높은 혈친화성 층은 바람직하게는 각각의 층의 침착과 함께 침착되는 활성제를 더 함유할 수 있다.

기본적으로 모든 층, 즉 생체 안정성 층, 생체 분해층 및 혈친화성 층은 하나 이상의 항증식성, 항염증성 및/또는 항혈전성 활성제를 함유할 수 있고, 상기 언급한 층들 사이에 하나 이상의 활성제의 활성제 층이 존재할 수 있다. 바람직한 것은 2개의 층, 생체 안정성 및 혈친화성 층의 코팅 계인 반면에, 혈친화성 층은 외부 층이고 양 층은 하나 이상의 활성제를 함유할 수 있다. 추가로 혈친화성 층의 아래 또는 위에 하나 이상의 활성제의 활성제 층이 존재하는 것이 바람직하다. 생체 안정성, 생체 분해성 및 혈친화성 층으로 이루어진 3층계가 바람직하다. 따라서, 가장 낮은 층은 생체 안정성 층이다. 추가적으로 하나 이상의 활성제 층이 가능하다. 2개의 활성제 층을 서로 위에 직접 침착하는 것도 가능하다. 추가로 바람직한 양태로서, 하나 이상의 활성제가 공유적으로 어떤 층의 위 또는 내에 결합되는 것이 바람직하다.

활성제로서 코팅방법 및 의료기 상에 바람직하게 사용될 수 있는 것은 타크롤리무스(tacrolimus), 피테크롤리무스(pimecrolimus), PI88, 티모신 α-1, PETN (펜타데리트리톨 테트라니트레이트), 바카틴(baccatin) 및 그 유도체, 도세탁셀(docetaxel), 콜키신(colchicin), 파클리탁셀(paclitaxel) 및 그 유도체, 트라피딜(trapidil), 알파- 및 베타-에스트라디올(estradiol), 데르미시딘(dermicidin), 티알린(tialin, 2-메틸티아졸리딘-2,4-디카르복시산), 티알린-나트륨(티알린의 나트륨염), 심바스타틴(simvastatine), 거대환 아산화물(MCS) 및 그 유도체, 시롤리무스(sirolimus), 티르포스틴(tyrphostines), D24851, 콜키신, 푸마르산 및 푸마르산 에스테르, 활성화된 단백질 C (aPC), 인터루신-1ß 전해제, 및 멜라노사이트 자극 호르몬 (알파-MSH), 이들의 혼합물 등이다.

본 발명의 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드, 또는 40% 내지 60%의 당 단위 N-아실 글루코스아민 또는 N-아실 갈락토스아민을 함유하고 및 나머지 당 단위는 실질적으로 당 단위당 하나의 카르복실기를 함유하는 올리고사카라이드 및/또는 폴리사카라이드의 혈친화성 층으로 본 발명에서 기재된 방법으로 코팅된 의료기의 천연 및/또는 인공적인 표면은, 혈액 회로 및 혈액과 직접 접촉하게 도는 각각의 이식체 및 기관 대체용부품으로서 특히 적합하다. 본 발명에 따라 코팅된 의료기는 직접적인 및 영구적인 혈액 접촉에 특별히 적당할 뿐만 아니라, 그러한 코팅 표면상으로 단백질의 접착을 감소 또는 방지까지 하는 특징을 놀랍게도 보여준다.

혈액과 접촉하게 되는 외부 표면상의 혈장 단백질의 접착은 혈액계의 인식과 실행 작용에 관한 추후 과정에 대한 필수적이고 초기 단계이다.

예를 들면, 이것은 체액으로부터 체외 진단에서 중요하다. 그래서 본 발명의 코팅의 침착은, 예를 들면, 진단 검출 방법으로 사용되는 마이크로-적정계측판이나 다른 지지 매질 상에 단백질의 비특이적인 접착(일반적으로 민감한 테스트 반응을 방해하고 분석 결과의 오류를 유발할 수 있다)을 방지하거나 적어도 감소시킨다.

흡착 매질이나 크로마토그라피 매질상에 본 발명에 따른 코팅을 이용하여, 단백직의 비특정 흡착을 또한 방지하거나 줄일 수 있으므로, 이로써 더 좋은 분리를 달성하여 더 높은 순도의 제품을 생성시킬 수 있다.

특히 스텐트는 본 발명의 방법에 따라 코팅된다. 폐색혈관의 풍선 확장술을 이용한 스텐트(stent)의 이식은 지난 몇 년 동안 계속적으로 실행되어 왔다. 스텐트는 새로워진 혈관 폐색의 위험을 줄이기는 하지만, 아직까지는 그러한 재협착증 을 완전하게 예방하지는 못한다.

재협착증의 정확한 개념은 전문적 문헌에 설명되어 있지 않다. 재협착증에 대해 대체로 이용되는 형태적 정의는 성공적인 PAT (경피적 혈관성형술) 후 혈관 직경이 정상적인 혈관의 직경보다 50% 미만으로 줄어드는 것이다. 이는 경험상 정한 수치이긴 하나 혈류역학 관련성과 이의 임상병리와의 관계가 대규모의 과학적인 기초에 근거한 것이 아니다. 실전에서 환자의 임상적 악화는 흔히 종전에 치료받은 혈관 부위의 재협착증의 징후로 관찰된다.

스텐트에 의하여 야기되는 재협착증에 대한 3 가지 다른 이유가 있다.

a) 이식 후 첫 번째 기간동안 스텐트 표면은 혈액과 바로 접하고 있으며 현재의 외부 표면 때문에 혈관을 다시 폐색시키는 급성 혈전증이 일어날 수 있다.

b) 스텐트 이식은 혈관손상을 야기하며, 이러한 혈관손상은 염증 반응을 야기하고 염증 반응은 첫 7일 동안 회복 과정동안 중요한 역할을 한다. 이하의 동시 발생 과정들은, 통제되지 않는 증가 때문에 급속하게 혈관의 폐색을 다시 야기하는 평활근 세포가 증가하여 증식을 초래하는 증가 요소의 방출과 관련 있는 것들 중의 하나이다.

c) 2주 후에 스텐트는 혈관 조직으로 성장한다. 이는 스텐트가 전적으로 평활근 세포에 의하여 둘러 쌓여 있고 혈액과는 접촉하지 않는다는데 있다. 이러한 반흔화는 지나치게 두드러질 수 있고(네오인티마 하이퍼플라시아), 스텐트 표면을 덮을 뿐만 아니라 스텐트의 내부 공간 전체를 폐색시킬 수도 있다.

헤파린으로 스텐트를 코팅하여 재협착의 문제를 해결하려는 시도가 있었으나 허사였다 (J. Whorle et al., European Heart Journal (2001) 22, 1808-1816). 헤파린은 단지 첫 번째 언급된 원인만을 항응고제로서 다루고 있고 게다가 그의 전체적인 효과가 용액 상태에서만 발휘될 수 있다. 한편, 이러한 첫 번째 문제는 항응고제의 투여에 의해 약물적으로 거의 완전하게 피할 수 있다. 두 번째 및 세 번째 문제는 본 발명에 의하여 스텐트상의 국부적인 평활근 세포의 성장을 억제함으로써 해결하고자 하고 있다. 이것은 예를 들면 방사성 스텐트 또는 약물학적 활성제를 함유하는 스텐트에 의해 수행된다.

US-A-5 891 108은 예로서 중공형태로 성형된 스텐트를 제시하는데 이 스텐 트는 내부에 제약학적 활성 물질을 포함하고 있고 이들 물질은 스텐트에서 여러 개의 출구를 통하여 방출될 수 있다. EP-A-1 127 582는 활성 물질의 제공에 적당한 표면위에 0.1 ㎜ 내지 1 ㎜의 깊이와 7 ㎜ 내지 15 ㎜의 길이의 도랑을 판 스텐트를 제시한다. 이러한 활성 물질 저장소는 중공 형태의 스텐트에 있는 출구와 유사하게, 함유된 약제학적 활성 물질을 정확히 고농도로 비교적 긴 기간 동안에 방출하며, 이는 평활근 세포가 스텐트를 더 이상 에워쌀 수 없거나 단지 상당히 더디게 에워쌀 수 있다는 사실을 제공한다. 결과적으로 스텐트는 혈액에 보다 장시간 노출되며, 이것은 다시 혈전증에 의하여 증가된 혈관 폐쇄를 유도한다(Liistro F., Colombo A., Late acute thrombosis after paclitaxel eluting stent implantation. Heart (2001) 86 262-4).

이러한 문제의 한 가지 해결 방법은 생체적합성 물질의 포스포릴콜린 코팅(WO 0101957)에 의하여 제시될 수 있다. 즉, 적혈구 세포 멤브레인의 성분인 포스 포릴콜린이 스텐트 위에 코팅된 비생체분해성 중합체 층의 구성요소로서 비혈전형성 표면을 형성한다. 상기 분자량에 의존하여 이러한 활성제는 중합체 함유 포스포릴콜린 층에 의해 흡수되거나 표면에 흡착된다.

본 발명에 따른 스텐트는 혈친화성 층으로 코팅되어 있고, 하나 이상의 항증식성 및/또는 항염증성, 필요하다면 항혈전성 활성제를 포함하는 하나 이상의 추가적인 층으로 코팅되어 있는 것을 특징으로 한다.

스텐트의 혈친화성 코팅은 필요한 혈액 친화성과 활성제(또는 활성제 배합물)를 제공하며, 이러한 활성제는 스텐트 표면에 전체적으로 균일하게 분포되어 있고 이러한 세포, 특히 평활근 및 내피 세포에 의한 스텐트 표면의 피복은 조절된 방법으로 일어날 수 있도록 제공한다. 따라서 세포에서 재협착증에 이를 수 있는 세포에 의한 급격한 증가나 과성장이 스텐트 표면에 일어나지 않는다. 반면에 스텐트 표면을 세포로 덮는 것은 혈전증의 위험을 동반하는 약의 고농도의 약물에 의하여 완전하게 방지될 수는 없다.

따라서 활성제의 배합은 하부 층(subjacent layer)에 공유적으로 및/또는 접착적으로 결합되고/되거나 층 내로 공유적으로 및/또는 접착적으로 채워지는 활성제나 활성제 배합물이 계속적으로 조금씩 방출되도록 함으로서 세포에 의한 스텐트 표면은 증가를 억제시키지는 못하지만 과성장은 억제되도록 보장할 것이다.

이러한 양 효과의 배합은 발명적 가치가 있는 스텐트에 혈관 벽내로 급격하게 자랄 수 있는 능력을 부여하고 재협착증과 혈전증의 위험을 줄인다. 하나 이상의 활성제의 방출은 1개월 내지 12개월의 기간동안 지속될 수 있으며, 보다 바람직 하게는 이식 후에 1개월 내지 2개월동안 지속될 수 있다.

항증식성 물질, 항혈전성 화합물은 물론 항염증 화합물도 활성제로 사용된다. 바람직하게는 시토스테틱, 마크로리드 항생제 및/또는 스타틴이 항증식성 활성제로 사용된다. 적용 가능한 항증식성 활성제는 시로리무스(라파마이신), 에베로리무스, 피메크로리무스, 소마토스타틴, 타크로리무스, 록시드로마이신, 두나이마이신, 아스코마이신, 바필로마이신, 에리드로마이신, 미데카마이신, 조사마이신, 콘카나마이신, 클라리트로마이신, 트로레안도마이신, 폴리마이신, 세리바스타틴, 심바스타틴, 로바스타틴, 플루바스타틴, 로수바스타틴, 아토르바스타틴, 프라바스타틴, 피타바스타틴, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 빈데신, 비노렐빈, 에토포시드, 테니포시드, 니무스틴, 카르무스틴, 로무스틴, 시클로포스파미드, 4-하이드록시옥시시클로포스파미드, 에스트라무스틴, 멜파란, 베툴린산, 캄프토테신, 라파콜, β-라파콘, 포도필로톡신, 베툴린, 트로포스파미드, 포도필릭산 2-에틸하이드라지드, 이포스파미드, 클로람부실, 벤다무스틴, 다카르바진, 부술판, 프로카르바진, 트레오술판, 테모졸로미드, 멜라노사이트-자극 호르몬(α-MSH), 디오테파, 다우노루비신, 독소루비신, 아클라루비신, 에피루비신, 미톡산트론, 이다루비신, 블레오마이신, 미토마이신, 닥티노마이신, 메토트렉세이트, 플루다라빈, 플루다라빈-5'-디하이드로젠인산염, 모페부타존, 아세메타신, 디클로페낙, 로나조락, 다프손, o-카바모일페녹시아세트산, 리도카인, 케토프로펜, 메페남산, 피록시캄, 멜록시캄, 클로로퀸 인산염, 페니실라민, 하이드록시클로로퀸, 아우라노핀, 쇼듐 아우로티오말레이트, 옥사세프롤, 셀레콕시브, β-시토스테린, 아데메티오닌, 미르테카인, 폴리도카놀, 노니바미드, 레노멘톨, 벤조카인, 아에스신, 클라드리빈, 메르카프토푸린, 티오구아닌, 시타라빈, 플루오로우라실, 젬시타빈, 카페시타빈, 도세탁셀, 카보플라틴, 시스플라틴, 옥살리플라틴, 암사크린, 이리노테칸, 토포테칸, 하이드록시카바미드, 밀테포신, 펜토스타틴, 알데슬레우킨, 트레티노인, 아스파라기나제, 트라스투주마브, 엑세메스탄, 레트로졸, 코세렐린, 페팔로만닌, 페가스파라제, 아나스트로졸, 포르메스탄, 아미노글루테티미드, 아드리아마이신, 아지트로마이신, 스피라마이신, 세파란틴, smc 증식 억제제-2w, 에포틸론 A와 B, 미톡산트론, 아자디오프린, 미코페놀라트모페틸, c-myc-안티센스, b-myc-안티센스, 셀렉틴(사이토킨 길항제), CETP 억제제, 카드헤리네스, 사이토키닌 억제제, COX-2 억제제, NFkB, 안지오펩틴, 시프로플록사신, 캄프토테신, 플루로블라스틴, 근육세포 증식을 억제하는 모노클로날 항체, bFGF 길항제, 프로부콜, 프로스타글란딘스, 폴산 및 이의 유도체, B-계열의 비타민, 칼시포트리올과 타칼시톨과 같은 비타민 D-유도체, D24851, 디메틸푸마레이트와 같은 푸마르산 및 이의 유도체, IL-1 β 억제제, 콜키신, 펜타에리트리톨 테트라니트레이트와 신드노에이민과 같은 NO 제공자, S-니트로소유도체, 타모시펜, 스타우로스포린, β-에스트라디올, α-에스트라디올, 에스트론, 에스트리올, 에티닐에스트라디올, 포스페스트롤, 메드록시프로게스테론, 에스트라디올 시피오네이트, 에스트라디올 벤조에이트, 트라닐라스트, 카메바카우린, 암치료에 적용되는 다른 테르페노이드, 베라파밀, 티로신 키나제 억제제(티르포스틴), 시클로스포린 A, 파클리탁셀 및 이의 유도체(6-α-하이드록시-파클리탁셀, 바카틴 등), 탁소테레와 같은 유도체, 합성되거나 천연 원료로 얻어진 카본 서브옥사이드의 거대환 올리고머(MCS)와 이의 유도체, 몰그라모스팀(rhuGM-CSF), 페긴테르페론 α-2b, 레노그라스팀(r-HuG-CSF), 필그라스팀, 마크로골, 다카르바진, 레트로졸, 고세렐린, 세파로만닌, 트라스투주마브, 엑세메스탄, 바실리시마브, 다클리주마브, 엘립티신, D-24851(칼비이오켐), 콜세미드, 시토칼라신 A-E, 인다노신, 노코다졸, S 100 단백질, PI-88, 멜라노사이트 자극 호르몬(α-MSH), 바시트라신, 비트로넥틴 수용체 길항제, 아젤라스틴, 메탈 프로데이나제-1과 -2의 구아니딜 시클라제 자극제 조직 억제제, 자유 핵산, 바이러스 전달물질내로 혼입된 핵산, DNA와 RNA 단편, 플라스미노젠 활성물 억제제-1, 플라스미노겐 활성물 억제제-2, 안티센스 올리고뉴클레오티드, 인테로레우신-1β 억제제, IGF-1로 불리우는 VEGF 억제제.

항생제의 그룹으로부터 추가로 세파드록실, 세파졸린, 세파클로르, 세포틱신, 토브라마이신, 젠타마이신이 사용된다. 수술 후 상태에 대한 긍정적인 영향이 있는 것은 디클록사실린과 같은 페니실린, 옥사실린, 술폰아미드, 메트로니다졸, 아르가트로반과 같은 항혈전제, 아스피린, 아브식시마브, 합성 항혈전, 비발리루딘, 코우마딘, 데르미시딘, 에녹사파린, 헤모파린, 조직 플라스미노겐 활성제, GpⅡb/Ⅲa 플라텔레트 멤브레인 수용체, 펙터 Xa 억제제, 활성 단백질 C, 데르미시딘, 항체, 헤파린, 히루딘, r-히루딘, PPACK, 프로타민, 프로우로키나제, 스트렙토키나제, 와파린, 우로키나제, 디피라미돌과 같은 바소딜라터, 트라피딜, 니트로프루시데스, 트리아졸로피리미딘과 세라민과 같은 PDGF 길항제, 카프토프릴과 같은 ACE 억제제, 실라자프릴, 리시노프릴, 에날라프릴, 로사르탄, 디올프로테아제 억제제, 카스파제 억제제, 세포소멸 억제제, p65, NF-kB 또는 Bcl-xL 안티센스 올리고뉴클레오티드 및 프로스타시클린와 같은 세포소멸 조절제, 바피프로스트, α, β및 γ 인터페론 , 히스타민 길항제, 세로토닌 블록커, 할로푸기논, 니페디피네, 토코페롤, 트라니라스트, 몰시도민, 티 폴리페놀, 에피카테친 갈라테, 에피갈로카테친 칼라테, 보스웰산과 그 유도체, 레플루노미드, 아나킨라, 에타네르셉트, 설파살라진, 에토포시드, 디클록사실린, 테트라시클린, 트리암시놀론, 무타마이신, 프로카인아미드, 레티노산, 퀴니딘, 디소피리미드, 플레카이니드, 프로파페논, 소탈롤, 아미도론이 있다. 추가의 활성제는 스테로이드계(하이드로코르티손, 베타메타손, 덱사메타손), 페노포르펜과 같은 비스테로이드계 물질(NSAIDS), 이부프로펜, 인도메타신, 나프록센, 페닐부타존 등이 있다. 아실클로비르, 간시클로비르 및 지도부딘과 같은 항바이러스 물질도 적용 가능하다.

다른 항진균 물질도 이 영역에서 사용된다. 예로는 클로트리마졸, 플루시토신, 그리세오풀빈, 케토코나졸, 미코나졸, 니스타틴, 테르비나핀이 있다. 클로로퀸, 메플로퀸, 퀴닌과 같은 항원생동물 물질은 동일한 정량에 있어서 효과적인 활성제이며, 게다가 히포에스쿠린과 같은 천연 테르페노이드, 바링토게놀-C21-안젤레이트, 14-데하이드로아그로스티스타친, 아그로스케린, 아그로스티스타친, 17-하이드록시아그로스티스타친, 오바토디올리드스, 4,7-옥시시클로아니소멜산, 바카리노이드 B1, B2, B3, 투베이모시드, 브루세아놀 A, B 및 C, 브루세안티노시드 C, 야단지오시드 N 및 P, 이소데옥시엘레판토핀, 토멘판토핀 A 및 B, 코로나린 A, B, C 및 D, 우르솔산, 힙타트산 A, 제오린, 이소이리도제르마날, 마이텐폴리올, 에푸산틴 A, 엑시사닌 A 및 B, 롱기카우린 B, 스컬포네아틴 C, 카메바우닌, 레우카메닌 A 및 B, 13,18-데하이드로-6-α-세네시오일록시카파린, 1,11-디메톡시칸딘-6-온, 1-하이드록시-11-메톡시칸딘-6-온, 스코폴렉틴, 탁사마이린 A 및 B, 레제닐롤, 트리프토리드, 더욱이 시마린, 아포시마린, 아리스톨로키산, 아놉테린, 하이드록시아놉테린, 아네모닌, 프로토아네모닌, 베르베린, 켈리부린 클로라이드, 식토신, 시노코쿨린, 봄브레스타틴 A 및 B, 쿠드라이소플라본 A, 쿠르쿠민, 디하이드로니티딘, 니티딘 클로라이드, 12-β-하이드록시프레그나디엔-3,20-디온, 빌로볼, 진크골, 진크골산, 헬레날린, 인디신, 인디신-N-옥사이드, 라지오카르핀, 이노토디올, 글리코시드 1a, 포도필로톡신, 주스티시딘 A 및 B, 라레아틴, 말로테린, 말로토크로마놀, 이소부티릴말로토크로마놀, 마퀴노시드 A, 마찬틴 A, 마이탄신, 리코리디신, 마르게틴, 판크라티스타틴, 리리오데닌, 옥소우신수닌, 아리스토락탐-All, 비스파르테노리딘, 페리플로코시드 A, 갈라키노시드, 우르솔산, 데옥시프소로스페르민, 프시코루빈, 리신 A, 산구이나린, 만우 밀산, 메틸소르비폴린, 스파델리아크로멘, 스티조필린, 만소닌, 스트레블로시드, 아카게린, 디하이드로우삼바라렌신, 하이드록시우삼바린, 스트리크노펜타민, 스트리크노필린, 우삼바린, 우삼바렌신, 베르베린, 리리오데닌, 옥소우신수닌, 다프노레틴, 라리시레시놀, 메톡시라리시레시놀, 시링가레시놀, 움벨리페론, 아프로모손, 아세틸비스미온 B, 데스아세틸비스미온 A, 비스미온 A 및 B, 추가로 히포카에스쿨린과 같은 천연 테르페노이드계, 14-데하이드로아그로스티스타친, 아그로스케린, 아그로스티스타친, 17-하이드록시아그로스티스타친, 오바토디올리드, 4,7-옥시시클로아니소멜산, 야단지오시드 N 및 P, 이소데옥시엘레판토핀, 토멘판토핀 A 및 B, 코로나린 A, B, C 및 D, 우르솔산, 힙타르산 A, 제오린, 이소이리도게르마날, 마이텐폴리올, 에푸산틴 A, 엑시사닌 A 및 B, 롱기카우린 B, 스컬포네아틴이 있다.

활성제는 개별적으로 또는 같거나 다른 농도로 혼합하여 사용된다. 특별히 바람직한 것은 그들은 항증식 효과 외에 면역억제 성질을 가지고 있는 활성제이다. 그와 같은 활성제에는 에리드로마이신, 미데카마이신, 타크로리무스, 시놀리무스, 파클리탁셀 그리고 조사마이신이 있다. 추가로 바람직한 것은 몇 가지 항증식 작용 물질들 또는 항증식 활성제들과 면역 억제 활성제를 함께 배합하는 것이다.

본 발명에서 바람직한 것은 타크로리무스, 피메크롤리무스, PI88, 티모신 α-1, PETN(펜타에리트리톨 테트라니트릴), 바카틴 및 그 유도체, 도세탁셀, 콜키신, 파클리탁셀 및 그 유도체, 트라피딜, α- 및 β-에스트라디올, 데르미시딘, 심바스타틴, 거대환 카본 서브옥사이드(MCS)와 그 유도체, 시놀리무스, 티르포스티네스, D24851, 콜키신, 푸마르 및 푸마르산 에스테르, 활성 단백질 C(aPC), 인터루신-1β 억제제 및 멜라노사이트-자극 호르몬(α-MSH) 및 티아린-Na(티아린의 나트륨염)뿐만 아니라 티아린(2-메틸티아졸리딘-2,4-디카르복실산)이 있다.

활성제는 바람직하게는 활성제 층 또는 활성제 함유층 당, 스텐트 표면적(㎠)당 0.001 ㎎내지 10 mg의 제약학적 활성농도로 함유하는 것이다. 추가적인 활성제는 같은 층 또는 다른 층에 비슷한 농도로 함유될 수 있다.

본 발명에 따라 코팅된 의료기, 특히 본 발명에 따라 코팅된 스텐트는 활성제 또는 활성제들을 조절하여 연속적으로 방출할 수 있으며, 재협심증의 예방 또는 감소를 위하여 적당하다.

스텐트를 직접적으로 덮고 있는 혈친화성 층은 천연산 헤파린뿐만 아니라 합성적으로 얻어지는 유도체를 함유하며, 이러한 유도체는 구매가능한 헤파린의 표준 분자량까지 항혈전 작용에 책임이 있는(즉 원인의 되는) 5당체의 분자량 범위에서 상이한 설파티온 계수(설파티온 정도)와 아실레이션 계수(아실레이션 정도)를 가지는 유도체이고, 예로는 헤파란 설페이트와 그 유도체, 적혈구 글리코칼릭의 올리고- 및 폴리-사카라이드(이들은 포스포릴콜린과 달리 혈액과 적혈구의 실제적인 접촉이 일어나기때문에 적혈구의 항혈전 표면을 완벽하게 복사한다.), 완전하게 탈설페이트화되고 N-재아세틸레이트화된 헤파린, 탈설페이트화되고 N-재아세틸레이트화된 헤파린, N-카르복시메틸레이트화되고/되거나 불완전하게 N-아세틸화된 키토산, 키토산 및/또는 이들 물질들의 혼합물이 있다. 혈친화 코팅을 가지는 이러한 스텐트는 통상적으로 보통의 비코팅 스텐트를 제공하여 제조되거나, 활성제의 방출에 이어서, 활성제의 영향의 감소와 매트리스의 분해 후에 이식 표면을 영구히 가리는 혈친화성 층의 바람직한 공유 침착에 의하여 제조된다.

방법 발명에 의하여 코팅될 수 있는 통상적인 스텐트는 스테인레스 강, 니티롤 또는 다른 금속 및 합금, 또는 합성수지로 이루어진다.

발명에 따른 스텐트의 다른 바람직한 양태는 적어도 두개의 층을 이루는 코팅을 제시한다. 다층 시스템도 자주 사용된다. 이러한 다층 시스템에서는 스텐트 상에 직접적으로 침착되어 있는 층을 첫 번째 층이라 한다. 두번째 층은 첫 번째 층위에 적층되어 있는 층이다.

두 층 디자인에 따라서, 첫 번째 층은 공유적으로 및/또는 접착적으로 결합 되는 하나 이상의 항증식성, 항염증성 및/또는 항혈전성 활성제를 포함하는 생분해층에 의하여 실질적으로 완전하게 덮여 있는 혈친화성 층으로 이루어진다. 또한, 서로 촉진되거나 보충되는 활성제 배합물이 적용된다.

외부 층을 위한 생체분해성 물질로서 다음의 것이 사용될 수 있다: 폴리발레롤락톤, 폴리-ε-데카락톤, 폴리락톤산, 폴리글리콜산, 폴리락티드, 폴리글리콜라이드, 폴릭락티드와 폴리글리콜라이드의 공중합체, 폴리-ε-카프로락톤, 폴리하이드록시부타노산, 폴리하이드록시부티레이트, 폴리하이드록시발레레이트, 폴리하이드록시부티레이트-코-발레레이트, 폴리(1,4-디옥산-2,3-디온), 폴리(1,3-디옥산-2-온), 폴리-파라-디옥사논, 폴리말레익 안하이드라이드와 같은 폴리안하이드라이드, 폴리하이드록시메타크릴레이트, 피브린, 폴리시아노아크릴레이트, 폴리카프롤락톤디메틸아크릴레이트, 폴리-b-말레산, 폴리카프로락톤부틸아크릴레이트, 올리고카프로락톤디올과 올리고디옥사논디올로 부터 형성되는 것과 같은 멀티블록 폴리머, PEG와 폴리부틸렌테레프탈레이트와 같은 폴리에테르 에스테르 멀티블록 폴리머, 폴리피보토락톤, 폴리글리콜산 트리메틸카르보네이트, 폴리카프로락톤-글리콜라이드, 폴리(g-에틸글루타메이트), 폴리(DTH-이미노카보네이트), 폴리(DTE-코-DT-카보네이트), 폴리(비스페놀-A-이미노카보네이트), 폴리오르토에스테르, 폴리클리콜산 트리메틸-카르보네이트, 폴리트리메틸카르보네이트, 폴리이미노카르보네이트, 폴리(N-비닐)피롤리돈, 폴리비닐알콜, 폴리에스테르아미드, 글리콜화된 폴리에스테르, 폴리포스포에스테르, 폴리포스파젠, 폴리[(p-카르복시페녹시)프로판], 폴리하이드록시펜타노산, 폴리안하이드라이드, 폴리에틸렌옥사이드-프로필렌옥사이드, 소프트 폴리우레탄, 골격에 아미노산 잔기를 가지고 있는 폴리우레탄, 폴리에틸렌옥사이드와 같은 폴리에테르 에스테르, 폴리알켄옥살레이트, 폴리오르토에스테르 및 이들의 공중합체, 지질, 카라지난, 피브리노겐, 전분, 콜라겐, 단백질-기본 폴리머, 폴리아미노산, 합성 폴리아미노산, 제인, 변형된 제인, 폴리하이드록시알카노에이트, 펙트산, 액틴산, 변형된 및 변형되지 않은 피브린 및 카세인, 카르복시메틸설페이트, 알부민, 히알루론산, 키톤산 및 이의 유도체, 헤파란설페이트 및 이의 유도체, 헤파린, 콘드로이틴설페이트, 덱스트란, b-시클로덱스트린, PEG와 폴리프로필렌글리콜의 공중합체, 아라비아 검, 구아르, 젤라틴, 콜라젠, 콜라젠-N-하이드록시숙신이미드, 지질, 인지질, 상기 언급된 물질의 변형체 및 공중합체 및/또는 혼합물.

활성제를 함유한 층과 층들은 각각 혈액의 성분에 의하여 천천히 분해되어 활성제는 분해 속도에 따라서 외부 층에서 방출되거나 용출 형태에 따른 매트릭스로부터 자체적으로 용해된다. 첫 번째 혈친화성 층은 일단 생분해층이 분해되면, 스텐트의 필요한 혈액 친화성을 보장한다. 이러한 외부층의 생물학적 분해와 이에 상응하는 활성제의 방출은 특정 기간 동안만 세포의 성장을 강력히 억제하고, 외부층이 이미 광범위하게 분해되는 곳에서 목적하는 조절된 접착이 가능하게 한다. 외부층의 생물학적 분해는 1달에서 36달까지 유익하게 지속되고, 바람직하게는 1달에서 6달, 특히 바람직하게는 1달에서 2달 지속된다. 이와 같은 스텐트는 재협착증을 방지하거나 최소한 강력하게 감소시킨다. 이러한 기간동안, 중요한 치료 절차가 일어난다. 마지막으로 혈친화성 층은 항혈전 표면으로 남으며 외부 표면을 가려서 아무런 생명을 위협하는 반응이 더 이상 일어나지 않도록 한다.

의료기, 바람직하게는 스텐드상의 표면상에 침착된 중합체의 양은, 0.01 내지 3mg/층, 바람직하게는 0.20 내지 1mg/층, 특히 바람직하게는 0.2 내지 0.5mg/층이다.

이러한 스텐트는 다음의 원리에 따라서 이루어지는 스텐트의 혈친화성 코팅을 위한 방법을 통하여 마련될 수 있다:

a) 비코팅된 스텐트를 준비하는 단계;

b) 바람직하게 공유적으로 결합된 혈친화성 층을 침착시키는 단계;

c) 활성제를 혈친화성 층으로 확산시키는 단계, 또는

c') 하나 이상의 활성제를 디핑시키거나 분무하는 방법을 통하여 혈친화성 층을 실질적으로 완전하게 코팅하는 단계, 또는

c'') 하나 이상의 활성제를 포함하거나 그 자체가 활성제를 나타내는 하나 이상의 생분해층 및/또는 생체안정층으로 디핑시키거나 분무하는 방법을 통하여 혈친화성 층을 실질적으로 완전하게 및/또는 불완전하게 코팅하는 단계.

코팅의 원리는 활성제를 위해 고안된 요건과 관련하여 다양한 종류의 변화를 제공하고, 다른 코팅 형태로 분리될 수 있으며, 이들은 또한 서로 결합될 수도 있다.

코팅 원리 Ⅰ:

a) 비코팅된 스텐트를 준비하는 단계;

b) 혈친화성 층을 침착시키는 단계;

c) 매트릭스 없이 혈친화성 층 위에 활성제 또는 활성제 배합물을 침착시키 는 단계;

d) 매트릭스 없이 혈친화성 층 위에 활성제 또는 활성제 배합물을 침착시켜 확산조절을 위하여 생분해성 및/또는 생안정성 물질로 층들을 실질적으로 완전하게 및/또는 불완전하게 코팅하는 단계.

코팅 원리 Ⅱ;

a) 비코팅된 스텐트를 준비하는 단계;

b) 혈친화성 층을 침착시키는 단계;

c) 혈친화성 층에 공유적으로 및/또는 접착적으로 결합한 하나 이상의 활성제를 포함하는 하나 이상의 생분해층 및/또는 생체안정층을 가지고 혈친화성 층을 실질적으로 완전하하게 및/또는 불완전하게 코팅하는 단계;

d) 매트릭스에 공유적으로 및/또는 접착적으로 결합한 하나 이상의 활성제를 포함하는 하나 이상의 생분해층 및/또는 생체안정층, 및 하부층을 완전하게 및/또는 불완전하게 덮고 있는 확산 차단층으로서 활성제 없는 다른 생분해층 및/또는 생체안정층을 가지고 혈친화성 층을 실질적으로 완전하게 코팅하는 단계.

코팅 원리 Ⅲ;

a) 비코팅된 스텐트를 준비하는 단계;

b) 혈친화성 층을 침착시키는 단계;

c) 공유적으로 및/또는 접착적으로 결합한 하나 이상의 활성제를 포함하는 하나 이상의 생분해층 및/또는 생체안정층을 가지고 혈친화성 층을 실질적으로 완전하게 코팅하는 단계;

d) 하부층에 공유적으로 및/또는 접착적으로 결합된 활성제 또는 활성제 배합물을 침착시키는 단계;

e) 공유적으로 및/또는 접착적으로 결합한 하나 이상의 활성제, 활성제 또는 활성제 배합물의 침착물을 포함하는 하나 이상의 생분해층 및/또는 생체안정층, 및 하부층을 완전하게 및/또는 불완전하게 덮고 있는 확산 차단층으로서 활성제 없는 다른 생분해층 및/또는 생체안정층을 가지고 혈친화성 층을 실질적으로 완전하게 코팅하는 단계.

코팅 원리 Ⅳ;

a) 비코팅된 스텐트를 준비하는 단계;

b) 혈친화성 층을 침착시키는 단계;

c) 층마다 다른 농도로 공유적으로 및/또는 접착적으로 결합한 하나 이상의 활성제를 포함하는 적어도 두개의 생분해층 및/또는 생체안정층을 가지고 혈친화성 층을 실질적으로 완전하게 및/또는 불완전하게 코팅하는 단계;

d) 층마다 다른 농도로 공유적으로 및/또는 접착적으로 결합한 하나 이상의 활성제를 포함하는 적어도 두개의 생분해층 및/또는 생체안정층, 및 하부층을 완전하게 및/또는 불완전하게 덮고 있는 확산 차단층으로서 활성제 없는 다른 생분해층 및/또는 생체안정층을 가지고 혈친화성 층을 실질적으로 완전하게 및/또는 불완전하게 코팅하는 단계;

e) 같은 그룹이나 보완적인 성질을 가진 다른 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 활성제 및/또는 적어도 다른 하나의 활성제를 동일하거나 상이한 농도로, 공 유결합되고/되거나 접착된 형태로 포함하는 하나 이상의 생분해층 및/또는 생체안정층을 가지고 혈친화성 층을 실질적으로 완전하게 및/또는 불완전하게 코팅하는 단계;

f) 같은 그룹이나 보완적인 성질을 가진 다른 그룹으로부터 선택되어, 같은 또는 다른 농도로 하나 이상의 활성제 및/또는 하나 이상의 다른 활성제를 포함하는 적어도 두개의 생분해층 및/또는 생체안정층, 및 하부층을 완전하게 및/또는 불완전하게 덮고 있는 확산 차단층으로서 활성제 없는 다른 생분해층 및/또는 생체안정층을 가지고 혈친화성 층을 실질적으로 완전하게 및/또는 불완전하게 코팅하는 단계;

g) 동일하거나 상이한 농도로, 공유결합되고/되거나 접착된 형태로 하나 이상의 활성제를 포함하는 하나 이상의 생분해층 및/또는 생체안정층, 및 하부층을 완전하게 덮고 있는 확산 차단층으로서 활성제 없는 다른 생분해층 및/또는 생체안정층을 가지고 혈친화성 층을 실질적으로 완전하게 코팅하고/하거나, 하부 매트릭스에 공유 결합되고/되거나 지지 물질 없이 접착되어 있는 하나 이상의 활성제로 구성된 활성제 층에 의하여 불완전하게 코팅하는 단계.

다른 유용한 양태는 적어도 세개의 코팅층을 가진 스텐트에 의하여 나타낼 수 있으며, 여기서 첫 번째 층은 혈친화성 층으로 스텐트의 표면을 덮고 있고, 두번째 층은 활성제를 포함하지만 생분해성이 아니며 세번째 혈친화성 층으로 덮혀있다. 외부 층은 스텐트에 필요한 혈친화성을 제공하고 두번째 층은 활성제 저장소로서 작용한다. 활성제는 필요한 경우 매트릭스에 가수분해-약한 결합에 의하여 공유 적으로 결합되고/되거나 코팅 방법을 위하여 필요한 용매에 녹은 매트릭스에 첨가됨으로써, 이렇게 두번째 층으로부터 작은 농도로 계속적으로 방출되고 외부의 혈친화성 층을 통하여 억제되지 않은 상태로 방출된다. 또한 이러한 층 배열은 세포와 함께 스텐트 표면의 증가는 방지되지는 않지만 이상적인 정도까지는 감소될 수 있다. 첫 번째 층은 이식을 하는 동안 또는 현재의 플라그를 통한 마찰에 의하여 또는 사전배열이나 주름지는(crimping) 동안에 결국 발생하는 코팅된 스텐트 표면의 손상에 대한 위험을 최소화한다. 두 번째 안전 보장은 생체안정성 중합체도 적어도 스텐트 표면을 불완전하게 덮고 있지는 않지만, 다소 긴 시간동안 몸속에서 분해될 수 있다는 사실로부터 도출된다. 전술한 코팅 원리에서 특히 생분해성 물질과의 배합물도 가능하다.

이와 같은 스텐트는 통상적인 스텐트를 준비하고, 이의 표면에 첫 번째 혈친화성 층을 침착하고, 하나 이상의 활성제와 공유적으로 및/또는 접착적으로 결합된 다른 그룹으로부터의 다른 활성제와의 배합물을 포함할 뿐만 아니라, 비생분해층을 침착하고, 이 층을 다른 혈친화성 층으로 실질적으로 완전하게 코팅하는 것에 의하여 제조될 수 있다.

생체안정성 층을 위한 생체안정성 물질로서 사용될 수 있는 것은 의학 분야에서 일정하게 사용되는 모든 물질이다. 예로는 다음과 같다: 폴리아크릴산, 폴리메틸메타크릴레이트로서 폴리아크릴레이트, 폴리부틸메타크릴레이트, 폴리아크릴아미드, 폴리아크릴로니트릴, 폴리아미드, 폴리에테르아미드, 폴리에틸렌아민, 폴리이미드, 폴리카르보네이트, 폴리카르보우레탄, 폴리비닐케톤, 폴리비닐할로게나이드, 폴리비닐리덴할로게나이드, 폴리비닐에테르, 폴리비닐아로메이트, 폴리비닐에스테르, 폴리비닐피롤리돈, 폴리옥시메틸렌, 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 폴리테트라플루오로에틸렌, 폴리우레탄, 폴리올레핀 탄성체, 폴리이소부틸렌, EPDM 검, 플루오로실리콘, 카르복시메틸키토산, 폴리에틸렌테레프탈레이트, 폴리발레레이트, 카르복시메틸셀룰로즈, 셀룰로즈, 레이욘, 레이욘트리아세테이트, 셀룰로즈니트레이트, 셀룰로즈아세테이트, 하이드록시에틸셀룰로즈, 셀룰로즈부티레이트, 셀룰로즈아세테이트부티레이트, 에틸비닐아세테이트 공중합체, 폴리설폰, 에폭시 수지, ABS 수지, EPDM 검, 폴리실록산으로서 실리콘, 폴리비닐할로겐 및 공중합체, 셀룰로즈에테르, 셀룰로즈트리아세테이트, 키토산 및 이들 물질의 공중합체 및/또는 혼합물.

다층시스템의 경우, 새롭게 침착된 층은 하부층을 실질적으로 완전하게 덮게 된다. 본 명세서에서 사용된 “실질적으로”의 용어는 혈관벽과 접촉하는 적어도 스텐트 표면이 적어도 90%, 바람직하게는 95%, 특히 바람직하게는 적어도 95%를 완전하게 덮고 있다는 것을 의미한다.

본 발명에 따른 스텐트는 급성 혈전증과 스텐트 이식 후에 신생 혈관내막 과다형성의 두 가지 문제를 해결한다. 게다가, 본 발명에 따른 스텐트는 단일층이건 또는 다층 시스템이건 이와 같은 코팅에 의해 특히 하나 이상의 항증식성및/또는 면역억제성 활성제의 계속적인 방출에 적합하다. 필요한 양에서 목적하는 활성제를 계속적으로 방출하는 특징 때문에 본 발명에 따른 코팅된 스텐트는 재협착증의 위험을 거의 완전하게 예방한다.

추가로, 상술한 방법에 따르면, 어떤 플라스틱 표면도 올리고사카라이드 및/ 또는 폴리사카라이드의 혈친화성 층으로 코팅될 수 있다. 플라스틱으로는, 생체중합체뿐만 아니라 합성 중합체도 예를 들면 다음의 단량체를 함유하는 것이 적합하다: 에텐, 비닐아세테이트, 메타크릴산, 비닐카르바졸, 트리플루오로에틸렌, 프로펜, 부텐, 메틸펜텐, 이소부텐, 스티렌, 클로로스티렌, 아미노스티렌, 아크릴로니트릴, 부타디엔, 아크릭 에스테르, 디비닐벤젠, 이소프렌, 비닐클로라이드, 비닐알콜, 비닐피리딘, 비닐피롤리돈, 테트라플루오로에틸렌, 트리플루오로클로로에텐, 비닐플로라이드, 헥사플루오로이소부텐, 아크릴산, 아크로레인, 아크릴아미드, 메타크릴아미드, 말레산, 하이드록시메틸 메타크릴산, 메틸 메타크릴산, 말레산 무수물, 메타크릴산 무수물, 메타크릴로니트릴, 플루오르스티렌, 플루오르아닐리드, 3,4-이소티오시안네이토스티렌, 알릴알콜, 술폰산, 메탈릴술폰산, 디알릴프탈산, 시아노아크릴산, 디메틸아미노에틸메타크릴산, 라우릴 메타크릴산, 아세트아미노페닐에톡시메타크릴산, 글리콜 디메타크릴산, 2-하이드록시에틸 메타크릴산, 포름알데히드, 플루오랄, 클로랄, 에틸렌 옥사이드, 테트라히드로푸란, 프로필렌 옥사이드, 알릴 글리시딜 에테르, 에피클로로히드린, 글리세린, 트리메틸프로판, 펜타에리트라이트, 프탈산, 숙신산, 푸마르산, 아디프산, 티오펜, 에틸렌이민, 헥사메틸렌 아디프아미드, 엑사메틸렌 세바크아미드, 헥사메틸렌 도데칸 디아미드, 아미노벤자아미드, 페닐렌 디아민, 아미드 하이드라지드, 디메틸 피레라진, 벤즈이미다졸, 테트라아미노벤젠, 피로네스, ε-카프로락탐, 이소프탈산, 글루탐산, 루신, 페닐 알라닌, 발린, 리신, 우레아, 디이소시아네이트, 티오우레아 등 또는 상술한 단량체의 혼합물. 더욱이, 다음의 중합체도 고려될 수 있다: 실리콘, 셀룰로스 및 셀 룰로스 유도체, 오일, 폴리카르보네이트, 폴리우레탄, 아가로스, 폴리사카라이드, 덱스트란스, 녹말, 키틴, 글리코사미노 글리칸, 젤라틴, 콜라겐 I-IV 및 다른 단백질.

도 1은 기본 가수분해에 의하여 키토산으로 변형될 수 있거나, 부분적 탈아세틸레이트화에 이은 N-카르복시알킬레이션에 의하여 일반식(Ia)의 화합물로 변형될 수 있는 키틴의 2당체 구조 단편을 보여준다.

도 2는 부분적 N-아실레이션화에 이은 N-카르복시알킬레이션화에 의하거나, 부분적 N-카르복시알킬레이션화에 이은 N-아실레이션화에 의하여 일반식(Ia)의 화합물로 변형될 수 있는 키토산의 2당체 구조 단편을 보여준다.

도 3은 헤파린의 전형적인 경우(도 3a)로서 2당체당 2의 설페이트화 계수 및 설페이트 그룹의 랜덤 분포를 갖는 헤파린 또는 헤파란 설페이트의 4당체 단위를 보여준다. 구조적 유사성을 비교하기 위해 도 3b는 본원에 기술된 일반식 (Ib)의 화합물을 예를 보여주고 도 3c는 N-카르복시메틸레이션화되고, 불완전하게 N-아세틸화된 키토산의 전형적 구조를 갖는 한 단편을 보여준다.

도 4는 혈소판 손실(PLT-손실)에 미치는 PVC-관 확장된, 표면 변형된 스테인레스 강 관상 스텐트의 영향을 보여준다. 비코팅된 스테인레스강 관상 스텐트는 참조로 측정되었다. 0 값으로서, 스테인레스 강 관상 스텐트 없이 PVC-관의 경우에 혈소판 손실의 수준이 설정되었다. 그럼으로써, SH1은 헤파린 공유 결합적으로 코팅된 스텐트이며, SH2는 콘드로이틴설페이트 코팅된 스텐트이고, SH3은 적혈구 글 리코칼릭스로부터 유래된 폴리사카라이드로 코팅된 스텐트이며, SH4는 Ac-헤파린 공유 결합적으로 코팅된 스테인레스 강 관상 스텐트이다.

도 5는 완전하게 탈설페이트화되고 N-재아세틸레이트화된 헤파린 (Ac-헤파린) 공유 결합적으로 코팅된 스텐트 및 적혈구 글리코칼릭스의 올리고- 및 폴리사카라이드 코팅된 스텐트의 재협착율을 비코팅된 스텐트 및 폴리아크릴산 (PAS) 코팅된 스텐트와 돼지에 이식 후 4주 지나서 비교한 것이다.

도 6은 정량적인 관상 조형사진으로서, Ac-헤파린 코팅된 스텐트를 갖는 스텐트 함유 혈관 단편을 통한 횡단면의 이미지 (a) 및 비교로서 비코팅된 스텐트의 상응하는 이미지 (b)이다. 동물 실험(돼지)에서 4주 후 형성된 신생내막의 두께에서 명백한 차이가 관찰될 수 있었다.

도 7은 스텐트(지지 매체없이)로부터의 파클리탁셀의 용출도이다.

도 8은 PLGA-매트릭스 안에 있는 파클리탁셀의 용출도이다.

도 9는 PLGA-매트릭스 안에 있는 파클리탁셀과 기본 코팅을 완전하게 덮는 희석되지 않은 파클리탁셀 층의 용출도이다.

도 10은 매트리스 안에 있는 친수성 활성제와 확산 조절을 위하여 기본 코팅을 완전하게 덮는 하부의 활성제가 없는 중합체(탑코트)의 용출도이다.

도 11은 PLGA-매트리스로부터 콜키신의 용출도이다.

도 12는 PLGA-매트리스로부터 심바스타틴의 용출도이다.

도 13은 확산 조절층으로서 기본 코팅을 완전하게 덮고 있는 폴리스티렌을 갖는 매트리스로부터 스타틴의 용출도이다.

도 14는 비어있는 관(대조)에 대하여 코팅된 스텐트와 비코팅된 스텐트간, 신선하게 추출된 혈액(공여자)과 주사기에서 60분 저장된 후의 혈액(주사기 60) 의 챈들러 루프 후에 혈액 내에서 혈소판 수의 비교도이다.

도 15는 신선하게 추출된 혈액(공여자), 60분 후 비어있는 관(대조), 비코팅된 스텐트(비코팅됨) 및 코팅된 스텐트(코팅됨)에서의 혈소판 인자 4 농도의 비교도이다.

도 16은 신선하게 추출된 혈액(공여자), 60분 후 비어있는 관(대조), 비코팅된 스텐트(비코팅됨) 및 코팅된 스텐트(코팅됨)에서의 활성화된 보체 인자 C5a에 대한 비교도이다.

도 17은 비코팅된 스텐트와 비교하기 위하여, 돼지에 이식한 다음 12주 경과 후에 완전하게 탈설페이트화되고 재아세틸레이트화된 헤파린 (Ac-헤파린)으로 공유결합 코팅된 스텐트와 폴리(D,L-락티드-코-글리콜리드)의 두 번째 층의 직경 재협착율(%)의 비교도이다. PLGA의 경우에 협착 형성의 기간별 진행상황을 보여주는데, 여기서, ‘직경 재협착율(%)’은 스텐트의 이식 직후 초기 상태에 대한 변화된 혈관 직경의 백분율을 나타낸다. 실험을 위해 6-9개월된 사육 돼지를 사용하였으며, 혈관 직경은 스텐트의 이식 전 후에 혈관내 초음파조사(IVUS)에 의하여 측정되었다. 스텐트된 면적을 1주후(1WoFUP), 1개월 후(4WoFUP), 6주 후(6WoFUP) 및 3개월 후(12WoFUP)로 나누어 관상 혈관조영법(QCA) 및 혈관내 초음파조사(IVUS)에 의하여 각각 측정되었다. 얻어진 결과는 기대하지 않은 놀라운 긍정적인 효과를 보여주며, 이는 의심할 이유 없이 코팅에 기인한 것으로 보인다. 비록 3개월 후의 협착증의 수치는 비코팅 관 및 코팅 관의 경우와 거의 차이가 없지만, PLGA-코팅 스텐트에 대한 혈관벽의 반응은 실질적으로 더욱 순조로웠다. 1주 후의 협착증의 수치는 비코팅 이식의 수치 10.4%보다 약간 낮은 6%로 나타난다. 금속 표면의 차폐는 4주 후조차 비코팅된 스텐트 보다 협착율에서는 낮으면서 2배 보다는 큰 10% (33%의 증가)를 야기하며, 이는 이 기간의 경과 후 이의 최대값인 22.6% (54%의 증가)에 도달한다. 코팅된 스텐트는 6주 후 단지 12.33%인 최대치를 보여준다. 12주후에는 양 시스템의 수치는 서로 약 11%로 동일하다.

도 18은 돼지에 혈친화적으로 공급된 PLGA-코팅된 스텐트의 도 17에 대한 1주, 4주, 6주 및 8주 후의 각각에 대한 동물실험의 정량적 관상 조형 사진이다.

(실시예 1)

탈설페이트화되고 재아세틸레이트화된 헤파린의 제조:

100 ml 앰버라이트 IR-122 양이온 교환 수지를 전환된 H⁺-형태로 400 ml 3M HCl과 함께 2 cm 직경의 컬럼에 가하고 용출액에 클로라이드가 없고 pH가 중성일때까지 증류수로 세정하였다. 1 g 나트륨-헤파린을 10 ml 물에 용해시키고 양이온 교환 컬럼상에 가한 다음, 400 ml 물로 용출하였다. 용출물을 0.7 g 피리딘이 함유된 용기에 적가한 후 피리딘으로 적정하여 pH 6을 만들고 동결 건조시켰다.

0.9 g 헤파린-피리디늄-염을 환류 냉각기가 장착되고 DMSO/1,4-디옥산/메탄올(v/v/v)의 6/3/1 혼합물 90 ml가 함유된 둥근 플라스크에 가한 다음, 90℃로 24 시간 가열하였다. 이어서, 823 mg 피리디늄 클로라이드를 가하고 90℃로 추가로 70시간 가열하였다. 이후, 100 ml 물로 희석하고 묽은 수산화나트륨으로 적정하여 pH 9를 만들었다. 탈설페이트화된 헤파린을 물에 대하여 투석하고 동결 건조시켰다.

100 mg의 탈설페이트화된 헤파린을 10 ml의 물에 용해시키고, 0℃로 냉각시킨 다음, 1.5 ml 메탄올로 교반하에 가했다. 이 용액에 OH^--형태의 4 ml 도웩스 1x4 음이온 교환 수지를 가한 후 150 μl의 아세트산 무수물을 가하고 4℃에서 2시간 교반하였다. 이어서, 수지를 여과하여 제거하고 용액을 물에 대해 투석한 다음 동결 건조시켰다.

(실시예 2)

N-카르복시메틸화된, 부분적 N-아세틸화된 키토산:

150 ml의 0.1 N HCl에 2 g의 키토산을 용해시키고, 환류하면서 24시간동안 질소하에 가열하였다. 실온까지 냉각한 후, 용액의 pH를 2 N NaOH로 5.8이 될 때까지 조정하였다. 얻어진 용액을 탈염수에 대하여 투석한 다음 동결 건조시켰다.

이러한 방법으로 불완전하게 가수분해된 1g의 키토산을 100ml의 1% 아세트산에 용해시켰다. 100ml의 메탄올을 가한 다음, 30ml의 메탄올에 용해된 605μl의 아세트산 무수물을 가하고, 실온에서 40분 동안 교반하였다. 얻어진 생성물을 140ml의 메탄올과 60ml의 25% 암모니아용액의 혼합물내로 붓고 침전시켰다. 이것을 여과하고, 메탄올과 디에틸 에테르로 세척한 다음, 진공하에 밤새동안 건조시켰다.

불완전하게 가수분해되고 불완전하게 N-아세틸화된 1g의 키토산을 50ml의 물 에 현탁시켰다. 0.57g의 글리오실산 일수화물을 가한 다음, 키토산 유도체를 추가의 45분 동안 용해시켰다. 얻어진 용액의 pH를 2 N NaOH에 의하여 12가 되도록 조정하였다. 가능한 한 물이 없는 0.4g의 쇼듐 시아노보론 수소화물의 용액을 가한 다음 45분 동안 교반시켰다. 생성물을 400ml의 에탄올에 침전시키고, 여과한 다음, 에탄올로 세척한 후, 진공 하에 밤새동안 건조시켰다.

(실시예 3)

탈설페이트화된 N-프로피오닐화된 헤파린의 합성:

100 ml 앰버라이트 IR-122 양이온 교환 수지를 전환된 H+-형태로 400 ml 3M HCl과 함께 2 cm 직경의 컬럼에 가하고 용출액에 클로라이드가 없고 pH가 중성일때까지 증류수로 세정하였다. 1 g 나트륨-헤파린을 10 ml 물에 용해시키고 양이온 교환 컬럼상에 가한 다음, 400 ml 물로 용출하였다. 용출물을 0.7 g 피리딘이 함유된 용기에 적가한 후 피리딘으로 적정하여 pH 6을 만들고 동결 건조시켰다.

0.9 g 헤파린-피리디늄-염을 환류 콘덴서가 장착되고 DMSO/1,4-디옥산/메탄올(v/v/v)의 6/3/1 혼합물 90 ml가 함유된 둥근 플라스크에 가한 다음, 90℃로 24시간 가열하였다. 이어서, 823 mg 피리디늄 클로라이드를 가하고 90℃로 추가로 70시간 가열하였다. 이후, 100 ml 물로 희석하고 묽은 수산화나트륨으로 적정하여 pH 9를 만들었다. 탈설페이트화된 헤파린을 물에 대하여 투석하고 동결 건조시켰다.

100 mg의 탈설페이트화된 헤파린을 10 ml의 물에 용해시키고, 0℃로 냉각시킨 다음, 1.5 ml 메탄올로 교반하에 가했다. 이 용액에 OH^--형태의 4 ml 도웩스 1x4 음이온 교환 수지를 가한 후 192 μl의 프로피온산 무수물을 가하고 4℃에서 2시간 교반하였다. 이어서, 수지를 여과하여 제거하고 용액을 물에 대해 투석한 다음 동결 건조시켰다.

(실시예 4)

N-카르복시메틸화된, 부분적 N-프로피오닐화된 키토산:

이러한 방법으로 불완전하게 가수 분해된 1g의 키토산을 100ml의 1% 아세트산에 용해시켰다. 100ml의 메탄올을 가한 다음, 30ml의 메탄올에 용해된 772μl의 프로피온산 무수물을 가하고, 실온에서 40분 동안 교반하였다. 얻어진 생성물을 140ml의 메탄올과 60ml의 25% 암모니아용액의 혼합물내로 붓고 침전시켰다. 이것을 여과하고, 메탄올과 디에틸 에테르로 세척한 다음, 진공하에 밤새동안 건조시켰다.

불완전하게 가수분해되고 불완전하게 N-아세틸화된 1g의 키토산을 50ml의 물에 현탁시켰다. 0.57g의 글리오실산 일수화물을 가한 다음, 키토산 유도체를 추가의 45분 동안 용해시켰다. 얻어진 용액의 pH를 2 N NaOH에 의하여 12가 되도록 조정하였다. 가능한 한 물이 없는 0.4g의 쇼듐 시아노보론 수소화물의 용액을 가한 다음 45분 동안 교반시켰다. 생성물을 400ml의 에탄올에 침전시키고, 여과한 다음, 에탄올로 세척한 후, 진공 하에 밤새동안 건조시켰다.

(실시예 5)

ISO 10933-4 에 의한 일반식 (Ia) 및 (Ib)의 화합물의 혈친화성 측정(시험관내 측정)

일반식 (Ia) 및 (Ib)의 화합물의 혈친화성을 측정하기 위해 셀룰로즈 막, 실리콘 관 및 스테인레스 강 스텐트에 일반식 (Ia) 및 (Ib)의 화합물을 공유적으로 코팅하고 헤파린뿐만 아니라 상응하는 것에 대하여 단일시험 사용된 비코팅된 재질 표면에서 시험하였다.

5.1 탈설페이트화되고 재아세틸레이트화된 헤파린 (Ac-헤파린)으로 코팅된 셀룰로즈 막(큐프로판)

시트레이트화된 전체혈액 및 Ac-헤파린- 및/또는 헤파린-코팅된 큐프로판 막사이의 응고적인 생리적 상호작용의 검사를 위해 Sakariassen-변형된 Baumgartner-챔버의 개방 관류 시스템을 사용한다 [Sakariassen K.S. et al.; J. Lab. Clin. Med. 102: 522-535 (1983)]. 챔버는 4개의 빌딩 부품과 원추형 꼭지 및 연결된 이음쇠로 구성되어 있고 폴리메틸메타크릴레이트로 제조되었으며, 두개의 변형된 막의 평형 조사가 가능함으로써 매 가동시 통계적 범위가 포함된다. 이 챔버의 구조는 준라미나 환류 조건을 허용한다.

37℃ 에서 5분간 관류한 후 막을 추출하고, 인접한 혈소판을 고정한 후 혈소판 점유를 측정한다. 개개의 결과는 100% 혈소판 점유를 갖는 음성 표준치로서 고도로 혈전형성성 내피하 매트릭스와 관련하여 설정된 것이다. 혈소판의 흡착은 외래 물질상에 혈장 단백질 층이 형성되기 전에 이차로 일어난다. 혈장 단백질 피브리노겐은 혈소판 응집의 보조인자로서 작용한다. 혈소판의 그렇게 유도된 활성화는 비트로넥틴, 피브로넥틴 및 폰 빌브랜드-인자와 같은 수 종류의 응집 연관된 혈장 단백질이 혈소판 표면에 결합하는 결과를 낳는다. 이들의 영향에 의해 마지막으로 혈소판의 비가역적인 응집이 일어난다.

혈소판 점유는 기술된 상호작용 때문에 혈액의 외래 표면 접촉의 경우 표면의 혈전형성성의 허용된 동력을 제공한다. 이러한 사실로부터 다음의 결론이 도출된다: 혈소판 점유가 관류된 표면에 낮을 수록 검사된 표면의 혈친화성을 더 높다.

검사된 헤파린-코팅된 막과 Ac-헤파린-코팅된 막의 결과는 Ac-헤파린으로의 코팅을 통한 외래 표면의 혈친화성이 뚜렷이 개선된 것을 보여준다. 헤파린-코팅된 막은 45-65% 혈소판 점유를 보여주는 한편, Ac-헤파린-코팅된 표면은 0-5%의 값을 보여준다 (100% 혈소판 점유를 갖는 내피하 매트릭스를 참조).

Ac-헤파린화된 표면상에 혈소판의 흡착은 혈소판 필수적인 혈장 단백질의 활성화를 위해 부재로 인해 상당히 약화된다. 이와는 달리, 즉시 초기 혈장 단백질 흡착을 갖는 헤파린-코팅된 표면은 혈소판의 활성화, 침착 및 응집을 위한 최적의 선결조건을 제공하며, 궁극적으로 혈액은 삽입된 외래 표면에 상응하는 방어 기전과 반응한다. Ac-헤파린은 헤파린보다 외래 표면의 혈친화성에 대한 요건을 훨씬 더 우수하게 충족시켜 준다.

혈액에 제공된 코팅에 의존하여 표면의 혈전형성성에 대한 직접적인 동력으로서 혈장 단백질 흡착과 혈소판 점유의 상호작용은 이러한 시험관내 시험에 의해 특히 잘 드러난다. 따라서, 항혈전성 표면으로서 공유결합된 헤파린의 이용은 단지 상당히 제한적이거나 전혀 가능하지 않다. 혈액과 고정된 헤파린의 상호작용은 원 치 않는 효과를 유발한다-헤파린-코팅된 표면은 혈전형성을 유도한다.

명백한 것은 항혈전제로서 헤파린의 현저한 중요성은 공유적으로 고정된 헤파린에 적용되지 않는다. 용해된 형태로서 전신 투여되는 경우, 그의 특성을 완전하게 드러낼 수 있다. 그러나, 헤파린이 공유적으로 고정되지 않는 경우, 항혈전 특성은 있다고 하더라도 단명한다. Ac-헤파린은 탈설페이트화 및 N-재아세틸레이트화로 인해 사실 완전하게 초기 분자의 항혈전 특성을 상실하지만 뚜렷한 비혈전형성 특성을 다시 획득함으로서 다르다. 이러한 특성은 안티트롬빈 III에 대한 수동성 및 응집 초기 과정에 대한 손실된 친화성에서 증명되며 공유 결합 후 유지된다.

그럼으로써, Ac-헤파린과 이에 따른 일반식 (Ia) 및 (Ib)의 화합물은 응집계와 접촉하는 외래 표면의 위장 수단으로 최적이다.

5.2. 실리콘상의 고정화

3 mm 내부 직경을 갖는 1 m 길이의 실리콘관을 통해, 에탄올/물 1/1 (v/v)의 혼합물 100 ml를 순환운동으로 40℃에서 30분간 펌핑한다. 이어서, 2 ml의 3-(트리에톡실릴)-프로필아민을 첨가하고 순환운동으로 40℃에서 추가로 15시간 동안 펌핑한다. 그런 후 100 ml 에탄올/물 및 100 ml 물로 각각 2시간씩 세척한다.

3 mg의 탈아세틸레이트화되고 재아세틸레이트화된 헤파린(Ac-헤파린)을 4℃에서 30 ml 0.1 M MES-완충액 pH 4.75에 용해시키고 30 mg CME-CDI (N-사이클로헥실-N'-(2-모르폴리노에틸)카르보디이미드메틸-p-톨루엔설포네이트)와 혼합한다. 이 용액은 관을 통해 4℃에서 15시간 동안 순환운동으로 펌핑한다. 그런 후 물, 4M NaCl 용액 및 물로 각각 2시간씩 세정한다.

5.3. 혈소판 수의 측정 (EN30993-4)

내부 직경이 3 mm인 2 m 길이의 실리콘관에 이 형태에 맞게 만들어진 두개의 2 cm 길이 유리관을 넣었다. 이어서, 관을 수축성 원형 관으로 막고 공기의 배제하에 주사기를 통해 0.154 M NaCl 용액을 채웠다. 이렇게 하는 과정에서 한개의 주사기를 사용하여 용액을 채우고 다른 주사기를 사용하여 공기를 제거하였다. 용액은 건강한 시험 대상자의 시트레이트화된 전체혈액에 대하여 두개의 주사기로 공기의 배제하에 교환하였다. 이어서, 주사기의 오목한 구멍을 이들 위로 유리관을 밀어 넣어 막고 관을 투석 펌프내로 꽉 죄었다. 혈액을 10분 동안 150 ml/min의 유속으로 펌핑하였다. 혈액의 혈소판 함량은 코울터 계수기로 관류 전후에 측정하였다. 비코팅된 실리콘 관의 경우 혈소판 손실은 10%였다. 이와 대조적으로 실시예 5.2에 따라 코팅된 실리콘 관에서는 손실이 평균 0%였다 (실험횟수: n=3).

또한 이러한 역동적 시험 시스템에서, Ac-헤파린 코팅된 표면상에서 혈소판의 활성화가 감소되는 것으로 나타난다. 동시에 헤파린의 고정은 사용된 표면의 혈친화성에 미치는 음성적 효과를 나타내는 것으로 기록될 수 있다. 이에 대하여 Ac-헤파린은 이의 수동적 성질에 따라 혈소판과의 접촉에 효과가 없음을 보여준다.

5.4 316 LVM 스테인레스강 관상 스텐트에 대한 전체혈액 실험

생체적합성 실험과 더불어, 31 mm 길이의 316 LVM 스테인렌스강 스텐트를 Ac-헤파린으로 공유 결합적으로 코팅하였다. 2 cm²의 전체 표면 및 약 20 pm/cm² 스텐트 표면의 점유 계수의 경우 이러한 스텐트의 하중은 약 0.35 μg Ac-헤파린이 다. 비교하면, 혈전증 예방의 경우 보통 헤파린의 일일 적용율은 대조적으로 20-30 mg이며, 이에 따라 이 값은 적어도 60,000 배에 해당한다.

이들 실험은 설정된 혈액역학적 Chandler 루프-시스템으로 수행하였다 [A. Henseler, B. Oedekoven, C. Andersson, K. Mottaghy; KARDIOTECHNIK 3 (1999)]. 코팅된 및 비코팅된 스텐트를 확장시키고 길이가 600 mm이고 내부 직경이 4 mm인 PVC 관(의료 등급 PVC)에서 시험하였다. 이들 실험의 결과는 실리콘 관에서 논의된 실험의 것을 검증한다. 초기에 스텐트 기인한 관류물내 50% 혈소판 손실은 Ac-헤파린으로 스텐트 표면을 정련하여 80% 이상으로 감소된다.

관 확장되고 표면 변형된 관상 스텐트의 혈소판 손실에 미치는 영향은 45분간의 전체혈액 관류 동안에 추가의 Chandler 시험에서 평가된다. 이를 위해 일차로 스텐트-유리(free) PVC 관이 분석되고, 이의 결과는 0 값이다. 빈 관은 단지 3.6%의 표준 편차에서 공여자 혈액에 대하여 27.4%의 평균 혈소판 손실을 보여준다. 이러한 기본 값은 상이한 표면 변형된 스텐트가 PVC 관에서 확장되고 이들에 의해 유발된 혈소판 손실에 대하여 유사한 조건하에서 분석된 것이라는 기초가 되었다. 이 경우에서도 단지 전체 시험 표면의 약 0.84%를 차지하는 스텐트 피복된 표면이 혈소판 함량에 상당하면서 반복적인 효과를 일으키는 것으로 나타난다. 빈 관(기본 값)에 따르면 매끄럽고 화학적으로 표면이 코팅되지 않은 스텐트는 추가적으로 평균 22.7%의 혈소판 손실을 초래한다. 이와 함께 이를 PVC 빈 관과 비교하면 1% 미만의 측정가능한 외래 표면으로 거의 비슷한 혈소판 손실을 초래한다. 직접적인 결과는 비록 이 시험 표면이 단지 전체 표면의 0.84%를 차지한다고 하더라도, 스텐트 재질로 사용된 의료용 스테인레스강 316 LVM이 의료 등급 PVC 표면과 비교하여 약 100배 이상 강력한 혈소판 손상을 유도한다는 것이다.

스테인레스강 관상 스텐트의 분석된 표면 코팅은 상당한 정도의 스텐트 유도된 혈소판 손상을 아주 명확하게 감소시킬 수 있음을 보여준다 (도 4 참조). 가장 효과적인 것으로는 81.5%의 Ac-헤파린이다 (SH4).

만일 혈소판 손실에 미치는 Ac-헤파린-코팅된 스텐트의 영향을 고려한다면, 이때 양호한 일치된 값을 얻는다. 관류물에서의 혈소판 손실 대 제공된 표면에 혈소판의 흡착의 상관관계는 측정치의 신뢰성을 보여준다.

5.4.1 스텐트의 공유 결합적 혈친화성 코팅

의료용 스테인레스강 LVM 316의 비확장된 스텐트를 초음파 욕에서 아세톤 및 에탄올로 15분간 탈유시키고 건조기에서 100℃로 건조시켰다. 그런 다음, 이들을 에탄올/물의 혼합물(50/50: (v/v))의 혼합물중의 3-아미노프로필트리에톡시실란의 2% 용액중에 5분간 디핑한 다음, 5분간 100℃로 건조시켰다. 그런 후, 스텐트를 탈광천수로 밤새 세척하였다.

3 mg의 탈설페이트화되고 재아세틸레이트화된 헤파린을 pH 4.75의 30 ml 0.1M MES-완충액 (2-(N-모르폴리노)에탄설폰산)중에 4℃에서 용해시키고 30 mg의 N-사이클로헥실-N'-(2-모르폴리노에틸)카르보디이미드-메틸-p-톨루엔설포네이트와 혼합하였다. 이 용액중에 10개의 스텐트를 4℃에서 15시간 동안 교반시켰다. 이어서, 이들을 물, 4M NaCl 용액 및 물로 각각 2시간씩 세척하였다.

5.4.2 코팅된 스텐트의 글루코스아민 함량의 HPLC에 의한 결정

가수분해: 코팅된 스텐트를 작은 가수분해 관에 넣고 실온에서 정확히 1분간 3 ml의 3M HCl로 처리한다. 금속 탐침을 제거하고 관을 100℃의 건조기에서 16시간동안 밀폐한 후 배양한다. 이어서, 이들이 냉각되도록 하고, 건조될 때까지 3회 증발시킨 다음, 1 ml의 탈기 및 여과된 물에 침지하고, HPLC에 의해 가수분해된 표준에 대하여 측정한다:

(실시예 6)

코팅된 관상 스텐트의 생체내 검사 (도 5)

6.1. Ac-헤파린으로 코팅된 관상 스텐트의 생체내 검사

Ac-헤파린이 시험관내 실험에서 제공한 혈친화성에 대한 데이터로 인해, 금속 스텐트의 비혈전형성성 코팅으로서 Ac-헤파린 표면의 적합성이 생체내에서 논의되었다 (동물 실험). 실험의 목표는 주로 스텐트 유도된 혈관 반응에 미치는 Ac-헤파린 코팅의 영향을 평가하는데 있다. 가능한 혈전 과정의 기록이외에, 신생내막 영역, 혈관관강 및 협착증과 같은 재협착 과정과 연관된 변수가 기록되었다.

동물시험은 고문 심장학자인 헤스(Hess) 교수의 지도하에 스위스 베른에 있는 인셀스피탈(Inselspital)에서 수행하였다. 시험을 위해 6-9개월된 사육 돼지를 사용하였고 한 마리는 장기간 확립되고 승인된 동물 모델을 위한 스텐트의 유효성을 위한 것이다.

이들 실험에서 예상된 바와 같이, 급성, 아급성 또는 후급성 혈전 과정은 어느 것도 기록되지 않았다. 이것은 Ac-헤파린의 비혈전형성 특성의 증거로 평가될 수 있다.

4주후 동물을 안락사시키고, 스텐트 제공된 관상동맥 절편을 추출하고 조직형태적으로 분석하였다. Ac-헤파린 코팅된 스텐트의 이식 결과로서 가능한 급성 또는 아만성 독성, 알레르기반응 또는 배후 자극의 징후가 완성된 실험 단계동안에, 특히 조직학적 검사에서 관찰되지 않는다. 스텐트 이식 동안에 후속적인 관상-조영학적 데이터 세트가 검증되었으며, 이것은 스텐트 이식에 대한 혈관 반응에 대한 해석을 가능케한다.

비코팅된 대조 스텐트와 Ac-헤파린 코팅된 스텐트사이의 차이는 명백하다. 뚜렷한 신생내막 층의 생성은 비코팅된 대조 스텐트의 경우에서 아주 잘 관찰된다. 4주후 조차 주변 조직에 미치는 비코팅된 스텐트 표면의 증식 촉진 효과는 궁극적으로 스텐트 영역에서 혈관 폐쇄의 위험이 발생하는 정도로 일어난다. 대조적으로 Ac-헤파린 코팅된 스텐트의 경우 명백하게 보다 얇은 신생내막 층이 관찰되며, 이는 넓고 자유로운 혈관강의 유지하에 스텐트의 잘 조절된 내부성장을 가리킨다.

세부적인 조직형태적 및 관상 조영학적 데이터는 Ac-헤파린 코팅 (SH4)를 통해 신생내막 과형성증 (재협착증)이 비코팅된 대조 스텐트와 비교하여 약 17-20%까지 감소된 것이 일관되게 관찰될 수 있는 것처럼 그러한 결론을 증명한다. 이 결과는 예상치 못한 것이며 동시에 현저한 효과이다. 확실한 것은 혈친화성 특징의 선조건이외에, 신생내막 과형성증을 유도하는 과정에 영향을 주는데, 즉 재협착증을 예방하는데 비혈성형성성 표면은 필요하지 않다.

한편으로 Ac-헤파린에 의한 스텐트 표면의 조밀하고 영구적인 점유로 인해 금속 표면과의 직접적인 세포 접촉은 방지된다. 이식체 봉합 조직내로 특정 금속 이온의 누출은 재협착증의 한 가지 가능한 이유로서 논의되는 문헌에서와 같이, 항재협착 효능이 직접적인 금속 접촉의 코팅 유발된 예방의 하나로 발견될 수 있었다.

다른 한편으로 그러한 긍정적인 부작용은 설득력이 있다. 그 이유는 혈소판 응집의 부재하에 수동성 비혈정형성성 스텐트 표면상에서, 그 결과로 방출된 성장인자의 증식 효과가 상실될 것이기 때문이다. 따라서, 혈관강 측면에서 시작되는 신생내막 증식의 중대한 자극이 배제된다.

(실시예 7)

공유결합된 Ac-헤파인과 PLGA 50/50의 두 번째 하부층으로 코팅된 관상 스텐트의 생체내 실험

7.1 생체내에서 사용된 매트릭스의 혈친화성

PLGA 50/50의 혈친화성을 평가하기 위하여, 스테인레스강 스텐트를 중합체로 코팅하고 생체내 전체혈액 실험에 의하여 생리연구소(Intitute of Physiology of the RWTH Aachen)에서 실험하였다. 사용된 바 있는 표준화된 캔들러 루프-시스템은 펌프의 사용 없이 작동하는 유동 밀페관 시스템이다. 혈친화성 실험 전체 혈액의 범위 내에서, 혈소판인자 4 (PF4) 및 보체인자 5a (C5a)를 결정하였다(도 14-16 참조). 비교하기 위하여 비코팅된 스텐트를 포함시켰다.

실험의 수행:

공여자 혈액을 1.5 U/ml의 헤파린으로 주입한다. 스텐트를 PVC 관(내경 3.5 mm, L = 95 cm)에 도입하고 풍선 카테터로 고정시켰다. 4개의 관(K3 내지 K6) 및 2개의 빈 관(L1, L2)의 각각에 7.5 ml 등장성 염화나트륨용액으로 채워넣고 캔들러 루프에서 15분동안, 37°C에서 5 r/min으로 회전시켰다. 완전하게 비어있는 관에도 조심하여 헤파린 처리된 공여자 혈액(7.5 ml)을 채워 넣고 60분 동안 5 r/min으로 회전시켰다. 항응혈성 물질에 따라, 시료들을 각각 모노베트(monovettes) 및 단지(jars)로 취한 다음(PF4-CTAD, C5a-EDTA, BB-EDTA) 처리하였다.

혈소판 수의 측정에 의하면, 비어있는 대조 관, 코팅 관 및 비코팅 관사이에서 특별한 차이를 보여주지 않는다. 방출된 PF4는 코팅 관 및 비코팅 관의 경우에 동일한 수준이었다. 활성화된 보체인자 5 (C5a)의 측정에 의하면, 비코팅 관의 경우보다 코팅 관에서 더 작은 활성을 보여준다.

7.2 생체내에서 사용된 매트릭스의 혈친화성

이 실험의 목표는 주로 스텐트 유도된 혈관 반응에 미치는 PLGA 코팅의 영향을 평가하는데 있다. 실험 28을 위해 6-9개월된 사육 돼지를 사용하였다. 스텐트된 면적을 1주후(1WoFUP), 1개월 후(4WoFUP), 6주 후(6WoFUP) 및 3개월 후(12WoFUP)로 나누어 조사하였다. 얻어진 결과는 기대하지 않은 놀라운 긍정적인 효과를 보여주며, 이는 의심할 이유 없이 PLGA 50/50의 존재에 기인한 것으로 보인다. 비록 3개월 후의 협착증의 수치는 코팅 관 및 비코팅 관의 경우와 거의 차이가 없지만, PLGA-코팅 스텐트에 대한 혈관벽의 반응은 실질적으로 더욱 순조로웠다. 1주 후의 협착증의 수치는 비코팅 이식의 수치 10.4%보다 약간 낮은 6%로 나타난다. 금속 표면의 차폐는 4주 후조차도 비코팅된 스텐트 보다 협착율에서는 낮으면서 인자 2보다 큰 10% (33%의 증가)를 야기하며, 이는 이 기간의 경과 후 이의 최대값인 22.6% (54%의 증가)에 도달한다. 코팅된 스텐트는 6주 후 단지 12.33%인 최대치를 보여준다. 12주후에는 양 시스템의 수치는 서로 약 11%로 동일하다(도 16 참조).

이러한 재협착증의 데이터는 정량적 관상 혈관조영법(QCA) 및 혈관내 초음파 조사(IVUS)에 의하여 측정되었다.

(실시예 8)

타크로리무스를 이용한 표면의 코팅에 관한 시험들:

톨루이딘 블루에 의한 사전 실험:

타크로리무스는 화학적으로 감지하는 것이 무척 힘들기 때문에 첫 번째 사전 시험은 톨루이딘 블루(알드리치)를 가지고 실행한다.

화학물질들:

스테인레스 강 관 LVM 316 : 2.5㎝의 길이, 2㎜의 지름

폴리락티드 : 플루카, Lot. 398555/123500, HNo. 0409

톨루이딘 블루 : 알드리치, Lot. 19,816-1, HNo. 0430

PBS-완충액(pH 7.4) : 14.24g Na₂HPO₄, 2.72g NaH₂PO₄, 9g NaCl

인식:

스텐트는 분석 저울로 무게가 측정되고 무게가 표시된다. 작은 가수분해 관에서 0.5g 폴리락티드가 2㎖의 CHCl₃에 용해된다. 그리고 물 욕조에서 65℃까지 가열된다. 용액은 동결 격리부에서 냉각된다. 여기에 200㎕의 CHCl₃에 용해된 200㎕톨루이딘 블루를 넣는다. 스텐트는 이 용액 안에 침지시킨다. 몇 분후에 스텐트는 핀셋으로 용액 밖으로 꺼내지고 증기 후드에 용액이 증발할 때까지 옮겨진다. 공기 건조 후에 스텐트는 약 10분 동안 동결 건조된다. 건조 후에 스텐트는 다시 무게를 측정한다. 톨루이딘 블루와 함께 고정된 폴리락티드의 함량은 무게 차이로 측정된다.(샘플 1)

이 시험은 같은 용액을 가지고 한 번 더 반복된다.(샘플 2)

샘플 3에 있어서, 실험 1(샘플 1)과 실험 2(샘플 2)로부터 나오는 침지용액(1.93㎖)은 0.825㎖의 CHCl₃와 250㎎ 폴리락티드 안에서 0.825㎎ 톨루이딘 블루와 함께 섞인다. 폴리락티드는 가열 중에 녹는다. 그리고 상기 언급한 바와 같이 스텐트는 두 차례 침지시킨다.

결과:

처리되지 않은 스텐트는 176.0㎎와 180.9㎎의 무게를 가졌다. 폴리락티드 용액에 침지시킨 이후에는 스텐트는 200.9㎎와 205.2㎎의 무게를 가졌다.

침지용액은 500㎎ 폴리탁티드와 200㎕ 톨루이딘 블루를 포함하고 있다. 톨루이딘 블루의 결합된 함량은 비율로부터 샘플 1과 샘플 2에 대해서 측정될 수 있다.

샘플 3의 경우, 2.755㎖ 용액은 1㎎ 톨루이딘 블루와 638.6㎎ 폴리락티드(초기 무게-소비 샘플 1과 샘플 2; 약 50㎎)를 포함하고 있다. 여기 두개의 스텐트는 보다 높은 흡수력을 얻기 위하여 하나의 제제로 준비한다. 침지용액이 두꺼운 코팅을 만드는 높은 점성을 가지고 있으므로 2.625㎖에서 클로로포름을 섞어서 4㎖로 희석시켰다.

(실시예 9)

다른 농도를 가진 코팅의 용출 상태:

사전 실험으로서 에탄올에서 톨루이딘 블루 용액의 UV-vis 스펙트럼이 취해지고(c=0.1㎎/㎖), 흡수 최대치가 결정된다. 용액에서 톨루이딘 블루 농도는 627nm의 최대 흡수치에서 결정된다. 이렇게 하여 보정 곡선이 만들어진다.

스텐트는 인산염 완충액 pH7.4(14.24g NaH₂PO₄, 2.72g K₂HPO₄ 그리고 9g NaCl) 안에 25㎖의 생리식염수와 함께 비이커에 넣어지고 실내온도에서 천천히 젓는다. 0.5, 1, 2, 3, 6, 24, 48 및 120시간 후에, 각각 3㎖의 샘플이 취해지고 분광기적으로 측정되고 다시 제제에 되돌려진다.

다른 시간 동안 샘플의 흡수를 측정한다. 농도 측정을 위하여 측정된 값으로 부터 큐벳 차이(abs. at T=0)가 추출된다.

각각 12일과 13일이 지난 후에 시험을 종료하였다. 모든 스텐트에서 시험이 종료된 이후에도 코팅은 여전히 존재하였다. 녹아 있는 톨루이딘 블루와 폴리락티드의 함량을 각각 결정하기 위하여, 스텐트는 물과 에탄올로 세척되었고 그리고 나서 나중에 무게를 측정하기 위하여 1시간 동안 동결 건조되었다.

침지용액(㎖)당 90㎍ 톨루이딘 블루의 농도의 경우, 톨루이딘 블루의 방출 함량은 매우 낮아서 흡수가 분광계의 감지 한계에 있다. 200㎍/㎖ 농도의 경우, 흡수치는 수 시간 후에 측정할 수 있는 영역에 있다. 측정을 위해서는 높은 흡수를 이루기 위해서는 두개의 샘플을 비이커(용출 단지)에 넣을 것을 권한다. 가장 높은 폴리락티드/톨루이딘 블루 농도의 경우는 포화 효과가 나타나는 것 같다. 반면에 좀더 얇은 샘플의 경우 용출비는 거의 선형 궤도를 갖는다. 모든 스텐트에서 코팅은 며칠 후에 여전히 감지될 수 있다.

약 2주 후에, 결합된 톨루이딘 블루는 평균 약 1/4 내지 1/5에서 녹았다. 그러므로, 약 8 내지 10주 동안 샘플들은 톨루이딘 블루를 여전히 용출할 것으로 결 론 지워 진다.

침지용액은 지나치게 진하지 않아야 할 것이고 냉각되어야 하고 그래서 클로로포름이 추출하는 동안 지나치게 빨리 증발하지 않아야 한다. 그러지 않으면 코 팅의 두께는 너무 커지고 불균일해진다. 여기서 샘플 4(134㎎/㎖)의 폴리락티드 농도는 충분한 것으로 보인다. 무엇보다도 높은 농도에서는 용액은 지나치게 점성이 되고 폴리락티드는 용해가 매우 어렵게 된다.

(실시예 10)

분무 방법에 의해 스텐트의 코팅

실시예 1 및 2에서 미리 제조한 비확장된 스텐트를 저울로 달고 회전 및 급여 장치의 회전축에 고정되어 있는 얇은 금속봉 (d = 0.2 mm)에 수평적으로 매달고 28 r/min으로 회전시킨다. 스텐트는 이러한 방식으로 고정하고 스텐트의 내부는 봉과 접촉하지 않는다. 2.2 cm의 급여 폭, 4 cm/s의 급여속도 및 스텐트와 분무밸브사이의 6 cm 거리에서 스텐트를 특정 분무액으로 분무한다. 실온에서 약 15분간 건조시킨 후 증기 후드에서 밤새 건조시키고 다시 저울로 잰다.

(실시예 11)

순수 매트릭스를 이용한 스텐트의 코팅:

분무 용액의 준비: 176㎖ 폴리락티드의 무게를 측정하여 클로로포름과 합쳐서 20g까지 만든다.

스텐트는 3㎖의 분무 용액을 가지고 각각의 경우 분무하고, 분무 전 후의 무게를 측정한다. 그리고 얻어진 층 두께는 현미경으로 100배 확대시킴으로써 측정되 어 결정된다.

(실시예 12)

순수 활성제를 이용한 스텐트의 코팅:

분무 용액의 준비: 44㎎ 탁솔을 6g의 클로로포름에 녹인다.

스텐트는 분무 전과 후 무게가 측정된다.

(실시예 13)

PBS-완충액에서 용출 상태의 결정:

충분히 작은 플라스크에 놓여진 각 스텐트에 2㎖ PBS-완충액이 첨가되고, 파라필름으로 봉합되고 37℃에서 건조실에서 배양되어진다. 각 경우 정해진 시간 간격의 끝난 후에 표면에 뜨는 물질은 피펫으로 제거된다. 그리고 306㎚에서 이의 UV 흡수도가 측정된다.

(실시예 14)

활성제가 부가된 매트릭스를 이용한 혈친화성 스텐트의 코팅(도 7)

분무 용액: 폴리락티드 RG502/탁솔-용액은 145.2㎎ 폴리락티드와 48.4㎎ 탁솔로부터 클로로포름을 합쳐서 22g을 만든다.

(실시예 15)

활성제가 부가된 매트릭스와 탑코팅으로서의 활성제를 이용한 스텐트의 코팅(도 8):

기본 코팅 : 19.8㎎ 폴리락티드와 6.6㎎ 탁솔을 클로로포름과 합쳐서 3g을 만든다.

탑코팅: 8.8㎎ 탁솔이 클로로포름과 합쳐서 2g을 만든다

(실시예 16)

친수성 활성제를 포함하는 폴리락틴과 탑코팅으로서 활성제 없는 매트릭스를 이용한 스텐트의 코팅(도 9):

분무 코팅:

기본 코팅 : 22㎎ 폴리락티드와 22㎎ 친수성 활성제의 무게를 측정하고 클로로포름과 합쳐서 5g을 만든다.

탑코팅: 22㎎ 폴리락티드와 22㎎ 폴리스티렌의 무게를 측정하고 클로로포름과 합쳐서 5g을 만든다.

Claims

하기 화학식 (Ia) 또는 (Ib)의 화합물 또는 이들 화합물의 염:

(화학식 Ia)

(화학식 Ib)

상기식에서,

n은 4 내지 1050사이의 정수이고;

Y 및 Z는 서로 독립적으로 선택되며, 잔기 -CHO, -COCH₃, -COC₂H₅, -COC₃H₇, -COC₄H₉, -COC₅H₁₁, -COCH(CH₃)₂, -COCH₂CH(CH₃)₂, -COCH(CH₃)C₂H₅, -COC(CH₃)₃, -CH₂COO^-, -C₂H₄COO^-, -C₃H₆COO^- 또는 -C₄H₈COO^-이다.
제1항에 있어서, Y 및 Z는 서로 독립적으로 선택되며, 잔기 -COCH₃, -COC₂H₅, -COC₃H₇, -CH₂COO^-,-C₂H₄COO^-, -C₃H₆COO^- 인 상기 화학식 (Ia)의 화합물 또는 이들 화합물의 염.
제1항에 있어서, Y는 잔기 -COCH₃, -COC₂H₅, -COC₃H₇ 인 상기 화학식 (Ib)의 화합물 또는 이들 화합물의 염.
헤파란 설페이트 또는 헤파린이 산을 통하여 90% 이상으로 탈설페이트화된 다음 94% 이상으로 N-아실레이트화되어지는 것을 특징으로 하는 하기 화학식 (Ib)의 화합물의 제조 방법.

(화학식 Ib)

상기식에서,

n은 4 내지 1050사이의 정수이고;

Y 및 Z는 서로 독립적으로 선택되며, 잔기 -CHO, -COCH₃, -COC₂H₅, -COC₃H₇, -COC₄H₉, -COC₅H₁₁, -COCH(CH₃)₂, -COCH₂CH(CH₃)₂, -COCH(CH₃)C₂H₅, -COC(CH₃)₃, -CH₂COO^-, -C₂H₄COO^-, -C₃H₆COO^- 또는 -C₄H₈COO^-이다.
a) 키토산이 불완전하게 N-카르복시알킬레이트화된 다음 N-아실레이트화되어지거나,

b) 키토산이 불완전하게 N-아실레이트화된 다음 N-카르복시알킬레이트화되어지거나,

c) 키틴이 불완전하게 탈아세틸레이트화된 다음 N-카르복시알킬레이트화되어지는 것을 특징으로 하는 하기 화학식 (Ia)의 화합물의 제조 방법.

(화학식 Ia)

상기식에서,

n은 4 내지 1050사이의 정수이고;

Y는 잔기 -CHO, -COCH₃, -COC₂H₅, -COC₃H₇, -COC₄H₉, -COC₅H₁₁, -COCH(CH₃)₂, -COCH₂CH(CH₃)₂, -COCH(CH₃)C₂H₅, -COC(CH₃)₃, -CH₂COO^-, -C₂H₄COO^-, -C₃H₆COO^- 또는 -C₄H₈COO^-이다.
제5항에 있어서, 상기 키토산 또는 키틴의 아미노 기(group)의 45 % 내지 55%가 아실레이트화되고 이의 나머지는 카르복시알킬레이트화되는 것을 특징으로 하는 제조 방법.
제4항에 따른 제조 방법에 의하여 얻어지는 하기 화학식 (Ib)의 화합물.

(화학식 Ib)

상기식에서,

n은 4 내지 1050사이의 정수이고;

Y 및 Z는 서로 독립적으로 선택되며, 잔기 -CHO, -COCH₃, -COC₂H₅, -COC₃H₇, -COC₄H₉, -COC₅H₁₁, -COCH(CH₃)₂, -COCH₂CH(CH₃)₂, -COCH(CH₃)C₂H₅, -COC(CH₃)₃, -CH₂COO^-, -C₂H₄COO^-, -C₃H₆COO^- 또는 -C₄H₈COO^-이다.
제5항에 따른 제조 방법에 의하여 얻어지는 하기 화학식 (Ia)의 화합물.

(화학식 Ia)

상기식에서,

n은 4 내지 1050사이의 정수이고;

Y 및 Z는 서로 독립적으로 선택되며, 잔기 -CHO, -COCH₃, -COC₂H₅, -COC₃H₇, -COC₄H₉, -COC₅H₁₁, -COCH(CH₃)₂, -COCH₂CH(CH₃)₂, -COCH(CH₃)C₂H₅, -COC(CH₃)₃, -CH₂COO^-, -C₂H₄COO^-, -C₃H₆COO^- 또는 -C₄H₈COO^-이다.
제6항에 따른 제조 방법에 의하여 얻어지는 하기 화학식 (Ia)의 화합물.

(화학식 Ia)

상기식에서,

n은 4 내지 1050사이의 정수이고;

Y 및 Z는 서로 독립적으로 선택되며, 잔기 -CHO, -COCH₃, -COC₂H₅, -COC₃H₇, -COC₄H₉, -COC₅H₁₁, -COCH(CH₃)₂, -COCH₂CH(CH₃)₂, -COCH(CH₃)C₂H₅, -COC(CH₃)₃, -CH₂COO^-, -C₂H₄COO^-, -C₃H₆COO^- 또는 -C₄H₈COO^-이다.
제1항 내지 제3항 및 제7항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 2당체 단위당 설페이트 그룹의 함량이 0.005 미만인 것을 특징으로 하는 상기 화학식 (Ia) 또는 화학식 (Ib)의 화합물.
제1항 내지 제3항 및 제7항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 자유 아미노 기의 함량은 모든 -NH-Y 기에 대하여 1% 미만인 것을 특징으로 하는 상기 화학식 (Ia) 또는 화학식 (Ib)의 화합물.
제1항 내지 제3항 및 제7항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 당 단위의 배열이 교대로 반복되는 것을 특징으로 하는 상기 화학식 (Ia) 또는 화학식 (Ib)의 화합물.
제1항 내지 제3항 및 제7항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 모든 아미노 기의 45-55%가 그룹 Y를 수반하고, 나머지 아미노 기가 그룹 Z를 수반하는 것을 특징으로 하는 상기 화학식 (Ia)의 화합물.
의료기의 혈친화성 표면을 생성시키기 위하여 사용되는 하기 화학식 (Ia) 또는 화학식 (Ib)의 화합물.

(화학식 Ia)

(화학식 Ib)

상기식에서,

n은 4 내지 1050사이의 정수이고;

Y 및 Z는 서로 독립적으로 선택되며, 잔기 -CHO, -COCH₃, -COC₂H₅, -COC₃H₇, -COC₄H₉, -COC₅H₁₁, -COCH(CH₃)₂, -COCH₂CH(CH₃)₂, -COCH(CH₃)C₂H₅, -COC(CH₃)₃, -CH₂COO^-, -C₂H₄COO^-, -C₃H₆COO^- 또는 -C₄H₈COO^-이다.
제14항에 있어서, 상기 의료기의 표면상에 상기 화학식 (Ia), 화학식(1b), 또는 화학식 (Ia)과 (Ib)의 화합물이 공유 결합되어 있는 것을 특징으로 하는 화합물.
올리고사카라이드 및 폴리사카라이드 중에서, 40 내지 60% 범위 내의 당 단위 N-아실글루코스아민 또는 N-아실갈락토사민을 함유하며, 나머지 당 단위는 당 단위당 하나의 카르복실기를 갖는 것을 특징으로 하는 의료기 표면의 혈친화성 표면을 위한 올리고사카라이드 또는 폴리사카라이드의 화합물.
제16항에 있어서, 상기 올리고사카라이드 및 폴리사카라이드의 각각의 두 번째 당 단위는 N-아실글루코스아민 또는 N-아실갈락토코사민인 것을 특징으로 하는 화합물.
제16항에 있어서, N-아실글루코스아민의 경우 N-아세틸글루코스아민이고, N-아실갈락토사민의 경우 N-아세틸갈락토사민인 것을 특징으로 하는 화합물.
제16항에 있어서, 상기 나머지 당 단위가 우론산인 것을 특징으로 하는 화합물.
제19항에 있어서, 상기 우론산이 D-글루쿠론산 및 L-이두론산인 것을 특징으로 하는 화합물.
제16항에 있어서, 상기 당 단위의 배열이 교대로 반복되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제16항에 있어서, 상기 올리고사카라이드 및 폴리사카라이드는 탈설페이트화되고 N-아실레이트화된 헤파린 설페이트 뿐만 아니라 불완전하게 N-카르복시알킬레이트화되고 N-아실레이트화된 키토산인 것을 특징으로 하는 화합물.
a) 의료기의 표면을 제공하고;

b) 상기 표면상에 제1항 내지 제3항, 제7항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 하나 이상의 올리고사카라이드 또는 폴리사카라이드를 혈친화성 층으로서 침착시키는 단계를 포함하여, 의료기의 생물학적이고 인공적인 표면을 혈친화적으로 코팅하는 방법.
a) 의료기의 표면을 제공하고;

b) 올리고사카라이드 또는 폴리사카라이드가 40% 내지 60% 범위내의 당 단위 N-아실글루코스아민 또는 N-아실갈락토코사민을 함유하고, 나머지 당 단위는 당 단위마다 하나의 카르복실기를 갖는 하나 이상의 올리고사카라이드 또는 폴리사카라이드로 상기 표면상에 침착시키는 단계를 포함하여, 의료기의 생물학적이고 인공적인 표면을 혈친화적으로 코팅하는 방법.
제23항에 있어서, 혈친화성 층이 디핑 또는 분무 방법에 의해 공유결합되거나 접착된, 활성제를 함유하는 하나 이상의 생체분해성 또는 생체안정성 층으로 코팅되는 방법.
제24항에 있어서, 혈친화성 층이 디핑 또는 분무 방법에 의해 공유결합되거나 접착된, 활성제를 함유하는 하나 이상의 생체분해성 또는 생체안정성 층으로 코팅되는 방법.
제23항에 있어서,

c) 하나 이상의 활성제를 혈친화성 층 안에, 또는 위에, 또는 위와 안에 침착시키는 단계를 추가로 포함함을 특징으로 하는 방법.
제24항에 있어서,

c) 하나 이상의 활성제를 혈친화성 층 안에, 또는 위에, 또는 위와 안에 침착시키는 단계를 추가로 포함함을 특징으로 하는 방법.
제27항에 있어서,

d) 하나 이상의 생체분해성 층 또는 하나 이상의 생체안정성 층을 혈친화성 층 또는 활성제 층상에 각각 침착시키는 단계 또는

d') 혈친화성 층으로서 제1항에 따른 하나 이상의 올리고사카라이드 또는 폴리사카라이드를 생체안정성 층 또는 활성제 층상에 각각 침착시키는 단계를 추가로 포함하는 방법.
제29항에 있어서,

e) 하나 이상의 활성제를 하나 이상의 생체분해성 또는 생체안정성 층 또는 혈친화성 층 안에, 또는 위에, 또는 위와 안에 침착시키는 단계를 추가로 포함하는 방법.
제24항에 있어서, 혈친화성 층이 항혈전 활성을 책임지는 5당체의 분자량 범위에서, 구입가능한 13 kD의 헤파린 표준 분자량까지 다른 설페이트화 계수 및 아실레이트화 계수의 부위 선택적으로 합성된 유도체의 천연 헤파린, 헤파란설페이트 및 이의 유도체, 적혈구 글리코칼릭스의 올리고- 및 폴리사카라이드, 탈설페이트화되고 N-재아세틸레이트화된 헤파린, N-카르복시메틸화되고 불완전하게 N-아세틸화된 키토산뿐만 아니라 이들 물질의 혼합물을 포함함을 특징으로 하는 방법.
제25항에 있어서, 생체분해성 층을 위한 생체분해성 물질로서, 폴리발레롤락톤, 폴리-ε-데카락톤, 폴리락톤산, 폴리글리콜산, 폴리락티드, 폴리글리콜라이드, 폴리락티드와 폴리글리콜라이드의 공중합체, 폴리-ε-카프로락톤, 폴리하이드록시부타노산, 폴리하이드록시부티레이트, 폴리하이드록시발레레이트, 폴리하이드록시부티레이트-코-발레레이트, 폴리(1,4-디옥산-2,3-디온), 폴리(1,3-디옥산-2-온), 폴리-파라-디옥사논, 폴리말레익 안하이드라이드와 같은 폴리안하이드라이드, 폴리하이드록시메타크릴레이트, 피브린, 폴리시아노아크릴레이트, 폴리카프로락톤디메틸아크릴레이트, 폴리-b-말레산, 폴리카프로락톤부틸아크릴레이트, 멀티블록 폴리머(올리고카프로락톤디올과 올리고디옥사논디올로 부터 형성되는 것), 폴리에테르 에스테르 멀티블록 폴리머, PEG와 폴리부틸렌테레프탈레이, 폴리피보토락톤, 폴리글리콜산 트리메틸카르보네이트, 폴리카프로락톤-글리콜라이드, 폴리(g-에틸글루타메이트), 폴리(DTH-이미노카보네이트), 폴리(DTE-코-DT-카보네이트), 폴리(비스페놀-A-이미노카보네이트), 폴리오르토에스테르, 폴리글리콜산 트리메틸-카르보네이트, 폴리트리메틸카르보네이트, 폴리이미노카르보네이트, 폴리(N-비닐)피롤리돈, 폴리비닐알콜, 폴리에스테르아미드, 글리콜화된 폴리에스테르, 폴리포스포에스테르, 폴리포스파젠, 폴리[(p-카르복시페녹시)프로판], 폴리하이드록시펜탄 산, 폴리안하이드라이드, 폴리에틸렌옥사이드-프로필렌옥사이드, 소프트 폴리우레탄, 골격에 아미노산 잔기를 가지고 있는 폴리우레탄, 폴리에테르 에스테르, 폴리에틸렌옥사이드, 폴리알켄옥살레이트, 폴리오르토에스테르 및 이들의 공중합체, 지질, 카라지난, 피브리노겐, 전분, 콜라겐, 단백질-기본 폴리머, 폴리아미노산, 합성 폴리아미노산, 제인(zein), 변형된 제인, 폴리하이드록시알카노에이트, 펙트산(pectic acid), 액틴산(actinic acid), 변형된 및 변형되지 않은 피브린 및 카세인, 카르복시메틸설페이트, 알부민, 히알루론산, 키톤산 및 이의 유도체, 헤파란설페이트 및 이의 유도체, 헤파린, 콘드로이틴설페이트, 덱스트란, b-시클로덱스트린, PEG와 폴리프로필렌글리콜의 공중합체, 아라비아 검, 구아르, 젤라틴, 콜라젠, 콜라젠-N-하이드록시숙신이미드, 지질, 인지질, 상기 언급된 물질의 변형체 및 공중합체 및 혼합물이 사용됨을 특징으로 하는 방법.
제26항에 있어서, 생체분해성 층을 위한 생체분해성 물질로서, 폴리발레롤락톤, 폴리-ε-데카락톤, 폴리락톤산, 폴리글리콜산, 폴리락티드, 폴리글리콜라이드, 폴리락티드와 폴리글리콜라이드의 공중합체, 폴리-ε-카프로락톤, 폴리하이드록시부타노산, 폴리하이드록시부티레이트, 폴리하이드록시발레레이트, 폴리하이드록시부티레이트-코-발레레이트, 폴리(1,4-디옥산-2,3-디온), 폴리(1,3-디옥산-2-온), 폴리-파라-디옥사논, 폴리말레익 안하이드라이드와 같은 폴리안하이드라이드, 폴리하이드록시메타크릴레이트, 피브린, 폴리시아노아크릴레이트, 폴리카프로락톤디메틸아크릴레이트, 폴리-b-말레산, 폴리카프로락톤부틸아크릴레이트, 멀티블록 폴리머(올리고카프로락톤디올과 올리고디옥사논디올로 부터 형성되는 것), 폴리에테르 에스테르 멀티블록 폴리머, PEG와 폴리부틸렌테레프탈레이, 폴리피보토락톤, 폴리글리콜산 트리메틸카르보네이트, 폴리카프로락톤-글리콜라이드, 폴리(g-에틸글루타메이트), 폴리(DTH-이미노카보네이트), 폴리(DTE-코-DT-카보네이트), 폴리(비스페놀-A-이미노카보네이트), 폴리오르토에스테르, 폴리글리콜산 트리메틸-카르보네이트, 폴리트리메틸카르보네이트, 폴리이미노카르보네이트, 폴리(N-비닐)피롤리돈, 폴리비닐알콜, 폴리에스테르아미드, 글리콜화된 폴리에스테르, 폴리포스포에스테르, 폴리포스파젠, 폴리[(p-카르복시페녹시)프로판], 폴리하이드록시펜탄 산, 폴리안하이드라이드, 폴리에틸렌옥사이드-프로필렌옥사이드, 소프트 폴리우레탄, 골격에 아미노산 잔기를 가지고 있는 폴리우레탄, 폴리에테르 에스테르, 폴리에틸렌옥사이드, 폴리알켄옥살레이트, 폴리오르토에스테르 및 이들의 공중합체, 지질, 카라지난, 피브리노겐, 전분, 콜라겐, 단백질-기본 폴리머, 폴리아미노산, 합성 폴리아미노산, 제인(zein), 변형된 제인, 폴리하이드록시알카노에이트, 펙트산(pectic acid), 액틴산(actinic acid), 변형된 및 변형되지 않은 피브린 및 카세인, 카르복시메틸설페이트, 알부민, 히알루론산, 키톤산 및 이의 유도체, 헤파란설페이트 및 이의 유도체, 헤파린, 콘드로이틴설페이트, 덱스트란, b-시클로덱스트린, PEG와 폴리프로필렌글리콜의 공중합체, 아라비아 검, 구아르, 젤라틴, 콜라젠, 콜라젠-N-하이드록시숙신이미드, 지질, 인지질, 상기 언급된 물질의 변형체 및 공중합체 및 혼합물이 사용됨을 특징으로 하는 방법.
제25항에 있어서, 생체안정성 층을 위한 생체안정성 물질로서, 폴리아크릴산 및 폴리아크릴레이트, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리부틸메타크릴레이트, 폴리아크릴아미드, 폴리아크릴로니트릴, 폴리아미드, 폴리에테르아미드, 폴리에틸렌아민, 폴리이미드, 폴리카르보네이트, 폴리카르보우레탄, 폴리비닐케톤, 폴리비닐할로게나이드, 폴리비닐리덴할로게나이드, 폴리비닐에테르, 폴리이소부틸렌, 폴리비닐아로메이트, 폴리비닐에스테르, 폴리비닐피롤리돈, 폴리옥시메틸렌, 폴리테트라메틸렌옥사이드, 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 폴리테트라플루오로에틸렌, 폴리우레탄, 폴리에테르우레탄, 실리콘-폴리에테르우레탄, 실리콘-폴리우레탄, 실리콘-폴리카르보네이트에테르-우레탄, 폴리올레핀 탄성체, 폴리이소부틸렌, EPDM 검, 플루오로실리콘, 카르복시메틸키토산, 폴리아릴에테르에테르케톤, 폴리에테르에테르케톤, 폴리에틸렌테레프탈레이트, 폴리발레레이트, 카르복시메틸셀룰로즈, 셀룰로즈, 레이욘, 레이욘트리아세테이트, 셀룰로즈니트레이트, 셀룰로즈아세테이트, 하이드록시에틸셀룰로즈, 셀룰로즈부티레이트, 셀룰로즈아세테이트부티레이트, 에틸비닐아세테이트 공중합체, 폴리설폰, 에폭시 수지, ABS 수지, EPDM 검, 실리콘, 폴리실록산과 폴리디메텔실옥산, 폴리비닐할로겐 및 공중합체, 셀룰로즈에테르, 셀룰로즈트리아세테이트, 키토산 및 이들 물질의 공중합체 및 혼합물이 사용됨을 특징으로 하는 방법.
제26항에 있어서, 생체안정성 층을 위한 생체안정성 물질로서, 폴리아크릴산 및 폴리아크릴레이트, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리부틸메타크릴레이트, 폴리아크릴아미드, 폴리아크릴로니트릴, 폴리아미드, 폴리에테르아미드, 폴리에틸렌아민, 폴리이미드, 폴리카르보네이트, 폴리카르보우레탄, 폴리비닐케톤, 폴리비닐할로게나이드, 폴리비닐리덴할로게나이드, 폴리비닐에테르, 폴리이소부틸렌, 폴리비닐아로메이트, 폴리비닐에스테르, 폴리비닐피롤리돈, 폴리옥시메틸렌, 폴리테트라메틸렌옥사이드, 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 폴리테트라플루오로에틸렌, 폴리우레탄, 폴리에테르우레탄, 실리콘-폴리에테르우레탄, 실리콘-폴리우레탄, 실리콘-폴리카르보네이트에테르-우레탄, 폴리올레핀 탄성체, 폴리이소부틸렌, EPDM 검, 플루오로실리콘, 카르복시메틸키토산, 폴리아릴에테르에테르케톤, 폴리에테르에테르케톤, 폴리에틸렌테레프탈레이트, 폴리발레레이트, 카르복시메틸셀룰로즈, 셀룰로즈, 레이욘, 레이욘트리아세테이트, 셀룰로즈니트레이트, 셀룰로즈아세테이트, 하이드록시에틸셀룰로즈, 셀룰로즈부티레이트, 셀룰로즈아세테이트부티레이트, 에틸비닐아세테이트 공중합체, 폴리설폰, 에폭시 수지, ABS 수지, EPDM 검, 실리콘, 폴리실록산과 폴리디메텔실옥산, 폴리비닐할로겐 및 공중합체, 셀룰로즈에테르, 셀룰로즈트리아세테이트, 키토산 및 이들 물질의 공중합체 및 혼합물이 사용됨을 특징으로 하는 방법.
제27항에 있어서, 상기 활성제는 다음을 함유하는 항증식성 물질 그룹(시로리무스(라파마이신), 에베로리무스, 피메크로리무스, 소마토스타틴, 타크로리무스, 록시트로마이신, 두나이마이신, 아스코마이신, 바필로마이신, 에리트로마이신, 미데카마이신, 조사마이신, 콘카나마이신, 클라리트로마이신, 트로레안도마이신, 폴리마이신, 세리바스타틴, 심바스타틴, 로바스타틴, 플루바스타틴, 로수바스타틴, 아토르바스타틴, 프라바스타틴, 피타바스타틴, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 빈데신, 비노렐빈, 에토포시드, 테니포시드, 니무스틴, 카르무스틴, 로무스틴, 시클로포스파미드, 4-하이드록시옥시시클로포스파미드, 에스트라무스틴, 멜파란, 이포스파미드, 트롭포스파미드, 티모신 α-1, 클로람부실, 벤다무스틴, 데카바진, 부술판, 프로카르바진, 트레오술판, 드레모졸로미드, 티오테파, 다우노루비신, 독소루비신, 아클라루비신, 에피루비신, 미톡산트론, 이다루비신, 블레오마이신, 미토마이신, 닥티노마이신, 메토트렉세이트, 플루다라빈, 2-메틸티아졸리딘-2,4-디카르복실산, 티알린-Na(티알린의 나트륨 염), 플루다라빈-5'-디하이드로겐포스페이트, 클라드리빈, 메르카프토푸린, 티오구아닌, 시타라빈, 플루오로우라실, 젬시타빈, 카페시타빈, 도세탁셀, 카보플라틴, 시스플라틴, 옥살리플라틴, 암사크린, 이리노테칸, 토포테칸, 하이드록시카바미드, 밀테포신, 펜토스타틴, 알데슬레우킨, 트레티노인, 아스파라기나제, 페가스파라제, 아나스트로졸, 엑세메스탄, 레트로졸, 포르메스탄, 아미노글루테티미드, 아드리아마이신, 아지트로마이신, 스피라마이신, 세파란틴, 데르미시딘, smc 증식 억제제-2w, 에포틸론 A와 B, 미톡산트론, 아자디오프린, 미코페놀라트모페틸, c-myc-안티센스, b-myc-안티센스, 베툴린산, 캄프토테신, PI-88(설페이트화된 올리고사카라이드), 멜라노사이트 자극 호르몬(α-MSH), 활성 단백질 C, IL 1-β 억제제, 푸마르산 및 이의 에스테르, 칼시포트리올, 타칼시톨, 라파콜, β-라파콘, 포도필로톡신, 베툴린, 포도필산 2-에딜하이드라지드, 몰그라모스팀(rhuGM-CSF), 페긴테르페론 α-2b, 라노그라스팀(r-HuG-CSF), 필그라스팀, 마크로골, 다카르바진, 엑세메스탄, 레트로졸, 고세렐린, 세파로만닌, 바실릭시마브, 트라스투주마브, 다클리주마브, 셀렉틴(사이토킨 길항제), CETP 억제제, 카드헤리네스, 사이토키닌 억제제, COX-2 억제제, NFkB, 안지오펩틴, 시프로플록사신, 캄프토테신, 플루로블라스틴, 근육세포 증식을 억제하는 모노클로날 항체, bFGF 길항제, 프로부콜, 프로스타글란딘, 1,11-디메톡시칸틴-6-온, 1-하이드록시-11-메톡시칸틴-6-온, 스코폴렉틴, 콜키신, NO 제공자, 펜타에리트리톨 테트라니트레이트와 신드노에이민, S-니트로소유도체, 타목시펜, 스타우로스포린, β-에스트라디올, α-에스트라디올, 에스트리올, 에스트론, 에티닐에스트라디올, 포스페스트롤, 메드록시프로게스테론, 에스트라디올 시피오네이트, 에스트라디올 벤조에이트, 트라닐라스트, 카메바카우린, 암치료에 적용되는 테르페노이드, 베라파밀, 티로신 키나제 억제제(티르포스틴), 시클로스포린 A, 파클리탁셀, 6-α-하이드록시-파클리탁셀, 바카틴, 탁소테레 및 합성적으로나 천연 원료로 얻어진 카본 서브옥사이드(carbon suboxide)의 거대환 올리고머(MCS)와 이의 유도체, 모페부타존, 아세메타신, 디클로페낙, 로나조락, 다프손, o-카바모일페녹시아세트산, 리도카인, 케토프로펜, 메페남산, 피록시캄, 멜록시캄, 클로로퀸 인산염, 페니실라민, 하이드록시클로로퀸, 아우라노핀, 쇼듐 아우로티오말레이트, 옥사세프롤, 셀레콕시브, β-시토스테린, 아데메티오닌, 미르테카인, 폴리도카놀, 노니바미드, 레노멘톨, 벤조카인, 아에스신, 엘립티신, D-24851(칼비이오켐), 콜세미드, 시토칼라신 A-E, 인다노신, 노카다졸, S 100 단백질, 바시트라신, 비트로넥틴 수용체 길항제, 아젤라스틴, 메탈 프로데이나제-1과 -2의 구아니딜 시클라제 자극제 조직 억제제, 자유 핵산, 바이러스 전달물질내로 혼입된 핵산(DNA와 RNA 단편), 플라스미노젠 활성물 억제제-1, 플라스미노겐 활성물 억제제-2, 안티센스 올리고뉴클레오티드, VEGF 억제제, IGF-1);

다음을 함유하는 항생제 물질 그룹(세파드록실, 세파졸린, 세파클로르, 세포틱신, 토브라마이신, 젠타마이신, 페니실린, 디클록사실린, 옥사실린, 술폰아미드, 메트로니다졸, 항혈전제, 아르가트로반, 아스피린, 아브식시마브, 합성 항혈전, 비발리루딘, 코우마딘, 에녹소파린, 탈설페이트와되고 N-재아세틸레이트화된 헤파린, 조직 플라스미노겐 활성제, GpⅡb/Ⅲa 혈소판 멤브레인 수용체, 펙터 Xa 억제제 항체, 헤파린, 히루딘, r-히루딘, PPACK, 프로타민, 티아린-Na, 프로우로키나제, 스트렙토키나제, 와파린, 우로키나제, 디피라미돌과 같은 바소딜라터, 트라피딜, 니트로프루시데스, PDGF 길항제, 트리아졸로피리미딘과 세라민, ACE 억제제, 카프토프릴, 실라자프릴, 리시노프릴, 에날라프릴, 로사르탄, 티오프로테아제 억제제, 프로스타시클린, 바피프로스트, 인터페론 α, β및 γ , 히스타민 길항제, 세로토닌 블록커, 세포소멸 억제제, 세포소멸 조절제, p65, NF-kB 또는 Bcl-xL 안티센스 올리고뉴클레오티드, 할로푸기논, 니페디피네, 토코페롤, 비타민 B1, B2, B6 및 B12, 폴산, 트라니라스트, 몰시도민, 티(tea) 폴리페놀, 에피카테친 갈라테, 에피갈로카테친 칼라테, 보스웰산과 그 유도체, 레플루노미드, 아나킨라, 에타네르셉트, 설파살라진, 에토포시드, 디클록사실린, 테트라시클린, 트리암시놀론, 무타마이신, 프로카인이미드, 레티노산, 퀴니딘, 디소피리미드, 플레카이니드, 프로파페논, 소톨롤, 아미도론, 천연 및 합성적으로 얻어진 스테로이드계 물질( 브리오필릴 A, 이노토돌, 마르퀴로시드 A, 갈라키노시드, 만소닌, 스트레블로시드, 하이드로코르티손, 베타메타손, 덱사메타손), 비스테로이드계 물질(NSAIDS)( 페노포르펜, 이부프로펜, 인도메타신, 나프록센, 페닐부타존); 및

다른 항바이러스 물질( 아실클로비르, 간시클로비르 및 지도부딘), 항진균 물질( 클로트리마졸, 플루시토신, 그리세오풀빈, 케토코나졸, 미코나졸, 니스타틴, 테르비나핀), 항원생동물 물질( 클로로퀸, 메플로퀸, 퀴닌, 천연 테르페노이드계 물질( 히포카에스쿠린, 바링토게놀-C21-안젤레이트, 14-데하이드로아그로스티스타친, 아그로스케린, 아그로스티스타친, 17-하이드록시아그로스티스타친, 오바토디올리드스, 4,7-옥시시클로아니소멜산, 바카리노이드 B1, B2, B3 및 B7, 투베이모시드, 브루세아놀 A, B 및 C, 브루세안티노시드 C, 야단지오시드 N 및 P, 이소데옥시엘레판토핀, 토멘판토핀 A 및 B, 코로나린 A, B, C 및 D, 우르솔산, 힙타트산 A, 제오린, 이소이리도제르마날, 마이텐폴리올, 에푸산틴 A, 엑시사닌 A 및 B, 롱기카우린 B, 스컬포네아틴 C, 카메바우닌, 레우카메닌 A 및 B, 13,18-데하이드로-6-α-세네시오일록시카파린, 탁사마이린 A 및 B, 레제닐롤, 트리프토리드, 시마린, 아포시마린, 아리스톨로키산, 아놉테린, 하이드록시아놉테린, 아네모닌, 프로토아네모닌, 베르베린, 켈리부린 클로라이드, 식토신, 시노코쿨린, 봄브레스타틴 A 및 B, 쿠드라이소플라본 A, 쿠르쿠민, 디하이드로니티딘, 니티딘 클로라이드, 12-β-하이드록시프레그나디엔-3,20-디온, 빌로볼, 진크골, 진크골산, 헬레날린, 인디신, 인디신-N-옥사이드, 라지오카르핀, 이노토디올, 글리코시드 1a, 포도필로톡신, 주스티시딘 A 및 B, 라레아틴, 말로테린, 말로토크로마놀, 이소부티릴말로토크로마놀, 마퀴노시드 A, 마르찬틴 A, 마이탄신, 리코리디신, 마르게틴, 판크라티스타틴, 리리오데닌, 옥소우신수닌, 아리스토락탐-All, 비스파르테노리딘, 페리플로코시드 A, 갈라키노시드, 우르솔산, 데옥시프소로스페르민, 프시코루빈, 리신 A, 산구이나린, 만우 밀산(manwu wheat acid), 메틸소르비폴린, 멜라노사이트-자극 호르몬(α-MSH), 스파텔리아크로멘, 스티조필린, 만소닌, 스트레블로시드, 아카게린, 디하이드로우삼바라엔신, 하이드록시우삼바린, 스트리크노펜타민, 스트리크노필린, 우삼바린, 우삼바렌신, 베르베린, 리리오데닌, 옥소우신수닌, 다프노레틴, 라리시레시놀, 메톡시라리시레시놀, 시링가레시놀, 움벨리페론, 아프로모손, 아세틸비스미온 B, 데스아세틸비스미온 A, 비스미온 A 및 B))로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
제28항에 있어서, 상기 활성제는 다음을 함유하는 항증식성 물질 그룹(시로리무스(라파마이신), 에베로리무스, 피메크로리무스, 소마토스타틴, 타크로리무스, 록시트로마이신, 두나이마이신, 아스코마이신, 바필로마이신, 에리트로마이신, 미데카마이신, 조사마이신, 콘카나마이신, 클라리트로마이신, 트로레안도마이신, 폴리마이신, 세리바스타틴, 심바스타틴, 로바스타틴, 플루바스타틴, 로수바스타틴, 아토르바스타틴, 프라바스타틴, 피타바스타틴, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 빈데신, 비노렐빈, 에토포시드, 테니포시드, 니무스틴, 카르무스틴, 로무스틴, 시클로포스파미드, 4-하이드록시옥시시클로포스파미드, 에스트라무스틴, 멜파란, 이포스파미드, 트롭포스파미드, 티모신 α-1, 클로람부실, 벤다무스틴, 데카바진, 부술판, 프로카르바진, 트레오술판, 드레모졸로미드, 티오테파, 다우노루비신, 독소루비신, 아클라루비신, 에피루비신, 미톡산트론, 이다루비신, 블레오마이신, 미토마이신, 닥티노마이신, 메토트렉세이트, 플루다라빈, 2-메틸티아졸리딘-2,4-디카르복실산, 티알린-Na(티알린의 나트륨 염), 플루다라빈-5'-디하이드로겐포스페이트, 클라드리빈, 메르카프토푸린, 티오구아닌, 시타라빈, 플루오로우라실, 젬시타빈, 카페시타빈, 도세탁셀, 카보플라틴, 시스플라틴, 옥살리플라틴, 암사크린, 이리노테칸, 토포테칸, 하이드록시카바미드, 밀테포신, 펜토스타틴, 알데슬레우킨, 트레티노인, 아스파라기나제, 페가스파라제, 아나스트로졸, 엑세메스탄, 레트로졸, 포르메스탄, 아미노글루테티미드, 아드리아마이신, 아지트로마이신, 스피라마이신, 세파란틴, 데르미시딘, smc 증식 억제제-2w, 에포틸론 A와 B, 미톡산트론, 아자디오프린, 미코페놀라트모페틸, c-myc-안티센스, b-myc-안티센스, 베툴린산, 캄프토테신, PI-88(설페이트화된 올리고사카라이드), 멜라노사이트 자극 호르몬(α-MSH), 활성 단백질 C, IL 1-β 억제제, 푸마르산 및 이의 에스테르, 칼시포트리올, 타칼시톨, 라파콜, β-라파콘, 포도필로톡신, 베툴린, 포도필산 2-에딜하이드라지드, 몰그라모스팀(rhuGM-CSF), 페긴테르페론 α-2b, 라노그라스팀(r-HuG-CSF), 필그라스팀, 마크로골, 다카르바진, 엑세메스탄, 레트로졸, 고세렐린, 세파로만닌, 바실릭시마브, 트라스투주마브, 다클리주마브, 셀렉틴(사이토킨 길항제), CETP 억제제, 카드헤리네스, 사이토키닌 억제제, COX-2 억제제, NFkB, 안지오펩틴, 시프로플록사신, 캄프토테신, 플루로블라스틴, 근육세포 증식을 억제하는 모노클로날 항체, bFGF 길항제, 프로부콜, 프로스타글란딘, 1,11-디메톡시칸틴-6-온, 1-하이드록시-11-메톡시칸틴-6-온, 스코폴렉틴, 콜키신, NO 제공자, 펜타에리트리톨 테트라니트레이트와 신드노에이민, S-니트로소유도체, 타목시펜, 스타우로스포린, β-에스트라디올, α-에스트라디올, 에스트리올, 에스트론, 에티닐에스트라디올, 포스페스트롤, 메드록시프로게스테론, 에스트라디올 시피오네이트, 에스트라디올 벤조에이트, 트라닐라스트, 카메바카우린, 암치료에 적용되는 테르페노이드, 베라파밀, 티로신 키나제 억제제(티르포스틴), 시클로스포린 A, 파클리탁셀, 6-α-하이드록시-파클리탁셀, 바카틴, 탁소테레 및 합성적으로나 천연 원료로 얻어진 카본 서브옥사이드(carbon suboxide)의 거대환 올리고머(MCS)와 이의 유도체, 모페부타존, 아세메타신, 디클로페낙, 로나조락, 다프손, o-카바모일페녹시아세트산, 리도카인, 케토프로펜, 메페남산, 피록시캄, 멜록시캄, 클로로퀸 인산염, 페니실라민, 하이드록시클로로퀸, 아우라노핀, 쇼듐 아우로티오말레이트, 옥사세프롤, 셀레콕시브, β-시토스테린, 아데메티오닌, 미르테카인, 폴리도카놀, 노니바미드, 레노멘톨, 벤조카인, 아에스신, 엘립티신, D-24851(칼비이오켐), 콜세미드, 시토칼라신 A-E, 인다노신, 노카다졸, S 100 단백질, 바시트라신, 비트로넥틴 수용체 길항제, 아젤라스틴, 메탈 프로데이나제-1과 -2의 구아니딜 시클라제 자극제 조직 억제제, 자유 핵산, 바이러스 전달물질내로 혼입된 핵산(DNA와 RNA 단편), 플라스미노젠 활성물 억제제-1, 플라스미노겐 활성물 억제제-2, 안티센스 올리고뉴클레오티드, VEGF 억제제, IGF-1);

다음을 함유하는 항생제 물질 그룹(세파드록실, 세파졸린, 세파클로르, 세포틱신, 토브라마이신, 젠타마이신, 페니실린, 디클록사실린, 옥사실린, 술폰아미드, 메트로니다졸, 항혈전제, 아르가트로반, 아스피린, 아브식시마브, 합성 항혈전, 비발리루딘, 코우마딘, 에녹소파린, 탈설페이트와되고 N-재아세틸레이트화된 헤파린, 조직 플라스미노겐 활성제, GpⅡb/Ⅲa 혈소판 멤브레인 수용체, 펙터 Xa 억제제 항체, 헤파린, 히루딘, r-히루딘, PPACK, 프로타민, 티아린-Na, 프로우로키나제, 스트렙토키나제, 와파린, 우로키나제, 디피라미돌과 같은 바소딜라터, 트라피딜, 니트로프루시데스, PDGF 길항제, 트리아졸로피리미딘과 세라민, ACE 억제제, 카프토프릴, 실라자프릴, 리시노프릴, 에날라프릴, 로사르탄, 티오프로테아제 억제제, 프로스타시클린, 바피프로스트, 인터페론 α, β및 γ , 히스타민 길항제, 세로토닌 블록커, 세포소멸 억제제, 세포소멸 조절제, p65, NF-kB 또는 Bcl-xL 안티센스 올리고뉴클레오티드, 할로푸기논, 니페디피네, 토코페롤, 비타민 B1, B2, B6 및 B12, 폴산, 트라니라스트, 몰시도민, 티(tea) 폴리페놀, 에피카테친 갈라테, 에피갈로카테친 칼라테, 보스웰산과 그 유도체, 레플루노미드, 아나킨라, 에타네르셉트, 설파살라진, 에토포시드, 디클록사실린, 테트라시클린, 트리암시놀론, 무타마이신, 프로카인이미드, 레티노산, 퀴니딘, 디소피리미드, 플레카이니드, 프로파페논, 소톨롤, 아미도론, 천연 및 합성적으로 얻어진 스테로이드계 물질( 브리오필릴 A, 이노토돌, 마르퀴로시드 A, 갈라키노시드, 만소닌, 스트레블로시드, 하이드로코르티손, 베타메타손, 덱사메타손), 비스테로이드계 물질(NSAIDS)( 페노포르펜, 이부프로펜, 인도메타신, 나프록센, 페닐부타존); 및

다른 항바이러스 물질( 아실클로비르, 간시클로비르 및 지도부딘), 항진균 물질( 클로트리마졸, 플루시토신, 그리세오풀빈, 케토코나졸, 미코나졸, 니스타틴, 테르비나핀), 항원생동물 물질( 클로로퀸, 메플로퀸, 퀴닌, 천연 테르페노이드계 물질( 히포카에스쿠린, 바링토게놀-C21-안젤레이트, 14-데하이드로아그로스티스타친, 아그로스케린, 아그로스티스타친, 17-하이드록시아그로스티스타친, 오바토디올리드스, 4,7-옥시시클로아니소멜산, 바카리노이드 B1, B2, B3 및 B7, 투베이모시드, 브루세아놀 A, B 및 C, 브루세안티노시드 C, 야단지오시드 N 및 P, 이소데옥시엘레판토핀, 토멘판토핀 A 및 B, 코로나린 A, B, C 및 D, 우르솔산, 힙타트산 A, 제오린, 이소이리도제르마날, 마이텐폴리올, 에푸산틴 A, 엑시사닌 A 및 B, 롱기카우린 B, 스컬포네아틴 C, 카메바우닌, 레우카메닌 A 및 B, 13,18-데하이드로-6-α-세네시오일록시카파린, 탁사마이린 A 및 B, 레제닐롤, 트리프토리드, 시마린, 아포시마린, 아리스톨로키산, 아놉테린, 하이드록시아놉테린, 아네모닌, 프로토아네모닌, 베르베린, 켈리부린 클로라이드, 식토신, 시노코쿨린, 봄브레스타틴 A 및 B, 쿠드라이소플라본 A, 쿠르쿠민, 디하이드로니티딘, 니티딘 클로라이드, 12-β-하이드록시프레그나디엔-3,20-디온, 빌로볼, 진크골, 진크골산, 헬레날린, 인디신, 인디신-N-옥사이드, 라지오카르핀, 이노토디올, 글리코시드 1a, 포도필로톡신, 주스티시딘 A 및 B, 라레아틴, 말로테린, 말로토크로마놀, 이소부티릴말로토크로마놀, 마퀴노시드 A, 마르찬틴 A, 마이탄신, 리코리디신, 마르게틴, 판크라티스타틴, 리리오데닌, 옥소우신수닌, 아리스토락탐-All, 비스파르테노리딘, 페리플로코시드 A, 갈라키노시드, 우르솔산, 데옥시프소로스페르민, 프시코루빈, 리신 A, 산구이나린, 만우 밀산(manwu wheat acid), 메틸소르비폴린, 멜라노사이트-자극 호르몬(α-MSH), 스파텔리아크로멘, 스티조필린, 만소닌, 스트레블로시드, 아카게린, 디하이드로우삼바라엔신, 하이드록시우삼바린, 스트리크노펜타민, 스트리크노필린, 우삼바린, 우삼바렌신, 베르베린, 리리오데닌, 옥소우신수닌, 다프노레틴, 라리시레시놀, 메톡시라리시레시놀, 시링가레시놀, 움벨리페론, 아프로모손, 아세틸비스미온 B, 데스아세틸비스미온 A, 비스미온 A 및 B))로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
제23항에 있어서, 제1항 내지 제3항, 제7항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 올리고사카라이드 또는 폴리사카라이드의 침착 또는 고정화는 소수성 상호작용, 반 데르 발스 힘, 정전기적 상호작용, 수소결합, 이온성 상호작용, 교차연결 또는 공유결합에 의해 달성될 수 있음을 특징으로 하는 방법.
제23항에 따른 방법에 의하여 이용 가능한 의료기.
제24항에 따른 방법에 의하여 이용 가능한 의료기.
의료기의 표면이 제1항 내지 제3항, 제7항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 하나 이상의 올리고사카라이드 또는 폴리사카라이드를 함유하는 혈친화성 층으로 직접 코팅되거나 하나 이상의 개재된 생체안정성 또는 생체분해성 층 또는 활성제 층을 경유하여 코팅되는 의료기.
의료기 표면이 직접적으로 또는 적어도 하나의 인접한 생체안정성 또는 생체분해성 또는 활성제 층을 통하여 혈친화성 층에 의하여 코팅되는데, 상기 혈친화성 층은 올리고사카라이드 및 폴리사카라이드가 40 내지 60% 범위 내의 당 단위 N-아실글루코스아민 또는 N-아실갈락토사민을 함유하며, 나머지 당 단위는 당 단위당 하나의 카르복실기를 갖는 하나 이상의 올리고사카라이드 또는 폴리사카라이드를 함유하는 것을 특징으로 하는 의료기.
제42항에 있어서, 상기 올리고사카라이드 및 폴리사카라이드의 각각의 두 번째 당 단위는 N-아실글루코스아민 또는 N-아실갈락토코사민인 것을 특징으로 하는 의료기.
제42항에 있어서, N-아실글루코스아민의 경우는 N-아세틸글루코스아민이고, N-아실갈락토사민의 경우는 N-아세틸갈락토사민인 것을 특징으로 하는 의료기.
제42항에 있어서, 상기 나머지 당 단위가 우론산인 것을 특징으로 하는 의료기.
제45항에 있어서, 상기 우론산이 D-글루쿠론산 및 L-이두론산인 것을 특징으로 하는 의료기.
제42항에 있어서, 상기 당 단위의 배열이 교대로 반복되는 것을 특징으로 하는 의료기.
제42항에 있어서, 상기 올리고사카라이드 및 폴리사카라이드는 탈설페이트화되고 N-아실레이트화된 헤파린 설페이트 뿐만 아니라 부분적으로 N-카르복시알킬레이트화되고 N-아실레이트화된 키토산인 것을 특징으로 하는 의료기.
제41항에 있어서, 상기 혈친화성 층 아래 또는 두개의 혈친화성 층 사이에 하나 이상의 생체안정성 또는 생체분해성 층이 존재하는 의료기.
제41항에 있어서, 상기 혈친화성 층이 하나 이상의 추가적인 바로 인접한 생체안정성 또는 생체분해성 층으로 완전하게 또는 불완전하게 코팅되는 의료기.
제49항에 있어서, 상기 혈친화성 층이 하나 이상의 추가적인 바로 인접한 생체안정성 또는 생체분해성 층으로 완전하게 또는 불완전하게 코팅되는 의료기.
제41항에 있어서, 하나 이상의 활성제가 생체안정성 또는 생체분해성 층 및 혈친화성 층 사이에 존재하고, 이의 층이 공유적으로 또는 접착적으로 결합된 하나 이상의 항증식성, 항염증성, 또는 항혈전성 활성제를 함유하는 의료기.
제41항에 있어서, 하나 이상의 항증식성, 항염증성 또는 항혈전성 활성제는 혈친화성 층 또는 생체안정성 또는 생체분해성 층 안에, 또는 위에, 또는 위와 안에 공유 결합 되거나 접착되어 있는 의료기.
제41항에 있어서, 사용된 활성제는 다음을 함유하는 항증식성 물질 그룹(시로리무스(라파마이신), 에베로리무스, 피메크로리무스, 소마토스타틴, 타크로리무스, 록시트로마이신, 두나이마이신, 아스코마이신, 바필로마이신, 에리트로마이신, 미데카마이신, 조사마이신, 콘카나마이신, 클라리트로마이신, 트로레안도마이신, 폴리마이신, 세리바스타틴, 심바스타틴, 로바스타틴, 플루바스타틴, 로수바스타틴, 아토르바스타틴, 프라바스타틴, 피타바스타틴, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 빈데신, 비노렐빈, 에토포시드, 테니포시드, 니무스틴, 카르무스틴, 로무스틴, 시클로포스파미드, 4-하이드록시옥시시클로포스파미드, 에스트라무스틴, 멜파란, 이포스파미드, 트롭포스파미드, 클로람부실, 벤다무스틴, 데카바진, 부술판, 프로카르바진, 트레오술판, 티모신 α-1, 드레모졸로미드, 티오테파, 타알린(2-메틸티아졸리딘-2,4-디카르복실산), 티알린-Na(티알린의 나트륨 염), 아우노루비신, 독소루비신, 아클라루비신, 에피루비신, 미톡산트론, 이다루비신, 블레오마이신, 미토마이신, 닥티노마이신, 메토트렉세이트, 플루다라빈, 플루다라빈-5'-디하이드로겐포스페이트, 클라드리빈, 메르카프토푸린, 티오구아닌, 시타라빈, 플루오로우라실, 젬시타빈, 카페시타빈, 도세탁셀, 카보플라틴, 시스플라틴, 옥살리플라틴, 암사크린, 이리노테칸, 토포테칸, 하이드록시카바미드, 밀테포신, 펜토스타틴, 알데슬레우킨, 트레티노인, 아스파라기나제, 페가스파라제, 아나스트로졸, 엑세메스탄, 레트로졸, 포르메스탄, 아미노글루테티미드, 아드리아마이신, 아지트로마이신, 스피라마이신, 세파란틴, smc 증식 억제제-2w, 에포틸론 A와 B, 미톡산트론, 아자디오프린, 미코페놀라트모페틸, c-myc-안티센스, b-myc-안티센스, 베툴린산, 캄프토테신, PI-88(설페이트화된 올리고사카라이드), 멜라노사이트 자극 호르몬(α-MSH), 활성 단백질 C, IL 1-β 억제제, 푸마르산 및 이의 에스테르, 데르미시딘, 칼시포트리올, 타칼시톨, 라파콜, β-라파콘, 포도필로톡신, 베툴린, 포도필산 2-에딜하이드라지드, 몰그라모스팀(rhuGM-CSF), 페긴테르페론 α-2b, 라노그라스팀(r-HuG-CSF), 필그라스팀, 마크로골, 다카르바진, 레트로졸, 고세렐린, 세파로만닌, 트라스투주마브, 엑세메스탄, 바실릭시마브, 다클리주마브, 셀렉틴(사이토킨 길항제), CETP 억제제, 카드헤리네스, 사이토키닌 억제제, COX-2 억제제, NFkB, 안지오펩틴, 시프로플록사신, 캄프토테신, 플루로블라스틴, 근육세포 증식을 억제하는 모노클로날 항체, bFGF 길항제, 프로부콜, 프로스타글란딘, 1,11-디메톡시칸틴-6-온, 1-하이드록시-11-메톡시칸틴-6-온, 스코폴렉틴, 콜키신, NO 제공자, 펜타에리트리톨 테트라니트레이트와 신드노에이민, S-니트로소유도체, 타목시펜, 스타우로스포린, β-에스트라디올, α-에스트라디올, 에스트리올, 에스트론, 에티닐에스트라디올, 포스페스트롤, 메드록시프로게스테론, 에스트라디올 시피오네이트, 에스트라디올 벤조에이트, 트라닐라스트, 카메바카우린, 암치료에 적용되는 테르페노이드, 베라파밀, 티로신 키나제 억제제(티르포스틴), 시클로스포린 A, 파클리탁셀, 6-α-하이드록시-파클리탁셀, 바카틴, 탁소테레 및 합성적으로나 천연 원료로 얻어진 카본 서브옥사이드(carbon suboxide)의 거대환 올리고머(MCS)와 이의 유도체, 모페부타존, 아세메타신, 디클로페낙, 로나조락, 다프손, o-카바모일페녹시아세트산, 리도카인, 케토프로펜, 메페남산, 피록시캄, 멜록시캄, 클로로퀸 인산염, 페니실라민, 하이드록시클로로퀸, 아우라노핀, 쇼듐 아우로티오말레이트, 옥사세프롤, 셀레콕시브, β-시토스테린, 아데메티오닌, 미르테카인, 폴리도카놀, 노니바미드, 레노멘톨, 벤조카인, 아에스신, 엘립티신, D-24851(칼비이오켐), 콜세미드, 시토칼라신 A-E, 인다노신, 노카다졸, S 100 단백질, 바시트라신, 비트로넥틴 수용체 길항제, 아젤라스틴, 메탈 프로데이나제-1과 -2의 구아니딜 시클라제 자극제 조직 억제제, 자유 핵산, 바이러스 전달물질내로 혼입된 핵산(DNA와 RNA 단편), 플라스미노젠 활성물 억제제-1, 플라스미노겐 활성물 억제제-2, 안티센스 올리고뉴클레오티드, VEGF 억제제, IGF-1);

다음을 함유하는 항생제 물질 그룹(세파드록실, 세파졸린, 세파클로르, 세포틱신, 토브라마이신, 젠타마이신, 페니실린, 디클록사실린, 옥사실린, 술폰아미드, 메트로니다졸, 항혈전제, 아르가트로반, 아스피린, 아브식시마브, 합성 항혈전, 비발리루딘, 코우마딘, 에녹소파린, 탈설페이트와되고 N-재아세틸레이트화된 헤파린, 조직 플라스미노겐 활성제, GpⅡb/Ⅲa 혈소판 멤브레인 수용체, 펙터 Xa 억제제 항체, 헤파린, 히루딘, r-히루딘, PPACK, 프로타민, 프로우로키나제, 스트렙토키나제, 와파린, 우로키나제, 디피라미돌과 같은 바소딜라터, 트라피딜, 니트로프루시데스, PDGF 길항제, 트리아졸로피리미딘과 세라민, ACE 억제제, 카프토프릴, 실라자프릴, 리시노프릴, 에날라프릴, 로사르탄, 티오프로테아제 억제제, 프로스타시클린, 바피프로스트, 인터페론 α, β및 γ , 히스타민 길항제, 세로토닌 블록커, 세포소멸 억제제, 세포소멸 조절제, p65, NF-kB 또는 Bcl-xL 안티센스 올리고뉴클레오티드, 할로푸기논, 니페디피네, 토코페롤, 트라니라스트, 몰시도민, 티 폴리페놀, 에피카테친 갈라테, 에피갈로카테친 칼라테, 보스웰산과 그 유도체, 레플루노미드, 아나킨라, 에타네르셉트, 설파살라진, 에토포시드, 디클록사실린, 테트라시클린, 트리암시놀론, 무타마이신, 프로카인이미드, 레티노산, 퀴니딘, 디소피리미드, 플레카이니드, 프로파페논, 소톨롤, 아미도론, 천연 및 합성적으로 얻어진 스테로이드계 물질( 브리오필릴 A, 이노토돌, 마르퀴로시드 A, 갈라키노시드, 만소닌, 스트레블로시드, 하이드로코르티손, 베타메타손, 덱사메타손), 비스테로이드계 물질(NSAIDS)( 페노포르펜, 이부프로펜, 인도메타신, 나프록센, 페닐부타존); 및

다른 항바이러스 물질( 아실클로비르, 간시클로비르 및 지도부딘), 항진균 물질( 클로트리마졸, 플루시토신, 그리세오풀빈, 케토코나졸, 미코나졸, 니스타틴, 테르비나핀), 항원생동물 물질( 클로로퀸, 메플로퀸, 퀴닌, 또한 천연 테르페노이드계 물질( 히포카에스쿠린, 바링토게놀-C21-안젤레이트, 14-데하이드로아그로스티스타친, 아그로스케린, 아그로스티스타친, 17-하이드록시아그로스티스타친, 오바토디올리드스, 4,7-옥시시클로아니소멜산, 바카리노이드 B1, B2, B3 및 B7, 투베이모시드, 브루세아놀 A, B 및 C, 브루세안티노시드 C, 야단지오시드 N 및 P, 이소데옥시엘레판토핀, 토멘판토핀 A 및 B, 코로나린 A, B, C 및 D, 우르솔산, 힙타트산 A, 제오린, 이소이리도제르마날, 마이텐폴리올, 에푸산틴 A, 엑시사닌 A 및 B, 롱기카우린 B, 스컬포네아틴 C, 카메바우닌, 레우카메닌 A 및 B, 13,18-데하이드로-6-α-세네시오일록시카파린, 탁사마이린 A 및 B, 레제닐롤, 트리프토리드, 시마린, 아포시마린, 아리스톨로키산, 아놉테린, 하이드록시아놉테린, 아네모닌, 프로토아네모닌, 베르베린, 켈리부린 클로라이드, 식토신, 시노코쿨린, 봄브레스타틴 A 및 B, 쿠드라이소플라본 A, 쿠르쿠민, 디하이드로니티딘, 니티딘 클로라이드, 12-β-하이드록시프레그나디엔-3,20-디온, 빌로볼, 진크골, 진크골산, 헬레날린, 인디신, 인디신-N-옥사이드, 라지오카르핀, 이노토디올, 글리코시드 1a, 포도필로톡신, 주스티시딘 A 및 B, 라레아틴, 말로테린, 말로토크로마놀, 이소부티릴말로토크로마놀, 마퀴노시드 A, 마르찬틴 A, 마이탄신, 리코리디신, 마르게틴, 판크라티스타틴, 리리오데닌, 옥소우신수닌, 아리스토락탐-All, 비스파르테노리딘, 페리플로코시드 A, 갈라키노시드, 우르솔산, 데옥시프소로스페르민, 프시코루빈, 리신 A, 산구이나린, 만우 밀산, 메틸소르비폴린, 스파텔리아크로멘, 스티조필린, 만소닌, 스트레블로시드, 아카게린, 디하이드로우삼바라엔신, 하이드록시우삼바린, 스트리크노펜타민, 스트리크노필린, 우삼바린, 우삼바렌신, 베르베린, 리리오데닌, 옥소우신수닌, 다프노레틴, 라리시레시놀, 메톡시라리시레시놀, 시링가레시놀, 움벨리페론, 아프로모손, 아세틸비스미온 B, 데스아세틸비스미온 A, 비스미온 A 및 B))로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 의료기.
제42항에 있어서, 사용된 활성제는 다음을 함유하는 항증식성 물질 그룹(시로리무스(라파마이신), 에베로리무스, 피메크로리무스, 소마토스타틴, 타크로리무스, 록시트로마이신, 두나이마이신, 아스코마이신, 바필로마이신, 에리트로마이신, 미데카마이신, 조사마이신, 콘카나마이신, 클라리트로마이신, 트로레안도마이신, 폴리마이신, 세리바스타틴, 심바스타틴, 로바스타틴, 플루바스타틴, 로수바스타틴, 아토르바스타틴, 프라바스타틴, 피타바스타틴, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 빈데신, 비노렐빈, 에토포시드, 테니포시드, 니무스틴, 카르무스틴, 로무스틴, 시클로포스파미드, 4-하이드록시옥시시클로포스파미드, 에스트라무스틴, 멜파란, 이포스파미드, 트롭포스파미드, 클로람부실, 벤다무스틴, 데카바진, 부술판, 프로카르바진, 트레오술판, 티모신 α-1, 드레모졸로미드, 티오테파, 타알린(2-메틸티아졸리딘-2,4-디카르복실산), 티알린-Na(티알린의 나트륨 염), 아우노루비신, 독소루비신, 아클라루비신, 에피루비신, 미톡산트론, 이다루비신, 블레오마이신, 미토마이신, 닥티노마이신, 메토트렉세이트, 플루다라빈, 플루다라빈-5'-디하이드로겐포스페이트, 클라드리빈, 메르카프토푸린, 티오구아닌, 시타라빈, 플루오로우라실, 젬시타빈, 카페시타빈, 도세탁셀, 카보플라틴, 시스플라틴, 옥살리플라틴, 암사크린, 이리노테칸, 토포테칸, 하이드록시카바미드, 밀테포신, 펜토스타틴, 알데슬레우킨, 트레티노인, 아스파라기나제, 페가스파라제, 아나스트로졸, 엑세메스탄, 레트로졸, 포르메스탄, 아미노글루테티미드, 아드리아마이신, 아지트로마이신, 스피라마이신, 세파란틴, smc 증식 억제제-2w, 에포틸론 A와 B, 미톡산트론, 아자디오프린, 미코페놀라트모페틸, c-myc-안티센스, b-myc-안티센스, 베툴린산, 캄프토테신, PI-88(설페이트화된 올리고사카라이드), 멜라노사이트 자극 호르몬(α-MSH), 활성 단백질 C, IL 1-β 억제제, 푸마르산 및 이의 에스테르, 데르미시딘, 칼시포트리올, 타칼시톨, 라파콜, β-라파콘, 포도필로톡신, 베툴린, 포도필산 2-에딜하이드라지드, 몰그라모스팀(rhuGM-CSF), 페긴테르페론 α-2b, 라노그라스팀(r-HuG-CSF), 필그라스팀, 마크로골, 다카르바진, 레트로졸, 고세렐린, 세파로만닌, 트라스투주마브, 엑세메스탄, 바실릭시마브, 다클리주마브, 셀렉틴(사이토킨 길항제), CETP 억제제, 카드헤리네스, 사이토키닌 억제제, COX-2 억제제, NFkB, 안지오펩틴, 시프로플록사신, 캄프토테신, 플루로블라스틴, 근육세포 증식을 억제하는 모노클로날 항체, bFGF 길항제, 프로부콜, 프로스타글란딘, 1,11-디메톡시칸틴-6-온, 1-하이드록시-11-메톡시칸틴-6-온, 스코폴렉틴, 콜키신, NO 제공자, 펜타에리트리톨 테트라니트레이트와 신드노에이민, S-니트로소유도체, 타목시펜, 스타우로스포린, β-에스트라디올, α-에스트라디올, 에스트리올, 에스트론, 에티닐에스트라디올, 포스페스트롤, 메드록시프로게스테론, 에스트라디올 시피오네이트, 에스트라디올 벤조에이트, 트라닐라스트, 카메바카우린, 암치료에 적용되는 테르페노이드, 베라파밀, 티로신 키나제 억제제(티르포스틴), 시클로스포린 A, 파클리탁셀, 6-α-하이드록시-파클리탁셀, 바카틴, 탁소테레 및 합성적으로나 천연 원료로 얻어진 카본 서브옥사이드(carbon suboxide)의 거대환 올리고머(MCS)와 이의 유도체, 모페부타존, 아세메타신, 디클로페낙, 로나조락, 다프손, o-카바모일페녹시아세트산, 리도카인, 케토프로펜, 메페남산, 피록시캄, 멜록시캄, 클로로퀸 인산염, 페니실라민, 하이드록시클로로퀸, 아우라노핀, 쇼듐 아우로티오말레이트, 옥사세프롤, 셀레콕시브, β-시토스테린, 아데메티오닌, 미르테카인, 폴리도카놀, 노니바미드, 레노멘톨, 벤조카인, 아에스신, 엘립티신, D-24851(칼비이오켐), 콜세미드, 시토칼라신 A-E, 인다노신, 노카다졸, S 100 단백질, 바시트라신, 비트로넥틴 수용체 길항제, 아젤라스틴, 메탈 프로데이나제-1과 -2의 구아니딜 시클라제 자극제 조직 억제제, 자유 핵산, 바이러스 전달물질내로 혼입된 핵산(DNA와 RNA 단편), 플라스미노젠 활성물 억제제-1, 플라스미노겐 활성물 억제제-2, 안티센스 올리고뉴클레오티드, VEGF 억제제, IGF-1);

다음을 함유하는 항생제 물질 그룹(세파드록실, 세파졸린, 세파클로르, 세포틱신, 토브라마이신, 젠타마이신, 페니실린, 디클록사실린, 옥사실린, 술폰아미드, 메트로니다졸, 항혈전제, 아르가트로반, 아스피린, 아브식시마브, 합성 항혈전, 비발리루딘, 코우마딘, 에녹소파린, 탈설페이트와되고 N-재아세틸레이트화된 헤파린, 조직 플라스미노겐 활성제, GpⅡb/Ⅲa 혈소판 멤브레인 수용체, 펙터 Xa 억제제 항체, 헤파린, 히루딘, r-히루딘, PPACK, 프로타민, 프로우로키나제, 스트렙토키나제, 와파린, 우로키나제, 디피라미돌과 같은 바소딜라터, 트라피딜, 니트로프루시데스, PDGF 길항제, 트리아졸로피리미딘과 세라민, ACE 억제제, 카프토프릴, 실라자프릴, 리시노프릴, 에날라프릴, 로사르탄, 티오프로테아제 억제제, 프로스타시클린, 바피프로스트, 인터페론 α, β및 γ , 히스타민 길항제, 세로토닌 블록커, 세포소멸 억제제, 세포소멸 조절제, p65, NF-kB 또는 Bcl-xL 안티센스 올리고뉴클레오티드, 할로푸기논, 니페디피네, 토코페롤, 트라니라스트, 몰시도민, 티 폴리페놀, 에피카테친 갈라테, 에피갈로카테친 칼라테, 보스웰산과 그 유도체, 레플루노미드, 아나킨라, 에타네르셉트, 설파살라진, 에토포시드, 디클록사실린, 테트라시클린, 트리암시놀론, 무타마이신, 프로카인이미드, 레티노산, 퀴니딘, 디소피리미드, 플레카이니드, 프로파페논, 소톨롤, 아미도론, 천연 및 합성적으로 얻어진 스테로이드계 물질( 브리오필릴 A, 이노토돌, 마르퀴로시드 A, 갈라키노시드, 만소닌, 스트레블로시드, 하이드로코르티손, 베타메타손, 덱사메타손), 비스테로이드계 물질(NSAIDS)( 페노포르펜, 이부프로펜, 인도메타신, 나프록센, 페닐부타존); 및

다른 항바이러스 물질( 아실클로비르, 간시클로비르 및 지도부딘), 항진균 물질( 클로트리마졸, 플루시토신, 그리세오풀빈, 케토코나졸, 미코나졸, 니스타틴, 테르비나핀), 항원생동물 물질( 클로로퀸, 메플로퀸, 퀴닌, 또한 천연 테르페노이드계 물질( 히포카에스쿠린, 바링토게놀-C21-안젤레이트, 14-데하이드로아그로스티스타친, 아그로스케린, 아그로스티스타친, 17-하이드록시아그로스티스타친, 오바토디올리드스, 4,7-옥시시클로아니소멜산, 바카리노이드 B1, B2, B3 및 B7, 투베이모시드, 브루세아놀 A, B 및 C, 브루세안티노시드 C, 야단지오시드 N 및 P, 이소데옥시엘레판토핀, 토멘판토핀 A 및 B, 코로나린 A, B, C 및 D, 우르솔산, 힙타트산 A, 제오린, 이소이리도제르마날, 마이텐폴리올, 에푸산틴 A, 엑시사닌 A 및 B, 롱기카우린 B, 스컬포네아틴 C, 카메바우닌, 레우카메닌 A 및 B, 13,18-데하이드로-6-α-세네시오일록시카파린, 탁사마이린 A 및 B, 레제닐롤, 트리프토리드, 시마린, 아포시마린, 아리스톨로키산, 아놉테린, 하이드록시아놉테린, 아네모닌, 프로토아네모닌, 베르베린, 켈리부린 클로라이드, 식토신, 시노코쿨린, 봄브레스타틴 A 및 B, 쿠드라이소플라본 A, 쿠르쿠민, 디하이드로니티딘, 니티딘 클로라이드, 12-β-하이드록시프레그나디엔-3,20-디온, 빌로볼, 진크골, 진크골산, 헬레날린, 인디신, 인디신-N-옥사이드, 라지오카르핀, 이노토디올, 글리코시드 1a, 포도필로톡신, 주스티시딘 A 및 B, 라레아틴, 말로테린, 말로토크로마놀, 이소부티릴말로토크로마놀, 마퀴노시드 A, 마르찬틴 A, 마이탄신, 리코리디신, 마르게틴, 판크라티스타틴, 리리오데닌, 옥소우신수닌, 아리스토락탐-All, 비스파르테노리딘, 페리플로코시드 A, 갈라키노시드, 우르솔산, 데옥시프소로스페르민, 프시코루빈, 리신 A, 산구이나린, 만우 밀산, 메틸소르비폴린, 스파텔리아크로멘, 스티조필린, 만소닌, 스트레블로시드, 아카게린, 디하이드로우삼바라엔신, 하이드록시우삼바린, 스트리크노펜타민, 스트리크노필린, 우삼바린, 우삼바렌신, 베르베린, 리리오데닌, 옥소우신수닌, 다프노레틴, 라리시레시놀, 메톡시라리시레시놀, 시링가레시놀, 움벨리페론, 아프로모손, 아세틸비스미온 B, 데스아세틸비스미온 A, 비스미온 A 및 B))로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 의료기.
제54항에 있어서, 사용된 활성제의 경우에, 타크로리무스, 피메크롤리무스, PI88, 티모신 α-1, PETN, 바카틴 및 그 유도체, 도세탁셀, 콜키신, 파클리탁셀 및 그 유도체, 트라피딜, α- 및 β-에스트라디올, 데르미시딘, 티알린-나트륨, 심바스타틴, 거대환 서브옥사이드(MCS)와 그 유도체, 시롤리무스, 티르포스틴, D24851, 콜키신, 푸마르산 및 이의 에스테르, 활성 단백질 C(aPC), 인터루킨-1β 억제제 및 멜라노사이트-자극 호르몬(α-MSH) 및 이들 활성제의 혼합물 중에서 선택되는 의료기.
제41항에 있어서, 의료기가 보철, 기관, 혈관, 동맥, 심장 밸브, 튜브, 기관 대체용부품, 이식체, 섬유체, 중공 섬유체, 스텐트, 중공 바늘, 주사기, 막, 주석처리 용품(tinned goods), 혈액 용기, 적정계측판, 맥박조정기, 흡수용 매질, 크로마토그래피 매질, 크로마토그래피 컬럼, 투석기, 연결 부품, 센서, 밸브, 원심분리 챔버, 복열기, 내시경, 필터 또는 펌프 챔버를 포함함을 특징으로 하는 의료기.
제42항에 있어서, 의료기가 보철, 기관, 혈관, 동맥, 심장 밸브, 튜브, 기관 대체용부품, 이식체, 섬유체, 중공 섬유체, 스텐트, 중공 바늘, 주사기, 막, 주석처리 용품(tinned goods), 혈액 용기, 적정계측판, 맥박조정기, 흡수용 매질, 크로마토그래피 매질, 크로마토그래피 컬럼, 투석기, 연결 부품, 센서, 밸브, 원심분리 챔버, 복열기, 내시경, 필터 또는 펌프 챔버를 포함함을 특징으로 하는 의료기.
제57항에 있어서, 의료기가 스텐트임을 특징으로 하는 의료기.
제58항에 있어서, 의료기가 스텐트임을 특징으로 하는 의료기.
항증식성, 항염증성 또는 항혈전성 활성제가 스텐트 표면(cm²)당 0.001 내지 10 mg의 약제학적 활성 농도로 함유되어 있음을 특징으로 하는 제59항에 따른 의료기.
재협착의 예방 또는 감소를 위하여 사용되는 것을 특징으로 하는 제59항에 따른 의료기.
하나 이상의 항증식성, 항염증성 또는 항혈전성 활성제의 연속 방출을 위하여 사용되는 것을 특징으로 하는 제59항에 따른 의료기.
제39항에 있어서, 혈액과의 직접적인 접촉을 위하여 사용되는 의료기.
제39항에 있어서, 의료기의 코팅된 표면상에 단백질의 흡착의 예방 또는 감소를 위하여 사용되는 의료기.
제64항에 있어서, 진단 검출 방법을 위하여 사용되는 마이크로 적정 계측판 또는 다른 담체 매질로서 사용되는 것을 특징으로 하는 의료기.
제64항에 있어서, 흡착 매질 또는 크로마토그래피 매질로서 사용되는 것을 특징으로 하는 의료기.