KR100814201B1

KR100814201B1 - 항위궤양용 또는 위궤양치료용 약학조성물

Info

Publication number: KR100814201B1
Application number: KR1020060069987A
Authority: KR
Inventors: 조일환; 이철규; 신장식; 김병수
Original assignee: 조일환; 이철규
Priority date: 2006-07-25
Filing date: 2006-07-25
Publication date: 2008-03-17
Also published as: KR20080010040A; WO2008013362A1

Abstract

본 발명은 항위궤양 또는 위궤양 치료효과가 있는 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 살아있는 지렁이를 습식분쇄하고 원침시킨 뒤 그 상등액을 여과한 후 동결건조하여 유효성분으로 룸브로키나제를 함유하는 구인동결건조분말을 포함시키거나 상기 상등액을 포함시키므로써, 위궤양의 발생을 억제하거나 위궤양 치료효과가 있는 항위궤양 또는 위궤양 치료효과가 있는 조성물에 관한 것이다.

이러한 본 발명은, 위궤양를 억제하고 치료하는 효과가 있다.

항위궤양제, 위궤양 치료제

Description

항위궤양용 또는 위궤양치료용 약학조성물{ANTI STOMACH ULCER OR STOMACH ULCER DRUG COMPOSITION}

도1a~도1b는 본 발명에 따른 실시예4에 있어서 대조군의 위장상태사진.

도2a~도2b는 본 발명에 따른 실시예4에 있어서 오메프라졸을 투여한 흰쥐의 위장상태사진.

도3a~도3b는 본 발명에 따른 실시예4에 있어서 스티렌을 투여한 흰쥐의 위장상태사진.

도4a~도4b는 본 발명에 따른 실시예4에 있어서 구인동결건조분말을 투여한 흰쥐의 위장상태사진.

본 발명은 항위궤양 또는 위궤양 치료효과가 있는 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 살아있는 지렁이를 습식분쇄하고 원침시킨 뒤 그 상등액을 여과한 후 동결건조하여 유효성분으로 룸브로키나제를 함유하는 구인동결건조분말을 포함 시키거나 상기 상등액을 포함시키므로써, 위궤양의 발생을 억제하거나 위궤양 치료효과가 있는 항위궤양 또는 위궤양 치료효과가 있는 조성물에 관한 것이다.

기존의 구인건조분말 또는 구인추출물은 항고지혈증제, 당뇨병치료제, 혈압조절제 및 혈전증 치료제등에 사용되었다. 이는 신농본초경등의 한의학 고서등에 등재되어 있는 약효에 기인하는 것이다. 그러나 본 발명자들은 구인 체내에는 단백질을 분해하는 룸브로키나제라는 효소가 다량 함유되어 있다는 것과 사람의 위에는 이 효소에 작용하는 수용체가 많이 분포한다는 것에 착안하여, 구인단백분해효소의 위궤양 치료효과를 실시한 바 그 효과를 입증하여 발명을 완성하게 되었다.

구인에 함유된 룸브로키나제는 세린계열의 단백질분해효소이고 열 또는 pH에 매우 안정하며, 그 활성이 혈전의 성분인 fibrin에 특이적으로 작용하여 하는 것으로 보고되어있다. 그러나 그것이 약효를 발휘하기 위해서는 경구투여후 장에서 흡수되어 혈액으로 들어가야 하는데 이에 대한 연구는 현재 진행 중인 것으로 사료된다.

위장에는 단백질분해효소에 의해 활성화되는 수용체, 즉 프로테아제 활성 수용체 (proteinase activating receptor; PAR)가 많이 분포하고 있는데 이는 위장의 보호기능과 관련이 있는 것으로 보고되었다.

따라서 본 발명자들은 여러 가지 방법에 의한 위궤양 유발 모델에서의 구인건조동결분말의 효능을 검증하였다.

본 발명은 상기와 같은 종래기술의 문제점을 해결하기 위한 것으로, 살아있는 지렁이를 습식분쇄하고 원침시킨 뒤 그 상등액을 여과한 후 동결건조하여 유효성분으로 룸브로키나제를 함유하는 구인동결건조분말을 포함시키거나 상기 상등액을 포함시키므로써 위궤양의 발생을 억제하거나 위궤양 치료효과가 있는 항위궤양 또는 위궤양 치료효과가 있는 조성물을 제공하고자 하는 것을 그 목적으로 한다.

본 발명에 의한 항위궤양 또는 위궤양 치료효과가 있는 조성물은, 구인동결건조분말 또는 구인추출 상등액을 포함한다.

상기 구인동결건조분말 또는 구인추출 상등액은 단백질분해효소인 룸브로키나제를 유효성분으로 하는 것이 바람직하다.

상기 항위궤양 또는 위궤양 치료효과가 있는 조성물의 제조방법은, 생구인을 증류수로 세척하는 세척단계와; 상기 세척단계를 거친 생구인을 습식분쇄하는 습식분쇄단계와; 습식분쇄단계를 거쳐 분쇄된 구인을 2,000 내지 4,000×g로 20분 내지 40분간 원심분리하여 상등액을 얻는 원심분리단계와; 상기 상등액을 포함하는 항위궤양 또는 위궤양 치료효과가 있는 조성물을 생산하는 생산단계;를 갖는다.

상기 상등액을 규조토를 이용하여 불용물질을 여과하는 여과단계를 포함하는 것이 바람직하다.

상기 상등액을 동결건조하여 구인동결건조분말을 만드는 구인동결건조분말 제조단계를 포함하며, 상기 조성물생산단계는 상기 구인동결건조분말을 이용하는 것이 바람직하다.

이하 실시예를 통하여 본 발명을 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 예시적인 목적일 뿐 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.

실시예 1; 구인동결건조분말의 제조

환형동물문, 빈모강에 속하는 구인, 즉 붉은 지렁이 (Lumbricus rubellus), 줄지렁이 (Eisenia fetida), 붉은 큰 지렁이 (Lumbricus terrestris), 또는 붉은줄지렁이 (Eisenia andrei)등을 사료 및 낚시미끼용을 목적으로 사육하는 곳에서 구입하였다. 생구인 10kg을 먼저 증류수로 깨끗이 씻어 이물질을 제거하고 습식분쇄한 다음 3,000×g로 30분간 원심분리하여 상등액 8.5kg을 얻었다. 얻은 상등액을 규조토를 이용하여 불용물질을 여과한 후 동결건조하여 구인동결건조분말을 제조하였다. 이와같은 구인동결건조분말은 생구인 10kg에서 1.2kg을 얻었으며, 그것의 카제인 분해 역가는 단위 g당 870유니트였다.

실시예 2; 스트레스에 의한 위궤양 모델에서의 항위궤양 효과

실험동물은 6주령의 수컷 위스타 흰쥐를 사용하였다. 스트레스는 흰쥐를 수조에 담그는 수침 스트레스 모델로 유발하였다. 이러한 모델은 쥐가 싫어하는 물속에 6시간동안 스트레스 케이지에 넣어서 강제로 구속시키는 것으로써 흰쥐에게 급성위궤양을 유발하는 것으로 알려져 있다. 실험약물 (스티렌; stillene 60mg/kg 또 는 구인동결건조분말 50mg/kg)은 흰쥐를 물속에 넣기 30분 전에 투여하였다. 수조의 온도는 21내지 23℃로 유지시켰다. 수침이 종료되면 위를 적출하고 유문부를 결찰한 후 분문을 통해 3mL의 2% 포르말린 용액을 주입하여 10분간 고정하였다. 고정 후 대만부를 절개하고 생리식염수로 세척하고 고정판에 잘 펴서 고정한 후 사진을 찍었다. 사진에서의 손상된 부위의 면적을 영상분석기로 측정하였다.

결과는 표1과 같다. 구인동결건조분말은 50mg/kg 용량투여에 의해 아무것도 처치하지 않은 대조군에 비해 50.2%의 위궤양발생이 억제되었다. 양성대조약물로 사용한 스티렌은 18.1%의 위궤양발생 억제율을 나타내었다.

표1. 수침스트레스에 의한 위궤양유발에 있어서 구인동결건조분말의 효과

스티렌(양성대조약물); 동아제약 스티렌.

궤양면적은 평균±표준오차로 표시.

*; 95%신뢰도에서의 대조군과 비교하여 통게학적 유의성을 나타냄.

실시예 3; 약물에 의한 위궤양 모델에서의 항위궤양 효과

실험동물은 6주령의 수컷 위스타 흰쥐를 사용하였다. 궤양유발약물로는 비스 테로이드성 소염제인 인도메타신 (indomethacin)을 사용하였는데 이는 위세포에 존재하는 싸이클로-옥시게나제 (cyclo-oxygenase)의 활성을 억제로 인한 프로스타싸이클린 (prostcyclin)의 합성이 억제되어 위손상이 발생된다고 보고되었다. 시험 전 하룻밤동안 절식시킨 위스타 흰쥐에 실험약물 (스티렌; stillene 60mg/kg 또는 구인동결건조분말 50mg/kg)을 경구투여하고 30분 후에 인도메타신을 20mg/kg 용량으로 경구투여하여 위궤양을 유발하였다. 위궤양약물 투약 후 6시간이 지나고 흰쥐를 희생시켜 위를 적출하고 유문부를 결찰한 후 분문을 통해 3mL의 2% 포르말린 용액을 주입하여 10분간 고정하였다. 고정 후 대만부를 절개하고 생리식염수로 세척하고 고정판에 잘 펴서 고정한 후 사진을 찍었다. 사진에서의 손상된 부위의 길이를 영상분석기로 측정하였다.

결과는 표2과 같다. 구인동결건조분말은 50mg/kg 용량투여에 의해 아무것도 처치하지 않은 대조군에 비해 46.8%의 위궤양발생이 억제되었다. 양성대조약물로 사용한 스티렌은 약 13.2%의 위궤양발생 억제율을 나타내었다.

표2. 약물에 의한 위궤양유발에 있어서 구인동결건조분말의 효과

스티렌(양성대조약물); 동아제약 스티렌.

궤양면적은 평균±표준오차로 표시.

*; 95%신뢰도에서의 대조군과 비교하여 통계학적 유의성을 나타냄.

실시예 4; 위궤양 모델에서 구인동결건조분말의 위궤양 치료 효과

실험동물은 6주령의 수컷 위스타 흰쥐를 사용하였다. 위궤양은 앞의 실시예2에서와 같은 수침 스트레스 모델로 유발하였다. 위궤양 유발(수침)은 하루에 한번 씩 3일간 총 3회를 실시하였다. 1일차에는 먼저 6시간 동안 수침을 실시하고 수조에서 실험동물을 꺼내어 사육케이지로 옮겼다. 수침이 종료되고 3시간 후에 실험약물 (오메프라졸;omeprazole 10mg/kg, 스티렌; stillene 60mg/kg, 구인동결건조분말 50mg/kg)을 경구하였다. 2일차에는 수침을 2시간 동안만 실시하였고 실험약물은 수침 1시간 전과 수침 종료 후 3시간에 1일차와 같은 용량으로 투여하였다. 3일차는 2일차와 동일하게 시행하였고 투약 후 3시간 후에 실험동물을 희생시켜 위를 적출하였다. 적출된 위의 유문부를 결찰한 후 분문을 통해 3mL의 2% 포르말린 용액을 주입하여 10분간 고정하였다. 고정 후 대만부를 절개하고 생리식염수로 세척하고 고정판에 잘 펴서 고정한 후 사진을 찍었다. 사진에서의 손상된 부위의 면적을 영상분석기로 측정하였다.

결과는 표3과 도1 내지 도8과 같다. 구인동결건조분말은 50mg/kg 용량투여에 의해 아무것도 처치하지 않은 대조군에 비해 72.2%의 위궤양발생이 억제되는 효과를 나타내었다. 또한 양성대조약물인 오메프라졸 10mg/kg 투여군은 대조군에 비해 71.6%의 위궤양발생 억제 효과를 나타내었다. 한편 또다른 양성대조약물로 사용한 스티렌은 약 18%의 위궤양발생 억제율을 나타내는 것으로 관찰되었다. 따라서 구인건조분말은 수침 스트레스에 의한 위궤양 유발을 억제하는 효과가 스티렌 보다는 우수하고 오메프라졸과는 비슷한 것으로 관찰되었다.

표3. 수침스트레스로 유발된 위궤양에 대한 구인동결건조분말의 치료 효과

스티렌(양성대조약물); 동아제약 스티렌.

오메프라졸 (양성대조약물); Sigma Co제품의 위궤양 치료제 원료명이다. 오메프라졸은 치료제이므로 치료효과를 실시한 실시예4에서만 사용하였습니다.

궤양면적은 평균±표준오차로 표시.

실시예 5; 구인추출 상등액을 이용한 실시예

실시예1에서 제조한 구인추출 상등액 8.5kg을 이용하여, 실시예2 내지 실시예4의 실험을 동일하게 하였다. 다만, 구인추출 상등액은 구인동결건조분말의 중량의 약 7배이므로, 실시예2 내지 실시예4에서 투입하는 구인동결건조분말의 중량 의 7배에 해당하는 구인추출 상등액을 투입하였다.

실시예2 내지 실시예4의 실험을 구인동결건조분말 대신 구인추출 상등액을 이용한 결과, 실시예2 내지 실시예4와 동일, 유사한 결과가 도출되었다.

이상과 같이 본 발명에 의한 항위궤양 또는 위궤양 치료효과가 있는 조성물은, 위궤양의 발생을 억제하거나 위궤양 치료효과가 있는 항위궤양 또는 위궤양 치료효과가 있다.

Claims

구인동결건조분말 또는 구인을 습식 분쇄후 원심분리하여 얻어진 상등액을 포함하는 항위궤양용 또는 위궤양치료용 약학조성물.
제1항에 있어서,

상기 구인동결건조분말 또는 구인을 습식 분쇄후 원심분리하여 얻어진 상등액은 단백질분해효소인 룸브로키나제를 유효성분으로 하는 것을 특징으로 하는 항위궤양용 또는 위궤양치료용 약학조성물.
제1항 또는 제2항에 의한 항위궤양용 또는 위궤양치료용 약학조성물 제조방법은,

생구인을 증류수로 세척하는 세척단계와;

상기 세척단계를 거친 생구인을 습식분쇄하는 습식분쇄단계와;

습식분쇄단계를 거쳐 분쇄된 구인을 2,000 내지 4,000×g로 20분 내지 40분간 원심분리하여 상등액을 얻는 원심분리단계와;

상기 상등액을 포함하는 항위궤양 또는 위궤양 치료효과가 있는 조성물을 생산하는 생산단계;를 갖는 항위궤양용 또는 위궤양치료용 약학조성물 제조방법.
제3항에 있어서,

상기 상등액을 규조토를 이용하여 불용물질을 여과하는 여과단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 항위궤양용 또는 위궤양치료용 약학조성물 제조방법.
제4항에 있어서,

상기 상등액을 동결건조하여 구인동결건조분말을 만드는 구인동결건조분말 제조단계를 포함하며,

상기 조성물생산단계는 상기 구인동결건조분말을 이용하는 것을 특징으로 하는 항위궤양용 또는 위궤양치료용 약학조성물 제조방법.