KR100789405B1 - 실크티로신의 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 티로신의 제조방법에 관한 것으로서, 실크아미노산을 제조하는 공정에서 불순물로서 버려지던 티로신을 회수하여 활용하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 실크아미노산의 제조방법에 있어서, 누에고치 등을 가수분해한 다음에, 티로신 성분이 석출되어 불순물과 함께 배출되는 것을 방지하기 위하여, 1차 중화반응을 산성영역에 머물도록 진행하고, 그 상태에서 불순물을 제거하며, 불순물이 제거된 가수분해 용액으로부터 티로신 성분이 석출되는 영역으로 중화반응을 2차적으로 실시하며, 그 상태에서 티로신 성분과 실크아미노산 성분을 서로 분리하게 된다. 서로 분리된 실크아미노산은 이후 실크아미노산의 회수단계로 진행되어지는 반면에, 티로신은 티로신 회수단계로 진행되어진다.

본 발명은 실크아미노산과 티로신을 동일한 가수분해 용액으로부터 제조할 수 있는 효과가 있다.

티로신, 실크아미노산, 누에고치, 폐견사, 피브로인, 가수분해

Description

실크티로신의 제조방법{Method of Producing Silk Tyrosine}

본 발명은 티로신의 제조방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 실크아미노산을 생산하는 과정에서 불순물로 취급되어 버려지고 있었던 티로신 성분을 별도로 분리하여 회수함으로써 실크 티로신을 제조하는 방법에 관한 것이다.

일반적으로 티로신은 실크아미노산의 일종으로서, 누에고치, 양잠설물 또는 부잠사 등(이하, "누에고치 등"이라 한다)의 피브로인 단백질에 11%, 세린신 단백질에 4% 정도 존재한다.

티로신은 견피브로인, 카제인, 인슐린에 많이 존재하는데, L-티로신은 아드레날린[부신피질 호르몬], 티록신[갑상선 호르몬], 멜라닌 색소 등 호르몬 생합성에 중요한 역할을 하며, 소아의 성장발육, 노인치매에도 효과가 있는 것으로 알려져 있다.

실크아미노산은 17 내지 20종의 아미노산으로 구성되어 있고 신체의 세포조 직들을 활성화시키는 기본 물질로서, 통상적으로 누에고치 등에 존재하는 피브로인 단백질을 산가수분해시켜서 제조되어지고 있다.

통상적인 실크아미노산의 제조방법은 누에고치 등을 정련하고 세척하는 준비단계, 상기의 누에고치 등을 산에 의해 저분자량으로 분해시키는 가수분해단계, 가수분해단계에서 첨가된 산에 의해 산성화된 용액을 중성으로 전환시키는 중화단계, 가수분해시 생성되는 색소 및 이취를 제거하는 탈색 및 탈취단계, 탈색 및 탈취된 용액의 미분해물, 번데기 등을 제거하는 여과단계, 불순물이 제거된 용액으로부터 염을 제거하는 탈염단계, 탈염된 용액을 농축하는 농축단계, 그리고 농축된 용액을 건조시키는 건조단계를 포함하고 있다.

종래의 통상적인 실크아미노산의 제조방법은 상기의 중화단계에서 직접중화법을 사용함으로써, 아미노산의 등전점에 의하여 침전이 발생하고, 유지성분을 함유한 단백질이 염산과 반응하여 클로로하이드린을 생성하게 되는데, 그 중에서도 인체에 극히 유해한 MCPD(3-chloro,2-propane diol)와 DCP(1,3-dichloro-2-propanal)를 생성하게 되므로, 바람직스럽지 못한 단점이 있었다.

이에, 본 발명자는 위와 같은 실크아미노산의 제조방법을 개량하여 상기의 유해성분을 원천적으로 발생시키지 않도록 하였고, 이러한 개량된 제조방법을 특허출원하여 특허등록 제443785호로 특허권을 획득하기도 하였다.

그러나, 상기의 특허등록 제443785호에 의한 실크아미노산의 제조방법에 의 할 경우에는, 중화된 용액 속에 다량 석출되어 있는 티로신 성분이 제조공정 특성에 의하여 불순물과 함께 버려질 수밖에 없었다. 이것은 실크아미노산을 제조하기 위하여, 누에고치 등을 가수분해시킨 용액 중에 다량으로 함유되어 있는 티로신 성분을 전혀 활용하지 못하는 것으로서, 약 10%의 제조수율 손실과 천연자원의 활용을 포기하는 것이나 다름없는 처사라고 하지 않을 수 없다.

이와 같이 종래의 통상적인 실크아미노산의 제조방법은 상기의 누에고치 등로부터 실크아미노산을 제조하는 과정에서 티로신 성분이 풍부하게 함유되어 있음에도 불구하고, 이러한 유용한 성분을 공정상의 특성으로 인해 폐기처분 되어지는 단점이 있었다.

따라서, 본 발명의 목적은 실크아미노산을 제조하는 공정에서 다량 발생되어 있는 티로신 성분을 그대로 분리하여 회수하면서도 여전히 실크아미노산을 제조할 수 있는 티로신의 제조방법을 제공하는데 있다.

본 발명에 의한 실크티로신의 제조방법은 누에고치 등을 정련하고 세척하는 준비단계; 상기의 누에고치 등을 산에 의해 저분자량으로 분해시키는 가수분해단계; 가수분해단계에서 첨가된 산에 의해 산성화된 용액을 알칼리 성분으로 중화시키되 pH 1.5 내지 pH 3.5의 범위를 유지하도록 전환시키는 1차 중화단계; 1차 중 화된 용액으로부터 불순물 성분을 제거하는 이물질의 제거단계; 이물질을 제거한 용액을 다시 알칼리 성분으로 중화시키되 pH 6.0 내지 pH 8.0의 범위를 유지하도록 전환시키는 2차 중화단계; 2차 중화된 용액으로부터 실크아미노산 성분과 티로신 성분을 서로 분리시켜서 티로신 성분을 추출하는 티로신 성분의 추출단계; 추출된 티로신 성분을 산 또는 알칼리로 용해 및 정제하여 다시 회수하는 마무리단계; 를 포함하고 있다.

본 발명에 있어서, 상기의 티로신 성분은 상기의 마무리단계를 더욱 정교하고 세밀한 공정을 거쳐서 순도가 높은 티로신을 수득할 수 있게 된다. 또한, 본 발명에 있어서, 실크티로신이라 함은 실크아미노산으로부터 수득된 티로신을 의미한다.

이하, 본 발명을 보다 구체적이고 상세하게 설명한다.

1). 사전 준비단계:

본 발명에 의한 티로신의 제조방법은 누에고치 등을 정련하고 세척하는 준비단계를 포함하고 있다.

본 발명에 있어서, 원료로서는 누에고치 속의 번데기를 제거한 절각누에고치 또는 누에고치 중 실켜기를 할 수 없는 얇은 고치, 풀솜, 견면, 생피저 등 양잠설물을 사용한다. 먼저 절각누에고치 또는 양잠설물을 세척, 정련하여 그 속에 함유된 세리신(sericin) 성분을 제거한다. 세리신 성분(30%)은 피브로인(70%)과 함께 누에고치에 함유된 주성분이지만, 가수분해 이후의 공정에서 다량의 거품을 발생시켜 공정진행에 큰 지장을 초래하고, 또한 세리신의 주성분인 세린은 단백질의 가수분해 도중 라세미화를 일으키게 되므로, 전처리 정련공정을 통해 세리신을 제거한다.

정련시 용매로는 비누, 유화제, 탄산나트륨, 수산화나트륨, 중탄산나트륨, 열수 등을 사용할 수 있으나, 인체에 가장 위험이 적은 물질인 중탄산나트륨(NaHCO₃)용액 또는 열수를 사용하는 것이 바람직하다. 상기의 정련시 용매는 약 2% 중탄산나트륨이 더욱 바람직하고, 용액을 교반해주면서 약 1시간 정도 가열한 후 정련된 누에고치 등을 꺼낸다.

정련된 누에고치 등을 깨끗한 열수로 약 30분씩 세척을 하며, 이러한 세척을 3회 정도 반복한다. 세척된 누에고치 등을 원심분리법에 의하여 탈수하고, 탈수된 누에고치 등의 함수율은 50% 정도인 것이 바람직하다. 탈수된 누에고치 등은 건조시켜서 최종 함수율이 10% 이하가 되도록 한다.

2). 가수분해 단계:

본 발명에 의한 티로신의 제조방법은 상기의 누에고치 등을 산에 의해 저분자량으로 분해시키는 가수분해단계를 포함하고 있다.

본 발명에 있어서, 최종 함수율 10% 이하인 누에고치 등을 정확히 칭량하고, 그의 약 10배수에 해당하는 염산용액과 함께 컨덴서가 부착된 반응용기에 투입한 후, 약 105℃ 내지 120℃에서 40 시간 내지 48시간 정도 가열한다. 가수분해공정에서 사용하는 염산은 2N 농도의 염산용액을 사용하는 것이 바람직하다. 그 농도가 높으면 분해속도는 빠르지만 가수분해 후의 용액의 색상이 짙고 인체 유해물질인 MCPD 및 DCP가 생성되기 쉬우며, 농도가 낮으면 분해속도가 느린 문제점이 발생하기 때문이다. 이때, 상기의 컨덴서에는 냉각수를 공급하여 가열시 증발되는 염산용액을 응축시켜 다시 가수분해용기로 환류시킨다. 냉각수를 공급하면서 가열함으로써 짧은 시간내에 염산용액이 모두 증발되어 가수분해가 불가능해지는 것을 방지할 수 있기 때문이다.

3). 1차 산성화 중화단계:

본 발명에 의한 티로신의 제조방법은 가수분해단계에서 첨가된 염산에 의해 산성화된 용액을 알칼리 성분으로 중화시키되 pH 1.5 내지 pH 3.5의 범위를 유지하도록 하는 1차 중화단계를 포함하고 있다.

본 발명에 있어서, 가수분해된 용액을 1차적으로 알칼리 성분에 의하여 중화시킨다. 중화제로서는 통상적으로 사용되는 염기를 사용할 수 있다. 본 발명은 그 중에서 수산화나트륨(NaOH)을 사용하는 것이 더욱 바람직하다. 이는 중화단계 이후 인체에 유해하지 않고 탈염이 용이한 염화나트륨을 생성하게 되기 때문이다.

본 발명에 있어서, 상기의 수산화나트륨은 1차 중화단계에서 pH 1.5 내지 pH 3.5의 범위를 유지하도록 투입하는 것이 바람직하고, 더욱 바람직하기로는 pH 1.8 내지 pH 2.5의 범위를 유지하는 것이다. 본 발명은 상기 가수분해된 용액을 1차적 으로 pH 1.5 내지 pH 3.5의 범위로 중화시키는 점에 그 특징이 있는데, 그 이유는 상기 가수분해된 용액으로부터 티로신 성분이 용해되어 있는 상태에서 이물질을 분리하여 제거하는 아래의 이물질제거 단계에서, 상기의 티로신 성분이 이물질들과 함께 제거되는 것을 방지하기 위한 것이다. 더욱 구체적으로 설명하면, 티로신 성분은 통상적으로 pH 6.5 내지 pH 7.5의 범위에서 가장 잘 석출되어지게 되므로, pH 1.5 내지 pH 3.5의 범위에서는 석출되지 않는다. 따라서 다음 단계에서 가수분해액으로부터 불용성 이물질만을 분리제거할 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기의 수산화나트륨은 결정상태로 사용하는 것보다는 수용액상태로 사용하는 것이 더욱 바람직하다.

4). 이물질 제거단계:

본 발명에 의한 티로신의 제조방법은 1차 중화된 용액으로부터 불순물 성분을 제거하는 이물질의 제거단계를 포함하고 있다.

본 발명에 있어서, 이물질의 제거단계는 1차 중화된 용액을 pH 1.5 내지 pH 3.5의 범위에 조절해둔 상태에서 진행되어진다. 본 발명은 중화된 용액을 실온에서 약 6시간 이상 방치한 다음, 상등액과 침전물을 서로 1차적으로 분리시킨다. 상등액을 이송시키면, 용기내에 침전물이 남겨지고, 상기의 침전물로부터 활성탄 또는 규조토 등의 여과보조제를 이용하여 이물질을 제거한다. 여과보조제는 미립자인 형태가 바람직하고, 그 투입량은 총 용액에 대하여 0.1 내지 1.0%(W/V), 더욱 구체적으로는 0.5%(W/V) 정도를 투입하는 것이 바람직하다. 교반시간은 30분 내지 60분 정도가 바람직하며, 중화처리된 용액에 따라 변동될 수 있다.

본 발명에 있어서, 이물질이 제거된 용액은 다시 상기의 상등액과 합쳐져서 아래의 2차 중화단계로 진행되어진다.

5). 2차 중성화 중화단계:

본 발명에 의한 티로신의 제조방법은 이물질을 제거한 용액을 다시 알칼리 성분으로 중화시키되, pH 6.0 내지 pH 8.0의 범위를 유지하도록 하는 2차 중화단계를 포함하고 있다.

본 발명에 있어서, 이물질이 제거된 가수분해 용액은 2차적으로 알칼리 성분에 의하여 다시 중화시킨다. 중화제로서는 역시 통상적으로 사용되는 염기를 사용할 수 있다. 본 발명은 그 중에서 수산화나트륨(NaOH)을 사용하는 것이 더욱 바람직하다. 이는 중화단계 이후 인체에 유해하지 않고 탈염이 용이한 염화나트륨을 생성하게 되기 때문이다.

본 발명에 있어서, 상기의 수산화나트륨은 2차 중화단계에서 pH 6.0 내지 pH 8.0의 범위를 유지하도록 투입하는 것이 바람직하고, 더욱 바람직하기로는 pH 6.5 내지 pH 7.5의 범위를 유지하는 것이다.

본 발명은 상기의 이물질이 제거된 가수분해 용액을 2차적으로 pH 6.0 내지 pH 8.0의 범위로 다시 중화시키는 점에 그 특징이 있는데, 그 이유는 상기 가수분해 용액 중에 존재하는 티로신 성분을 1차 중화단계에서는 가수분해 용액 중에 용해된 상태로 유지시키는 반면에, 2차 중화단계를 거친 이후에는 가수분해 용액으로 부터 석출되어 나올 수 있도록 함으로써, 티로신의 추출을 용이하게 수행하도록 하기 때문이다.

본 발명에 있어서, 상기의 수산화나트륨은 결정상태로 사용하는 것보다는 수용액상태로 사용하는 것이 더욱 바람직하다. 또한, 상기의 중화제로서 수산화나트륨은 약 30% 내지 40% 수산화나트륨 수용액이 바람직하다.

6). 티로신 성분의 추출단계:

본 발명에 의한 티로신의 제조방법은 2차 중화된 용액으로부터 실크아미노산 성분과 티로신 성분을 서로 분리시켜서 티로신 성분을 추출하는 티로신 성분의 추출단계를 포함하고 있다.

본 발명은 2차 중화된 용액을 원심분리기 또는 여과기에 통과시켜 티로신 성분을 추출한다. 상기의 중화된 용액에는 티로신 성분이 석출되어 있는 상태이므로, 상기의 티로신 성분을 중화된 용액으로부터 분리시키기 위하여 원심분리기 또는 여과기를 사용하는 것이 바람직하다. 여과기는 1.0㎛ 이하의 여과지를 이용하는 것이 바람직하다.

본 발명에 있어서, 상기의 2차 중화된 용액을 여과기에 통과시켜 티로신을 추출하고, 추출된 티로신은 수득하여 다음 단계로 이행하게 된다. 반면에, 상기의 여과기를 통과한 여과액은 이후 실크아미노산을 추출하여 제조하기 위한 공정으로 이송한다.

7). 최종 마무리단계:

본 발명에 의한 티로신의 제조방법은 추출된 티로신 성분을 용해시키고 다시 회수하는 마무리단계를 포함하고 있다.

본 발명은 추출된 티로신 성분을 더욱 정제하고 불순물 등을 제거하기 위하여 마무리단계를 실시한다. 상기 티로신의 고형분에는 티로신 이외의 다른 아미노산 및 불순물이 포함되어 있으므로, 상기의 티로신을 액상으로 다시 용해시킨 후, 제거하는 것이 바람직하다. 상기 티로신은 1N 알칼리 또는 2N 산용액으로 용해시켜 정제할 수 있으며, 2N 염산용액으로 용해시키는 것이 가장 바람직하다.

본 발명은 상기의 용해과정을 마친 후, 티로신 고형분에 부착되어 있었던 다른 아미노산 및 불순물을 제거하는 이물질제거과정을 수행하는 것이 바람직하다. 상기 이물질제거과정은 상기의 염산용액 중에 활성탄을 투입하여 여과기를 이용하여 여과시키고, 여과된 액을 1.0㎛ 이하의 필터를 이용하여 잔여 불순물을 제거하는 것이 바람직하다.

본 발명은 상기의 염산용액 중에 용해되어 있는 티로신 성분을 다시 석출시키고 이것을 다시 여과시키는 2차 추출과정을 수행하는 것이 바람직하다. 상기의 2차 추출방법은 상기 염산용액을 알칼리 성분으로 다시 중화시켜 pH 6.0 ~ pH 8.0 정도로 유지시키고, 그 상태에서 티로신 성분을 석출시킨 다음, 다시 여과시키는 것이 바람직하다. 이는 티로신 성분이 pH 6.5 내지 pH 7.5 에서 가장 석출되기 쉬운 성질을 가지고 있는 점을 이용한 것이고, 상기의 알칼리 성분은 역시 수산화나트륨이 가장 적합하다. 그 이유는 위에서 이미 설명한 바와 같다. 또한, 티로신 성 분의 석출과정은 통상의 실온에서 수행될 수 있고, 좀더 바람직하기로는 25℃ 내지 30℃에서 수행될 수 있다.

본 발명은 중화된 용액 중에서 석출된 티로신을 다시 여과시켜 2차 회수하는 것이 바람직하다. 여과방법 및 그 조건은 위에서 이미 설명한 바와 동일하다. 따라서, 여과기는 1.0㎛ 이하의 여과지를 이용하는 것이 바람직하다.

본 발명은 2차 회수된 티로신을 정제수로 세척하여 중화과정에서 발생된 염분을 제거하는 세척과정을 수행하는 것이 바람직하다. 석출된 티로신 고형분은 그의 표면에 필연적으로 중화염이 포함되어 있을 수 있으므로, 이들을 제거하기 위함이다. 세척 후 염도는 0.3% 이하로 유지하는 것이 바람직하다.

본 발명은 세척과정을 수행한 이후 티로신을 최종적으로 수득하는 최종 회수과정을 수행하는 것이 바람직하다. 이를 위하여, 상기의 티로신을 티로신 고형분의 3~5배의 정제수에 투입하고, 이들을 60℃ ~ 90℃에서 20 분 내지 60분 정도 살균 및 교반하는 것이 바람직하다. 살균 및 교반과정을 마친 후, 티로신 액을 건조시켜서 최종적인 실크티로신을 회수하게 된다.

이러한 건조과정을 거치면 거의 순수한 실크티로신을 얻을 수 있으며, 수득된 실크티로신은 적당한 용기에 충진되고 포장되어지고, 사용목적에 따라 적절하게 사용될 수 있다.

이하, 본 발명을 실시예에 의거하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 아래 의 실시예는 본 발명의 기술사상을 이 기술분야의 통상전문가로 하여금 보다 용이하게 이해할 수 있도록 하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 아래의 실시예에 한정되는 것이 아님은 자명하다.

《실시예》

세리신 성분을 제거한 정련누에고치 500kg 을 준비하였다. 상기 누에고치 500 kg에 2N 염산용액 5000리터를 컨덴서가 부착된 스팀자켓 반응기에 고르게 투입하고, 상기 반응기 내부 온도를 평균 115℃를 유지하면서, 40시간 가수분해시켰다. 가수분해가 완료되면 55℃ 이하로 냉각하여 33% 수산화나트륨용액 600 리터를 주입하고, 30분 정도 교반하여 pH 2.0 이 되도록 한 후 6시간 이상 실온에서 방치하고, 상등액과 침전물로 분리되어지도록 하였다. 중화액의 2/3의 상등액을 완충탱크로 이송한 다음, 10kg의 활성탄을 투입하고, 45분간 교반한 다음, 프리코트 필터의 탈액조로 이송하여 여과지로 여과하였다. 여과된 액은 상기 침전 분리과정의 상등액 이송탱크인 완충탱크로 보내고, 여과 케익은 별도로 회수하였다. 완충탱크에 33% 수산화나트륨 350 리터를 가하여 1시간 동안 교반하여 pH 6.8이 되도록 하였다. 티로신을 석출시킨 다음, 석출이 완료되면 프리코트 캔들필터에서 여과시켰다. 탈액조에서 케익 상태로 회수된 티로신은 2차에 걸쳐 80kg 정도를 회수하였다. (이때, 함수율이 50% 인 것을 감안하면, 원료대비 75% 정도의 티로신을 회수한 것이다). 여과된 액은 실크아미노산 생산을 위한 공정으로 이송시켜 기존의 공정으로 진행하도록 하였다. 회수한 케익상태의 티로신을 정제하기 위하여, 2N 염산 350리 터에 용해시키고, 활성탄(200 mesh, 95%) 5kg을 투입하고 30 분간 교반, 탈색, 탈취 및 불순물을 흡착시키고 여과한 다음, 여과된 티로신 용해액을 1N 수산화나트륨을 사용하여 pH 6.5로 중화시키고 티로신을 재석출시켰다.

중화염을 제거하기 위하여 정제수로 현탁시켜 3회 여과시키고, 염도를 0.3%이하로 처리하여, 50% 함수의 60kg/wet 티로신을 얻었다. 선반 열풍건조기에 1 ~ 2 두께로 펼쳐깔고 80℃에서 24시간 건조하여 티로신 케익을 얻었다. 이를 파워밀 분쇄기로 분쇄하여 최종 수분 3% 이하의 약 30kg에 달하는 실크티로신을 생산하였다. 총 수득율은 평균 50% 이상이고, 그 함량은 90% 정도이었다.

이와 같이, 본 발명에 의한 티로신의 제조방법은 실크아미노산의 제조과정에서 불순물과 함께 버려지던 유용한 성분을 회수할 수 있으므로, 자원의 활용을 대폭적으로 향상시킨 장점이 있다.

또한, 본 발명은 실크아미노산의 제조방법으로서 활용될 수도 있으므로, 실크아미노산을 제조하면서 그와 동시에 실크티로신을 제조할 수 있는 장점도 있다.

이상에서 본 발명에 의한 실크티로신의 제조방법을 구체적으로 설명하였으나, 이는 본 발명의 가장 바람직한 실시양태를 기재한 것일 뿐, 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니며, 첨부된 특허청구범위에 의해서 그 범위가 결정되어지고 한정되어진다.

또한, 이 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 누구나 본 발명의 명세서의 기재내용에 의하여 다양한 변형 및 모방을 행할 수 있을 것이나, 이 역시 본 발명의 범위를 벗어난 것이 아님은 명백하다고 할 것이다.

Claims (8)

1. 절각누에고치 또는 양잠설물을 정련하고 세척하여 가수분해함으로써 티로신을 제조하는 방법에 있어서,

   상기의 정련된 절각누에고치 또는 양잠설물을 염산에 의해 분해시키는 가수분해단계;

   가수분해단계에서 첨가된 염산에 의해 산성화된 용액을 중화시키되 pH 1.5 내지 pH 3.5의 범위를 유지하도록 전환시키는 1차 중화단계;

   1차 중화된 용액으로부터 불순물 성분을 제거하는 이물질의 제거단계;

   이물질을 제거한 용액을 다시 중화시키되 pH 6.0 내지 pH 8.0의 범위를 유지하도록 전환시키는 2차 중화단계;

   2차 중화된 용액으로부터 실크아미노산 성분과 티로신 성분을 서로 분리시켜서 티로신 성분을 추출하는 티로신 성분의 추출단계;

   추출된 티로신 성분을 용해시키고 정제하여 다시 회수하는 마무리단계; 를 포함하고 있는 것을 특징으로 한 실크티로신의 제조방법.
2. 제 1 항에 있어서,

   상기의 1차 중화단계는 알칼리 성분으로서 수용액상태의 수산화나트륨을 사용하고, pH 1.8 내지 pH 2.5의 범위를 유지하도록 중화시키는 것을 특징으로 한 실 크티로신의 제조방법.
3. 제 1 항에 있어서,

   상기의 2차 중화단계는 이물질을 제거한 용액을 다시 알칼리 성분으로서 수용액상태의 수산화나트륨을 사용하고, pH 6.5 내지 pH 7.5의 범위를 유지하도록 중화시키는 것을 특징으로 한 실크티로신의 제조방법.
4. 제 1 항에 있어서,

   상기의 티로신의 추출단계는 원심분리기 또는 여과기에 통과시켜 추출하며, 여과기의 경우 1.0㎛ 이하의 여과지를 이용하여 여과하는 것을 특징으로 한 실크티로신의 제조방법.
5. 제 1 항에 있어서,

   상기의 마무리단계는 추출된 티로신을 2N 염산용액으로 다시 용해시키고, 상기 염산용액 중에 활성탄을 투입하여 여과시키고, 여과된 액을 1.0㎛ 이하의 필터를 이용하여 잔여 불순물을 제거하여 이물질을 제거하는 것을 특징으로 한 실크티로신의 제조방법.
6. 삭제
7. 제 5 항에 있어서,

   상기의 마무리단계는 상기 2차 추출과정 이후에, 2차 회수된 티로신을 정제수로 세척하여 중화과정에서 발생된 염분을 제거하는 세척과정을 더욱 포함하는 것을 특징으로 한 실크티로신의 제조방법.
8. 제 7 항에 있어서,

   상기의 마무리단계는 상기의 세척과정을 수행한 이후에, 세척된 티로신 고형분의 3 ~ 5배의 정제수를 상기 티로신에 투입하고, 이들을 60℃ ~ 90℃에서 20 내지 60분 동안 살균 및 교반하고, 살균 및 교반과정을 마친 후, 티로신 액을 건조시켜서 최종적인 티로신을 회수하는 최종회수과정을 더욱 포함하는 것을 특징으로 한 실크티로신의 제조방법.