KR100638573B1

KR100638573B1 - 흡연으로 인해 유발되는 인체내의 유독성분을 제거하는 생약 조성물

Info

Publication number: KR100638573B1
Application number: KR1020040038590A
Authority: KR
Inventors: 조진원; 안대성; 김락권
Original assignee: 극동에치팜 주식회사
Priority date: 2004-05-28
Filing date: 2004-05-28
Publication date: 2006-10-26
Also published as: KR20050113091A

Abstract

본 발명은 흡연으로 인한 니코틴과 다이옥신을 분해하는 우수한 기능성제제 및 흡연으로 유발되는 인체내의 유독성분을 제거하는 생약추출물 및 그의 제조방법에 관한 것으로 보다 상세하게는 천연 생약제중 삼백초,이질풀, 흑두, 차전초, 용규, 갈근을 주성분 생약제로 하고 보조성분 생약제로 인동덩굴,결명자,감초, 천초,토사자, 치자, 백작약,오미자,진피를 이용한 식물성 추출물을 포함한다. 본 발명의 우수한 기능성 제제는 흡연으로 인한 피해를 방지하고 니코틴과 다이옥신의 분해를 촉진시키고, 발암물질의 생성을 억제할 뿐만 아니라 항산화효과, 항균력효과를 나타내고, 돌연변이를 억제하고 더 나아가서 흡연으로 인한 폐암 발생율을 현저히 낮춘다.

니코틴, 담배 특이적 니트로사민, 담배, 기능성 식품, 항돌연변이, 항산화효과, 항균력효과

Description

흡연으로 인해 유발되는 인체내의 유독성분을 제거하는 생약 조성물{A composition of plants extracts having detoxication ability of toxic ingredients caused by smoking}

도 1은 비장세포에 의한 증식효과를 나타낸 것이고

도 2는 Aflatoxin B1의 돌연변이 유발력 결과를 나타낸 것이고

도 3은 담배의 타르중에서 NNN, NAT, NNK, B(a)P의 정량분석 결과를 나타낸것이다.

1. 발명이 속하는 기술분야

본 발명은 흡연으로 인하여 인체내에 축적된 니코틴과 다이옥신을 분해하는 우수한 기능성제제 및 흡연으로 유발되는 인체내의 유독성분을 제거하는 생약추출물의 조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로 더욱 상세하게는 흡연으로 인한 피해를 방지하고 니코틴과 다이옥신의 분해를 촉진시키며, 발암물질의 생성을 억제할 수 있는 우수한 기능성제제에 관한 것이다.

2.종래기술

사람들의 건강에 피해를 주는 많은 물질과 요소들이 있지만 그 중에서 가장 많은 피해를 주는 것이 담배다. 담배는 현 시대에서 가장 큰 예방 가능한 사망원인이다.

세계보건기구의 추정에 의하면 1996년도 현재 전 세계적으로 흡연과 관련된 질환으로 사망하는 인구수는 선진국에서 연간 약 200만 명이고 개발도상국가에서는 약 100만명이 된다고 한다. 그리고 흡연율은 선진국과 후진국의 차이를 알려주는 하나의 중요한 지표로 인식되고 있다. 특히 중국 사람들의 흡연율의 증가는 모두의 우려와 관심의 대상이 되고 있다.

흡연과 질병의 관련성에 대한 연구는 1900년대 중반 이후 집중적으로 연구되기 시작했으며, 흡연으로 인한 폐암을 비롯한 각종 질병의 발생증가와 다른 건강장해에 대한 증거가 지속적으로 쌓이고 있다. 실제로 담배연기 속에서 일찍이 약 4,000 여종의 성분을 찾아냈으며, 현재는 주류연에 포함된 성분이 10만종이 넘을 것으로 추정하고 있다.

그 중에서 니코틴은 신경계에서의 작용을 보면, 자율신경계 내의 모든 니코틴성 수용체와 결합하여 모든 교감, 부교감 신경에 흥분작용을 일으킨다. 그러나 이러한 흥분작용은 지속적으로 일어나지 않으며 대량의 니코틴 공급시에는 흥분작용의 시간이 매우 짧아진다. 중추신경계에 대해서 니코틴은 자율신경계에서와 마 찬가지로 처음에 흥분시켰다가 나중에는 마비시킨다. 즉, 척수의 반사흥분성이 증가되고, 연수의 각 중추(미주신경중추, 호흡중추 등)가 흥분되어 맥박이 느려지고 호흡이 빨라진다. 또한 특이한 것은 진전(tremor)이 나타나고 이어서 전신의 경련이 일어난다. 이와 같은 흥분작용에 이어 마비기에 들어가므로 끝내는 호흡중추 및 말초호흡근 마비로 사망할 수도 있다. 즉 한꺼번에 과량의 담배를 피울 경우 사망하게 되는 원인이 여기에 있는 것이다.

순환계에서 혈관 및 혈압은 혈관운동중추 및 교감신경계의 작용이 우세하게 나타나 혈관은 수축되고 혈압이 상승되나 점차 시간이 흐름에 따라 혈압은 다시 하강하게 된다. 이 때문에 흡연자들은 보통 맥박이 빠르며, 특히 심혈관 계통에 질환이 있는 사람들이 흡연을 하게 되면 혈관이 수축되어 좁아져 혈관을 더욱 악화시킴으로 심근경색 또는 허혈증세를 나타나게 된다.

또한 니코틴은 호흡중추와 호흡근의 마비, 신체 내의 각종 분비선의 항진과 억제, 결막염, 시신경의 위축, 시신경절의 퇴행변성이 나타나서 소위 담배약시(Tobacco amblyopia)를 야기하며, 소화기 계통에는 부교감 신경을 자극하여 장운동을 증가시키고 오심, 구토, 심하면 설사를 초래한다. 니코틴은 체중 1㎏당 1㎎이 되면 사망한다고 알려져 있으며 혈중 부신피질호르몬, 유리지방산 및 항이뇨호르몬을 증강시키고 혈당을 상승시키므로 신장이나 요로계 질환이 있는 사람 또는 당뇨질환이 있는 환자는 흡연을 반드시 피해야 한다.

니코틴은 니코틴유도체(nicotine derived nitrosamine)에 의해 매우 강력한 발암물질로 작용하여 흡연으로 인한 폐암 환자는 전세계적으로 매년 수억에 이르고 있다.

1956년 Magee와 Barnes는 니트로소디메틸아민(N'-Nitrosodimethylamine:NDMA)이 쥐에서 매우 강력한 간암유발물질임을 증명(Magee,P. N., and Barnes, J. M.(1956) Br. J. Cancer, 10, 114-122)하였으며, 그 후에는 약 200개 이상의 N-nitrosamine중에서 발암성을 지닌 화합물이 30종 이상 확인 되었다.

그리고 Smith 등은 여러 가지 나이트로사민이 니코틴으로부터 형성되어 진다는 것을 보여주었고, Hecht는 NNK, NNA, NNN등 많은 다른 물질들이 니코틴으로부터 형성되어진다는 것을 증명하였다.

그리고 타르는 담배를 피우는 사람들은 흔히들 담배맛이 있다고 하는데 이것은 담배마다 독특한 타르향을 즐기는 것이다. 타르는 목초를 태울 때 흐르는 진 같은 것을 말하는데 담배도 건조된 풀잎이므로 타르가 나온다. 흡연이 몸에 해롭다고 하는 것은 바로 타르가 몸에 해롭다는 말과 같은데 담배에서 가장 해로운 성분은 타르라고 말할 수 있다. 담배연기 속에는 약 4,000여종의 독성물질이 들어 있는 것으로 추정하고 있는데 이는 담배가 탈 때 그 중심온도가 약 900℃에 이르기 때문이다. 이런 고온에서 유기물질이 열분해, 열합성, 증류, 승화, 수소화, 산화, 탈수화등의 작용을 거쳐 유해물질이 생성된다. 한 개비의 담배가 연소될 때 담배연기는 500㎎의 물질이 생성되는데 이 중 70%는 질소와 산소로 이루어지며 나머지 30%는 편의상 두 성분으로 나누어 22%의 기체성분과 8%의 미립자 성분으로 구분한다. 이 미립자 성분은 주로 타르, 니코틴, 수증기로 구성되어 있다.

타르는 암 발생의 가장 중요한 역할을 담당하며, 담배 속에는 1,200여종의 암 유발 인자를 포함하고 있는데 이 중 대부분이 타르에 속하는 물질들이다. 타르 속에 있는 대부분의 발암성 물질은 단백질성 질소형태이며 이러한 질소 성분은 호흡기계뿐 아니라 신체 여러 부위에서 암을 유발하며 특히 뇨중으로 배출되므로 방광암의 발생률을 높이게 된다. 그럼에도 불구하고 담배 애호가는 끽연의 습관을 끊는다는 일은 쉬운 일이 아니며, 또 끽연을 계속하면서 흡연으로 인한 각종 질병들을 미연에 방지하는 실시 용이한 수단과 방법도 없다.

현대사회에서 크게 문제시되고 있는 각종 유해물질의 광범위한 오염으로 인하여 직, 간접적으로 인체에 유해한 물질들의 무의식적인 섭취로 심각한 건강 위험성이 노출되고 있다. 이러한 노출과 더불어 현대인들의 각종 유해물질에 대한 면역능력 저하와 방어능력 저하는 건강한 삶의 영위와 직접적으로 연결되어 있다. 그럼에도 위에서 노출된 위험요소 인자들에 대하여 효과적인 독성감소 및 방어능력 향상에 기여할 수 있는 각종 유용성 화합물에 대한 많은 연구에도 불구하고, 종합적이고 체계적인 연구가 식품학적 또는 독성학적 연구에도 불구하고, 괄목한 만한 기능성 첨가물의 개발이 이루어지지 못하고 있다. 이에 본 발명에서는 흡연으로 인한 피해를 방지하고 담배로 인한 니코틴과 다이옥신을 분해하고 인체내의 유독성분을 제거하는데 있어서 한국 및 중국에서 오랫동안 한약재 및 식용으로 사용되어 오던 한약재 추출물을 배합하여 이들이 갖고 있는 독성감소능력 및 기능성 식품첨가물의 개발을 목적으로 본 발명를 계획하였으며, 이에 복합한약재 추출물로부터 약리학적, 독성 감소효과 및 식품학적 기능성 부여 여부를 조사, 탐색하고 그 응용성을 제공하며 흡연으로 인한 니코틴이 니코틴 유도체인 NNK, NNN, NAT로 전환되는 것보다 코티닌으로 빠르게 대사되는 것이 흡연으로 인한 피해를 줄이고, 또한 Benzo(a)pyren을 줄임으로써 궁극적으로 발암물질을 효과적으로 억제할 수 있는 것을 목적으로 한다.

다음 주성분으로 이루어지는 흡연으로 인한 피해를 방지하고 니코틴과 다이옥신의 분해를 촉진시키며, 발암물질의 생성을 억제할 수 있는 우수한 기능성제제를 제공하는데 있다.

본 발명은 (1) 삼백초 (2) 이질풀 (3)흑두 (4)차전초 (5) 용규 (6)갈근을 주성분으로 함유하고, 보조성분 생약제로 구성하는 (7) 인동덩굴 (8) 결명자 (9) 감초 (10)천초 (11) 토사자 (12)치자 (13)백작약 (14)오미자 (15)진피에서 선택된 1종 이상의 성분을 더 함유할 수도 있다.

성분(1)의 삼백초 (Houttuynia cordata thunb (poly cordata Bueck)는 식물 높이 15 ~ 30cm 되는 여러해살이 풀로 달걀 또는 심장 모양의 잎이 어긋나게 붙고 줄기 윗부분에 꽃 이삭이 돋아난다. 작은 노란 꽃들이 모인 꽃 이삭 밑에 4개의 흰 꽃쌈이 열 십자 모양으로 있다. 중부와 남부의 낮은산, 들, 길섶의 습한 곳에서 자 란다. 일본히로시마의 원폭으로 황폐된 땅에 제일 처음으로 무성하게 자란 것이 이 풀이며, 식물의 줄기와 잎이 사용된다.

주성분은 메틸노닐케논 CH₃(CH₂)₈COCH₃ (데카노일 아세트알데히드의 산화 생성물) 미르센(C₁₀H₁₆), 라우린 알데히드(C₁₁H₂₃CHO), 카프린알데히드(C ₉H₁₉CHO), 카프르산이고 이밖에도 다수의 성분이 있으며, 잎에는 쿠에르시트린과 물에 풀리는 무기성분이 있다.

작용으로는 쿠에르시트린는 오줌내기작용(10만배농도)과 강심작용이 있고 대장균, 장티푸스균, 파라티푸스균, 적리균, 임균, 포도알균, 사상균에 대한 항균작용과 모세혈관 강화작용이 있으며, 데카노일 아세트알데히드는 비병원성 곰팡이는 물론 백선균, 무좀균 등에 대한 항균작용이 있으며 포도알균, 임균, 항산성균에도 억균작용이 있다. 포도알균에 대한 항균력은 1 : 40,000이며 설파제보다 세다.

응용하는곳은 전초는 염증약, 이뇨해독약으로 임질과 요도염, 방광염, 자궁염, 폐렴, 기관지염, 물고임, 무좀치료, 탈 항, 악창, 풍악, 축농증 등에 쓰인다.

성분(2)의 이질풀(Geranium nepalense Sweet (G. thunbergii Siebold et Zuccarini)은 식물 줄기의 길이가 약 1m에 이르는 여러해살이풀이다. 잎은 3~5개로 깊이 갈라졌으며, 여름철에 연한분홍색 또는 흰꽃이 핀다. 중부 외 남부의 산과 들, 길섶에서 자라며, 식물의 어린잎을 사용한다.

주성분은 전초에는 피로갈롤타닌, 몰식자산, 호박산, 쿠에르세틴과 그 배당 체, 그리고 켐페롤과 켐페리트린 C₂₇H₃₀O₁₄·3 1/2 H₂O (켐페롤의 디람노시드)이 있으며, 다른 자료에 의하면 엘라그타닌의 한 종류인 게라닌을 주성분으로 한 타닌질이 있다.

전초에서는 프로토 카테킨산, 피로갈롤, 엘라그산, 브레비폴린, 코릴라진 등도 확인된다.

타닌의 함량은 전초에 4.7%, 잎에 20.3%, 줄기에 3.8% 뿌리에 4.6%들어 있다. 잎에서의 함량은 6~8월에 제일 높고 겨울철에 제일 낮다.

주작용은 전초의 물 추출액 또는 알코올 추출액은 장의 긴장도를 높인다. 설사멎이작용은 비스무트 제제처럼 뚜렷하며 많은 양을 써도 부작용이 없고 밥맛을 떨구지 않으며, 적리균, 장티푸스균, 대장균에 살균작용이 있다.

성분(3)의 흑두(黑豆) (Glycine max (L.) Merrill)는 다른이름으로는 서리태, 콩, 대두라고 부르며, 이식물은 한해살이풀로서 잎은 달걀 모양 또는 버들잎 모양의 쪽잎으로 된 겹잎이다. 꽃은 희거나 가지색을 띠며 드물게는 붉은색이다. 열매는 꼬투리이며, 기름과 단백질 작물로 널리 심는다.

성분으로는 씨에는 단백질이 36~45%, 기름이 17~22% 들어 있다. 이 밖에 트리테르페노이드사포닌, 질소화합물, 탄수화물, 사탕, 펙틴, 무기물과 비타민이 있다. 단백질의 80~90%는 필수 아미노산, 즉 아르기민, 메티오닌, 트레오닌, 류신, 이소류신, 발린 등으로 이루어졌다. 씨의 인지질 함량은 높은데 레시틴 1~3.5%, 케 팔린 등이 있다. 질소 화합물로는 아데닌, 구아닌, 콜린, 트리고넬린, 아미노산인 히스티딘이 있다.

탄수화물은 거의 완전히 물에 풀리는 것들로 이루어 졌으며, 그 가운데에는 3.3~13%는 사카로오스이다. 회분에는 K, Mg, Cu, Fe, Mn, Ni, Zn과 흔적의 Co 그리고 인산이 있다. 씨에는 또한 비타민 A, B₁, B₂, D, E, K와 이소플라본 배당체인 다이아진과 헤니스틴, 로비닌 등이 들어 있다. 씨에는 비타민 C가 없으나 콩나물에는 4%까지 들어있다. 싹틔운콩에는 L-아스파라긴이 많고 크산틴, 히포크산틴, 많은 양의 비타민 C가 있다.

작용하는 곳은 콩 사포닌은 지질대사에 활성이 있다. 콩에 들어 있는 레시틴은 물에 잘 풀리지 않는 지방질, 스테로이드 등을 유화시켜 물에 풀리게 하는 성질이 있으므로 동맥경화를 일으키는 주물질인 콜레스테롤의 양을 줄인다. 또한 레시틴은 몸안에서 콜린, 글리세로인산, 지방산 등으로 물분해되므로 신경 인지질 대사 과정에 좋은 영향을 준다. 이처럼 사람의 몸에 유익한 레시틴은 콩기름을 짜낸 찌꺼기에도 많이 들어있다.

응용하는 곳으로는 씨는 중추신경 계통을 자극하는 약제, 당뇨병과 광선병 치료 약품을 만드는 원료로 쓴다. 콩우유는 영양가가 높고 동물성 우유보다도 위액의 지나친 분비, 급성 및 만성 전염성 질병, 장티푸스 등에 좋다. 동의치료에서는 소염성 건위약, 소화약, 열내림약, 땀내기약으로 열병의 초기, 머리가 아프고 추울 때에 쓴다.

성분(4)의 차전초(Plantago asiatica L.(P.major L. var. asiatica Decne)는 높이가 약 50cm되는 여러해살풀이다. 잎은 긴 달걀 모양 또는 타원형인 뿌리잎이다. 6~7월에 잎 사이에서 꽃대가 나오고 연한 풀색의 작은 이삭처럼 모여 핀다. 씨로 번식한다. 이 식물이 길섶 즉 달구지 바퀴 자국이 난 곳에서 자란다는 뜻에서 차전이라고 한다. 각지의 들, 길섶에서 널리 자란다.

사용부위는 전초를 꽃필 때 잎의 밑을 잘라서 햇볕에 말린 것을 사용을 한다. 씨는(차전자) 7~8월에 익은 열매이삭을 열매와 씨를 모아 말린 다음 체로 친다. 질경이씨는 크므로 대립차전자, 털질경이씨는 소립차전자라고 한다.

성분으로는 잎에는 이리도이드 배당체인 아우쿠빈 C₁₅H₂₄O₉ 카탈폴과 플라보노이드인 폴란타기닌(스쿠텔라레인-7-글루코시드), 호모플란타기닌(히스피톨린-7-글루코시드)이 있다. 플란타긴(5,6,4-트리메틸스쿠텔라레인-7-글루코시드)이 있다고 하나 확실하지 않다. 이밖에 아피게닌, 루테올린, 네페틴, 6-옥시루테올린 배당체가 있다. 잎에는 또한 우르솔산, 헨트리아콘탄 C₂₃H_48,β-시토스테롤, 스티그마스테롤 및 β-시토스테롤의 팔미트산 에스테르가 있다. 효소(에물신과 인베로틴)와 카로틴, 아스코르브산도 있다. 씨에는 아우쿠빈과 많은 점액이 있다.

점액을 부분 물분해하면 이당류 Ⅰ[O-β-D-크실로피라노실-(1→ 2)-D-크실로피라노오스], И[O-β-D-크실로피라노실-(1 4)-D-크실로피라노오스],ш[(-β-D-글루코피라노실-우론산-(1→5)-L-아라비노피라노오스)]이 생긴다. 이 밖에 플란테놀 산, 호박산, 콜린, 아데닌, 비타민 A, B₁이 있다.

전초에는 물에 풀리는 다당류가 있다. 다당류에는 회분이 28%까지 있으며, 전기투석하여도 약 절반밖에는 제거되지 않는다. 오랜시간 정제하면 회분이 0.4~0.5%에 이른다. 다당류에는 80~82%의 펙틴산, 5~6%의 갈락토아라반, 4~5%의 갈락탄으로 이루어졌다. 펙틴산은 물분해하면 갈락투론산 78~83%, 갈락토오스, 아라비노오스, 람노오스, 적은양의 포도당, 크실로로스와 이 밖에 3개의 당이 생긴다. 즉 다당류는 모두 9개의 당과 무기물로 이루어졌다.

작용하는 곳은 전초와 플란타긴은 동물실험에서 호흡중추에 작용하여 호흡을 느리고 깊게 한다. 또한 점막의 분비기능을 높여 기관지점막과 소화액의 분비를 늘린다. 씨의 점액은 완화작용과 열내림작용을 한다.

질경이의 진해거담작용은 용혈작용과 점막에 대한 자극작용이 있는 사포닌과는 다르다. 용혈작용과 부작용이 없기 때문에 어린이 기침약으로 쓰기 좋다. 질경이는 또한 오줌내기작용이 있다. 수분배설을 늘릴 뿐 아니라 요소, 염화나트륨, 요산의 배설도 촉진한다.

다당류 성분은 항염증작용, 상피화촉진작용이 있다. 전초추출액은 동물실험에서 곪은 상처에 대한 항염증작용과 상피화촉진작용을 한다. 전초에서 분리한 다당류는 독성이 적다. 다당류를 흰쥐에게 1내지 3g/kg, 개에게 2내지 5g/kg씩 14일 동안 먹여도 독작용은 없다. 다당류는 부타디온에 의한 흰쥐의 위궤양 형성을 억제한다. 또한 개에게 먹이면 위액의 분비량을 2.5배로 늘리며, 위액의 유리산도와 총 산도를 20내지 30% 높인다. 그러나 위액의 단백질용해 활성에는 영향이 없다. 다당류는 또한 위를 통하여 물질의 이동을 3~4배로 느리게 한다. 흰쥐의 떼낸 장에 대한 다당류의 진경작용은 1:10,000액에서도 나타난다. 이와 같이 다당류는 진경작용과 항염증작용, 상피화촉진작용이 있으므로 궤양에 좋은 치료약이 된다. 다당류에 있는 무기물을 갈라낸 것은 이러한 작용이 없다. 그러므로 무기물과 결합된 다당류가 생물학적 활성이 있는 성분이라고 생각된다.

다당류의 작용상 특징은 높아진 산도를 낮추고 낮아진 산도를 높여 위액의 분비를 정상화시키는 것이다. 특히 위액의 산도가 정상이거나 낮은 환자들에게 치료 효과가 좋다. 만성 위염 특히 저선성 위염에도 치료 효과가 좋다.

응용하는곳은 전초에서 얻은 다당류 또는 생즙은 위액의 산도가 장상이거나 낮은 위십이지장궤양과 만성 위염에 쓴다. 전초 달임약은 신석증에도 효과가 있다.

동의치료에서는 전초와 씨는 습열을 없애고 눈을 밝게 한다고 하여 눈병, 방광염, 장카타르, 피오줌, 설사, 적리에 염증약, 오줌내기약, 설사멎이약으로 쓴다. 또한 기침약으로 백날기침, 기관지염등의 호흡기질병에 사용을 하며, 민간에서는 전초를 위병과 기타 동맥경화, 당뇨병에 쓴다. 씨는 눈병, 신경계통 질병에 달여마신다. 이밖에 기침엿, 진해정을 만드는데 사용을 한다.

성분(5)의 용규(Solanum nigrum)는 가지과의 딸린 한해살이풀로 산이나 집 주변, 묵은 밭, 개울가 같은 데서 흔히 자란다. 까맣게 익은 열매가 중머리를 닮았다 하여 까마중 이라는 이름이 붙었다. 잎은 어긋나며 계란형이고 가장자리에 톱니 가 있으며 끝이 뾰족하거나 둔하다. 잎자루가 길고 뒷면의 맥 위에 잔털이 있으며, 꽃은 5~7월에 취산화서로 흰색의 오판화가 피는데 마디 사이의 중간부에서 뻗은 꽃자루에 여러 개가 아래를 향하여 달리며, 열매는 9~11월에 녹색의 둥그런 장과가 검게 익는다.

사용부위는 식물의 열매를 사용한다.

성분으로는 전초에 스테로이드알칼로이드와 적은 양의 아트로핀, 니코틴이 있다. 스테로이드알칼로이드는 솔라닌 C₄₅H₇₃O₁₅N, 솔라소딘, 솔라니그린 등이 있다. 전초에는 또한 플라보노니드 루틴, 아스파라긴, 솔란구스틴, 시토스테롤, 7~10%의 타닌질, 사포닌, 유기산이 있다. 선열매에도 전초에서와 비슷한 성분이 있다. 익은 열매에는 글리코알칼로이드, 사포닌과 안토시안 색소, β-카로텐 1,630mg%의 아스코르브산이 있다. 다른 자료에는 솔라소닌(0.2%), 솔라마르긴(0.25%)이 있다고 한다. 잎에는 24~184mg%의 아스코르브산, 50mg%의 카로틴이 있으며, 뿌리에도 알칼로이드와 사포닌이 있다.

작용으로는 전초달인물은 티푸스균, 포도알균, 녹농균, 적리균, 대장군, 진균에 대한 억제작용이 있다. 또한 항염증, 혈당낮춤작용이 있다. 알칼로이드 성분은 폐나 기관지 조직중의 히스타민 분해를 촉진시키므로 기침멎이, 가래삭임작용을 나타내며, 혈압을 낮춘다.

특징 및 사용방법은 일명 까마중이라고도 한다. 식용, 약용으로 이용된다. 약으로 쓸 때는 온포기는 탕으로 하여 사용하고 익은 열매는 생식한다. 특히 급만 성 기관지염이나 개고기, 돼지고기, 쇠고기를 먹고 체했을 때에는 온포기를 달여서 복용하거나 열매를 한 움큼 따서 먹으면 효험이 있다. 주로 소화기, 순환계 질환 등을 다스리며 폐 기능을 보호해준다

응용하는 곳은 동의치료에서 강장약, 열내림약, 오줌내기약으로 피로를 회복하는데 쓴다.

잎과 줄기는 여러가지 상처, 곪은데 붙이며 열매는 눈을 밝게 한다.

민간에서는 강장약, 오줌내기약으로 신석증, 물고임에 사용을 하며, 전초즙은 진정약, 진경약, 땀내기약으로 감기에 사용을 한다.

꽃은 가래약으로 잎은 수렴약, 피멎이약으로 설사, 적리, 간비데에 쓴다. 잎과 열매 우린액은 방부약, 염증약으로 치질, 궤양, 상처, 부스럼, 버짐, 습진, 뾰두라지, 단독, 선병등에 사용을 하며, 아픔멎이약으로 머리아픔, 류머티즘, 통풍, 종양에도 쓴다.

성분(6)의 갈근(Pueraria thunbergiana Benth)은 다른이름으로 칡덤불, 칡덩굴이라고 부르며, 이 식물은 덩굴뻗는 여러해살이 풀이다. 밤색털이 있으며, 잎은 둥근 쪽잎이 3개 모인 겹잎이다. 여름철에 보라색꽃이 피며, 열매는 밤색털이 있는 꼬투리이다. 각지의 산지대, 산골짜기, 산허리, 산기슭의 양지에서 자란다.

사용부위는 이른봄 또는 늦은 가을에 캐서 물에 씻은 다음 겉껍질을 벗겨버린다. 긴것은 자르고 굵은 것은 쪼개서 햇볕에 말린 것을 사용을 한다.

성분으로는 뿌리에는 이소플라본화합물인 다이드제인(C₁₅H₁₀O₄), 다이드진(C₂₁H₂₀O₉),푸에라린(C₂₁H₂₀O₉), 푸에라린크실로시드, 루테올린, 비오카닌 A(C₁₆H₁₂O₅)등과 농마,쿠마린이 있다. 또한 콜린, 아세틸콜린양물질, 카크코네인, 푸에라롤이 갈라졌다. 잎에는 쿠마린, 아데닌, 아스파라긴, 글루타민산, 켐페롤-람노시드(C₂₇H₃₀O₁₄), 로비닌(C₃₃H₄₀O₁₉)등이 있다.

작용하는곳은 온열중추를 자극한 집토끼에게 뿌리가루 15g/kg을 먹이면 뚜렷한 열내림작용이 있으면서도 다른 특별한 변화는 없다. 뿌리의 우림약, 달임약, 알코올추출액도 이러한 작용이 있으나 물추출액에서 강하다. 열내림작용은 합성열내림약보다 늦게 나타나지만 지속시간이 길다. 또한 작용량의 16배를 사용을 하여도 열내림작용은 큰변화가 없으며 심장, 혈압, 호흡에는 부작용이 없다.

정상집토끼에게서는 혈당량을 늘이고 간장글리코겐량을 늘이지만 근육글리코겐량에는 뚜렷한 변화가 없다. 굶긴 집토끼에게서는 간에서만 아니라 근육에서도 글리코겐량이 늘어난다. 뿌리의 이소플라본화합물은 진경작용이 있다. 특히 이 작용은 다이드제인에서 강하다. 진경작용은 파파베린과 항아세틸콜린작용에 의한것이다. 칡뿌리를 동의치료에서 진경약으로 머리아픔에 쓴 것은 이소플라본화합물에 의한 것으로 생각된다. 다이드제인을 편두통, 고혈압, 협심증 등 여러가지 심장의 대상기능부전증에 사용 한것에 의하면, 심장피줄을 확장하여 70~80%의 환자에게서 치료효과가 있었다. 그리하여 다이드제인은 고혈압, 편두통, 협심증에 쓰이고 있다. 뿌리에는 다이드제인의 진경작용에 길항하는 물질 즉 활평근장기를 강하게 수축시 키는 물질이 있다. 잎과 꽃에 있는 로비닌은 오줌내기작용 특히 피속의 잔여질소함량을 줄이는 작용을 한다. 총플라보노이드는 혈압을 낮추고 뇌피줄 및 관상동맥의 피흐름량을 늘인다. 그리고 심근의 산소소비량을 낮추고 피속산소공급량을 늘인다.

응용하는곳은 동의치료에서 뿌리와 꽃은 발한해열약, 진경약으로 열병에 쓰며 목안이 마르고 머리가 아플 때, 감기로 머리와 목이 아플 때, 편도염, 급성중이염에 쓴다. 또한 소갈병, 열이나고 토하며 머리가 아프고 속이 답답한데, 목과 어깨가 뻗뻗한때 그리고 어혈을 풀고 상처를 아물게 하는데 사용을 하며, 잎은 고혈압으로 오는 머리아픔에 사용을 하며, 게움약, 오줌내기약으로도 사용을 하며, 뿌리는 고혈압, 폭발성귀울이때 쓴다. 또한 뿌리가루를 농마와 섞어서 열내림약을 만들어 사용을 한다.

성분(7)의 인동덩굴은(Lonicera japonica Thunb) 다른 이름으로 금은화, 겨우살이덩굴이라고 하며, 사철 푸른 떨기나무이다. 줄기는 덩굴로 자라며 다른 식물에 감겨 자란다. 잎은 긴 달걀모양으로 마주 붙는다. 잎 아귀에 긴 관 모양 꽃이 2개씩 핀다. 꽃은 처음에는 희고 점차 노란색으로 변하기 때문에 금은화라 한다. 그리고 겨울에도 견딘다 하여 인동이라고 한다. 각지의 길섶, 산기슭, 개울가에서 자란다. 이 약의 줄기는 원주형이고 마디에는 잎이 붙었던 자국과 가지를 자른 흔적이 있다. 바깥면은 옅은 홍색-어두운 홍색으로 세로 무늬가 있고 잔털이 있다. 어린 가지에는 털이 밑생하며 껍질은 쉽게 떨어져 나가 회백색의 목부가 드러나 보이며 섬유성이다. 꺾은면은 섬유상으로 황백색이며 중심은 비여 있다. 이 약은 냄 새가 별로 없고 맛은 조금 쓰고 어린가지의 맛은 덤덤하며, 사용부위는 식물의 잎이 붙은 줄기를 베어 둥근 타래처럼 감아 햇볕에 말린다음 줄기와 잎을 사용한다.

성분으로는 꽃에는 루테올린 C₁₅H₁₀O₆(5,7,3,4-테트라히드록시플라본), 이노시톨 C₆H₁₂O₆이 있으며, 꽃이 단 것은 이노시톨 때문이다. 납모양 물질(세릴알콜, 스테롤, 아라킨산, 미리스트산, 엘라이딘산, 리놀산, 리놀레산)도 있다. 잎과 줄기에는 5~8%의 타닌질이 있고, 잎에는 로가닌, 약19%의 함 질소물질, 그리고 루테올린-7-람노글루코시드인 로니세린 C₂₇H₃₀O₁₅·2 H₂O 이 있다. 같은 속 식물 L. morronii의 잎에서 이리도이드 화합물인 로니세로이드, 스웨로시드가 분리 되었다.

작용으로는 꽃 달인 물은 오줌내기 작용과 혈당량을 늘리는 작용이 있고 적리균, 티푸스균, 포도상구균, 폐렴쌍구균에 센 억균작용도 있다. 소화성위궤양의 예방효과, 교감신경흥분, 평활근마비작용도 있다.

응용하는 곳은 동의치료에서 꽃과 잎, 줄기를 열내림약, 독풀이약, 오줌내기약, 정혈약으로 풍악초기에 열날 때, 종창과 종독, 여러 가지 창 독, 곪는 질병에 쓴다. 달임 약으로는 여러 가지 곪는 질병에 씻는다. 숯처럼 탄 것은 피멎이 약으로 쓴다. 민간처방으로는 암 치료에 쓴다. 물에 달여 차처럼 오래 먹으면 위암에 좋다. 특히 자궁내막염, 림프절결핵의 누공, 입안염에 씻거나 입가심한다.

성분(8) 결명자 (Cassia obtusifolia L.) 식물 높이 약 1m 되는 한해살이 풀이다, 잎은 달걀모양의 쪽잎(3쌍)이 모인 깃겹잎이다. 여름철에 노란 꽃이 핀다. 열매는 가늘고 긴 꼬투리이다. 아메리카가 원산지이며 우리나라와 열대 아시아에서 널리 심는다. 가을철 열매가 검게 여문 때 줄기를 베어 말린 다음 두둘겨 씨를 모은다. 100개의 무게는 1.7~2.7g 이다. 결명이란 눈을 밝게 한다는 뜻이다.

결명자의 기원식물에는 열대 아시아에서 자라는 C.Tora L.도 있다. 이 식물은 우리나라 기후에 맞지 않아 열매를 맺지 못한다. 잎의 끝이 오목하다. 씨 100개의 무게는 1.6~2.0g으로 작으며 윤기가 없다. 이 약은 기둥모양이며 끝이 약간 뾰족하고 길이 3~6mm, 지름 2~3.5mm이다. 종피는 굳으며 윤이 나는 갈색이다. 양쪽의 측면에 황갈색의 넓은 세로줄 및 띠가 있다. 횡단면은 원형~둔한 다각형이며 배유중에 구부러진 어두운 색의 자엽이 있다. 이 약재는 잡질을 제거하고 깨끗이 씻어 건조하여 향기가 날 때까지 볶아서 사용 한다. 사용부위는 씨를 잘 건조하여 볶아서 사용한다.

성분으로는 씨에는 에모딘, 오브투시폴린, 오부투신(C₁₈H₁₆O₇), 크리소오브투신 (C₁₉H₁₈O₇), 아우란티오오브투신(C₁₇H₁₄O₇)과 그 배당체가 분리 되었다. T.L.C에 의하여 크리소파놀, 크리소파놀안트론, 알로에에모딘, 레인이 확인되었다. 나프로피론 유도체 및 그 배당체인 루브로푸사린, 노르-루브로푸사린, 루브로푸사린겐티오비오시드, 이소쿠마린인토랄락톤, 노란색소인 토라크리손이 분리되었다.

작용은 씨의 물 또는 알코올 추출물은 동물실험에서 혈압내림작용이 있다..

응용하는곳은 동의치료에서 신을 보하고 간 열을 내리며 거풍, 열 내림 효과가 있다고 하여 바람으로 인하여 머리가 아픈데, 눈병을 치료하는데 쓴다. 민간처방으로 는 흔히 약한 설사약, 강장약으로 약간 섞어서 차처럼 달여 마신다. 장을 윤활하게 하여 변이 잘나오게 하며 혈압을 낮추는데 좋다.

성분(9)의 감초(Glycyrrhiza glabra L.)는 다른 이름으로 국로, 곧은 감초, 민감초라고 부르며, 식물의 높이는 30~80cm 되는 여러해살이 풀이다, 잎은 홀수 깃 겹잎이며 쪽 잎은 달걀모양 또는 타원형이다. 가지색을 띤 붉은색 꽃이 이삭처럼 모여 핀다. 열매는 곧은 꼬투리이다. 러시아(중앙아시아), 이란, 아프카니스탄, 파키스탄, 중국(감숙성, 신강성)에서 자란다. 우리나라 중부지대를 중심으로 하여 각지에서 약초로 심는다. 이 약재는 건조한 근은 긴 원주형으로 길이는 5~100cm, 직경 0.6~3cm이다. 표면은 홍갈색, 암갈색, 또는 회갈색으로 세로 주름이 뚜렷하고 홈, 피공과 세근의 흔적이 있다. 질은 단단하고 무거우나 절단은 쉽다. 단면은 섬유성이 뚜렷하고 갈라진 틈이 있으며 중앙에는 수가 있다. 냄새는 조금 나며 단맛이 특수하다. 굽은 감초는 러시아(시베리아지방), 중국(동북지방, 내몽고), 몽골에서 자란다.

사용부위는 가을에 뿌리줄기와 뿌리를 캐어 줄기를 다듬고 물에 씻어서 햇볕에 말린 것을 사용한다.

성분으로는 뿌리와 줄기에는 글리시리진(글리시리진산의 칼륨염 또는 칼슘염)이 5~14%(많은 것은 23%), 글라브라산(글리시레틴) C₃₀H₄₆O₅이 있다. 글리시리진산C₄₂H₆₂O₁₆은 트리테르페노이드사포닌으로 녹는점 205℃, 분해점 220℃, [d]D²⁰ +58.5°이고 알코올과 뜨거운 물에 잘 풀리며 에테르에 풀리지 않는다. 뜨거운 물에 푼 것을 식히면 갖풀처럼 굳어진다. 물 분해하면 맛이 없는 글리시레틴산 C₃₀H₄₆O₄과 2분자의 글루쿠론산 C₆H₁₀O₇이 생긴다. 글리시레틴산은 β-아미린계 트리테르페노이드로 α,β체의 2가지가 있는데 쉽게 서로 변한다. 그러나 그의 에스테르는 서로 변화하지 않는다. α-글리시레틴산은 판 모양 결정(묽은알콜)이고 녹는점 283℃, [α]D²⁰+140°(에탄올)이며 에탄올, 디옥산, 클로로포름에 풀린다. β-글리시레틴산은 바늘결정(에탄올)이며 녹는점 296~300℃ [α]D²⁰+86°(알코올)이고 에탄올, 피리딘, 초산에 풀리고 석유에테르에 잘 풀리지 않는다. 또한 플라보노 배당체인 리쿠이리틴 C₂₁H₂₂O₉,, 네오리쿠이리틴, 람노리쿠이리틴(이것들의 비당부분은 모두 리쿠이리티게닌이다)과 이에 대응한 갈콘 배당체인 이소리쿠이리틴, 네오이소리쿠이리틴, 이소람노리쿠이리틴, 리쿠라시드(이것들의 비당 부분은 모두 이소리쿠이리티게닌이다)가 있다. 람노리쿠이리틴을 리쿠이리토시드라고도 한다. 감초뿌리에서 크로마토그라프로 27개를 넘는 플라보노이드 유사물질이 확인 되었다.

굽은 감초 뿌리에서는 β-시토스테롤, 포르모노네틴, 리코리시딘, 리코리콘, 리코레올리그난이 확인 되었다. 또한 꽃필 때의 마른 잎과 줄기에는 단백질 14~22%, 기름 2~5%, 무질소엑스 36~62%, 회분 5~20%로 집짐승 먹이로 쓸 수 있다. 감초의 플라보노이드 함량은 자라는 시기에 따라 변한다. 뿌리에는 가을철, 잎과 줄기에는 열매가 달리기 시작할 때에 제일 높다. 가을철에 리쿠라시드의 함량은 약 0.5%이 다. 리쿠라시드는 총플라보노이드의 약 10%을 차지한다. 줄기와 잎에는 사포나레틴, 글리포시드, 비텍신등이 있다. 사포나레틴은 총플라보노이드의 약 50%이며 열매가 열릴 때의 전초에 3% 들어 있다. 또한 쓴맛이 있는 글리시라마린(글리시리진의 쓴맛 성분), 2,4,4-트리히드록시갈콘과 그 배당체 디옥시스티그마스테롤(녹는점135~136℃), β-시토스테롤, 정유(0.03%), 아스코르브산 11~30mg%, 아스파라긴(1~4%), 과당(2.4~6.5%), 포도당(2~4%), 만니톨, 녹말(14~30%), 고무질(1.5~4%), 노란색소, 사과산, 기름, 수지, 타닌, 단백질, 아미노산으로 아스파라긴산, 프롤린, 알라닌, 트레오닌, 세린, 글리신, 발린, 이소류신, γ-아미노버터산이 있다. 쓴맛물질이 제일 많을 때 8%이다. 그 가운데서 물에 풀리는 것이 2.5~3%이다.

작용하는곳은 감초 뿌리의 유효성분으로 알려져 있는 글리시리진은 사탕의 40~50배 정도로 단맛이 있으며 그 단맛은 10만 배의 희석 액에서도 느낄 수 있다. 물 용액은 흔들면 거품이 생기지만 일반 사포닌보다 약하게 일고 용혈작용도 없거나 약하다(칼륨염은 1 : 400). 글리시리진의 물 분해에 의하여 생긴 글리시레틴산은 단맛이 없고 용혈작용이 있다. 그리하여 감초의 거담 작용은 글리시레틴산에 의한 것으로 추정됨. 글리시리진은 또한 호흡기를 완화 시킨다.

감초뿌리엑스, 글리시리진은 독성이 없고 포수클로랄, 스트리크닌, 요힘빈, 코카인, 모르핀, 코데인, 아트로핀, 루미날 등에 의한 중독을 풀어준다. 세균독과 바이러스독, 예를 들면 파상풍 독소, 디프테리아 독소, 뱀 독을 풀어준다. 아세틸콜린, 히스타민, 알레르기를 일으키는 물질과는 길항작용을 하며 아드레날린과 비 슷한 강심작용도 있다.

글리시리진의 독풀이 작용은 물 분해 산물인 글루쿠론산과 관계된다. 글루쿠론산은 동식물계에 널리 들어있는 성분으로 간에서 유독한 물질과 결합되어 글루쿠로니드를 형성하고 오줌으로 배설된다. 그러므로 글루쿠론산은 약물중독, 알코올중독, 식중독, 황달, 간경변증, 만성간장에, 류머티즘, 관절아픔, 신경아픔 등에 쓰이고 있다. 글리시리진의 독풀이작용은 글루쿠론산에만 의한 것으로 생각되지 않으며 글리시리진이 부신피질호르몬과 비슷한 작용을 하는 것과도 관계된다. 글리시리진은 부신피질 호르몬인 데스옥시코르티코스테론과 같은 효과가 있다. 글리시레틴산은 동물실험에서 나트륨과 클로르, 오줌의 배설량을 줄이고 칼륨의 배설량을 늘린다. 즉 Na/K의 비를 낮춘다. 이와 같이 칼륨대사에는 부정적 영향을 주지만 나트륨대사에는 긍정적 영향을 준다. 또한 물과 염류대사에 대한 부신피질 호르몬의 영향을 강화할 수 있도록 조건을 지어주는 부신피질의 아스코르브산 함량을 줄이는 작용을 한다. 이러한 작용은 감초의 추출물과 글리시리진에서도 있다. 사람이 먹었을 때에도 같은 작용이 나타난다. 감초뿌리엑스 글리시리진은 항염증작용을 한다. 즉 동물에게 실험적으로 일으킨 포르말린 관절염의 치료에 긍정적 영향을 준다, 혈청 트랜스아미나제의 활성을 억제하며 간에 있는 아데노신트리포스파타아제의 활성을 높인다. 글리시리진의 데스옥시코르티코스테론과 비슷한 항염작용은 분해 산물인 글리시레틴산에 의한 것으로 본다.

글리시리진의 부신피질호르몬 유사작용은 코르티코이드의 생체 안에서의 비활성화 Δ⁴-3케톤부분의 환원을 억제하기 때문이라는 견해도 있다.

감초뿌리엑스는 동물실험에서 위장평활근에 대한 파파베린과 비슷한 향 근육성 진경작용이 있다. 잊작용은 플라보노이드 성분에 기인한다. 감초의 플라보노이드는 지금까지 쓰이지 않았던 것인데 진경작용, 항 염증작용이 알려지면서 개발되었다. 플라보노이드 성분인 리쿠라시드는 파파베린보다 3배나 센 진경작용이 있으면서도 항 염증, 항 궤양활성이 있다. 그리고 아세틸콜린, 히스타민에 대한 길항작용이 있다.

감초뿌리엑스가 소화성 위궤양에 치료효과가 있다는 것은 1950년대에 알려졌다. 그리하여 감초뿌리에서 항 궤양성 물질을 찾아내기 위한 많은 실험이 진행되었다. 1960년대 들어와서 플라보노이드를 얻어내고 그 성분들이 진경작용을 한다는 것을 알게 되었다. 또한 최근에 많은 실험들을 통하여 진경작용뿐만 아니라 항 염증작용, 항궤양성작용이 있다, 감초는 계면 활성이 세므로 다른 동약재와 달이거나 먹으면 동약성분을 물에 잘 풀리게 하여 흡수를 돕는다. 또한 동약재의 독성을 줄이고 맛을 바꾼다 요즘에는 에스트로겐 작용도 주목 되고 있다. 감초뿌리에는 포도알균, 대장균, 적리균에 대한 약간의 억제작용이 있다. 글리시리진산을 항암약인 티오폭스마미드와 함께 쓰면 항암 활성은 85~95%에 이른다고 한다.

응용하는곳은 감초뿌리는 가래삭임작용, 완화작용, 항 염증작용과 진경작용, 항히스타민작용 등이 있다. 따라서 가래기침약으로 상기도질병에 쓴다, 단맛이 있으므로 약품의 약고침약으로도 쓴다. 독풀이약이나 부형약으로도 쓰인다. 요즘에는 위 십이지장궤양, 에디슨병, 기관지천식, 황달과 간염, 습진을 비롯한 피부병 등에 널리 쓰이고 있다. 글리시리진산은 항암약의 활성을 높이기 위한 보조약으로 쓰고 있다. 동의치료에서는 뿌리를 주로 다른 동약들의 작용을 완화 및 조화시킬 목적으로 많이 쓴다. 즉, 더운약과 같이 쓰면 열을 완화 시키며 찬 약과 같이 쓰면 찬 것을 완화 시킨다. 이처럼 완화약 또는 아픔멎이진경약, 가래약, 기침멎이약, 독풀이약으로 위경련, 위 아픔, 인후아픔, 위궤양, 십이지장궤양 등에 쓰며 독이 있는 동의처방에 들어간다.

성분(10)의 천초(Rubia cordifolia L. var. mungista Miquel(R. akane Nakai)는 식물 여러해살이 풀로서 줄기는 길이 약 1m이고 옆으로 뻗어 다른 식물에 붙어서 위로 올라간다. 잎은 4개 마디씩 마디에 돌려 붙으며 심장모양 또는 달걀모양 이다. 연한 노란색을 띤 흰색의 작은 꽃이 핀다. 열매는 둥글고 검은색으로 익는다. 뿌리가름과 씨로 번식한다. 각지의 산골짜기, 산기슭에서 자라며, 이 약재는 건조한 과피는 2쪽으로 갈라지는데 직경이 4~5mm이다. 표면은 홍자색, 또는 홍갈색으로 거칠고 선단에는 화주의 잔여부분이 있다. 밑 부분에는 작은 과병이 있으며 과피는 매끄럽고 담황색이다. 과피는 혁질로 특수하고 강렬한 냄새가 나는데 씹으면 혀가 마비되고 아린 맛이 오래 간다. 사용부위는 식물의 꽃을 사용한다.

성분으로는 뿌리에는 옥시안트라퀴논 색소인 푸르푸린 C₁₄H₈O₅, 프세우도푸르푸린, 프세우도푸르푸린-크실로-글루코시드, 문기스틴, 문기스틴-글루코시드가 분 리 되었다. R. tinctorum L.과 cordifolia L. 의 뿌리에는 알리자린 C₁₄H₈O₂과 그 배당체인 루베리트린산 C₂₅H₂₆O₁₃, 갈리오진 C₁₅H₈O₇, 크산토푸르푸린 C₁₄H₈O₄, 푸르푸로크산틴, 루비안딘배당체, 푸르푸로크산틴카르복시산, 루비아딘 등이 있다. 이밖에 레몬산, 사과산, 포도산, 당분, 펙틴이 있다. 잎에는 유기산과 흔적의 알칼로이드, 플라보노이드가 있다.

작용하는곳은 뿌리 달인액은 콩팥과 방광의 결석을 천천히 부풀어 나게 하여 파괴시킨다. 이러한 작용기전은 처음에는 루베리트린산이 오줌을 산성화 하여 인산칼슘으로 된 신석을 녹여 주는 것으로 생각하였다. 요즘에 와서는 뿌리에 있는 화학적으로 비슷한 색소 물질들이 칼슘의 인산염과 작용하여 녹여 내려 루베리트린산은 오줌을 산성화 시켜 싱아산염이 빨리 녹이게 하는 것으로 보고 있다. 뿌리제제는 동 맥압과 호흡에는 영향을 주지 않으나 심장의 수축을 강화 시킨다. 그러나 심장의 율동에는 뚜렷한 영향을 주지 않는다. 그리고 장의 진자 운동을 세게 하고 긴장도를 높인다. 또한 오줌내기 작용이 있고 구균에 대한 억균작용을 한다. 뿌리제제는 신우 및 방광 평활근의 긴장도를 낮추며 근육섬유의 연동성 수축을 세게 하여 결석의 이동에 아픔을 느끼지 못하게 한다. 그러므로 이약의 치료 효과는 요도평활근의 경련에 특히 좋다. 뿌리 마른엑스, 뿌리가루, 총배당체와 루베리트린산을 비교 시험한 바에 의하면 마른엑스에서 치료효과가 제일 좋고 다음으로 뿌리가루가 좋다. 이제제는 다른제제보다 오줌을 잘 내보내고 보다 뚜렷한 진경작용이 있다. 또한 피응고 시간을 줄인다.

응용하는곳은 신석증 치료와 결석 수술후의 재발예방, 염증성 인산염뇨에 쓴다. 인산마그네슘, 인산칼슘으로 된 결석에 치료효과가 좋다. 이 약을 먹으면 결석은 거칠어지고 구멍이 많아지며 분홍색을 띤다. 약을 먹고 3~4 시간이 지나면 오줌이 붉은색으로 된다. 오줌이 장미색을 띠도록 충분한 양을 써야 한다. 동의치료에서는 정혈약, 통경약, 피멎이약으로 월경이 없을 때, 자궁내막염, 피를 토하거나 코피가 날 때, 오줌에 피가 섞일 때 사용을 하며, 민간처방으로는 오줌내기 약으로 부기가 있는 마비, 열내림약으로 특히 폐와 간장에 열이 있을 때, 가래 약으로 감기와 폐렴, 인후염 그리고 혈액순환을 좋게 하는데, 적리에 쓴다. 또한 아픔멎이약, 진경약, 방부약으로 쓰이며 악성종양에도 효과가 있다고 한다. 이외도 항 염증작용, 에스트로겐활성, 피멎이작용, 진경작용, 거담작용, 강장작용, 혈압내림작용, 수은 흡수작용등에도 효과가 있다고 한다.

성분(11)의 토사자(Cuscuta japonica Choisy)는 덩굴 뻗는 한해살이 풀이며. 줄기는 노란 흰색이고 가지색 무늬가 있다. 잎은 퇴화되어 작은 비닐처럼 되었다. 여름철에 노란 흰색의 작은 꽃이 핀다. 열매는 작고 타원형이며, 각지의 산기슭, 길섶, 콩밭에서 자란며, 이 약은 구형-원반형으로 된 작은 알맹이 모양이고 지름 1~3mm, 100개의 무게는 100mg 정도이다. 바깥면은 황록색-흑갈색이며 뾰죽한 쪽에 작은 홈이 있고 질은 단단하다. 이 약은 냄새는 별로 없고 맛은 부드러우며 기름기가 있으며, 사용부위는 잘 여문 씨를 따서 햇볕에 말린 것을 사용한다.

성분으로는 씨에는 수지 모양의 배당체, 아밀라제, 프로비타민 A 약 40mg%, 당이 있고 전초에는 켐페롤이 있다.

응용하는 곳은 동의치료에서 강정강장약으로 음위증, 유정, 허리아픔에 사용을 하며 진정약, 아픔멎이약, 설사약으로도 사용을 하며, 민간처방으로는 전초즙으로 구진(농포)을 없애기 위하여 얼굴을 씻으며 가래약, 피멎이약으로도 사용을 하며 땀내기약, 구풍약, 열물내기약, 가래약, 벌레떼기약, 설사약으로 쓴다. 폐렴, 콩팥염, 고혈압에도 치료 효과가 있다.

성분(12)의 치자(Gardenia jasminoides Ellis)

이 식물은 높이 1~2m에 이르고 사철푸른 떨기나무이다. 잎은 긴 타원형이고 마주 붙는다. 여름철에 흰꽃이 피며 향기가 있다. 열매는 타원형이고 6~9개의 룽이 있으며 빨간색으로 익는다.

성분으로는 열매에 이리도이드배당체인 게니핀 C₁₁H₁₄O₅과 그 배당체인 게니포시드C₁₇H₂₄O 및 겐티오비오시드, 가르데노시드 그리고 노란 색소인 α-크로찐이 있다. 이 밖에 크산찔레틴, 프서랄렌, 페우쩨다놀메틸에스테르등 쿠마린성분이 있다.

작용하는곳은 열매의 물 및 에탄올 추출액은 집토끼에게 먹일 때 열물분비를 뚜렷하게 항진시키지는 않으나 총수담관결찰때에는 빌리루빈이 피와 말초림파에로 나가는 것을 억제한다. 크로찐과 그의 나트륨염을 토끼귀정맥에 주사할 때 열분비물을 늘이고 총수담관을 잡아맨 토끼의 피로 나가는 것을 억제한다. 인돌계알카로이는 혈압내림작용을 한다. 열매를 흰생쥐에게 먹이면 약한 설사를 일으키는데 그 작용물질은 게니포시드이다.

응용하는곳은 동의치료에서 소염, 진정, 오줌내기, 열내림, 피멎이약으로, 염증, 출혈, 심근염, 토혈, 각혈, 황달에 사용을 한다.

성분(13)의 백작약(Paeonia albiflora Pallas var. trichocarpa Bunge)은 다른이름으로 함박꽃, 참작약, 집함박꽃이라고 부르며, 이 식물은 높이가 약 80cm되는 여러해살이풀이다. 잎은 여러 갈래로 깊이 갈라졌고 갈라진 조각은 긴 타원형~버들잎모양이다. 줄기끝에 빨간색, 보라빨간색, 흰색인 한 개의 큰꽃이 피며 꽃잎은 여러겹이거나 외겹이다. 열매에는 털이 있다. 전국각지에서 약초 또는 꽃보기식물로 심는다.

사용 부위는 가을에 캐서 물에 씻어 겉껍질을 벗기고 햇볕에 말린 것을 사용한다.

성분으로는 뿌리에는 배당체 페오놀리드, 페오니플로린과 알카로이드인 페오닌, 탄닌질, 수지, 당, 농마, 살리실산0.37%, 메틸살리질라트 정유가 있다. 페오니플로린과 함께 적은량의 알비플로린, 옥시페오니플로린, 벤조실페오니플로린이 있다.

작용하는곳은 뿌리의 물, 알코올 추출액은 진정진통작용이 있고 위액의 산도를 높인다. 또한 장윤동운동을 항진시키고 병원성세균에 대한 살균 및 억균작용을 한다. 알카로이드 페오닌은 아코니틴과 비슷한 작용이 있으며 자궁에 대한 자극 작용이 있다. 페오니플로린은 진정작용이 있다. 뇌실안에 넣어주면 아주 뚜렷하게 잠 상태에 들어가는데 이작용은 주입량에 정비례하며 다시 정상으로 회복된다. 아픔멎이작용, 열내림작용도 약하지만 있다. 그러나 장티푸스와 파라티푸스 혼합왁진에 의한 열나기때에는 열내림작용이 없다. 그리고 약간의 진경작용이 있다. 말초작용으로는 약한 소염작용, 궤양 예방효과가 있고 호흡운동에는 영향이 거의 없다.

페오니플로린은 데스벤조일페오니플로린과 안식향산으로 분해되는데 이 두물질은 약리활성이 없다. 뿌리추출액을 먹이거나 배안에 넣어주어도 효과는 뚜렷하지 않다. 추출물을 중성으로 하여도 작용이 약해진다. 그러므로 이 약초의 약리작용은 추출액의 액성과 적용방법에 관계되리라고 생각된다. 패오니플로린은 진정, 아픔멎이, 진경, 항염증, 스트레스궤양예방효과, 활평근이완, 혈관확장작용이 있으며 동약 작약의 치료효과와 일치한다. 그러므로 이 물질 즉 안식향산과 결합한 모노테르펜화합물이 유효성분으로 인정된다.

응용하는곳은 동의치료에서 아픔멎이약, 진경약으로 베장근경련, 신경아픔, 월경때의 아픔, 배아픔에 쓴다. 또한 수렴약, 완하약으로는 설사, 헛배부를 때도 쓴다.

성분(14)의 오미자(Schizandra chinensis Baillon = Schisandra chinensis)

이 식물은 덩굴뻗는 잎지는 나무이다. 줄기의 길이는 약 8m에 이르며, 잎은 넓은 타원형 또는 닭알모양이고 꽃은 노란색을 띤 흰색이다. 열매는 직경이 약 1cm되며 둥글고 빨간색인데 송이처럼 내려드리운다. 전국각지의 바다기준높이 100~1600m 되는 산기슭, 산골짜기의 떨기나무숲에 자란다. 특히 강원도, 자강도, 함경남도에 많 다.

사용부위는 가을에 여문 열매를 따서 햇볕에 말린다음 그늘에서 말린 것을 사용한다. 열매껍질은 달고 시며 씨는 쓰고 매운맛이 있으며 전체가 짜기 때문에 오미자라고 한다.

성분으로는 열매의 알코올엑스는 45~47%, 물엑스는 39~41%이며 많은량의 유기산이 있다. 씨까지 포함한 열매의 유기산 함량은 레몬산 10.9~12.8%, 사과산 7.6~10%, 포도주산 약 0.8%이다. 열매에는 또한 7.8%의 수지, 약 5%의 사포닌, 350~762mg%의 아스코르빈산이 있다. 씨에는 20~30%의 기름, 수지, 1.6~25의 정유, 리그닌화합물이 있다. 줄기에는 0.2~0.7%의 정유와 많은 점액, 줄기껍질에는 2.6~3.2%의 정유가 있다. 껍질의 레몬과 비슷한 냄새가 나며 풀색을 띤 누런색이며, 알데히드와 케톤이 약 20% 들어있다. 향기가 좋기 때문에 음식물의 양념으로도 사용을 한다.

작용하는 곳은 열매의 우림약과 팅크는 중추신경에 대하여 오래 지속되는 흥분작용이 있으며 반사흥분성을 뚜렷이 높인다. 또한 근육신경의 흥분성을 높이고 말초신경계통의 기능을 좋게 하여 준다. 열매는 심장 피줄계통에 좋은 치료효과가 있다. 슈잔드린은 척수의 반사흥분성을 높이며 심장 피줄계통과 호흡에 대한 긴장작용이 있다. 중추신경계통에 대한 흥분작용은 씨와 열매에서 강하게 나타나고 줄기와 껍질에서는 약하다. 특히 씨에서 뚜렷이 나타난다. 이것은 슈잔드린이 주로 씨에 들어있기 때문이다. 슈진드린은 탄수화물과 인대를 도우며, 조직 호흡을 빠르게 하고 효소들의 활성을 높여준다. 또한 동맥경화를 억제하며, 간염때 효소단위를 낮추는 작용도 있다. 임상실험에 의하면, 전신쇠약, 신경쇠약, 전신분열증, 저혈압에 뚜렷한 치료효과가 있다.

오미자의 에칠알콜추출액은 동물실험에서 약물중독으로 높아진 혈청글루타님산초성트란스아미나제(SGPT)농도를 낮추며 간의 독풀이 기능을 강화하고 간글리코겐의 생성과 혈청단백질의 합성을 촉진한다. 임상적으로 만성비루스성간염이나 약물성간염에 어느정도 치료효과가 있고 특히 SGPT를 낮추는 작용이 뚜렷하다. 슈잔드린과 씨는 독성이 매우 약하다. 40%의 슈잔드린의 독성은 (LD₅₀)은 10g/kg이고 씨의 독성은 625g/kg이다.

응용하는곳은 전신쇠약, 정신육체적피로, 신경쇠약, 저혈압, 심장기능저하, 영양실조성궤양과 상처에쓴다. 그리고 시력을 높이기 위해 쓴다. 씨가루와 팅크는 중로통과 정밀한 정신노동이 필요한 부분에서 일하는 일꾼들에게 쓴다. 씨제제를 먹여서 30분만에 정신육체적 노동능력이 높아진다. 이러한 효과는 3~4일동안 지속된다. 열매는 또한 단물을 만들어 기관질염, 기관지천식때 쓰며 어린이에게도 기침약으로 쓰면 좋다

열매즙은 위운동기능이 낮아졌을 때 쓰면 위운동을 항진시킨다. 위운동기능이 항진되었을때에 씨가루를 먹으면 위운동이 정상으로 회복 시킨다. 위운동이 정상인 때에도 항진시킨다. 껍질과 입은 차를 만들어 먹는다. 향기로운 냄새가 나며 밥맛을 돋구고 소화를 돕는다. 조미료는 가루내어 형개꽃 이삭과 섞어서 쓴다. 열매와 씨로 만든 약은 부작용이 없고 오래 쓸수 있는 귀중한 보약이다. 오미자의 약 리작용으로 보아 심장피줄계통질병치료, 염증치료약, 간담도계통 질병치료약, 당뇨병치료약으로 전망이 크다고 생각된다. 열매와 씨는 간질병에 쓰면 실험실 검사지표가 뚜렷하게 좋아진다는 임상검토 자료들이 알려지고있다. 동의치료에서는 폐를 보하고 콩팥을 돕는 목적에 기침멎이약, 수렴약, 자양강장약으로 기침, 입안이 마르며 설사가 멎지 않고 땀이 나고 가래가 많은 때 사용을 하며, 민간에서는 오미자가루를 효소단위가 높은 간기능 장애시, 가래약 오줌내기약, 즙은 유정때 강정약으로 사용을 한다.

성분(15)의 진피(Citrus unshiu MARKOVICH)는 사철푸른 떨기나무 또는 작은 키나무이다. 버들잎모양 또는 긴 닭알모양의 잎이 어긋나게 붙는다. 여름철에 흰꽃이 핀다. 직경 4~5cm되는 노란감색의 둥근 열매가 익는다.

사용부위는 익은 열매의 껍질을 벗겨 햇볕에 말린 것을 사용을 하며, 동의치료에서는 오래 묵인것일수록 좋다고 하여 진피라고 한다.

성분으로는 열매에는 레몬산을 주성분으로 하는 유기산이 1~3% 있고 아스파라긴, 프롤린, γ-아미노버터산이 있다.

열매껍질에는 정유와 헤스피리딘이 있다. 헤스피리딘은 헤스페레틴과 포도당, 람노즈로 물분해된다.

작용하는곳은 열매껍질의 향기성분과 쓴맛물질은 위액분비량을 늘이고 입맛을 돋구는 방향성건위작용을 한다. 헤스피리딘을 비롯한 플라보노이드성분은 비타민 P활성을 가지며 모세피줄의 투과성을 낮춘다. 껍질제제는 콩팥과 콩팥의 피줄을 수축시켜 오줌량을 줄이는 작용을 하며 포도알균에 대한 억제작용을 한다.

응용하는곳은 동의치료에서 열매껍질을 방향성건위약, 게움멋이약, 기침가래약으로 가슴과 배가 불룩하고 아플 때 가래와 기침이 있을 때 쓴다.

상기의 목적을 달성하기 위하여 본 발명은

(1) 5내지 50 중량부의 삼백초에서 에탄올로 추출한 삼백초 유효성분의 분말 또는 추출액

(2) 5내지 50 중량부의 이질풀에서 정제수로 추출한 이질풀 유효성분의 분말 또는 추출액

(3) 5내지 50 중량부의 흑두에서 정제수로 추출한 흑두 유효성분의 분말 또는 추출액

(4) 5내지 50 중량부의 차전초에서 정제수로 추출한 차전초 유효성분의 분말 또는 추출액

(5) 5내지 50 중량부의 용규에서 정제수로 추출한 용규 유효성분의 분말 또는 추출액

(6) 5내지 50 중량부의 갈근에서 정제수로 추출한 갈근 유효성분의 분말 또는 추출액 을 각각 1중량부씩을 혼합하고, 이를 주제로 사용한다. 이렇게 하면, 6종류의 성분의 추출물을 1 내지 10 중량부씩을 함유하게 된다.

또한 보조성분으로

(1) 5내지 50 중량부의 인동덩굴에서 정제수로 추출한 인동덩굴 유효성분의 분말 또는 추출액

(2) 5내지 50 중량부의 결명자에서 에탄올로 추출한 결명자 유효성분의 분말 또는 추출액

(3) 5내지 50 중량부의 감초에서 에탄올로 추출한 감초 유효성분의 분말 또는 추출액

(4) 5내지 50 중량부의 천초에서 정제수로 추출한 천초 유효성분의 분말 또는 추출액

(5) 5내지 50 중량부의 토사자에서 에탄올로 추출한 토사자 유효성분의 분말 또는 추출액

(6) 5내지 50 중량부의 치자에서 정제수로 추출한 치자 유효성분의 분말 또는 추출액

(7) 5내지 50 중량부의 백작약에서 정제수로 추출한 백작약 유효성분의 분말 또는 추출액

(8) 5내지 50 중량부의 오미자에서 정제수로 추출한 오미자 유효성분의 분말 또는 추출액

(9) 5내지 50 중량부의 진피에서 정제수로 추출한 진피 유효성분의 분말 또는 추출액을 1종이상을 함유하는 조성물이 제공된다.

또한 주성분으로 하는 (1), (2), (3), (4), (5), (6)번과 보조성분으로 하는(1), (2), (3), (4), (5),(6),(7),(8)번 및 (9)번의 추출물을 수득하기 위해서는 각 성분을 동시에 또는 별개로 수성용매(예 : 물 단독 또는 친수성유기용매, 예컨데, 메탄올, 에탄올등과의 혼합액, ethyl acetete)의 과잉량(예컨데, 5~50배의량, 바람직하기로는 5~20배의 량)과 혼합하고, 이혼합물을 100℃, 바람직하기로는 40~95℃에서 충분한 시간(0.5~12시간, 바람직하기로는 3~10시간)추출하여 고체를 제거하고, 추출액을 감압하에 농축한다.

또한 본 발명에서 상기 니코틴과 다이옥신을 분해하는 인체내의 유독성분을 제거하는 기능성제제를 건조하는 방법은 통상적으로 사용되는 건조방법들이 적용될 수 있으며, 바람직하기로는 상기 건조방법은 분사건조인 것이 좋다.

상기 각 성분의 함유율은 원칙으로 넓은 범위에 걸쳐 사용을 할 수 있으나 고형분으로서 1~85%(이상 각 중량%를 나타냄)을 포함하는 것을 특징으로 하는 니코틴과 다이옥신을 분해하고 인체내의 유독성분을 제거하는 기능성 제제 제조방법을 제공한다.

이하 본 발명을 상세하게 설명한다.

본 발명은 흡연으로 인한 체내 니코틴 및 담배의 유해성분을 인식하여 이의 분해효능증진을 위하여 시험 하던중 상기 성분을 함유하는 혼합물은 흡연으로 인한 담배의 유해성분에 대한 분해 및 생성억제능이 뛰어난 기능성 제제가 됨을 알게되었으며, 이를 토대로하여 본발명을 완성하게 되었다.

본 발명의 니코틴과 다이옥신을 분해하는 기능성 제제는 기능성식품으로 사용을 할 수 있으나, 필요에 따라 종래의 부형제(유당, 옥수수전분, 미세결정질(Microcrstalline),셀룰로오스, 마그네슘 스테아레이트 등)과 혼합하여, 건강을 위한 식품의 첨가제로 분말, 과립, 정제, 캡슐 등의 내복약으로 통상 사용되는 제형으로 제제화 할 수 있다. 또 요구르트, 쿠키, 젤리, 검, 치약, 과자류, 음료나 식품의 첨가제로 사용 되어지는 것이 바람직하며, 더욱이 의약, 한방약 등에 1%~60% 중량부로 혼합하여 사용할 수도 있다. 또한 본 발명에 따른 생약추출물을 담배의 첨가물 형태로 제조할 수도 있고, 동물의 사료, 어류의 사료성분으로 제조할 수도 있다.

본 발명의 니코틴과 다이옥신을 분해하는 인체내의 유독성분을 제거하는 생약추출물의 농축액 제조단계 및 혼합 건조단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.

다음에 실시예 및 실험예로서 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.

실시예 1

삼백초 건조분말 10kg에 50% 에탄올 10배수를 가하고 75℃이상을 유지하면서 5시간을 서서히 교반하면서 추출하였다.

수득한 생성물은 원심분리 한 후 고체 잔류물은 버리고 추출액을 1일간 방치한 후 상등액을 여과하여 감압 농축하였다. 감압 농축시 온도는 55℃에서 감압(70～76mmHg) 농축하며, 수득한 고형성분을 약70%의 고형분 함량이 되도록 농 축한 다음 엑기스로서 3kg~4kg을 수득하였다. 이 생성물을 그대로 본 발명의 기능성식품으로 사용하여도 좋고, 다른 성분과 혼합하여 약제학적 조성물로 제제화하거나 음식물 형태로 조제할 수도 있다.

실시예 2

이질풀 건조분말 10kg에 정제수 10배수를 가하고 95℃이상을 유지하면서 5시간을 서서히 교반하면서 추출하였다.

수득한 생성물은 원심분리 한 후 고체 잔류물은 버리고 추출액을 1일간 방치한 후 상등액을 여과하여 감압 농축하였다. 감압 농축시 온도는 55℃에서 감압(70～76mmHg) 농축하며, 수득한 고형성분을 약70%의 고형분 함량이 되도록 농축한 다음 엑기스로서 4kg~5kg을 수득하였다. 이 생성물을 그대로 본 발명의 기능성식품으로 사용하여도 좋고, 다른 성분과 혼합하여 약제학적 조성물로 제제화하거나 음식물 형태로 조제할 수도 있다.

실시예 3

흑두 건조분말 10kg에 정제수 10배수를 가하고 상온에서 12시간을 추출하였다.

수득한 생성물은 원심분리 한 후 고체 잔류물은 버리고 추출액을 1일간 방치한 후 상등액을 여과하여 감압 농축하였다. 감압 농축시 온도는 55℃에서 감압(70～76mmHg) 농축하며, 수득한 고형성분을 약60%의 고형분 함량이 되도록 농축한 다음 엑기스로서 4kg~5kg을 수득하였다. 이 생성물을 그대로 본 발명의 기능 성식품으로 사용하여도 좋고, 다른 성분과 혼합하여 약제학적 조성물로 제제화하거나 음식물 형태로 조제할 수도 있다.

실시예 4

차전초 건조분말 10kg에 정제수 10배수를 가하고 95℃이상을 유지하면서 5시간을 서서히 교반하면서 추출하였다.

수득한 생성물은 원심분리 한 후 고체 잔류물은 버리고 추출액을 1일간 방치한 후 상등액을 여과하여 감압 농축하였다. 감압 농축시 온도는 55℃에서 감압(70～76mmHg) 농축하며, 수득한 고형성분을 약60%의 고형분 함량이 되도록 농축한 다음 엑기스로서 4kg~5kg을 수득하였다. 이 생성물을 그대로 본 발명의 기능성식품으로 사용하여도 좋고, 다른 성분과 혼합하여 약제학적 조성물로 제제화하거나 음식물 형태로 조제할 수도 있다.

실시예 5

용규 건조분말 10kg에 정제수 10배수를 가하고 95℃이상을 유지하면서 5시간을 서서히 교반하면서 추출하였다.

수득한 생성물은 원심분리 한 후 고체 잔류물은 버리고 추출액을 1일간 방치한 후 상등액을 여과하여 감압 농축하였다. 감압 농축시 온도는 55℃에서 감압(70～76mmHg) 농축하며, 수득한 고형성분을 약65%의 고형분 함량이 되도록 농축한 다음 엑기스로서 4kg~5kg을 수득하였다. 이 생성물을 그대로 본 발명의 기능 성식품으로 사용하여도 좋고, 다른 성분과 혼합하여 약제학적 조성물로 제제화하거나 음식물 형태로 조제할 수도 있다.

실시예 6

갈근 건조분말 10kg에 정제수 10배수를 가하고 95℃이상을 유지하면서 5시간을 서서히 교반하면서 추출하였다.

실시예 7

인동덩굴 건조분말 10kg에 정제수 10배수를 가하고 95℃이상을 유지하면서 5시간을 서서히 교반하면서 추출하였다.

수득한 생성물은 원심분리 한 후 고체 잔류물은 버리고 추출액을 1일간 방치한 후 상등액을 여과하여 감압 농축하였다. 감압 농축시 온도는 55℃에서 감압(70～76mmHg) 농축하며, 수득한 고형성분을 약70%의 고형분 함량이 되도록 농축한 다음 엑기스로서 4kg~5kg을 수득하였다. 이 생성물을 그대로 본 발명의 기능 성식품으로 사용하여도 좋고, 다른 성분과 혼합하여 약제학적 조성물로 제제화하거나 음식물 형태로 조제할 수도 있다.

실시예 8

결명자 건조분말 10kg에 40%에탄올 10배수를 가하고 70℃이상을 유지하면서 5시간을 서서히 교반하면서 1차 추출한 후 생성물은 1차 보관하고, 다시 40%에탄올 7배수를 가하고 5시간에서 2차 추출하였다.

1차와 2차에서 수득한 생성물은 원심분리 한 후 고체 잔류물은 버리고 추출액을 1일간 방치한 후 상등액을 여과하여 감압 농축하였다. 감압 농축시 온도는 55℃에서 감압(70～76mmHg) 농축하며, 수득한 고형성분을 약70%의 고형분 함량이 되도록 농축한 다음 엑기스로서 4kg~5kg을 수득하였다. 이 생성물을 그대로 본 발명의 기능성식품으로 사용하여도 좋고, 다른 성분과 혼합하여 약제학적 조성물로 제제화하거나 음식물 형태로 조제할 수도 있다.

실시예 9

감초 건조분말 10kg에 40%에탄올 10배수를 가하고 25℃에서 12시간을 서서히 교반하면서 추출하였다.

수득한 생성물은 원심분리 한 후 고체 잔류물은 버리고 추출액을 1일간 방치한 후 상등액을 여과하여 감압 농축하였다. 감압 농축시 온도는 55℃에서 감압(70～76mmHg) 농축하며, 수득한 고형성분을 약70%의 고형분 함량이 되도록 농 축한 다음 엑기스로서 4.5kg~5.5kg을 수득하였다. 이 생성물을 그대로 본 발명의 기능성식품으로 사용하여도 좋고, 다른 성분과 혼합하여 약제학적 조성물로 제제화하거나 음식물 형태로 조제할 수도 있다.

실시예 10

천초 건조분말 10kg에 정제수 10배수를 가하고 95℃이상을 유지하면서 5시간을 서서히 교반하면서 추출하였다.

실시예 11

토사자 건조분말 10kg에 40%에탄올 10배수를 가하고 70℃이상을 유지하면서 5시간을 서서히 교반하면서 1차 추출한 후 생성물은 1차 보관하고, 다시 40%에탄올 7배수를 가하고 5시간에서 2차 추출하였다.

실시예 12

치자 건조분말 10kg에 정제수 10배수를 가하고 95℃이상을 유지하면서 5시간을 서서히 교반하면서 추출하였다.

실시예 13

백작약 건조분말 10kg에 정제수 10배수를 가하고 95℃이상을 유지하면서 5시간을 서서히 교반하면서 추출하였다.

실시예 14

오미자 건조분말 10kg에 정제수 10배수를 가하고 95℃이상을 유지하면서 5시간을 서서히 교반하면서 추출하였다.

실시예 15

진피 건조분말 10kg에 정제수 10배수를 가하고 95℃이상을 유지하면서 5시간을 서서히 교반하면서 추출하였다.

실시예 16

혼합 및 분사건조단계

상기 한약재 농축액의 각각을 고속 원심분리기를 이용하여 침전물을 제거한 후 분사 건조시켜서 본 발명의 조성물 1을 얻었다.

실시예 17

실시예 1 내지 6에서 얻어진 엑기스를 각각 1중량씩 혼합하고 농축한 다음, 동결건조시켜서 본 발명의 조성물 2를 얻었다.

실시예 18

실시예 7 내지 15에서 얻어진 각각의 추출물을 각각 농축한 다음, 각각 동결건조시켜서 각각의 동결건조물을 얻었다.

실시예 19

실시예 17에서 얻어진 동결건조물에 실시예 18에서 얻어진 인동덩굴, 결명자, 감초 및 천초의 동결건조물을 혼합하여 본 발명의 조성물 3을 얻었다.

실시예 20

실시예 17에서 얻어진 동결건조물에 실시예 18에서 얻어진 토사자, 치자, 백작약,오미자 및 진피의 동결건조물을 혼합하여 본 발명의 조성물 4를 얻었다.

실시예 21

실시예 17에서 얻어진 동결건조물에 실시예 18에서 얻어진 인동덩굴, 결명자, 감초, 천초, 토사자, 치자, 백작약, 오미자, 진피의 동결건조물을 혼합하여 본 발명의 조성물 5를 얻었다.

실시예 22

실시예 17에서 얻어진 동결건조물에 실시예 18에서 얻어진 인동덩굴, 결명자, 감초, 천초, 토사자의 동결건조물을 혼합하여 본 발명의 조성물 6을 얻었다.

실시예 23

실시예 17에서 얻어진 동결건조물에 실시예 18에서 얻어진 치자, 백작약, 오미자, 진피의 동결건조물을 혼합하여 본 발명의 조성물 7을 얻었다.

다음에 실험예로서 본 발명의 효능을 측정하였다.

실험예 1

동물임상실험에 의한 혈액중의 니코틴 분해능 측정

1) 시험동물

Wister strain 수컷 랫트(6주령)는 (주)샘타코(경기도 오산시)로부터 구입.

2) 시험환경

동물을 실온 22±1℃, 습도 55±5%, 환기회수 12회/시간, 조명시간 12시간/일(아침 8시점등, 밤 8시 소등) 로 설정된 동물실의 철망 사육실에 5마리씩 수용하였다. 사료는 고체사료(Sam#31(Autoclavable)를 물과 함께 섭취하게 하였다.

3) 투여방법

시험환경에 2주간 적응시키고 8주령에서 동물을 사용하였다.

시험물질은 본 조성물로서, 0.4g의 본 조성물 5를 고체사료 3.6g에 섞어서 Total 4g을 물과 함께 자유로 먹이로서 체내에 경구 투여하였다.

4)투여시간

투여는 오후 2시에 실시하고, 기간은 7일간으로 하였다.

투여 종료시 및 시험 종료시에 니코틴 분해능 측정을 위한 시료로 심장으로부터 1ml 채혈하였다.

5) 관찰방법

투여일은 투여직후와 저녁에, 그 다음날부터는 아침과 저녁에 관찰하였다. 관 찰은 동물을 사육자 바깥으로부터 주의 깊게 실시하였다

6) 혈액중 니코틴 분해능의 측정시험결과

혈액을 묽은 암모니아수로 pH 9로 조절하였다. 이어서 EXTRELUT COLUMN.(Merck사 제품)에 15분간 유지시키고 15ml의 에틸 아세테이트로 용출 한 다음, 용출아세테이트를 감압하에 증류 제거하고, 생성된 잔사에 100㎕의 에틸 아세테이트를 가하여 용해시키고 분석시료로 하였다

분석은 가스크로마토그래피(미국 HP사 5890 SERIESП, FID부착)사용.

COLUMN 은 2% Tharmon 1000+1% KOH Chromosorb WAM(8/100Mesh)를 충전한길이 2m, 직경 3mm의 유리 칼럼을 사용하였다.

COLUMN온도는 100℃, 캐리어 기체는 N₂를 사용하였고 유속은 60ml/분으로 하였다.

표1. 본 조성물 7일 투여후의 결과

		마비 증상	Hyperactivity 개시시간	Hyperactivity 종료시간	사망시간	혈액중의 Nicotine 농도(㎍/㎖)
G 1	1	20"	3'10"	7'50"	회복	0.019
	2	40"	3'44"	7'30"	회복	0.023
	3	40"	3'20"	7'40"	회복	0.025
	4	53"	3'40"	7'40"	회복	0.023
	5	40"	3'50"	7'30"	회복	0.027
	6	25"	3'40"	7'25"	회복	0.020
	7	35"	3'54"	7'30"	회복	0.027
	8	48"	3'47"	6'51"	회복	0.021
	9	40"	3'49"	7'20"	회복	0.022
	10	40"	3'52"	6'30"	회복	0.028
	평균	34"	3'41"	7'15"		0.0235
G 2	1	20"	3'42"	7'40"	회복	0.023
	2	30"	3'46"	7'25"	회복	0.021
	3	30"	3'30"	7'25"	회복	0.025
	4	30"	3'40"	7'30"	회복	0.021
	5	33"	3'46"	7'47"	회복	0.023
	6	25"	3'52"	6'45"	회복	0.020
	7	35"	3'46"	7'30"	회복	0.027
	8	32"	3'41"	6'51"	회복	0.021
	9	22"	3'57"	6'30"	회복	0.027
	10	28"	3'46"	6'47"	회복	0.028
	평균	29"	3'45"	7'10"		0.0236
G 3	1	30"	45"	59"	1'30"	11.178
	2	30"	40"	1'10"	1'45"	11.183
	3	30"	50"	1'30"	1'55"	11.987
	4	30"	55"	1'45"	2'17"	11.969
	5	20"	45"	1'40"	2'30"	11.119
	6	23"	52"	1'30"	1'33"	12.118
	7	29"	53"	1'30"	1'55"	12.183
	8	25"	55"	1'10"	1'50"	12.137
	9	11"	31"	1'35"	2'10"	12.169
	10	23"	47"	50"	1'35"	12.719
	평균	25.1"	42.3"	1'14"	2'06"	10.5443
G4	1	30"	3'50"	5'20"	7'15"	4.011
	2	20"	3'40"	5'50"	7'10"	4.679
	3	34"	3'45"	5'47"	7'45"	4.295
	4	30"	3'37"	5'30"	7'25"	4.417
	5	40"	3'35"	5'15"	7'54"	4.417
	6	31"	3'40"	5'25"	7'25"	4.020
	7	29"	3'20"	5'30"	7'30"	4.327
	8	20"	3'47"	5'41"	7'51"	4.411
	9	29"	3'49"	5'30"	7'20"	4.422
	10	38"	3'52"	5'40"	7'30"	4.418
	평균	30.1"	3'42"	5'05"	7'31"	3.9417

참고사항 : G1 : 본 조성물 5 전처치후 Nicotine 투여.

G2 : 본 조성물 5 전처치후 Nicotine 투여후 본 조성물 5 투여.

G3 : 대조군 Nicotine투여.

G4 : 대조군 Nicotine투여후 본 조성물 5 투여.

시험 개체수는 각 군별로 열마리씩 시험하였다

Nicotine 농도 40mg/kg/몸무게 대비(투여량 ml)

실험예 2

동물임상실험에 의한 뇨중의 니코틴 분해능 측정

1) 시험동물

2) 시험환경

동물을 실온 22±1℃, 습도 55±5%, 환기회수 12회/시간, 조명시간 12시간/일(아침 8시 점등, 밤 8시 소등) 로 설정된 동물실의 철망 사육실에 5마리씩 수용하였다. 사료는 고체사료(Sam#31(Autoclavable)를 물과 함께 섭취하게 하였다.

3) 투여방법

4)투여시간

투여는 오후 2시에 실시하고, 기간은 7일간으로 하였다.

투여 종료시 및 시험 종료시에 니코틴 분해능 측정을 위한 시료로 방광으로부터 1ml 채혈하였다.

5) 관찰방법

투여일은 투여직후와 저녁에, 그 다음날부터는 아침과 저녁에 관찰하였다. 관찰은 동물을 사육자 바깥으로부터 주의 깊게 실시하였다

6) 뇨중 니코틴 분해능의 측정시험결과

뇨를 묽은 암모니아수로 pH9로 조절하였다. 이어서 EXTRELUT COLUMN. (Merck사 제품)에 15분간 유지시키고 15ml의 에틸 아세테이트로 용출 한 다음, 용출아세테이트를 감압하에 증류 제거하고, 생성된 잔사에 100㎕의 에틸 아세테이트를 가하여 용해시키고 분석시료로 하였다

COLUMN은 2% Tharmon 1000+1% KOH Chromosorb WAM(8/100Mesh)를 충전한 길이 2m, 직경 3mm의 유리 칼럼을 사용하였다.

표2. 본 조성물 7일 투여후의 결과

		마비 증상	Hyperactivity 개시시간	Hyperactivity 종료시간	사망시간	뇨중의 Nicotine 농도(㎍/㎖)
G 1	1	35"	3'40"	7'50"	회복	5.619
	2	45"	3'44"	7'30"	회복	5.599
	3	30"	3'10"	7'25"	회복	5.625
	4	40"	3'49"	7'46"	회복	5.623
	5	40"	3'42"	6'55"	회복	5.621
	6	30"	3'20"	7'30"	회복	5.624
	7	25"	3'34"	7'20"	회복	5.627
	8	40"	3'45"	7'45"	회복	5.615
	9	40"	3'30"	7'40"	회복	5.631
	10	35"	3'30"	7'45"	회복	5.617
	평균	36"	3'30"	7'29"		5.6201
G 2	1	20"	3'42"	6'45"	회복	5.623
	2	40"	3'40"	7'23"	회복	5.621
	3	30"	3'21"	7'25"	회복	5.601
	4	20"	3'47"	7'40"	회복	5.621
	5	30"	3'40"	7'17"	회복	5.623
	6	35"	3'32"	7'25"	회복	5.637
	7	30"	3'30"	7'45"	회복	5.614
	8	30"	3'40"	7'55"	회복	5.612
	9	25"	3'35"	7'40"	회복	5.613
	10	30"	3'26"	7'30"	회복	5.619
	평균	29"	3'35"	7'25"		5.6184
G 3	1	20"	45"	1'30"	1'50"	0.038
	2	35"	50"	1'55"	2'45"	0.031
	3	35"	55"	1'10"	1'45"	0.035
	4	30"	55"	1'35"	2'25"	0.039
	5	30"	45"	1'40"	2'15"	0.035
	6	30"	50"	1'10"	1'50"	0.031
	7	30"	50"	1'30"	2'05"	0.033
	8	25"	45"	1'40"	1'55"	0.030
	9	25"	55"	1'45"	2'40"	0.031
	10	25"	45"	1'35"	2'40"	0.039
	평균	25.5"	50"	1'23"	2'11"	0.0342
G4	1	30"	3'30"	5'15"	7'10"	0.319
	2	20"	3'20"	5'55"	7'35"	0.321
	3	25"	3'45"	5'40"	7'45"	0.325
	4	20"	3'15"	5'10"	7'55"	0.317
	5	40"	3'25"	5'40"	7'30"	0.317
	6	25"	3'10"	5'10"	7'45"	0.319
	7	30"	3'20"	5'45"	7'55"	0.379
	8	20"	3'15"	5'37"	7'25"	0.315
	9	30"	3'20"	5'50"	7'45"	0.314
	10	30"	3'15"	5'45"	7'30"	0.314
	평균	27"	3'12"	5'30"	7'38"	0.324

참고사항 : G1 : 본 조성물 5 전처치후 Nicotine 투여.

G2 : 본 조성물 5 전처치후 Nicotine 투여후 본 조성물 5 투여.

G3 : 대조군 Nicotine투여.

G4 : 대조군 Nicotine투여후 본 조성물 5 투여.

시험 개체수는 각 군별로 열마리씩 시험하였다

Nicotine 농도 40mg/kg/몸무게 대비(투여량 ml)

실험예 3

동물임상실험에 의한 혈액중 일산화탄소 농도 측정

1) 시험동물

2) 시험환경

3) 투여방법

4) C0 폭로 방법

투여 종료 다음날, 폭로용 챔버(일본국 Sugiyamage사 제품)내에 각 동물을 수용하고, O₂ 21%, CO 100ppm의 혼합기체를 펌프로 도입하여 5분간 흡입시켰다. 챕버내 의 농도는 일산화탄소 측정기 (COM-4, 일본국 Komei Rikagaku Kogyo사 제품)로서 검사하였다.

5) 혈액중 CO - Hb 농도의 측정

폭로종료후 바로 심장으로부터 채혈하여 혈액 0.5ml을 5ml 용량의 reaction vial에 넣고 옥틸알콜 한방울과 포타슘 페리시아네이트 포화 수용액 0.25ml를 가하였다. 반응액을 마개로 막고 5분간 진탕한 후 기상(氣相)을 분석 시료로 사용하였다.

분석은 가스크로마토그래피(미국 HP사 5890 SERIESП, TCD부착)사용.

COLUMN 은 분자체 5A(3/60Mesh)를 충전한 길이 2m, 직경 3mm의 유리 칼럼을 사용하였다.

COLUMN온도는 60℃, 캐리어 기체는 H₂를 사용하였고 유속은 50ml/분으로 하였다.

6) 결과

시험 후의 혈액중 CO농도를 측정한 결과는 표3에 나와 있다.

표3. 본 조성물을 10일 투여후의 결과

		혈액중의 CO-Hb농도(%)
G 1	1	65.8
	2	61.9
	3	63.3
	4	65.8
	5	67.5
	6	62.3
	7	64.3
	8	63.5
	10	64.2
	평균	64.59
G 2	1	68.0
	2	62.8
	3	67.5
	4	63.9
	5	67.0
	6	65.5
	7	67.5
	8	61.5
	9	64.9
	10	66.5
	평균	65.51
G 3	1	51.3
	2	50.2
	3	59.1
	4	58.5
	5	58.9
	6	53.3
	7	51.4
	8	54.6
	9	55.9
	10	53.2
	평균	54.64
G 4	1	56.5
	2	55.8
	3	58.9
	4	51.1
	5	53.8
	6	52.3
	7	54.5
	8	53.2
	9	57.3
	10	54.3
	평균	54.77

실험예 4

항산화효과

자유 라디칼들이 동맥경화(Palinski, W., Rosenfeld, M. E., Yla, H. S., Gurtner, G. C., Socher, S. S., Butler, S. W., Carew, T. E., Steinberg, D., and Witztum, J. L. (1989) Proc. Natl. Acad. Sci., 86, 1372-1376), 혈관수축에 의한 국소빈혈(Hammond, B., Kontos, H. A., and Hess, M. L. (1985) Can. J. Physiol. Pharmacol., 63, 173-187), 염증(Cheeseman, K. H., and Forni, L. G. (1988) Biochem. Pharmacol., 37, 4225-4233), 발암(Weitzman, S. A., Weitberg, A. B., Clark, E. P., and Stossel, T. P. (1985) Science, 227, 1231-1233), 류마티스성 관절염(Fantone, J. C., and Ward, P. A. (1985) Human Pathol., 16, 973-978)과 같은 넓은 범위의 병을 매개한다는 다양한 증거들이 알려져 왔다. 그러므로, 자유 라디칼 포착제(scavenger)는 자유 라디칼 수준을 감소시킴으로써 효과적인 치료제로써 기대 되어 지고 있으며, 사람들은 안전하고 효과적인 항산화제의 개발에 초점을 맞추어 왔다.

본 실험에서는 자유 라디칼인 DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)와 Flow-Injection Chemiluminescence (FI-CL)에 의한 항산화 효과 측정 방법 (Analytical Biochemistry 264, 291-293) SOD(superoxide dismutase) 기능성 제제에 대하여 실험하였다.

1) DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl)에 의한 항산화 효과 측정 방법

안정한 free radical인 DPPH를 ethanol에 녹여 0.5 mM solution을 만들고, DPPH solution 1 ml에 100 mM Tris-HCl buffer (pH 7.4) 1 ml를 넣고, 0.5% test sample(vitamin C, 또는 본 조성물 5)용액 0.1 ml를 첨가하여 37℃, 암실에서 15분간 반응시킨 후 517 nm에서 흡광도를 측정했다. 흡광도는 HP UV/VIS spectrophotometer를 사용하여 측정하였다. 각 test sample의 항산화 효과는 DPPH만 넣고 시료를 넣지 않은 control의 UV 흡광도와 DPPH에 0.5%의 sample을 넣은 시험관의 흡광도의 감소를 비교하였다. vitamin C 및 본 조성물 5의 radical scavenging activity를 % inhibition으로 나타내었다.

% Inhibition = [A-B]/[A] x 100

A : DPPH만의 흡광도

B : DPPH + sample(scavenger)을 혼합한 sample 흡광도

표 4-1. radical scavenging activity(%)

	본 조성물 5	vitamin C
평 균	74.47	80.80
표준오차	0.09	1.50

2) Flow-Injection Chemiluminescence (FI-CL)에 의한 항산화 효과 측정 방법 (Analytical Biochemistry 264, 291-293)

화학발광 detector를 이용하여 과산화수소에 의해 발생되는 ROS(reactive oxygen species)의 제거를 통해 항산화 효과를 알아볼 수 있는 방법이다. CL intensity는 filter equipped photon counting 형태인 spectrophotometer (CLA-1100, Tohoku Electronic Industry)에 pump (Gilson Model 306) 와 injector (Rheodyne Model 7125)를 연결하여 측정하였다. 화학발광은 cytochrome c 와 H₂O₂가 반응하여 oxygen-derived free radical이 생성되고, 이 생성물이 luminol과 반응하여 luminol의 산화가 일어나면서 화학발광이 일어난다. 이 때 radical scavenger의 역할을 하는 항산화 물질에 의하여 활성산소의 reduction이 일어나 CL intensity가 감소한다. Mobile phase는 50% methanol로 만들어진 50 mM phosphate buffer (pH 7.4)에 cytochrome c (10 mg/L), luminol(2 mg/L)을 첨가하여 사용하였고, flow-rate는 1 ml/min로 하였다. Injector를 통해 0.06% H₂O₂ 5 ㎕ 와 0.1% test sample(vitamin C, 또는 본 조성물 5) 5 ㎕를 injection 하였다. test sample의 항산화 효과는 0.06% H₂O₂의 CL intensity를 control로 하고 0.06% H₂O₂에 0.1% sample을 함께 injection하여 나타난 CL intensity의 감소를 비교하여 radical scavenging activity를 나타내었다.

% radical scavenging activity = [A-B]/[A] x 100

A : H₂O₂만을 injection 한 후 발생한 화학발광

B : H₂O₂ + sample(scavenger)을 injection 한 후 발생한 화학발광

표4-2. radical scavenging activity(%)

	본 조성물 5	vitamin C
평 균	87	100
표준오차	0.01	0.00

실험예 5

아질산 소거작용

본 발명의 기능성 제제가 발암성인 니트로사민 부산물의 형성 억제여부를 실험하였다.

아질산 소거작용은 발암성 물질인 Nitrosamines 들의 생성전구물질의 활성도를 감소시켜 Nitrosamines들의 생성억제 기능을 조사하고 본 발명품 추출물에 의한 생체 내에서 Nitrosamines 생성억제효과 측정을 한다.

이 방법은 Nitrosation model system을 만들어 즉, morpholin과 NaNO₂용액을 반응시키면서 본 조성물 추출물에 의한 Nitrosation inhibition effect를 측정한다.

이러한 반응에서 억제 효과의 Nitrosation반응에서 억제효과의 측정은 인체나 동물들의 위(stomach)에서 합성되는 각종 Nitrosamines들의 생성억제를 탐색함으로써 현대사회에서 큰 질병중의 하나인 암의 발생을 효과적으로 억제할 수 있는 가능성에 대한 정보를 얻을 수 있을 뿐만 아니라, 다양한 기능성을 확인할 수 있다.

건조된 담배를 피워 담배진을 모아서 아질산염 소거능은 Kato실험(Kato, H., Lee, I.E., Chuyen, N.V., KIM, S.B. and Hayase, F.Inhibition of nitrosamine formation by nondialyable melanoidins. Agri. Bio. Cham. 51(5): 1333-1338(1987).와 Kytopoulos, S.A. Ascorbic acid and formation of N-nitroso compounds;Possible role of ascorbic acid in cancer prevention.Am.J. Clin. Nutr. 45: 1344-1350(1987)의 방법에 따라 측정하였다. 즉 1mM NaNO₂용액 2mL에 0.01% test sample(본 조성물 5, 또는 vitamin C)용액 1mL를 가하고 0.1N HCl(pH 1.2) 및 0.2M citrate buffer (pH 4.2)를 사용하여 반응 용액의 pH를 각각 1.2 및 4.2로 조정하여 총 부피가 10mL가 되도록 한 후 37℃에서 1시간 동안 반응시켰다. 반응액을 각각 1mL씩 취하고 여기에 2% acetic acid 5mL와 griess시약 0.4mL를 가한 후 실온에서 빛을 차단하여 15분간 방치한 후 520nm에서 흡광도를 측정하여 잔존하는 아질산염량을 구하였다. Griess시약은 sulfanilic acid(Sigma,co.)와 naphthylamine(Sigma,co.)을 각각 1% 상당량 정량한 후 100% 초산을 첨가하여 교반 용해 시키고 30%초산이 되도록 일정량을 정용 하여 사용직전에 조제하였다. 아질산염 소거율은 시료용액을 첨가한 경우와 첨가하지 않은 경우의 흡광도를 백분율로 나타내었다.

SA(%) = (1 - A-B/B) X 100

SA : Nitrite scavenging ability

A : Absorbance of 1mM NaNO₂added sample after standing for 1 hour

B: Absorbance of NaNO₂

C : Absorbance of control

실험결과는 본 조성물의 기능성제품에 대한 아질산염 소거율을 조사한 결과는 표4와 같다. 본 조성물에 대한 기능성 제품은pH 1.2의 조건에서 전체적으로 51.65~90.55%로 가장 높은 소거율을 나타냈으며 pH 4.2에서는 7.19~16.26%로 pH가 증가할수록 소거율이 크게 감소하는 경향을 나타내었다. Nitrosamine생성 최적pH 는 2.5~3.0으로 pH가 높아질수록 감소하는 것으로 보고한 결과와도 동일한 경향을 나타내었다.

위장 내(낮은 pH조건에서) 또는 담배연기에서 nitrosamine이 쉽게 형성되므로 낮은 pH에서의 아질산염 소거율이 큰 것은 nitrosamine 형성을 효과적으로 억제하는 것으로 판단된다. 대조군으로 사용한 vitamine C의 아질산염 소거율은 pH1.2에서 98.93%였으며, pH4.2에서는 92.91%로 나타났다.

표 5. Nitrite scavenging ability(%)

	pH 1.2		pH 4.2
Vit. C	98.93	Vit. C	92.91
본 조성물 5	67.86	본조성물 5	10.84

실험예 6

NO 생성 억제효과

NO는 최근 약리 및 독성 작용에 관여하는 새로운 생체조절 물질로 발암과 고혈압, 지혈, 면역반응. 뇌독성은 물론 근세포나 간세포, 신경세포등의 고유 작용을 중화시키는 표적으로 작용한다. 하지만 NO가 쌍을 이루지 못한 전자를 갖는 다른 종들과 반응할 경우 더욱 독성이 강한 2차 물질을 생성, 치명적인 조직 손상을 일으키는 직접적인 원인이 되기도 한다.

일반적으로 대식 세포는 크게 3가지의 항 미생물 작용이 항진된다.

첫째는 세포내 lysosome에 들어 있는 여러 가지 가수 분해 효소의 증가이고,

둘째는 NADH oxidase의 활성에 의한 ROI의 생성이며,

셋째는 NO의 생성이다.

그러나 과량의 ROI 및 NO는 조직을 손상시키고 염증을 유발한다. 따라서 이 두 가지 활성 물질의 생성은 조절될 필요성이 있으며, 여러 연구에 의하면 NO와 ROI는 동시에 생성되거나 어느 한쪽에 의해서 생성이 촉진되기도 한다

본발명의 시험은 마우스 대식세포인 RAW264.7을 well당 1X10⁵개 세포를 분취하고 37℃ CO₂배양기에서 2시간 동안 배양하여 부착되지 않는 죽은 세포를 제거하고, 본 조성물 5를 농도별로 단독 또는 Lipopolysaccharide(LPS, 100ng/ml)와 혼합하여 처리하고 24시간 배양했다. 배양 종료 후 배양 상등액중의 nitrite(NO의 안정한 수화합물)를 Griess시약을 이용하여 NaNO₂를 Standard로 하여 정량하였으며, 측정한 NO의 양은 상대백분율로 표기하였다.

표 6. NO 생성량의 상대비

본 조성물 5 투여량	Not LPS	LPS(100ng/ml) 투여
-	13.0	100
0.5㎍/ml	12.6	92.5
5.0㎍/ml	18.5	89.0
50.0㎍/ml	22.0	86.2
500.0㎍/ml	19.3	40.2

삭제

위의 표에서 본 바와 같이 본 조성물을 단독 투여시에는 NO의 생성량에 직접적인 영향을 미치지 않았으나, LPS로 NO의 생성을 촉진시켰을 경우에는 NO의 생성을 저해하는 효과를 나타냈다.

실험예 7

AMES TEST

담배연기 속에는 Benzo(α)Pyrene(B(a)P)를 비롯한 약 4,000여종의 독성물질이 들어있으며 그중에서 60여종은 발암물질로 알려져 있다. 본 발명에 따른 조성물이 담배의 발암물질로 인해 유발되는 돌연변이를 경감시키는지를 알아보기 위하여 AMES TEST를 하였다.

본 발명의 조성물의 돌연변이 억제효과를 평가하기 위하여, 하기 표 7에 나타낸 바와 같이 담배진으로 돌연변이를 유발시키고 본 조성물에 의한 억제 작용을 검증하였다.

MOLTOX^TMSalmonella Mutagenicity Assay Kit(우정비에스씨)를 이용하여 kit의 설명서에 제시된 방법을 따라 시험하였으며, 조건별로 각각 3세트씩 실험하였다.

표7. 본 조성물(X±SD)의 AMES Test의 결과.

	담배진 (㎍/plate)	본조성물5 (mg/plate)	TA98(+S9)	TA100(+S9)
negative control	-	-	21.3±7.4	122.7±14.4
positive control	680	-	66.4±6.0	134.5±13.0
시험군	680	0.96	58.5±9.2	132.5±12.2
	680	4.80	21.3±4.0	120.0±13.0
	680	24.00	22.3±7.5	110.2± 7.5
	680	120.00	17.3±2.1	109.0± 8.7

상기 표 7과 같이 본 발명의 조성물을 담배진과 함께 투여하여, 활성대사효소계 존재하(+S9)에서 AMES Test를 하였다.

시험 결과에 따르면 TA98, TA100 Strain 모두에서 본 발명의 조성물은 담배진으로 인한 돌연변이 유발을 경감시키는 것으로 나타났다.

실험예 8

골수 소핵시험

하기 표8에 따라 성숙한 마우스에 본 조성물과 담배진을 투여하여 골수 소핵 시험방법에 따라 염색체의 손상을 관찰하였다. 담배진과 본 조성물을 건조사료에 혼합하여 취식하도록 한 후, 24시간 후에 경추탈구시키고 골수세포를 채취, 도말, 고정, 염색(5% Giemsa액)하여 현미경으로 적혈구를 관찰하였다. 각각의 군은 6마리로 하였으며, 마리당 5000개의 세포를 관찰하여 소핵형성의 수를 기재하였다.

표8. 마우스 골수 소핵시험 결과

	dose		소핵형성수		소핵형성비율(‰)		P
	담배진	본 조성물 5	암컷	수컷	암컷	수컷	P
negative control	-	-	40	36	8.0	7.2	-
positive control	40mg/kg	-	163	122	32.6	24.4	-
시험군	40mg/kg	5g/kg	41	32	8.2	6.4	< 0.01
	40mg/kg	10g/kg	37	30	7.4	6.0	> 0.05
	40mg/kg	20g/kg	41	29	8.2	5.8	> 0.05

상기와 같이 본 발명의 조성물 5~20g/kg을 각각 담배진과 함께 투여하여 골수 소핵 시험을 한 결과, 본 발명의 조성물은 담배진으로 인해 유발되는 마우스 골수세포의 소핵 형성을 경감시켜 주는 것으로 나타났다.

실험예 9

마우스 정자기형시험

하기 표9.에 따라 성숙한 수컷 마우스에 본 조성물과 담배진을 투여하여 정자기형시험을 하였다. 담배진과 본 조성물을 건조사료에 혼합하여 취식하도록 하고 24시간 후에 정자를 채취하여 관찰하였으며, 각각의 군은 5마리로 하였다.

표9. 마우스 정자기형시험

시험군	담배진 투여량	본 조성물 5 투여량	Animal number	Observed sperms	Abnormality sperms	Abnormality Ratio(%)
negative control	-	-	5	5000	52	1.04
positive control	60mg/kg	-	5	5000	250	5.00
시험군	60mg/kg	5g/kg	5	5000	50	1.00
	60mg/kg	10g/kg	5	5000	52	1.04
	60mg/kg	20g/kg	5	5000	69	1.38

상기와 같이 본 발명의 조성물 5~20g/kg을 각각 담배진과 함께 투여하여 마우스 정자기형시험을 한 결과, 본 발명의 조성물은 담배진으로 인해 유발되는 마우스 정자기형을 경감시켜 주는 것으로 나타났다.

실험예 10

Aflatoxin B1(AFB1)를 이용한 Ames Test

Aflatoxin B1은 매우 강력한 발암물질로 돌연변이를 유발한다. 본 발명의 조성물의 돌연변이 억제 효과를 확인하기 위하여, 아래의 표 10에 따라 Ames Test를 실시하였다. MOLTOX^TMSalmonella Mutagenicity Assay Kit(우정비에스씨)를 이용하여 kit에 제시된 방법을 따라 시험하였으며, 조건별로 각각 2세트씩 실험하여 평균치를 기재하였다.

표10. AFB1(X)의 돌연변이 유발력에서 본 발명품의 영향.

	본 조성물 5 (mg/plate)	AFB₁ (㎍/plate)	TA97a(+S9)	TA98(+S9)	TA100(+S9)
positive control	-	1.4	550	1167	1152
시험군	15	1.4	670	935	889
	30	1.4	406	417	358
	60	1.4	224	143	186
	120	1.4	173	41	129
negative control	-	-	121	39	111

상기와 같이 본 발명의 조성물을 AFB1과 함께 투여하여 활성대사효소계 존재(+S9)하에 AMES Test를 한 결과, TA97a, TA98, TA100 Strain 모두에서 본 발명의 조성물이 AFB1로 인한 돌연변이 유발을 경감시켜 주는 것으로 나타났다.

실험예 11

담배의 TAR중 NNN. NAT. NNK. B(a)P분석

대기중에는 자동차 배기가스, 공장굴뚝, 주택이나 건물의 난방 등에서 발생하는 매연과 함께 수백 종의 화학물질들이 다수 포함돼 있다. 그중에 벤조피렌은 폐암을 일으키는 물질로 알려져 있으며, 특히 흡연으로 인한 문제가 현재 제기되고 있다.

흡연으로 인한 니코틴이 니코틴 유도체인 NNK, NNN, NAT로 전환되는 것보다 코티닌으로 빠르게 대사되는 것이 흡연으로 인한 피해를 줄이고, 또한 Benzo(a)pyren을 줄임으로써 궁극적으로 발암물질을 효과적으로 억제할 수 있다.

본 조성물을 담배에 첨가하여 담배연기를 측정한 결과이다.

1. 시약

1.1 표준물질

NNN, NAT, NNK, B(a)P(2000㎍/㎖, Supelco, USA)를 약 1.0∼40.0ng/㎖의 농도범위로 희석하여 사용하였다.

2. 기기 및 장치

2.1 기체 크로마토그래피

사용한 기체크로마토그래피는 Hewlett Packard사(미국) 6890 Plus에 Detector 는 Flame Ionized Detector와 Mass Selective Detector, HP 5973을 사용하였다.

2.2 자동흡연장치

자동흡연장치는 Heinr. Borgwaldt(독일)의 20-port 흡연기를 사용하였다.

3. 분석방법

3.1. 시험담배

3.1.1중국천진연초제조창에서 본 조성물을 첨가하여 제조한 SAMPLE담배,

3.1.2 중국천진연초제조창에서 제조한 HANDA담배(대조담배)

3.2. 시험담배 제조

본 조성물 100mg에 증류수 2ml을 넣어 본 발명품을 잘 용해하여 각초 담배잎 20g에 골고루 살포한후 50℃에서 24시간 건조하였다.

3.3. 담배의Tar중 NNN. NAT. NNK. Benzo(a)pyrene)분석

3.3.1 연소조건

각각의 시험 담배를 제조하여 CORESTA 표준조건으로 연소하였다. 연소조건은 흡연부피 35±0.5ml, 흡연시간 2.0초, 흡연주기 60초이다. 꽁초길이는 필터가 부착된 팁페이파 길이 +3mm로 조절하였다.

흡연프로필은 (puff profile)은 ISO 3308을 만족하는 종모양(bell shape)을 유지하도록 하였다.

3.2.2 담배의 Tar중 NNN(N'-nitrosonor nicotine)

NAT(N'-nitrosoanatabine).

NNK(4-(methylnitrosamino)-1-(3-pyridyl)-1-butanone). Benzo(a)pyrene(B(a)P)의 정량분석 결과.

표11. 정량분석결과 (단위 : ng/개피)

	NNN	NAT	NNK	B(a)P
SAMPLE	0.86±0.12	1.11±0.18	0.45±0.12	5.78±0.31
CONTROL	2.43±0.25	4.26±0.43	1.72±0.17	19.59±0.54
함량차이(%)	64.61	73.94	73.84	70.50

4. 시험결과

담배의 Tar중 NNN, NAT, NNK, B(a)P시험결과 CONTROL(대조담배)군보다 SAMPLE (본조성물 2%추가)군이 평균 70.723%가 감소되었다.

실험예 12

본조성물이 mouse splenocyte의 proliferation에 미치는 영향(면역력시험)

Splenic cell culture방법

3주령의 ICR mouse로부터 적출한 비장을 생리식염수로 세척하여 complete RPMI 1640 media에서 비장세포를 분리하였다. 분리된 비장세포를 96well에 2 x 10⁵ cells/ml로 분주하여 ConA(Concanavalin A), LPS 등의 stimulator와 함께 배양하면서 각각 다른 농도의 조성물을 처리하여 37℃, 5% CO2 incubator에서 이틀간 배양한 후 alarmar blue를 20㎕/well로 처리하여 micro plate reader로 흡광도를 측정하였다.

* 본 조성물 및 stimulator의 농도 : 1, 10, 100, 1000 ug/ml

* 모든 실험은 클린벤치에서 하였으며 media를 비롯한 모든 샘플은 여과(22㎛) 하여 세포에 처리하였다.

* micro plate reader : measurement 570㎚

** Alamar Blue assay : alamar blue dye는 무독성으로 세포의 활성에 의해 대사 되어 파란색으로 변하는 성질을 이용한 cytotoxity 측정실험법. micro plate reader로 측정한 OD값이 낮을 경우 cell proliferation이 감소된 것으로 평가함.

시험결과는 도 1 및 표 12와 같다.

표12. cell proliferation(O.D)

	본 조성물 5	LPS	ConA
0μg/ml	0.21	0.22	0.22
1μg/ml	0.37	0.60	0.29
10μg/ml	0.38	0.78	0.32
100μg/ml	0.58	1.19	0.42
1000μg/ml	0.74	0.58	0.56

표12 및 도 1에서 본 바와 같이 본 조성물은 동물세포에 대하여 독성이 없으며, 비록 상용되는 mitogen(LPS, ConA)의 효과에는 미치지 못하나 마우스 비장세포의 증식을 촉진시키는 것으로 나타났다.

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실험예 13

동물실험(PLASMA)결과

1.실험방법 : 3주령의 SD-rat 을 Normal, Nicotin, Nicotine + 본 발명품(n=7) 의 그룹으로 나누어 사육 후 7주령에 희생시켰다.

Normal (n=6) : 자유식이

Nicotine (n=8) : nicotine 4mg/kgBW 경구투여 + 200mg/kgBW 생리식염수 복강투여

Nicotine + 본 조성물 (n=7) : nicotine 4mg/kgBW 경구투여 + 200mg/kgBW 본 조성물 복강투여

2. Plasma 분석

희생시킨 동물의 동맥에서 혈액을 채취하여 응고 방지를 위해 EDTA 처리 하였다. 채취된 혈액은 3,000 rpm에 10분간 원심분리하여 혈청을 분리한 후 분석할 때 까지 -70℃에서 보관하였다.

1) Total Cholesterol : 혈중 총콜레스테롤 측정 키트(Wako, Japan)를 사용하여 UV-VIS Spectrophotometer 505nm에서 흡광도를 측정하여 정량 하였다.

2) Triglyceride : 혈중 중성지방 측정 키트(Wako, Japan)를 사용하여 UV- VIS

Spectrophotometer 410nm에서 흡광도를 측정하여 정량 하였다.

3. 지질과산화 함량 측정 (TBARS)

4주간 Nicotine 및 본조성물 투여 후 diethyl ether로 마취시켜 간을 적출하였다. 적출한 간은 분석할 때 까지 -70℃에서 보관하였다.

간 1g을 100mM Tris-HCl, pH 7.4 buffer로 homogenate 한 후 TBA 정색시약을 첨가하여 535nm에서 생성된 TBARS 함량을 정량 분석하였다.

표13. 실험결과

Plasma (mg/dl)	Normal	Nicotine	Nicotine + 본조성물
Triglyceride	37.2 ± 6.0^a	77.1 ± 3.8^b	46.3 ± 2.7^a
Total Cholesterol	89.8 ± 3.2^c	68.0 ± 1.9^b	43.7 ± 3.0^a
Glucose	151.5 ± 2.4^a	174.4 ± 2.7^b	197.3 ± 3.5^c

TBARS (nmol/mg)	Normal	Nicotine	Nicotine + 본조성물
Liver	1.0± 0.0^b	0.91 ± 0.0^a	0.8 ± 0.1^a
Brain	2.2 ± 0.1	2.0 ± 0.1	2.1 ± 0.1
Lung	1.5 ± 0.1	1.5 ± 0.1	1.5 ± 0.1
Plasma	0.3 ± 0.0	0.3 ± 0.0	0.3 ± 0.1

Tip :

TBARS-(ThioBarbutic Acid -Recative Substance)란.

TBA 시약과 반응하는 MDA(MalonDiAldehyde-지질과산화 생성물)를 측정하여 지질 과산화정도 측정

이상의 실험에서 확인되는 바와 같이 본 발명의 조성물은 인체내의 유해물질 분해 및 배출에 탁월한 효능을 가진다. 따라서 본 발명의 조성물은 담배흡연에 의한 니코틴중독이나 또는 기타 유해물질의 해독제로서 대단히 유용하다.

본 발명의 조성물은 이를 정제, 산제, 액제, 시럽제, 캡슐제, 주사제등과 같은 통상의 식품이나 의약품에서 사용되는 제제형태로서 사용될 수도 있으며, 또는 음료수나 차등에 혼합하여 제조하여 섭취할 수도 있으며, 이는 이 분야에 통상의 지식을 가진 사람에게는 매우 쉬운 일이다.

본 발명의 조성물은 음료나 과자류, 동물이나 어류의 사료, 또는 구강치약에 첨가하여 사용될 수도 있다.

본 발명의 조성물은 기존에 식품이나 또는 의약품으로 오랫동안 사용되어오고 있는 성분들이며, 따라서 독성은 거의 없는 것으로 판명된 성분들이다.

실험예로 부터 명백한 바와 같이, 본 발명의 조성물은 인체내의 유독물질을 제거하는 기능성제제는 니코틴의 분해를 가속화시키고, 발암성의 니트로소-화합물과 벤조파이렌의 형성을 억제한다. 또한 담배에 의한 발암물질 형성을 저해하고, 항산화효과를 나타낼 뿐만 아니라 NNK,NNN,NAT와 벤조피렌에 의한 돌연변이능을 억제시키고, 폐암발생율을 억제시킨다.

따라서 본 발명의 조성물은 흡연으로 인한 피해를 저하시키며, 또한 혈액중의 니코틴 양을 저하시키므로 흡연으로 인하여 발생한 인체내의 유독 성분을 제거함으로써 각종 질병들을 미연에 예방할 수 있다.

더욱이, 본 발명의 조성물은 음식물 또는 제제화된 식품으로서 섭취하게 되므로 끽연 습관을 중단하거나 끽연시 다른 물품을 사용하거나 여분의 동작을 추가할 필요가 없다.따라서 끽연 습관에 영향을 미치지 않고 무리하지 않게 효과를 달성할 수 있다. 또 독성이 없으므로 상시로 탈 없이 복용할 수 있다.

Claims

삼백초(Saururus chinensis BAILL.),이질풀(Geranium nepalense Sweet (G. thunbergii Siebold et Zuccarini), 흑두(Glycine max(L.)Merr.), 차전초(Plantago asiatica L.(P.major L. var. asiatica Decne), 용규(Solanum nigrum), 갈근(Pueraria thunbergiana Benth) 각각 1 내지 10 중량부로부터 추출한 성분을 함유하는 것을 특징으로 하는 흡연으로 인해 유발되는 인체내의 유독성분의 제거에 유효한 효능을 가지는 조성물.
제1항에 있어서, 인동덩굴(Lonicera japonica Thunb), 결명자(Cassia obtusifolia L.), 감초(Glycyrrhiza glabra L.), 천초(Rubia cordifolia L. var. mungista Miquel), 토사자(Cuscuta japonica Choisy), 치자(Gardenia jasminoides Ellis), 백작약(Paeonia albiflora Pallas var. trichocarpa Bunge), 오미자(Schizandra chinensis Baillon = Schisandra chinensis), 진피(Citrus unshiu MARKOVICH)로 이루어진 그룹에서 선택된 1종 이상의 성분 1 내지 10 중량부로부터 추출한 성분을 추가로 함유하는 것을 특징으로 하는 흡연으로 인해 유발되는 인체내 유독성분의 제거에 유효한 효능을 가지는 조성물.
제1항 또는 제2항의 조성물을 분말, 과립, 정제, 캡슐제, 액제, 주사제 또는 시럽제의 형태로 제제화한 제제.
제 1항 또는 제2항의 조성물을 과자류, 음료 또는 사탕의 형태로 제제화한 제제.
제1항 또는 제2항의 조성물을 담배제조시에 첨가물의 형태로 첨가하여 제조된 기능성 담배.
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