KR100541044B1 - 바실러스 츄린겐시스로부터 유래된 키토산아제 활성을 갖는 신규한 폴리펩타이드 - Google Patents
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- 바실러스 츄린겐시스 (Bacillus thuringiensis)로부터 분리된 키토산아제로서. 서열목록 제 8 서열, 제 10 서열, 제 12 서열, 제 14 서열, 제 16 서열, 제 18 서열, 제 20 서열 또는 제 22 서열로 구성되는 군으로부터 택일적으로 선택되는 아미노산 서열로 이루어지고, 키토산 분해시 1 당 및 2 당은 전체 올리고당 산물에 대하여 0-10% 범위로만 생성되는 것을 특징으로 하는 키토산아제.
- 상기 제 4 항의 키토산아제를 코딩하는 핵산 분자.
- 제 5 항에 있어서, 상기 핵산 분자의 염기 서열은 서열목록 제 7 서열, 제 9 서열, 제 11 서열, 제 13 서열, 제 15 서열, 제 17 서열, 제 19 서열 또는 제 21 서열로 구성되는 군으로부터 택일적으로 선택되는 염기 서열로 이루어지는 것을 특징으로 하는 키토산아제를 코딩하는 핵산 분자.
- 상기 제 5 항 또는 제 6 항의 키토산아제를 코딩하는 핵산 분자를 포함하는 벡터.
- 상기 제 7 항의 벡터를 포함하는 미생물 형질전환체.
- 제 8 항에 있어서, 상기 형질전환체는 바실러스 속 미생물인 것을 특징으로 하는 형질전환체.
- 제 9 항에 있어서, 상기 바실러스 속 미생물은 바실러스 츄린겐시스인 것을 특징으로 하는 형질전환체.
- 다음의 단계를 포함하는 상기 제 4 항의 키토산아제를 개량하는 방법:(a) 상기 제 5 항 또는 제 6 항의 키토산아제를 코딩하는 핵산 분자에 무작위 돌연변이를 발생시켜, 키토산아제를 코딩하는 핵산 분자의 라이브러리를 구축하는 단계;(b) 상기 핵산 분자의 라이브러리를 숙주 세포에 도입하여 형질전환체를 제조하는 단계;(c) 키토산아제를 생산하는 숙주 세포만이 선택적으로 성장하는 0.125%-0.175% 농도의 키토산이 함유된 배지에 상기 형질전환체를 도말하는 단계;(d) 성장된 형질전환체를 선택하는 단계; 및(e) 키토산아제 활성 측정을 통해 개량된 키토산아제를 얻는 단계.
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- 상기 제 4 항의 키토산아제를 이용하여 키토산 올리고당을 제조하는 방법.
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J. Biochem. (Tokyo)., Vol. 131(1), pp. 87-96 (2002. 1. 31.). * |
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