상기 목적을 달성하기 위한 본 발명은 원료의 이물질을 제거하고 초핑하여 소정 크기의 원료가 형성되도록 하는 원료 전처리 단계; 상기 원료에 유기산 수용액을 첨가하여 원료의 유기산 수용액이 형성되도록 하는 유기산 용액 침지 단계; 상기 원료의 유기산 수용액에 특정 단백질 가수분해 효소를 첨가함으로써 단백질을 가수분해하여 콜라겐 펩타이드 수용액이 형성되도록 하는 효소처리 단계; 상기 콜라겐펩타이드 수용액에서 콜라겐이 소정의 농도에 도달하면 상기 콜라겐 펩타이드 수용액으로부터 슬러지를 제거하여 제1차 여과 콜라겐 펩타이드 수용액이 형성되도록 하는 제1차 여과단계; 상기 제1차 여과 콜라겐 펩타이드 수용액의 온도를 소정 온도이상으로 상승되도록 가열하고, 상기 온도를 특정시간 동안 유지함으로써 효소를 실활시킴과 동시에 살균하여 살균된 콜라겐 펩타이드 수용액이 형성되도록 하는 효소실활 및 살균 단계; 및 원심분리기를 이용하여 상기 살균된 콜라겐펩타이드 수용액으로부터 이물질을 제거함으로써 제2차 여과 콜라겐 펩타이드 수용액이 형성되도록 하는 제2차 여과 단계; 를 포함하여 이루어진 식물성 및 마린 콜라겐 펩타이드 제조방법에 관한 것이다.
본 발명에 따른 콜라겐펩타이드의 제조방법을 간단히 설명하면 다음과 같다.
본 발명에서는 콜라겐 펩타이드의 제조에 있어서 과실류, 채소류, 종자류, 견과류, 버섯류, 해조류, 어패류, 어류 등 식물 또는 해산물을 원료로 사용한다.
먼저 상기 식물성 및 해산물 원료에 대하여 효소 작용을 원할히 하기 위해 원료를 분쇄하는 전처리 공정을 수행한다.
상기 전처리를 행한 원료에 유기산 용액을 첨가하여 효소의 최적 활성 조건인 pH 를 가지는 원료수용액을 만드는 유기산 침지 공정과 상기 원료수용액에 단백질 가수분해 효소인 펩신을 첨가하여 처리하는 효소처리 단계를 거친다.
상기 효소처리하여 얻어진 콜라겐 펩타이드 수용액을 제1차 여과하여 이물질(슬러지)을 제거한 후, 수용액의 온도를 높여 효소실활 및 살균공정을 거친후 원심분리기를 사용하여 제2차 여과함으로써 액상 콜라겐 펩타이드를 완성한다.
또한 상기 액상 콜라겐 펩타이드를 건조함으로써 안전성 있는 분말형 콜라겐펩타이드를 얻을 수 있다.
상기 효소처리단계는 바람직하게는 단백질 가수분해효소로서 트립신(Trypsin)을 사용하여 pH 7.5 ~ 8.5, 온도 35 ~ 45℃ 에서 20 ~ 30 분간 효소처리 함으로써 안전성 있는 콜라겐펩타이드를 얻을 수 있다.
또한, 더욱 바람직하게는 단백질 가수분해효소로 파파인(Papain)을 사용하여 pH 5.0 ~ 9.0, 온도 40 ~ 60℃에서 30 ~ 40분간 효소처리함으로써 안전성 있는 우수한 콜라겐펩타이드를 얻을 수 있다.
상기 단백질 가수분해효소는 상기 원료 콜라겐을 저분자화하기 위한 효소로서 각각의 원료의 특성에 알맞은 펩신(Pepsine), 트립신(Trypsin), 파파인(Papain)을 사용하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 효소처리 단계에서 사용하는 효소가 최적활동을 나타낼 수 있는 pH와 온도를 조절한 후 처리하는 것이 무엇보다 바람직하며, 펩신은 pH를 1.0 내지 3.0, 온도는 25 내지 40℃로 조절하고, 트립신은 pH는 7.5 내지 8.5, 온도는 35 내지 45℃로 조절하며, 파파인은 pH는 5.0 내지 9.0, 온도는 40 내지 60℃로 조절하는 것이 효소가 활성화 되기 좋은 조건이다.
이하, 본 발명의 안전성이 우수한 식물성 및 마린콜라겐펩타이드의 제조방법을 각 단계별로 보다 구체적으로 설명한다
1. 원료 전처리단계
원료의 이물질을 제거하고 잘게 쵸핑함으로써 효소의 작용면적을 확대하여 이후의 공정에서 효소의 작용을 용이하게 하는 것이 주 목적이다.
본 발명의 원료물질인 식물과 해산물은 상온 또는 냉장 처리된 것이며, 이물질을 제거한 다음 파쇄기에 넣어 초핑하여 사용된다.
본 발명에서 확인 한 바에 의하면 원료를 파쇄한 정도에 따라 즉, 잘게 파쇄할수록 효소처리 시간이 짧아지는 것으로 나타난다.
2. 유기산용액 침지단계
상기 초핑된 원료에 효소분해가 쉽게 되도록 하는 공정으로서, 무엇보다 독성이 강한 무기산의 사용을 배제하기 위하여 pH 2 ~ 3범위의 유기산 용액을 원료 중량대비 1:2 ~ 1:5 비율로 첨가하여 수용액 상태로 만든 다음 온도를 30 ~ 50℃로 유지한다.
3. 효소처리단계
유기산 수용액에 특정 단백질 가수분해 효소를 사용하여 콜라겐을 체내 흡수가 빠른 1,000 ~ 3,000정도의 분자량 범위로 가수분해하는 공정으로서, 통상적으로 단백질 가수분해 효소를 유기산 수용액의 0.1g 중량 % ~ 1g 중량 %를 사용하여 2시간 ~ 24시간 처리한다. 특히 단백질 가수분해 효소 중 펩신이 우수한 것으로 나타난다.
단백질 가수분해 효소 중 펩신은 인체의 위장에서 활동하는 단백질 가수분해 효소로서 Phenylalanine, leucine 혹은 Glutamic acid의 carboxyl기 측의 peptide 결합을 우선적으로 가수분해하며, pH 1.0 ~ 3.0, 온도 30 ~ 50℃에서 단백질의 가수분해가 가장 잘 일어나므로 상기 콜라겐펩타이드 수용액의 pH를 최적 조건에 맞도록 유기산으로 조절하면서 처리하는 것이 바람직하다.
본 발명의 실시예에 의하여 제조된 식물성 및 마린 콜라겐펩타이드의 농도 결과는 표1과 표2에서 나타난다.
식물성 및 마린 콜라겐 콜라겐펩타이드의 효소첨가량 조건에 따른 농도 변화(Brix , %, 온도 40℃)
구분 |
2시간경과 |
6시간경과 |
10시간경과 |
14시간경과 |
18시간경과 |
22시간경과 |
24시간경과 |
0.1%첨가 |
0.2 |
0.3 |
1.0. |
1.6 |
1.8 |
1.8 |
1.8 |
0.3%첨가 |
0.5 |
0.8 |
1.2 |
1.6 |
1.9 |
2.1 |
2.3 |
0.5%첨가 |
1.5 |
2.0 |
2.3 |
2.5 |
2.7 |
2.8 |
3.0 |
0.7%첨가 |
1.7 |
2.1 |
2.3 |
2.6 |
2.7 |
2.8 |
3.1 |
0.9%첨가 |
2.0 |
2.4 |
2.5 |
2.6 |
2.8 |
2.9 |
3.1 |
1.0%첨가 |
2.1 |
2.5 |
2.6 |
2.6 |
2.8 |
2.9 |
3.1 |
식물성 및 마린 콜라겐펩타이드의 온도 조건에 따른 농도 변화(Brix , %, 펩신 0.5% 사용)
구분 |
2시간경과 |
6시간경과 |
10시간경과 |
14시간경과 |
18시간경과 |
22시간경과 |
24시간경과 |
30℃ |
1.0 |
1.3 |
1.5. |
1.6 |
1.8 |
2.0 |
2.1 |
35℃ |
1.5 |
1.8 |
2.2 |
2.3 |
2.4 |
2.5 |
2.7 |
40℃ |
1.5 |
2.0 |
2.3 |
2.5 |
2.7 |
2.8 |
3.0 |
45℃ |
1.7 |
2.1 |
2.2 |
2.6 |
2.6 |
2.8 |
3.0 |
50℃ |
1.9 |
2.3 |
2.4 |
2.6 |
2.7 |
2.9 |
3.1 |
4. 제1차 여과 단계
수용액의 농도가 목적한 농도에 도달하면 상기 효소처리된 원료 수용액에서 콜라겐이 추출되고 남은 원료 찌꺼기인 슬러지를 채를 사용하여 제거함으로써 콜라겐 수용액만을 걸러내는 과정인 제1차 여과 과정을 거친다. 이때 목표하는 농도는 Brix meter로 측정한다.
5. 효소실활 및 살균단계
상기 제1차 여과 단계가 종료되면 상기 제1차 여과된 수용액의 온도를 85℃ 이상으로 급격히 상승시켜 일정한 시간동안 계속 가열함으로써 효소를 실활시키면서 동시에 살균을 한다.
6. 제2차 여과단계
상기 단계에서 효소를 실활시킨 콜라겐펩타이드 추출물을 원심분리기를 이용하여 이물질을 제거하는 단계이다.
본 제2차 여과 단계을 거침으로써 식물성 및 마린 콜라겐 액상제품은 완성된다.
7. 건조단계
상기 액상제품을 동결건조기, 스프레이 드라이어 등 건조장치를 사용하여 건조시킴으로써 식물성 및 마린 콜라겐펩타이드 분말 제품을 완성한다.
이하에서는 실시예를 통하여 본 발명의 구성 및 작용효과를 보다 구체적으로 설명한다.
그러나 이하의 실시예는 단지 예시를 위한 것이므로 본 발명의 범위를 국한시키는 것으로 이해되어서는 안 될 것이다.
〈실시예1〉
냉장 처리된 원료를 파쇄기로 쵸핑하여 원료 전처리 후, pH 2 ~ 3의 구연산수용액을 상기 원료와 1:3의 비율로 혼합하여 수용액을 제조한다. 상기 원료 수용액의 pH를 3.0으로 조정하면서 원료 대비 0.5g 중량 %의 펩신을 첨가하고 40℃에서 24시간동안 처리한다.
효소처리된 상기 수용액의 농도가 원료대비 5% 수율의 콜라겐펩타이드를 얻게 되면 온도를 85℃로 급격하게 상승시켜 1시간 동안 효소의 실활과 동시에 살균을 함으로써 반응을 종결한다.
살균이 끝난 콜라겐펩타이드 추출물은 원심분리기를 이용하여 이물질을 제거하여 식물성 및 마린 콜라겐을 제조한다.
〈실시예2〉
냉장처리된 원료를 파쇄기로 쵸핑하여 원료 전처리 후, pH 2 ~ 3의 구연산 수용액을 상기 원료와 1:2의 비율로 혼합하여 수용액을 제조한다. 상기 원료 수용액의 pH를 2.0으로 조정하면서 원료 대비 0.3g 중량 %의 펩신을 첨가하고 40℃에서 18시간 동안 처리한다.
효소처리된 상기 수용액의 농도가 원료대비 5% 수율의 콜라겐펩타이드를 얻게 되면 온도를 85℃로 급격하게 상승시켜 40분간 효소의 실활과 동시에 살균을 함으로써 반응을 종결한다.
살균이 끝난 콜라겐펩타이드 추출물은 원심분리기를 이용하여 이물질을 제거하여 식물성 및 마린 콜라겐을 제조한다.
〈실시예3〉
냉장처리된 원료를 파쇄기로 쵸핑하여 원료 전처리 후, pH 2 ~ 3의 구연산 수용액을 상기 원료와 1:5의 비율로 혼합하여 수용액을 제조한다. 상기 원료 수용액의 pH를 2.0으로 조정하면서 원료 대비 0.6g 중량 %의 펩신을 첨가하고 40℃에서 10시간 동안 처리한다.
효소처리된 상기 수용액의 농도가 원료대비 5% 수율의 콜라겐펩타이드를 얻게 되면 온도를 85℃로 급격하게 상승시켜 60분간 효소의 실활과 동시에 살균을 함으로써 반응을 종결한다.
살균이 끝난 콜라겐펩타이드 추출물은 원심분리기를 이용하여 이물질을 제거하여 식물성 및 마린 콜라겐을 제조한다.
〈비교예1〉
냉장처리된 원료를 파쇄기로 쵸핑하여 1.1% 황산 수용액이 담긴 원료처리 탱크에서 60시간동안 처리한 후 상기 원료의 약 10배의 세척수로 12시간동안 세척한다.
상기 산처리 및 세척 과정을 거친 원료물질에 물을 넣고 중탕으로 각각 55℃, 65℃, 80℃의 온도에서 3회에 걸쳐 추출하여 원료 콜라겐을 얻은 후, 이 원료 콜라겐에 효소를 첨가하여 2시간동안 처리하고 펄프여과기를 사용하여 여과한 다음 2시간동안 양이온합과 음이온합을 통과시켜 탈염 정제한다.
이후, 탈염된 제품을 고온살균하여 수용성 콜라겐을 제조한다.
〈비교예2〉
냉장처리된 원료를 파쇄기로 쵸핑하여 1.1% 황산 수용액이 담긴 원료처리 탱크에서 48시간동안 처리한 후 상기 원료의 약 8배의 세척수로 10시간동안 세척한다.
상기 산처리 및 세척 과정을 거친 원료물질에 물을 넣고 중탕으로 각각 55℃, 65℃, 80℃의 온도에서 3회에 걸쳐 추출하여 원료 콜라겐를 얻은 후, 이 원료 콜라겐에 효소를 첨가하여 2시간동안 처리하고 펄프여과기를 사용하여 여과한 다음 2시간동안 양이온합과 음이온합을 통과시켜 탈염 정제한다.
이후, 탈염된 제품을 고온살균하여 수용성 콜라겐을 제조한다.
〈비교예3〉
냉장처리된 원료를 파쇄기로 쵸핑하여 1.1% 황산 수용액이 담긴 원료처리 탱크에서 36시간동안 처리한 후 상기 원료의 약 6배의 세척수로 8시간동안 세척한다.
상기 산처리 및 세척 과정을 거친 원료물질에 물을 넣고 중탕으로 각각 55℃, 65℃, 80℃의 온도에서 3회에 걸쳐 추출하여 원료 콜라겐를 얻은 후, 이 원료 콜라겐에 효소를 첨가하여 2시간동안 처리하고 펄프여과기를 사용하여 여과한 다음 2시간동안 양이온합과 음이온합을 통과시켜 탈염 정제한다.
이후, 탈염된 제품을 고온살균하여 수용성 콜라겐을 제조한다.
〈실험예〉
상기 실시예 1 ~ 3 및 비교예 1 ~ 3에서 식물성 및 마린 콜라겐펩타이드의 제조시 공정별 처리시간을 측정하여 다음의 표3에 나타내고, 제조된 식물성 및 마린 콜라겐펩타이드를 10인의 훈련된 관능검사 요원에 의해 순위법에 의한 관능검사를 실시하여 그 결과를 표4에 나타낸다.
구 분 |
산처리시간 |
세척시간 |
추출시간 |
효소처리시간 |
탈염시간 |
총소요시간 |
실시예1 |
- |
- |
- |
24 |
-- |
24 |
실시예2 |
- |
- |
- |
18 |
- |
18 |
실시예3 |
|
|
|
10 |
- |
10 |
비교예1 |
60 |
12 |
18 |
2 |
2 |
94 |
비교예2 |
48 |
10 |
18 |
2 |
2 |
80 |
비교예3 |
36 |
8 |
18 |
2 |
2 |
66 |
상기 표3의 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 본 발명의 제조방법에 의해 제조된 실시예 1 ~ 3 식물성 및 마린 콜라겐펩타이드는 종래의 동물성 콜라겐의 제조방법에 의해 제조된 비교예 1 ~ 3과 비교하여 산처리, 세척단계, 추출단계를 거치지 않고 바로 효소처리를 행하며, 효소처리 후에 탈염정제 과정 또한 거칠 필요가 없다. 따라서 총소요시간이 4.6배 정도 단축됨을 알 수 있다.
식물성 및 마린 콜라겐펩타이드의 순위법에 의한 관능검사
관능검사요원 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
합계 |
맛 |
실시예1 |
5 |
4 |
4 |
4 |
3 |
3 |
4 |
4 |
3 |
4 |
38 |
|
실시예2 |
5 |
5 |
4 |
3 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
41 |
|
실시예3 |
4 |
4 |
3 |
4 |
4 |
3 |
3 |
4 |
3 |
3 |
35 |
|
비교예1 |
2 |
3 |
2 |
2 |
3 |
2 |
2 |
2 |
1 |
1 |
20 |
|
비교예2 |
2 |
2 |
3 |
3 |
3 |
2 |
2 |
1 |
3 |
3 |
24 |
|
비교예3 |
1 |
2 |
2 |
2 |
1 |
3 |
2 |
1 |
2 |
1 |
17 |
냄새 |
실시예1 |
3 |
3 |
5 |
4 |
4 |
3 |
4 |
4 |
4 |
4 |
38 |
|
실시예2 |
4 |
4 |
5 |
4 |
4 |
4 |
4 |
5 |
3 |
4 |
51 |
|
실시예3 |
4 |
3 |
4 |
3 |
4 |
4 |
3 |
4 |
4 |
4 |
37 |
|
비교예1 |
2 |
2 |
2 |
2 |
1 |
1 |
2 |
1 |
2 |
1 |
16 |
|
비교예2 |
2 |
1 |
1 |
2 |
2 |
2 |
2 |
2 |
2 |
2 |
18 |
|
비교예3 |
1 |
2 |
2 |
1 |
2 |
1 |
1 |
2 |
2 |
1 |
15 |
색상 |
실시예1 |
5 |
4 |
4 |
4 |
5 |
3 |
4 |
3 |
3 |
4 |
39 |
|
실시예2 |
3 |
5 |
5 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
41 |
|
실시예3 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
3 |
4 |
4 |
3 |
3 |
37 |
|
비교예1 |
1 |
2 |
2 |
2 |
2 |
1 |
1 |
2 |
1 |
2 |
16 |
|
비교예2 |
1 |
2 |
2 |
2 |
1 |
2 |
2 |
2 |
2 |
3 |
19 |
|
비교예3 |
2 |
2 |
1 |
2 |
1 |
1 |
2 |
1 |
2 |
1 |
15 |
전반적인 기호도 |
실시예1 |
4 |
4 |
4 |
5 |
5 |
5 |
5 |
4 |
3 |
4 |
43 |
|
실시예2 |
5 |
5 |
4 |
5 |
5 |
4 |
4 |
5 |
4 |
4 |
45 |
|
실시예3 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
4 |
3 |
39 |
|
비교예1 |
1 |
2 |
1 |
1 |
2 |
2 |
1 |
1 |
2 |
2 |
15 |
|
비교예2 |
2 |
2 |
2 |
1 |
2 |
2 |
1 |
2 |
2 |
2 |
18 |
|
비교예3 |
2 |
1 |
2 |
2 |
2 |
1 |
1 |
2 |
2 |
1 |
16 |
(주) 1:아주 나쁘다 2:나쁘다 3:보통이다 4:좋다 5:아주 좋다