KR100426753B1 - 피부 노화 치료 조성물 및 방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 유효량의 ADP, AMP 또는 옥살로아세트산, 또는 이들의 조합물을 화장용 또는 제약상 허용되는 담체와 함께 포함하는, 피부에 국소 적용하기 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 조성물은 세포, 특히 피부 세포의 에너지 수준의 증가 및 피부 노화 증상의 치료 및 억제에 사용될 수 있다.

Description

피부 노화 치료 조성물 및 방법 {Composition and Method for Treatment of Aging Skin}

중년의 사람들이 인식하듯이, 피부는 노화되면서 대부분 바람직하지 않은 많은 변화를 겪는다. 이러한 변화의 특성은 큰 조직 및 세포 수준에 대해 매우 잘 보고되어 있다. 노인의 피부가 젊은 시절보다 더 건조해지고, 많은 주름살이 생기고, 일반적으로 더 늘어지거나 느슨해진다는 것은 육안으로 쉽게 알 수 있다. 조직 수준에 대해서, 상기 큰 변화 중의 많은 변화는, 양이 크게 감소되고 외관상 소모되고 분해되는 콜라겐 생성의 변화에 기인할 수 있다. 흥미로운 사실은, 노화와 관련한 변화가 세포 및 분자 수준에서도 검출될 수 있다는 사실이다. 섬유아세포가 노화될 때, 그의 세포 기능은 쇠퇴하기 시작한다. 특히, 시험관 내 노화 인간 섬유아세포는 배양 세포의 이동을 유도하는 자극에 대한 반응성이 낮고 복제 횟수가 적다는 것이 관찰되었다 (Muggleton-Harris and Aroian, Somat. Cell Genet. 8: 41-50, 1982). 상기 변화는 ATP 활용 및 복구 정상적인 싸이클에서의 노화 관련 결함과 다소 관련이 있는 것으로 제안되었다. 그러나, 복제 감소에 대한 연구는 ATP 복구 경로의 결함과 관련되지 않는다는 것을 나타낸다 (Goldstein et al., J. Cell Phys. 112: 419-424, 1982). 문헌 (Muggleton-Harris and DeFuria (In Vitro Cell. Devel. Biol. 21: 271-276, 1985)은 대사 독성물질로 세포를 처리하면 세포의 ATP 함량 및 전환율의 노화 의존적 변화가 일어나 노화 세포가 ATP 이용능을 일부 상실하게 된다는 것을 보여주었다. 그러나, 이유가 무엇이 되었든간에, 최종 결과는 분명히 필연적인 콜라겐 생성의 불가피한 저하이고, 이것은 노화 피부에서 발견되는 일반적인 피부 위축증을 발생시키고, 이러한 세포 기능의 상실 및 세포 외양의 퇴화는 해결할 수 없을 정도로 서로 얽혀있는 것으로 보인다.

보다 "젊은" 섬유아세포에서 보이는 "기운찬" 에너지의 연장을 기대하면서 세포 노화로의 이러한 불가피한 퇴화를 변화시킬 수 있는 것이 바람직할 수도 있다. 그러나, 현재까지, 피부 세포의 이러한 노화 측면에 대한 치료책이 전무한 실정이다. 본 발명은 노화된 섬유아세포의 ATP 수준을 증강시키는 수단을 제공한다.

발명의 요약

본 발명은 피부에 유효량의 ADP, AMP 또는 옥살로아세트산, 또는 이들의 조합물을 적용하는 것을 포함하는, 노화 세포의 ATP 수준을 증가시키는 방법을 제공한다. 본 발명의 방법은 피부 세포, 특히 섬유아세포의 에너지 증가에 특히 유용하다. 본 발명은 또한 화장용 또는 제약상 허용되는 담체 중의 유효량의 ADP, AMP 또는 옥살로아세트산, 또는 이들의 조합물을 포함하는, 피부에 국소 적용하기 위한 화장 및 제약 조성물을 제공한다. 본원에서 사용되는 용어 "ADP", "AMP" 및 "옥살로아세트산"은 정성적으로 동일한 활성을 보유하는 이들의 안전하고 유효한 유도체를 포함한다.

본 발명은 화장 및 제약 조성물에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 피부 세포 에너지를 증강시키고 노화 피부 세포를 회복시키는 화장 및 제약 조성물에 관한 것이다.

본 발명은 피부 세포에 ADP, AMP 또는 옥살로아세트산(옥살로아세테이트)를 외부로부터 공급하면 처리된 세포에 존재하는 세포 에너지가 증가된다는 발견을 기초로 한다. 특히, ADP, AMP 또는 옥살로아세트산을 배양 중의 정상 섬유아세포에 공급하면, ATP 수준을 상당히 증가시킬 수 있다. 따라서, 피부 노화의 치료 및 예방에 있어서 활성 물질로서의 ADP 및(또는) AMP 및(또는) 옥살로아세트산의 용도를 제공한다.

본 발명의 조성물은 유효량의 ADP, AMP 또는 이들의 조합물을 화장용 또는 제약상 허용되는 담체와 함께 포함한다. "유효량"은 처리된 세포에서 ATP의 양을 비처리 세포에 비해 약 10% 이상, 바람직하게는 약 20% 이상, 보다 바람직하게는 약 30% 이상, 가장 바람직하게는 약 40% 이상 증가시킬 수 있는 활성 물질의 양을 의미한다. 일반적인 조성물에서, 활성 물질의 농도는 전체 조성물의 약 0.001 내지 10 중량%, 바람직하게는 약 0.01 내지 5 중량%일 것이고, 농도는 조성물의 사용 횟수에 따라 상이할 수 있으며, 사용 횟수가 많으면 보다 낮은 농도가 사용될 것이다.

국소 적용을 위해, 활성 성분(들)은 다양한 화장용 및(또는) 제약상 허용되는 담체와 함께 제제화될 수 있다. 용어 "화장용 또는 제약상 허용되는 담체"는 활성 성분을 목적하는 표적에 전달하고 인간 또는 기타 수용체에 해를 끼치지 않는, 화장용 또는 제약상 용도를 위한 비히클을 의미한다. 본원에서 사용된 "제약상" 또는 "화장용"은 인간 및 동물용 약품 또는 화장품을 모두 포함하는 것으로 이해될 것이다. 유용한 담체는 예를 들어 물, 아세톤, 에탄올, 에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 부탄-1,3-디올, 이소프로필 미리스테이트, 이소프로필 팔미테이트 또는 광유를 포함한다. 화장용 및 제약 조성물의 제제화를 위한 방법 및 성분은 잘 알려져 있으며, 예를 들어 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, Eighteenth Edition, A.R. Gennaro, Ed., Mack Publishing Co. Easton Pennsylvania, 1990]에 기재된 바를 참조할 수 있다. 담체는 전달 방식에 적합한 형태, 예를 들어 용액, 콜로이드성 분산액, 에멀젼 (수중유 또는 유중수), 현탁액, 크림, 로션, 겔, 포움, 무스, 스프레이 등일 수 있다.

본 발명의 활성 물질은 세포의 노화 증상의 발병을 지연시키거나 역전시키기 위해서 피부 세포의 에너지 수준을 대체적으로 증가시키기 위해 단독으로 사용될 수 있다. 본원 명세서 및 청구의 범위에서 사용된 "노화"는 광 노화, 즉 자외선에 대한 과도한 노출로 인해 발생하는 조기 노화와, 연령 증가에 따른 노화, 즉 장기간의 일광 노출이 없음에도 불구하고 시간 경과에 따라 자연 발생하는 통상의 피부 노화를 모두 의미한다. 본 발명의 조성물은 정상 세포 및 노화 피부 모두에서 섬유아세포 및 케라티노사이트의 에너지 수준을 증강시키는 데 특히 적합하다. 섬유아세포의 에너지 수준의 증가는 노화된 섬유아세포의 특징인 콜라겐 및 엘라스틴 생성의 감소를 지연시키거나 역전시킬 것으로 예상될 수 있다. 이와 유사하게, 케라티노사이트의 에너지 수준의 증가는 노화 피부에서 관찰되는 표피의 박화를 지연시킬 것으로 예상할 수 있다. 본 발명의 활성 물질의 용도는 피부 세포에 한정되지 않고, 예를 들어 노화 근육 또는 다른 결합 조직 세포의 에너지 증가에 유용할 것으로 기대할 수 있다.

노화 피부의 치료 또는 정상의 비노화된 피부의 노화 예방은 본 발명의 조성물을 일정 기간에 걸쳐 규칙적으로 적용함으로써 달성하는 것이 바람직하다. 본 발명의 조성물의 이점을 얻는 바람직한 방법은 광노화 또는 자연 노화로부터 발생할 수 있는 피부 손상의 발생을 예방 또는 지연시키기 위해 또는 이미 발생한 손상의 악화를 예방하거나 역전시키기 위해, 상기 혼합물을 함유하는 안전한 유효량의 조성물을 장기간에 걸쳐 국소 적용하는 것이다. 예를 들어, 노출된 피부 1 cm²당 0.1 ㎍ 내지 2 mg의 양의 조성물의 국소 적용은 주당 약 1회 내지 1일당 약 4 또는 5회, 바람직하게는 주당 약 3회 내지 1일당 약 3회, 가장 바람직하게는 1일당 약 1 또는 2회 수행할 수 있다. "장기간에 걸친" 적용은 국소 적용 기간이 사용자의 일생에 걸쳐, 바람직하게는 약 1달 이상의 기간, 보다 바람직하게는 약 3개월 내지 약 20년 동안, 보다 바람직하게는 약 6개월 내지 약 10년 동안, 보다 바람직하게는 약 1년 내지 약 5년 동안이라는 것을 의미하고, 따라서 광노화 및 시간 경과에 따른 자연 노화의 외부 증상을 치료 또는 억제할 수 있다. 그러나, 본 발명의 조성물은 보다 적은 투여 횟수로, 예를 들어 높은 수준의 활성 성분을 사용한 일종의 "광천 치료"로서 1달에 1회 또는 2회 사용될 수 있다.

조성물이 완화시킬 수 있는 노화의 외부 증상은 미세하고 깊은 선 및 주름, 피부 위축증, 피부 두께의 감소, 피부 착색의 변화 및 모발 성장의 감소를 포함하고, 이에 제한되지 않는다.

또한, 일반적인 항노화제로서의 기능에서, 본 발명의 활성물질은 다른 항노화제 또는 피부 개선제와 조합될 수 있다. 이를 위해, 본 발명의 활성 물질은 예를 들어 알파- 또는 베타-히드록시산, 예를 들어 락트산, 글리콜산, 시트르산, 알파-히드록시옥탄산, 알파-히드록시데칸산, 알파-히드록시라우르산, 타르타르산, 글루코우론산, 갈락토우론산, 알파-히드록시부티르산, 알파-히드록시이소부티르산, 말산, 만델산, 피루브산 및 타르트론산, 및 살리실산; 레티노이드, 예를 들어 레티놀, 레티닐 아세테이트, 레티닐 팔미테이트, 레티닐 부티레이트, 레티닐 올레에이트, 레티닐 리놀레에이트 및 레틴산; 및 DHEA 및 이들의 유도체 중의 1종 이상과 조합될 수 있다.

담체 및 활성 물질 이외에, 제제는 담체 및(또는) 제제의 사용 용도에 따라 선택될 수 있는 다른 성분도 포함할 수 있다. 추가의 성분으로는 수용성 착색제 (예를 들어 FDC Blue #1), 지용성 착색제 (예를 들어 DC Green #6), 수용성 선스크린 (예를 들어 Eusolex 232), 지용성 선스크린 (예를 들어 옥틸 메톡시신나메이트), 입자상 선스크린 (예를 들어 산화아연), 항산화제 (예를 들어 BHT), 킬레이팅제 (예를 들어 디소듐 EDTA), 에멀젼 안정화제 (예를 들어 카르보머), 보존제 (예를 들어 메틸 파라벤), 방향제 (예를 들어 피넨), 풍미제 (예를 들어 소르비톨), 습윤제 (예를 들어 글리세린), 방수제 (예를 들어 PVP/에이코센 공중합체), 수용성 막 형성제 (예를 들어 히드록시프로필 메틸셀룰로스), 지용성 막 형성제 (예를 들어 수소화 C-9 탄소), 양이온성 중합체 (예를 들어폴리쿼터늄 10), 음이온성 중합체 (예를 들어 잔탄 검), 비타민 (예를 들어 토코페롤) 등을 들 수 있고, 이에 제한되지 않는다. 분명하게 알 수 있듯이, 본 발명의 조성물은 ADP 및(또는) AMP 및(또는) 옥살로아세트산이 유일한 활성물질이거나 다른 활성물질과 조합된 치료용 제품일 수 있다. 그러나, 본 발명의 조성물은 화장품, 예를 들어 립스틱, 파운데이션, 콘실러, 브론저, 블러쉬, 아이섀도우 등일 수도 있다.

본 발명은 하기 비제한적 시시예에 의해 보다 더 상세하게 예시된다.

실시예 1

본 실시예는 ADP 또는 AMP를 사용한 세포 처리시에 생성되는 세포 에너지 수준의 증가를 입증한다.

정상적인 인간 피부 섬유아세포를 플라스크에서 전면생장시켜 3개의 상이한 처리군으로 나누었다. 세포가 32회까지 군집 분열한 시점에서 시험을 수행하였다. 0.01 내지 1.0 mM의 각각 상이한 5가지 농도의 ADP (Sigma), AMP (Yamasa Shoyu Co., Inc.) 및 크레아틴 모노포스페이트 (Sigma)를 사용하여 처리하였다. 생장 배지는 대조구로서 사용하였다.

세포를 2시간 동안 처리한 후, 트립신으로 처리하고, 세척하고 6 x 10⁶세포/ml로 재현탁하였다. 세포 내에 함유된 ATP를 방출시키는 방출제인 나트륨 라우릴 술페이트로 세포를 처리하였다. 이어서, 방출액을 루시페린 및 루시퍼라제를 함유하는 용액에 첨가하였다. 루시퍼라제는 루시페린을 옥시루시페린으로 전환시키기 위해 유리 ATP에 의해 제공되는 에너지를 이용한다. 상기 반응에서 방출되는 광을 분광광도계로 판독하였고, 생성된 광의 양은 이용가능한 ATP의 양에 비례하였다. ATP 수준은 ATP 표준 곡선으로부터 계산한 후, 세포 하나를 기준으로 하여 표준화하였다. 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.

시료	ATP (pg/세포)	증가율(%)
배지 대조군	14.7
ADP	0.01 mM0.05 mM0.10 mM0.50 mM1.00 mM	14.017.718.723.020.7	-520275641
AMP	0.01 mM0.05 mM0.10 mM0.50 mM1.00 mM	14.719.019.020.019.3	029293631
크레아틴	0.01 mM0.05 mM0.10 mM0.50 mM1.00 mM	16.713.314.712.715.0	14-90-142

상기 결과는 ADP가 투여량 의존적 방식으로 섬유아세포의 ATP 수준을 증가시켰음을 나타낸다. AMP도 ADP와 동일한 수준 및 투여량 의존 방식이 아니지만 처리된 세포의 ATP 수준을 증가시키는 것으로 밝혀졌다. 그러나, 크레아틴 모노포스페이트는 시험된 어느 투여량에서도 ATP 수준을 유의하게 증가시키지 않았다. ADP에 의해 달성된 최대 증가율은 0.5 mM에서 +56%인 반면, AMP에 의해 달성된 최대 증가는 0.5 mM에서 +36%이었다.

실시예 2

본 실시예는 옥살로아세트산을 사용한 세포 처리시에 생성되는 세포 에너지 수준의 증가를 입증한다.

정상적인 인간 피부 섬유아세포를 플라스크에서 전면생장 전까지 생장시켜 3개의 시료에 대해 0.05 mM, 0.50 mM 및 1.0 mM 농도의 옥살로아세트산을 사용하여 2시간 동안 처리하였다. 이어서, 세포를 트립신으로 처리하고, 세척하여 6 x 10⁶세포/ml로 재현탁하였다. 처리된 세포를 4회 계대배양하였다. 세포를 상기 실시예 1에서 설명한 바와 같이 처리하여 다양한 투여량에서 ATP의 양을 계산하여 분석하였다. 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.

시료	ATP (pg/세포)	증가율(%)
배지 대조군	1.67
OxAc	0.05 mM0.50 mM1.0 mM	1.922.582.17	155530

상기 데이타는 옥살로아세트산이 모든 농도에서 처리된 세포의 ATP 수준을 증가시켰음을 나타내고, 최대 증가율 55%는 0.1 mM의 투여량에서 관찰되었다.

Claims (31)

1. 삭제
2. 삭제
3. 삭제
4. 삭제
5. 삭제
6. 삭제
7. 삭제
8. 삭제
9. 삭제
10. 삭제
11. 삭제
12. 삭제
13. 삭제
14. 삭제
15. 삭제
16. 삭제
17. 삭제
18. 삭제
19. 화장용 담체와 함께 ADP, AMP 및 옥살로아세트산으로 구성되는 군으로부터만 선택되는 ATP 증가제 또는 이들의 조합물 유효량을 포함하는, 피부에 국소 적용하기 위한 화장 조성물.
20. 제약상 허용되는 담체와 함께 ADP, AMP 및 옥살로아세트산으로 구성되는 군으로부터만 선택되는 ATP 증가제 또는 이들의 조합물 유효량을 포함하는, 피부 노화 증상의 치료 또는 예방을 위해 피부에 적용하기 위한 제약 조성물.
21. 제약상 허용되는 담체와 함께 ADP, AMP 및 옥살로아세트산으로 구성되는 군으로부터만 선택되는 ATP 증가제 또는 이들의 조합물 유효량을 포함하는, 세포의 에너지 수준의 증가를 위해 피부에 적용하기 위한 조성물.
22. 제19항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 약 0.001 내지 약 10 중량%의 ADP, AMP, 옥살로아세트산 또는 이들의 조합물을 포함하는 조성물.
23. 제19항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 약 0.1 내지 약 5 중량%의 ADP, AMP, 옥살로아세트산 또는 이들의 조합물을 포함하는 조성물.
24. 제19항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, ADP를 포함하는 조성물.
25. 제19항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, AMP를 포함하는 조성물.
26. 제19항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 옥살로아세트산을 포함하는 조성물.
27. 제21항에 있어서, 세포가 피부 세포인 조성물.
28. 제27항에 있어서, 세포가 섬유아세포인 조성물.
29. 제20항에 있어서, 증상이 피부 위축증인 조성물.
30. 제20항에 있어서, 증상이 피부 두께의 소실인 조성물.
31. 제20항에 있어서, 증상이 주름인 조성물.