KR100390639B1

KR100390639B1 - 대나무 잎 추출물을 유효성분으로 첨가한 식품조성물의 제조방법

Info

Publication number: KR100390639B1
Application number: KR10-2000-0001400A
Authority: KR
Inventors: 김미정
Original assignee: 김미정
Priority date: 2000-01-12
Filing date: 2000-01-12
Publication date: 2003-07-07
Also published as: KR20010069130A

Abstract

본 발명은 대나무잎 추출물의 제조방법 및 용도에 관한 것이다.

대나무잎은 군락지에서 쉽게 채취가 가능한 다년생 식물로서 본 발명은 대나무잎(이대) 성분의 극성차를 이용하여 유기용매로 추출한 이대 성분을 식품 또는 약품에 첨가하여 항균활성 또는 생리활성을 높이고자 한다.

대나무 잎은 차고 단맛이 나며 독성이 없기 때문에 식품의 포장이나 보존 수단 또는 번열, 소갈과 악창등을 낫게 하여 민간요법으로 많이 사용되어 왔으나 학문적인 연구가 부족하였다. 본 발명은 대나무잎의 추출물을 이용하여 식품의 보존제로서 활용을 연구한 결과 김치 및 발효식품류에 탁월한 항균효과가 있을 뿐만 아니라 생리활성효과를 나타내므로 천연물을 이용하여 식품보존제로 활용 및 부가가치를 높이는 데 기여할 수 있다.

Description

대나무 잎 추출물을 유효성분으로 첨가한 식품조성물의 제조방법 {Manufacturing Method for Food Composition Containing Extracts of Bamboo Leaves}

본 발명은 대나무잎 추출물을 유효성분으로 첨가하는 식품조성물의 제조방법에 관한 것이다.

전통적으로 대나무잎의 성질은 차고 맛이 달며 독성이 없기 때문에 식품의 포장이나 보존 수단 또는 번열, 소갈과 악창등을 낫게 하여 민간요법으로 많이 사용되어 왔으나 학문적인 연구가 부족하였다. 또한 천연물에 존재하는 항균활성물질을 식품의 보존에 이용하고자 지근까지 여러 생약제 성분, 향신료와 그 정유성분, 마늘, 파, 쑥 추출물에서 유래된 성분, 미생물이 생성하는 항균활성 물질 등을 중심으로 연구가 계속되어 왔다. 이러한 천연 항균활성물질의 경우 대부분 활성이 낮고 추출된 물질은 식품의 맛과 색택에 많은 영향을 미치므로 아직까지 실용화되지 못하고 있는 실정이었다.

대나무잎에는 풍부하고 안정된 엽록소외에 철분, 칼슘, 비타민(B, C, K), 단백질 그리고 다당체 밤포린을 함유하고 있으므로 인체의 세포막을 강화시키고 면역력을 향상시키는 작용을 한다. 대나무잎에 함유되어 있는 일반적인 성분은 다음과 같다.

표 1. 대나무잎의 일반성분 ( 단위: 함량 %)

성 분	함 량
수 분	43.4
조 단 백	10.8
조 지 방	3.1
조미네랄	4.8
가용성 무질소물	37.9
비타민 C(100g 중)	1.278㎎

본 발명은 우리의 전통 발효식품인 김치의 보존성을 증대하고 맛과 향미기간을 연장시키기 위하여 연구하던 중 옛날부터 일반가정에서 김치 담금시 사용해 왔던 대나무잎(이대,Pseudosasa japonicaMakino) 추출물을 대상으로 이들을 여러 용매별로 분획하여 발효에 관여하는 젖산균에 대해 활성을 조사한 결과 이들 추출물의 항균활성이 높고 식품에 첨가시 냄새나 색택에 영향을 주지 않을 뿐만아니라 김치의 숙성을 조절하고 보존성을 연장하였다.

본 발명과 관련된 일본공개특허 88-109753호 대의 엽분의 제조방법은 대의 잎에 함유된 효소를 잃지 않고 동결건조하여 대 잎가루를 제조하는 방법이고, 일본공개특허 97-94081호는 대를 이용한 차의 제조방법으로 크로로필을 수용성 또는 올리고당으로 제조하는 방법이며, 일본특허공개 93-308845호는 대잎을 발효시켜 사료로 사용하는 방법에 관한 것으로 본 발명과는 내용이 다른 것이다.

본 발명은 우리나라 전역에서 자생하는 대나무잎(이대)의 극성차를 이용하여 유기용매로 추출물을 얻어 감압농축한 후 얻은 대나무잎 추출물을 식품 또는 약품의 항균효과 및 생리활성효과에 사용하는 것을 목적으로 한다.

도 1은 본 발명의 대나무잎 추출물의 제조공정도이다.

도 2는 본 발명의 대나무잎 추출물을 동치미에 첨가시 13일 경과후 관능적인 효과를 나타낸 것이다.

도 3은 본 발명의 대나무잎 추출물을 동치미에 첨가시 23일 경과후 관능적인 효과를 나타낸 것이다.

본 발명은 대나무잎을 깨끗이 세척후 도 1과 같이 에탄올과 석유에테르를 이용하여 순차적으로 추출한 후 석유에테르 분획물과 수용액층을 얻고, 수용액층은 다시 디에틸에테르로 추출하여 디에틸에테르 분획물과 수용액층을 얻고, 수용액층는 초산에틸로 추출하여 초산에틸 분획물과 수용액층을 얻고, 수용액층은 n-부탄올로 추출하여 n-부탄올 분획물과 수용액층을 얻는다.

이하 실시예 및 시험예로 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다.

＜실시예＞

[제 1단계]

대나무잎 1kg을 수세하여 0.5∼1cm 크기로 세절한 후 70 % 에탄올 용액 5리터에 넣고 60∼70℃에서 1∼2시간 동안 추출 및 여과하여 잔사는 제거하고 에탄올과 대나무잎 성분이 함유된 여액 4.5리터를 감압농축하여 에탄올이 제거된 에탄올 추출물 1.35리터를 얻었다.

[제 2단계]

에탄올 추출물을 물 0.5리터에 용해한 후 100 % 농도의 석유에테르 1리터를 가하여 혼합하고 석유에테르층과 수층을 분리한 후 석유에테르층이 모두 증발할 때 까지 감압농축하여 석유에테르가 제거된 석유에테르 추출물 0.2리터를 얻었고 수층 1리터를 얻었다.

[제 3단계]

수층을 100 % 농도의 디에틸에테르 1리터를 가하여 혼합하고 디에틸에테르층과 수층을 분리한 후 디에틸에테르층이 모두 증발할 때 까지 감압농축하여 디에틸에테르가 제거된 디에틸에테르 추출물 0.18리터와 수층 0.7리터를 얻었다.

[제 4단계]

수층을 100 % 농도의 에틸아세테이트 1리터를 가하여 혼합하고 에틸아세테이트층과 수층을 분리한 후 에틸아세테이트층이 모두 증발할 때 까지 감압농축하여 에틸아세테이트가 제거된 에틸아세테이트 추출물 0.15리터와 수층 0.6리터를 얻었다.

[제 5단계]

수층을 물 0.5리터와 100 % 농도의 n-부탄올 1리터를 가하여 혼합하여 n-부탄올층과 수층으로 분리한 후 n-부탄올층이 모두 증발할 때 까지 감압농축하여 n-부탄올이 제거된 n-부탄올 추출물 0.1리터와 수층 1리터를 얻었다.

[제 6단계]

수층을 70∼80℃에서 1∼2시간 동안 감압농축하여 수층 0.2리터를 얻었다.

＜시험예＞

상기 실시예와 같이 용매별로 추출하여 얻은 에탄올 분획물, 석유에테르 분획물, 디에틸에테르 분획물, 초산에틸 분획물, n-부탄올 분획물 및 수용성 분획물을 대상으로 식품에 적용시 어떠한 효과가 있는지를 알아보기 위하여 전자공여능(E lectron donating abilities), 아질산염 제거능력, 항보체 활성 및 항균능력에 대하여 시험한 결과를 다음의 표 1 내지 4에 나타냈다.

[시험 1: 전자공여능 효과시험]

추출물 획분별 각 시료 100㎕에 2×10^-4M의 DPPH(α,α'-diphenyl-β-picryl -hydrazyl) 용액 2.9㎖ 씩을 가한 후 보텍스믹서로 10초간 진탕하여 10분간 분광광도계를 사용하여 250nm에서 흡광도를 측정하였다. 전자공여능(Electron donating abilities)의 효과는 10초간 진탕후 흡광도값을 기준하여 10분동안 경시적 반응값을 백분율로 하여 아래의 표 1에 나타내었다.

표 1. 대나무잎 추출물 분획별 전자공여능

분 획	전 자 공 여 능(%)
분 획	0.5분	5분	10분
70% EtOH 추출물	54.3±7.2	149.7±10.3	195.0±12.5
석유에테르 추출물	23.4±3.5	60.3±8.1	74.2±7.0
디에틸에테르추출물	26.6±4.0	61.6±7.4	78.0±6.3
에틸아세테이트 추출물	28.1±4.2	77.0±6.5	95.1±7.9
n-부탄올 추출물	90.2±9.1	242.0±15.7	286.4±18.5
물 층	34.0±5.3	83.0±7.1	97.6±8.4

* 각 수치는 3회 측정하여 평균치를 기재한 것이다.

[시험 2: 아질산염 제거능력시험]

아질산염 제거작용(nitrate-scavenging ability)은 1mM NaNO2 용액 1ml에 추출물 분획별 각 시료 50㎕를 첨가하고 여기에 0.1N-HCl(pH 1.2)을 사용하여 반응액의 부피를 10㎖로 하고 37℃ 수욕조에서 1시간 동안 반응시킨 후 반응용액 각 1ml를 취하고 여기에 2% 초산용액 5㎖를 첨가한 다음 그리스(Griess) 시약(30% 초산으로 각각 조제한 1% 설파닐린산과 1% α-나프틸아민을 1 : 1(v/v)로 혼합한 것) 0.4㎖를 가하여 잘 혼합한 다음 실온에서 15분간 방치시킨 후 520nm에서 흡광도를 측정하여 잔존하는 아질산량을 구하여 아래의 표 2에 나타내었다.

표 2. 대나무잎 추출물의 아질산염 제거능력

분 획	아질산염 제거능력(%)
분 획	pH 1.2	pH 4.2
70% EtOH 추출물	29.7±1.8	3.9±0.9
석유에테르 추출물	29.5±2.0	9.8±0.5
디에틸에테르추출물	37.3±3.4	7.9±0.4
에틸아세테이트 추출물	40.4±3.2	6.6±0.6
n-부탄올 추출물	48.5±3.6	12.9±1.3
물 층	43.7±2.8	8.8±1.1

* 각 수치는 3회 평균치를 나타낸 것이다.

[시험 3: 항보체 활성시험]

항보체 활성(anti-complementary activity)은 건강한 성인으로부터 얻은 NHS (normal human serum), 획분별 추출물 50㎕ 및 GVB⁺⁺(gelatin veronal-buffered sal ine, pH 7.4)를 충분히 혼합한 후 이 혼합액을 37℃에서 30분간 방치한 다음 GV B⁺⁺350㎖를 첨가하였다. 여기에 EA cells(sensitized sheep erythrocytes)을 부가하면서 10-160배로 희석하였다. 이것을 37℃에서 1시간 동안 방치한 다음 PBS(phosphat e-buffered saline, pH 7.2) 2.5㎖를 가하여 4℃에서 원심분리하였다. 원심분리된 상징액을 412nm에서 흡광도를 측정 후 계산하여 아래의 표 3에 나타내었다.

표 3. 대나무잎 추출물의 항보체 활성

분 획	TCH₅₀억제율(%)
70% EtOH 추출물	56.2±3.7
석유에테르 추출물	35.4±1.9
디에틸에테르추출물	35.8±1.6
에틸아세테이트 추출물	37.6±2.1
n-부탄올 추출물	56.3±4.0
물 층	33.7±2.8

* 각 수치는 3회 평균치를 나타낸 것이다.

[시험예 4: 항균능력시험]

항균능력시험은 균주들을 액체배지 100㎖에 1백금이를 접종하여 적정온도에서 18-24시간 배양하여 활성화시킨 후, 그 액을 상부 아가(0.75% agar)에 200㎕ 접종(10⁷-10⁹CFU/㎖)하여 플레이트 위에 덮고 각 추출물을 멸균된 디스크에 50㎕씩 흡수, 건조시켜 플레이트 표면위에 올려놓은 다음 0.85% 식염수(75㎕)로 확산시켰다. 그리고 24시간 배양하여 디스크 주위에 생성된 저해환의 직경(mm)으로 항균력을 측정하여 아래의 표 4에 그 결과를 나타내었다.

표 4. 대나무잎 추출물의 항균능력

평판상 억제영역(nm)¹균주	70%EtOH	석유에테르	디에틸에테르	에틸에테르	n-부탄올	물층
Enterobacter aerogenesATCC 13048	12	-	-	-	-	-
Vibrio parahaemolyticusATCC 17802	-	-	-	-	-	-
Clostridium perfringenesATCC 13124	8.5	14	-	-	-	-
Bacillus subtilisATCC 6633	10	10	-	-	-	-
Staphylococcus aureusATCC 25923	10	10	9	-	8.5	8.5
Pseudomonas aeruginosaATCC 27853	-	-	-	-	10.5	-
E.coliATCC 25922	14	-²	-	-	-	-
Salmonella typhimuriumATCC 14028	-	-	-	9	-	-

상기 균주를 대상으로 24시간 배양한 결과(¹Diameter,²No inhibition zone )를 나타냈다.

＜적용예＞

대나무잎 추출물중 수층분획을 동치미 김치에 대한 효과를 파악하기 위하여 시중에서 구입한 무우 2.8kg(100중량부), 파 28g(1중량부), 마늘 14g(0.5중량부), 생강 8.4g(0.3중량부), 소금 3중량부 및 물 4.2리터(150중량부)를 넣고 동치미를 제조하여 10℃에 발효시켜, 대나무잎 추출물을 전체 동치미 100중량%에 대하여 무첨가군, 1%, 3%, 5% 및 7%로 첨가하여 10℃에서 75일간 발효시켜 경시적으로 pH와 산도, 고형분 함량, 탁도, 미생물수 및 관능에 미치는 영향을 파악하였다.

대나무잎을 첨가한 3%, 5% 및 7% 첨가군에서 유의적으로 pH, 산도, 고형분, 탁도 및 미생물수가 전체 발효기간 중에 낮게 나타났다. 또한 대나무잎 추출물을 무첨가군과 1%, 3%, 5% 및 7%를 첨가하여 미각이 잘 발달된 성인 남녀 20명을 대상으로 관능검사를 실시한 결과 외관, 익는 정도(Ripeness), 신맛, 향미, 조직감 및 전체적인 맛 등을 평가한 결과 대나무잎 추출물을 첨가한 경우 도 2 및 도 3에 나타난 바와 같이 대나무잎 추출물 1%와 3%에서 유의하게 우수하였다(0%:◆, 1%:■, 3%:▲, 5%:×, 7%:＊).

본 발명의 대나무잎 추출물은 항균활성이 있으므로 김치 또는 발효식품류의 저장성과 풍미를 향상시키고 전자공여능, 항보체 활성, 아질산염 제거능력 등의 생리활성효과가 있으므로 건강식품 또는 약품으로 이용될 수 있다. 또한 대나무잎은 각종 영양소, 비타민 C 그리고 특유의 천연 향기와 색소를 함유하고 있으므로 가공식품의 소재로 사용할 수 있을 것으로 기대된다.

Claims

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대나무 잎을 이용한 식품 조성물의 제조 방법에 있어서,

대나무잎을 수세 및 세절한 후 에탄올 용액에 넣고 추출 및 여과하여 잔사는 제거하고, 에탄올과 대나무잎 성분이 함유된 여액을 감압농축하여 에탄올이 제거된 에탄올 추출물을 얻는 단계와,

에탄올 추출물을 물에 용해한 후 석유에테르로 추출하여 석유에테르층과 수층으로 분리하는 단계와,

전기 단계에서 얻은 수층을 디에틸에테르로 추출하여 디에틸에테르층과 수층으로 분리하는 단계, 및

전기 단계에서 얻은 수층을 에틸아세테이트로 추출하여 에틸아세테이트층과 수층으로 분리한 후 에틸아세테이트층은 감압농축하여 에틸아세테이트가 제거된 대나무 잎 추출물을 유효성분으로 첨가함을 특징으로 하는 식품조성물의 제조방법
대나무 잎을 이용한 식품 조성물의 제조 방법에 있어서,

대나무잎을 수세 및 세절한 후 에탄올 용액에 넣고 추출 및 여과하여 잔사는 제거하고, 에탄올과 대나무잎 성분이 함유된 여액을 감압농축하여 에탄올이 제거된 에탄올 추출물을 얻는 단계와,

에탄올 추출물을 물에 용해한 후 석유에테르로 추출하여 석유에테르층과 수층으로 분리하는 단계와,

전기 단계에서 얻은 수층을 디에틸에테르로 추출하여 디에틸에테르층과 수층으로 분리하는 단계와,

전기 단계에서 얻은 수층을 에틸아세테이트로 추출하여 에틸아세테이트층과 수층으로 분리하는 단계, 및

전기 단계에서 얻은 수층을 물과 n-부탄올을 가하여 추출하여 n-부탄올층과 수층으로 분리한 후 n-부탄올층은 감압농축하여 n-부탄올층이 제거된 대나무 잎 추출물을 유효성분으로 첨가함을 특징으로 하는 식품조성물의 제조방법
대나무 잎을 이용한 식품 조성물의 제조 방법에 있어서,

대나무잎을 수세 및 세절한 후 에탄올 용액에 넣고 추출 및 여과하여 잔사는 제거하고 에탄올과 대나무잎 성분이 함유된 여액을 감압농축하여 에탄올이 제거된 에탄올 추출물을 얻는 단계와,

에탄올 추출물을 물에 용해한 후 석유에테르로 추출하여 석유에테르층과 수층으로 분리하는 단계와,

전기 단계에서 얻은 수층을 디에틸에테르로 추출하여 디에틸에테르층과 수층으로 분리하는 단계와,

전기 단계에서 얻은 수층을 에틸아세테이트로 추출하여 에틸아세테이트층과 수층으로 분리하는 단계와,

전기 단계에서 얻은 수층에 물과 n-부탄올을 가하여 추출하여 n-부탄올층과 수층으로 분리하는 단계 및

전기 단계에서 얻은 수층을 70∼80℃에서 1∼2시간 동안 감압농축하여 얻은 대나무 잎 추출물을 유효성분으로 첨가함을 특징으로 하는 식품조성물의 제조방법