KR100367379B1

KR100367379B1 - 항바이러스제로유용한마크로시클릭디플루오로스타톤유도체

Info

Publication number: KR100367379B1
Application number: KR1019960704227A
Authority: KR
Inventors: 로버트 에이. 파르; 브렌트 엘. 포드로거
Original assignee: 메렐 파마슈티칼스 인크.
Priority date: 1994-02-04
Filing date: 1994-11-28
Publication date: 2003-04-11
Also published as: EP0742791B1; DE69426574T2; NO963254D0; HU9602158D0; CN1142830A; JP3574455B2; AU1262295A; PT742791E; WO1995021186A1; DE69426574D1; NZ277410A; IL112514A0; NO963254L; CA2182476C; JPH09508417A; FI963073A; ES2155515T3; EP0742791A1; GR3035623T3; DK0742791T3

Abstract

본 발명은 항바이러스제로 유용한 신규한 마크로시클릭 디플루오로스타톤 유도체를 제공한다. 더 구체적으로, 이 신규 화합물은 사람 면역 결핍증 바이러스(HIV) 감염의 예방 또는 치료, 및 연속적 발병 증상, 예를 들어 HIV 바이러스 감염으로 포유류에서 후천성 면역 결핍증(AIDS)의 치료에 있어서, 바이러스 복제에 요구되는 레트로바이러스 프로테아제의 억제제, 특히 HIV-1 및 HIV-2바이러스 프로테아제의 억제제로 유용하다.

Description

항바이러스제로 유용한 마크로시클릭 디플루오로스타톤 유도체

발명의 배경

사람 및 동물에서 바이러스 감염 치료 및 치유를 진전시키기 위한 많은 연구들이 현재 진행 중이다. 특히 사람에서 AIDS 및 ARC의 발병이 놀라운 속도로 증가하고 있다. AIDS에 걸린 사람의 5년 생존률의 가망이 사라지고, 면역계가 바이러스 감염에 의해 심하게 훼손된 AIDS 환자는 카포시(Kaposi) 육종 및 뉴모시스티스 카르니니(Pneumocystis Carninii) 페렴을 포함한 수많은 감염으로 고생한다. AIDS에 관한 치료법은 알려져있지 않고,현재의 치료도 대개 효능에 관한 충분한 근거가 없으며, 많은 부작용을 갖고 있다. 이 질병에 대한 공포는 이 질병을 갖거나 갖는 것으로 의심되는 사람들에 대해 사회 추방 및 차별의 결과를 초래한다.

본 발명은 항바이러스제로 유용한 화합물에 관한 것이다. 더 구체적으로 본 발명은 복제에 요구되는 레트로바이러스 프로테아제(예를 들어 HIV-1 및 HIV-2 바이러스 프로테아제)의 억제제로서 유용한 마크로시클릭 디플루오로스타톤 유도체, 사람 면역 결핍성 바이러스(HIV) 감염의 예방 또는 치료, 및 결과적인 병리적 증상, 예를 들어 사람 면역 결핍성 바이러스(HIV)로 감염될 수 있는 포유류의 후천성 면역 결핍증(AIDS)의 치료에 관한 것이다.

발명의 요약

본 발명은 하기 일반식 I 의 화합물 및 그의 입체 이성질체, 수화물 및 제약적으로 허용가능한 염에 관한 것이다.

식 중,

P₂은 C_1-6알킬, 시클로펜틸, 히드록시 C_1-6알킬, 페닐, 벤질 또는 3-테트라히드로푸릴이고,

P₃는 수소, -CH₃, -CH(CH₃)₂, -CH₂CH(CH₃)₂, -CH(CH₃)(CH₂CH₃), -CH₂SH, -CH₂CH₂SCH₃, CH₂OH, -CH(CH₃)OH, -CH₂(CH₂)₃NH₂, -CH₂(CH₂)₂NHC(=NH)NH₂, -CH₂CO₂H, -CH₂CH₂CO₂H, -CH₂CONH₂, -CH₂CH₂CONH₂, 벤질,

R₁은 수소, C_1-15알킬, 히드록시 C_1-15알킬, CH([(CH₂)_d-O-CH₂]_f-R₇)₂,CH₂Si(CH₃)₂(R₈), PDL, -(C_1-6알킬렌)-OR₄, CH(Y)(Z),

[여기서, PDL은 -(CH₂)_a-2-, 3- 또는 4-피리딜이고, Y는 히드록시 C_1-15알킬, C_1-6알킬 또는 (CH₂)_e-C₆H₄-(V)_e'이고, Z는 (CH₂)_d-O-CHO, C_1-6알킬렌-O-(CH₂)_d-(O-CH₂-CH₂)e -O-C_1-6알킬, CHO, CO₂R₄, CONHR₄, (CH₂)_d-O-(CH₂)_d'-R₅, -(CH₂)_e-OR₄, 또는

(여기서, V는 OR₄또는 히드록시 C_1-6알킬렌임)이고,

다만, R5가 피페라지닐, 치환된 피페라지닐, 피페리딜 또는 모르폴리닐인 경우, d'는 2임]이고,

R₂는 R₁에 대해 정의된 바와 같고, 다만, R₁이 수소인 경우, R₂는 수소는 아니고, 또는 R₁및 R₂는 그들이 결합된 질소 원자와 함께,

로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이고,

R₃은 CH₂OR₄, C(O)NHR₄또는 CHO이고,

R₄는 수소, C_1-6알킬, 페닐 또는 벤질이고,

R₅는 피페라지닐, 치환된 피페라지닐(이 치환된 피페라지닐은 그의 하나의 질소 원자상에서 CHO, C(O)NHR₄, C_1-4알킬 또는 CO₂R₄로 치환된 피페라지닐임), 피페리딜, 모르폴리닐, 피리딜, 피라지닐, 피리미디닐 또는 페닐이고,

R₆은 (H, OH) 또는 =O이고,

R₇은 피리미딜, 피리딜, 피라지닐 또는 페닐이고,

R₈은 C_1-6알레닐, C_1-6알콕시, C_1-6알킬렌, 히드록시 C_1-6알킬, C_1-6알킬 또는 OH이고,

a는 0, 1, 2 또는 3이고,

b는 0 또는 1이고,

d 및 d'는 각각 독립적으로 1 또는 2이고,

e 및 e'는 각각 독립적으로 0, 1 또는 2이고,

f는 0 또는 1이고,

x는 1, 2, 3, 또는 4이다.

또한, 본 발명은 바이러스 감염 환자에게 항바이러스 유효량의 일반식 I의 화합물을 투여하는 것으로 이루어진 상기 환자의 치료 방법을 제공한다.

추가로, 본 발명은 HIV 프로테아제 억제를 요하는 환자에게 억제 유효량의 일반식 I의 화합물을 투여하는 것으로 이루어진 상기 환자에서 HIV 프로테아제를 억제하는 방법을 제공한다.

용어 "할로겐", "할로" 또는 "할라이드"는 염소, 브롬 또는 요오드 원자를 의미한다. 용어 "입체 이성질체"는 동일 원자가 동일 결합으로 결합되어 있으나 상호변환되지 않는 상이한 3차원 구조를 갖는 화합물을 의미한다. 3차원 구조를 배열(configuration)라 부른다. 용어 "디아스테레오머"란 하나 이상의 키랄 중심을 갖는 서로 거울상이 아닌 입체 이성질체를 의미한다. 용어 "에난티오머"는 두 분자가 서로 겹칠 수 없는 거울상인 입체 이성질체를 의미한다. 용어 "라세미 혼합물" 또는"라세미 변형체"는 동량의 에난티오머의 혼합물을 의미한다. 용어 "키랄 중심"은 4개의 상이한 기가 결합된 탄소 원자를 의미한다. 아미노산에서 L/D 또는 R/S는 생화학적 명명법에서 IUPAC-IUB공동 위원회에서 정한 대로 사용될 수 있다(Eur. J. Biochem., 138, 9-37, 1984). 일반식 I의 화합물은 다양한 입체 이성질체 배열로 존재할 수 있는 것으로 이해된다. 일반식 I의 배열이 고정된 경우, 각 화합물의 가능한 에낱티오머의 최대 갯수는 2ⁿ이며,여기서 n은 화합물에 존재하는 키랄 중심의총 갯수를 나타낸다. 일반식 I 상에 위치한 키랄 중심의 최소 갯수는 하기 *에 의해 표시된다.

여기서, 치환체는 상기 정의된 바와 같되, 다만 P₃는 수소가 아니다.

본 발명의 화합물은 양쪽성 형태와 같은 유리 형태, 또는 산 부가 또는 음이온 염과 같은 염 형태일 수 있다. 유리 형태의 화합물은 당 업계의 공지된 방법으로 염 형태로 전환될 수 있고 역 또한 같다.

일반식 I 의 화합물의 제약적으로 허용가능한 염(물 또는 오일에 용해 또는 분산 가능한 생성물 형태)은 예를 들면,무기 또는 유기 산 또는 염기로 부터 형성된 이 화합물들의 통상의 비독성 염 또는 4급 암모늄 염을 포함한다. 이러한 산 부가 염의 예로는 아세테이트, 아디페이트, 알기네이트, 아스팔테이트, 벤조에이트, 벤젠술포네이트, 비술페이트, 부티레이트, 시트레이트, 캠포레이트, 캠포술포네이트, 시클로펜탄프로피오네이트, 디글루코네이트, 도데실술페이트, 에탄술포네이트, 푸마레이트, 글루코헵타노에이트, 글리세로포스페이트, 헤미술페이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 히드로클로라이드, 히드로브로마이드, 히드로요오디드, 2-히드록시에탄술포네이트, 락테이트, 말리에이트, 메탄술포네이트, 2-나프탈렌술포네이트, 니코티네이트, 옥살레이트, 페모에이트, 펙티네이트, 퍼술페이트, 3-페닐프로피오네이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 숙시네이트, 타르타레이트, 티오시아네이트, 토실레이트, 및 운데카노에이트를 포함한다. 염기 염은 암모늄염, 나트륨염 및 칼륨염과 같은 알칼리 금속염, 칼슘염 및 마그네슘염과 같은 알칼리 토 금속염, 디시클로헥실아민염, N-메틸-D-글루카민과 같은 유기 염기를 가진 염, 및 아르기닌, 라이신 등과 같은 아미노산을 가진 염을 포함한다. 또한, 염기성 질소를 함유한 기는 메틸, 에틸, 프로필 및 부틸클로라이드, 브로마이드 및 요오다이드와 같은 저급 알킬 할라이드; 디메틸, 디에틸, 디부틸과 같은 디알킬 술페이트; 디아민 술페이트, 긴 사슬 할라이드, 예를 들어, 데실, 라우릴, 미리스틸 및 스테아릴 클로라이드, 브로마이드 및 요오다이드; 아라킬 할라이드 화합물, 예를 들어 벤질 및 페네틸 브로마이드 및 다른 할라이드로 4원화 될 수 있다.

일반식 I의 화합물의 수화물은 하기한 바와 같은 부분 구조를 갖는 수화된 화합물이고, 이는 일반적으로 최종 용도에서 활성 형태이다.

일반적으로, 본 명세서에서 사용된 용어 "알킬"은 다른 언급이 없는 한, 직쇄, 분지쇄 및 고리화된 형태를 포함하며, 특히, 메틸, 에틸, 이소프로필, n-부틸, t-부틸, -CH₂-t-부틸, 시클로프로필, n-프로필, 펜틸, 시클로펜틸, n-헥실, 시클로헥실 및 시클로헥실메틸과 같은 기를 나타낸다. 용어 "아랄킬"이란 아릴기가 알킬렌 브릿징(bridging) 기, 바람직하게는 메틸렌 또는 에틸렌에 결합된 것을 포함한다.

"아릴"은 카르보시클릭 기 및 헤테로시클릭 기를 둘 다 포함하고, 그 중 페닐, 피리딜, 피리미디닐, 피라지닐, 인돌릴, 인다졸릴, 푸릴 및 티에닐이 주요하고, 이들 기는 그들의 위치 이성질체,예를 들어 2-, 3-, 또는 4-피리딜, 2-또는 3-푸릴 및 티에닐, 1-, 2-, 또는 3-인돌릴 또는 1- 및 3-인다졸릴 외에 푸릴 및 티에닐 기의 디히드로 및 테트라히드로 동족체를 포함한다. 또한, 용어 "아릴"이란 펜탈레닐, 인데닐, 나프탈레닐, 아줄레닐, 헵탈레닐, 아세나프틸레닐, 플루오레닐, 페날레닐, 페난트레닐, 안트라세닐, 아세페난트릴레닐, 아세안트릴레닐, 트리페닐레닐, 피레닐, 크리세닐 및 나프타세닐과 같은 융합된 카르보시클릭 기를 포함한다. 또한, 용어 "아릴"이란 2- 또는 3-벤조[b]티에닐, 2- 또는 3-나프토[2,3-b]티에닐, 2- 또는 3-티안트레닐, 2H-피란-3-(또는 4- 또는 5-)일, 1-이소벤조-푸라닐, 2H-크로메닐-3-일, 2- 또는 3-페녹사티이닐, 2- 또는 3-피롤릴, 4- 또는 3-피라졸릴, 2-피라지닐, 2-피리미디닐, 3-피리다지닐, 2-인돌리지닐, 1-이소인돌릴, 4H-퀴놀리진-2-일, 3-이소퀴놀릴, 2-퀴놀릴, 1-프탈라지닐, 1,8-나프티리디닐, 2-퀴녹살리닐, 2-퀴나졸리디닐, 3-시놀리닐, 2-프테리디닐, 4aH-키르바졸-2-일, 2-카르바졸릴, β-카르볼린-3-일, 3-페난트리디닐, 2-아크리디닐, 2-페리미디닐, 1-페나지닐, 3-이소티아졸릴, 2-페토티아지닐, 3-이속사졸릴, 2-페녹사지닐, 3-이소크로마닐, 7-크로마닐, 2-피롤린-3-일, 2-이미다졸리디닐, 2-이미다졸린-4-일, 2-피라졸리디닐, 3-피라졸린-3-일, 2-피페리딜, 2-피페라지닐, 1-인돌리닐, 1-이소인돌리닐, 3-모르폴리닐, 벤조[b]이소퀴놀리닐 및 벤조[b]푸라닐 같은 헤테로시클릭기, 그리고그의 위치 이성질체를 포함하고, 다만, 헤테로시클릭 기는 C_1-6알킬, 할로알킬, 알콕시, 티오알콕시, 아이노알킬아미노, 디알킬아미노, 히드록시, 할로, 메르캅토, 니트로, 카르복스알데히드, 카르복시, 카르보알콕시 및 카르복사미드로부터 독립적으로 선택된 치환체 1개, 2개 또는 3개가 그의 질소에 직접 결합될 수는 없다.

마찬가지로, 용어 "알킬렌"은 직쇄 또는 분지쇄 기를 포함한다. 분지쇄 알킬렌 기의 예로는 에틸에틸렌, 2-메틸트리메틸렌, 2,2-디메틸트리메틸렌 등과 같다. 예를 들어, C₃알킬렌이란 하기 구조를 의미할 수 있다.

모든 (C_1-15) 기는 바람직하게는 (C_1-6) 기이고, C_1-6알킬, C_1-6알레닐, C_1-6알콕시, 및 히드록시 C_1-6알킬과 같은 모든 (C_1-6)기는 더욱 바람직하게는 C_1-3기이다(즉, 1-6개의 탄소 원자 대신 1-3개의 탄소 원자를 함유).

플루오레닐메틸옥시 기는 일반적으로 약어 FMOC로 불리우고, 플루오레닐 기의 9-위치에 결합된 -CH₂O를 함유하는 플루오레닐 기이다. 본 명세서에서 정의된 다른 용어로는 피페라지닐또는 치환된 피페라지닐이고, 치환(★)은 분자의 나머지 부분에 결합되지 않고 오직 하나의 질소 분자에서만 일어난다(질소 원자를 통해 결합). 치환체는 CHO, C(O)NHR₄, C_1-4알킬 또는 CO₂R₄중의하나이다.

더 구체적으로, P₂가 C_1-6알킬 또는 히드록시 C_1-6알킬인 경우, -C(CH₃)₃, -CH(CH₃)₂, -CH(CH₃)(C₂H₅), -C(OH)(CH₃)₂및 -CH(OH)CH₃와 같은 기가 바람직하다.

피페리디닐및 모르폴리닐은둘 다 각각의 질소 원자를 통해 분자의 나머지 부분에 결합하는 반면, 피리미디닐, 피리딜및 피라지닐은 각각의 질소 원자를 제외한 모든 부분에서 분자의 나머지 부분에 결합한다.

히드록시 기는 알킬 기의 말단 탄소 원자에 한정되지 않는다.

본 명세서에서 사용된 용어 "Pg"란 보호기를 의미한다. 아미노 보호기 군으로부터 고려되는 것들은 (1) 아실 형태의 보호기, 예를 들어 포르밀, 트리플루오로아세틸, 프탈릴, p-톨루엔술포닐(토실), 벤젠술포닐, 니트로페닐술페닐, 트리틸술페닐, 및 o-니트로페녹시아세틸; (2) 방향족 우레탄 형태 보호기, 예를 들어 벤질옥시카르보닐 및 치환된 벤질옥시카르보닐, 예를 들어, p-클로로벤질옥시카르보닐, p-메톡시벤질옥시카르보닐, p-니트로벤질옥시카르보닐, p-브로모벤질옥시카르보닐, 1-(p-비페닐릴)-1-메틸에톡시카르보닐, α-,α-디메틸-3,5-디메톡시벤질옥시카르보닐 및 벤즈히드릴옥시카르보닐; (3) 지방족 우레탄 보호기, 예를 들어 t-부틸옥시카르보닐(Boc), 9-플루오레닐메톡시카르보닐(FMOC), 디이소프로필메톡시카르보닐,이소프로필옥시카르보닐, 에톡시카르보닐, 및 알릴옥시카르보닐; (4) 시클로알킬 우레탄 형태의 보호기, 예를 들어 시클로펜틸옥시카르보닐, 아다만틸옥시카르보닐, 및 시클로헥실옥시카르보닐; (5) 티오 우레탄 형태의 보호기, 예를 들어 페닐티오카르보닐; (6) 알킬 형태의 보호기, 예를 들어 트리페닐메틸(트리틸) 및 벤질(Bzl); (7)트리알킬실란 보호기, 예를 들어 트리메틸실란 등과 같다. 바람직한 α-아미노 보호기는 t-부틸옥시카르보닐(Boc) 또는 벤질옥시카르보닐(CBz)이다. 아미노산을 위한 α-아미노 보호기로서 Boc를 이용하는 것에 관해서 보단스키(Bodansky) 등에 의한 문헌["The Practice of Peptide Synthesis, Springer-Verlag, 베를린(1984), p 20]에 기재되어 있다.

α-아미노기 이외의 관능기가 존재하는 경우(예를 들어 P₃상에 존재할 수 있는 것), 일반적으로 이 관능기들은 보호되어야 한다. 이 관능기들은 α-아미노기 상에서 사용된 것들과 상이한 보호기에 의해 보호되어, 하나의 보호기가 다른 보호기를 제거하지 않고도 제거될 수 있게 되었다. 보호기 및 보호기를 선택적으로 제거하는 시약의 적절한 조합을 적절히 선택하는 것은 당업계에 공지되어 있다. 보단스키(M. Bodansky)의 문헌["Peptidc Chemistry, A Practical Text Book", Springer-Verlag (1988)], 스튜어트(J. Stewart)의 문헌["Solid Phase Peptide Synthesis", and Ed. Pierce Chemical Co.(1984)]을 예로 들을 수 있다.

일반적으로 본 발명의 화합물은 유사하게 당업계에 공지된 표준 화학 반응들을 사용하여 제조될수 있다. 더 구체적으로, 구조식 3의 화합물의 제조는 당업계에공지되어 있고, 일반적으로 Schirlin, D. 및 Van Dorsselaer, V.에 의한 1992년 7원 23일자 국제 공개 제92/12123호로 공개된 PCT/US91/09741에 기재되어 있다. 예를 들어, 반응식 II에서 사용하기 위해 필요한 출발물질인 구조식 3 및 4의 화합물을 반응식 I에서 제조할 수 있다. 반응식 I 및 반응식 II에서 사용된 용어 "Pg"란 상기된 보호기를 의미하나, 벤질 또는 방향족 우레탄 보호기를 포함하지 않는다. 다른 언급이 없는 한, 다른 모든 치환체는 상기 정의된 바와 같다. 시약 및 출발 물질은 당업자에 의해 쉽게 이용된다.

반응식 I 의 단계 A에서, 알데히드(구조식 1)을 불활성 질소 또는 아르곤 분위기 하에서 무수 비양성자성 용매(예를 들어 테트라히드로푸란, 디에틸에테르, t-부틸 메틸 에테르)에서 아연의 존재 하에 브로모디플루오로아세트산의 에스테르, 바람직하게는 에틸에스테르와 축합 반응한다. 반응 혼합물을 약 1-12시간 동안 60℃에서 온화하게 가열하거나 또는 초음파처리하여 에스테르(구조식 2)를 생성한다. 알데히드(구조식 1)에 바람직한 아미노 보호기(Pg')는 t-부틸옥시카르보닐기이다.

별법으로, 반응식 I 의 단계 A에서, 에스테르(구조식 2)를 형성하는 축합 반응은 낮은 반응 온도에서 하기 일반적 방법을 이용하여 높은 수율로 수행될 수 있다. 질소와 같은 불활성 기체 분위기 하에서, 알데히드(구조식 1)를 적당한 무수 유기 용매에 용해시킨다. 적절한 무수 유기 용매의 예로는 테트라히드로푸란, 디에틸 에테르, t-부틸 메틸 에테르 등과 같다. 용액을 약 0℃로 냉각한다. 용액에 약 0.3 당량의 아세트산은, 약 2.1 당량의 아연 분진, 및 약 2 당량의 에틸 브로모디플루오로아세테이트를 첨가한다. 약 0.34 당량의 디에틸알루미늄 클로라이드(톨루엔 중의 용액)를 반응 온도를 12℃ 미만으로 유지하면서 천천히 첨가한다. 반응 혼합물을 약 0℃에서 1 내지 3시간 동안 교반하고, 이어서 실온에서 4 내지 12시간 동안 교반한다. 이어서 반응 혼합물을 10℃로 냉각하고, 포화 염화암모늄 수용액으로 퀀칭한다. 이어서 에스테르(구조식 2)를 단리하고 당업계에 공지된 기술로 정제한다. 예를 들어, 타르타르산수소나트륨 용액를 첨가하고, 반응물을 10℃에서 실온으로 가온되도록 방치한다. 혼합물을 여과하고, 고체를 에틸 아세테이트와 같은 적절한 유기 용매로 세척하고, 여액층을 분리한다. 수성 층을 에틸아세테이트로 추출하고, 유기층 및 추출물을 혼합하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과, 농축한다. 잔사를 실리카겔 상에서 시클로헥산/에틸아세테이트와 같은 적당한 용출제를 사용하여 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 에스테르(구조식 2)를 제공한다.

반응식 I의 단계 B에서, 에스테르(구조식 2)는 아미드화 반응으로 구조식 3의 아미드를 제공한다. 에스테르(구조식 2)를 테트라히드로푸란과 같은 적절한 유기 용매에 용해시키고, 0 내지 80℃의 온도에서 적절한 R₁,R₂-치환 아민으로 처리하여 아미드(구조식 3)을 제공한다.

또한, 질소와 같은 불활성 기체 분위기 하에서 필요에 따라 보호된 적절한 R₁,R₂-치환 아민을 디클로로메탄과 같은 적절한 유기 용매에 용해시킨다. 톨루엔 중의 2M 트리메틸알루미늄 용액 1 당량을 용액에 적가한다. 약 15분 후, 이 용액을 디클로로메탄과 같은 적절한 유기 용매에 용해된 약 0.3 당량의 에스테르(구조식 2)에 첨가한다. 반응 혼합물을 약 15 내지 24 시간 동안 대략 실온 내지 40℃에서 출반한다. 이어서 생성물을 당업계에 공지된 기술을 사용하여 단리한다. 예를 들어 차가운 묽은 염산 수용액 및 에틸아세테이트를 첨가한다. 유기 층을 분리하고, 물, 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과 및 진공 하에서 농축하여 아미드(구조식 3)을 제공한다.

별법으로, 에스테르(구조식 2)를 당업계에 공지된 조건 하에서 대응하는 산으로 가수분해하고, 이어서 당업계에 공지된 펩티드 형성 커플링 방법으로 적절한 R₁,R₂-치환 아민에 커플링되어 아미드(구조식 3)를 제공한다.

반응식 I 의 단계 C에서, 당업계에 공지된 조건 하에서 에스테르(구조식 2)의 페놀성 에테르 부분이 탈벤질화되어 구조식 2a의 페놀을 제공한다. 예를 들어, 에스테르(구조식 2)를 4.4% 포름산/메탄올과 같은 적절한 용매 혼합물매 용해시킨다. 팔라듐 블랙의 촉매량을 약 1시간 내지 6일 동안 탈벤질화가 종결(박막 크로마토그래피 또는 HPLC에 의해 지시됨)될 때 까지 조금씩 첨가한다. 이어서 생성물을단리하고 플래쉬 크로마토그래피와 같은 당업계에 공지된 기술로 정제한다. 예를 들어, 반응물을 여과하고, 여액을 진공 하에 농축하고, 잔사를 실리카겔 상에서 시클로헥산/에틸아세테이트와 같은 적당한 용출제를 사용하여 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 페놀(구조식 2a)를 제공한다.

반응식 I의 단계 D에서, 페놀(구조식 2a)를 아미드화 반응시켜 구조식 4의 아미드를 제공한다. 예를 들어, 필요에 따라 보호되는 적절한 R₁,R₂-치환 아민, 예를 들어 O-벤질-D-발리놀을 질소와 같은 불활성 기체 분위기 하에서 디클로로메탄과 같은 적절한 유기 용매에 용해시킨다. 톨루엔 중의 2M 트리메틸알루미늄 용액 1당량을 용액에 첨가한다. 약 15분 후, 이 용액을 디클로로메탄과 같은 적절한 유기 용매에 용해된 악 0.3 당량의 페놀(구조식 2a) 에 첨가한다 반응 혼합물을 약 실온 내지 40℃에서 약 15 내지 24 시간 동안 교반한다. 이어서 생성물을 당업계에 공지된 기술로 단리한다. 예를 들어 차가운 묽은 염산 수용액 및 에틸아세테이트를 첨가한다. 유기층을 분리하고, 물, 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과시키고, 진공 하에 농축하여 아미드(구조식 4)를 제공한다.

일반식 I의 화합물을 반응식 II에서와 같이 제조할 수 있다. 다른 언급이 없는 한, 모든 치환체는 상기한 바와 같다. 시약 및 출발 물질은 당업자에 의해 쉽게 이용된다.

일반식 Ia에서 P₃는 보호되지 않음.

구조식 II에서 P₃는 필요에 따라 보호됨.

구조식 II의 탈보호로 일반식 Ib 생성.

반응식 II의 단계 A에서, 아미드(구조식 3)은 탈벤질화되어 구조식 4의 페놀을 제공한다. 예를 들어, 일반적으로 El Amin 등의 방법[J.Org.Chem., 44, 3442(1979)]에 따라, 아미드(구조식 3)를 촉매량의 Pd 블랙이 첨가된 4.4% 포름산/메탄올과 같은 적절한 용매 혼합물에 용해시킨다. 반응 혼합물을 약 4 내지 6시간 동안 교반하고, 반응이 완결될 때 까지 약 45분마다 추가의 Pd 블랙을 필요한만큼 나누어 첨가한다. 이어서 반응액을 여과하고, 여액을 진공 하에 농축한다. 잔사를 재결정화와 같이 당업계에 공지된 기술로 정제한다. 예를 들어, 잔사를 시클로헥산/에틸아세테이트와 같은 적절한 용매 혼합물로부터 재결정하여 페놀(구조식 4)을 제공한다.

반응식 II의 단계 B에서, 페놀(구조식 4)이 알킬화되어 구조식 5의 에테르를 제공한다. 예를 들어, 페놀(구조식 4)를 아세톤과 같은 적절한 유기 용매에 용해시킨다. 약 1.2 당량의 탄산칼륨과 같은 적절한 염기를 첨가하고, 약 1.15 당량의 적절한 알킬 할라이드를 첨가한다. 적절한 알킬 할라이드의 예로는 에틸 브로모아세테이트, 메틸 브로모아세테이트, 에틸 3-브로모프로피오네이트, 에틸 3-클로로프로피오네이트, 에틸 t-브로모부티레이트, 에틸 4-클로로부티레이트, 에틸 5-브로모발레레이트 등이 있다. 이어서, 촉매량의 요오드화칼륨을 첨가하고, 반응액을 1 내지 3일 동안 교반한다. 생성물을 단리하고, 당업계에 공지된 기술, 예를 들어 추출 방법 및 재결정으로 정제한다. 예를 들어, 반응액을 에틸아세테이트/묽은 염화나트륨 수용액과 같은 적절한 용매 혼합물에 붓고, 유기층을 분리한다. 이어서 유기층을 묽은 수산화칼륨 수용액, 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과시키고, 진공 하에 농축한다. 잔사를 시클로헥산/에틸아세테이트와 같은 적절한 용매 혼합물로부터 재결정으로 정제하여 에테르(구조식 5)를 제공한다.

반응식 II의 단계 C에서, T.H. Green 등에 의한 문헌["Protective Groups In Organic Synthesis", John Wiley and Sons, 1981, 7장]에 따라 에테르(구조식 5)의 보호된 아민 부분을 당업계의 공지된 조건 하에서 탈보호하여 구조식 6의 탈보호된 아민을 제공한다. 예를 들어, Pg'가 t-부틸옥시카르보닐인 경우, 에테르(구조식 5)를 과잉의 트리플루오로아세트산(TFA)으로 처리하고, 반응 혼합물을 약 2시간 동안 질소 분위기 하에 교반되도록 방치한다. 이어서 반응 혼합물을 진공 하에 농축한다. 잔사를 에틸아세테이트에 두번 용해시키고, 매번 진공 하에 농축하여 탈보호된 아민(구조식 6)을 TFA 염으로 제공한다.

또한, Pg'가 t-부틸옥시카르보닐인 경우, 에테르(구조식 5)를 과잉의 포름산으로 처리하고, 실온에서 약 1 내지 2 시간 동안 교반되도록 방치한다. 탈보호된 아민(구조식 6)은 중탄산나트륨 수용액으로 처리하고, 에틸아세테이트와 같은 적절한 유기 용매로 추출하여 단리될 수 있다. 유기 추출물을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 탈보호된 아민(구조식 6)을 제공한다.

반응식 II의 단계 D에서, 탈보호된 아민(구조식 6)을 당업계에 공지된 조건 하에서 즉시 구조식 6a의 산과 커플링 반응(구조식 6의 락탐화를 막기 위함)하여 원치 않는 결합 형성 방지를 위해 P₃가 적절히 보호된 구조식 7의 아미드를 제공한다.

P₃가 -CH₂SH, -CH₂OH, -CH(CH₃)OH,-CH₂(CH₂)₃NH₂, -CH₂(CH₂)₂NHC(=NH)NH₂, -CH₂CO₂H, CH₂CH₂CO₂H,또는인 경우, P₃는 적절한 보호기를 필요로 하나, 그렇지 않은 경우는 P₃가 보호되지 않는다.

사용될 수 있는 보호기, 그의 선택 및 제거는 당업계의 영역 내에 포함된다. 예를 들어, T.H, Greene "Protective Groups In Organic Chemistry", John Wiley & Sons, 뉴욕(1981), "The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology", Vol. 3, Academic Press, 뉴욕 (1981); M. Bodansky, "Peptide Chemistry, A Practical Text Book", Springer-Verlag (1988); J. Stewart, "Solid Phase Peptide Synthesis", and Ed, Pierce Chemical Co.(1984),

적절한 커플링 반응 방법의 선택은 당업계의 기술에 속한다. 커플링 반응을 아지드방법, 혼합 탄산 무수물(이소부틸 클로로포르메이트) 방법, 카르보디이미드(디시클로헥실카르보디이미드, 디이소프로필카르보디이미드, 또는 수용성 카르보디이미드)방법, 활성 에스테르(p-니트로페닐 에스테르, N-히드록시-숙신산 이미도 에스테르)방법, 우드워드(Woodward) 시약 K 방법, 카르보닐디이미다졸 방법, BOP-Cl과 같은 인 시약, 또는 산화-환원 방법과 같은 표준 커플링 반응을 사용하여 수행할 수 있다. 이 방법 중 일부(특히, 카르보디이미드 방법)는 1-히드록시벤조트리아졸을 첨가하여 증진될 수 있다. 예를 들어, 유리 염기 또는 TFA 염의 형태로 탈보호된 아민(구조식 6)을 질소와 같은 불활성 기체 분위기 하에서 교반하면서 메틸렌클로라이드/디메틸포름아미드(1:1)과 같은 적절한 유기 용매 혼합물에 용해시킨다. 약 1.06 당량의 1-히드록시벤조트리아졸 수화물(HOBT)를 첨가한 후, N-메틸모르폴린(구조식 6이 유리 염기인 경우 1.1 당량, 구조식 6이 TFA 염인 경우 2.2 당량), 약 1.06 당량의 구조식 6a 및 약 1.11 당량의 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드(EDC)를 첨가한다. 반응 혼합물을 약 12시간 내지 3일 동안 교반되도록 방치한다. 이어서 생성물을 단리하고, 당업계에 공지된 기술, 예를 들어 추출 방법, 플래쉬 크로마토그래피 및 재결정으로 정제한다. 예를 들어, 반응물을 물에 붓고, 혼합물을 에틸아세테이트와 같은 적절한 유기 용매로 추출한다. 유기 추출물을 묽은 염산 수용액, 중탄산나트륨 수용액, 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과시키고, 진공 하에 농축한다. 이어서, 잔사를 실리카겔 고정상 상에서 에틸아세테이트/시클로헥산과 같은 적절한 용출제를 사용하여 플래쉬 크로마토그래피로 정제하고, 에틸아세테이트/시클로헥산과 같은 적절한 용매 혼합물로 결정화하여 아미드(구조식 7)을 제공한다.

반응식 II의 단계 E 및 F에서, 아미드(구조식 7)의 에스테르 부분은 구조식 8의 활성화된 펜타플루오로페닐 에스테르로 전환된다. 예를 들어, 아미드(구조식 7)은 메탄올/물(19:1)과 같은 적절한 용매 혼합물에 현탁시킨다. 약 1.4 당량의 수산화리튬과 같은 적절한 염기를 교반하면서 첨가한다. 이어서, 반응 혼합물을 2 내지 4시간동안 고반되도록 방치한다. 이어서 반응 혼합물을 진공 하에 농축한다. 이결과 형성되는 상응하는 산의 염은 당업계에 공지된 기술에 의해 정제된다. 예를 들어, 염은 물에 용해되고, 에테르로 세척한다. 이어서, 에틸아세테이트와 같은 적절한 유기 용매를 수상에 첨가하고 0.1N 황산수소나트륨을 수상이 산성이 될 때까지 격렬히 교반하면서 첨가한다. 이어서, 유기층을 분리하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과시키고, 진공 하에 농축시켜 상응하는 산을 제공한다. 이어서, 산을 메틸렌클로라이드에 용해한다. 이 용액에 약 1.3 당량의 펜타플루오로페놀 및 약 1,2 당량의 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드를 교반하면서 첨가한다. 반응 혼합물을 3 시간 내지 3일 동안 교반되도록 방치한다. 이어서, 생성물을 당업계에 공지된 기술로 단리, 정제한다. 예를 들어, 반응물을 물로 희석하고, 이어서 생성된 고체를 여과로 수집하고, 물 및 에테르로 세척한다. 이어서, 시클로헥산/에힐아세테이트와 같은 적절한 용매 혼합물로부터 재결정하여 펜타플루오로페닐 에스테르(구조식 8)를 제공한다.

반응식 II의 단계 G에서, 펜타플루오로페닐 에스테르(구조식 8)의 보호된 아민 부분을 그린(T.H. Green) 의 문헌["Protective Groups In Organic Synthesis", John Wiley and Sons, 1981, 7장]에 따라 당업계에 공지된 조건 하에서 탈보호하여 구조식 9의 탈보호된 아민을 제공한다. 예를 들어, Pg가 t-부틸옥시카르보닐인 경우, 펜타플루오로페닐 에스테르(구조식 8)를 교반하면서 과잉의 4N 염화수소/디옥산으로 처리한다. 반응 혼합물을 30분 내지 2시간 동안 교반되도록 방치한다. 이어서 반응 혼합물을 진공 하에 농축하여 탈보호된 아민(구조식 9)을 히드로클로라이드 염으로 제공한다.

반응식 II의 단계 H에서, 탈보호된 아민(구조식 9) 히드로클로라이드 염을 고리화 반응시켜 구조식 10의 마크로시클릭 알코올을 제공한다 예를 들어, 탈보호된 아민(구조식 9)을 묽은 중탄산나트륨 수용액/메틸렌클로라이드와 같은 적절한 염기 및 유기 용매 혼합물로 처리한다. 반응 혼합물을 1 내지 3일 동안 격렬하게 교반한다. 이어서 생성물을 당업계에 공지된 기술로 단리,정제한다. 예를 들어,반응물을 여과하고, 고체를 물 및 에테르로 세척하여 마크로시클릭 알코올(구조식 10)을 제공하고, 이것은 당업계에 공지된 기술로 정제될 수 있다.

아미드(구조식 7)에서 마크로시클릭 알코올(구조식 10)로 전환하는 또 다른 방법은 2 단계로 진행될 수 있다. Pg가 아미드(구조식 7)의 FMOC 보호기인 경우, 약 2 당량의 수산화리튬과 같은 적절한 염기로 아미드(구조식 7)을 처리하여 산 및 구조식 7a의 탈보호된 아민을 제공한다.

구조식 7a를 상기 반응식 II의 단계 D에 기재된 표준 커플링 조건 하에 고리화하여 마크로시클릭 알코올(구조식 10)을 제공한다.

반응식 II의 단계 I에서, 마크로시클릭 알코올(구조식 10)을 당업계에 공지된 조건하에 산화하여, P₃가 보호되지 않은 경우 일반식 Ia의 마크로시클릭 케톤을제공하거나 또는 P₃가 적절히 보호된 경우 반응식 II의 마크로시클릭 케톤을 제공한다. 예를 들어, 마크로시클릭 알코올(구조식 10)을 질소 분위기 하에 디메틸 술폭시드/메틸렌 클로라이드(3:1)과 같은 적절한 유기 용매 혼합물에 용해시키고, 약 -15 내지 -17℃로 냉각한다. 약 9 당량의 옥살릴 클로라이드를 용액에 적가한다. 약 1시간 후, 약 19 당량의 트리에틸아민을 반응액에 첨가하고, 이어서 천천히 실온으로 가온되도록 방치하고, 약 17 시간 동안 교반한다. 이어서, 생성물을 단리하고, 당업계에 공지된 기술, 예를 들어, 추출 방법, 플래쉬크로마토그래피 및 재결정으로 정제한다. 예를 들어, 반응액을 물/에틸아세테이트와 같은 적절한 용매 혼합물로 희석한다. 유기층을 분리하고, 물, 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과시키고, 진공 하에 농축한다. 잔사를 에틸아세테이트/메탄올(19:1)과 같은 안정한 용출제를 사용하여 플래쉬크로마토그래피로 정제하고, 이어서 에틸아세테이트/2,2,2-트리플루오로에탄올과 같은 적절한 용매 혼합물로부터 재결정하여 일반식 Ia의 마크로시클릭 케톤 또는 일반식 II의 마크로시클릭 케톤을 제공한다.

또한, 산화는 데스-마틴 퍼요오디난(Dess-Martin periodinane) 즉, 1,1,1-트리아세톡시-1,1-디히드로-2,1-벤족시오돌-3(1H)-온(Dess-Martin, J.Org.Chem., 48, 4155, 1983 참조)으로 수행할 수 있다. 이 산화는 약 1당 량의 알코올을 1 내지 10 당량(바람직하게는 5 당량 이상)의 퍼요오디난[이 시약은 무수 조건 하에 0 내지 50℃(바람직하게는 실온)에서 불활성 기체 분위기(바람직하게는 질소) 하에 불활성용매(예를 들어, 메틸렌클로라이드)에 현탁됨]과 접촉시키고, 반응 혼합물을 약 1 내지 48 시간 동안 상호작용하도록 방치함으로써 수행된다. 이어서, 목적하는 케톤을 단리하고, 상기 당업계의 공지된 기술로 정제한다.

반응식 II 단계 J에서, 마크로시클릭 케톤(일반식 II)의 보호된 P₃부분을 당업계에 공지된 조건 하에 탈보호하여 일반식 Ib의 마크로시클릭 케톤을 제공한다.

반응식 III을 반응식 II에서 제조된 탈보호된 아민(구조식 6)이 출발 물질인 일반식 I 의 화합물의 또 다른 제조 방법이다. 다른 모든 치환체들은 다른 언급이 없는 한, 상기 정의한 바와 같다. 시약 및 출발 물질은 당업자에 의해 쉽게 이용된다.

반응식 III의 단계 A에서는, 탈보호된 아민을 상기 반응식 II의 단계 D에서의 커플링 조건 하에 구조식 6b의 산과 커플링 반응시켜 구조식 12의 아미드를 제공한다.

반응식 III의 단계 B에서, 아미드(12)는 상기 반응식 II의 단계 C에서의 조건 하에 탈보호되어 탈보호된 아민을 제공하고, 이어서 반응식 II의 단계 D에서의 커플링 조건 하에 구조식 6c의 산과 커플링 반응으로 구조식 7의 아미드를 제공한다.

이어서, 아미드(구조식 7)를 상기 반응식 II에 기재된 바대로, 일반식 I의 화합물로 전환한다.

일반식 I 의 디아스테레오머는 분리될 수 있고, 일반식 I의 에난티오머는 당업계의 공지된 기술, 예를 들어 쟈크(Jacques, J.) 등의 문헌["Enantiomers, Racemates, and Resolutions", Jhon Wiley and Sons, Inc, 1981]에 따른 결정화 방법 또는 HPLC(고압 액체 크로마토그래피) 조건 하에 키랄 고정상과 같은 적절한 고정상을 사용하는 크로마토그래피 또는 플래쉬 크로마토그래피를 이용하여 분할할 수 있다.

하기 실시예는 반응식 I, II 및 III에 기재된 바와 같은 대표적인 합성을 나타낸다. 이 실시예들을 어떠한 방법으로든 본 발명의 영역을 제한하지 않고 단지 예시적인 것으로 이해되어야 한다. 하기 실시예에서 사용된, 하기 용어들은 다음과 같은 의미를 나타낸다: "eq."은 당량, "g"은 그람, "mg"은 밀리그람, "mmol"은 밀라몰, "ml"은 밀리리터, "℃"은 섭씨 온도, "TLC"는 박막 크로마토그래피, "δ"는¹H NHR에서 테트라메틸실란으로부터 아랫 방향으로의 ppm 및¹⁹F NHR에서 플루오로트리클로로메탄으로부터 높은 방향으로의 ppm을 의미한다.

실시예 1

[9(S),12(S)]-α,α-디플루오로-9-(1-메틸에틸)-β,4,7,10-테트라옥소-N-(페닐메틸)-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-14,16-17-트리엔-12-프로판아미드의 제조

반응식 I의 출발 물질인 O-벤질-N-(tert-부톡시카르보닐)-L-티로시날 (구조식 1)의 제조

[Schirlin, D. 및 Van Dorsselaer,V.의 PCT/US91/09741(1992년 7월 23일자로 국제 공개 제WO92/12123호로 공개됨)에 기재된 방법]

무수 디클로로메탄 350ml 중의 N-tert-부톡시카르보닐-L-O-벤질티로신 37.1 g(100 mmol), 디시클로헥실카르보디이미드 20.6g (100 mmol) 및 N-히드록시벤조트리아졸 수화물 15.3 g (100 mmol)의 혼합물을 0℃에서 10 분 동안 교반하였다. 여기에 0℃에서 N,O-디메틸히드록실아민 히드로클로라이드 9.75 g (100 mmo1) 및 N-메틸모르폴린 10.1 g (100 mmol)을 첨가하였다. 온도를 실온으로 가온시키고, 15 시간 동안 계속해서 교반하였다. 이어서, 백색 침전을 여과하고, 디클로로메탄으로 세척하였다. 여액을 진공 하에서 농축시키고, 잔사를 플래쉬 크로마토그래피 (실리카겔, 에틸 아세테이트/시클로헥산 2:8)로 정제하여 N-tert-부톡시카르보닐-L-O-벤질티로신-N,O-디메틸-히드록사메이트 34.3g을 백색 고체로 얻었다. R_f=0.36 (에틸아세테이트/시클로헥산 1:1).

N-tert-부톡시카르보닐-L-O-벤질티로신-N,O-디메틸-히드록사메이트 18.2 g (44 mmol)을 무수 디에틸 에테르/디메톡시에탄 (4:1)의 혼합물 300 ml 중에 용해시키고, 0℃로 냉각시켰다. 여기에 수소화리튬알루미늄 1.82g (48 mmol)을 조금씩 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 교반하에 1M 황산수소칼륨 용액 55 ml를 반응 혼합물에 적가하였다. 첨가가 완료된 후, 수성상을 기울여 따라내고, 에틸 아세테이트(2 × 200 ml)로 추출하였다. 한데 모은 유기층을 3N 염산 250 ml, 물 200 ml, 포화 중탄산나트륨 150 ml 및 염수 200 ml로 세척하였다. 이어서, 유기층을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/펜탄으로부터 재결정하여 N-tert-부톡시카르보닐-L-O-벤질히로시날 13 g을 얻었다.

4-tert-부톡시카르보닐아미노-2,2-디플루오로-3-히드록시-5-(4-벤질옥시)페닐펜탄산 에틸 에스테르의 제조

반응식 I, 단계 A : 무수 테트라히드로푸란 120 ml 중의 N-tert-부톡시카르보닐-L-O-벤질티로시날 13.0 g (36.6mmol), 아세트산 은 1.82 g (10.9 mmol), 활성화된 아연 분진 5.02 g (76.8 mg-원자, 3N 염산, 물, 아세톤 및 에테르로 세척함) 및 에틸브로모디플루오로아세테이트와 교반된 혼합물에 0℃에서 20 분에 걸쳐 디에틸알루미늄 클로라이드 (톨루엔 중의 1.8M 용액) 22.4 ml를 첨가하였다. 첨가하는 동안 온도를 12℃ 이하로 유지시켰다. 이어서, 반응 혼합물을 0℃에서 90분 동안, 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 10℃로 냉각시키고, 포화염화암모늄 수용액 200 ml로 퀀칭시켰다. 1M 타르타르산수소나트륨 용액 200 ml를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온시켰다. 반응 혼합물을 여과하고, 고체를 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여액층을 분리하고, 수상층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 한데 모은 유기층을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 플래쉬 크로마토그래피(시클로헥산/에틸아세테이트, 4:1)로 정제하여 표제 화합물을 8.34g 얻었다. 디아스테레오머의 비율은 약 1:1이었다.

4-tert-부톡시카르보닐아미노-2,2-디플루오로-3-히드록시-5-(4-벤질옥시)페닐-N-(페닐메틸)펜타미드의 제조

반응식 I, 단계 B : 무수 테트라히드로푸란 50 ml 중의 4-tert-부톡시카르보닐아미노-2,2-디플루오로-3-히드록시-5-(4-벤질옥시)페닐펜탄산, 에틸 에스테르 5.5 g(11.5 mmol)의 용액에 0℃에서 벤질아민 6.15g (57.5 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 3 시간 동안, 실온에서 15 시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 100 ml로 희석하고, 0.1N 염산 수용액 (2×50ml), 물 50 ml, 염수 50 ml로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 이어서, 이것을 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트/펜탄으로부터 재결정하여 표제 화합물 5.17g을 백색 고체로 얻었다.

[3ξ,4(S)]-2,4,5-트리데옥시-4-[[(1,1-디메틸에톡시)카르보닐]-아미노]-2,2-디플루오로-5-[4-(히드록시)페닐]-N-(페닐메틸)-L-글리세로-펜톤아미드의 제조

반응식 II, 단계A : 4.4% HCO₂H/CH₃OH 25 ml 중의 Pd 블랙 300 mg의 교반 현탁액에 4-tert-부톡시카르보닐아미노-2,2-디플루오로-3-히드록시-5-(4-벤질옥시)페닐-N-벤질 펜탄아미드 (R/S 비율 = 6:1) 1.39 g (2.57 mmol)을 첨가하였다. 추가로, Pd 블랙을 300 mg씩 0.75 시간, 1.5 시간 및 2.25 시간이 되는 시점에서 첨가하였다. 총 4.25 시간 후, 촉매를 여과(CH₃OH로 세척)로 제거하고, 얻어진 여액을 유사한 실험 (4-tert-부톡시카르보닐아미노-2,2-디플루오로-3-히드록시-5-(4-벤질옥시)페닐-N-벤질 펜탄아미드 51mg을 사용함)에서 얻은 것과 합치고, 진공 하에 농축시켰다. 시클로헥산/EtOAc로 재결정하여 표제 화합물(R/S 비율 = 약 6:1) 1.10g (92%)을 아이보리색 미분말로 얻었다. 융점 163 - 166 ℃

[3ξ,4(S)]-2,4,5-트리데옥시-4-[[(1,1-디메틸에톡시)카르보닐]-아미노]-2,2-디플루오로-5-[4-[2-메톡시-2-(옥소)에톡시]페닐]-N-(페닐메틸)-L-글리세로-펜톤아미드의 제조

반응식 II, 단계 B : 아세톤 6 ml 중의 [3ξ,4(S)]-2,4,5-트리데옥시-4-[[(1,1-디메틸에톡시)카르보닐]-아미노]-2,2-디플루오로-5-[4-(히드록시)페닐]-N-(페닐메틸)-L-글리세로-펜톤아미드 441 mg (0.979 mmol)의 교반 용액에 분말화된 K₂CO₃165 mg(1.20 mmol), BrCH₂CO₂CH₃110 ㎕(1.16 mmol) 및 촉매량의 분말화된 KI를 첨가하였다 플라스크를 마개로 덮고, 3일 동안 계속해서 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc/묽은 NaCl 수용액에 붓고, 유기층을 분리하고, 묽은 KOH 수용액, 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조하였다. 유기층을 여과하고, 진공 하에 농축하여 표제 화합물 413 mg (81%)을 점성 백색 고체로 얻었다. 시클로헥산/EtOAc로부터 재결정하여 표제 화합물(R/S 비율 = 5.5:1)을 백색 분말로 얻었다. 융점; 93.5 -99.5 ℃

[3ξ,4(S)]-2,4,5-트리데옥시-4-[[2-[[[[(1,1-디메틸에톡시)카르보닐]아미노]아세틸]아미노]-3-메틸-1-옥소부틸]아미노]-2,2-디플루오로-5-[4-[2-메톡시-2-(옥소)에톡시]페닐]-N-(페닐메틸)-L-글리세로-펜톤아미드의 제조

반응식 II, 단계 C 및 D : 트리플루오로아세트산(TFA) 4 ml 중의 [3ξ,4(S)]-2,4,5-트리데옥시-4-[[(1,1-디메틸에톡시)카르보닐]아미노]-2,2-디플루오로-5-[4-[2-메톡시-2-(옥소)에톡시]페닐]-N-(페닐메틸)-L-글리세로-펜톤아미드 413 mg (0.790 mmol)의 용액을 질소 분위기에서 2 시간 동안 교반하였다. 용액을 진공 하에 농축시키고, 잔사를 EtOAc로 2회 용해시키고, 다시 농축시켰다. 얻어진 TFA염을 질소 분위기 하에 교반하면서 CH₂Cl₂/DMF (1;1) 3ml 중에 용해시키고, 여기에 1-히드록시벤조트리아졸 수화물 (HOBT) 128 mg (0.84 mmol), N-메틸모르폴린 (NMM) 190 ㎕ (1.73 mmol), Boc-gly-val-OH (표준 조건 하에서 시판 gly-val-OH와 디-t-부틸디카르보네이트를 반응시켜 제조함) 230 mg (0.84 mmol) 및 EDC 168 mg (0.88 mmol)을 나열된 순서대로 첨가하였다 3일 후, 혼합물을 물에 붓고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합친 추출물을 묽은 HCl 수용액, NaHCO₃및 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 유기층을 진공 하에 농축시켜 껌 형태의 고체를 549mg 얻고, 이것을 플래쉬 크로마토그래피 (EtOAC/시클로헥산 3:1)로 정제하여 표제 화합물 442mg을 백색 고체로 얻었다. EtOAc/시클로헥산으로부터 재결정하여 표제 화합물 (R/S 비율 = 6.6:1)을 백색 과립체로서 얻었다. 융점 : 161 - 166℃

CH₃OH/부타논/EtOAc로부터 재결정하여 순수한 [3(S),4(S)] 표제 화합물을 백색 분말로 얻었다. 융점 : 209 - 211 ℃

[3ξ,4(S)]-2,4,5-트리데옥시-4-[[2-[[[[(1,1-디메틸에톡시)카르보닐]아미노]아세틸]아미노]-3-메틸-1-옥소부틸]아미노]-2,2-디플루오로-5-[4-[2-옥소-2-(펜타플루오로페녹시]에톡시]페닐]-N-(페닐메틸)-L-글리세로-펜톤아미드의 제조

반응식 II, 단계 E 및 F : CH₃OH/H₂O (19:1) 20 ml 중의 [3ξ,4(S)]-2,4,5-트리데옥시-4-[[2-[[[[(1,1-디메틸에톡시)카르보닐]아미노]아세틸]아미노]-3-메틸-1-옥소부틸]아미노]-2,2-디플루오로-5-[4-[2-메톡시-2-(옥소)에톡시]페닐]-N-(페닐메틸)-L-글리세로-펜톤아미드 400 mg(0.589 mmol)의 교반 현탁액에 LiOH ·H₂O 29 mg (0.69 mmol)을 첨가하였다. 2 시간 후, 추가의 LiOH · H₂O 5 mg (총 0.81 mmol)을 첨가하고, 추가로 2 시간 후, 용액을 진공 농축시켰다. 잔사를 물 중에 용해시키고, 수용액을 에테르로 세척하고, EtOAc를 붓고, 격렬한 교반 하에 0.1N NaHSO₄10ml를 첨가하여 산성화하였다. 유기층을 분리하고, 수상층을 또다른 EtOAc로 추출하였다. 합친 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 유기층을 진공 농축시켜 상응하는 산을 407mg (이론치 392 mg) 얻고, 이것을 CH₂Cl₂5 ml 및 DMSO-d₆1 ml 중에 용해시켰다. 질소 분위기 하에 교반 용액에 C₆F₅OH 139 mg (0.755 mmol) 및 EDC 140 mg (0.73 mmol)을 얻었다. 3일 후, 혼합물을 물로 희석하고, 여과하고, 아이보리색 고체를 물 및 에테르로 세척하였다. CF₃CH₂OH/EtOAc로부터 재결정한 결과 트리플루오로에틸 에스테르로 부분 에스테르화되었다. 혼합물을 비누화하고, 재에스테르화하여 조 표제 화합물 394mg을 얻었다. 유사한 실험에서, CF₃CH₂OH/EtOAc로부터 재결정화(여과 보조 장치를 통해 더운 용액을 여과)하여 순수한 표제 화합물을 엷은 백색 매트 결정으로서 얻었다. 융점 : 202- 204 ℃.

[3(s),4(S)]-표제 화합물은 단리하지 않고, 직접 마크로시클릭 알콜로 전환시켰다.

[9(S),12(S)]-α,α-디플루오로-8-히드록시-9-(1-메틸에틸)-4,7,10-트리옥소-N-(페닐메틸)-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-14,16,17-트리엔-12-프로판아미드의 제조

반응식 II, 단계 G 및 H : [3ξ,4(S)]-2,4,5-트리데옥시-4-[[2-[[[[(1,1-디메틸에톡시)카르보닐]아미노]아세틸]아미노]-3-메틸-1-옥소부틸]아미노]-2,2-디플루오로-5-[4-[2-옥소-2-(펜타플루오로페녹시)에톡시]페닐]-N-(페닐메틸)-L-글리세로-펜톤아미드 494 mg (0.595 mmol)을 4N HCl/디옥산 16 ml 중에 교반하에 현탁시켰다. 2 시간 후, 투명한 겔이 형성되었다. 용매 및 HCl을 진공 중에서 제거하고, 잔류 고체를 묽은 NaHCO₃/CH₂Cl₂수용액 중에서 격렬한 교반 하에 3일 동안 현탁시켰다. 혼합물을 여과하고, 아이보리색 고체를 물 및 에테르로 세척하였다. 뜨거운 EtOAc를 고체의 대부분을 용해시키기에 충분한 양의 CF₃CH₂OH와 함께 첨가하고, 여과 보조장치를 통해 여과하고, 진공 중에서 농축시켜 표제 화합물 256 mg을 얻었다. 유사한 실험에서, 여액을 농축시키고, 뜨거운 EtOAc로 희석하여 표제 화합물의 (R)-알콜을 엷은 백색 과립체로 얻었다. 융점 : > 255 ℃.

표제 화합물 제조시, 탈보호/고리화로부터 얻은 조 물질을 끓는 CH₃OH를 조금씩 수회 사용하여 처리하여 표제 화합물의 (S)-알콜을 용해시키고, 약간의 불용성 중합체 물질을 제거하였다. 용매를 진공 하에서 제거하고, 잔사를 끓는 CF₃CH₂OH를 조금씩 수회 사용하여 처리하였다. 불용성 베이지색 분말은 표제 화합물의 (S)-알콜이었다.

이 실험에서는 표제 화합물의 (S)-알콜을 계속해서 사용하지 않으나, (R)-알콜과 유사한 방식으로 후속 반응을 수행하여 최종 표제 화합물을 얻었다. 이밖에, (R) 및 (S)-알콜의 혼합물도 유사한 방식으로 후속 반응을 수행하여 궁극적인 최종생성물을 얻었다. 이 알콜의 최종 산화에서는 비대칭 중심이 파괴되어 케톤이 제공되었고, 따라서 이들 알콜의 분리는 중요하지 않았다.

[9(S),12(S)]-α,α-디플루오로-9-(1-메틸에틸)-β,4,7,10-테트라옥소-N-(페닐메틸)-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-14,16,17-트리엔-12-프로판아미드의 제조

반응식 II, 단계 I : [9(S),12(S)]-α,α-디플루오로-β-히드록시-9-(1-메틸에틸)-4,7,10-트리옥소-N-(페닐메틸)-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-14,16,17-트리엔-12-프로판아미드 240 mg (0.439 mmol)을 DMSO 6 ml 중에서 격렬한 교반 하에 질소 분위기 하에 60℃에서 가열하여 용해시켰다. 냉각되었을 때, 용액을 CH₂Cl₂2ml로 희석하고, 얼음/CH₃OH 함유 조 중에서 -15 내지 -17 ℃로 냉각시켰다. 2M 염화옥살릴/CH₂Cl₂2.0 ml를 적가하여 묽은 슬러리를 제공하였다. 1 시간 후, Et₃N 1.15 ml (8.25 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 서서히 실온으로 가온시켰다. 17 시간 후, 혼합물을 물/EtOAc로 희석하였다. 유기층을 분리하고, 수상층을 또다른 EtOAc로 추출하였으며, 출발 물질인 일부 불용성 백색 고체 18 mg이 존재하였다. 합친 유기 추출물을 물 및 염수로 3회 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 이어서, 유기층을 여과하고, 진공 중에서 농축시켰다. 조 백색 잔분 101 mg을 플래쉬 크로마토그래피 (EtOAc/CH₃OH 19:1)로 정제하여 백색 고체/겔 70 mg 및 비극성 오일 27 mg을 얻었으며, 이 비극성 오일은 폐기하였다.EtOAc/CF₃CH₂OH로부터 재결정을 반복 수행하여 백색 겔을 얻고, 이것을 CH₂Cl₂/CH₃OH (19:1)로 세척하여 표제 화합물 17 mg을 엷은 베이지색 분말(소량의 [9(S),12(R)] 디아스테레오머를 함유하지만, [9(S),12(S)] 디아스테레오머 뿐만 아니라 [9(S),12(R)] 디아스테레오머의 수화물도 함유함)로 얻었다. 불용성 겔을 추가로 동일 용매 혼합물로부터 재결정하여 [9(S),12(S)] 디아스테레오머 5 mg을 엷은 베이지색 과립체를 얻었다.

혼합물의 경우 :

[9(S),12(S)] 디아스테레오머의 경우:

실시예 2

[9(S),12(S)]-α,α-디플루오로-9-(1-메틸에틸)-β,4,7,10-테트라옥소-N-[2-메틸-1-[(페닐메톡시)메틸]프로필]-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-14,16,17-트리엔-12-프로판아미드의 제조

후속 반응에 필요한 출발 물질 O-벤질-D-발리놀의 제조

메탄올 60 ml 중의 D-발리놀 5.1 g(49.4 mmol) 및 디-tert-부틸디카르보네이트 10.9 g (52 mmol)의 용액을 실온에서 17 시간 동안 교반하였다. 진공 농축 후, 잔사를 플래쉬 크로마토그래피 (실리카겔, 에틸 아세테이트/석유 에테르 3/7, R_f= 0.37)시켜 N-tert-부톡시카르보닐-D-발리놀을 무색 오일로서 정량적인 수득량 (10.7 g)으로 얻었다.

-5℃에서 질소 분위기 하에 무수 디메틸 포름아미드 50 ml 중의 N-tert-부톡시카르보닐-D-발리놀 10 g (49.3 mmol) 및 벤질브로마이드 5.86 ml (49.3 mmol)의 용액에 고체 칼륨-t-부톡사이드 11.06g (98.6 mmol)을 내부 온도가 +5℃를 초과하지 않도록 조금씩 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하고, 에틸 아세테이트(2×30 ml)로 희석하고, 1N 황산수소칼륨 50 ml 및 물 250 ml로 추출하고, 물(2 × 200 ml)로 세척하였다. 유기상을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과시키고, 진공 농축시킨 후, 오일을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카겔, 에틸 아세테이트/석유 에테르, 1/9, Rf = 0.42)에 의해 정제하여 N-tert-부톡시카르보닐-O-벤질-D-발리놀을 무색 오일로서 9.95 g (수율 : 69%) 얻었다.

포름산 50 ml 중의 N-tert-부톡시카르보닐-O-벤질-D-발리놀 9.95 g (34 mmol)의 용액을 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 진공 하에서 포름산을 제거한 후, 점성 잔사를 물 100 ml 중에 용해시키고, 포화 중탄산나트륨 용액 100 ml로 중화시키고, 유기 물질을 에틸 아세테이트 (2 ×200 ml)로 2회 추출하였다. 유기상을 중화될 때까지 물(2×200 ml)로 추출하고, 합친 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과 및 진공 농축하여 O-벤질-D-발리놀을 엷은 황색 오일로서 5.20 g (79%) 얻었다.

반응식 I, 단계 C : 질소 분위기 하에 4-tert-부톡시카르보닐아미노-2,2-디플루오로-3-히드록시-5-(4-벤질옥시)페닐펜탄산 에틸 에스테르 (실시예 1의 반응식 I, 단계 A에서 제조됨) 756 mg (1.58 mmol) 및 4.4 % 포름산/메탄올 9 ml를 혼합하였다. 팔라듐 블랙 171 mg을 첨가하고, 1 시간 동안 교반하였다. 추가량의 팔라듐 블랙을 1 시간 후에는 80 mg, 이어서 4 시간 후에는 378 mg, 마지막으로 2일 후에는 111 mg 첨가하였다. 6일 후, 반응 혼합물을 여과하고, 여액을 진공 하에서 농축시켰다. 잔사를 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 시클로헥산/에틸 아세테이트, 2:1, 이어서 1:1)하여 탈벤질화된 생성물 380 mg (58%)을 엷은 황색 포말 형태로 얻었다.

반응식 I, 단계 D : 질소 분위기 하에 건조 디클로로메탄 1 ml 중의 O-벤질-D-발리놀 (상기한 바대로 제조함) 600 mg (3.11 mmol)의 용액에 트리메틸알루미늄(톨루엔 중의 2 M) 1.55 ml를 첨가하였다. 반응 혼합물을 15분 동안에 교반하고, 건조 디클로로메탄 1ml 중의 상기 제조된 탈벤질화된 생성물 380 mg (0.976 mmol)의 용액을 첨가하였다. 추가량 (3ml)의 디클로로메탄을 첨가하고, 실온에서 19 시간 동안 교반하였다. 건조 테트라히드로푸란 5 ml를 첨가하고, 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 차가운 묽은 염산 수용액과 에틸 아세테이트 사이에 분배시켰다. 층을 분리하고, 유기층을 물 및 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고 진공 농축시켰다. 잔사를 상기와 동일한 조건 하에서 제2 아미드화 반응을 수행하여 반응을 완결시켰다. 제2 반응을 제1 반응과 유사한 방식으로 워크업 처리하였다. 잔사를 플래쉬 크로마토그래피(실리카겔, 시클로헥산/에틸아세테이트, 5:3)시켜 에스테르 출발 물질로 오염된 불순한 생성물 351 mg을 얻었다 생성물을 정제하기 위해, 상기 불순한 생성물 351mg을 메탄을 10 ml 및 물 0.5 ml 중에 추가로 용해시켰다. 수산화리튬 일수화물 48 mg을 첨가하고, 3 시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 감압 하에서 부분 농축시키고, 물로 희석하고, 에테르 및 차가운 묽은 염산 수용액을 첨가하였다. 층을 분리하고, 수상층을 에테르로 추출하였다. 유기층 및 추출물을 합치고, 물, 탄산칼륨 수용액 (2회) 및 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 농축시켜 아미드(히드록실에서의 R/S 비율 = 3.5:1) 266 mg (수율 51%)을 얻었다.

반응식 II, 단계 B : 직소 분위기 하에 아세톤 3 ml 중에서 상기에서 제조된 아미드 266 mg (0.496 mmol)을 분말화된 탄산카륨 80 mg (0.58 mmol)과 혼합하였다. 교반 혼합물에 메틸 브로모아세테이트 56 ㎕ (0.59 mmol)을 적가하였다. 반응 혼합물을 3 일 동안 교반하있다. 생성물을 실시예 1의 반응식 II, 단계 B에 기재된 바와 유사한 방식으로 생성물을 워크업 처리하였다. 잔류 출발 물질이 존재하는 경우, 불순한 생성물을 촉매량의 요오드화칼륨 존재 하에 상기한 바와 동일한 알킬화 조건으로 처리하였다. 24 시간 동안 교반하였다. 생성물을 상기한 바와 같은 워크업 처리에 의해 단리하였다. 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 시클로헥산/에틸 아세테이트 5:3)에 의해 정제하여 목적하는 알킬화 생성물 (히드록실에서의 R/S 비율 = 5;1) 143 mg (47%)을 얻었다.

반응식 II, 단계 C : 상기 알킬화 생성물 143 mg (0.235 mmol)을 포름산 3 ml(96%)와 혼합하고, 반응 혼합물을 실온에서 1.5 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 잔사를 에틸 아세테이트와 묽은 중탄산나트륨 수용액 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리하고, 물로 (2회) 세척하였다. 진공 하에 농축시켜 탈보호된 아민 114 mg (95%)을 얻었다.

반응식 II, 단계 D : 0℃에서 디클로로메탄/디메틸포름아미드 중에서 상기 탈보호된 아민 114 mg, 1-히드록시벤조트리아졸 수화물 38 mg (0.25 mmol), 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 염산염 55 mg (0.29 mmol), N-메틸모르폴린 28 ㎕ (0.25 mmol) 및 Boc ·gly ·val 69 mg (0.25 mmol)을 혼합하였다. 반응혼합물을 실온으로 가온시키고, 16 시간 후, 혼합물을 물에 붓고, EtOAC로 2회 추출하였다. 합친 추출물을 묽은 HCl 수용액, NaHCO₃및 염수로 세척하고, 무수 황산 마그네슘 상에서 건조시켰다. 유기층을 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔사를 플래쉬 크로마토그래피 (실리카겔, 에틸 아세테이트/시클로헥산 70:30)로 정제시킨 후, 시클로헥산/에틸 아세테이트로부터 재결정하여 목적하는 아미드 137 mg (76%)을 백색의 미과립으로 얻었다. 융점: 161.5 - 163.5 ℃

반응식 II, 단계 E 및 F : 메탄올 4.5 ml 및 물 0.5 ml 중에서 상기에서 제조한 아미드 137 mg (0.179 mmol)을 수산화리튬 일수화물 12 mg (0.29 mmol)과 혼합하였다. 반응 혼합물을 3 시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응혼합물을 진공 농축시켰다. 잔사를 물 중에 용해시켰다. 수용액을 에테르로 세척하고, EtOAc를 붓고, 격렬한 교반하면서 0.1N NaHSO₄를 첨가하여 산성화하였다. 유기층을 분리하고, 수층을 나머지 EtOAc로 추출하였다. 합친 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 유기층을 진공 하에 농축시켜 상응하는 산을 얻고, 이것을 CH₂Cl₂3 ml 중에 용해시켰다. 질소 분위기 하에 교반된 용액에 C₆F₅OH 40 ㎕(0.35 mmol) 및 EDC 45 mg (0.23 mmol)을 첨가하였다. 1일 후, 혼합물을 물로 희석하고, 여과하여 목적하는 펜타플루오로페닐 에스테르 161mg (98%)을 백색 미과립체로 얻었다. 시클로헥산/에틸 아세테이트로부터 재결정하여 펜타플루오로페닐 에스테르를 얻었다. 융점 139.5 - 143 ℃.

반응식 II, 단계 G 및 H : 상기에서 제조된 펜타플루오로페닐 에스테르 155 mg(0.169 mmol)을 포름산(96%) 4.5 ml와 혼합하고, 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 염화메틸렌 50 ml 및 포화 중탄산나트륨 50 ml를 첨가하였다. 반응 혼합물을 3일 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트를 첨가하고, 미세한 프릿화 유리 필터를 통해 여과하였다. 물로 겔을 세척하였다. 여액 중의 유기층을 분리하고, 물로 3 회 세척하고, 진공 중에서 농축시켰다. 잔사를 플래쉬 크로마토그레피 (실리카 겔, 95% 메탄올/에틸 아세테이트)로 정제하여 마크로시클릭 알콜(히드록실에서 (R) 디아스테레오머임) 9 mg (8%)를 왁스상 백색 고체로 얻었다.

반응식 II, 단계 I : 질소 분위기 하에 1:1 염화메틸렌/아세토니트릴 8 ml 중의 상기에서 제조한 마크로시클릭 알콜 9 mg (0.014 mmol)의 교반 용액에 데스-마틴 퍼요오디난 30 mg (0.071 mmol)을 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 실온에서 3 일 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 에틸 아세테이트/중탄산나트륨 수용액 및 티오황산나트륨으로 희석하였다. 10분 후, 유기층을 분리하고, 물로 세척하고, 진공 하에 농축시켜 회수된 알콜, 케톤 및 케톤 수화물의 혼합물을 얻었다. 혼합물을 3:1 아세토니트릴/염화메틸렌 4 ml 중의 퍼요오디난 30 mg (0.071 mmol)을 사용하여 산화 반응시켰다. 7일 후, 혼합물을 상기한 바와 같이 워크업 처리하여 표제 화합물 및 표제 화합물의 수화물의 혼합물을 백색 고체로 얻었다.

실시예 3

N-벤질-3-(6-벤질-9-이소프로필-4,7,10-트리옥소-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-1(17),14(18),15-트리엔-12-일]-2,2-디플루오로-3-옥소-프로피온아미드의 제조

반응식 II, 단계 C 및 D : 트리플루오로아세트산 (TFA) 4 ml 중의 [3ξ,4(S)]-2,4,5-트리데옥시-4-[[(1,1-디메틸에톡시)카르보닐]아미노]-2,2-디플루오로-5[4-[2-메톡시-2-(옥소)에톡시]페닐]-N-(페닐메틸)-L-글리세로-펜톤아미드(실시예1의 반응식 II, 단계 B) 0.790 mmol의 용액을 질소 분위기 하에 2 시간 동안 교반하였다. 용액을 진공 하에 농축시키고, 잔사를 EtOAc 중에서 2회 용해시키고, 다시 농축시켰다. 얻어진 TFA염을 질소 분위기 하의 교반하에 1:1 CH₂Cl₂/DMF 3 ml 중에 용해시키고, 1-히드록시벤조트리아졸 수화물 (HOBT) 128 mg (0.84 mmol), N-메틸모르폴린 (NMM) 190 ㎕ (1.73 mmol), Boc-phe-val-OH 0.84 mmol 및 EDC 168 mg (0.88 mmol)을 나열된 순서대로 첨가하였다. 3일 후, 혼합물을 물에 물고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합친 추출물을 묽은 HCl 수용액, NaHCO₃및 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 유기층을 진공 하에 농축시켜 목적하는 아미드를얻었다.

반응식 II, 단계 E 및 F : 19:1 CH₃OH/H₂O 20 ml중의 상기에서 제조한 아미드(0.589 mmol)의 교반 현탁액에 LiOH ·H₂O 34 mg (0.81 mmol)을 첨가하였다. 2 시간 후, 용액을 진공 중에서 농축시켰다. 잔사를 물 중에 용해시키고, 수용액을 에테르로 세척하고, EtOAc를 붓고, 격렬한 질소 분위기 하에서 0.1N NaHSO₄10 ml를 첨가하여 산성화하였다. 유기층을 분리하고, 수층을 또다른 EtOAc로 추출하였다. 합친 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 유기층을 진공 중에 농축시켜 상응하는 산을 얻고, 이것을 CH₂Cl₂5 ml 중에 용해시켰다. 질소 하에서 교반 현탁액에 C₆F₅OH 139 mg (0.755 mmol) 및 EDC 140 mg (0.73 mmol)을 첨가하였다. 1 일 후, 혼합물을 물로 희석하고, 여과하여, 고체를 물 및 에테르로 세척하여 목적하는 펜타플루오로페닐 에스테르를 제공하였다. 별법으로, 목적하는 펜타플루오로페닐 에스테르를 당업계에 공지된 추출 방법으로 단리할 수 있다.

반응식 II, 단계 G 및 H : 상기에서 제조한 펜타플루오로페닐 에스테르를 교반하에 4N HCl/디옥산 16 ml 중에 현탁시켰다. 2 시간 후, 용매 및 HCl을 진공 중에서 제거하고, 잔류 고체/겔을 격렬한 질소 분위기 하에 3 일 동안 묽은 NaHCO₃수용액/CH₂Cl₂중에 현탁시켰다. 혼합물을 여과하고, 고체를 물 및 에테르로 세척하였다. 뜨거운 EtOAc를 고체의 대부분을 용해시키기에 충분한 양의 CF₃CH₂OH와 함께 첨가하고, 필터 보조 장치를 통해 여과하고, 진공 하에 농축시켜 목적하는 마크로시클릭 알콜을 얻었다.

반응식 II, 단계 I : 질소 분위기 하에 1:1 염화에틸렌/아세토니트릴 8 ml 중에서 상기에서 제조한 마크로시클릭 알콜 0.014 mmol을 교반시킨 용액에 데스-마틴 퍼요오디난 60 mg (0.14 mmol)을 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 실온에서 3 일 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 에틸 아세테이트/중탄산나트륨 수용액, 티오황산나트륨으로 희석하였다. 10 분 후, 유기층을 분리하고, 물로 세척하고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 얻었다.

실시예 4

3-[12-(벤질카르바모일-디플루오로-아세틸)-9-이소프로필-4,7,10-트리옥소-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-1(17),14(18),15-트리엔-6-일]-프로피온산의 제조

반응식 II, 단계 C : 트리플루오로아세트산 (TFA) 4 ml 중의 [3ξ,4(S)]-2,4,5-트리데옥시-4-[[(1,1-디메틸에톡시)카르보닐]아미노]-2,2-디플루오로-5-[4-[2-메톡시-2-(옥소)에톡시]페닐]-N-(페닐메틸)-L-글리세로-펜톤아미드(실시예 1의 반응식 II, 단계 B에서 제조) 0.790 mmol의 용액을 질소 분위기 하에 2 시간 동안 교반하였다. 용액을 진공 중에서 농축시키고, 잔사를 EtOAc 중에 2회 용해시키고,다시 농축시켜 탈보호 아민의 TFA염을 얻었다.

반응식 III, 단계 A : 상기에서 제조한 탈보호 아민의 TFA염을 질소 분위기 하에 교반하면서 1:1 CH₂Cl₂/DMF 3 ml 중에 용해시키고, 1-히드록시벤조트리아졸 수화물 (HOBT) 128 mg (0.84 mmol), N-메틸모르폴린 (NMM) 190 ㎕ (1,73 mmol), Boc-val-OH 0.84 mmol 및 EDC 168 mg (0.88 mmol)을 나열된 순서대로 첨가하였다. 3일 후, 혼합물을 물에 붓고, EtOAc로 2회 세척하였다. 합친 추출물을 묽은 HCl 수용액, 묽은 NaHCO₃수용액 및 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 유기층을 진공 하에 농축시켜 목적하는 아미드를 얻었다.

반응식 III, 단계 B 및 C : 트리플루오로아세트산 (TFA) 4 ml 중의 상기에서 제조한 아미드 0.790 mmol의 용액을 질소 분위기 하에 2 시간 동안 교반하였다. 용액을 진공 중에서 농축시키고, 잔사를 EtOAc 중에서 2회 용해시키고, 다시 농축시켜 탈보호 아민의 TFA염을 얻었다. 탈보호 아민의 TFA염을 질소 분위기 하에 교반하면서 1:1 CH₂Cl₂/DMF 3 ml 중에 용해시키고, 1-히드록시벤조트리아졸 수화물(HOBT) 128 mg (0.84 mmol), N-메틸모르폴린 (NMM) 190㎕ (1.73 mmol), Nα-FMOC-γ-tert-부틸 에스테르-glu-OH 0.84 mmol 및 EDC 168 mg (0.88 mmol)을 나열된 순서대로 첨가하였다. 3일 후, 혼합물을 물 중에 붓고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합친 추출물을 묽은 HCl 수용액, 묽은 NaHCO₃수용액 및 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 유기층을 진공 하에 농축시켜 목적하는 아미드를 얻었다.

고리화의 별법:

상기에서 제조한 아미드 0.6 mmol을 메탄올/물 (19:1) 및 수산화리튬 일수화물 1.2 mmol에 용해시켰다. 5 시간 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고, 에테르로 세척하였다. 이어서 0.1 N 중황산나트륨 수용액으로 수층을 pH 4.5-5로 산성화하였다. 이어서, 산성화된 수층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 무수 황산마그네슘상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 하기하는 바와 같은 목적하는 산/탈보호된 아민을 얻었다.

상기에서 제조한 산/탈보호 아민 0.70 mmol을 질소 분위기 하에 교반하면서 1:1 CH₂Cl₂/DMF 3 ml 중에 용해시키고, 1-히드록시벤조트리아졸 수화물 (HOBT) 128 mg (0.84 mmol), N-메틸모르폴린 (NMM) 95 ㎕(0.87 mmol) 및 EDC 168 mg (0.88 mmol)을 나열된 순서대로 첨가하였다. 3일 후, 혼합물을 물 중에 붓고, EtOAc로 2회 세척하였다. 합친 추출물을 묽은 HCl 수용액, 묽은 NaHCO₃수용액 및 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 유기층을 진공 하에 농축시켜 마크로시클릭 알콜을 얻었다.

반응식 II, 단계 I : 질소 분위기 하에 1:1 염화메틸렌/아세토니트릴 8 ml 중에 상기에서 제조한 마크로시클릭 알콜 0.014 mmol을 현탁시킨 용액에 데스-마틴퍼요오디난 60 mg (0.14 mmol)을 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 실온에서 3 일 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 에틸 아세테이트/중탄산나트륨 수용액, 티오황산나트륨으로 희석하였다. 10분 후, 유기층을 분리하고, 물로 세척하고, 진공 하에 농축시켜 케톤을 얻었다.

반응식 II, 단계 J : 염화메틸렌 4 ml 중에 상기에서 제조한 케톤 0.013 mmol을 용해시키고, 트리플루오로아세트산 1ml를 첨가하였다. 반응 혼합물을 3 시간 동안 실온에서 교반한 후, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 얻었다.

실시예 5

3-[6-(4-아미노부틸)-9-이소프로필-4,7,10-트리옥소-2-옥사-5,8,11-트리아자-비시클로[12.2.2]옥타데카-1(17),14(18),15-트리엔-12-일]-N-벤질-2,2-디플루오로-3-옥소-프로판아미드의 제조

반응식 II, 단계 C 및 D : 트리플루오로아세트산(TFA) 4ml 중의 [3ξ,4(S)]-2,4,5-트리데옥시-4-[[(1,1-디메틸에톡시)카르보닐]아미노]-2,2-디플루오로-5-[4-[2-메톡시-2-(옥소)에톡시]페닐]-N-(페닐메틸)-L-글리세로-펜톤아미드(실시예 1 반응식 II, 단계 B에서 제조) 0.790 mmol의 용액을 질소 분위기 하에 2 시간 동안 교반하였다. 용액을 진공 중에서 농축시키고, 잔사를 EtOAc 중에 2회 용해시키고, 다시 농축시켰다. 얻어진 TFA염을 질소 분위기 하에 교반하면서 1:1 CH₂Cl₂/DMF 3 ml중에 용해시키고, 1-히드록시벤조트리아졸 수화물 (HOBT) 128 mg (0.84 mmol), N-메틸모르폴린 (NMM) 190㎕ (1.73 mmol), Nα-t-Boc-Nε-Cbz-L-lys-val-OH 0.84 mmol 및 EDC 168 mg (0.88 mmol)을 나열된 순서대로 첨가하였다. 1일 후, 혼합물을 물 중에 붓고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합친 추출물을 묽은 HCl 수용액, 묽은 NaHCO₃및 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 유기층을 진공 하에 농축시켜 목적하는 아미드를 얻었다.

반응식 II, 단계 E 및 F : 19:1 CH₃OH/H₂O 20 ml 중의 상기에서 제조한 아미드 0.589 mmo1의 교반 현탁액에 LiOH ·H₂O 34 mg (0.81 mmol)을 첨가하였다. 2 시간 후, 용액을 진공 중에서 농축시켰다. 잔사를 물 중에 용해시키고, 수용액을 에테르로 세척하고, EtOAc를 붓고, 격렬한 교반 하에 0.1N NaHSO₄10 ml를 첨가하여 산성화하였다. 유기층을 분리하고, 수층을 또다른 EtOAc로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 유기층을 진공하에 농축시켜 상응하는 산을 얻고, 이것을 CH₂Cl₂5 ml 중에 용해시켰다. 질소 하에서 교반시킨 용액에 C₆F₅OH 139 mg (0.755 mmol) 및 EDC 140 mg (0.73 mmol)을 첨가하였다. 1일 후, 혼합물을 물로 희석하고, 여과하고, 고체를 물 및 에테르로 세척하여 목적하는 펜타플루오로페닐 에스테르를 얻었다. 별법으로, 목적하는 펜타플루오로페닐 에스테르를 당업계 공지 추출 방법에 의해 단리할 수 있다.

반응식 II, 단계 G 및 H : 상기에서 제조한 펜타플루오로페닐에스테르를 교반 하에 4N HCl/디옥산 16 ml 중에 현탁시켰다. 2 시간 후, 용매 및 HCl을 진공 중에서 제거하고, 잔류하는 고체/겔을 3일 동안 격렬한 교반 하에 묽은 수성 NaHC₃/CH₂Cl₂중에 현탁시켰다. 혼합물을 여과하고, 고체를 물 및 에테르로 세척하였다. 뜨거운 EtOAc를 고체의 대부분을 용해시키기에 충분한 양의 CF₃CH₂OH와 함께 첨가하고, 여과 보조기를 통해 여과하고, 진공 하에 농축시켜 목적하는 마크로시클릭 알콜을 얻었다.

반응식 II, 단계 I : 질소 분위기 하에 1:1 염화메틸렌/아세토니트릴 8 ml 중의 상기 마크로시클릭 알콜의 교반 용액에 데스-마틴 퍼요오디난 60 mg (0.14 mmol)을 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 실온에서 3일 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 에틸아세테이트/중탄산나트륨 수용액, 티오황산나트륨으로 희석하였다. 10 분 후, 유기층을 분리하고, 물로 세척하고, 진공 하에 농축시켜 목적하는 케톤을 얻었다.

반응식 II, 단계 J : 4.4% HCO₂H/메탄올 5 ml 중의 Pd 블랙 10 mg의 교반 현탁액에 상기에서 제조한 케톤 0.014 mmol을 첨가하였다. 4 시간 후, 반응 혼합물을 여과하고, 여액을 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 얻었다.

실시예 6

N-벤질-3-[6-(2-카르보모일에틸)-9-이소프로필-4,7,10-트리옥소-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-1(17),14(18),15-트리엔-12-일]-2,2-디플루오로-3-옥소-프로피온아미드의 제조

반응식 II, 단계 C 및 D : 트리플루오로아세트산(TFA) 4ml 중의 [3ξ,4(S)]-2,4,5 -트리데옥시-4-[[(1,1-디메틸에톡시)카르보닐]아미노]-2,2-디플루오로-5-[4-[2-메톡시-2-(옥소)에톡시]페닐]-N-(페닐메틸)-L-글리세로-펜톤아미드(실시예 1 반응식 II, 단계 B에서 제조) 0.790 mmol의 용액을 질소 분위기 하에서 2 시간 동안 교반하였다. 용액을 진공 중에서 농축시키고, 잔사를 EtOAc 중에 2회 용해시키고, 다시 농축시켰다. 얻어진 TFA염을 질소 분위기 하에 교반하면서 1:1 CH₂Cl₂/DMF 3 ml 중에 용해시키고, 1-히드록시벤조트리아졸 수화물 (HOBT) 128 mg (0.84 mmol), N-메틸모르폴린 (NMM) 190 ㎕ (1.73 mmol), Boc-gln-val-OH 0.84 mmol 및 EDC 168 mg (0.88 mmol)을 나열된 순서대로 첨가하였다. 1일 후, 혼합물을 물 중에 붓고, EtOAc로 2회 추출하였다. 합친 추출물을 묽은 HCl 수용액, 묽은 NaHCO₃및 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 유기층을 진공 하에 농축시켜 목적하는 아미드를 얻었다.

반응식 II, 단계 E 및 F : 19:1 CH₃OH/H₂O 20 ml 중의 상기에서 제조한 아미드 0.589 mmol의 교반 현탁액에 LiOH ·H₂O 34 mg (0.81 mmol)을 첨가하였다. 2 시간 후, 용액을 진공 하에 농축시켰다. 잔사를 물 중에 용해시키고, 수용액을 에테르로 세척하고, EtOAc를 붓고, 격렬한 교반 하에 0.1N NaHSO₄10 ml를 첨가하여 산성화하였다. 유기층을 분리하고, 수층을 또다른 EtOAc로 추출하였다. 합친 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 유기층을 진공 하에 농축시켜 상응하는 산을 얻고, 이것을 CH₂Cl₂5 ml 중에 용해시켰다. 질소 하에서 교반시킨 용액에 C₆F₅OH 139 mg (0.755 mmol) 및 EDC 140 mg (0.73 mmol)을 첨가하였다. 1일 후, 혼합물을 물로 희석하고, 여과하고, 고체를 물 및 에테르로 세척하여 목적하는 펜타플루오로페닐 에스테르를 얻었다. 별법으로, 목적하는 펜타플루오로페닐 에스테르를 당업계 공지 추출 방법에 의해 단리할 수 있다.

반응식 II, 단계 G 및 H : 상기에서 제조한 펜타플루오로페닐에스테르를 교반 하에 4N HCl/디옥산 16 ml 중에 현탁시켰다. 2 시간 후, 용매 및 HCl을 진공 중에서 제거하고, 잔류하는 고체/겔을 3일 동안 격렬한 교반 하에 묽은 수성 NaHCO₃/CH₂Cl₂중에 현탁시켰다. 혼합물을 여과하고, 고체를 물 및 에테르로 세척하였다. 뜨거운 EtOAc를 고체의 대부분을 용해시키기에 충분한 양의 CF₃CH₂OH와 함께 첨가하고, 여과 보조기를 통해 여과하고, 진공 하에 농축시켜 목적하는 마크로시클릭 알콜을 얻었다.

반응식 II, 단계 I : 질소 분위기 하에 1:1 염화메틸렌/아세토니트릴 8 ml 중의 상기 제조된 마크로시클릭 알콜 0.014 mmol의 교반 용액에 데스-마틴 퍼요오디난 60 mg(0.14 mmol)을 첨가하였다. 얻어진 현탁액을 실온에서 3일 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 에틸 아세테이트/중탄산나트륨 수용액, 티오황산나트륨 수용액으로 희석하였다. 10 분 후, 유기층을 분리하고, 물로 세척하고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 얻었다.

추가의 실시 태양에서, 본 발명은 항바이러스 유효량의 일반식 I의 화합물을 투여하는 것으로 이루어진 바이러스 감염 환자의 치료 방법을 제공한다.

본 명세서에서 사용된 용어 "바이러스 감염"은 바이러스의 세포 형질 전환, 바이러스 복제 및 증식에 의해 특징지어지는 비정상적인 상태 또는 증상을 말한다. 일반식 I의 회합물로의 바이러스 감염 치료는 특히 레트로바이러스, 예를 들어 HTLV-I, HTLV-II, HTLV-III(HIV 바이러스)등을 포함하며, 쥐의 백혈병 바이러스, 고양이의 백혈병 바이러스, 시토메갈로바이러스(CMV), 조류 육종 바이러스 등에 효과적이다. 또한 AIDS, ARC(AIDS 관련 합병증), 및 증후성 및 무증후성, HIV에 실제적 또는 잠재적 노출을 포함하는 광범위한 HIV감염 상태의 치료에 유용하다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은 HIV로 의심되는 노출 후 HIV 감염(혈액 수혈, 주사바늘, 또는 수술 동안 환자 혈액의 노출)을 방지하는데에 유용하다.

일반식 I 화합물의 "항바이러스 유효량 "이란 1회 또는 다회 투여량을 환자에게 투여할 때, 이러한 처리가 없을 때 기대했던 것보다 뛰어난 바이러스의 증식 억제 또는 연장된 환자의 생존도에 효과적인 양을 의미한다. 본 명세서에서 사용된 "바이러스 감염의 억제"는 바이러스의 세포 형질전환 또는 바이러스의 복제 및 증식을 지연, 방해, 제지 또는 중단시키는 것을 의미하며, 바이러스를 모두 제거하는것을 의미하지는 않는다.

또한 본 발명은 HIV 프로테아제 억제를 요하는 환자에게 일반식 I 화합물의 억제유효량을 투여하는 것으로 이루어진 HIV 프로테아제 억제 방법을 제공한다.

HTLV-III와 같은 레트로바이러스에 감염된 환자는 일반식 I의 화합물과 같은 HIV 프로테아제 억제제를 요구하는 것으로 이해된다.

본 명세서에서 사용된 용어 "환자"란 특정 바이러스에 걸린 온혈 동물, 예를 들어 포유 동물을 의미한다. 사람, 마우스 및 래트는 용어 "환자"의 영역에 속한다.

일반식 I의 화합물을 환자에 투여한 결과 환자에서 HIV 프로테아제 억제되었다. 따라서, 일반식 I의 화합물로 환자를 처치하면 HTLV-III과 같은 레트로바이러스가 억제 또는 억압된다.

HIV 프로테아제가 질병 진행의 주요인인 특정 바이러스 감염 환자는 일반식 I의 화합물과 같은 HIV프로테아제 억제 약제로의 치료를 요구한다.

표준 의학 및 실험적 시험 및 방법을 근거로하여, 당업계에 능숙한 진단 전문가는 쉽게 일반식 I의 화합물과 같은 HIV 프로테아제 억제 약제로의 치료를 요하는 환자를 식별할 수 있다.

일반식 I의 화합물의 "억제 유효량"이란 1회 또는 다회 투여량을 환자에게 투여할때 HIV 프로테아제 억제를 제공함에 효과적인 양을 의미한다.

본 명세서에서 용어 "유효량"이란 일반식 I 화합물의 항바이러스 또는 억제 유효량을 의미한다. 유효량은 공지된 기술을 사용하고 유사한 상황 하에 얻어진 결과를 관찰하여 당업계에 능숙한 전문 진단가에 의해 쉽게 결정될 수 있다. 유효량 또는 투여량의 결정에 있어서, 여러 인자들이 진단전문가에 의해 고려된다(포유류의 종류, 크기, 연령 및 일반적 건강상태, 특정 바이러스 감염, 바이러스 감염의 정도 또는 여부 또는 강도), 개별 환자의 반응도, 투여된 특정 화합물, 투여 방식, 투여된 제제의 생유용성, 선택된 투여 양생법, 수반되는 약의 용도, 다른 관계되는 상황들).

일반식 I의 화합물의 유효량은 0.1 mg(mg/kg/일) 내지 100 mg/kg/일로 변화될 것으로 예싱된다. 바람직한 양은 0,5 내지 10 mg/kg/일로 변화할 것으로 예상된다. 바이러스 감염된 환자의 치료에 있어서, 일반식 I의 화합물은 유효량으로 생체이용성이게 하는 어떠한 형태 또는 방법(경구적 및 비경구적 경로 포함)으로든 투여될 수 있다. 예를 들어, 일반식 I의 화합물은 경구, 피하, 근육내, 정맥내, 경피, 구강내, 항문 등으로 투여될 수 있다. 일반적으로 경구 투여가 바람직하다. 제제를 제조하는 당 업계의 하나의 기술은 선택된 화합물, 치료될 바이러스 감염, 감염의 단계, 및 다른 관계된 상황의 특정한 특성에 따라 투여의 적당한 형태 및 방식을 쉽게 선택할 수 있다.

일반식 I의 화합물은 단독으로 또는 제약적으로 허용가능한 담체 또는 부형제와 혼합된 제약 조성물(비율 및 특성은 선택된 화합물의 용해도 및 화학적 특성, 선택된 투여 경로, 및 표준 제약 관행에 의해 결정됨)의 형태로 투여될 수 있다. 본 발명의 화합물은 그 자체로 유효한 반면, 안정성, 결정화의 편리함, 증가된 용해도 등과 같은 목적으로 제약적으로 허용가능한 염 형태로 제조되고 투여될 수 있다.

다른 실시 태양에서, 본 발명은 일반식 I의 화합물로 이루어진 조성물을 하나 이상의 불활성 담체와의 혼합제 또는 결합된 형태로 제공한다. 이 조성물들은 분석 표준물, 정미수송(bulk Shipment) 제조의 편리한 수단 또는 제약 조성물로서 유용하다. 일반식 I 화합물의 분석가능한 양은 당업계에 공지되고 평가된 표준 분석 방법 및 기술에 의해 쉽게 측정된다. 일반식 I의 화합물의 분석가능한 양은 일반적으로 조성물의 0.001 중량% 내지 75 중량%로 변화된다. 불활성 담체는 분해되지 않거나 또는 일빈식 I의 화합물과 공유적으로 반응하는 어떠한 물질도 가능하다. 적절한 불활성 담체의 예로는 물, 일반적으로 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 분석에 유용한 수성 완충액, 아세토니트릴, 에틸아세테이트, 헥산 등과 같은 유기 용매, 제약적으로 허용가능한 담체 또는 부형제이다.

더 구체적으로, 본 발명은 일반식 I의 화합물의 치료 유효량이 하나 이상의 제약적으로 허용가능한 담체 또는 부형제와의 혼합제 또는 결합된 형태로 이루어진 제약 조성물을 제공한다.

제약 조성물은 제약 업계에 공지된 방법으로 제조된다. 담체 또는 부형제는 활성성분을 위한 비히클(vehicle)또는 매질로 작용할 수 있는 고체, 반고체, 또는 액체 물질일 수 있다. 적절한 담체 또는 부형제는 당업계에 공지되어 있다. 제약 조성물은 경구 또는 비경구적 용도로 채택될 수 있으며, 환자에게 정제, 캡슐, 좌약, 용액제, 현탁액제 등과 같은 형태로 투여될 수 있다.

본 발명의 화합물은 불활성 희석제 또는 식용 담체와 함께 경구적으로 투여될 수 있다. 그들은 젤라틴 캡슐에 봉합되거나 또는 정제로 압축될 수 있다. 경구 투여의 목적으로 화합물은 부형제와 혼합되고 정제, 트로키제, 캡슐제, 엘릭시르제, 현탁액제, 시럽제, 봉함지, 씹는 껌 등과 같은 형태로 사용될 수 있다. 이 제제들은 본 발명의 화합물, 활성 성분을 4% 이상 함유해야하나, 특정 형태에 따라 변형될 수 있고, 편리하게는 유닛의 4 중량% 내지 약 70 중량%일 수 있다. 조성물에 존재하는 화합물의 양은 적절한 투여량인 것이다. 본 발명에 따른 바람직한 조성물 및 제제는 경구 투여 유닛 형태가 본 발명의 화합물 5.0-300 mg을 함유하도록 제조된다.

또한 정제, 알약, 캡슐, 트로키 등은 하나 이상의 하기 보조약을 함유한다: 마이크로 결정성 셀룰로오즈, 트라가칸쓰 껌 또는 젤라틴과 같은 결합제, 녹말 또는 락토오즈와 같은 부형제, 알기닌산, 프리모겔, 옥수수 녹말 등과 같은 붕해제, 마그네슘 스테아레이트 또는 스테로텍스와 같은 윤활제, 콜로이드성 이산화규소와 같은 활강제 및 수크로오즈 또는 사카린과 같은 감미제가 첨가되거나 또는 박하, 메틸 살리실레이트 또는 오렌지 향의 방향제 등이 첨가될 수 있다. 단위 투여 형태가 캡슐인 경우, 상기 형태의 물질 외에 폴리에틸렌 글리콜 또는 지방 오일과 같은 액체 담체를 함유할 수 있다. 다른 단위 투여 형태는 단위 투여의 물리적 형태를 변화시키는 다른 다양한 물질(예를 들어, 코팅)을 함유할 수 있다. 따라서, 정제 또는 알약은 당, 쉘락(shellac) 또는 다른 장용피제로 코팅될 수 있다. 시럽은 존재하는 화합물 외에, 감미제로 수크로오즈, 특정 방부제, 염료 및 착색제, 및 방향제를 함유할 수 있다. 다양한 조성물을 제조하는데 사용된 물질은 사용된 양에서제약적으로 순수하고 비독성이어야한다.

비경구 투여를 목적으로, 본 발명의 화합물은 용액 또는 현탁액에 혼입될 수 있다. 이 제제들은 본 발명의 화합물을 0.1 중량% 이상 함유해야하나, 0.1 내지 50 중량%로 변화될 수 있다. 이러한 조성물에 존재하는 본 발명의 화합물의 양은 적절한 투여양인 것이다. 본 발명에 따른 바람직한 조성물 및 제제는 비경구 단위 투여가 본 발명의 화합물을 5.0 내지 100 mg 함유하도록 제조된다.

또한, 용액 또는 헌탁액은 주사용 물, 염수 용액, 고정용 오일, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 다른 합성 용매와 같은 멸균 희석제, 벤질 알코올 또는 메틸 파라벤과 같은 항바이러스제, 아스코르브산 또는 아황산수소나트륨과 같은 항산화제, 에틸렌 디아민테트라아세트산과 같은 킬레이팅제, 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트와 같은 완충제 및 염화나트륨 또는 덱스트로오즈과 같은 긴장성 조절제로 이루어진 보조약 중 하나 이상을 함유할 수 있다. 비경구 제제는 앰플, 일회용 주사, 또는 유리 또는 플라스틱으로 제조된 다회 투여량 바이알에 봉입될 수 있다.

또한 본 발명은 HIV 프로테아제 억제 화합물과 하나 이상의 AIDS 치료에 유용한 약제, 예를 들어 HIV 1 및 HIV 2 바이러스 감염을 치료하기에 적합한 항바이러스 제로 알려진, PNPase 억제제를 함유하거나 또는 함유하지 않은 AZT의 배합물, 또는 DDI 및 PNPase 억제제로 함께 치료하는 것에 관한 것이다.

본 발명의 화합물은 하기 기술을 사용하여 그의 HIV-프로테아제 억제를 분석할 수 있다.

레트로 바이러스 효소의 제조 및 프로테아제의 억제 분석

A) 레트로바이러스 효소의 제조

재조합 프로테아제를 제조하기 위하여, C,Gunet 등의 문헌[European Jounal Of Pharmacology, Molecular Pharmacology Section, 172, 443-451(1989)]에서 공개된 대로 HIV 프로테아제를E.Coli를 통해 발현시켰다. Darke, P.L. 등의 문헌[J.Biol.Chem., 256, 2307(1989)]에 따라 재조합 효소를 부분적으로 정제하였다.

B) 효소 정제

부분적으로 정제된 프로테아제의 비활성은 단백질 mg 당 10-100 유닛이다(1 유닛이란 37℃의 분석 조건 하에서 1분 당 H-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-NH₂1몰을 절단하는 효소의 양으로 정의됨). HIV-1을 옥타펩티드 H-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-NH₂에 대해 분석하였다. 반응을 0.05 M 아세트산 나트륨, 0.5 M 염화나트륨, 1 mM EDTA, 0.5% BSA, 5% 에틸렌글리콜, 10% 글리세롤을 함유하는 pH 5.5의 완충액 0.1 ml에서 수행하였다. 37℃에서 1시간 동안 배양한 후, 최종 농도 0.4 M의 과염소산으로 퀀칭시켜 반응을 중단시키고, 5분간 원심분리하였다. 반응생성물, H-Ser-Gln-Asn-Tyr-OH(P₁) 및 H-Pro-Ile-Val-NH₂(P₂)를 C₁₈컬럼(Ultrasphere ODS 4.6×150 mm, 5 mm, Beckman) 상에서 HPLC에 의한 상응하는 피크 영역을 통합함으로써 분석하였다. 5% 아세토니트릴, pH 3.0 내지 60% 아세토니트릴, pH 3.0의 아세토니트릴 구배로 10분간 용출하였다(1 ml/분의 유속, 지연 시간: P₁=6분, P₂=7분 및S=8.3분). K_i값을 딕손 플롯(Dixon Plot: 1/v 대 [I], I.H., Enzyme Kinectice, 109(1975))으로 결정하였다. [(9S), 12(S)]-α,α-디플루오로-9-(1-메틸에틸)-β,4,7,10-테트라옥소-N-(페닐메틸)-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2,2]옥타데카-14,16,17-트리엔-12-프로판아미드를 위한 K_i값은 10 내지 30 nM이다.

상기 기술을 수행하고, 그 외에 다른 공지된 기술을 사용하며, 상기 질병의 치료에 유용한 공지된 화합물과 비교함으로써, 적절한 물질이 본 발명을 수행할 당업자에 의해 이용될 수 있다고 믿어진다.

특히 일반적 유용성을 지닌 구조적으로 관련된 화합물의 기에 있어서, 일반식 I 의 화합물이 사용될 최종 용도에 따라 특정 기 및 배열을 적용하는 것이 바람직하다. 일반적으로 X 가 1인 일반식 I 의 화합물이 바람직하다.

일반적으로 P₃가 -CH₂CO₂H, -CH₂CONH₂, -CH₂(CH₂)₃NH₂, -CH₂CH₂CO₂H, -CH₂CH₂CONH₂, 벤질 및인 일반식 I의 화합물이 바람직하다. 일반적으로 P₂가 -CH(CH₃)₂, 시클로펜틸 및 페닐인 일반식 I의 화합물이 바람직하다. 일반적으로 P₃가 결합된 시클릭 구조에서 탄소 원자의 배열이 D 배열인 일반식 I의 화합물이 바람직하다. 일반적으로 R₁이 수소이고, R₂가 벤질, 2-피리딜, 3-피리딜 및인 일반식 I의 화합물이 바람직하다.

본 발명에 따른 화합물 및 입체 이성질체, 수화물 및 제약적으로 허용가능한 그의 염의 예는 다음과 같다.

1) [(9S), 12(S)]-α,α-디플루오로-9-(1-메틸에틸)-β,4,7,10-테트라옥소-N-(페닐메틸)-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-14,16,17-트리엔-12-프로판아미드

2) [(9S), 12(S)]-α,α-디플루오로-9-(1-메틸에틸)-β,4,7,10-테트라옥소-N-[2-메틸-1-[(페닐메톡시)메틸]프로필]-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-14,16,17-트리엔-12-프로판아미드

3) N-벤질-3-(6-벤질-9-이소프로필-4,7,10-트리옥소-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-1(17),14(18),15-트리엔-12-일)-2,2-디플루오로-3-옥소-프로피온아미드

4) 3-[12-(벤질카르바모일-디플루오로-아세틸)-9-이소프로필-4,7,10-트리옥소-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-1(17),14(18),15-트리엔-6-일]프로피온산

5) 3-[6-(4-아미노부틸)-9-이소프로필-4,7,10-트리옥소-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-1(17),14(18),15-트리엔-12-일]-N-벤질-2,2-디플루오로-3-옥소-프로피온아미드

6) N-벤질-3-[6-(2-카르바모일에틸)-9-이소프로필-4,7,10-트리옥소-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-1(17),14(18),15-트리엔-12-일]-2,2-디플루오로-3-옥소-프로피온아미드

7) [12-(벤질카르바모일-디플루오로-아세틸)-9-이소프로필-4,7,10-트리옥소-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-1(17),14(18),15-트리엔-6-일]아세트산

8) N-벤질-3-(6-카르바모일메틸-9-이소프로필-4,7,10-트리옥소-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-1(17),14(18),15-트리엔-12-일)-2,2-디플루오로-3-옥소-프로피온아미드

9) N-벤질-2,2-디플루오로-3-(9-이소프로필-4,7,10-트리옥소-6-피리딘-3-일메틸-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-1(17),14(18),15-트리엔-12-일)-3-옥소-프로피온아미드

Claims

하기 일반식 I의 화합물, 및 그의 입체 이성질체, 수화물 및 제약적으로 허용가능한 염.

식 중,

P₂는 C_1-6알킬이고,

P₃는 수소이고,

R₁은 수소, 벤질 또는 CH(Y)(Z)[여기서, Y는 C_1-6알킬이고, Z는 (CH₂)-OR₄이며, 여기서 R₄는 벤질임]이고,

R₂는 R₁에 대해 정의된 바와 같고, 다만, R₁이 수소인 경우, R₂는 수소는 아니고, x는 1이다.
제1항에 있어서, P₂가 -CH(CH₃)₂인 화합물,
제2항에 있어서, R₁이 수소이고, R₂가 벤질인 화합물.
제2항에 있어서, R₁이 수소이고, R₂가 2-(3-메틸-1-페닐메톡시)부틸인 화합물.
제1항에 있어서, 화합물이 [9(S),12(S)]-α,α-디플루오로-9-(1-메틸에틸)-β,4,7,10-테트라옥소-N-(페닐메틸)-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-14,16,17-트리엔-12-프로판아미드인 화합물.
제1항에 있어서, 화합물이 [9(S),12(S)]-α,α-디플루오로-9-(1-메틸에틸)-β,4,7,10-테트라옥소-N-[2-메틸-1-[(페닐메톡시)-메틸]프로필]-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-14,16,17-트리엔-12-프로판아미드인 화합물.
[9(S),12(S)]-α,α-디플루오로-9-(1-메틸에틸)-β,4,7,10-테트라옥소-N-(페닐메틸)-2-옥사-5,8,11-트리아자비시클로[12.2.2]옥타데카-14,16,17-트리엔-12-프로판아미드의 HIV 프로테아제 억제 유효량을 포함하는 HIV 감염증의 치료 또는 예방용 제약 조성물.